過(guò)過(guò)濾的方式使懸浮物和清液分離，分取清液；測(cè)定清液中的卡托普利濃度或卡托普利二硫化物濃度(記為D2)，以及清液中的磷酸根濃度(記為C2);
[0114](4)取上一步驟所得卡托普利清液直接用于質(zhì)譜測(cè)定，以確定其是否與卡托普利吻合；將所得卡托普利二硫化物清液進(jìn)行氮?dú)獯蹈蓾饪s(至1/10體積)后再用于質(zhì)譜測(cè)定，以確定其是否與卡托普利二硫化物吻合。(在測(cè)定MS時(shí)試樣量不足的情況下，可以重復(fù)步驟(I)以獲得多份洗脫餾份并使其合并，下同)。
[0115]實(shí)施例2:除去流動(dòng)相中緩沖鹽磷酸二氫鈉的方法
[0116]照實(shí)施例1，將其中得到的餾份A或者餾份B，照以下本發(fā)明方法步驟進(jìn)行處理:
[0117](I)使檢測(cè)物配制成溶液，將該溶液注入液相色譜儀以進(jìn)行洗脫，從液相色譜洗脫液收集待用于質(zhì)譜檢測(cè)的目標(biāo)物洗脫餾份，使該洗脫餾份導(dǎo)入預(yù)先填充有助劑的注射器中(上面已完成本步驟，所得餾份分別是餾份A或餾份B);
[0118](2)在注射器中，使所述洗脫餾份與助劑(硫酸鈉，洗脫餾份與助劑重量比約1:0.5)充分混合；
[0119](3)使所得混合液通過(guò)過(guò)濾(微孔濾膜，0.Sum)的方式使懸浮物和清液分離，分取清液；測(cè)定清液中的卡托普利濃度或卡托普利二硫化物濃度(記為D2)，以及清液中的磷酸根濃度(記為C2)；
[0120](4)取上一步驟所得卡托普利清液直接用于質(zhì)譜測(cè)定，以確定其是否與卡托普利吻合；將所得卡托普利二硫化物清液進(jìn)行氮?dú)獯蹈蓾饪s(至1/5體積)后再用于質(zhì)譜測(cè)定，以確定其是否與卡托普利二硫化物吻合。
[0121]實(shí)施例3:除去流動(dòng)相中緩沖鹽磷酸二氫鈉的方法
[0122]照實(shí)施例1，將其中得到的餾份A或者餾份B，照以下本發(fā)明方法步驟進(jìn)行處理:
[0123](I)使檢測(cè)物配制成溶液，將該溶液注入液相色譜儀以進(jìn)行洗脫，從液相色譜洗脫液收集待用于質(zhì)譜檢測(cè)的目標(biāo)物洗脫餾份，使該洗脫餾份導(dǎo)入預(yù)先填充有助劑的注射器中(上面已完成本步驟，所得餾份分別是餾份A或餾份B);
[0124](2)在注射器中，使所述洗脫餾份與助劑(硫酸鈣，洗脫餾份與助劑重量比約1:2)充分混合(在步驟(I)中與洗脫餾份一起預(yù)先向注射器內(nèi)加乙腈(其體積是洗脫餾份的25倍))；
[0125](3)使所得混合液通過(guò)過(guò)濾(微孔濾膜，0.22um)的方式使懸浮物和清液分離，分取清液；測(cè)定清液中的卡托普利濃度或卡托普利二硫化物濃度(記為D2)，以及清液中的磷酸根濃度(記為C2);
[0126](4)取上一步驟所得卡托普利清液直接用于質(zhì)譜測(cè)定，以確定其是否與卡托普利吻合；將所得卡托普利二硫化物清液進(jìn)行氮?dú)獯蹈蓾饪s(至1/5體積)后再用于質(zhì)譜測(cè)定，以確定其是否與卡托普利二硫化物吻合。
[0127]實(shí)施例4:除去流動(dòng)相中緩沖鹽磷酸二氫鈉的方法
[0128]照實(shí)施例1，將其中得到的餾份A或者餾份B，照以下本發(fā)明方法步驟進(jìn)行處理:
[0129](I)使檢測(cè)物配制成溶液，將該溶液注入液相色譜儀以進(jìn)行洗脫，從液相色譜洗脫液收集待用于質(zhì)譜檢測(cè)的目標(biāo)物洗脫餾份，使該洗脫餾份導(dǎo)入預(yù)先填充有助劑的注射器中(上面已完成本步驟，所得餾份分別是餾份A或餾份B);
[0130](2)在注射器中，使所述洗脫餾份與助劑(硫酸鉀，洗脫餾份與助劑重量比約1:1)充分混合(在步驟(I)中與洗脫餾份一起預(yù)先向注射器內(nèi)加乙腈(其體積是洗脫餾份的10倍))；
[0131](3)使所得混合液通過(guò)過(guò)濾(微孔濾膜，0.45um)的方式使懸浮物和清液分離，分取清液；測(cè)定清液中的卡托普利濃度或卡托普利二硫化物濃度(記為D2)，以及清液中的磷酸根濃度(記為C2);
[0132](4)取上一步驟所得卡托普利清液直接用于質(zhì)譜測(cè)定，以確定其是否與卡托普利吻合；將所得卡托普利二硫化物清液進(jìn)行氮?dú)獯蹈蓾饪s(至1/5體積)后再用于質(zhì)譜測(cè)定，以確定其是否與卡托普利二硫化物吻合。
[0133]實(shí)施例5:除去流動(dòng)相中緩沖鹽磷酸二氫鈉的方法
[0134]照實(shí)施例1，將其中得到的餾份A或者餾份B，照以下本發(fā)明方法步驟進(jìn)行處理:
[0135](I)使檢測(cè)物配制成溶液，將該溶液注入液相色譜儀以進(jìn)行洗脫，從液相色譜洗脫液收集待用于質(zhì)譜檢測(cè)的目標(biāo)物洗脫餾份，使該洗脫餾份導(dǎo)入預(yù)先填充有助劑的注射器中(上面已完成本步驟，所得餾份分別是餾份A或餾份B);
