-l，4-diamine)、聚 季按鹽 _11 (Copolymer of vinylpyrrolidone and quaternized dimethylaminoethyl methacrylate)和聚季按鹽-2(poly[bis(2-chloroethyl)eter-alt-l， 3-bis[3_(dimethylamino)propyl]urea])等。作為二甲胺-表氯醇共聚物，在一個(gè)或多個(gè) 實(shí)施方式中也可以包括二甲胺-表氯醇以外的構(gòu)成單位，例如也可以包括乙二胺等。從獲 得容易的觀點(diǎn)來看，陽離子性聚合物優(yōu)選為包括聚二烯丙基二甲基銨鹽、和/或二甲胺-表 氯醇共聚物，更優(yōu)選為由聚二烯丙基二甲基銨鹽、和/或二甲胺-表氯醇共聚物構(gòu)成。在一 個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中陽離子性聚合物是氯化物和/或硫化物。陽離子性聚合物既可以以一 種使用，也可以組合多種使用。
[0038] 本公開的制造方法在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中包括接合樹脂基板。通過該接合形成 微型流路。樹脂基板的接合在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中將使固定了陽離子性聚合物的面/與 陽離子性聚合物溶液接觸了的面作為接合面進(jìn)行。接合在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中可以舉出 壓力接合、加熱壓力接合和超聲波熔敷等。在加熱壓力接合的情況下，作為其條件，在一個(gè) 或多個(gè)實(shí)施方式中是 40 ~200°C或 60 ~120°C，1 ~100kgf/cm2(0. 0981MPa ~9. 81MPa) 或 5 ~50kgf/cm2 (0? 4905MPa ~4. 905MPa)，1 秒~10 分或 10 秒~3 分。
[0039] 至少一個(gè)樹脂基板在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中在接合面上形成有凹部。在一個(gè)或多 個(gè)實(shí)施方式中也可以在兩個(gè)樹脂基板的接合面上形成有凹部。凹部的截面的外接圓的直徑 在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中是28~280 y m或35~140 y m。一個(gè)樹脂基板在一個(gè)或多個(gè)實(shí) 施方式中形成有用于導(dǎo)入試樣和電泳液的通孔。
[0040] 作為樹脂，在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中可以舉出聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA)等丙烯 樹脂、聚甲基丙烯酸甲酯、聚碳酸酯、聚偏二氯乙烯、環(huán)狀聚烯、聚醚醚酮、聚苯乙烯、聚四氟 乙烯（PTFE)、環(huán)烯、聚丙烯和聚乙烯等，從光透過性優(yōu)良的角度考慮優(yōu)選為聚甲基丙烯酸甲 酯。
[0041] [微型流路芯片]
[0042] 本公開在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中涉及包括微型流路的芯片。本公開的微型流路芯 片在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中是由本公開的制造方法制造的芯片。根據(jù)本公開的芯片，在一 個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中能起到能夠短時(shí)間且高精度地分離血紅蛋白的各成分的效果。根據(jù)本 公開的芯片，在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中能起到分析的再現(xiàn)性優(yōu)良的效果。
[0043] 本公開的芯片在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中在微型流路的內(nèi)壁固定了具有季鑰基的 陽離子性聚合物。從而，本公開的芯片在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中涉及通過樹脂基板的接合 形成有微型流路的芯片，即在所述微型流路的內(nèi)壁固定了具有季鑰基的陽離子性聚合物的 芯片。陽離子性聚合物在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中被經(jīng)由陰離子性官能基固定到微型流路。 陽離子性聚合物在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中被離子鍵固定到微型流路。本公開的芯片在一個(gè) 或多個(gè)實(shí)施方式中在樹脂基板的接合部分固定有具有季鑰基的陽離子性聚合物。本公開的 芯片在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中經(jīng)由具有季鑰基的陽離子性聚合物接合樹脂基板。樹脂和陽 離子性聚合物如上所述。
