專利名稱：一種抗植物白粉病的藥物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及羥基吳茱萸吲哚類生物堿即N-?；?色胺及N-?；?5-羥色胺衍生物及其藥物組合物，其制備方法，以及作為防治植物白粉病的藥物的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
現(xiàn)有技術(shù)中未見有N-酰基-色胺及N-?；?5-羥色胺衍生物作為藥物的報(bào)道，更未見有抗植物白粉病的藥物的報(bào)道。本發(fā)明基于發(fā)現(xiàn)和研究新類型的天然活性物質(zhì)，通過抗植物自粉病活性的構(gòu)效關(guān)系研究，發(fā)現(xiàn)了吳茱萸吲哚生物堿具有抗植物白粉病活性，且顯著強(qiáng)于先導(dǎo)物，作為新型的抗植物白粉病藥物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種抗植物白粉病的藥物，其中含有治療有效量的式(I)化合物羥基吳茱萸吲哚類生物堿和藥學(xué)上可接受的載體，該藥物的制備方法及其中制備抗植物白粉病的藥物中的應(yīng)用。
為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案一種抗植物白粉病的藥物，其中含有治療有效量的式(I)化合物羥基吳茱萸吲哚類生物堿和藥學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明同時(shí)提供了制備權(quán)利要求1所述藥物的方法，包括取吳茱萸果實(shí)和莖葉，粉碎成粗粉后，用95％乙醇回流提取，回收乙醇得浸膏，以5％的酸水捏溶，過濾后的酸水溶液先用石油醚脫脂后，以28％的氨水堿化至PH10，以氯仿萃取，無水硫酸鈉干燥，回收氯仿得總堿，用石油醚∶氯仿∶甲醇為1∶12∶0.5和氯仿∶二乙胺為10∶1進(jìn)行反復(fù)硅膠常壓柱層析(LC)，低、中壓柱層析(LPLC、MPLC)，真空柱層析(VLC)，常壓及真空干柱層析(DCC、VDCC)，得式(I)化合物，加入藥學(xué)上可接受的載體即可。
本發(fā)明還提供了式[I]化合物在制備抗植物白粉病的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明的藥物可以將化合物直接使用，也可在化合物中加入藥學(xué)上可接受的常規(guī)載體制成適合的劑型使用。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖
用本發(fā)明的實(shí)際例子來進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但本發(fā)明的內(nèi)容并不局限于此。
實(shí)施例1羥基吳茱萸吲哚類生物堿的制備取吳茱萸干燥果實(shí)生品20kg和莖葉6.8kg，粉碎成粗粉后，用95％乙醇回流提取，回收乙醇得浸膏，以5％的酸水捏溶，過濾后的酸水溶液先用石油醚脫脂后，繼以28％的氨水堿化至PH10，繼以氯仿萃取，無水硫酸鈉干燥，回收氯仿得總堿，再用石油醚∶氯仿∶甲醇為1∶12∶0.5和氯仿∶二乙胺為10∶1進(jìn)行反復(fù)硅膠常壓柱層析(LC)，低、中壓柱層析(LPLC、MPLC)，真空柱層析(VLC)，常壓及真空干柱層析(DCC、VDCC)，得式(I)化合物3.1克。
羥基吳茱萸堿(式(I)化合物) (羥基吳茱萸堿，Hydroxyevodiamine)即式(I)化合物，黃色片晶(乙醇)，m.p.165℃變紅，195℃分解；MSm/z319(M+，77)，301(M-H2O，100)，286(M-H2O-CH3)，257(16)，186(65)，134(80)；IR(KBr)cm-13404，3270，1682(C＝O)，1664(C＝O)，1516，1484，1396，1288，1232，1204，743；1H和13CNMR(δppm，DMSO，400MHz，見生物堿(1)的13C化學(xué)位移(δ，ppm，DMSO)(溶劑為C5D5N)和生物堿(1)的1H化學(xué)位移(δ，ppm，DMSO)(溶劑為CDCl3)數(shù)據(jù)。
羥基吳茱萸堿，Hydroxyevodiamine(1)，黃色片晶(乙醇)，m.p.165 ℃變紅，195℃分解；EIMS m/z319(M+，77)，301(M-H2O，100)，286(M-H2O-CH3)，257(16)，186(65)，134(80)；IR(KBr)cm-13404，3270，1682(C＝O)，1664(C＝O)，1516，1484，1396，1288，1232，1204，743；1H NMR(δ，ppm，DMSO)6.47(t，7.2，H-1)，6.91(d，4.8，H-2)，6.68(d，8.4，H-3)，6.91(d，4.8，H-4)，4.09(d，5.6，H-7)，3.16(t，5.6，H-8)，7.68(d，8.0，H-9)，7.11(t，7.2，H-10)，7.30(t，7.2，H-11)，7.42(d，8.4，H-12)，11.77(s，H-13)，3.43(s，N14-CH3)；13C NMR(δ，ppm，DMSO)110.9d(C-1)，133.5d(C-2)，114.2d(C-3)，131.4d(C-4)，117.0s(C-4a)，174.7s(C-5)，46.9t(C-7)，20.5t(C-8)，122.5s(C-8a)，124.5s(C-8b)，120.0d(C-9)，120.9d(C-10)，125.7d(C-1 1)，112.8d(C-12)，138.4s(C-12a)，126.0s(C-13a)，161.1s(C-13b)，149.8s(C-14a)，29.5q(N14-C).
