一種測定水產(chǎn)品中間氨基苯甲酸乙酯殘留量的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
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[0001]本發(fā)明涉及水產(chǎn)品中藥物殘留的理化檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種測定水產(chǎn)品中間氨基苯甲酸乙酯殘留量的方法。
【背景技術(shù)】
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[0002]我國是漁業(yè)大國，水產(chǎn)品的總產(chǎn)量多年來居世界首位，極大滿足了人們對水產(chǎn)品消費的需求。但是，高密度、規(guī)?；酿B(yǎng)殖也帶來的一些負面影響，如水環(huán)境的污染，水產(chǎn)品中各種藥物殘留超標等。水產(chǎn)品體內(nèi)的藥物會通過食物鏈在生物體內(nèi)累積濃縮并最終傳遞到人體，對人的食用安全帶來了潛在危害。間氨基苯甲酸乙酯商品名稱為魚安定，常以間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽形式存在，其已經(jīng)廣泛應(yīng)用到水產(chǎn)品的麻醉過程中。雖然水產(chǎn)品體內(nèi)間氨基苯甲酸乙酯殘留的分析方法有高效液相色譜法(HPLC)和高效液相色譜三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)，但由于水產(chǎn)樣品的脂肪和蛋白質(zhì)等干擾物質(zhì)含量高，導(dǎo)致樣品制備方法復(fù)雜:需采用溶劑萃取、固相萃取、氮氣吹干、懸蒸濃縮等多種前處理技術(shù)進行純化、富集。

【發(fā)明內(nèi)容】

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[0003]本發(fā)明的目的是提供一種測定水產(chǎn)品中間氨基苯甲酸乙酯的殘留量方法，它克服了現(xiàn)有的方法前處理復(fù)雜或要使用多種固相萃取小柱凈化的缺點，提供一種混合溶液提取，QuEChERS試劑包凈化，離心后用配置有自動進樣器的HPLC-MS/MS直接測定水產(chǎn)品中氨基苯甲酸乙酯殘留量的方法，該方法干擾較少，前處理簡便、快捷、節(jié)省溶劑，準確、靈敏。
[0004]為了解決【背景技術(shù)】所存在的問題，本發(fā)明是采用以下技術(shù)方案:先將水產(chǎn)樣品經(jīng)混合溶液提取，QuEChERS試劑包凈化，離心后用HPLC-MS/MS分析測定水產(chǎn)品中的藥物殘留量，具體步驟如下:
[0005]1、制備:魚體解剖、勻漿，_20°C冰箱中低溫保存；
[0006]2、提取:實驗過程中，魚糜室溫下融解。稱取魚糜樣品于具蓋離心試管中，加提取溶液充分浸潤，漩渦振蕩，加入QuEChERS試劑盒一振蕩，離心；
[0007]3、凈化:移取樣品提取液上清液于離心管中，加入QuEChERS試劑盒二，渦旋振蕩，離心，吸取上清液經(jīng)0.22 μ m有機相濾膜過濾后進行HPLC-MS/MS分析。
[0008]所述的混合溶液由30% (V/V)醋酸鈉緩沖液(PH4.0)的乙腈組成；所述的QuEChERS試劑盒一由4g無水硫酸鎂、Ig氯化鈉組成；所述的QuEChERS試劑盒二由300mgN-丙基乙二胺鍵合固相吸附劑組成。
