加10%硝酸鉛 溶液1ml，搖勻，放置6分鐘，加氨氧化軸試液10ml，再加水至刻度，放置15分鐘桐法制備 空白溶液，照中國(guó)藥典2010年版一部附錄VA紫外-可見分光光度法，在500nm波長(zhǎng)處，測(cè) 定吸光度；W吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；
[0021] 測(cè)定法；取本品內(nèi)容物，混勻，取0. 2g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入60%己醇 25ml，密塞，稱定重量，超聲處理1小時(shí)，放冷，稱定重量，用60%己醇補(bǔ)足減失的重量，濾過， 精密量取續(xù)濾液1ml，置25ml的容量瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下的方法，至"加水至5ml" 起，依法測(cè)定吸光度，標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中蘆下的濃度，計(jì)算，即得；
[002引本品每粒含總黃麗W蘆下計(jì)，不得少于17. 5mg;
[0023] (2)八角楓堿含量測(cè)定：
[0024] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)；W十八烷基娃焼鍵合硅膠為填充劑；W甲醇；緩沖 液=22 ;78為流動(dòng)相，所述的緩沖液由0. 2g庚焼黃酸軸、2.Og磯酸二氨鐘、0. 3ml磯酸加水 到1000ml而得；柱溫30°C，流速為1.OOOml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為259nm;理論板數(shù)按L(―)- 八角楓堿峰計(jì)算應(yīng)不低于6000 ;
[00巧]對(duì)照品溶液的制備；精密稱取L(-)-八角楓堿對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含10yg的溶液，即得；
[0026] 供試品溶液的制備；取本品內(nèi)容物，混勻，取1. 5g，精密稱定，置150ml的錐形瓶 中，加氨水3ml潤(rùn)濕，密閉5分鐘后，再加入H氯甲焼80ml，7(TC水浴回流50分鐘，放冷，濾 過，濾液揮干，殘?jiān)眉状歼m量溶解，并轉(zhuǎn)移至10ml的容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻， 用0. 45um的微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得；
[0027] 測(cè)定法；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10y1，注入液相色譜儀，測(cè) 定，即得；
[002引本品每粒含八角楓WL(―)-八角楓堿咕化4馬）計(jì)，應(yīng)為0. 007~0. 30mg。
[0029] 為了研究治療關(guān)節(jié)腫痛的金骨蓮膠囊的檢測(cè)方法，申請(qǐng)人進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)W篩 選最佳方案，具體如下：
[0030] 1、八角楓鑒別：
[0031] 八角楓是金骨蓮膠囊處方中的藥材之一，通過查閱相關(guān)文獻(xiàn)資料，確認(rèn)八角楓藥 材中所含成份八角楓堿，既是活性成份，又是有毒成分。w八角楓對(duì)照藥材與八角楓堿同時(shí) 為對(duì)照進(jìn)行鑒別，在不同的提取條件與展開下，分別通過在365nm紫外光燈下檢視，5%香草 酵硫酸溶液加熱顯色，稀楓化餓鐘試液，改良楓化餓鐘試液顯色，結(jié)果，八角楓堿對(duì)照品均 無斑點(diǎn)顯現(xiàn)，為此采用八角楓對(duì)照藥材進(jìn)行了W下實(shí)驗(yàn)：
[0032] 1. 1、供試品制備方法的選擇：W下方法內(nèi)容物取樣量為1. 5g。
[003引表1提取方法選擇
[0034]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種治療關(guān)節(jié)疼痛的藥物制劑的檢測(cè)方法，所述的制劑是金骨蓮膠囊，這種膠囊劑 這樣制備：透骨香343g、漢桃葉400g、大血藤370g、八角楓50g、金鐵鎖50g、淀粉125g，以 上五味藥材，金鐵鎖加水煎煮3小時(shí)，濾過，濾液備用，藥渣干燥后粉碎成細(xì)粉，備用；其余 透骨香等四味，加水煎煮三次，每次2小時(shí)，合并煎液，濾過，合并上述濾液，濃縮至60°C測(cè) 相對(duì)密度為1. 25~1. 28的清膏；加入上述細(xì)粉及淀粉，混勻，干燥，粉碎，過篩，裝入膠囊， 制成1000粒；該檢測(cè)方法由性狀、鑒別、檢查和含量測(cè)定組成，其特征在于：鑒別是以透骨 香對(duì)照藥材為對(duì)照、以三氯甲烷：丙酮=9 :1為展開劑，照薄層色譜法鑒別透骨香；以大血 藤對(duì)照藥材為對(duì)照、以甲苯：乙酸乙酯：甲酸=20:8:1為展開劑，照薄層色譜法鑒別大血 藤；以金鐵鎖對(duì)照藥材為對(duì)照、以三氯甲烷：乙酸乙酯：甲醇：水=15:40:22:10的下層溶液 為展開劑，照薄層色譜法鑒別金鐵鎖；以八角楓對(duì)照藥材為對(duì)照、以二甲苯：乙酸乙酯：甲 醇：異丙醇；氨水=10:5:1:0. 30:0. 15為展開劑，照薄層色譜法鑒定八角楓；含量測(cè)定是照 中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI D高效液相色譜法對(duì)膠囊中八角楓堿的含量測(cè)定，照中國(guó) 藥典2010年版一部附錄V A紫外-可見分光光度法對(duì)膠囊中總黃酮類的含量測(cè)定。