約5fM、約6fM、約7fM、約8fM、 約 9fM、約 10fM、約 20fM、約 30fM、約 40fM、約 50fM、約 60fM、約 70fM、約 80fM、約 90fM、約 100fM、約 200fM、約 300fM、約 400fM、約 500fM、約 600fM、約 700fM、約 800fM、約 900fM、約 1 皮摩爾（pM)、約 2pM、約 3pM、約 4pM、約 5pM、約 6pM、約 7pM、約 8pM、約 9pM、約 10pM、約 20pM、 約 30pM、約 40pM、約 50pM、約 60pM、約 7pM、約 80pM、約 90pM、約 100pM、約 200pM、約 300pM、約 400pM、約 500pM、約 600pM、約 700pM、約 800pM、約 900pM、約 1 納摩爾（nM)、約 2nM、約 3nM、 約 4nM、約 5nM、約 6nM、約 7nM、約 8nM、約 9nM、約 10nM、約 20nM、約 30nM、約 40nM、約 50nm、約 60nM、約 70nM、約 80nM、約 90nM、約 100nM、約 200nM、約 300nM、約 400nM、約 500nM、約 600nM、 約 700nM、約 800nM、約 900nM、約 1 yM、約 2 yM、約 3 yM、約 4 yM、約 5 yM、約 6 yM、約 7 yM、 約 8 y M、約 9 y M、約 10 y M、約 20 y M、約 30 y M、約 40 y M、約 50 y M、約 60 y M、約 70 y M、約 80 yM、約90 yM或約100 yM的解離常數(shù)與陣列中的多種肽結(jié)合。
[0102] 分子可以以至少lfM、至少2fM、至少3fM、至少4fM、至少5fM、至少6fM、至少7fM、 至少8fM、至少9fM、至少10fM、至少20fM、至少30fM、至少40fM、至少50fM、至少60fM、至少 70fM、至少80fM、至少90fM、至少100fM、至少200fM、至少300fM、至少400fM、至少500fM、至 少600fM、至少700fM、至少800fM、至少900fM、至少1皮摩爾（pM)、至少2pM、至少3pM、至少 4pM、至少5pM、至少6pM、至少7pM、至少8pM、至少9pM、至少10pM、至少20pM、至少30pM、至 少40pM、至少50pM、至少60pM、至少7pM、至少80pM、至少90pM、至少100pM、至少200pM、至少 300pM、至少400pM、至少500pM、至少600pM、至少700pM、至少800pM、至少900pM、至少1納 摩爾（nM)、至少2nM、至少3nM、至少4nM、至少5nM、至少6nM、至少7nM、至少8nM、至少9nM、 至少10nM、至少20nM、至少30nM、至少40nM、至少50nm、至少60nM、至少70nM、至少80nM、 至少90nM、至少100nM、至少200nM、至少300nM、至少400nM、至少500nM、至少600nM、至少 700nM、至少800nM、至少900nM、至少1 y M、至少2 y M、至少3 y M、至少4 y M、至少5 y M、至少 6 yM、至少7 yM、至少8 yM、至少9 yM、至少10 yM、至少20 yM、至少30 yM、至少40 yM、至 少50 y M、至少60 y M、至少70 y M、至少80 y M、至少90 y M或約100 y M的解離常數(shù)與陣列 中的多個(gè)肽結(jié)合。
