專利名稱：：抗除草劑的向日葵植物和使用方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)生物技術學領域，特別地涉及抗除草劑的向日葵植物以及編碼野生型的和抗除草劑的向日葵乙酰羥酸合酶大亞基蛋白的新型多核苷酸序列。
背景技術：
：乙酰羥酸合酶(AHAS;EC4.1.3.18，也稱作乙酰乳酸合酶或ALS)是催化纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸這些支鏈氨基酸的生物化學合成的第一個酶(Singh(1999)"Biosynthesisofvaline,leucineandisoleucine'1，/7a/2t爿邁//20」c/c/，Singh,B丄，ed.，MarcelDekkerInc.NewYork,NewYork,pp.227-247)。AHAS是5個結(jié)構上不同的除草劑家族的作用位點，所述5個除草劑家族包括磺酰脲類(LaRossa和Falco，(1984)7>e/2&"/Wec力/70人2:158-161)、。米唑啉酮類(Shaner等人，(1984)尸7aW76:545-546)、三唑并嗜啶類(Subramanian和Gerwick，(1989)"Inhibitionofacetolactatesynthasebytriazolopyrimidines"，S/oc"s/"/s//j^r/ci/"i/_ra/"/c^ec力/2c^0g/，Whitaker,J.R和Sonnet,P.E.eds.，ACSSymposiumSeries,AmericanChemicalSociety,Washington,D.C.，pp.277-288)和嗜啶基氧基苯甲酸酯類(Subramanian等人，(1990)P/a/^戶力/Wo/,94:239-244)。由于它們在非常低的施用率時的有效性和在動物中的相對無毒性，咪唑啉酮類和磺酰脲類除草劑被廣泛地用于現(xiàn)代農(nóng)業(yè)。通過抑制AHAS活性，這些除草劑家族阻止易感植物(包括許多雜草物種)的進一步生長和發(fā)育。商購可獲得的咪唑啉酮類除草8劑的幾個實例是PURSUIT⑧(咪草煙)、SCEPTER(滅草會)和ARSENAL⑧(滅草煙)?；酋ｋ孱惓輨┑膶嵗蔷G磺隆、甲磺隆、甲嘧磺隆、氯嘧磺隆、噻吩磺隆、苯磺隆、節(jié)嘧磺隆、煙嘧磺隆、胺苯磺隆、砜嘧磺隆、氟胺磺隆、醚苯磺隆、氟嗜磺隆、醚磺隆、amidosulfiuon、fluzasulfuron、哇吡嘧磺隆、吡嘧碌隆和敗氯磺隆。由于它們的高效性和低毒性，喜歡將咪唑啉酮類除草劑通過在大范圍植被的頂部的上方噴灑來施用。在大范圍植被的頂部的上方噴施除草劑的能力減少了與種植場的建立和維護有關的費用，且減少了在使用這樣的化學藥品之前對場所準備的需要。在想要的耐受物種的頂部的上方進行噴施也因為不存在竟爭物種而導致獲得想要的物種的最大生產(chǎn)潛力。然而，使用這樣的上方噴施(spray-over)技術依賴于在上方噴施區(qū)域中存在想要的植被的抗咪唑啉酮類的物種。在主要的農(nóng)作物中，一些豆科物種例如大豆，由于其快速代謝除草劑化合物的能力而天然地對咪唑啉酮類除草劑具有抗性(Shaner和Robinson,(1985)/Teedi^/.33:469-471)。其他作物例如玉米(Newhouse等人，(1992)戶/a/^尸力7"o人100:882-886)和水稻(Barrett等人,(1989)Cro/5^尸e"ers尸or〃er6/c/f/es，AcademicPress,NewYork,pp.195-220)對咪唑啉酮類除草劑有些易感。對^_物中;述化合物從^5性￡非毒性形式的不同代謝(Shaner等人，(1984)/a/7"/戸.。/.76:545-546;Brown等人，(1987)戶e"/c.5/oc力e邁.戶力j^2'o7.27:24-29)。其他植物生理學差異例如吸收和轉(zhuǎn)運也在敏感性上起著重要作用(Shaner和Robinson，(l985)肸ec^c/.33:469-471)。在玉米(Zea邊，)、擬南芥(Jra62，/s^"/a/7a)、歐洲油菜(即，卡諾拉油菜)、大豆(67/""e則i)、煙草(7\7co〃a/2a"6scf/邁)、甜菜P7/"ar/51)和7jc稻(^戸s"/m)中使用種子、小孢子、花粉和愈傷組織誘變已成功地產(chǎn)生了抗咪唑啉酮類、磺酰脲類、三唑并嘧啶類和嘧啶基氧基苯甲酸酯類的植物(Sebastian等人，(1989)5V7/.29:1403-1408;Swanson等人，19897Teor.^e/et78:525-530;Newhouse等人，(1991)r力eor.爿/7/7Ce/et83:65-70;Sathasivan等人，(1991)戶/a"/腳"o/.97:1044-1050;Mourand等人，(1993)/.^recT"/84:91-96;Wright和Penner(1998)r力eor.^/7人^"eL96:612-620;美國專利號5，545，822)。在所有情況下，單一的、部分顯性的核基因賦予了抗性。先前也在小麥Fidel栽培種(rW〃c"范ae^2>ML.cv.Fidel)的種子i秀變后分離了4種抗咪唑啉酮類的小麥植物(Newhouse等人，(1992)腳"o/.100:882-886)。遺傳研究確認了，單一的、部分顯性的基因賦予了抗性。基于等位基因的研究，作者推斷出4種已鑒定的品系中的突變定位于相同的基因座。Fidel栽培種抗性基因中的一個被命名為FS-4(Newhouse等人，(1992)戶/a/^戶A^/o厶100:882-886)。植物群體也已用于開發(fā)抗除草劑的向日葵繁殖系(breedingline)。近年來，使用源于普通向日葵(^eZ/a/^Af^a/7/7"w)的野生群體的種質(zhì)作為除草劑抗性性狀的來源開發(fā)了兩種抗磺酰脲類除草劑的向日葵品系(Miller和A卜Khatib,(2004)Cro/S"'.44:1037-1038)。