Hplc法分離測(cè)定鹽酸左西替利嗪及其對(duì)映異構(gòu)體的方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種HPLC法分離測(cè)定鹽酸左西替利嗪及其對(duì)映異構(gòu)體的方法。所述方法中采用的色譜柱是以表面化學(xué)鍵合β?環(huán)糊精的硅膠為填料，采用流動(dòng)相A和流動(dòng)相B進(jìn)行洗脫，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)；所述的流動(dòng)相A為無機(jī)鹽緩沖體系，所述的流動(dòng)相B為有機(jī)溶劑。該方法為反相高效液相色譜法，可同時(shí)實(shí)現(xiàn)鹽酸左西替利嗪及其對(duì)映異構(gòu)體的分離和檢測(cè)，且有優(yōu)良的分離性能和耐久性，簡(jiǎn)便可行，重現(xiàn)性好，高效快速，顯著縮短了分析時(shí)間，拖尾因子和理論踏板數(shù)均能達(dá)到非常好的效果，可以有效測(cè)定鹽酸左西替利嗪中對(duì)映異構(gòu)體的含量，專屬性強(qiáng)。
【專利說明】
HPLC法分離測(cè)定鹽酸左西替利瞎及其對(duì)映異構(gòu)體的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，具體設(shè)及一種HPLC法分離測(cè)定鹽酸左西替利嗦及其對(duì) 映異構(gòu)體的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 鹽酸左西替利嗦(Xevocetirizine Hy化ochloride)于2001年2月上市，為第S代 抗組胺藥，是第二代抗組胺藥西替利嗦的單一光學(xué)異構(gòu)體(西替利嗦TP-異構(gòu)體），由UCB公 司研發(fā)，為選擇性組胺Hl受體括抗劑，無明顯抗膽堿和抗5-徑色胺的作用，中樞抑制作用較 小，主要用于治療呼吸系統(tǒng)、皮膚和眼睛等處的過敏性疾病，如過敏性鼻結(jié)膜炎、過敏性皮 膚病、過敏性哮喘等，具有作用起效快、效應(yīng)強(qiáng)而持久和副作用少的優(yōu)點(diǎn)。
[0003] 鹽酸左西替利嗦適用人群廣泛，可用于兒童與妊娠期和哺乳期婦女，安全、可靠、 臨床效果顯著。鹽酸左西替利嗦化學(xué)名R-2-[2-[4-[(4-氯苯基)苯基甲基]-1-贓嗦基]乙氧 基]乙酸，二鹽酸鹽，分子式為C21也5C1化化? 2肥1。鹽酸左西替利嗦結(jié)構(gòu)式為：
[0004]
[0005] 異構(gòu)體的化學(xué)名稱及結(jié)構(gòu)式如下：
[00061
[0007]在已經(jīng)進(jìn)行的西替利嗦對(duì)映異構(gòu)體的療效臨床研究試驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)，左旋西替利 嗦療效優(yōu)于其消旋體西替利嗦，而右旋西替利嗦則沒有任何藥效作用。由于二者在藥理上 存在較大的差異，故藥物合成和制劑過程中需要對(duì)鹽酸左西替利嗦的對(duì)映異構(gòu)體雜質(zhì)含量 進(jìn)行嚴(yán)格控制。而含手性碳原子的對(duì)映異構(gòu)體的分析、分離一直是手性藥物合成和制劑過 程中質(zhì)量控制的難點(diǎn)和重點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)鹽酸左西替利嗦及其對(duì)應(yīng)異構(gòu)體的分離在鹽酸左西替利 嗦藥物的合成和制劑過程的質(zhì)量控制方面具有非常重要的社會(huì)意義和經(jīng)濟(jì)效益。
[000引對(duì)于制備鹽酸左西替利嗦過程中產(chǎn)生的異構(gòu)體，不論是在原料藥還是制劑中均需 要進(jìn)行嚴(yán)格控制。目前USP中收載有藥品鹽酸左西替利嗦，并且有異構(gòu)體檢測(cè)方法，但是USP 中鹽酸左西替利嗦異構(gòu)體檢測(cè)方法，出峰時(shí)間很晚，主峰出峰時(shí)間為35分鐘，一針樣品至少 需要60分鐘，并且對(duì)稱因子很大，理論踏板數(shù)不高?！竟_日】期為20041231的蛋白質(zhì)及纖維素 衍生物手性固定性分離鹽酸左西替利嗦對(duì)映體，張哲峰，藥學(xué)學(xué)報(bào)中限制的是蛋白質(zhì)及纖 維素衍生物手性固定相，而本方法采用的是W表面化學(xué)鍵合e-環(huán)糊精的硅膠為填料，具體 采用化TRON ES-CD，該色譜柱有優(yōu)良的分離性能和耐久性。