[0044] 本公開的芯片在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中能夠用于被測體分析。本公開的芯片在一 個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中能夠用于電泳用和毛細(xì)管電泳等分析。本公開的芯片在一個(gè)或多個(gè)實(shí) 施方式中能夠在源自生物體的被測體的分析中進(jìn)行。作為源自生物體的被測體，在一個(gè)或 多個(gè)實(shí)施方式中可以舉出包括血液成分的被測體，例如可以舉出血液和包含血液中的成分 的血液來源物等。作為血液，可以舉出被從生物體采集的血液。作為包含血液中的成分的 血液來源物，例如可以舉出全血、血清、血漿和血球。作為包含紅血球成分的血液來源物，可 以舉出被從血液分離或調(diào)制且包含紅血球成分的物質(zhì)，例如包含除去了血漿的血球成分、 血球濃縮物、血液或血球的冷凍干燥物、對(duì)全血進(jìn)行了溶血處理的溶血試樣、離心分離血 液、自然沉淀血液、洗凈血球等。作為分析對(duì)象物，在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中可以舉出蛋白 質(zhì)等，其中優(yōu)選為血紅蛋白、白蛋白和球蛋白。作為血紅蛋白，在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中可 以舉出糖化血紅蛋白、修飾血紅蛋白和異常血紅蛋白等。作為糖化血紅蛋白，在一個(gè)或多個(gè) 實(shí)施方式中可以舉出血紅蛋白Alc、血紅蛋白Ala、血紅蛋白Alb、血紅蛋白Aldl、血紅蛋白 Ald2、血紅蛋白Ald3、血紅蛋白Ale等。作為異常血紅蛋白，可以舉出血紅蛋白F、血紅蛋白 S、血紅蛋白C、血紅蛋白D、血紅蛋白E、血紅蛋白J、血紅蛋白A2、高鐵血紅蛋白等。作為修 飾血紅蛋白，在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中可以舉出氨基甲?；t蛋白、醛化血紅蛋白、乙酰 化血紅蛋白等。作為白蛋白，在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中可以舉出糖化白蛋白。作為球蛋白， 在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中可以舉出IgA、IgG、IgM、IgE、IgD、IgY、Fab、F(ab' )2和它們與 抗原結(jié)合了的抗原抗體復(fù)合體等。作為球蛋白，在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中可以舉出結(jié)合了 標(biāo)記物的球蛋白。作為標(biāo)記物，可以舉出染料、熒光物質(zhì)、發(fā)光物質(zhì)、量子點(diǎn)、酶、核酸等。
[0045] 本公開的芯片在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中包括微型流路、用于保持試樣的凹部、用 于保持電泳液的凹部。用于保持試樣的凹部和用于保持電泳液的凹部通過微型流路來分別 連通。本公開的芯片在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中通過2張樹脂基板接合來形成微型流路。
[0046] 本公開的芯片在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中，也可以在流路中填充電泳液。作為電泳 液可以舉出后述的電泳液。
[0047] 在圖1中示出本公開的芯片的不被限定的實(shí)施方式。圖1是用于說明本公開的芯 片的簡要不意圖。圖la是樹脂基板1、2的俯視圖，圖lb是樹脂基板1、2的仰視圖，圖lc 是芯片的上側(cè)截面圖和側(cè)截面圖。圖1所示的芯片由一對(duì)樹脂基板1、2形成，在內(nèi)部包括 微型流路10。在微型流路10的兩端分別形成有試樣保持槽11和電泳液保持槽12。在試 樣保持槽11和電泳液保持槽12之間微型流路10的上面形成有檢測部13。
[0048] [試劑盒]
[0049] 本公開在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中涉及試劑盒，所述試劑盒是用于分析被測體的試 劑盒，包含本公開的芯片和具備分析用溶液的盒。作為分析用的溶液，作為一個(gè)或多個(gè)實(shí)施 方式可以舉出電泳液和試樣調(diào)制用液等。
