專利名稱：液滴流動注射裝置及其定量分析方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于借助于測定材料的化學(xué)或物理性質(zhì)來測試或分析材料技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及到材料在其中經(jīng)受化學(xué)反應(yīng)的裝置，測試反應(yīng)的進行或結(jié)果的化學(xué)發(fā)光。
背景技術(shù)：
自1975年Ruzicka與Hansen首次提出了流動注射分析(Flow Injection Analysis，F(xiàn)IA)技術(shù)后，流動注射技術(shù)與紫外、熒光、色譜、原子光譜、質(zhì)譜等檢測手段聯(lián)用，在分析化學(xué)領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。流動注射技術(shù)所具有的快速、簡便、低耗等特點，也正是所有分析方法所追求的目標(biāo)。在結(jié)合流動注射技術(shù)的分析方法中，發(fā)光分析法顯示出了分析速度快、儀器設(shè)備簡單、樣品消耗量少、易于實現(xiàn)自動化等優(yōu)點，為無機物和有機物的微量和超微量分析提供了一個高靈敏度的檢測手段，已被廣泛地應(yīng)用于化學(xué)分析、免疫分析、巖礦分析、食品檢驗、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。
在傳統(tǒng)的流動注射分析方法中，由于通常使用載流攜帶樣品區(qū)帶并與反應(yīng)試劑混合，在樣品區(qū)帶載運過程和與反應(yīng)試劑的混合過程中，由于擴散會導(dǎo)致樣品的稀釋，使分析方法的靈敏度受到影響。當(dāng)使用采樣環(huán)控制進樣體積時，每次進樣前都需要大量的樣品溶液洗滌采樣環(huán)管道，增大了試劑或樣品的消耗量。在傳統(tǒng)的流動注射分析過程中，試劑通常處于連續(xù)流動的狀態(tài)下，在兩次進樣間隙里的試劑消耗也是非常大的。當(dāng)流動注射分析的檢測對象是樣品與試劑的反應(yīng)產(chǎn)物時，既要求樣品與試劑溶液有充分的混合，同時也要求樣品與試劑的混合達到最佳混合比；在傳統(tǒng)的流動注射中，由于流體的層流狀態(tài)在管道中處于主導(dǎo)地位，為實現(xiàn)樣品與試劑溶液的充分混合，需要通過編織反應(yīng)器等手段來獲得湍流；在順序注射分析中則是通過溶液的往復(fù)運動來實現(xiàn)樣品和試劑溶液的充分混合；但這些手段會帶來反應(yīng)產(chǎn)物的過度稀釋，使樣品-試劑的最佳混合比難以得到保證。同樣，實現(xiàn)以上樣品和試劑的充分混合過程需要一定的時間，分析方法的分析頻率也受到了很大的影響。
在已公開的有關(guān)液滴分析儀器，只介紹了單個液滴的體積測量和單個液滴中熒光組分的分析，并未涉及到兩個或兩個以上的液滴聚并和液滴聚并反應(yīng)過程。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的一個技術(shù)問題在于克服上述流動注射裝置的缺點，提供一種設(shè)計合理、流路簡單、操作方便、自動進樣的液滴流動注射裝置。
本發(fā)明所要解決的另一個技術(shù)問題在于提供一種分析頻率高、分析速度快、試樣消耗少、重現(xiàn)性好的液滴流動注射定量分析方法。
解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是它包括恒流泵、注射泵、蠕動泵、負(fù)高壓控制器、化學(xué)發(fā)光儀、計算機、恒電位儀，恒流泵通過樣品管和樣品進管與化學(xué)發(fā)光儀相聯(lián)通、通過試劑管和試劑進管與化學(xué)發(fā)光儀相聯(lián)通，注射泵通過試劑管和試劑進管與化學(xué)發(fā)光儀相聯(lián)通，經(jīng)蠕動泵的廢液管與化學(xué)發(fā)光儀相聯(lián)通，負(fù)高壓控制器和電位控制器通過導(dǎo)線與化學(xué)發(fā)光儀相連接，負(fù)高壓控制器通過電纜與計算機相連接。
本發(fā)明的化學(xué)發(fā)光儀為化學(xué)發(fā)光儀殼體與暗盒上加工有相互聯(lián)通的光窗，在化學(xué)發(fā)光儀殼體內(nèi)設(shè)置有發(fā)光反應(yīng)池，樣品進管和試劑進管設(shè)置在發(fā)光反應(yīng)池的上表面，在發(fā)光反應(yīng)池內(nèi)樣品進管和試劑進管的正下方設(shè)置有電極，穿出化學(xué)發(fā)光儀殼體外的廢液管與發(fā)光反應(yīng)池內(nèi)相聯(lián)通，在暗盒內(nèi)設(shè)置有通過導(dǎo)線與負(fù)高壓控制器相連接的光電傳感器。
本發(fā)明的光電傳感器為光電倍增管。本發(fā)明的樣品進管和試劑進管是內(nèi)徑為325～500μm的石英毛細(xì)管。本發(fā)明的電極為鉑絲電極或鉑片電極。
本發(fā)明的樣品進管的管口與試劑進管的管口之間的距離為0.5～3.0mm，電極與樣品進管的管口和試劑進管的管口之間的距離為0.2～2mm。
本發(fā)明的樣品進管與試劑進管的夾角為30°～60°，樣品進管和試劑進管與發(fā)光反應(yīng)池上表面的夾角為10°～30°。
本發(fā)明的發(fā)光反應(yīng)池為透明的有機或無機材料發(fā)光反應(yīng)池。
采用液滴流動注射裝置的定量分析方法包括下述步驟1、配制試劑(1)按常規(guī)方法配制0.1mol/L氫氧化鈉溶液、1.0mol/L的鹽酸溶液、0.05mol/L含0.9％NaCl的Na2CO3-HCl緩沖溶液、0.05mol/L的硫酸溶液作為pH值控制試劑。
(2)按常規(guī)方法配制1.0×10-2mol/L魯米諾貯備液作為發(fā)光試劑。
(3)按常規(guī)方法配制1.0×10-2mol/L鐵氰化鉀溶液、1.0mol/L過氧化氫溶液、25g/L過硫酸鉀溶液、0.28mol/L鉬酸銨溶液、1.2×10-2mol/L偏釩酸銨溶液作為氧化劑。
(4)按常規(guī)方法配制1.0×10-2mol/L的乙二胺四乙酸二鈉溶液。
(5)按常規(guī)方法配制待測的5.0×10-3mol/L雙嘧達莫標(biāo)準(zhǔn)溶液、1.0×10-4mol/L的牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液、1.0×10-2mol/L的Cr3+標(biāo)準(zhǔn)溶液、1.0×10-2mol/L的三硝基甲苯標(biāo)準(zhǔn)溶液、5.0×10-3mol/L的敵敵畏標(biāo)準(zhǔn)溶液、5.0×10-3mol/L的敵百蟲標(biāo)準(zhǔn)溶液和5.0×10-3mol/L的氧化樂果標(biāo)準(zhǔn)溶液。