[0103] 來自生物樣品的抗體與肽微陣列結(jié)合的動(dòng)態(tài)范圍可被描述為檢測(cè)到的結(jié)合信號(hào) 的最大值與最小值之間的比值。結(jié)合信號(hào)可以是，例如，利用第二抗體檢測(cè)到的熒光信號(hào)。 傳統(tǒng)測(cè)定受限于結(jié)合的預(yù)定的且狹窄的動(dòng)態(tài)范圍。本發(fā)明的方法和陣列可檢測(cè)寬動(dòng)態(tài)范圍 的抗體與本發(fā)明陣列中的肽的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，可在對(duì)數(shù)尺度上檢測(cè)寬動(dòng)態(tài)范圍 的抗體結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法和陣列允許使用最高21og的動(dòng)態(tài)范圍、最 高31og的動(dòng)態(tài)范圍、最高41og的動(dòng)態(tài)范圍或最高51og的動(dòng)態(tài)范圍來檢測(cè)多種抗體與陣列 的結(jié)合模式。
[0104] 陣列中的分子組成可決定分子與陣列的結(jié)合親合力。在健康狀況的預(yù)防、治療、診 斷或監(jiān)測(cè)中使用的陣列中可存在多種不同的分子。生物分子的非限制性實(shí)例包括氨基酸、 肽、肽模擬物、蛋白質(zhì)、重組蛋白質(zhì)抗體（單克隆或多克隆的）、抗體片段、抗原、表位、碳水 化合物、脂質(zhì)、脂肪酸、酶、天然產(chǎn)物、核酸（包括DNA、RNA、核苷、核苷酸、其結(jié)構(gòu)類似物或組 合）、營(yíng)養(yǎng)物、受體和維生素。在一些實(shí)施方案中，陣列中的分子為模擬表位，即模擬表位的 結(jié)構(gòu)并能夠結(jié)合由表位引發(fā)的抗體的分子。在一些實(shí)施方案中，陣列中的分子為互補(bǔ)位或 互補(bǔ)位模擬物，包含與抗原表位結(jié)合的抗體（或T細(xì)胞受體）的可變區(qū)中的位點(diǎn)。在一些 實(shí)施方案中，本發(fā)明的陣列是包含隨機(jī)肽序列的肽陣列。
[0105] 肽陣列中的氨基酸內(nèi)距離為肽微陣列中的每個(gè)肽之間的距離。氨基酸內(nèi)距離可有 助于脫靶結(jié)合和/或分子與陣列的結(jié)合親合力。氨基酸內(nèi)差異可以是約0. 5nm、約lnm、約 lnm、l. lnm、約 L 2nm、約 L 3nm、約 L 4nm、約 L 5nm、約 L 6nm、約 L 7nm、約 L 8nm、約 L 9nm、 約 2nm、約 2. lnm、約 2. 2nm、約 2. 3nm、約 2. 4nm、約 2. 5nm、約 2. 6nm、約 2. 7nm、約 2. 8nm、 約 2. 9nm、約 3nm、約 3. lnm、約 3. 2nm、約 3. 3nm、約 3. 4nm、約 3. 5nm、約 3. 6nm、約 3. 7nm、 約 3. 8nm、約 3. 9nm、約 4nm、約 4. lnm、約 4. 2nm、約 4. 3nm、約 4. 4nm、約 4. 5nm、約 4. 6nm、 約 4. 7nm、約 4. 8nm、約 4. 9nm、約 5nm、約 5. lnm、約 5. 2nm、約 5. 3nm、約 5. 4nm、約 5. 5nm、約 5. 6nm、約5. 7nm、約5. 8nm、約5. 9nm和/或約6nm。在一些實(shí)施方案中，氨基酸內(nèi)距離小于 6納米（nm)。
[0106] 氨基酸內(nèi)差異可以是至少0? 5nm、至少lnm、至少lnm、至少1. lnm、至少1. 2nm、至少 1. 3nm、至少 1. 4nm、至少 1. 5nm、至少 1. 6nm、至少 1. 7nm、至少 1. 8nm、至少 1. 9nm、至少 2nm、 至少2. lnm、至少2. 2nm、至少2. 3nm、至少2. 4nm、至少2. 5nm、至少2. 6nm、至少2. 7nm、至少 2. 8nm、至少 2. 9nm、至少 3nm、至少 3. lnm、至少 3. 2nm、至少 3. 3nm、至少 3. 4nm、至少 3. 5nm、 至少3. 6nm、至少3. 7nm、至少3. 8nm、至少3. 9nm、至少4nm、至少4. lnm、至少4. 2nm、至少 4. 3nm、至少 4. 4nm、至少 4. 5nm、至少 4. 6nm、至少 4. 7nm、至少 4. 8nm、至少 4. 9nm、至少 5nm、 至少5. lnm、至少5. 2nm、至少5. 3nm、至少5. 4nm、至少5. 5nm、至少5. 6nm、至少5. 7nm、至少 5. 8nm 或至少 5. 9nm。