申請(qǐng)?zhí)枮?01010595648.X的發(fā) 明專利公開了一種分析分離左西替利嗦及其光學(xué)異構(gòu)體的檢測(cè)方法，該方法采用CHIRAk AGP手性柱，為正相色譜法。在該專利中首先色譜柱填料為ai-酸糖蛋白，使用壽命不長(zhǎng)，很 容易壞。其次該專利方法報(bào)道為正相色譜法，正相色譜法味道重，毒性大。目前還沒有一種 采用e-環(huán)糊精的硅膠為填料，且能經(jīng)久耐用、環(huán)保、毒性小，并且還能快速分離鹽酸左西替 利嗦及其對(duì)映異構(gòu)體的公開方法報(bào)道。
[0009] 因此開發(fā)We-環(huán)糊精的硅膠為填料，經(jīng)久耐用、環(huán)保、毒性小且能快速分離鹽酸左 西替利嗦及其對(duì)映異構(gòu)體的分析方法，對(duì)于藥物分析人員健康及其產(chǎn)品的質(zhì)量控制和降解 途徑研究都是十分有意義的工作。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010] 有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種HPLC法分離測(cè)定鹽酸左西替利嗦及其對(duì)映 異構(gòu)體的方法，該方法為反相高效液相色譜法，可同時(shí)實(shí)現(xiàn)鹽酸左西替利嗦及其對(duì)映異構(gòu) 體的分離和檢測(cè)，且有優(yōu)良的分離性能和耐久性，顯著縮短了分析時(shí)間，拖尾因子和理論踏 板數(shù)均能達(dá)到非常好的效果。
[0011] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為：
[0012] -種HPLC(高效液相色譜)法分離測(cè)定鹽酸左西替利嗦及其對(duì)映異構(gòu)體的方法，所 述方法中采用的色譜柱是W表面化學(xué)鍵合e-環(huán)糊精的硅膠為填料，采用流動(dòng)相A和流動(dòng)相B 進(jìn)行洗脫，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè);所述的流動(dòng)相A為無機(jī)鹽緩沖體系，所述的流動(dòng)相B為有機(jī) 溶劑。
[0013] 所述鹽酸左西替利嗦結(jié)構(gòu)式為：
[001 ^
[0015]所述鹽酸左西替利嗦對(duì)映異構(gòu)體的化學(xué)名稱及結(jié)構(gòu)式如下：
[nrn 么 1
[0017]在用環(huán)糊精手性鍵合相拆分對(duì)映異構(gòu)體時(shí)，對(duì)樣品的結(jié)構(gòu)有特殊要求，一是樣品 分子必須部分能夠進(jìn)入環(huán)糊精內(nèi)腔，二是樣品分子手性中屯、上的極性基團(tuán)與環(huán)糊精腔中的 徑基發(fā)生締合作用。本發(fā)明所分離的化合物含有苯環(huán)，能與環(huán)糊精內(nèi)腔發(fā)生包容絡(luò)合作用， 能與環(huán)糊精腔口的徑基形成氨建，所W鹽酸左西替利嗦及其對(duì)映體在環(huán)糊精鍵合固定相上 能得到較好的分離。
[0018] 作為一種優(yōu)選，所述的色譜柱選擇的是ULTRON ES-CD，ULTR0N ES-CD:ES-CD手性 固定相為e-環(huán)糊精，ES-CD有優(yōu)良的分離性能和耐久性。ES-CD和柱對(duì)反相正相流動(dòng)相都可 W，應(yīng)用于疏水的環(huán)狀藥物、農(nóng)藥和有機(jī)化合物的手性分離。
[0019] 進(jìn)一步，所述無機(jī)鹽緩沖體系中無機(jī)鹽的濃度為0. (MmolA-0.06mol/L。
[0020] 作為一種優(yōu)選，所述無機(jī)鹽緩沖體系中無機(jī)鹽的濃度為〇.〇5mol/L。
[0021] 進(jìn)一步，所述無機(jī)鹽緩沖體系為六氣憐酸鐘的緩沖體系。
[0022] 影響手性分離的因素很多，在確定的固定相條件下，對(duì)確定的樣品來說，流動(dòng)相的 組成是影響分離的關(guān)鍵因素。六氣憐酸鐘濃度高了，與乙臘混合容易析出固體，濃度低了達(dá) 不到離子對(duì)試劑效果，故選擇濃度范圍為為0. (MmolA-0.06mol/L。
[0023] 進(jìn)一步，所述無機(jī)鹽緩沖體系pH值為2-4。