2、制備待測樣品溶液每種待測樣品配制前，應(yīng)先使用標(biāo)準(zhǔn)溶液進行檢測條件優(yōu)選實驗，確定以下實驗參數(shù)如氫氧化鈉濃度、或鹽酸濃度、或含NaCl的Na2CO3-HCl緩沖濃度、或硫酸濃度，發(fā)光試劑濃度，根據(jù)上述優(yōu)選參數(shù)配制樣品溶液。
3、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線打開化學(xué)發(fā)光儀電源開關(guān)，調(diào)節(jié)光電倍增管的負(fù)高壓為500～900v，增益為1～16，打開恒流泵電源開關(guān)，調(diào)節(jié)樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液與試劑溶液的流速比為0.2～1.0，樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液由恒流泵經(jīng)樣品管輸送到樣品進管口形成液滴，氧化劑溶液由恒流泵經(jīng)試劑管輸送到試劑進管口形成液滴，兩個液滴逐漸增大，聚并成一個液滴，發(fā)生化學(xué)發(fā)光反應(yīng)或由恒電位儀提供電壓在電極表面發(fā)生電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，聚并的液滴在重力作用下滴落到發(fā)光池的底部經(jīng)廢液管由蠕動泵泵出，光電倍增管將接收到的光信號轉(zhuǎn)換成電信號進行放大輸出到負(fù)高壓控制器的A/D轉(zhuǎn)換器，A/D轉(zhuǎn)換器鍵輸入的電信號轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號輸出到計算機，以樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，化學(xué)發(fā)光強度為縱坐標(biāo)，用計算機繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到下述的線性回歸方程ΔICL＝kC(mol/L)+b式中ΔICL為化學(xué)發(fā)光強度，C為被檢測物質(zhì)的濃度，k、b為常數(shù)由實驗確定，計算線性相關(guān)系數(shù)和方法的檢出限；以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，電化學(xué)發(fā)光強度為縱坐標(biāo)，用計算機6繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并按以下方程進行線性回歸ΔIECL＝kC(mol/L)+b式中ΔIECL為電化學(xué)發(fā)光強度，C為被檢測物質(zhì)的濃度，k、b為常數(shù)由實驗確定，計算線性相關(guān)系數(shù)和方法的檢出限。
4、檢測樣品將標(biāo)準(zhǔn)溶液替換為樣品溶液，按照標(biāo)準(zhǔn)溶液的測定步驟檢測樣品溶液的化學(xué)發(fā)光或電化學(xué)發(fā)光強度，光電倍增管將接收到的光信號進行放大轉(zhuǎn)換成電信號輸出到負(fù)高壓控制器的A/D轉(zhuǎn)換器，A/D轉(zhuǎn)換器鍵輸入的電信號轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號輸出到計算機，計算機將輸入的信號進行數(shù)據(jù)處理按照線性回歸方程ΔICL＝kC(mol/L)+b式中ΔICL為電化學(xué)發(fā)光強度，k、b為常數(shù)由實驗確定，計算出樣品中被測物質(zhì)的含量；將測得的電化學(xué)發(fā)光強度帶入線性回歸方程ΔIECL＝kC(mol/L)+b，式中ΔIECL為電化學(xué)發(fā)光強度，k、b為常數(shù)由實驗確定，計算出樣品中被測物質(zhì)的含量。
本發(fā)明液滴流動注射裝置采用液滴聚并的表面張力，實現(xiàn)樣品液滴與試劑液滴混合，通過調(diào)節(jié)樣品溶液與試劑溶液的流速，實現(xiàn)了樣品溶液與試劑溶液不同比例的混合進行化學(xué)發(fā)光反應(yīng)或電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，采用無載流注射樣品和試劑，使所有樣品和試劑都被用于分析，節(jié)約了樣品和試劑消耗量，減少了廢液的生成量，提高了分析頻率，簡化了儀器的結(jié)構(gòu)，無需使用進樣閥可實現(xiàn)定量進樣、自動進樣，降低了儀器成本。本發(fā)明液滴流動注射裝置與現(xiàn)有的流動注射裝置相比，具有流路簡單、操作方便、自動進樣、生產(chǎn)成本低等優(yōu)點。本發(fā)明定量分析方法與現(xiàn)有的流動注射分析方法比較，無需液體載流，采用液滴聚并實現(xiàn)樣品溶液與試劑溶液混合進行化學(xué)發(fā)光反應(yīng)或電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。本發(fā)明定量分析方法具有分析頻率高、分析速度快、試樣消耗少、重現(xiàn)性好、靈敏度高等優(yōu)點。本發(fā)明液滴流動注射裝置及其定量分析方法可用于對無機離子、有機分子、藥物等的流動注射分析。


圖1是本發(fā)明液滴流動注射裝置一個實施例的結(jié)構(gòu)示意圖。
圖2是圖1中化學(xué)發(fā)光儀5的結(jié)構(gòu)示意圖。
圖3是圖2中樣品進管5-6和試劑進管5-7在發(fā)光反應(yīng)池5-8上的聯(lián)接示意圖。
圖4是實施例6的化學(xué)試劑流路圖。
具體實施例方式
下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明進一步詳細(xì)說明，但本發(fā)明不限于這些實施例。
實施例1在圖1中，本實施例的液滴流動注射裝置由負(fù)高壓控制器1、恒流泵2、注射泵4、蠕動泵3、化學(xué)發(fā)光儀5、計算機6、恒電位儀7、廢液管5-10聯(lián)接構(gòu)成。
負(fù)高壓控制器1和恒電位儀7通過導(dǎo)線與化學(xué)發(fā)光儀5相連接，經(jīng)過恒流泵2導(dǎo)管與化學(xué)發(fā)光儀5相聯(lián)通，經(jīng)過注射泵4的導(dǎo)管與化學(xué)發(fā)光儀5相聯(lián)通，化學(xué)發(fā)光儀5通過導(dǎo)線與負(fù)高壓控制器1相連接，負(fù)高壓控制器1內(nèi)裝有A/D轉(zhuǎn)換器，A/D轉(zhuǎn)換器通過電纜與計算機6相連接。恒流泵2、注射泵4、蠕動泵3、負(fù)高壓控制器1、恒電位儀7、計算機6為市場上銷售的商品。