[0009]本發(fā)明的儀器參數(shù)為:液相色譜:帶自動進樣器，毛細管電壓3.2kV ;殼氣45Arb ；輔助氣1Arb ;毛細管溫度350°C ;蒸發(fā)溫度200°C ;峰寬Q10.7Da、Q30.7Da，碰撞氣壓力1.5mTorr ;反相色譜柱為kromasil C18反相色譜柱(2.1mmX 50mm, 3.0 μ m);液體自動進樣器:進樣體積5 μ L ;三元流動相，流動相A:0.5%甲酸溶液(V/V)、流動相B:甲醇、流動相C:乙腈。
[0010]本發(fā)明具有以下有益效果:它克服了現(xiàn)有的方法前處理復(fù)雜或要使用多種固相萃取小柱凈化的缺點，提供一種混合溶液提取，QuEChERS試劑包凈化，離心后用配置有自動進樣器的HPLC-MS/MS直接測定水產(chǎn)品中氨基苯甲酸乙酯殘留量的方法，該方法干擾較少，前處理簡便、快捷、節(jié)省溶劑，準確、靈敏。
【具體實施方式】
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[0011]本【具體實施方式】采用以下技術(shù)方案:先將水產(chǎn)樣品經(jīng)混合溶液提取，QuEChERS試劑包凈化，離心后用HPLC-MS/MS分析測定水產(chǎn)品中的藥物殘留量，具體步驟如下:
[0012]1、制備:魚體解剖、勻漿，_20°C冰箱中低溫保存；
[0013]2、提取:實驗過程中，魚糜室溫下融解。稱取魚糜樣品于具蓋離心試管中，加提取溶液充分浸潤，漩渦振蕩，加入QuEChERS試劑盒一振蕩，離心；
[0014]3、凈化:移取樣品提取液上清液于離心管中，加入QuEChERS試劑盒二，渦旋振蕩，離心，吸取上清液經(jīng)0.22 μ m有機相濾膜過濾后進行HPLC-MS/MS分析。
[0015]所述的混合溶液由30% (V/V)醋酸鈉緩沖液(PH4.0)的乙腈組成；所述的QuEChERS試劑盒一由4g無水硫酸鎂、Ig氯化鈉組成；所述的QuEChERS試劑盒二由300mgN-丙基乙二胺鍵合固相吸附劑組成。
[0016]本【具體實施方式】的儀器參數(shù)為:液相色譜:帶自動進樣器，毛細管電壓3.2kV ;殼氣45Arb ;輔助氣1Arb ;毛細管溫度350°C ;蒸發(fā)溫度200°C ;峰寬Q10.7Da、Q30.7Da，碰撞氣壓力1.5mTorr ;反相色譜柱為kromasil C18反相色譜柱(2.1mmX 50mm, 3.0ym);液體自動進樣器:進樣體積5 μ L ;三元流動相，流動相A:0.5%甲酸溶液(V/V)、流動相B:甲醇、流動相C:乙腈。
[0017]本【具體實施方式】克服了現(xiàn)有的方法前處理復(fù)雜或要使用多種固相萃取小柱凈化的缺點，提供一種混合溶液提取，QuEChERS試劑包凈化，離心后用配置有自動進樣器的HPLC-MS/MS直接測定水產(chǎn)品中氨基苯甲酸乙酯殘留量的方法，該方法干擾較少，前處理簡便、快捷、節(jié)省溶劑，準確、靈敏。
[0018]實施例:
[0019]實施例一:1、水產(chǎn)品樣品制備:鯉魚組織經(jīng)過勻漿，保存在_20°C冰箱中；
[0020]2、提取:魚糜室溫下融解，稱取2g樣品于50mL具蓋離心管中，加1mL混合溶液充分浸潤，渦旋混勻；加入QuEChERS試劑盒I (由4g無水硫酸鎂、Ig氯化鈉組成)，立即手持振蕩，防止無水硫酸鎂結(jié)塊，以10000r/min離心1min ；
[0021 ] 3、凈化:移取樣品提取液上清液ImL于2mL離心管中，加入QuEChERS試劑盒2 (由300mg N-丙基乙二胺鍵合固相吸附劑組成)，禍旋振蕩2min,以10000r/min離心5min,吸取上清液經(jīng)0.22 μ m有機相濾膜過濾后進行HPLC-MS/MS分析；