以前，White等人((2002)ree"c/.50:432-437)已報導，來自SouthDakota,U.S.A.的普通向日葵野生群體中的個體對咪唑啉酮類和磺酰脲類除草劑具有交叉抗性。對于該群體中的個體的乙酰羥酸合酶大亞基(AHASL)基因的編碼區(qū)的部分所進行的分析揭示了點突變，該點突變導致向日葵AHASL蛋白中的Ala至Val的氨基酸置換，這相應于野生型擬南芥AHASL蛋白中的Ala2。5(White等人，(2003)^eecT5W.51:845-853)。AHAS-抑制劑復合物的三維構象的基于計算機的建模預測了所提出的抑制劑結(jié)合袋中的幾個氨基酸作為位點，在所述位點上誘導的突變可能賦予對咪唑啉酮類的選擇性抗性(Ott等人，(1996)/.#o/.263:359-368)。用在AHAS酶的所提出的結(jié)合位點中的這些合理設計的突變之中的一些突變產(chǎn)生了小麥植物，這些小麥植物事實上已展示出對單一類別的除草劑的特異性抗性(0tt等人，(1996)/.M入脅/.263:359-368)。在許多專利中也已報道了對咪唑啉酮類除草劑的植物抗性。美國專利號4，761，373、5,331,107、5,304,732、6，211，438、6,211,439和6,222，IOO概括性地描述了改變的AHAS基因在植物中引發(fā)除草劑抗性的用途，并且具體地公開了某些抗咪唑啉酮類的玉米品系。美國專利號5,013，659公開了由于一個或多個保守區(qū)域中的至少一個氨基酸的突變而展示出的除草劑抗性的植物。此處描述的突變編碼對咪唑啉酮類和磺酰脲類的交叉抗性或磺酰脲類特異性抗性，但未描述咪唑啉酮類特異性抗性。美國專利號5，731，180和美國專利號5，767，361論述了在野生型單子葉植物AHAS氨基酸序列中具有單個氨基酸置換的分離的基因，所述置換導致咪唑啉酮類特異性抗性。此外，已通過突變育種，還通過從由花藥培養(yǎng)產(chǎn)生的水稻植物庫中選擇抗除草劑的植物，開發(fā)了對于干擾AHAS的除草劑具有抗性的水稻植物。參見，美國專利號5，545，822、5,736,629、5,773,703、5,773,704、5，952，553和6,274,796。在植物中，如在所有經(jīng)檢查的其他生物中一樣，AHAS酶由兩個亞基組成大亞基(催化作用)和小亞基(調(diào)節(jié)作用)(Duggleby和Pang，(2000)/.丑/oc力e瓜#o7.5/o/.33:1-36)。AHAS大亞基(此處也稱作AHASL)可由單基因編碼，如在擬南芥、水稻和甜菜的情況下，或由多基因家族成員編碼，如在玉米、油菜和棉花的情況下。大亞基中特定的單核苷酸置換賦予了該酶以一定程度的對一種或更多種類別的除草劑的不敏感性(Chang和Duggleby，(1998)》/oc力e邁/.333:765-777)。例如，小麥(rr27/c咖aes"Vw邁力.)包含3個同源的乙酰羥酸合酶大亞基基因。這些基因中的每一個展示出顯著的表達，基于來自所述三個基因中的每一個基因的突變體的除草劑應答和生物化學數(shù)據(jù)(Ascenzi等人，(2003)InternationalSocietyofPlantMolecularBiologistsCongress,Barcelona,Spain,Ref.No.S10-17)。所ii有三個基因的編碼序列在核苷酸水平上共有廣泛的同源性(WO03/014357)。通過對來自小麥的幾個變種的J^I5X基因進行序列，發(fā)現(xiàn)在大多數(shù)耐受IMI(耐受咪唑啉酮類)的品系中的除草劑耐受性的分子基礎是突變S653(^)N，表示在等同于擬南芥中氨基酸653上的絲氨酸的位置處絲氨酸至天冬酰胺的置換(W003/01436;W003/014357)。該突變是由于在編碼AHASL蛋白的DM序列中的單核苷酸多態(tài)性(SNP)造成的。還已知在雙子葉植物物種中出現(xiàn)多個^^5X基因。最近，Kolkman等人((2004)Deor.^/7ACe/2W.109:1147-1159)報道了來自向日葵(^e"a"^^a//7i/wL.)的抗除草劑和野生型的基因型的三個^^5Z基因(^^5X人^W5Z2和^^iX力的鑒定、克隆和測序。Kolkman等人報道，所述除草劑抗性歸因于AHASL1蛋白中的Prol97Leu(使用擬南芥AHASL氨基酸位置命名法)置換或Ala205Val置換，以及這些置換中的每一個提供了對咪唑啉酮類和磺酰脲類除草劑兩者的抗性。因為其高效性和低毒性，咪唑啉酮類除草劑有利于農(nóng)業(yè)用途。然而，在特定的作物生產(chǎn)系統(tǒng)中使用咪唑啉酮類除草劑的能力依賴于目的作物植物的抗咪唑啉酮類的變種的可獲得性。為了產(chǎn)生這樣的抗咪唑啉酮類的變種，植物育種者需要開發(fā)出具有咪唑啉酮類抗性性狀的繁殖系。因此，需要作物植物的另外的抗咪唑啉酮類的繁殖系和變種，發(fā)明概述本發(fā)明提供了具有相比于野生型向日葵植物而言增加的對至少一種除草劑的抗性的向日葵植物。特別地，當與野生型向日葵植物相比較時，本發(fā)明的向日葵植物具有增加的對至少一種咪唑啉酮類除草劑(特別是咪草啶酸和/或滅草煙)的抗性。與先前描述的抗咪唑啉酮類的向日葵植物不同，本發(fā)明的向日葵植物包含新的除草劑抗性機制，該機制不牽涉編碼乙酰羥酸合酶大亞基(AHASL)蛋白的基因中的突變。本發(fā)明的向日葵植物還包括種子和后代植物，所述種子和后代植物包含至少一個拷貝的編碼本發(fā)明的抗除草劑的AHASL蛋白的基因或多核苷酸。在一個實施方案中，本發(fā)明提供了抗除草劑的向日葵植物，其來自在此處被命名為MUT31的向日葵品系。已將MUT31品系的種子的樣品以ATCC專利保藏號PTA-7839保藏在美國典型培養(yǎng)物保藏中心(AmericanTypeCultureCollection,ATCC)。本發(fā)明進一步提供了包含MUT31的除草劑抗性特征的種子、后代(progeny)植物和其他后裔(descendent)植物。