在圖2、3中，本實施例的化學(xué)發(fā)光儀5由暗盒5-1、光電倍增管5-2、化學(xué)發(fā)光儀殼體5-3、樣品管5-4、試劑管5-5、樣品進管5-6、試劑進管5-7、發(fā)光反應(yīng)池5-8、鉑絲電極5-9、廢液管5-10聯(lián)接構(gòu)成?；瘜W(xué)發(fā)光儀殼體5-3與暗盒5-1用螺紋緊固聯(lián)接件固定聯(lián)接，化學(xué)發(fā)光儀殼體5-3的右側(cè)和暗盒5-1的左側(cè)加工有光窗，化學(xué)發(fā)光儀殼體5-3內(nèi)的光經(jīng)光窗可進入到暗盒5-1內(nèi)。在化學(xué)發(fā)光儀殼體5-3內(nèi)安裝有發(fā)光反應(yīng)池5-8。本實施例的發(fā)光反應(yīng)池5-8是由聚甲基丙烯酸甲酯材料制成，側(cè)面開有反應(yīng)池光窗，反應(yīng)所產(chǎn)生的光經(jīng)過反應(yīng)池光窗、光窗可進入到暗盒5-1內(nèi)，發(fā)光反應(yīng)池5-8的中心位置加工有直徑為8mm的中心孔為反應(yīng)池，在發(fā)光反應(yīng)池5-8的上表面用環(huán)氧樹脂固定粘接有樣品進管5-6和試劑進管5-7，樣品進管5-6和試劑進管5-7也可采用丙烯酸樹脂或甲基丙烯酸甲酯粘接固定，樣品進管5-6與樣品管5-4相聯(lián)通并經(jīng)恒流泵2，試劑進管5-7與試劑管5-5相聯(lián)通并經(jīng)恒流泵2，樣品進管5-6和試劑進管5-7是內(nèi)徑為400μm的石英毛細(xì)管，試劑進管5-7的夾角為30°，樣品進管5-6與試劑進管5-7的管口距離為1.5mm，樣品進管5-6與發(fā)光反應(yīng)池5-8上表面的夾角為20°。在反應(yīng)池的側(cè)壁上樣品進管5-6與試劑進管5-7的管口正下方1mm處固定安裝有電極，本實施例的電極為鉑絲電極5-9，鉑絲電極5-9通過導(dǎo)線與恒電位儀7相連接，鉑絲電極5-9用于進行電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。在反應(yīng)池底部安裝有與反應(yīng)池相聯(lián)通的廢液管5-10，廢液管5-10穿出化學(xué)發(fā)光儀殼體5-3外，經(jīng)蠕動泵3將發(fā)光反應(yīng)池5-8內(nèi)化學(xué)反應(yīng)后的廢液排出到化學(xué)發(fā)光儀殼體5-3外。在暗盒5-1內(nèi)安裝有光電倍增管5-2，光電倍增管5-2為光電傳感器的一個實施例。光電倍增管5-2通過導(dǎo)線與負(fù)高壓控制器1相連接，由負(fù)高壓控制器1控制光電倍增管5-2的工作電壓。樣品溶液由恒流泵2加壓經(jīng)樣品管5-4、樣品進管5-6，從樣品進管5-6的管口流出形成液滴，氧化劑溶液由恒流泵2加壓經(jīng)試劑管5-5、試劑進管5-7，從試劑進管5-7的管口流出形成液滴，樣品溶液液滴和氧化劑溶液液滴增大到一定尺寸時，樣品溶液液滴與氧化劑溶液液滴聚并形成一個液滴，在液滴內(nèi)發(fā)生化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，光電倍增管5-2將接收到的光信號轉(zhuǎn)換成電信號進行放大輸出到A/D轉(zhuǎn)換器，A/D將輸入的電信號轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號輸出到計算機6，計算機6對輸入的電信號進行數(shù)據(jù)處理計算出所測物質(zhì)的含量。聚并的液滴大到一定程度后掉落，由蠕動泵3加壓經(jīng)過廢液管5-10排出到廢液瓶中，在樣品進管5-6的管口重新形成新的樣品溶液液滴，試劑進管5-7的管口重新形成新的氧化劑溶液液滴，重復(fù)以上的過程，得到重現(xiàn)的發(fā)光信號。這種液滴流動注射裝置，實現(xiàn)了樣品溶液與試劑溶液不同比例的混合進行化學(xué)發(fā)光反應(yīng)或電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，采用無載流注射樣品和試劑，使所有樣品和試劑都被用于分析，節(jié)約了樣品和試劑消耗量，減少了廢液的生成量，提高了分析頻率，簡化了儀器的結(jié)構(gòu)，無需使用進樣閥可實現(xiàn)定量進樣、自動進樣，降低了儀器成本。本發(fā)明液滴流動注射裝置與現(xiàn)有的流動注射裝置相比，具有流路簡單、操作方便、自動進樣、生產(chǎn)成本低等優(yōu)點。
采用本實施例的液滴流動注射裝置及其定量分析方法對魯米諾的檢測步驟如下1、配制試劑(1)配制氫氧化鈉pH值控制試劑按常規(guī)配制方法配制0.1mol/L的氫氧化鈉溶液和0.05mol/L硫酸溶液作為pH值控制試劑。
(2)配制魯米諾發(fā)光試劑準(zhǔn)確稱取1.7716g魯米諾，用0.1mol/L氫氧化鈉溶液配制成1升濃度為1.0×10-2mol/L魯米諾發(fā)光試劑，貯于棕色瓶中，置于避光處，兩周后使用。
(3)配制鐵氰化鉀氧化劑準(zhǔn)確稱取3.2900g鐵氰化鉀，按常規(guī)配制方法配制1.0×10-2mol/L的鐵氰化鉀貯備液，避光保存，使用時配制成5.0×10-4mol/L鐵氰化鉀溶液。
(4)配制魯米諾標(biāo)準(zhǔn)溶液將(2)配制的魯米諾溶液用0.1mol/L的氫氧化鈉溶液配制1.0×10-7mol/L、3.0×10-7mol/L、5.0×10-7mol/L、8.0×10-7mol/L、1.0×10-6mol/L、2.0×10-6mol/L、4.0×10-6mol/L魯米諾標(biāo)準(zhǔn)溶液。
2、制備待測的魯米諾樣品溶液用0.1mol/L的氫氧化鈉溶液和0.200克待測魯米諾樣品配制成魯米諾樣品溶液100ml，用0.1mol/L的氫氧化鈉溶液將所配制的樣品溶液稀釋到1.0×10-7mol/L～4.0×10-6mol/L范圍內(nèi)。
3、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線打開化學(xué)發(fā)光儀5電源開關(guān)，調(diào)節(jié)光電倍增管5-2的負(fù)高壓為500v，增益為4，打開恒流泵2電源開關(guān)，調(diào)節(jié)魯米諾標(biāo)準(zhǔn)溶液與鐵氰化鉀溶液的流速比為0.6，魯米諾標(biāo)準(zhǔn)溶液由恒流泵2經(jīng)樣品管5-4輸送到樣品進管5-6口形成液滴，鐵氰化鉀溶液由恒流泵2經(jīng)試劑管5-5輸送到試劑進管5-7口形成液滴，兩個液滴逐漸增大，聚并成一個液滴，魯米諾標(biāo)準(zhǔn)溶液與鐵氰化鉀溶液發(fā)生化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，聚并的液滴在重力作用下滴落到發(fā)光池的底部經(jīng)廢液管5-10由蠕動泵3泵出，光電倍增管5-2將接收到的光信號轉(zhuǎn)換成電信號進行放大輸出到負(fù)高壓控制器1的A/D轉(zhuǎn)換器，A/D轉(zhuǎn)換器鍵輸入的電信號轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號輸出到計算機6，以魯米諾標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，化學(xué)發(fā)光強度為縱坐標(biāo)，用計算機6繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到下述的線性回歸方程ΔICL＝140.19Cluminol(10-6moll-1)-134.07線性相關(guān)系數(shù)r＝0.9994式中ΔICL為相對化學(xué)發(fā)光強度，Cluminol為魯米諾的濃度。