[0050] 電泳液能夠使用以往公知的電泳液。電泳液在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中包括pH緩 沖物質(zhì)、非表面活性劑型的兩性離子物質(zhì)和水，還根據(jù)需要包括離子性的假固定相等。作為 離子性假固定相，從提高分析精度和縮短測定時(shí)間的觀點(diǎn)來考慮，在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式 中可以舉出具有陰離子性基團(tuán)的多糖類等。作為具有陰離子性基團(tuán)的多糖類，可以舉出硫 酸化多糖類、羧酸化多糖類、磺酸化多糖類和磷酸化多糖類，從提高分析精度和縮短測定時(shí) 間的觀點(diǎn)來考慮，優(yōu)選為硫酸化多糖類和羧酸化多糖類。作為硫酸化多糖類，在不被限定的 一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中，從提高分析精度和縮短測定時(shí)間的觀點(diǎn)來考慮，可以舉出硫酸軟 骨素、肝素、類肝素、褐藻素或其鹽等，其中優(yōu)選為硫酸軟骨素或其鹽。作為硫酸軟骨素，可 以舉出硫酸軟骨素A、硫酸軟骨素C、硫酸軟骨素D和硫酸軟骨素E等。
[0051] 作為試樣調(diào)制用液，在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中可以舉出與電泳液同樣的組成的試 樣調(diào)制用液。作為試樣調(diào)制用液，在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中，也可以是與電泳液不同的組成 的試樣調(diào)制用液。
[0052][分析方法]
[0053] 本公開在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中涉及分析方法，該分析方法是血紅蛋白的分析方 法，包括使用本公開的芯片來測定試樣中的分析對(duì)象。根據(jù)本公開的分析方法，在一個(gè)或多 個(gè)實(shí)施方式中能夠提高試樣中的分析對(duì)象的測定精度，優(yōu)選地能起到提高分析對(duì)象的分離 精度和/或縮短測定時(shí)間的效果。
[0054] 分析在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中能夠通過由分離分析法分離試樣中的分析對(duì)象來 進(jìn)行。作為分離分析法，在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中可以舉出電泳法，其中優(yōu)選為毛細(xì)管電泳 法。
[0055] 本公開的分析方法在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中包括：向芯片的微型流路的一端導(dǎo)入 試樣以及向微型流路的兩端施加電壓。本公開的分析方法在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中包括將 試樣導(dǎo)入到芯片的微型流路以及向微型流路的整體或一部分施加電壓。本公開的分析方法 在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中包括：稀釋被測體而調(diào)制試樣；將電泳液向芯片的微型流路的一 端導(dǎo)入從而以電泳液填充微型流路；向所述芯片的微型流路的一端導(dǎo)入試樣；以及向微型 流路的兩端施加電壓。電泳液如上所述。
[0056] 被測體的稀釋在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中優(yōu)選為使用上述的試樣調(diào)制用液進(jìn)行。
[0057] 接著，對(duì)使用圖1示出的使用了毛細(xì)管電泳芯片的試樣的分析方法的一例進(jìn)行說 明。
[0058] 首先，在毛細(xì)管電泳芯片的電泳液保持槽12中填充電泳液，通過毛細(xì)管現(xiàn)象將電 泳液向毛細(xì)管流路10填充。
[0059] 接著，將試樣配置到在毛細(xì)管流路10中填充了電泳液的所述毛細(xì)管電泳芯片的 試樣保持槽11。
[0060] 配置在試樣保持槽11的試樣能夠通過稀釋作為試樣原料的全血來調(diào)制。試樣原 料的稀釋率在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中是1. 2~200倍，優(yōu)選為2~100倍或3~80倍。
[0061] 接著，在毛細(xì)管流路10的兩端，即試樣保持槽11和電泳液保持槽12之間施加電 壓。由此，進(jìn)行從試樣保持槽11向毛細(xì)管流路10導(dǎo)入試樣和在毛細(xì)管流路10中分離，包 含血紅蛋白的試樣從試樣保持槽11向電泳液保持槽12移動(dòng)。向毛細(xì)管流路10的兩端施 加的電壓在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中是〇. 5~10kV，優(yōu)選為0. 5~5kV。
[0062] 然后，在預(yù)定的位置進(jìn)行測定。測定在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式中能夠通過吸光度測 定等光學(xué)方法來進(jìn)行。在分析對(duì)象物質(zhì)是血紅蛋白的情況下，例如優(yōu)選為進(jìn)行波長415nm 的吸光度的測定。
[0063] 進(jìn)行測定的位置、即分離所要的長度能夠根據(jù)毛細(xì)管流路10的長度等適宜決定。 例如，在毛細(xì)管流路10的長度時(shí)10~150mM的情況下