一種gc-ms/ms測定水果和蔬菜中二溴氯丙烷殘留的方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種二溴氯丙烷殘留量的檢測方法,更具體地說,涉及一種采用氣相 色譜-串聯(lián)質譜法(GC-MS/MS)定性定量測定水果和蔬菜中二溴氯丙烷殘留量的方法,屬于 農藥殘留的檢測技術領域。
【背景技術】
[0002] 二溴氯丙烷,俗稱黑藥,學名1,2_二溴-3-氯丙烷,英文名稱1, 2-Dibrom〇-3-chloropropane(簡稱:DBCP),CAS 號為 96-12-8,分子量 236. 3328,結構式為:
二溴氯丙烷是液態(tài)熏蒸性殺線蟲劑的活性成份。它是一種農業(yè)上使用的土壤熏蒸劑, 適用于蔬菜、花卉、煙草、草莓等作物的苗床和溫室大棚的熏蒸,防治根結線蟲、孢囊線蟲、 短體線蟲、螺旋線蟲、紐帶線蟲、矮化線蟲等。眾多研究表明二溴氯丙烷對人體有劇毒,具有 高殘留、致畸、致不育的特點。在發(fā)現它對人類健康造成不良影響之后,此化合物于1979年 被禁止及限制使用。但仍有不法分子為取得高效的種植效果,暗地使用該農藥,為社會留下 不少隱患。
[0003] 國內外對于水果和蔬菜中二溴氯丙烷的檢測研究開展的較少,且主要集中在上世 紀80年代。已有的研究主要是針對花生上的二溴氯丙烷,采用氣相色譜技術進行其殘留量 檢測,但前處理手段落后、過程繁瑣、檢測效率低,且溶劑多為毒性較大的苯、乙烷、濃硫酸 等,對人體有較大危害,不適用于果蔬基質。另外,氣相色譜技術無法克服基質干擾、假陽性 等問題,不能進行較復雜基質中二溴氯丙烷的檢測,限制了其使用范圍。因此,迫切需要建 立一種操作簡單、回收率高、重復性好、檢出限低、選擇性好的方法,適用于各種蔬菜和水果 中二溴氯丙烷的檢測。
【發(fā)明內容】
[0004] 本發(fā)明要解決的問題是針對以上不足,提供一種GC-MS/MS測定水果和蔬菜中二 溴氯丙烷殘留的方法,克服傳統(tǒng)技術檢測步驟繁瑣、溶劑毒性較大、靈敏度低、回收率低、重 現性差、不適用于果蔬基質的缺陷,采用本發(fā)明的方法,具有檢測快速簡便、毒性小、靈敏度 高、選擇性強、重現性好、回收率高的優(yōu)點。
[0005] 為解決以上問題,本發(fā)明采取的技術方案是:一種GC-MS/MS測定水果和蔬菜中二 溴氯丙烷殘留的方法,其特征在于,包括如下步驟: (1) 提?。悍Q取粉碎好的樣品置于具塞離心管中,加入無水硫酸鎂、無水乙酸鈉和〇. 1% 醋酸/乙腈溶液,立即用玻璃棒充分攪拌均勻,均質后離心得樣品提取液; (2) 凈化:移取樣品提取液上清液于旋蒸瓶中,旋蒸至近干,用乙腈溶解殘渣,渦旋振 蕩,溶解液轉入加有分散固相萃取劑和甲苯的離心管中,渦旋振蕩,離心,過膜得樣品液; (3)標準工作溶液的配制:采用樣品空白基質提取液配制不同濃度標準工作液,然后用 標準溶液濃度-色譜峰面積作標準工作曲線; (4 )氣相色譜串聯(lián)質譜(GC-MS/MS )測定 將步驟(3)中的各濃度的標準工作液進行GC-MS/MS測定,用標準溶液濃度-色譜峰面 積作出標準工作曲線; 在相同條件下將步驟(2)中得到的樣品液進行GC-MS/MS測定,測得樣品中二溴氯丙烷 的色譜峰面積,帶入標準曲線,得到樣品液中二溴氯丙烷的含量,然后根據樣品液所代表的 質量計算得到樣品中二溴氯丙烷的殘留量。
[0006] 以下是對上述技術方案的進一步說明: 步驟(1)中樣品若為脫水蔬菜和水果,稱樣量減為正常值的十分之一,然后加水至正常 值,浸泡半小時,進行檢測。
[0007] 步驟(2)中分散固相萃取劑由PSA和C18組成,加入量分別為150mg和200mg,甲 苯為IOOul。
[0008] 步驟(4)中色譜條件為:色譜柱HP-5MS毛細管色譜柱,30*0. 25*0. 25 ;進樣口溫度 250°C ;載氣:He氣,不分流模式進樣,進樣量Iul ;恒流模式,柱流量1.0 ml/min ;程序升溫: 初溫50°C保持2min,以每分鐘5°C的速度升至180°C,保持5min,然后以每分鐘20°C的速度 升至210°C,保持5min ;傳輸線溫度250°C。質譜條件為:離子源溫度:250°C;電離模式:EI ; 碰撞氣:高純氬;多反應監(jiān)測掃描模式SRM,二溴氯丙烷的母離子為156. 8-157. 2,子離子分 別為 74. 8-75. 2 和 76. 8-77. 2。