本發(fā)明提供了在本發(fā)明的抗除草劑的向日葵植物附近控制雜草的方法。所述方法包括向所述雜草和向所述抗除草劑的向日葵植物施用有效量的除草劑，其中當與野生型向日葵植物相比較時，所述抗除草劑的向日葵植物具有增加的對至少一種除草劑(特別是咪唑啉酮類除草劑，更特別是咪草啶酸)的抗性。所述除草劑可以例如施用于植物的葉，在種植之前施用于植物的種子，和/或在種植之前或之后施用于土壤。本發(fā)明進一步提供了用于產(chǎn)生抗除草劑的向日葵植物的方法。所述方法包括將包含對除草劑的抗性的第一向日葵植物與不抗該除草劑的第二向日葵植物雜交，其中所述第一向日葵植物包含MUT31的除草劑抗性特征，特別是MUT31向日葵植物或MUT31的任何抗除草劑的后裔。其的這樣的除草劑抗性包括MUT31的除草劑抗性特征，MUT31的代表性種子已經(jīng)以專利保藏號PTA-7839保藏在ATCC。所述方法進一步包括選擇抗所述除草劑的后代植物。此外，本發(fā)明還提供了用于增加向日葵植物的除草劑抗性的方法。所述方法包括將包含對除草劑的抗性的第一向日葵植物與第二向曰葵植物雜交，其中所述第一向日葵植物包含MUT31的除草劑抗性特征，特別是MUT31向日葵植物或MUT31的任何抗除草劑的后裔。所述第二向日葵植物可以(但不是必需)包含對至少一種除草劑的抗性。所述方法進一步包括選擇包含相比于所述第二向日葵植物的除草劑抗性而言增13加的除草劑抗性的后代植物。在本發(fā)明的一個實施方案中，所述第二向曰葵植物包含至少一個抗除草劑的AHASL基因。這樣的第二向日葵植物包含增加的對一種或多種AHAS抑制性除草劑(特別是咪唑啉酮類除草劑)的抗性。附圖簡述圖1是2X3X2析因?qū)嶒灥慕Y(jié)果的圖示，所述實驗用于測試向日葵基因型(RHA266或MUT31)、除草劑劑量(O、0.25X和0.50X;其中X=50ga.i./ha的咪草啶酸)和馬拉疏磷(O或IOOOga.i./ha)的影響。在噴施馬拉硫磷和除草劑之時，向日葵植物正處于3-4葉的生長階段。在噴施咪草啶酸前30分鐘，向所述植物噴施馬拉石克磷。在噴施除草劑后7天，對所述向日葵植物進行評估，以確定損害得分(damagescore)。在下面的實施例3中提供了另外的詳細描述。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及具有相比于野生型向日葵植物而言增加的對至少一種除草劑的抗性的向日葵植物。如此處下面所描述的，通過下列過程來產(chǎn)生抗除草劑的向日葵植物將野生型(就除草劑抗性而言)向日葵植物暴露于誘變劑，使植物成熟和繁殖，并選擇當與野生型向日葵植物對咪唑啉酮類除草劑的抗性相比較時展現(xiàn)出增強的對咪唑啉酮類除草劑咪草啶酸的抗性的后代植物。本發(fā)明提供了在此處被命名為MUT31的新型抗除草劑的向日葵品系。盡管本發(fā)明不受任何特定的生物學機制束繂，但本發(fā)明的抗除草劑的向日葵植物包含新型除草劑抗性機制，所述新型除草劑抗性機制不依賴于在一個或多個AHASL基因中的突變。除草劑的向日:植物i增加已包含除草劑抗性包括但不限于，咪唑啉酮類抗性)的向日葵植物的除草劑抗性的方法中使用的咪唑啉酮類抗性的新來源。對于本發(fā)明，術語"耐受除草劑的，，和"抗除草劑的，，可互換使用，并且認為具有相同的含義和相同的范圍。類似地，術語"除草劑耐受性"和"除草劑抗性"可互換使用，并且認為具有相同的含義和相同的范圍。同樣，術語"抗咪唑啉酮類的"和"咪唑啉酮類抗性"可互換使用，并且認為分別與術語"耐受咪唑啉酮類的"和"咪唑啉酮類耐受性"具有相同的含義和相同的范圍。本發(fā)明涉及耐受除草劑或抗除草劑的植物，以及用于制備和使用此類植物的方法。"耐受除草劑的"或"抗除草劑的"植物是對于至少一種處于通常殺死正?；蛞吧椭参锘蛘咭种普；蛞吧椭参锷L的水平的除草劑具有耐受性或抗性的植物。在本發(fā)明的一個實施方案中，本發(fā)明的用于增加植物的除草劑抗蛋白的向日葵植物。"抗除草劑的AHASL多核苷酸"是編碼抗除草劑的AHASL蛋白的多核苷酸，其中所述蛋白包含抗除草劑的AHAS活性。"抗除草劑AHASL蛋白"是當至少一種除草劑(已知其干擾AHAS活性，并處于已知抑制野生型AHASL蛋白的AHAS活性的除草劑濃度或水平)存在時，相對于野生型AHASL蛋白的AHAS活性，展示出更高的AHAS活性的AHASL蛋白。此外，此類耐受除草劑或抗除草劑的AHASL蛋白的AHAS活性在此處還可稱為"耐受除草劑的，，或"抗除草劑的，，AHAS活性。此外，認識到可以通過用編碼耐受除草劑或抗除草劑的AHASL蛋白的核苷酸序列轉(zhuǎn)化植物或其祖先來將耐受除草劑或抗除草劑的AHASL蛋白導入植物。這樣的耐受除草劑或抗除草劑的AHASL蛋白由耐受除草劑或抗除草劑的JW"多核普酸編碼?？蛇x擇地，由于在植物或其祖先的基因組中于內(nèi)源^^5X基因中天然發(fā)生的或誘導的突變，耐受除草劑或抗除草劑的AHASL蛋白可在植物中出現(xiàn)。編碼抗除草劑的AHASL蛋白草劑的植物在本領域中是已知的。參見，例如，美國專利號5，013，659、5,731,180、5，767，361、5,545,822、5,736,629、5，773，703、155，773，704、5，952，553和6，274，796;所有這些專利通過提及而合并入本文。本發(fā)明提供了植物、植物組織和植物細胞，其具有增加的對至少一種除草劑(特別是咪唑啉酮類除草劑，更特別地是咪草啶酸、滅草煙或咪草啶酸和滅草煙兩者)的抗性或耐受性。除草劑的優(yōu)選的量或濃度是"有效量"或"有效濃度"。"有效量"和"有效濃度"分別意指這樣的量和濃度，即所述量和濃度足以殺死或抑制相似的野生型植物、植物組織或植物細胞的生長，但所述量不殺死或不同樣嚴重地抑制本發(fā)明的抗除草劑的植物、植物組織和植物細胞的生長。通常，除草劑的有效量是在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)系統(tǒng)中為了殺死目的雜草而常規(guī)使用的量。