[0136](2)在注射器中，使所述洗脫餾份與助劑(二水硫酸鈣，洗脫餾份與助劑重量比約1:0.5)充分混合；
[0137](3)使所得混合液通過(guò)過(guò)濾(微孔濾膜，0.22um)的方式使懸浮物和清液分離，分取清液；測(cè)定清液中的卡托普利濃度或卡托普利二硫化物濃度(記為D2)，以及清液中的磷酸根濃度(記為C2);
[0138](4)取上一步驟所得卡托普利清液直接用于質(zhì)譜測(cè)定，以確定其是否與卡托普利吻合；將所得卡托普利二硫化物清液進(jìn)行氮?dú)獯蹈蓾饪s(至1/10體積)后再用于質(zhì)譜測(cè)定，以確定其是否與卡托普利二硫化物吻合。
[0139]實(shí)施例6:除去流動(dòng)相中緩沖鹽磷酸二氫鈉的方法
[0140]照實(shí)施例1，將其中得到的餾份A或者餾份B，照以下本發(fā)明方法步驟進(jìn)行處理:
[0141](I)使檢測(cè)物配制成溶液，將該溶液注入液相色譜儀以進(jìn)行洗脫，從液相色譜洗脫液收集待用于質(zhì)譜檢測(cè)的目標(biāo)物洗脫餾份，使該洗脫餾份導(dǎo)入預(yù)先填充有助劑的注射器中(上面已完成本步驟，所得餾份分別是餾份A或餾份B);
[0142](2)在注射器中，使所述洗脫餾份與助劑(硫酸鎂，洗脫餾份與助劑重量比約1:2)充分混合(在步驟(I)中與洗脫餾份一起預(yù)先向注射器內(nèi)加甲醇(其體積是洗脫餾份的50倍))；
[0143](3)使所得混合液通過(guò)過(guò)濾(微孔濾膜，0.22um)的方式使懸浮物和清液分離，分取清液；測(cè)定清液中的卡托普利濃度或卡托普利二硫化物濃度(記為D2)，以及清液中的磷酸根濃度(記為C2);
[0144](4)取上一步驟所得卡托普利清液直接用于質(zhì)譜測(cè)定，以確定其是否與卡托普利吻合；將所得卡托普利二硫化物清液進(jìn)行氮?dú)獯蹈蓾饪s(至1/10體積)后再用于質(zhì)譜測(cè)定，以確定其是否與卡托普利二硫化物吻合。
[0145]實(shí)施例7:除去流動(dòng)相中緩沖鹽磷酸二氫鈉的方法
[0146]照實(shí)施例1，將其中得到的餾份A或者餾份B，照以下本發(fā)明方法步驟進(jìn)行處理:
[0147](I)使檢測(cè)物配制成溶液，將該溶液注入液相色譜儀以進(jìn)行洗脫，從液相色譜洗脫液收集待用于質(zhì)譜檢測(cè)的目標(biāo)物洗脫餾份，使該洗脫餾份導(dǎo)入預(yù)先填充有助劑的注射器中(上面已完成本步驟，所得餾份分別是餾份A或餾份B);
[0148](2)在注射器中，使所述洗脫餾份與助劑(硫酸鈉，洗脫餾份與助劑重量比約1:0.5)充分混合；
[0149](3)使所得混合液通過(guò)過(guò)濾(微孔濾膜，0.22um)的方式使懸浮物和清液分離，分取清液；測(cè)定清液中的卡托普利濃度或卡托普利二硫化物濃度(記為D2)，以及清液中的磷酸根濃度(記為C2);
[0150](4)取上一步驟所得卡托普利清液直接用于質(zhì)譜測(cè)定，以確定其是否與卡托普利吻合；將所得卡托普利二硫化物清液進(jìn)行氮?dú)獯蹈蓾饪s(至1/10體積)后再用于質(zhì)譜測(cè)定，以確定其是否與卡托普利二硫化物吻合。
[0151]結(jié)果:以上實(shí)施例1-7，經(jīng)質(zhì)譜測(cè)定餾份A和餾份B，各試驗(yàn)中的質(zhì)譜結(jié)果分別與卡托普利和卡托普利二硫化物吻合；各試驗(yàn)中，緩沖鹽殘余率均在6?28%范圍內(nèi)，例如實(shí)施例I的緩沖鹽殘余率為19% ;卡托普利目標(biāo)物殘余率均在75%?85%范圍內(nèi)，例如實(shí)施例2的卡托普利目標(biāo)物殘余率為83%;卡托普利二硫化物目標(biāo)物殘余率均在73%?87%范圍內(nèi)，例如實(shí)施例3的卡托普利二硫化物目標(biāo)物殘余率為82%。以上實(shí)施例1-7步驟(3)所得清液經(jīng)測(cè)定，其中基本上不含有硫酸根。在補(bǔ)充的試驗(yàn)中，照以上實(shí)施例1-7的方法，不同的僅是將其中的硫酸鹽改為等量的硫酸鋁；結(jié)果顯示緩沖鹽殘余率均大于93%。
[0152]實(shí)施例8:除去流動(dòng)相中混合緩沖鹽磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉的方法
[0153]中國(guó)藥典2010年版二部179頁(yè)收載了使用HPLC法測(cè)定頭孢地嗪鈉原料藥含量的方法，本實(shí)例考察除去流動(dòng)相中混合緩沖鹽的效果。
