分別移取 10 ii L、20 ii L、50 ii L、100 ii L于lml進(jìn)樣瓶中，分別用空白樣品提取溶液定容至lmL，配制成 基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)曲線；其中，該混合農(nóng)藥成分如表2中的化合物名單。
[0097] (5)測(cè)定方法：將配制好的不同濃度的基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液注入液相色譜-串 聯(lián)質(zhì)譜儀，以外標(biāo)法進(jìn)行殘留量的定量分析，即以配置好的不同梯度的混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液作為 標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行回歸分析，相關(guān)系數(shù)大于等于0. 99,對(duì)提取后的樣品進(jìn)行測(cè)定，對(duì)檢出的農(nóng)藥 和標(biāo)準(zhǔn)曲線的峰面積對(duì)比，并代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得樣品中各種農(nóng)藥的殘留量；其中，液相色 譜設(shè)定條件為 ：
[0098]色譜柱：Agilent (：18色譜柱；
[0099]流速：0? 30mL/min，柱溫：30°C;
[0100] 進(jìn)樣量：10iiL，
[0101] 流動(dòng)相：〇. 1%甲酸-水、〇. 1%甲酸-乙腈梯度洗脫程序表見上表1 ;
[0102] 掃描方式：正離子掃描；電噴霧離子源（ESI);停留時(shí)間50msec ;多反應(yīng)檢測(cè) (MRM)模式采集，MRM參數(shù)見上表2 ;
[0103] 質(zhì)譜設(shè)定條件：ESI+模式下采集，質(zhì)譜條件如下：分辨率：?jiǎn)挝环直媛?；CUR : 40psi ;CAD :Medium ;TEM :50(TC;GS1 :40.0 Opsi ;GS2 :60.0 Opsi ;IS :5000. 00V?；衔镔|(zhì)譜 參數(shù)見上表2 ;
[0104] (6)本發(fā)明方法的檢出限：通過(guò)混標(biāo)溶液經(jīng)過(guò)前處理和進(jìn)樣分析，以3倍信噪比計(jì) 算得到，范圍在0. 15~0. 50 y g/kg之間；
[0105](7)本發(fā)明方法的重復(fù)性和加標(biāo)回收率：
[0106] 在蝦肉樣品中加入混合農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照蝦肉樣品前處理方法進(jìn)行前處理， LC-MS/MS分析，并按照加標(biāo)量和測(cè)定值計(jì)算其回收率，結(jié)果見表4,由表4可以看出，13種農(nóng) 藥化合物在三個(gè)濃度水平10、20、50ii g/kg添加回收率范圍在75. 5%~118%，平均相對(duì)標(biāo) 準(zhǔn)偏差（RSD)小于14. 6%。
[0107]表4.蝦肉樣品中13種農(nóng)藥殘留的檢出限、回收率和RSD
[0110] 另外，收集市售不同來(lái)源的蝦肉樣本18份，每種樣本取兩份平行樣，按照實(shí)施例2 所建立的分析方法進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)和數(shù)據(jù)分析工作在6小時(shí)內(nèi)完成，檢測(cè)結(jié)果表明，在蝦肉 中檢出2份草奸樣本含有58. 4ii g/kg、38. 6ii g/kg的啼菌酯，色譜圖見附圖3、4。經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)方 法氣相色譜檢測(cè)為準(zhǔn)確結(jié)果。通過(guò)實(shí)際樣品分析，進(jìn)一步證明所建立的基于聚苯乙烯-二 乙烯基苯微球建立的改良QuEChERS方法和配方適用于水產(chǎn)品中多種類農(nóng)殘的同時(shí)檢測(cè)， 具有成本低、準(zhǔn)確、可靠的優(yōu)點(diǎn)。
[0111] 以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精 神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包括在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種能同時(shí)檢測(cè)水產(chǎn)品中多種類藥物殘留的方法，包括如下步驟： 將待測(cè)水產(chǎn)品進(jìn)行多種類藥物殘留提取處理，獲得含有藥物殘留提取液； 將所述含有藥物殘留提取液采用聚苯己帰-二己帰基苯微球或聚苯己帰-二己帰基苯 微球與PSA混合物進(jìn)行萃取凈化處理，并配制含有農(nóng)藥殘留提取凈化液； 將所述含有農(nóng)藥殘留提取凈化液上LC-MS/MS進(jìn)行定量檢測(cè)，對(duì)檢出的農(nóng)藥峰面積與 混合農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)曲線的峰面積對(duì)比，計(jì)算出所述待測(cè)水產(chǎn)品中各種農(nóng)藥具體殘留量。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的能同時(shí)檢測(cè)水產(chǎn)品中多種類藥物殘留的方法，其特征在于： 所述聚苯己帰-二己帰基苯微球選用粒徑為微米級(jí)。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的能同時(shí)檢測(cè)水產(chǎn)品中多種類藥物殘留的方法，其特征在于： 所述聚苯己帰-二己帰基苯微球的粒徑為80ym~250ym。