這樣的量對于本領域技術人員來說是已知的，或可以使用本領域中已知的方法而容易地確定。本發(fā)明的方法可用于增加向日葵植物(包括包含對一種或多種除草劑(例如，抑制或者干擾野生型AHAS酶的活性的除草劑)的抗性的向日葵植物)的除草劑抗性。此類除草劑在此處也可稱為"AHAS抑制性除草劑"，或簡稱為"AHAS抑制劑"。如此處所用的，"AHAS抑制性除草劑"或"AHAS抑制劑"并不是表示限定于干擾AHAS酶的活性的單一除草劑。因此，除非另外提到或從上下文中顯示，"AHAS抑制性除草劑"或"AHAS抑制劑"可以是一種除草劑或者2、3、4或更多種除草劑的混合物，其中的每一種除草劑干擾AHAS酶的活性。"野生型向日葵植物、植物組織或植物細胞"分別意指缺乏本發(fā)明的抗除草劑的向日葵植物(特別是MUT31及其抗除草劑的后裔)的除草劑抗性特征的向日葵植物、植物組織或植物細胞。因此，術語"野生型"的使用不是想要指，向日葵植物、植物組織或植物細胞在其基因組中缺少重組DNA和/或缺少與此處公開的抗除草劑特征不同的抗除草劑特征。如此處所用的，除非另外清楚地指出，術語"植物"意指處于任何發(fā)育階段的植物，以及可附著至或從整個完整植物分離的任何植物部分。此類植物部分包括，但不限于，植物的器官、組織和細胞。具體的植物部分的實例包括莖、葉、根、花序、花、小花、果實、花梗(pedicle)、花序梗、雄蕊、花藥、花粉、柱頭、花柱、子房、花瓣、萼片、心皮、根尖、根冠、根毛、葉毛(leafhair)、種毛(seedhair)、花粉粒、小孢子、子葉、下胚軸、上胚軸、木質(zhì)部、韌皮部、薄壁組織、胚乳、伴胞、保衛(wèi)細胞和任何其他已知的植物的器官、組織和細胞。此外，要認識到種子是植物。本發(fā)明的向日葵植物包括非轉(zhuǎn)基因植物和轉(zhuǎn)基因植物。"非轉(zhuǎn)基因植物"意指在其基因組中缺少重組DNA的植物。"轉(zhuǎn)基因植物"意指在其基因組中包含重組DNA的植物。可通過將重組DNA導入植物的基因組中來產(chǎn)生這樣的轉(zhuǎn)基因植物。當這樣的重組DNA被整合入轉(zhuǎn)基因植物的基因組中時，植物的后代也可包含該重組DNA。這樣的后代植物也是轉(zhuǎn)基因植物，即所述后代植物包含至少一個祖先轉(zhuǎn)基因植物的重組DNA的至少一部分。本發(fā)明提供了此處稱作MUT31的抗除草劑的向日葵品系。2006年8月22日，向美國典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC)的專利保藏所，Mansassas,VA20110USA保藏了至少2500粒來自向日葵07e7/a;^力i^續(xù)陋L.)品系MUT31的種子，并被分配以ATCC專利保藏號PTA-7839。進行為期至少30年的向日葵品系MUT31的保藏，并且在ATCC收到提供保藏的樣品的最新請求后保藏至少5年。在國際承認用于專利程序的微生物保藏布達佩斯條約的條款下維持該保藏。'進行為期至少30年的向日葵品系MUT31的保藏，并且在ATCC收到提供保藏的樣品的最新請求后保藏至少5年。此外，申請者已滿足37C.F.R.§§1.801-1.809的所有要求，包括提供樣品的存活證明。本發(fā)明提供了通過誘變育種產(chǎn)生的MUT31品系的抗除草劑的向日葵植物。通過將野生型向日葵植物暴露于誘變劑，特別是化學誘變劑，更特別是甲磺酸乙酯(EMS),來對植物進行誘變。然而，本發(fā)明不限于由涉及化學誘變劑EMS的誘變方法產(chǎn)生的抗除草劑的向日葵植物。本物。此類誘變方法可涉及，例如，使用任何一種或多種下列誘變劑放射線，例如X-射線、v射線(例如，鈷60或銫137)、中子(例如，原子反應堆中鈾235的核裂變產(chǎn)物)、P射線(例如，從放射性同位素例如磷32或碳14發(fā)射的)和紫外射線(優(yōu)選地，從2500至2900rnn)，和化學誘變劑，例如堿基類似物(例如，5-溴-尿嘧啶)、相關化合物(例如，8-乙氧基咖啡因)、抗生素(例如，鏈黑菌素)、烷化劑(例如,硫芥(sulfurmustards)、氮芥、環(huán)氧化物、ethylenamines、硫酸鹽、磺酸鹽、砜、內(nèi)酯)、疊氮化合物、羥胺、亞硝酸或吖啶。也可通過下列方法來產(chǎn)生抗除草劑的植物使用組織培養(yǎng)方法來挑選包含除草劑抗性突變的植物細胞，然后從其再生出抗除草劑的植物。參見，例如，美國專利號5，773，702和5，859，348，兩者通過提及而以其整體合并入本文。誘變育種的更詳細內(nèi)容可參見"PrincipalsofCultivarDevelopment"Fehr，1993MacmillanPublishingCompany,其公開內(nèi)容通過提及而合并入本文。本發(fā)明的向日葵植物和種子包含MUT31的除草劑抗性特征。此類植物和種子在此處可纟皮稱為包含MUT31性狀。該MUT31性狀將對咪唑啉酮.類除草劑的抗性賦予具有該性狀的植物或種子，無論該性狀在植物中處于雜合狀態(tài)還是純合狀態(tài)。特別地，該MUT31性狀將對至少一種咪唑啉酮類除草劑(特別是咪草啶酸和/或滅草煙)的抗性賦予向日葵植物或種子，其中所述咪唑啉酮類抗性被有機磷酸酯殺蟲劑馬拉疏磷降低或抑制。如本文下面所描述的，發(fā)現(xiàn)在施用咪草啶酸之前向MUT31向日葵植物施用馬拉疏磷后，MUT31向日葵植物對咪唑啉酮類除草劑咪草啶酸的抗性或耐受性被降低或抑制。因此，包含MUT31性狀的向日葵植物和種子包含可被馬拉硫磷抑制的咪唑啉酮類抗性。盡管本發(fā)明不受特定生物學機制束綽，但MUT31向日葵植物的除草劑抗性或MUT31性狀據(jù)信是由于在向日葵的核基因組內(nèi)單個基因中的經(jīng)誘導的突變。本發(fā)明的向日葵植物包括例如對于MUT31性狀而言雜合或純合的MUT31品系的后裔。