一種細(xì)菌莢膜快速染色試劑及其染色方法
【技術(shù)領(lǐng)域】：
[0001] 本發(fā)明屬于一種細(xì)菌染色用試劑，具體涉及一種細(xì)菌莢膜染色試劑及其使用該試 劑的染色方法。
【背景技術(shù)】：
[0002] 莢膜是細(xì)菌的一種特殊結(jié)構(gòu)，是指某些細(xì)菌細(xì)胞壁外包繞的一層粘液性的物質(zhì)， 主要成分為多糖或蛋白質(zhì)的多聚體。莢膜是細(xì)菌致病重要的毒力因子，也是鑒別細(xì)菌的重 要標(biāo)志。因此在教學(xué)和科研中，細(xì)菌莢膜染色是一種重要的染色方法。由于細(xì)菌莢膜對(duì)一 般堿性燃料親和力低，不易著色，因此，需要采用特殊的染色方法對(duì)其染色才能觀察到。目 前常采用的方法有Hiss法、Muir法、Anthony染色法、墨水負(fù)染法、石碳酸復(fù)紅墨汁法、剛 果紅鹽酸負(fù)染法等方法。但從現(xiàn)有的文獻(xiàn)報(bào)道，這些方法都存在一定的缺點(diǎn)，如染色方法復(fù) 雜、操作繁瑣、染色時(shí)間長(zhǎng)、染色效果不穩(wěn)定等。為此很多研宄者對(duì)現(xiàn)有莢膜染色法進(jìn)行了 改良，但改良后的莢膜染色法仍然存在操作過程復(fù)雜、染色時(shí)間長(zhǎng)等缺點(diǎn)。因此需要一種更 加簡(jiǎn)單快捷的染色方法，來(lái)對(duì)細(xì)菌莢膜進(jìn)行染色觀察。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的旨在克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，為細(xì)菌莢膜染色提供一種新的快速染色 試劑及其使用方法，該試劑可在室溫下長(zhǎng)期貯存，應(yīng)用該試劑染色操作簡(jiǎn)單、染色時(shí)間短， 染色效果穩(wěn)定。
[0004] 本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：本發(fā)明提供的染色試劑包括堿性品紅、硫酸 銅、石碳酸溶液、明礬、無(wú)水乙醇和雙蒸水。具體配方如下：
[0005]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種細(xì)菌莢膜快速染色試劑，其特征在于：該試劑主要由堿性品紅、硫酸銅、石碳酸 溶液、明礬和無(wú)水乙醇組成。具體配方如下： 堿性品紅6.258~88;4.5%石碳酸溶液8〇1111~10〇1111;明研11.558~2.158;硫酸銅 15. 8g~18. 6g;無(wú)水乙醇 90ml~100mL;雙蒸水 90ml~100ml。
2. 使用權(quán)利要求1所述的染色試劑對(duì)細(xì)菌莢膜進(jìn)行染色的方法，其特征在于：按下述 步驟進(jìn)行： (1) 制片：在一張潔凈的載玻片中央滴加少許生理鹽水，用滅菌的接種環(huán)取少許培養(yǎng) 好的細(xì)菌菌苔，放入載玻片上的生理鹽水中，充分涂開，室溫下自然干燥。 (2) 染色：用滴管吸取權(quán)利要求1所述的染色劑，滴加到涂片區(qū)內(nèi)，染色時(shí)間為60秒， 然后用流水將染液沖洗掉，用吸水紙將載玻片上多余水分吸干。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種細(xì)菌莢膜快速染色試劑及使用該試劑的染色方法。該試劑主要由堿性品紅、硫酸銅、石碳酸溶液、明礬和無(wú)水乙醇等試劑配制而成。該染色試劑成本低廉，可在室溫下長(zhǎng)期貯存而不失效。應(yīng)用該試劑對(duì)細(xì)菌莢膜染色，操作簡(jiǎn)單，只需一個(gè)染色步驟。應(yīng)用該試劑的染色方法克服了目前細(xì)菌莢膜常規(guī)染色法操作繁瑣的缺點(diǎn)；同時(shí)用該試劑染色時(shí)間只需要60秒，大大縮短了細(xì)菌莢膜染色的時(shí)間，染色效果好，莢膜和背景對(duì)比明顯，易于觀察。適合在教學(xué)科研中對(duì)細(xì)菌莢膜染色中推廣應(yīng)用。
【IPC分類】G01N1-31, G01N1-30
【公開號(hào)】CN104819886
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510187309
【發(fā)明人】楊帆, 張曉琴, 趙永新, 李敏, 崔柳蘇, 丘樂樂
【申請(qǐng)人】新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【公開日】2015年8月5日
【申請(qǐng)日】2015年4月21日