2、從步驟1所得化合物抗白粉病活性試驗(yàn)(1)菌種植物白粉病菌株。
(2)培養(yǎng)基馬鈴薯培養(yǎng)基用于植物白粉病的培養(yǎng)。
(3)抗白粉病菌活性測(cè)定1)化合物對(duì)真菌菌絲生長的抑制作用化合物濃度配制取1mg樣品，用無水乙醇完全溶解，并定容至1ml，制成1000μg/ml的母液，-20℃保存。實(shí)驗(yàn)前臨時(shí)將化合物母液稀釋成不同濃度，并使溶液的乙醇濃度固定為10％。白粉病病葉放在馬鈴薯培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一星期，挑取培養(yǎng)基上真菌菌落邊緣的少許菌絲于中間滴有不同濃度的該化合物的馬鈴薯培養(yǎng)基上，培養(yǎng)并記錄真菌菌絲的生長情況，計(jì)算該化合物抑制率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1所示。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明式(I)化合物具有抗植物白粉病活性，對(duì)植物白粉病菌株生長抑制濃度為35(μg/ml)。
由表1可知隨著濃度的增加抑制效果也隨之增加。
從表1中和連續(xù)施藥三次后白粉病煙苗的大田表現(xiàn)癥狀可以得到用70μg/ml的吳茱萸生物堿連續(xù)試藥三次后白粉病癥狀基本消失，煙苗經(jīng)過一周后進(jìn)入正常生長階段。
表1不同濃度吳茱萸生物堿抑制白粉病菌落的效果培養(yǎng)后的菌落直徑平均值培養(yǎng)基編號(hào) 時(shí)間 10μg/ml 20μg/ml 30μg/ml 50μg/ml 70μg/mlG1 1天19.6 21.2 22.5 23.4 25.9G2 2天22.7 24.5 26.1 27.9 30.1G3 3天26.1 27.8 28.2 29.4 32.5G4 4天28.9 29.1 30.2 31.5 33.7G5 5天31.2 32.5 34.3 35.6 37.8G6 6天32.7 33.4 36.7 37.2 38.權(quán)利要求
1.一種抗植物白粉病的藥物，其中含有治療有效量的式(I)化合物羥基吳茱萸吲哚類生物堿和藥學(xué)上可接受的載體。
2.制備權(quán)利要求1所述藥物的方法，包括取吳茱萸果實(shí)和莖葉，粉碎成粗粉后，用95％乙醇回流提取，回收乙醇得浸膏，以5％的酸水捏溶，過濾后的酸水溶液先用石油醚脫脂后，以28％的氨水堿化至PH10，以氯仿萃取，無水硫酸鈉干燥，回收氯仿得總堿，用石油醚∶氯仿∶甲醇為1∶12∶0.5和氯仿∶二乙胺為10∶1進(jìn)行反復(fù)硅膠常壓柱層析(LC)，低、中壓柱層析(LPLC、MPLC)，真空柱層析(VLC)，常壓及真空干柱層析(DCC、VDCC)，得式(I)化合物，加入藥學(xué)上可接受的載體即可。
3.權(quán)利要求1式[I]化合物在制備抗植物白粉病的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
一種抗植物白粉病的藥物，其中含有治療有效量的式(I)化合物羥基吳茱萸吲哚類生物堿和藥學(xué)上可接受的載體。
文檔編號(hào)A01N43/90GK1685819SQ20051001080
公開日2005年10月26日 申請(qǐng)日期2005年5月11日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月11日
發(fā)明者郝小江, 李艷梅, 張仲凱, 何紅平, 左國營 申請(qǐng)人:中國科學(xué)院昆明植物研究所, 云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)與種質(zhì)資源研究所