應當認識到，可以經(jīng)由有性繁殖或者通過本領域中已知的任何無性繁殖方法例如組織培養(yǎng)來產(chǎn)生這樣的后裔。可以通過確定后裔向日葵植物是否包含可被馬拉硫磷抑制的咪唑啉酮類抗性來鑒定包含MUT31性狀的MUT31品系的后裔。本發(fā)明不依賴于用于確定后裔向日葵植物是否包含可被馬拉硫砩抑制的咪唑啉酮類抗性的特定方抗性。所述方法牽涉在施用咪唑啉酮類除草劑之前向MUT31的后裔施用馬拉硫磷，和確定馬拉硫磷是否降低或抑制所述后裔對咪唑啉酮類除草劑的抗性。包含MUT31性狀的后裔包含可被馬拉硫磷抑制的咪唑啉酮類抗性。因此，本發(fā)明的向日葵植物包括，例如作為MUT31的后裔并且包含可被馬拉疏磷抑制的咪唑啉酮類抗性的那些向日葵植物。本發(fā)明提供了用于增強向日葵植物、植物組織、植物細胞或其他宿主細胞對至少一種除草劑(特別是，咪唑啉酮類除草劑或者兩種或更多種咪唑啉酮類除草劑的混合物)的耐受性或抗性的方法。對于本發(fā)明，咪唑啉酮類除草劑包括，但不限于，PURSUIT(咪草煙)、CADRE(甲滅草煙)、RAPTOR(咪草啶酸)、SCEPTER(滅草會)、ASSERT(imazethabenz)、ARSENAL(滅草煙)、前述除草劑中任一種的衍生物和前述除草劑中兩種或更多種的混合物，例如，滅草煙/咪草啶酸(ODYSSEY)。更具體地，咪唑啉酮類除草劑可選自，但不限于，2-(4-異丙基-4-曱基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-煙酸、[2-(4-異丙基)-4-][甲基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-3-喹啉羧]酸、[5-乙基-2-(4-異丙基-]4-甲基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-煙酸、2-(4-異丙基-4-甲基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-5-(曱氧基甲基)-煙酸、[2-(4-異丙基-4-曱基-5-氧代-2-]咪唑啉-2-基)-5-甲基煙酸、和[6-(4-異丙基H-]甲基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-間-甲苯甲酸曱酯與[2-(4-異丙基-4-甲基-5-]氧代-2-咪唑啉-2-基)-對-甲苯甲酸甲酯的混合物。優(yōu)選使用5-乙基-2-(4-異丙基-4-曱基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-煙酸和[2-(4-異丙基-4-甲基-5-氧代-2-咪唑啉-2-]基)-5-(甲氧基曱基)-煙酸。特別優(yōu)選使用[2-(4-異丙基-4-]甲基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-5-(曱氧基曱基)-煙酸。本發(fā)明的抗除草劑植物可在用于控制雜草的方法中使用。因此，19本發(fā)明進一步提供了在本發(fā)明的抗除草劑的向日葵植物附近控制雜草的方法。所述方法包括向所述雜草和向所述抗除草劑的向日葵植物施用有效量的除草劑，其中所述植物具有相比于野生型植物而言增加的對至少一種除草劑特別是咪唑啉酮類或磺酰脲類除草劑的抗性。在此類用于控制雜草的方法中，本發(fā)明的抗除草劑的植物優(yōu)選地是作物植物，包括，但不限于，向日葵、苜蓿、蕓苔屬物種、大豆、棉花、紅花、花生、煙草、西紅柿、馬鈴薯、小麥、水稻、玉米、高梁、大麥、黑麥、稷和高梁。劑的抗性的植物，多種制劑可用于保護植物免受雜草的侵害，從而增強植物的生長和減少對營養(yǎng)的竟爭?？蓡为毜厥褂贸輨┰诖颂幟枋龅闹参锏闹車鷧^(qū)域內(nèi)進行雜草的苗前(pre-emergence)、苗后(post-emergence)、植前(pre-planting)和植時(atplanting)的控制，或者可使用包含其他添加劑的咪唑啉酮類除草劑制劑。也可將除草劑用于種子處理。即，在種子播種前或播種過程中，可將有效濃度或有效量的除草劑、或包含有效濃度或有效量的除草劑的組合物直接施用于種子?？稍谶溥蜻惢蚧酋ｋ孱惓輨┲苿┗蚪M合物中使用的添加劑包括其他除草劑、去污劑、佐劑、鋪展劑、粘著劑、穩(wěn)定劑等。除草劑制劑可以是濕潤的或干燥的制劑，并可包括，但不限于，可5充動小生粉齊'〗(flowablepowders)、專'U由和'液體,濃縮劑(liquidconcentrates)?？砂凑粘Ｒ?guī)方法，例如通過噴灑、灌溉、撒粉(dusting)、包被等來使用除草劑和除草劑制劑。本發(fā)明提供了具有增加的對至少一種除草劑特別是咪唑啉酮類除草劑的抗性的種子。這樣的種子包括，例如，作為MUT31向日葵品系的抗除草劑的后裔的向日葵種子。MUT31向日葵品系的"后裔"包括通過有性和/或無性繁殖而源自MUT31的任何植物、植物細胞或植物部分，已經(jīng)將MUT31的代表性種子保藏在ATCC，并被分配以ATCC專利保藏號PTA-7839。例如，這樣的后裔包括通過下列過程而產(chǎn)生的植物將第一植物與第二植物雜交從而產(chǎn)生第三植物的種子(即，后裔)，其中所述第一植物是MUT31向日葵植物，和所述第二植物是不為MUT31向日葵植物的另一種向日葵植物。這樣的后裔也包括傳自第三植物的任何植物(不論是通過有性和/或無性繁殖而產(chǎn)生的)。例如，來自第三植物的細胞、組織或器官可用于通過無性繁殖方法來產(chǎn)生第四植物，所述無性繁殖方法包括但不限于體外植物細胞、組織和器官培養(yǎng)方法以及牽涉枝插(stemcutting)的生根的方法。對于本發(fā)明，MUT31的抗除草劑的后裔是這樣的MUT31的后裔，其通過傳自一種或多種MUT31向日葵植物而包含MUT31的除草劑抗性特征。換句話說，這樣的抗除草劑的后裔已通過有性繁殖、無性繁殖或其組合而遺傳了MUT31向日葵植物的除草劑抗性特征。