[0154]用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀0.87g與無(wú)水磷酸氫二鈉0.22g，加水溶解并稀釋至1000ml，搖勻)-乙腈(920:80)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為262nm。取對(duì)照品溶液1ml，加0.lmol/L鹽酸溶液Iml，室溫放置24小時(shí)，再加0.1mol/L氫氧化鈉溶液1ml，搖勻，取20ul注入液相色譜儀，頭孢地嗉峰與前、后相鄰的降解雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)分別不小于3.0和4.0。測(cè)定法:取本品適量，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每Iml中約含頭孢地嗪0.1mg的溶液，搖勻，精密量取20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取頭孢地嗪對(duì)照品適量，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算供試品C20H20N607S4的含量。由此方法可以測(cè)定原料藥供試品中頭孢地嗪C20H20N607S4的含量。
[0155]接著，照上述方法，再精密量取供試品溶液20ul，注入液相色譜儀，截取頭孢地嗪色譜峰部分的洗脫餾份(在此記為餾份A)。測(cè)定該餾份A中的頭孢地嗪濃度(記為Dl)以及其中的磷酸根濃度(記為Cl)。
[0156]接著，將上述餾份A分別照實(shí)施例1-7中步驟(I)至(4)的操作進(jìn)行處理。
[0157]結(jié)果:經(jīng)質(zhì)譜測(cè)定，質(zhì)譜結(jié)果與頭孢地嗪吻合；緩沖鹽殘余率在7?27%范圍內(nèi)，目標(biāo)物殘余率在72 %?89 %范圍內(nèi)。
[0158]實(shí)施例9:除去流動(dòng)相中混合緩沖鹽醋酸鹽和高氯酸鹽的方法
[0159]中國(guó)藥典2010年版二部107頁(yè)收載了使用HPLC法測(cè)定左氧氟沙星原料藥含量的方法，本實(shí)例考察除去流動(dòng)相中混合緩沖鹽醋酸鹽和高氯酸鹽的效果。
[0160]用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以醋酸銨高氯酸鈉溶液(取醋酸銨4.0g和高氯酸鈉7.0g，加水1300ml使溶解，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至2.2)-乙腈(85:15)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為294nm。稱取左氧氟沙星對(duì)照品、環(huán)丙沙星對(duì)照品和雜質(zhì)E對(duì)照品各適量，加0.1mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋制成每Iml中約含左氧氟沙星0.12mg、環(huán)丙沙星和雜質(zhì)E各6ug的混合溶液，取1ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，左氧氟沙星峰的保留時(shí)間約為15分鐘，左氧氟沙星峰與雜質(zhì)E峰和左氧氟沙星峰與環(huán)丙沙星峰的分離度應(yīng)分別大于2.0與2.5。取左氧氟沙星原料藥約60mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加0.lmol/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，用0.lmol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取1ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取左氧氟沙星對(duì)照品適量，同法測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算左氧氟沙星含量，即得。由此方法可以測(cè)定原料藥供試品中左氧氟沙星的含量。
[0161]接著，照上述方法，再精密量取供試品溶液20ul，注入液相色譜儀，截取左氧氟沙星峰部分的洗脫餾份(在此記為餾份A)。測(cè)定該餾份A中的左氧氟沙星濃度(記為Dl)以及其中的醋酸根濃度(記為Cl)和高氯酸根濃度(記為C2)。
[0162]接著，將上述餾份A分別照實(shí)施例1?4中步驟⑴至(4)的操作進(jìn)行處理。
[0163]結(jié)果:經(jīng)質(zhì)譜測(cè)定，質(zhì)譜結(jié)果與左氧氟沙星吻合；醋酸鹽殘余率在11?29%范圍內(nèi)，高氯酸鹽殘余率在7?24 %范