[0024] 流動(dòng)相的抑和離子強(qiáng)度對(duì)環(huán)糊精鍵合相的選擇性和效能有很大的影響，在流動(dòng)相 中加入鹽，形成緩沖溶液，對(duì)保留和效能的影響比對(duì)選擇性的影響大，由于緩沖劑與分析物 競(jìng)爭(zhēng)占領(lǐng)環(huán)糊精空腔，所W隨緩沖劑的強(qiáng)度增加，溶質(zhì)的保留降低，效能增加。流動(dòng)相pH的 變化對(duì)離解溶質(zhì)的有很大的影響。
[0025] 作為一種優(yōu)選，所述無機(jī)鹽緩沖體系pH值為3.0。
[0026] 進(jìn)一步，所述流動(dòng)相A與流動(dòng)相B的體積比60:40;所述有機(jī)溶劑包括乙臘。
[0027] 在環(huán)糊精鍵合相的手性分離反相模式中，流動(dòng)相中一般可W使用的有機(jī)溶劑有： 甲醇、乙醇、丙醇、乙臘、二甲基甲酯胺、二氧六環(huán)等，但使用最多的是甲醇和乙臘。通常在水 中環(huán)糊精包合有機(jī)分子的能力最強(qiáng)，隨著有機(jī)改性劑的加入，由于有機(jī)改性劑與溶質(zhì)分子 相互競(jìng)爭(zhēng)占據(jù)環(huán)糊精內(nèi)腔，使包合能力降低，甲醇是醇類中最弱的頂替劑，乙臘的頂替能力 要比甲醇和乙醇強(qiáng)。選擇不同的有機(jī)溶劑，可W改善對(duì)映體分離的選擇性。
[0028] 進(jìn)一步，所述流動(dòng)相流速為0.3-0.7ml/min，所述色譜柱柱箱溫度為20-30°C。
[0029] 溶質(zhì)對(duì)環(huán)糊精的結(jié)合常數(shù)受溫度的影響很大，在低溫下結(jié)合常數(shù)增大，但質(zhì)傳遞 會(huì)變差，所W降低柱溫可使環(huán)糊精鍵合相的選擇性增大，同時(shí)也可能會(huì)使分離度降低，但增 加柱溫對(duì)強(qiáng)保留的溶質(zhì)的分離會(huì)有所改善，所W經(jīng)過試驗(yàn)驗(yàn)證，色譜柱柱箱溫度范圍選擇 為 20-30 °C。
[0030] 進(jìn)一步，所述色譜柱的規(guī)格為150 X 6.0mm，5皿。
[0031] 對(duì)此規(guī)格的化TRON ES-CD分析柱，最佳的流動(dòng)相流速范圍應(yīng)該為0.3-0.7ml/min， 在高流速下(0.7-2.Oml/min)由于質(zhì)傳遞效應(yīng)引起的峰擴(kuò)散會(huì)導(dǎo)致降低柱效和分離度。
[0032] 進(jìn)一步，所述檢測(cè)器的檢測(cè)波長(zhǎng)為220-240nm。
[0033] 進(jìn)一步，所述HPLC法分離測(cè)定鹽酸左西替利嗦及其對(duì)映異構(gòu)體的方法，具體包括 W下步驟：
[0034] 1)分別取鹽酸左西替利嗦及其對(duì)映異構(gòu)體的對(duì)照品，用稀釋劑溶解制成待測(cè)樣品 及其對(duì)映異構(gòu)體的對(duì)照品溶液，分別取待測(cè)樣品鹽酸左西替利嗦及其對(duì)映異構(gòu)體的對(duì)照品 溶液進(jìn)樣，進(jìn)行高效液相色譜分析，確定鹽酸左西替利嗦及其對(duì)映異構(gòu)體的保留時(shí)間；
[0035] 2)取鹽酸左西替利嗦供試樣品加稀釋劑制成供試品溶液，再取稀釋劑作為空白溶 液，分別取供試品溶液及空白溶液進(jìn)樣，進(jìn)行高效液相色譜分析，記錄色譜圖，完成鹽酸左 西替利嗦及其對(duì)映異構(gòu)體的分離測(cè)定。
[0036] 進(jìn)一步，步驟1)所述稀釋劑為乙臘或乙臘的水溶液溶解樣品，所乙臘的水溶液中 乙臘和水的體積比為40:60。
[0037] 本發(fā)明所述的方法，作為一種優(yōu)選，具體可按照W下方法實(shí)現(xiàn)：
[003引（1)取鹽酸左西替利嗦適量，用40%乙臘水溶液化臘V:水V = 40:60)溶解樣品，配 制成每1ml含鹽酸左西替利嗦0.1-0.5mg的樣品溶液；
[0039] (2)選用型號(hào)為島津LC-20AT的色譜儀，色譜柱型號(hào)為ULTRON ES-CD(150X 6.0mm)，流動(dòng)相A的配制：稱取六氣憐酸鐘9.25g(0.05mol/L六氣憐酸鐘)于1000 ml容量瓶 中，加水溶解并稀釋至刻度，用憐酸調(diào)節(jié)pH值至3.0 ±0.1;流動(dòng)相B為乙臘;流動(dòng)相A和流動(dòng) 相B的比例為60 :40，取步驟（1)的樣品溶液1 Oiil注入液相色譜儀中，設(shè)置流動(dòng)相流速為 0.5ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為231皿，色譜柱柱箱溫度為25°C，完成鹽酸左西替利嗦及其對(duì)映異構(gòu) 體的分離及測(cè)定。