除非另外清楚地指明或從上下文中顯示，植物的"后代"包括其祖先可追溯至該植物的任何后續(xù)世代的植物。類似地，除非另外通過上下文而清楚地指明，MUT31的"抗除草劑的后代"包括其祖先可追溯代的植物。本發(fā)明提供了用于通過常規(guī)的植物育種法(牽涉有性繁殖)來產(chǎn)生抗除草劑的向日葵植物特別是抗除草劑的向日葵植物的方法。所述方法包括將包含對除草劑的抗性的第一植物與不抗除草劑的第二植物雜交。所述第一植物可以是本發(fā)明的抗除草劑的植物中的任一種植物，其包括，例如，包含MUT31向日葵植物的抗除草劑抗性特征的向日葵植物，特別是MUT31向日葵植物和MUT31的抗除草劑的后裔。所述第二植物可以是當與第一植物雜交時能夠產(chǎn)生有生活力的后代植物(即，種子)的任何植物。通常，但非必需地，第一和第二植物是相同的物種。本發(fā)明的方法還可包括將第一次雜交的后代植物與具有與第一或第二植物相同的品系或基因型的植物回交一代或多代?？蛇x擇地，可使第一次雜交或任何隨后的雜交的后代與具有與第一或第二植物不同的品系或基因型的第三植物進行雜交。本發(fā)明的方法可額外地包括選擇包含第一植物的除草劑抗性特征的植物。21本發(fā)明進一步提供了通過常規(guī)的植物育種方法(牽涉有性繁殖)來增加植物特別是抗除草劑的向日葵植物的除草劑抗性的方法。所述方法包括將包含對除草劑的抗性的第一植物與第二植物雜交，所述第二植物可以抗或不抗除草劑，或者可以抗相對于第一植物來說不同的除草劑。所述第一植物可以是本發(fā)明的抗除草劑的向日葵植物中的任一種植物，其包括，例如，MUT31向日葵植物和其抗除草劑的后裔。所述第二植物可以是當與第一植物雜交時能夠產(chǎn)生有生活力的后代植物(即，種子)的任何植物。通常，但非必需地，第一和第二植物是相同的物種。由本發(fā)明的該方法產(chǎn)生的后代植物，當與第一或第二植物或兩者相比較時，具有增加的或增強的對除草劑的抗性。當?shù)谝缓偷诙参锟共煌某輨r，后代植物將具有組合的第一和第二植物的除草劑抗性特征。本發(fā)明的方法還可包括將第一次雜交的后代植物與具有與第一或第二植物相同的品系或基因型的植物回交一代或多代。可選擇地，可使第一次雜交或任何隨后的雜交的后代與具有與第一或第二植物不同的品系或基因型的第三植物進行雜交。本發(fā)明的方法可額外地包括選擇包含第一植物、第二植物或第一和第二植物兩者的除草劑抗性特征的植物。本發(fā)明提供了用于增強或增加向日葵植物對至少一種咪唑啉酮類除草劑的抗性的方法。由于公認的它們在體內(nèi)和體外抑制AHAS活性的能力，咪唑啉酮類除草劑已知為AHAS抑制性除草劑。除了咪唑啉酮類除草劑以外，AHAS抑制性除草劑包括例如磺酰脲類除草劑、三唑并嘧啶類除草劑、嘧啶基氧基苯甲酸酯類除草劑和磺?；被?羰基三唑啉酮類除草劑。在本發(fā)明的實施方案中，所述方法包括增強或增加包含對AHAS抑制性除草劑的抗性的抗除草劑的向日葵植物的抗性，其中所述對AHAS抑制性除草劑的抗性是由于一種或多種抗除草劑的AHASL蛋白而產(chǎn)生的。這樣的抗除草劑的向日葵植物可以抗一種或多種AHAS抑制性除草劑，例如咪唑啉酮類除草劑、磺酰脲類除草劑、三唑并嘧啶類除草劑、嘧啶基氧基苯曱酸酯類除草劑、磺酰基氨基-羰基三唑啉酮類除草劑或咪唑啉酮類除草劑的實例?；酋ｋ孱惓輨┌?，但不限于，綠磺隆、甲磺隆、甲嘧磺隆、氯嘧磺隆、噻吩磺隆、苯磺隆、芐嘧磺隆、煙嘧磺隆、胺苯磺隆、砜嘧磺隆、氟胺磺隆、醚苯磺隆、氟嗜磺隆、醚磺隆、amidosulfiuon、fluzasulfuron、唑吡嘧磺隆、吡嘧磺隆、吡氯磺隆、四哇嗜磺隆、cyclosulfuron、乙氧嘧磺隆、啶嘧磺隆、氟啶嘧磺隆、甲酰胺磺隆、碘磺隆(iodosulfuron)、環(huán)氧嘧磺隆、甲磺胺磺隆、氟磺隆、磺酰磺隆、三氟啶磺隆、三氟甲磺隆、前述除草劑中任一種的衍生物、和前述除草劑中兩種或更多種的混合物。三唑并嘧啶類除草劑包括，但不限于，氯酯磺草胺(cloransulam)、雙氯磺草胺、雙氟磺草胺、唑嘧磺草胺、磺草唑胺和五氟磺草胺。本發(fā)明的嘧啶基氧基苯曱酸酯類除草劑包括，但不限于，雙草醚(bispyribac)、嗜草疏醚(pyrithiobac)、嘧草醚(pyrifflinobac)、嘧嚏厲草醚和環(huán)酯草醚。磺?；被?羰基三唑啉酮類除草劑包括，但不限于，氟酮磺隆(flucarbazone)和丙苯磺隆(propoxycarbazone)。要認識到，嘧啶基氧基苯甲酸酯類除草劑和嘧啶基硫代苯甲酸酯類除草齊寸緊密相關，并且由WeedScienceSocietyofAmerica都歸納在后一名稱的標題之下。因此，本發(fā)明的除草劑還包括嘧啶基硫代苯甲酸酯類除草劑，包括，但不限于，上述的嘧啶基氧基苯甲酸酯類除草劑。本發(fā)明的向日葵植物可以是非轉(zhuǎn)基因的或轉(zhuǎn)基因的。具有增加的對至少一種咪唑啉酮類除草劑的抗性的非轉(zhuǎn)基因向曰葵植物的實例包括MUT31向日葵植物，MUT31的代表性種子已經(jīng)以專利保藏號PTA-7839保藏在ATCC;或MUT31的突變體、重組體或基因工程;時生物；或MUT31的任何后代的突變體、重組體或基因工程衍生物；或作為這些植物中任何一種植物的后代的植物；或包含MUT31的除草劑抗性特征的植物，特別是MUT31的抗除草劑的后裔。具有增加的對至少一種咪唑啉酮類除草劑的抗性的轉(zhuǎn)基因向日葵植物的實例是作為MUT31的基因工程衍生物的向日葵植物，所述基因工程衍生物包含MUT31的除草劑抗性特征。此類基因工程衍生物可在其基因組中包含例如目的轉(zhuǎn)基因，包括但不限于，抗除草劑的AHASL基因、賦予疾病抗性的基因和賦予昆蟲抗性的基因。本發(fā)明提供了牽涉使用咪唑啉酮類除草劑的方法。在這些方法中，可通過本領域已知的任何方法，包括，但不限于，種子處理、土壤處理和葉處理，來施用咪唑啉酮類除草劑。在施用之前，可將咪唑啉酮類除草劑轉(zhuǎn)變成慣用的制劑，例如溶液、乳液、懸浮液、粉末(dusts)、粉劑、糊劑和顆粒劑。