對3.0×10-7mol/L的魯米諾標(biāo)準(zhǔn)溶液進行11次測定，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.7％。方法的檢出限(3σ)為3.2×10-8mol/L。
4、檢測魯米諾樣品將魯米諾標(biāo)準(zhǔn)溶液替換成魯米諾樣品溶液，按照魯米諾標(biāo)準(zhǔn)溶液的測定方法檢測魯米諾樣品溶液的發(fā)光強度，化學(xué)發(fā)光儀5將接收到的光信號進行放大轉(zhuǎn)換成電信號輸出到計算機6，計算機6將輸入的電信號進行數(shù)據(jù)處理按照線性回歸方程ΔICL＝140.19Cluminol(10-6moll-1)-134.07式中ΔICL為化學(xué)發(fā)光強度，Cluminol為魯米諾的濃度，計算出魯米諾樣品中魯米諾的含量為98％。
實施例2在本實施例中，樣品進管5-6和試劑進管5-7是內(nèi)徑為325μm的石英毛細(xì)管，電極為鉑片電極，樣品進管5-6的管口與試劑進管5-7的管口之間的距離為0.5mm，樣品進管5-6與試劑進管5-7的夾角為60°，樣品進管5-6和試劑進管5-7與發(fā)光反應(yīng)池5-8上表面的夾角為10°，發(fā)光反應(yīng)池5-8為透明的硅玻璃材料發(fā)光反應(yīng)池5-8。其它零部件以及零部件的聯(lián)接關(guān)系與實施例1相同。
實施例3在本實施例中，樣品進管5-6和試劑進管5-7是內(nèi)徑為500μm的石英毛細(xì)管，電極為鉑片電極，樣品進管5-6的管口與試劑進管5-7的管口之間的距離為2.0mm，樣品進管5-6與試劑進管5-7的夾角為45°，樣品進管5-6和試劑進管5-7與發(fā)光反應(yīng)池5-8上表面的夾角為30°，發(fā)光反應(yīng)池5-8為透明的硅玻璃材料發(fā)光反應(yīng)池5-8。其它零部件以及零部件的聯(lián)接關(guān)系與實施例1相同。
實施例4采用本發(fā)明實施例1液滴流動注射裝置及其定量分析方法對藥物雙嘧達莫的檢測步驟如下1、配制試劑(1)配制氫氧化鈉pH值控制試劑與實施例1相同。
(2)配制魯米諾發(fā)光試劑與實施例1相同。
(3)配制鐵氰化鉀氧化劑與實施例1相同。
(4)配制雙嘧達莫標(biāo)準(zhǔn)溶液用0.025mol/L的鹽酸溶液配制5.0×10-3mol/L雙嘧達莫儲備溶液。用該儲備溶液配制魯米諾濃度均為1.0×10-4mol/L、NaOH濃度均為0.1mol/L，雙嘧達莫濃度分別為1.0×10-9mol/L、5.0×10-9mol/L、1.0×10-8mol/L、3.0×10-8mol/L、5.0×10-8mol/L、7.0×10-8mol/L、1.0×10-7mol/L的雙嘧達莫標(biāo)準(zhǔn)溶液。
2、制備雙嘧達莫樣品溶液取市售雙嘧達莫片劑20片(標(biāo)示量為25.0mg/片)，準(zhǔn)確稱量后研細(xì)混勻，求得每片平均質(zhì)量。稱取相當(dāng)于一片的量，用0.025mol/L的鹽酸溶液配制成雙嘧達莫樣品溶液，配制方法與雙嘧達莫標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制方法相同，配制成濃度為1.0×10-9mol/L～1.0×10-7mol/L的雙嘧達莫樣品溶液。
3、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線打開化學(xué)發(fā)光儀5電源開關(guān)，調(diào)節(jié)光電倍增管5-2的負(fù)高壓為500v，增益為8，打開恒流泵2電源開關(guān)，調(diào)節(jié)雙嘧達莫標(biāo)準(zhǔn)溶液與鐵氰化鉀溶液的流速比為0.2，雙嘧達莫標(biāo)準(zhǔn)溶液由恒流泵2經(jīng)樣品管5-4輸送到樣品進管5-6口形成液滴，鐵氰化鉀溶液由恒流泵2經(jīng)試劑管5-5輸送到試劑進管5-7口形成液滴，兩個液滴逐漸增大，聚并成一個液滴，魯米諾標(biāo)準(zhǔn)溶液與鐵氰化鉀溶液發(fā)生化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，以雙嘧達莫標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，化學(xué)發(fā)光強度為縱坐標(biāo)，用計算機6繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到下述的線性回歸方程ΔICL＝3548.3C(10-8mol/L)-276.4其線性相關(guān)系數(shù)r＝0.9991式中ΔICL為化學(xué)發(fā)光強度，C為雙嘧達莫的濃度。對5.0×10-9mol/L的雙嘧達莫標(biāo)準(zhǔn)溶液進行11次測定，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.3％。方法的檢出限(3σ)為3.2×10-10mol/L。
4、檢測雙嘧達莫樣品在步驟3中，將雙嘧達莫標(biāo)準(zhǔn)溶液替換成雙嘧達莫樣品溶液，按照雙嘧達莫標(biāo)準(zhǔn)溶液的測定方法檢測雙嘧達莫樣品溶液的發(fā)光強度，計算機6按照線性回歸方程ΔICL＝3548.3C(10-8mol/L)-276.4式中ΔICL為化學(xué)發(fā)光強度，計算出樣品中雙嘧達莫的含量，并做回收實驗，檢測結(jié)果見下表1。
表1雙嘧達莫檢測結(jié)果

通過本實施例實驗結(jié)果說明，采用本發(fā)明液滴流動注射裝置及其定量分析方法可用于微量藥物雙嘧達莫的定量分析。
實施例5采用本發(fā)明實施例1液滴流動注射裝置及其定量分析方法測定藥物雙嘧達莫與牛血清白蛋白的交互作用的步驟如下1、配制試劑(1)配制pH值控制試劑按常規(guī)配制方法分別配制0.1mol/L的氫氧化鈉溶液和0.05mol/L含0.9％NaCl的Na2CO3-HCl緩沖溶液。
(2)配制魯米諾發(fā)光試劑與實施例1相同。