[0040] 本發(fā)明的目的還在于提供一種固定相及流動(dòng)相在分離和/或測(cè)定鹽酸左西替利嗦 及其對(duì)映異構(gòu)體的色譜法中的應(yīng)用，所述固定相為表面化學(xué)鍵合e-環(huán)糊精的硅膠，所述流 動(dòng)相為六氣憐酸鐘的緩沖體系和有機(jī)溶劑，所述六氣憐酸鐘溶液的濃度為0.04111〇1幾- 0.06molA;所述六氣憐酸鐘溶液的pH值為2-4;所述有機(jī)溶劑為乙臘。
[0041] 本發(fā)明的有益效果在于：
[0042] 1)本發(fā)明的一種HPLC法分離測(cè)定鹽酸左西替利嗦及其對(duì)映異構(gòu)體的方法，采用反 相高效液相色譜法對(duì)鹽酸左西替利嗦及其對(duì)映異構(gòu)體進(jìn)行分離和檢測(cè)，可在25分鐘內(nèi)將鹽 酸左西替利嗦及其對(duì)映異構(gòu)體完全分離并進(jìn)行檢測(cè)，顯著縮短了分離時(shí)間，且有優(yōu)良的分 離性能和耐久性。
[0043] 2)本發(fā)明We-環(huán)糊精的硅膠為填料，該填料經(jīng)久耐用、環(huán)保、毒性小且能快速分離 鹽酸左西替利嗦及其對(duì)映異構(gòu)體的分析方法，對(duì)于藥物分析人員健康及其產(chǎn)品的質(zhì)量控制 和降解途徑研究都是十分有意義的工作。
[0044] 3)本發(fā)明解決了鹽酸左西替利嗦及其對(duì)映異構(gòu)體的分離測(cè)定問題，該方法分離度 好，專屬性強(qiáng)，靈敏度高;且操作簡(jiǎn)單，具有簡(jiǎn)便、快速的優(yōu)點(diǎn)，從而確保了鹽酸左西替利嗦 及其制劑的質(zhì)量可控，并最終確定產(chǎn)品的安全有效，對(duì)于鹽酸左西替利嗦的質(zhì)量控制有重 要意義。
【附圖說明】
[0045] 圖1為空白溶劑的高效液相色譜圖。
[0046] 圖2為鹽酸左西替利嗦及其對(duì)映異構(gòu)體的混合溶液高效液相色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0047] W下將參照附圖，對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)描述。優(yōu)選實(shí)施例中未注明具 體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件，所舉實(shí)施例是為了更好地對(duì)本發(fā)明的內(nèi)容進(jìn)行說 明，但并不是本發(fā)明的內(nèi)容僅限于所舉實(shí)施例。所W熟悉本領(lǐng)域的技術(shù)人員根據(jù)上述發(fā)明 內(nèi)容對(duì)實(shí)施方案進(jìn)行非本質(zhì)的改進(jìn)和調(diào)整，仍屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[004引 W下實(shí)施例中，采用的儀器及色譜條件如下：
[0049]高效液相色譜儀:島津LC-20AT [0化0]色譜柱:ULTR0N ES-CD(150X6.0mm)
[0化1] 流動(dòng)相：
[0052]流動(dòng)相A:無機(jī)鹽緩沖體系緩沖鹽:稱取六氣憐酸鐘9.25g(0.05mol/L六氣憐酸鐘） 于1000 ml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，用憐酸調(diào)節(jié)pH值至3.0±0.1;
[0化3] 流動(dòng)相B:乙臘
[0054] 流動(dòng)相A和流動(dòng)相B的比例為60:40
[005日]檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)：231nm
[0056]流動(dòng)相流速:0.5ml/min
[0化7] 色譜柱柱箱柱溫:25°C
[0化引進(jìn)樣量：1化1
[0化9] 稀釋劑(溶解對(duì)照品和待測(cè)樣品的溶劑）：40 %乙臘(乙臘V:水V = 40:60)。