使用形式取決于特定的所希望的目的；在各個情況下，應當確保本發(fā)明的化合物的精細和均勻的分布。以已知的方式制備制劑(參見例如，關于綜述可見US3，060，084,EP—A707445(對于、液體濃縮齊'J),Browning,"Agglomeration",ChemicalEngineering,Dec.4，1967，147—48，Perry，sChemicalEngineer'sHandbook,第4版，McGraw-Hill，NewYork,1963，第8-57頁，以及下列，W091/13546，US4,172,714，US4,144,050，US3,920,442，US5，180，587，US5,232,701，US5,208,030,GB2,095,558,US3,299,566,Klingman，WeedControlasaScience,JohnWileyandSons,Inc.,NewYork,1961，Hance等人,WeedControlHandbook,第8版，BlackwellScientificPublications,Oxford,1989,和Mollet，H.，Grubemann，A.，F(xiàn)ormulationtechnology,WileyVCHVerlagGmbH,Weinheim(Germany),2001，2.D.A.Knowles，ChemistryandTechnologyofAgrochemicalFormulations,KluwerAcademicPublishers,Dordrecht,1998(ISBN0-7514-0443-8)),例如通過用適合于配制農(nóng)用化學藥品的輔助劑例如溶劑和/或載體擴充活性化合物，如果想要，可使用乳化劑、表面活性劑和分散劑、防腐劑、防沫劑、防凍劑，對于種子處理制劑還任選地可用著色劑和/或粘合劑和/或膠凝劑。合適的溶劑的實例是水、芳香族溶劑(例如Solvesso產(chǎn)品，二曱苯)、石蠟(例如礦物油級分)、醇類(例如甲醇、丁醇、戊醇、苯甲醇)、酮類(例如環(huán)己酮、Y-丁內(nèi)酯)、吡咯烷酮(NMP，NOP)、乙酸酯(乙二醇二乙酸酯)、二醇類、脂肪酸二曱基酰胺、脂肪酸和脂肪酸酯。原則上，也可使用溶劑混合物。合適的栽體的實例是磨細的天然礦物(例如高嶺土、粘土、滑石、白堊)和磨細的合成礦物(例如高度分散的二氧化硅、硅酸鹽)。合適的乳化劑是非離子和陰離子型乳化劑(例如聚氧乙烯脂肪醇醚、烷基磺酸鹽和芳基磺酸鹽)。分散劑的實例是木質(zhì)素-亞硫酸鹽(酯)廢液和甲基纖維素。所用的合適的表面活性劑是木素質(zhì)磺酸、萘磺酸、苯酚磺酸、二丁基萘磺酸、烷基芳基磺酸、烷基硫酸、烷基磺酸、脂肪醇硫酸酯、脂肪酸和硫酸化脂肪醇二醇醚的堿金屬、堿土金屬和銨鹽，此外還有磺化萘和萘衍生物與曱醛的縮合物、萘或萘磺酸與苯酚和曱醛的縮合物、聚氧乙烯辛基苯酚醚、乙氧基化異辛基苯酚、辛基苯酚、壬基苯酚、烷基苯酚聚乙二醇醚、三丁基苯基聚乙二醇醚、三硬脂基苯基聚乙二醇醚、烷基芳基聚醚醇、醇和脂肪醇環(huán)氧乙烷縮合物、乙氧基化蓖麻油、聚氧乙烯烷基醚、乙氧基化聚氧丙烯、月桂醇聚乙二醇醚縮醛、山梨糖醇酯、木質(zhì)素亞硫酸鹽(酯)廢液和曱基纖維素。適合用于制備可直接噴施的溶液、乳液、糊劑或油分散體的物質(zhì)是具有中至高沸點的礦物油級分，例如煤油或柴油，此外還有煤焦油和植物或動物來源的油，脂族烴、環(huán)烴和芳族烴，例如曱苯、二甲苯、石蠟、四氫萘、烷基化萘或其衍生物，甲醇，乙醇，丙醇，丁醇，環(huán)己醇，環(huán)己酮，異佛爾酮，高極性溶劑，例如二曱亞砜、N-曱基吡咯烷酮或水。也可向制劑中加入防凍劑，例如甘油、乙二醇、丙二醇和殺菌劑。合適的防沫劑是例如基于硅氧烷或硬脂酸鎂的防沫劑。合適的防腐劑是例3口雙氣盼和enzylalkoholhemiformal。種子處理制劑可額外地包含粘合劑和任選地著色劑?？杉尤胝澈蟿┮栽谔幚砗蟠龠M活性材料在種子上的附著。合適的粘合劑是嵌段共聚物E0/P0表面活性劑，還有聚乙烯醇類、聚乙烯吡咯25烷酮類、聚丙烯酸酯類、聚甲基丙烯酸酯類、聚丁烯類、聚異丁烯類、聚苯乙烯、聚乙烯胺類、聚乙烯酰胺類、聚乙烯亞胺類(Lupasol、Polymin)、聚醚、聚氨酯、聚乙酸乙烯酯、纖基乙酸鈉和源自這些聚合物的共聚物。任選地，制劑中還可包含著色劑。種子處理制劑的合適的著色劑或染料是羅丹明B、C.L顏料紅112、C.I.溶劑紅l、顏料藍15:4、顏料藍15:3、顏料藍15:2、顏料藍15:1、顏料藍80、顏料黃l、顏料黃13、顏料紅112、顏料紅48:2、顏料紅48:1、顏料紅57:1、顏料紅53:1、顏料橙43、顏料橙34、顏料橙5、顏料綠36、顏料綠7、顏料白6、顏料棕25、堿性紫IO、堿性紫49、酸性紅51、酸性紅52、酸性紅14、酸性藍9、酸性黃23、堿性紅IO、堿性紅108。合適的膠凝劑的實例是角叉菜(SaUagel)?？赏ㄟ^將活性物質(zhì)與固體載體混合或相伴碾磨來制備粉末、用于撒播的材料和粉劑產(chǎn)品(dustableproducts)?？赏ㄟ^將活性物質(zhì)結(jié)合至固體載體來制備顆粒劑，例如包被的顆粒劑、浸漬的顆粒劑和均質(zhì)的顆粒劑。固體載體的實例是礦物土，例如珪膠，珪酸鹽，滑石，高嶺土，attaclay，石灰石，石灰，白堊，紅玄武土，黃土，粘土，白云石，硅藻土，硫酸鈣，硫酸鎂，氧化鎂，磨細的合成材料，肥料，例如，硫酸銨、磷酸銨、硝酸銨、尿素，和植物來源的產(chǎn)物，例如谷類粗粉、樹皮粗粉、木材粗粉和堅果殼粗粉，纖維素粉末，和其他固體載體。一般地，制劑包含O.01-95wt。/。的，優(yōu)選地O.1-90wt。/。的咪唑啉酮類除草劑。在該情況下，以90wt%-100wt。/。的純度，優(yōu)選地以95wt0/。-100wt。/。的純度(根據(jù)NMR譜)使用咪唑啉酮類除草劑。對于種子處理目的，可將各個制劑稀釋2-10倍，從而導致即時可用的制備物中的濃度為0.01-60wt%，優(yōu)選地O.1-40wt。