[0107] 氨基酸內(nèi)差異可以是不大于0? 5nm、不大于lnm、不大于lnm、不大于1. lnm、不 大于1. 2nm、不大于1. 3nm、不大于1. 4nm、不大于1. 5nm、不大于1. 6nm、不大于1. 7nm、不 大于1. 8nm、不大于1. 9nm、不大于2nm、不大于2. lnm、不大于2. 2nm、不大于2. 3nm、不大 于2. 4nm、不超過2. 5nm、不大于2. 6nm、不大于2. 7nm、不大于2. 8nm、不大于2. 9nm、不大 于3nm、不大于3. lnm、不大于3. 2nm、不大于3. 3nm、不大于3. 4nm、不大于3. 5nm、不大 于3. 6nm、不大于3. 7nm、不大于3. 8nm、不大于3. 9nm、不大于4nm、不大于4. lnm、不大 于4. 2nm、不大于4. 3nm、不大于4. 4nm、不大于4. 5nm、不大于4. 6nm、不大于4. 7nm、不大 于4. 8nm、不大于4. 9nm、不大于5nm、不大于5. lnm、不大于5. 2nm、不大于5. 3nm、不大于 5. 4nm、不大于5. 5nm、不大于5. 6nm、不大于5. 7nm、不大于5. 8nm、不大于5. 9nm和/或不大 于6nm。在一些實(shí)施方案中，氨基酸內(nèi)距離不大于6納米（nm)。
[0108] 氨基酸內(nèi)差異的范圍可以是0. 5nm至lnm、0. 5nm至2nm、0. 5nm至3nm、0. 5nm至 3nm、0. 5nm 至 4nm、0. 5nm 至 5nm、0. 5nm 至 6nm、lnm 至 2nm、lnm 至 3nm、lnm 至 4nm、lnm 至 5nm、lnm 至 6nm、2nm 至 3nm、2nm 至 4nm、2nm 至 5nm、2nm 至 6nm、3nm 至 4nm、3nm 至 5nm、3nm 至 6nm、4nm 至 5nm、4nm 至 6nm 和 / 或 5nm 至 6nm〇
[0109] 肽陣列可以在表面上包含多種不同的肽模式。肽陣列可包含，例如，不同的多個(gè)肽 和/或分子的單份、一式兩份、一式三份、一式四份、一式五份、一式六份、一式七份、一式八 份、一式九份和/或一式十份重復(fù)。在一些實(shí)施方案中，將多個(gè)不同的肽重復(fù)地點(diǎn)印在肽陣 列表面上。肽陣列可以，例如，包含均勻地分布在陣列上的多個(gè)肽。肽陣列可以，例如，包含 非均勻地分布在陣列上的多個(gè)肽。
[0110] 可將肽"點(diǎn)印"于肽陣列中。肽斑點(diǎn)（P印tide spot)可具有各種幾何形狀，例如， 肽斑點(diǎn)可以是圓形、正方形、矩形和/或三角形。肽斑點(diǎn)可具有多種直徑。肽斑點(diǎn)直徑的 非限制性實(shí)例為約3 y m至約8 y m、約3至約10mm、約5至約10mm、約10 y m至約20 y m、約 30 y m、約 40 y m、約 50 y m、約 60 y m、約 70 y m、約 80 y m、約 90 y m、約 100 y m、約 110 y m、 約 120 y m、約 130 y m、約 140 y m、約 150 y m、約 160 y m、約 170 y m、約 180 y m、約 190 y m、約 200 ym、約 210 ym、約 220 ym、約 230 ym、約 240 ym 和 / 或約 250 ym。