[0060] 實(shí)施例1分離測(cè)定鹽酸左西替利嗦及其對(duì)映異構(gòu)體
[0061] 對(duì)映異構(gòu)體溶液的配制：分別取對(duì)映異構(gòu)體對(duì)照品約25mg，置100mL量瓶中，加稀 釋劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)映異構(gòu)體膽備溶液。精密移取上述溶液0.5ml，置 100mL量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)映異構(gòu)體濃度為1.25μg/ml的對(duì)照品液。
[0062] 混合溶液的配制：稱取鹽酸左西替利嗦約25mg，置100mL量瓶中，精密移取對(duì)映異 構(gòu)體膽備溶液0.5ml，置上述同一量瓶中，加稀釋劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。
[0063] 分別取稀釋劑及混合溶液按上述色譜條件進(jìn)樣，記錄色譜圖，測(cè)定結(jié)果見表1。結(jié) 果見圖1、圖2。
[0064] 表1試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果
[00 化]
[0066] 結(jié)論:空白稀釋劑不干擾樣品測(cè)定；主峰與對(duì)映異構(gòu)體峰間分離度大于1.5;上述 試驗(yàn)證明鹽酸左西替利嗦與對(duì)映異構(gòu)體峰分離良好，專屬性強(qiáng)。
[0067] 對(duì)比實(shí)施例1
[0068] 在該對(duì)比實(shí)施例中，除了采用的流動(dòng)相A不同，其余條件均與實(shí)施例1相同。
[0069] 流動(dòng)相A:水。
[0070] 取混合溶液按上述色譜條件進(jìn)樣，記錄色譜圖，測(cè)定結(jié)果見表2。
[0071] 表2試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果
[0072]
[0073] 結(jié)論:在與上述實(shí)施例其他條件相同僅為流動(dòng)相A不同的分離試驗(yàn)中，鹽酸左西替 利嗦與對(duì)映異構(gòu)體分離度小于1.5，并且主峰拖尾因子大于2.0，不能滿足鹽酸左西替利嗦 與對(duì)映異構(gòu)體進(jìn)行有效分離。
[0074] 對(duì)比實(shí)施例2
[0075] 在該對(duì)比實(shí)施例中，除了采用的流動(dòng)相A不同，其余條件均與實(shí)施例1相同。
[0076] 流動(dòng)相A:無機(jī)鹽緩沖體系緩沖鹽:稱取憐酸二氨鐘6.8g(0.05mol/L憐酸二氨鐘） 于1000 ml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，用憐酸調(diào)節(jié)pH值至3.0±0.1。
[0077] 取混合溶液按上述色譜條件進(jìn)樣，記錄色譜圖，測(cè)定結(jié)果見表3。
[0078] 表3試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果
[0079]
[0080] 結(jié)論:在與上述實(shí)施例其他條件相同僅為流動(dòng)相A不同的分離試驗(yàn)中，鹽酸左西替 利嗦與對(duì)映異構(gòu)體分離度小于1.5，并且主峰拖尾因子大于2.0，不能達(dá)到鹽酸左西替利嗦 與對(duì)映異構(gòu)體有效分離的要求。
[0081 ]實(shí)施例2色譜系統(tǒng)對(duì)鹽酸左西替利嗦和對(duì)映異構(gòu)體的檢測(cè)限、定量限基礎(chǔ)研究
[0082] 定量限溶液:精密稱取鹽酸左西替利嗦與對(duì)映異構(gòu)體照品，配成一定濃度的溶液， 并逐級(jí)稀釋得定量限溶液，如表2所示。
[0083] 檢測(cè)限溶液:精密移取定量限溶液7.Oml,置20ml量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖 勻，即得檢測(cè)限溶液，如表3所示。
[0084] 測(cè)定方法：
[0085] 取上述定量限溶液連續(xù)進(jìn)樣3次，檢測(cè)限溶液連續(xù)進(jìn)樣2次，計(jì)算主峰峰高與噪聲 的比值(信噪比）。記錄色譜圖，試驗(yàn)結(jié)果見表4和表5。
