一種羅漢果中羅漢果皂苷v的檢測(cè)方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種羅漢果中羅漢果皂苷V的檢測(cè)方法，包括以下步驟：步驟1：將羅漢果粉碎后，過(guò)篩；步驟2：稱(chēng)取0.5重量份羅漢果粉，與1重量份硅藻土混合均勻待用；步驟3：在預(yù)先放好過(guò)濾膜的萃取池中先加入2重量份硅膠，混合均勻后加入適量的硅藻土至達(dá)到萃取池的池口；蓋上萃取池的蓋子進(jìn)行靜態(tài)萃??；萃取結(jié)束后得到萃取液；步驟4：將萃取液在15000r/min的條件下離心3min，取上清液進(jìn)行液相色譜測(cè)試。本發(fā)明提供了一種羅漢果中羅漢果皂苷V的檢測(cè)方法，該方法操作簡(jiǎn)單，相比于藥典，其提取更為徹底。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
一種羅漢果中羅漢果皂苷V的檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)領(lǐng)域，特別是一種羅漢果中羅漢果皂苷V的檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 2010年藥典記錄了提取羅漢果中羅漢果皂苷V的方法：取本品粉末(過(guò)四號(hào)篩）約 0.5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱(chēng)定重量，加熱回流2小時(shí)，放 冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)。精密量取續(xù)濾液20ml，回收溶劑至干， 加水10ml溶解，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱AB-8(內(nèi)徑為lcm，柱高為10cm)，以水100ml洗脫，棄去 水液，再用20%乙醇100ml洗脫，棄去洗脫液，繼用稀乙醇100ml洗脫，收集洗脫液，回收溶劑 至干，殘?jiān)恿鲃?dòng)相溶解，轉(zhuǎn)移至l〇ml量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，即得。
[0003] 藥典的方法操作過(guò)程復(fù)雜，對(duì)操作人員的操作技能要求高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種羅漢果中羅漢果皂苷V的檢測(cè)方法，該方法操作簡(jiǎn)單，相 比于藥典，其提取更為徹底。
[0005] 本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：一種羅漢果中羅漢果皂苷V的檢測(cè)方法，包括以下步 驟：
[0006] 步驟1:將羅漢果粉碎后，過(guò)篩；
[0007] 步驟2:稱(chēng)取0.5重量份羅漢果粉，與1重量份硅藻土混合均勻待用；
[0008] 步驟3:在預(yù)先放好過(guò)濾膜的萃取池中先加入2重量份硅膠，混合均勻后加入適量 的硅藻土至達(dá)到萃取池的池口；蓋上萃取池的蓋子進(jìn)行靜態(tài)萃取;萃取結(jié)束后得到萃取液；
[0009] 靜態(tài)萃取分為兩步進(jìn)行：
[0010]第一步:用水進(jìn)行洗脫，棄去洗脫液；
[0011] 洗脫條件為:萃取溫度70°c，靜態(tài)萃取時(shí)間為5min，沖洗體積100%，靜態(tài)循環(huán)次數(shù) 1次；
[0012] 第二步:用體積比為80:20的甲醇和乙酸乙酯混合液進(jìn)行萃取;收集得到萃取液； [0013]萃取條件為:萃取溫度100°C;靜態(tài)萃取時(shí)間5min;沖洗體積100%;靜態(tài)循環(huán)次數(shù)1 次；
[0014] 步驟4:將萃取液在15000r/min的條件下離心3min，取上清液進(jìn)行液相色譜測(cè)試； [0015]所述的液相色譜測(cè)試的參數(shù)為：
[0016] a)儀器:液相色譜儀
[0017] b)色譜柱：碳 18色譜柱；3*100mm 3um
[0018] (3)柱溫:40°〇
[0019] d)流速:0.3mL/min
[0020] e)流動(dòng)相：乙腈-水，其中，乙腈和水的體積比23:77 [0021] f)檢測(cè)波長(zhǎng)：203nm〇
[0022]在上述的羅漢果中羅漢果皂苷V的檢測(cè)方法中，所述的萃取池的體積為10ml，所述 的第一步和第二步中的壓力均為1500psi，所述的第一步和第二步中吹掃時(shí)間均為60s。 [0023]在上述的羅漢果中羅漢果皂苷V的檢測(cè)方法中，所述的液相色譜儀為T(mén)hermo U-3000雙三元液相色譜儀;色譜柱為T(mén)hermo Syncronis C18色譜柱，所述的靜態(tài)萃取所用的 設(shè)備為ASE快速溶劑萃取儀。
[0024] 本發(fā)明在采用上述技術(shù)方案后，其具有的有益效果為：
[0025] 本發(fā)明的萃取和測(cè)定的方法操作簡(jiǎn)單，相比于藥典，其提取效率更高，檢測(cè)精度更 好。
【具體實(shí)施方式】
[0026] 下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，但不構(gòu)成對(duì) 本發(fā)明的任何限制。
[0027] 實(shí)施例1:
[0028] -種羅漢果中羅漢果皂苷V的檢測(cè)方法，包括以下步驟：
[0029]步驟1:將羅漢果粉碎后，過(guò)篩；
[0030]步驟2:稱(chēng)取0.5重量份羅漢果粉，與1重量份硅藻土混合均勻待用；