[0111] 肽陣列可包含許多不同的肽。在一些實(shí)施方案中，肽陣列包含約10個(gè)肽；約50個(gè) 肽；約100個(gè)肽；約200個(gè)肽；約300個(gè)肽；約400個(gè)肽；約500個(gè)肽；約750個(gè)肽；約1000 個(gè)肽；約1250個(gè)肽；約1500個(gè)肽；約1750個(gè)肽；約2, 000個(gè)肽；約2, 250個(gè)肽；約2, 500個(gè) 肽；約2, 750個(gè)肽；約3, 000個(gè)肽；約3, 250個(gè)肽；約3, 500個(gè)肽；約3, 750個(gè)肽；約4, 000 個(gè)肽；約4, 250個(gè)肽；約4, 500個(gè)肽；約4, 750個(gè)肽；約5, 000個(gè)肽；約5, 250個(gè)肽；約5, 500 個(gè)肽；約5, 750個(gè)肽；約6, 000個(gè)肽；約6, 250個(gè)肽；約6, 500個(gè)肽；約7, 500個(gè)肽；約7, 725 個(gè)肽；8, 000個(gè)肽；約8, 250個(gè)肽；約8, 500個(gè)肽；約8, 750個(gè)肽；約9, 000個(gè)肽；約9, 250 個(gè)肽；約10, 〇〇〇個(gè)肽；約10, 250個(gè)肽；約10, 500個(gè)肽；約10, 750個(gè)肽；約11，000個(gè)肽；約 11，250個(gè)肽；約11，500個(gè)肽；約11，750個(gè)肽；約12, 000個(gè)肽；約12, 250個(gè)肽；約12, 500 個(gè)肽；約12, 750個(gè)肽；約13, 000個(gè)肽；約13, 250個(gè)肽；約13, 500個(gè)肽；約13, 750個(gè)肽；約 14, 000個(gè)肽；約14, 250個(gè)肽；約14, 500個(gè)肽；約14, 750個(gè)肽；約15, 000個(gè)肽；約15, 250 個(gè)肽；約15, 500個(gè)肽；約15, 750個(gè)肽；約16, 000個(gè)肽；約16, 250個(gè)肽；約16, 500個(gè)肽；約 16, 750個(gè)肽；約17, 000個(gè)肽；約17, 250個(gè)肽；約17, 500個(gè)肽；約17, 750個(gè)肽；約18, 000 個(gè)肽；約18, 250個(gè)肽；約18, 500個(gè)肽；約18, 750個(gè)肽；約19, 000個(gè)肽；約19, 250個(gè)肽；約 19, 500個(gè)肽；約19, 750個(gè)肽；約20, 000個(gè)肽；約20, 250個(gè)肽；約20, 500個(gè)肽；約20, 750 個(gè)肽；約21，000個(gè)肽；約21，250個(gè)肽；約21，500個(gè)肽；約21，750個(gè)肽；約22, 000個(gè)肽；約 22, 250個(gè)肽；約22, 500個(gè)肽；約22, 750個(gè)肽；約23, 000個(gè)肽；約23, 250個(gè)肽；約23, 500 個(gè)肽；約23, 750個(gè)肽；約24, 000個(gè)肽；約24, 250個(gè)肽；約24, 500個(gè)肽；約24, 750個(gè)肽；約 25, 000個(gè)肽；約25, 250個(gè)肽；約25, 500個(gè)肽；約25, 750個(gè)肽；和/或約30, 000個(gè)肽。