[0088] 表4定量限測(cè)定結(jié)果[0089]
[0086]
[0087]
[0090] 表5檢測(cè)限測(cè)定結(jié)果
[0091]
[0092] 結(jié)論:從上表試驗(yàn)數(shù)據(jù)可知，本色譜系統(tǒng)下，鹽酸左西替利嗦與對(duì)映異構(gòu)體的檢測(cè) 限、定量限分別符合S/N=3(10):l的要求。
[0093] 最后說明的是，W上實(shí)施例僅用W說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管參照較 佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可W對(duì)本發(fā)明的技 術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的宗旨和范圍，其均應(yīng)涵蓋在本 發(fā)明的權(quán)利要求范圍當(dāng)中。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. HPLC法分離測(cè)定鹽酸左西替利嗪及其對(duì)映異構(gòu)體的方法，其特征在于，所述方法中 采用的色譜柱是以表面化學(xué)鍵合β-環(huán)糊精的硅膠為填料，采用流動(dòng)相A和流動(dòng)相B進(jìn)行洗 脫，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè);所述的流動(dòng)相A為無機(jī)鹽緩沖體系，所述的流動(dòng)相B為有機(jī)溶劑。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述無機(jī)鹽緩沖體系中無機(jī)鹽的濃度為 O·04mol/L-〇·06mol/L。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述無機(jī)鹽緩沖體系為六氟磷酸鉀的緩沖 體系。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述無機(jī)鹽緩沖體系pH值為2-4。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述流動(dòng)相A與流動(dòng)相B的體積比60:40;所 述有機(jī)溶劑包括乙腈。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述流動(dòng)相流速為0.3-0.7ml/min，所述色 譜柱柱箱溫度為20-30 °C。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述色譜柱的規(guī)格為150 X 6.0mm，5μπι。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述檢測(cè)器的檢測(cè)波長(zhǎng)為220-240nm。9. 根據(jù)權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，具體包括以下步驟： 1) 分別取鹽酸左西替利嗪及其對(duì)映異構(gòu)體的對(duì)照品，用稀釋劑溶解制成待測(cè)樣品及其 對(duì)映異構(gòu)體的對(duì)照品溶液，分別取待測(cè)樣品鹽酸左西替利嗪及其對(duì)映異構(gòu)體的對(duì)照品溶液 進(jìn)樣，進(jìn)行高效液相色譜分析，確定鹽酸左西替利嗪及其對(duì)映異構(gòu)體的保留時(shí)間； 2) 取鹽酸左西替利嗪供試樣品加稀釋劑制成供試品溶液，再取稀釋劑作為空白溶液， 分別取供試品溶液及空白溶液進(jìn)樣，進(jìn)行高效液相色譜分析，記錄色譜圖，完成鹽酸左西替 利嗪及其對(duì)映異構(gòu)體的分離測(cè)定。10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，步驟1)所述稀釋劑為乙腈或乙腈的水溶 液溶解樣品，所乙腈的水溶液中乙腈和水的體積比為40:60。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK105954419SQ201610382247
【公開日】2016年9月21日
【申請(qǐng)日】2016年6月1日
【發(fā)明人】林曉兵, 張波
【申請(qǐng)人】重慶華邦勝凱制藥有限公司