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的金骨蓮膠囊的檢測(cè)方法，其特征在于：鑒別方法如下： (1) 透骨香鑒別：取本品內(nèi)容物3g，加甲醇30ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液濃縮 至0. 5ml，作為供試品溶液；另取透骨香對(duì)照藥材2g，同法制成對(duì)照藥材溶液，照中國(guó)藥典 2010年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 yl，分別點(diǎn)于同一以羧甲 基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷：丙酮=9 :1為展開劑，展開，取出，晾 干，用濃氨試液熏約5分鐘，置于365nm紫外光燈下觀察，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜 相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)； (2) 大血藤鑒別：取本品內(nèi)容物2g，加乙醚20ml，加熱回流30分鐘，放冷，濾過，濾液揮 干,殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取大血藤對(duì)照藥材2g，同法制成對(duì)照藥材 溶液；照中國(guó)藥典2010年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取對(duì)照藥材溶液5 ill、供試 品溶液10 Ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯：乙酸 乙酯：甲酸=20:8:1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105°C加熱至 斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； (3) 金鐵鎖鑒別：取本品內(nèi)容物2g，加甲醇30ml，加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?加水30ml使溶解，加以水飽和的正丁醇提取兩次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨試液30ml 洗滌，棄去氨試液，再加以正丁醇飽和的水30ml洗滌，棄去水洗液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)?甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；另取金鐵鎖對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液；照中 國(guó)藥典2010年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液、對(duì)照藥材溶液各5~ IOu 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷：乙酸乙 酯：甲醇：水=15:40:22:10的下層溶液為展開劑，下層溶液為KTC以下展開,取出，晾干,噴 以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，分別置日光下及365nm紫外光燈下檢 視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； (4) 八角楓鑒別：取本品內(nèi)容物1.5g，加氨飽和的三氯甲烷50ml，加熱回流30分鐘，放 冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取八角楓對(duì)照藥材0. 5g， 同法制成對(duì)照藥材溶液；照中國(guó)藥典2010年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩 種溶液各10 U 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以二甲苯： 乙酸乙酯：甲醇：異丙醇：氨水=10:5:1:0. 30:0. 15為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香 草醛硫酸溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位 置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的金骨蓮膠囊的檢測(cè)方法，其特征在于：含量測(cè)定方法如下： (1) 總黃酮含量測(cè)定 對(duì)照品溶液的制備：取蘆丁對(duì)照品適量，精密稱定，加60%乙醇制成0. 35mg/ml的溶 液； 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：精密量取對(duì)照品溶液1.0 ml、2. Oml、3. Oml、4. Oml、5. Oml，分別置 25ml的容量瓶中，加水至5ml，加5%亞硝酸鈉溶液Iml，搖勻，放置6分鐘，加10%硝酸鋁溶 液lml，搖勻，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液10ml，再加水至刻度，放置15分鐘；同法制備空 白溶液，照中國(guó)藥典2010年版一部附錄V A紫外-可見分光光度法，在500nm波長(zhǎng)處，測(cè)定 吸光度；以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線； 測(cè)定法：取本品裝量下的內(nèi)容物，混勻，取〇. 2g，精密稱定，置錐形瓶中