[0009] 步驟(4)中測定樣品和標準工作溶液時,若兩者相應農藥的保留時間一致,并且在 扣除背景后的樣品質譜圖中所選擇的離子均出現,且離子豐度比與標準溶液一致,則可判 斷樣品中殘留此種農藥,若不能同時滿足上述兩個條件,則判斷不含該種農藥。
[0010] 回收率為 86. 54-95. 25%,檢出限為 0· 76ug/kg,RSD 為 2. 44-5. 79%。
[0011] 本發(fā)明采用以上技術方案,與傳統(tǒng)技術相比,具有以下優(yōu)點:將分散固相萃取前處 理技術和GC-MS/MS檢測技術相結合,快速簡便,采用醋酸、乙腈作為溶劑,毒性小。檢出限 低至0. 76ug/kg,所以靈敏度高。回收率86. 54-95. 25%,所以選擇性強。RSD值2. 44-5. 79%, 所以重現性好,有效的去除了基質的干擾,適用于各種蔬菜水果中二溴氯丙烷的檢測。在分 散固相萃取前處理方法的凈化步驟中加入了甲苯,降低PSA對目標物的吸附,同一基質中 使方法的回收率由不加甲苯時的72. 03-75. 88%,提高到86. 54-94. 29%。
[0012] 下面結合附圖和實施例對本發(fā)明作詳細說明。
【附圖說明】
[0013] 附圖1為添加在空白蘋果基質中的二溴氯丙烷標液的選擇離子色譜圖; 附圖2為空白蘋果樣品的選擇離子色譜圖; 附圖3為添加在空白蘋果基質中的二溴氯丙烷標液的質譜圖。
【具體實施方式】
[0014] 現以以下實施實例來說明本發(fā)明,但并不是限制本發(fā)明的范圍。
[0015] 實施例1 :下面以蘋果為例,說明GC-MS/MS測定二溴氯丙烷殘留的方法,包括如下 步驟: (1)樣品前處理 稱取粉碎并充分混勻的蘋果15g,置于IOOmL塑料離心管中,加入0. 1%醋酸/乙腈溶 液15mL,無水硫酸鎂6. 0g,無水乙酸鈉 I. 5g,用玻璃棒充分攪拌均勾,于均質器上高速均質 2min,10000r/min,4°C高速離心 IOmin ; 取IOmL上清液于250mL旋蒸瓶中,旋蒸至近干,準確加入乙腈2mL溶解殘渣,HOOr/ min渦混2min,溶解液轉移入盛有150mg PSA、200mg C18和IOOuL甲苯的離心管中,1400r/ min禍混2min,凈化液4000r/min,離心10min后用0. 45um濾膜過濾,供GC-MS/MS分析。
[0016] (2 )氣相色譜串聯(lián)質譜(GC-MS/MS )測定 將不同濃度的標準工作液進行GC-MS/MS測定,用標準溶液濃度-色譜峰面積作出標準 工作曲線; 在相同條件下將樣品液進行GC-MS/MS測定,測得樣品中二溴氯丙烷的色譜峰面積,帶 入標準曲線,得到樣品液中二溴氯丙烷的含量,然后根據樣品液所代表的質量計算得到樣 品中^?漠氣丙烷的殘留量。
[0017] (3)色譜條件和質譜條件 色譜條件: 色譜柱HP-5MS毛細管色譜柱,30*0. 25*0. 25 ;進樣口溫度250°C ;載氣:He氣,不分流 模式進樣,進樣量IuL ;恒流模式,柱流量1.0 mL/min ;程序升溫:初溫50°C保持2min,以每 分鐘5°C的速度升至180°C,保持5min,然后以每分鐘20°C的速度升至210°C,保持5min ;傳 輸線溫度250 °C。
[0018] 質譜條件: 離子源溫度:250°C ;電離模式:EI ;碰撞氣:高純氬;多反應監(jiān)測掃描模式SRM,二溴氯 丙烷的母離子為156. 8-157. 2,子離子分別為74. 8-75. 2和76. 8-77. 2。
[0019] 表1MRM檢測參數
*為定莖尚子對。
[0020] (4)基質標準工作曲線 分別用蘋果空白基質提取液配制標準工作液各點:〇. 02、0. 05、0. 1、0. 2、0. 5ug/mL,按 照實驗條件GC-MS/MS測定,用標準溶液濃度-色譜峰面積作出標準工作曲線,求出回歸方 程如表2。
[0021] 表2蘋果空白基質中二溴氯丙烷的標準曲線
加標回收率和重復性: 在不含二溴氯丙烷的空白蘋果樣品中加入50、100