(3)配制鐵氰化鉀氧化劑與實施例1相同。
(4)配制雙嘧達莫標(biāo)準(zhǔn)溶液和牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液用0.025mol/L的鹽酸溶液配制5.0×10-3mol/L雙嘧達莫儲備溶液。用該儲備溶液配制魯米諾濃度均為1.0×10-4mol/L、NaOH濃度均為0.1mol/L，雙嘧達莫濃度分別為1.0×10-9mol/L、5.0×10-9mol/L、1.0×10-8mol/L、3.0×10-8mol/L、5.0×10-8mol/L、7.0×10-8mol/L、1.0×10-7mol/L雙嘧達莫標(biāo)準(zhǔn)溶液。
準(zhǔn)確稱取0.1650g牛血清白蛋白，用含0.9％NaCl和0.05mol/L Na2CO3-HCl緩沖溶液配制成100mL牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液。使用時用0.05mol/L含0.9％NaCl的Na2CO3-HCl緩沖溶液配制成1.0×10-6mol/L牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液。
2、制備待測的雙嘧達莫和牛血清白蛋白樣品溶液分別取5mL濃度為1.0×10-9mol/L、5.0×10-9mol/L、1.0×10-8mol/L、3.0×10-8mol/L、5.0×10-8mol/L、7.0×10-8mol/L、1.0×10-7mol/L的雙嘧達莫標(biāo)準(zhǔn)溶液與5mL 1.0×10-6mol/L的牛血清白蛋白溶液在37C結(jié)合1小時，用離心機14000轉(zhuǎn)/分鐘離心20分鐘，取上清液配成魯米諾濃度為1.0×10-4mol/L、NaOH濃度為0.1mol/L的游離雙嘧達莫樣品溶液。
3、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線與實施例4相同。
4、檢測樣品將步驟3中的雙嘧達莫標(biāo)準(zhǔn)溶液替換為步驟2中的游離雙嘧達莫樣品溶液，雙嘧達莫含量的檢測與實施例4的步驟4完全相同。由Scatchard方程r/[A]＝nK-rK計算結(jié)合位點數(shù)和結(jié)合常數(shù)。式中[A]為未結(jié)合(游離)藥物的濃度，n為結(jié)合比，r為一個蛋白質(zhì)分子上的結(jié)合位點數(shù)，K為結(jié)合常數(shù)。
由Scatchard方程計算得到，雙嘧達莫與牛血清白蛋白結(jié)合位點數(shù)為6.04，結(jié)合常數(shù)為2.20×105(mol/L)-1。
實施例6采用本發(fā)明實施例1液滴流動注射裝置及其定量分析方法對測定指甲中Cr3+含量檢測步驟如下
1、配制試劑(1)配制氫氧化鈉pH值控制試劑與實施例1相同。
(2)按常規(guī)方法配制1.0×10-2mol/L的乙二胺四乙酸二鈉溶液。，使用時用二次水稀釋成1.0×10-4mol/L乙二胺四乙酸二鈉溶液(3)配制過氧化氫氧化劑按常規(guī)方法配制0.1mol/L過氧化氫溶液，使用時用二次水稀釋成濃度為6.0×10-3mol/L的過氧化氫溶液。
(4)配制魯米諾發(fā)光試劑準(zhǔn)確稱取1.7716g魯米諾，用0.1mol/L氫氧化鈉溶液配制成1升濃度為1.0×10-2mol/L魯米諾發(fā)光試劑儲備液，貯于棕色瓶中，置于避光處，兩周后使用。
使用時配制成氫氧化鈉濃度為0.01mol/L，乙二胺四乙酸二鈉濃度為1.0×10-4mol/L，魯米諾濃度為5.0×10-5mol/L的發(fā)光試劑。
(5)配制Cr3+標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)確稱取0.2665g經(jīng)105℃干燥的CrCl3·6H2O，于100mL燒杯中，加入0.1mL濃度為1mol/L H2SO4溶液，加水溶解，定容至100mL容量瓶中，此溶液濃度為1×10-2mol/L，作為貯備液，冰箱保存，使用時用二次蒸餾水逐級稀釋，并加入2.0mol/L的溴化鉀溶液，使溴化鉀最終濃度為0.5mol/L，配置成1.0×10-7mol/L、3.0×10-7mol/L、5.0×10-7mol/L、8.0×10-7mol/L、1.0×10-6mol/L、2.0×10-6mol/L、4.0×10-6mol/L的Cr3+標(biāo)準(zhǔn)溶液。
2、制備待測的Cr3+樣品溶液洗凈的指甲干燥后稱重，置于坩堝中在電爐上碳化至無煙，轉(zhuǎn)至馬弗爐中800℃灼燒12小時，取出，冷卻后加水潤濕灰分，在電爐上蒸干，再轉(zhuǎn)入800℃馬弗爐中灰化12～24小時直至灰分呈白色，取出冷卻，用鹽酸分5次將灰分洗入燒杯中，最后一次在60℃洗滌，合并洗滌液，過濾，加入1mL 30％的H2O2，蒸干，用pH值為3.0的稀鹽酸稀釋成5ml，制成Cr3+樣品溶液。
3、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線打開化學(xué)發(fā)光儀5電源開關(guān)，調(diào)節(jié)光電倍增管5-2的負(fù)高壓為500v，增益為4，打開恒流泵2、注射泵4電源開關(guān)。魯米諾發(fā)光試劑和Cr3+標(biāo)準(zhǔn)溶液由恒流泵2經(jīng)三通T混合后再經(jīng)樣品管5-4輸送到樣品進管5-6口形成液滴，過氧化氫由注射泵4經(jīng)試劑管5-5輸送到試劑進管5-7口形成液滴，調(diào)節(jié)魯米諾發(fā)光試劑-Cr3+標(biāo)準(zhǔn)溶液的混合溶液與過氧化氫氧化劑的流速比為1.0；兩個液滴逐漸增大，聚并成一個液滴，發(fā)生化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。以Cr3+標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，化學(xué)發(fā)光強度為縱坐標(biāo)，用計算機6繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到下述的線性回歸方程ΔICL=5245.8CCr3+(10-6mol/L)-1603.1,]]>標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性相關(guān)系數(shù)r＝0.9990式中ΔICL為相對化學(xué)發(fā)光強度，CCr3+為Cr3+的濃度，對5.0×10-7mol/L的Cr3+標(biāo)準(zhǔn)溶液進行11次測定，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.5％，方法的檢出限(3σ)為1.1×10-8mol/L。