[0031]步驟3:在預(yù)先放好過(guò)濾膜的萃取池中先加入2重量份硅膠，混合均勻后加入適量 的硅藻土至達(dá)到萃取池的池口；蓋上萃取池的蓋子進(jìn)行靜態(tài)萃取;萃取結(jié)束后得到萃取液； [0032]靜態(tài)萃取分為兩步進(jìn)行：
[0033]第一步:用水進(jìn)行洗脫，棄去洗脫液；
[0034]第二步:用體積比為80:20的甲醇和乙酸乙酯混合液進(jìn)行萃取;收集得到萃取液； [0035]萃取條件(見(jiàn)表1)為：
[0038] 分析方法為L(zhǎng)C液相色譜法，液相色譜分析條件：
[0039] a)儀器：Thermo 雙三元液相（U-3000)
[0040] b)色譜柱：Thermo Syncronis C18 3*1 00mm 3um
[0041] c)柱溫：4(TC
[0042] d)流速:0.3mL/min
[0043] e)流動(dòng)相：乙腈-水(體積比2 3:7 7)
[0044] f)檢測(cè)波長(zhǎng)：203nm
[0045] 色譜分析有效性驗(yàn)證：
[0046] 取羅漢果皂苷V對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加流動(dòng)相制成每lml含0.2mg的溶液，即得 羅漢果皂苷V對(duì)照品。
[0047] 取羅漢果皂苷V對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，置棕色量瓶中，加50%乙腈制成每lml含異 阿魏酸880.4yg的溶液，然后分別精密吸取該溶液0. lyl、0.2yl、0.5yl、0.8yl、1. Oyl進(jìn)入LC 測(cè)定，并依照上述LC液相色譜法測(cè)定，結(jié)果詳見(jiàn)表2;
[0048]表 2
[0050] 1.1實(shí)施例1的萃取方法的重現(xiàn)性驗(yàn)證：
[00511 取相同批號(hào)的樣品（批號(hào)：1510180)0.5g，共6份，精密稱(chēng)定，按實(shí)施例1的ASE提取 方法提取供試品溶液，進(jìn)樣量為lyL，以上述的色譜條件平行試驗(yàn)，測(cè)得樣品中羅漢果皂苷v 的含量見(jiàn)表二，RSD為0.73 %，試驗(yàn)表明ASE提取方法重復(fù)性良好，結(jié)果詳見(jiàn)表3
[0052]表 3
[0054] 1.2實(shí)施例1的萃取方法的精確度測(cè)試
[0055] 采用實(shí)施例1的ASE萃取方法和藥典的萃取方法對(duì)羅漢果進(jìn)行萃取，羅漢果為3批， 批號(hào)分別為 1508166,1510180,150723;
[0056] 實(shí)施例1的ASE萃取方法對(duì)同一批次的羅漢果平行測(cè)試兩次，分別為ASE1和ASE2表 不。
[0057]具體測(cè)試結(jié)果見(jiàn)下表4;
[0058]表4
[0060]以上所述的僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，凡在本發(fā)明的精神和原則范圍內(nèi)所作的任 何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種羅漢果中羅漢果皂苷V的檢測(cè)方法，其特征在于，包括以下步驟： 步驟1:將羅漢果粉碎后，過(guò)篩； 步驟2:稱(chēng)取0.5重量份羅漢果粉，與1重量份硅藻土混合均勻待用； 步驟3:在預(yù)先放好過(guò)濾膜的萃取池中先加入2重量份硅膠，混合均勻后加入適量的硅 藻土至達(dá)到萃取池的池口；蓋上萃取池的蓋子進(jìn)行靜態(tài)萃取;萃取結(jié)束后得到萃取液； 靜態(tài)萃取分為兩步進(jìn)行： 第一步:用水進(jìn)行洗脫，棄去洗脫液； 洗脫條件為:萃取溫度70°C，靜態(tài)萃取時(shí)間為5min，沖洗體積100%，靜態(tài)循環(huán)次數(shù)1次； 第二步：用體積比為80:20的甲醇和乙酸乙酯混合液進(jìn)行萃取;收集得到萃取液； 萃取條件為:萃取溫度100 °C ;靜態(tài)萃取時(shí)間5min;沖洗體積100 % ;靜態(tài)循環(huán)次數(shù)1次； 步驟4:將萃取液在15000r/min的條件下離心3min，取上清液進(jìn)行液相色譜測(cè)試； 所述的液相色譜測(cè)試的參數(shù)為： a) 儀器:液相色譜儀 b) 色譜柱:碳18色譜柱;3*100mm 3um (：)柱溫:40°〇 d) 流速:0.3mL/min e) 流動(dòng)相：乙腈-水，其中，乙腈和水的體積比23:77 f) 檢測(cè)波長(zhǎng)：203nm〇2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的羅漢果中羅漢果皂苷V的檢測(cè)方法，其特征在于，所述的萃取 池的體積為l〇ml，所述的第一步和第二步中的壓力均為1500psi，所述的第一步和第二步中 吹掃時(shí)間均為60s。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的羅漢果中羅漢果皂苷V的檢測(cè)方法，其特征在于，所述的液相 色譜儀為T(mén)hermo U-3000雙三元液相色譜儀;色譜柱為T(mén)hermo Syncronis C18色譜柱，所述 的靜態(tài)萃取所用的設(shè)備為ASE快速溶劑萃取儀。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK105929071SQ201610268377
【公開(kāi)日】2016年9月7日
【申請(qǐng)日】2016年4月27日
【發(fā)明人】陳學(xué)松, 歐妮, 陳翠玲, 鐘水橋, 李仁喬
【申請(qǐng)人】廣西壯族自治區(qū)梧州食品藥品檢驗(yàn)所