[0112] 在一些實(shí)施方案中，在健康監(jiān)測(cè)方法、治療方法、診斷方法和預(yù)防狀況的方法中使 用的肽陣列包含多于30, 000個(gè)肽。在一些實(shí)施方案中，在健康監(jiān)測(cè)方法中使用的肽陣列 包含約330, 000個(gè)肽。在一些實(shí)施方案中，該陣列包含約30, 000個(gè)肽；約35, 000個(gè)肽；約 40, 000個(gè)肽；約45, 000個(gè)肽；約50, 000個(gè)肽；約55, 000個(gè)肽；約60, 000個(gè)肽；約65, 000 個(gè)肽；約70, 000個(gè)肽；約75, 000個(gè)肽；約80, 000個(gè)肽；約85, 000個(gè)肽；約90, 000個(gè)肽； 約95, 000個(gè)肽；約100, 000個(gè)肽；約105, 000個(gè)肽；約110, 000個(gè)肽；約115, 000個(gè)肽； 約120, 000個(gè)肽；約125, 000個(gè)肽；約130, 000個(gè)肽；約135, 000個(gè)肽；約140, 000個(gè)肽； 約145, 000個(gè)肽；約150, 000個(gè)肽；約155, 000個(gè)肽；約160, 000個(gè)肽；約165, 000個(gè)肽； 約170, 000個(gè)肽；約175, 000個(gè)肽；約180, 000個(gè)肽；約185, 000個(gè)肽；約190, 000個(gè)肽； 約195, 000個(gè)肽；約200, 000個(gè)肽；約210, 000個(gè)肽；約215, 000個(gè)肽；約220, 000個(gè)肽； 約225, 000個(gè)肽；約230, 000個(gè)肽；約240, 000個(gè)肽；約245, 000個(gè)肽；約250, 000個(gè)肽； 約255, 000個(gè)肽；約260, 000個(gè)肽；約265, 000個(gè)肽；約270, 000個(gè)肽；約275, 000個(gè)肽； 約280, 000個(gè)肽；約285, 000個(gè)肽；約290, 000個(gè)肽；約295, 000個(gè)肽；約300, 000個(gè)肽； 約305, 000個(gè)肽；約310, 000個(gè)肽；約315, 000個(gè)肽；約320, 000個(gè)肽；約325, 000個(gè)肽；約 330, 000個(gè)肽；約335, 000個(gè)肽；約340, 000個(gè)肽；約345, 000個(gè)肽；和/或約350, 000個(gè) 肽。在一些實(shí)施方案中，在健康監(jiān)測(cè)方法中使用的肽陣列包含多于330, 000個(gè)肽。
[0113] 肽陣列可包含許多不同的肽。在一些實(shí)施方案中，肽陣列包含至少2, 000個(gè)肽；至 少3, 000個(gè)肽；至少4, 000個(gè)肽；至少5, 000個(gè)肽；至少6, 000個(gè)肽；至少7, 000個(gè)肽；至少 8, 000個(gè)肽；至少9, 000個(gè)肽；至少10, 000個(gè)肽；至少11，000個(gè)肽；至少12, 000個(gè)肽；至少 13, 000個(gè)肽；至少14, 000個(gè)肽；至少15, 000個(gè)肽；至少16, 000個(gè)肽；至少17, 000個(gè)肽；至 少18, 000個(gè)肽；至少19, 000個(gè)肽；至少20, 000個(gè)肽；至少21，000個(gè)肽；至少22, 000個(gè)肽； 至少23, 000個(gè)肽；至少24, 000個(gè)肽；至少25, 000個(gè)肽；至少30, 000個(gè)肽；至少40, 000個(gè) 肽；至少50, 000個(gè)肽；至少60, 000個(gè)肽；至少70, 000個(gè)肽；至少80, 000個(gè)肽；至少90, 000 個(gè)肽；至少100, 〇〇〇個(gè)肽；至少110, 〇〇〇個(gè)肽；至少120, 000個(gè)肽；至少130, 000個(gè)肽；至少 140, 000個(gè)肽；至少150, 000個(gè)肽；至少160, 000個(gè)