4、樣品的檢測在步驟3中，將Cr3+標(biāo)準(zhǔn)溶液換成Cr3+樣品溶液，按照Cr3+標(biāo)準(zhǔn)溶液的測定方法檢測Cr3+樣品溶液的發(fā)光強度，計算機6按照線性回歸方程ΔICL=5245.8CCr3+(10-6mol/L)-1603.1]]>計算出Cr3+樣品中Cr3+的含量。檢測結(jié)果見下表2。
表2Cr3+樣品測定結(jié)果

實施例7采用本發(fā)明實施例1液滴流動注射裝置及其定量分析方法對水果和蔬菜上氧化樂果農(nóng)藥殘留量的檢測步驟如下1、配制試劑(1)配制氫氧化鈉和硫酸溶液pH值控制試劑按常規(guī)配制方法分別配制0.1mol/L的氫氧化鈉溶液和0.05mol/L硫酸溶液。
(2)配制魯米諾發(fā)光試劑準(zhǔn)確稱取1.7716g魯米諾，用0.1mol/L氫氧化鈉溶液配制成1升濃度為1.0×10-2mol/L魯米諾發(fā)光發(fā)光試劑，貯于棕色瓶中，置于避光處，兩周后使用。
使用時用配制成氫氧化鈉0.05mol/L的5.0×10-4mol/L的魯米諾溶液。
(3)配制氧化劑按常規(guī)配制方法分別配制25g/L的過硫酸鉀溶液、0.28mol/L的鉬酸銨溶液和1.2×10-2mol/L偏釩酸銨溶液作為氧化劑。
(4)配制氧化樂果標(biāo)準(zhǔn)溶液按常規(guī)配制方法配制5.0×10-3mol/L的氧化樂果溶液。取5ml該氧化樂果溶液、5ml的0.05mol/L硫酸溶液、5ml的25g/L過硫酸鉀溶液混合反應(yīng)25分鐘，用水稀釋成25ml作為經(jīng)過處理的氧化樂果溶液。
使用時分別取0.28mol/L鉬酸銨0.2mL、1.2×10-2mol/L偏釩酸銨0.42mL、0.05mol/L硫酸1.0mL，將鉬酸銨溶液、偏釩酸銨溶液、硫酸溶液和2ml經(jīng)過處理的氧化樂果溶液分別配制成含氧化樂果1.0×10-8mol/L、5.0×10-8mol/L、1.0×10-7mol/L、5.0×10-7mol/L、1.0×10-6mol/L、2.5×10-6mol/L的氧化樂果標(biāo)準(zhǔn)溶液。
2、制備氧化樂果樣品溶液取20克水果或蔬菜，用100mL二次水浸泡20分鐘后，按照標(biāo)準(zhǔn)溶液配制方法配制成氧化樂果樣品溶液。
3、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線在實施例4的制作標(biāo)準(zhǔn)曲線步驟中，用氧化樂果標(biāo)準(zhǔn)溶液替換雙嘧達莫標(biāo)準(zhǔn)溶液，魯米諾發(fā)光試劑替換鐵氰化鉀，調(diào)氧化樂果標(biāo)準(zhǔn)溶液與魯米諾發(fā)光試劑的流速比為0.8，以氧化樂果標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，化學(xué)發(fā)光強度為縱坐標(biāo)，用計算機6繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到下述的線性回歸方程ΔICL＝123.22C(10-8mol/L)+1554.8線性相關(guān)系數(shù)r＝0.9994式中ΔICL為化學(xué)發(fā)光強度，C為氧化樂果標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。對5.0×10-8mol/L的氧化樂果標(biāo)準(zhǔn)溶液進行11次測定，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.7％。方法的檢出限(3σ)為2.5×10-9mol/L。
4、檢測氧化樂果樣品在步驟3中，將氧化樂果標(biāo)準(zhǔn)溶液替換成氧化樂果樣品溶液，按照氧化樂果標(biāo)準(zhǔn)溶液的測量方法檢測氧化樂果樣品溶液的發(fā)光強度，計算機6按照線性回歸方程ΔICL＝123.22C(10-8mol/L)+1554.8式中ΔICL為化學(xué)發(fā)光強度，計算出樣品中氧化樂果的含量，與GB5537-85方法的測定結(jié)果相比，檢測結(jié)果基本一致。檢測結(jié)果見下表3。
表3水果或蔬菜上氧化樂果的含量測定結(jié)果

實施例8采用本發(fā)明實施例1液滴流動注射裝置及其定量分析方法對水果和蔬菜上敵百蟲農(nóng)藥殘留量的檢測步驟如下1、配制試劑(1)配制氫氧化鈉和硫酸溶液pH值控制試劑與實施例7相同。
(2)配制魯米諾發(fā)光試劑與實施例7相同。
(3)配制氧化劑與實施例7相同。
(4)配制敵百蟲標(biāo)準(zhǔn)溶液配制方法與實施例7相同。將氧化樂果替換成敵百蟲，配制成含敵百蟲2.0×10-8mol/L、5.0×10-8mol/L、1.0×10-7mol/L、5.0×10-7mol/L、1.0×10-6mol/L、3.0×10-6mol/L的敵百蟲標(biāo)準(zhǔn)溶液。
2、制備敵百蟲樣品溶液與實施例7制備氧化樂果樣品溶液的步驟完全相同。
3、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線與實施例7制作標(biāo)準(zhǔn)曲線相同，用計算機6繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到下述的線性回歸方程ΔICL＝196.76C(10-8mol/L)+1824.8線性相關(guān)系數(shù)r＝0.9997式中ΔICL為化學(xué)發(fā)光強度，C為敵百蟲標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。對5.0×10-8mol/L的敵百蟲標(biāo)準(zhǔn)溶液進行11次測定，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為2.7％。方法的檢出限(3σ)為6.7×10-9mol/L。
4、檢測敵百蟲樣品檢測方法與實施例5檢測氧化樂果樣品完全相同，計算出樣品中敵百蟲的含量，與GB5537-85方法的測定結(jié)果相比，檢測結(jié)果基本一致。檢測結(jié)果見下表4。
表4水果或蔬菜上敵百蟲的含量測定結(jié)果

實施例9采用本發(fā)明實施例1液滴流動注射裝置及其定量分析方法對人體皮膚上和土壤中的三硝基甲苯含量的檢測步驟如下1、配制試劑(1)配制氫氧化鈉和硫酸溶液pH值控制試劑與實施例7相同。
(2)配制魯米諾發(fā)光試劑與實施例7相同。
(3)按常規(guī)方法配制1.0×10-2mol/L的乙二胺四乙酸二鈉溶液。使用時用二次水稀釋成1.0×10-4mol/L乙二胺四乙酸二鈉溶液。
(4)配制三硝基甲苯標(biāo)準(zhǔn)溶液稱取經(jīng)無水乙醇重結(jié)晶的三硝基甲苯0.1000g于100mL燒杯中，用10ml無水乙醇全部溶解后，加水稀釋，定容至100mL棕色容量瓶中，配制成三硝基甲苯貯備液，冰箱保存。在乙二胺四乙酸二鈉濃度均為1.0×10-4mol/L時，配制成三硝基甲苯濃度分別為5.0×10-9mol/L、8.0×10-9mol/L、1.0×10-8mol/L、3.0×10-8mol/L、5.0×10-8mol/L、7.0×10-8mol/L、1.0×10-7mol/L的三硝基甲苯標(biāo)準(zhǔn)溶液。