[0022]儀器參數(shù):HPLC_MS/MS:帶自動進樣器，毛細管電壓3.2kV ;鞘氣45Arb ;輔助氣1Arb ;毛細管溫度350°C ;蒸發(fā)溫度200°C ;峰寬Q10.7Da、Q30.7Da，碰撞氣壓力1.5mTorr ；反相色譜柱為kromasil C18反相色譜柱(2.1mmX 50mm, 3.0ym);液體自動進樣器:進樣體積 5 μ L ;
[0023]液體自動進樣器:進樣體積5 μ L。
[0024]實施例二:將氨基苯甲酸乙酯標樣稀釋配成0.001?lmg/L共7檔濃度的系列混合工作液，以濃度一氨基苯甲酸乙酯SRM離子峰面積繪制標準曲線，得到相關(guān)系數(shù)(R2);以不斷降低進樣濃度直至峰面積高于基線噪音3倍作為檢出極限(LOD);分別在空白魚樣品中添加0.025、0.05、0.5mg/kg三檔濃度的氨基苯甲酸乙酯標樣,提取、凈化后進樣,計算回收率，重復(fù)3次。
【主權(quán)項】
1.一種測定水產(chǎn)品中間氨基苯甲酸乙酯殘留量的方法，其特征在于先將水產(chǎn)樣品經(jīng)混合溶液提取，QuEChERS試劑包凈化，離心后用HPLC-MS/MS分析測定水產(chǎn)品中的藥物殘留量，具體步驟如下: (1)、制備:魚體解剖、勻漿，-20°C冰箱中低溫保存； (2)、提取:實驗過程中，魚糜室溫下融解。稱取魚糜樣品于具蓋離心試管中，加提取溶液充分浸潤，漩渦振蕩，加入QuEChERS試劑盒一振蕩，離心； (3)、凈化:移取樣品提取液上清液于離心管中，加入QuEChERS試劑盒二，渦旋振蕩，離心，吸取上清液經(jīng)0.22 μ m有機相濾膜過濾后進行HPLC-MS/MS分析。2.一種測定水產(chǎn)品中間氨基苯甲酸乙酯殘留量的方法，其特征在于所述的混合溶液由30% (V/V)醋酸鈉緩沖液(pH4.0)的乙腈組成；所述的QuEChERS試劑盒一由4g無水硫酸鎂、Ig氯化鈉組成；所述的QuEChERS試劑盒二由300mg N-丙基乙二胺鍵合固相吸附劑組成。3.一種測定水產(chǎn)品中間氨基苯甲酸乙酯殘留量的方法，其特征在于儀器參數(shù)為:液相色譜:帶自動進樣器，毛細管電壓3.2kV ;殼氣45Arb ;輔助氣1Arb ;毛細管溫度350°C ;蒸發(fā)溫度200°C ;峰寬Q10.7Da、Q30.7Da，碰撞氣壓力1.5mTorr ;反相色譜柱為kromasil C18反相色譜柱(2.1mmX 50mm, 3.0 μ m);液體自動進樣器:進樣體積5 μ L ;三元流動相,流動相A:0.5%甲酸溶液(V/V)、流動相B:甲醇、流動相C:乙腈。
【專利摘要】一種測定水產(chǎn)品中間氨基苯甲酸乙酯殘留量的方法，它涉及水產(chǎn)品中藥物殘留的理化檢測技術(shù)領(lǐng)域，先將水產(chǎn)樣品經(jīng)混合溶液提取，QuEChERS試劑包凈化，離心后用HPLC-MS/MS分析測定水產(chǎn)品中的藥物殘留量，具體步驟如下：制備：魚體解剖、勻漿，-20℃冰箱中低溫保存；提??；凈化：吸取上清液經(jīng)0.22μm有機相濾膜過濾后進行HPLC-MS/MS分析；它克服了現(xiàn)有的方法前處理復(fù)雜或要使用多種固相萃取小柱凈化的缺點，提供一種混合溶液提取，該方法干擾較少，前處理簡便、快捷、節(jié)省溶劑，準確、靈敏。
【IPC分類】G01N30/06, G01N30/02
【公開號】CN105021717
【申請?zhí)枴緾N201410174995
【發(fā)明人】李晉成, 劉歡, 宋懌
【申請人】中國水產(chǎn)科學(xué)研究院
【公開日】2015年11月4日
【申請日】2014年4月29日