4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的能同時(shí)檢測(cè)水產(chǎn)品中多種類藥物殘留的方法，其特征 在于；所述待測(cè)水產(chǎn)品為魚類，在對(duì)所述藥物殘留提取液進(jìn)行萃取凈化處理的步驟中，向所 述魚類的所述藥物殘留提取液中加入聚苯己帰-二己帰基苯微球進(jìn)行混合靜置處理，取上 清液，在無(wú)氧環(huán)境中濃縮至干，溶解定容，得到所述含有農(nóng)藥殘留提取凈化液。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的能同時(shí)檢測(cè)水產(chǎn)品中多種類藥物殘留的方法，其特征在于： 所述聚苯己帰-二己帰基苯微球加入所述魚類的所述藥物殘留提取液中的量是所述魚類 的所述藥物殘留提取液與聚苯己帰-二己帰基苯微球體積質(zhì)量比為（l-5)mL; (20-200)mg。6. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的能同時(shí)檢測(cè)水產(chǎn)品中多種類藥物殘留的方法，其特征 在于；所述待測(cè)水產(chǎn)品為郵類，在對(duì)所述藥物殘留提取液進(jìn)行萃取凈化處理的步驟中，向所 述魚類的所述藥物殘留提取液中加入聚苯己帰-二己帰基苯微球與PSA混合物進(jìn)行混合靜 置處理，取上清液，在無(wú)氧環(huán)境中濃縮至干，溶解定容，得到所述含有農(nóng)藥殘留提取凈化液。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的能同時(shí)檢測(cè)水產(chǎn)品中多種類藥物殘留的方法，其特征在于： 所述聚苯己帰-二己帰基苯微球與PSA加入所述郵類的所述藥物殘留提取液中的量是所 述郵類的所述藥物殘留提取液與聚苯己帰-二己帰基苯微球、PSA體積質(zhì)量比為（l-5)mL: (40-200)mg; (10-50)mg。8. 根據(jù)權(quán)利要求1、2、3、5、7任一所述的能同時(shí)檢測(cè)水產(chǎn)品中多種類藥物殘留的方法， 其特征在于；將所述待測(cè)水產(chǎn)品進(jìn)行多種類藥物殘留提取處理方法如下： 向待測(cè)水產(chǎn)品加入己酸體積百分含量為1 %~2. 5%的己酸-己膳溶劑，同時(shí)加入醋酸 軸和無(wú)水硫酸鎮(zhèn)，進(jìn)行混料處理和振蕩提取后，離也，取上清液。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的能同時(shí)檢測(cè)水產(chǎn)品中多種類藥物殘留的方法，其特征在于： 所述己酸-己膳溶劑與所述待測(cè)水產(chǎn)品的體積質(zhì)量比為（3-5ml) ;lg;和/或 所述醋酸軸、無(wú)水硫酸鎮(zhèn)與所述待測(cè)水產(chǎn)品的質(zhì)量比為1 ;1 ;巧~10)。10. 根據(jù)權(quán)利要求1、2、3、5、7、9任一所述的能同時(shí)檢測(cè)水產(chǎn)品中多種類藥物殘留的方 法，其特征在于：所述LC-MS/MS進(jìn)行定量檢測(cè)的步驟中，所述LC的條件如下： AgilentC18色譜柱，流速；0. 30血/min,柱溫；3(TC，進(jìn)樣量；10yL，流動(dòng)相；0. 1 % (體積百分含量）甲酸-水、0. 1 %甲酸（體積百分含量）-己膳，梯度洗脫程序如下：或/和，所述MS的條件為；ESI+模式下采集，分辨率；單位分辨率；CUR;40psi;CAD:Medium;TEM;50(TC;GS1 ;40.OOpsi;GS2 ;60.OOpsi;IS;5000.OOV; 或/和，所述混合農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)曲線是含有如下農(nóng)藥標(biāo)樣的標(biāo)準(zhǔn)曲線： 氯嚼賴隆、異丙草胺、嚼菌醋、咪醜胺、帰醜嗎晰、甲賴隆、H哇麗、喔嗦麗、哇峨醋、帰哇 醇、多菌靈、喔菌靈、抑霉哇。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種能同時(shí)檢測(cè)水產(chǎn)品中多種類藥物殘留的方法。該能同時(shí)檢測(cè)水產(chǎn)品中多種類藥物殘留的方法包括對(duì)待測(cè)水產(chǎn)品中多種類藥物殘留的提取處理、對(duì)含有藥物殘留提取液的凈化處理、將含有農(nóng)藥殘留提取凈化液上LC-MS/MS進(jìn)行定量分析等步驟。本發(fā)明能同時(shí)檢測(cè)水產(chǎn)品中多種類藥物殘留的方法實(shí)現(xiàn)了一步式分離和檢測(cè)所有農(nóng)藥殘留，提高了樣品前處理和分析過(guò)程的效率，且靈敏度高，同時(shí)使得本發(fā)明方法檢測(cè)成本降低為常規(guī)方法的十分之一。
【IPC分類】G01N30/14, G01N30/02, G01N30/06
【公開號(hào)】CN104931597
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510003949
【發(fā)明人】張毅, 韓瑞陽(yáng), 肖鋒, 藍(lán)芳, 林黎, 沈金燦, 肖陳貴, 華紅慧
【申請(qǐng)人】深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局食品檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心, 深圳市檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院
【公開日】2015年9月23日
【申請(qǐng)日】2015年1月5日