2、制備待測的皮膚上和土壤中的三硝基甲苯樣品溶液對人接觸三硝基甲苯(TNT)兩天后的手指，用蘸有丙酮的脫脂棉反復(fù)擦洗手指，用丙酮分五次浸泡，合并浸泡液，用離心機3500轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘，取上清液，蒸干后用無水乙醇稀釋至5毫升。按照步驟1配制三硝基甲苯標(biāo)準(zhǔn)溶液的方法制備成皮膚上三硝基甲苯樣品溶液稱取爆炸現(xiàn)場的土樣1～3克，用20毫升苯分三次浸取，合并浸泡液，用分液漏斗分液，蒸干后用無水乙醇稀釋至5毫升。按照步驟1配制三硝基甲苯標(biāo)準(zhǔn)溶液的方法制備成土壤中三硝基甲苯樣品溶液。
3、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線打開化學(xué)發(fā)光儀5電源開關(guān)，調(diào)節(jié)光電倍增管5-2的負(fù)高壓為600v，增益為4，打開恒流泵2和恒電位儀7的電源開關(guān)，調(diào)節(jié)恒電位儀7的電位為-0.650v，調(diào)節(jié)恒流泵2使魯米諾溶液和三硝基甲苯溶液的流速比1，三硝基甲苯標(biāo)準(zhǔn)溶液由恒流泵2經(jīng)樣品管5-4輸送到樣品進管5-6口形成液滴，魯米諾由恒流泵2經(jīng)試劑管5-5輸送到試劑進管5-7口形成液滴，兩個液滴逐漸增大，聚并成一個液滴，并浸沒電極，電極為長1厘米、直徑0.3毫米的鉑絲，恒電位儀7為電極提供-0.650v的電壓，在電極表面發(fā)生電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，三硝基甲苯在鉑絲電極5-9上發(fā)生電化學(xué)反應(yīng)，反應(yīng)方程式如下 由第一步電還原反應(yīng)生成的自由基產(chǎn)物與魯米諾發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生強的電化學(xué)發(fā)光信號被化學(xué)發(fā)光儀5的管電倍增管接收。
以三硝基甲苯標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，電化學(xué)發(fā)光強度為縱坐標(biāo)，用計算機6繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到下述的線性回歸方程ΔIECL＝30.594CTNT(mol/L)+297.28其線性相關(guān)系數(shù)r＝0.9963式中ΔIECL為電化學(xué)發(fā)光強度，CTNT為三硝基甲苯溶液的濃度。對8.0×10-9mol/L的三硝基甲苯標(biāo)準(zhǔn)溶液進行11次測定，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為3.1％。方法的檢出限(3σ)為3.9×10-11mol/L。
4、樣品的檢測將標(biāo)準(zhǔn)溶液分別換成步驟2制備的皮膚上三硝基甲苯樣品溶液、土壤中三硝基甲苯樣品溶液，按照三硝基甲苯標(biāo)準(zhǔn)溶液的測定方法檢測三硝基甲苯樣品溶液的發(fā)光強度，計算機6按照線性回歸方程ΔIECL＝30.594CTNT(mol/L)+297.28計算出樣品中三硝基甲苯的含量，與GB/T 13905-92方法所測的結(jié)果對照，檢測結(jié)果基本一致。檢測結(jié)果見下表4、表5。
表4接觸三硝基甲苯兩天后測量手指表皮三硝基甲苯殘留的測量結(jié)果

表5土壤中三硝基甲苯殘留的測量結(jié)果

權(quán)利要求
1.一種液滴流動注射裝置，其特征在于它包括恒流泵(2)、注射泵(4)、蠕動泵(3)、負(fù)高壓控制器(1)、化學(xué)發(fā)光儀(5)、計算機(6)、恒電位儀(7)，恒流泵(2)通過樣品管(5-4)和樣品進管(5-6)與化學(xué)發(fā)光儀(5)相聯(lián)通、通過試劑管(5-5)和試劑進管(5-7)與化學(xué)發(fā)光儀(5)相聯(lián)通，注射泵(4)通過試劑管(5-5)和試劑進管(5-7)與化學(xué)發(fā)光儀(5)相聯(lián)通，經(jīng)蠕動泵(3)的廢液管(5-10)與化學(xué)發(fā)光儀(5)相聯(lián)通，負(fù)高壓控制器(1)和電位控制器通過導(dǎo)線與化學(xué)發(fā)光儀(5)相連接，負(fù)高壓控制器(1)通過電纜與計算機(6)相連接。
2.按照權(quán)利要求1所述的液滴流動注射裝置，其特征在于所說的化學(xué)發(fā)光儀(5)為化學(xué)發(fā)光儀殼體(5-3)與暗盒(5-1)上加工有相互聯(lián)通的光窗，在化學(xué)發(fā)光儀殼體(5-3)內(nèi)設(shè)置有發(fā)光反應(yīng)池(5-8)，樣品進管(5-6)和試劑進管(5-7)設(shè)置在發(fā)光反應(yīng)池(5-8)的上表面，在發(fā)光反應(yīng)池(5-8)內(nèi)樣品進管(5-6)和試劑進管(5-7)的正下方設(shè)置有電極，穿出化學(xué)發(fā)光儀殼體(5-3)外的廢液管(5-10)與發(fā)光反應(yīng)池(5-8)內(nèi)相聯(lián)通，在暗盒(5-1)內(nèi)設(shè)置有通過導(dǎo)線與負(fù)高壓控制器(1)相連接的光電傳感器。
3.按照權(quán)利要求2所述的液滴流動注射裝置，其特征在于所說的光電傳感器為光電倍增管(5-2)；所說的樣品進管(5-6)和試劑進管(5-7)是內(nèi)徑為325～500μm的石英毛細(xì)管；所說的電極為鉑絲電極(5-9)或鉑片電極。
4.按照權(quán)利要求2或3所述的液滴流動注射裝置，其特征在于所說的樣品進管(5-6)的管口與試劑進管(5-7)的管口之間的距離為0.5～3.0mm，電極與樣品進管(5-6)的管口和試劑進管(5-7)的管口之間的距離為0.2～2mm。
5.按照權(quán)利要求3所述的液滴流動注射裝置，其特征在于所說的樣品進管(5-6)與試劑進管(5-7)的夾角為30°～60°，樣品進管(5-6)和試劑進管(5-7)與發(fā)光反應(yīng)池(5-8)上表面的夾角為10°～30°。
6.按照權(quán)利要求4所述的液滴流動注射裝置，其特征在于所說的樣品進管(5-6)與試劑進管(5-7)的夾角為30°～60°，樣品進管(5-6)和試劑進管(5-7)與發(fā)光反應(yīng)池(5-8)上表面的夾角為10°～30°。
7.按照權(quán)利要求2或5所述的液滴流動注射裝置，其特征在于所說的發(fā)光反應(yīng)池(5-8)為透明的有機或無機材料發(fā)光反應(yīng)池(5-8)。
8.一種使用權(quán)利要求1的定量分析方法，其特征在于包括下述步驟(1)配制試劑①按常規(guī)方法配制0.1mol/L氫氧化鈉溶液、1.0mol/L的鹽酸溶液、0.05mol/L含0.9％NaCl的Na2CO3-HCl緩沖溶液、0.05mol/L的硫酸溶液作為pH值控制試劑。②按常規(guī)方法配制1.0×10-2mol/L魯米諾貯備液作為發(fā)光試劑。③按常規(guī)方法配制1.0×10-2mol/L鐵氰化鉀溶液、1.0mol/L過氧化氫溶液、25g/L過硫酸鉀溶液、0.28mol/L鉬酸銨溶液、1.2×10-2mol/L偏釩酸銨溶液作為氧化劑。④按常規(guī)方法配制1.0×10-2mol/L的乙二胺四乙酸二鈉溶液。⑤按常規(guī)方法配制待測的5.0×10-3mol/L雙嘧達莫標(biāo)準(zhǔn)溶液、1.0×10-4mol/L的牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液、1.0×10-2mol/L的Cr3+標(biāo)準(zhǔn)溶液、1.0×10-2mol/L的三硝基甲苯標(biāo)準(zhǔn)溶液、5.0×10-3mol/L的敵敵畏標(biāo)準(zhǔn)溶液、5.0×10-3mol/L的敵百蟲標(biāo)準(zhǔn)溶液和5.0×10-3mol/L的氧化樂果標(biāo)準(zhǔn)溶液。(2)制備待測樣品溶液每種待測樣品配制前，應(yīng)先使用標(biāo)準(zhǔn)溶液進行檢測條件優(yōu)選實驗，確定以下實驗參數(shù)如氫氧化鈉濃度、或鹽酸濃度、或含NaCl的Na2CO3-HCl緩沖濃度、或硫酸濃度，發(fā)光試劑濃度，根據(jù)上述優(yōu)選參數(shù)配制樣品溶液。(3)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線打開化學(xué)發(fā)光儀(5)電源開關(guān)，調(diào)節(jié)光電倍增管(5-2)的負(fù)高壓為500～900v，增益為1～16，打開恒流泵(2)電源開關(guān)，調(diào)節(jié)樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液與試劑溶液的流速比為0.2～1.0，樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液由恒流泵(2)經(jīng)樣品管(5-4)輸送到樣品進管(5-6)口形成液滴，氧化劑溶液由恒流泵(2)經(jīng)試劑管(5-5)輸送到試劑進管(5-7)口形成液滴，兩個液滴逐漸增大，聚并成一個液滴，發(fā)生化學(xué)發(fā)光反應(yīng)或由恒電位儀(7)提供電壓在電極上發(fā)生電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，聚并的液滴在重力作用下滴落到發(fā)光池的底部經(jīng)廢液管(5-10)由蠕動泵(3)泵出，光電倍增管(5-2)將接收到的光信號進行放大轉(zhuǎn)換成電信號輸出到負(fù)高壓控制器1的A/D轉(zhuǎn)換器，A/D轉(zhuǎn)換器鍵輸入的電信號轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號輸出到計算機(6)，以樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，化學(xué)發(fā)光強度為縱坐標(biāo)，用計算機(6)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到下述的線性回歸方程ΔICL＝kC(mol/L)+b式中ΔICL為化學(xué)發(fā)光強度，C為被檢測物質(zhì)的濃度，k、b為常數(shù)由實驗確定，計算線性相關(guān)系數(shù)和方法的檢出限；以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，電化學(xué)發(fā)光強度為縱坐標(biāo)，用計算機(6)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到下述的線性回歸方程ΔIECL＝kC(mol/L)+b式中ΔIECL為電化學(xué)發(fā)光強度，C為被檢測物質(zhì)的濃度，k、b為常數(shù)由實驗確定，計算線性相關(guān)系數(shù)和方法的檢出限。(4)檢測樣品將標(biāo)準(zhǔn)溶液替換為樣品溶液，按照標(biāo)準(zhǔn)溶液的測定步驟檢測樣品溶液的化學(xué)發(fā)光或電化學(xué)發(fā)光強度，光電倍增管(5-2)將接收到的光信號進行放大轉(zhuǎn)換成電信號輸出到負(fù)高壓控制器(1)的A/D轉(zhuǎn)換器，A/D轉(zhuǎn)換器鍵輸入的電信號轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號輸出到計算機(6)，計算機(6)將輸入的信號進行數(shù)據(jù)處理按照線性回歸方程ΔICL＝kC(mol/L)+b式中ΔICL為電化學(xué)發(fā)光強度，k、b為常數(shù)由實驗確定，計算出樣品中被測物質(zhì)的含量；將測得的電化學(xué)發(fā)光強度帶入線性回歸方程ΔIECL＝kC(mol/L)+b，式中ΔIECL為電化學(xué)發(fā)光強度，k、b為常數(shù)由實驗確定，計算出樣品中被測物質(zhì)的含量。
全文摘要
一種液滴流動注射裝置及其定量分析方法，它包括恒流泵、注射泵、蠕動泵、負(fù)高壓控制器、化學(xué)發(fā)光儀、計算機、恒電位儀，恒流泵通過樣品管和樣品進管與化學(xué)發(fā)光儀相聯(lián)通、通過試劑管和試劑進管與化學(xué)發(fā)光儀相聯(lián)通，注射泵通過試劑管和試劑進管與化學(xué)發(fā)光儀相聯(lián)通，經(jīng)蠕動泵的廢液管與化學(xué)發(fā)光儀相聯(lián)通，負(fù)高壓控制器和電位控制器通過導(dǎo)線與化學(xué)發(fā)光儀相連接，負(fù)高壓控制器通過電纜與計算機相連接。定量分析方法包括配制試劑、制備待測樣品溶液、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線、檢測樣品。本發(fā)明液滴流動注射裝置及其定量分析方法可用于對無機離子、有機分子、藥物等的流動注射分析。
文檔編號G06F19/00GK1815199SQ200610041788
公開日2006年8月9日 申請日期2006年2月16日 優(yōu)先權(quán)日2006年2月16日
發(fā)明者呂家根, 齊慧麗, 齊昕, 吳豐魁, 王娟, 聶迎春 申請人:陜西師范大學(xué)