/。的活性化合物?？删瓦@樣使用咪唑啉酮類除草劑，或者以其制劑的形式或從中制備的使用形式進行使用，例如以可直接噴灑的溶液、粉劑、懸浮液或分散體、乳液、油分散體、糊劑、粉劑產(chǎn)品、用于撒播的材料、或顆粒劑的形式進行使用，通過噴灑、霧化、撒粉、撒播或灌注進行施用。使用形式完全取決于想要的目的；其希望在每種情況下確保本發(fā)明的咪唑啉酮類除草劑的最佳可能的分布?？赏ㄟ^加入水而從乳液濃縮物、糊劑或可濕性粉劑(可噴灑的粉末、油分散體)制備水性使用形式。為制備乳劑、糊劑或油分散體，借助于濕潤劑、增粘劑、分散劑或乳化劑可將就這樣的或溶解在油或溶劑中的物質(zhì)在水中進行均質(zhì)化。然而，也可能制備由活性物質(zhì)、濕潤劑、增粘劑、分散劑或乳化劑和如果合適還有溶劑或油組成的濃縮物，這樣的濃縮物適合于用水進行稀釋。即時可用的制劑中的活性化合物濃度可在相對寬的范圍內(nèi)變化。一般地，其為O.0001-10wt%，優(yōu)選地0.01-1wt%。咪唑啉酮類除草劑還可成功地用于超低容量過程(ULV)中，從而可能施用包含超過95wt。/。的活性化合物的制劑，或甚至施用無添加劑的活性化合物。下面是制劑的實例1.用于葉面施用的用水稀釋的產(chǎn)品。對于種子處理目的，可將這樣的產(chǎn)品以稀釋或未稀釋的形式施用于種子。A)水溶性濃縮物(SL、LS)將10重量份的咪唑啉酮類除草劑溶解在90重量份的水或水溶性溶劑中。作為選擇，可加入濕潤劑或其他輔助劑。在用水稀釋時，咪唑啉酮類除草劑溶解，由此獲得具有10。/。(w/w)的咪唑啉酮類除草劑的制劑。B)可分散的濃縮物(DC)將20重量份的咪唑啉酮類除草劑溶解在添加了IO重量份的分散劑例如聚乙烯吡咯烷酮的7O重量份的環(huán)己酮中。用水稀釋產(chǎn)生分散體，由此獲得具有20%(w/w)的咪唑啉酮類除草劑的制劑。C)乳油(EC)將15重量份的咪唑啉酮類除草劑溶解在添加了十二烷基苯磺酸鈣和蓖麻油乙氧基化物(在每種情況下為5重量份)的7重量份的二曱苯中。用水稀釋產(chǎn)生乳劑，由此獲得具有15%(w/w)的咪唑啉酮類除草劑的制劑。D)乳劑(EW、E0、ES)將25重量份的咪唑啉酮類除草劑溶解在添加了十二烷基苯磺酸釣和蓖麻油乙氧基化物(在每種情況下為5重量份)的35重量份的二曱苯中。借助于乳化器(例如Ultraturrax)將該混合物導入30重量份的水中，并制備成均一的乳劑。用水稀釋產(chǎn)生乳劑，由此獲得具有25。/。(w/w)的咪唑啉酮類除草劑的制劑。E)懸浮劑(SC、0D、FS)在攪動式球磨機中，將20重量份的咪唑啉酮類除草劑在加入了10重量份的分散劑、濕潤劑和70重量份的水或有機溶劑的情況下粉碎成粉末，從而產(chǎn)生精細的咪唑啉酮類除草劑懸浮液。用水稀釋產(chǎn)生咪唑啉酮類除草劑的穩(wěn)定的懸浮液，由此獲得具有20%(w/w)的咪唑啉酮類除草劑的制劑。F)水分散性顆粒劑和水溶性顆粒劑(WG、SG)將50重量份的咪唑啉酮類除草劑在加入了50重量份的分散劑和濕潤劑的情況下精細地進行碾磨，并借助于技術器具(例如擠出、噴霧塔、流化床)而制備為水分散性或水溶性的顆粒。用水稀釋產(chǎn)生咪唑啉酮類除草劑的穩(wěn)定的分散體或溶液，由此獲得具有50%(w/w)的咪唑啉酮類除草劑的制劑。G)水分散性粉劑和水溶性粉劑(WP、SP、SS、WS)將75重量份的咪唑啉酮類除草劑在加入了25重量份的分散劑、濕潤劑和硅膠的情況下在轉(zhuǎn)子_定子研磨機中進行碾磨。用水稀釋產(chǎn)生咪唑啉酮類除草劑的穩(wěn)定的分散體或溶液，由此獲得具有75%(w/w)的咪唑啉酮類除草劑的制劑。I)凝膠制劑(GF)在攪動式球磨機中，將20重量份的咪唑啉酮類除草劑在加入了10重量份的分散劑、1份重量的凝膠劑濕潤劑和70重量份的水或有機溶劑的情況下粉碎成粉末，從而產(chǎn)生精細的咪唑啉酮類除草劑懸浮液。用28水稀釋產(chǎn)生咪唑啉酮類除草劑的穩(wěn)定的懸浮液，由此獲得具有20%(w/w)的咪唑啉酮類除草劑的制劑。該凝膠制劑適合用于種子處理。2.用于葉面施用的非稀釋地施用的產(chǎn)品。對于種子處理目的，可將這樣的產(chǎn)品以稀釋的形式施用于種子。A)粉劑(DP、DS)將5重量份的咪唑啉酮類除草劑精細地碾磨，并緊密地與95重量份的精細粉碎的高嶺土混合。這產(chǎn)生了具有5%(W'w)的咪唑啉酮類除草劑的粉劑產(chǎn)品。B)顆粒劑(GR、FG、GG、MG)將O.5重量份的咪唑啉酮類除草劑精細地碾磨。并將其與95.5重量份的載體組合，由此獲得具有0.5%(w/w)的咪唑啉酮類除草劑的制劑?，F(xiàn)有的方法是擠出、噴霧干燥或流化床。這產(chǎn)生了用于葉面使用的非稀釋地施用的顆粒劑。常規(guī)的種子處理制劑包括例如可流動性濃縮物(flowableconcentrates)FS、液劑LS、用于干處理的粉劑DS、用于漿處理的水分散性粉劑WS、水溶性粉劑SS和乳劑ES和EC以及凝膠制劑GF。這些制劑可以以稀釋的或未稀釋的形式施用于種子。在播種前施用于種子，或直接施用在種子上。在優(yōu)選的實施方案中，使用FS制劑進行種子處理。一般地，F(xiàn)S制劑可包含1-800g/l的活性成分、1-200g/l的表面活性劑、0-200g/l的防凍劑、0-400g/l的粘合劑、0-200g/l的色素和直至l升的溶劑，所述溶劑優(yōu)選地是水。本發(fā)明提供了本發(fā)明的抗除草劑的植物的種子，特別是作為MUT31的抗除草劑的后裔的種子。關于種子處理，使用除草劑，優(yōu)選地選自下列AHAS抑制性除草劑的除草劑，或使用包含AHAS抑制性除草劑的制劑，來處理本發(fā)明的種子，所述AHAS抑制性除草劑是例如酰嘧磺隆、四唑嘧磺隆、芐嘧磺隆、氯嘧磺隆、綠磺隆、醚磺隆、環(huán)丙嘧磺隆、胺苯磺隆、乙氧嘧磺隆、啶嘧磺隆、氟啶嘧磺隆、甲酰胺磺隆、吡氯磺隆、唑吡嘧磺隆、碘磺隆、甲磺胺磺隆、曱磺隆、煙嘧磺隆、環(huán)氧嘧磺隆、氟嘧磺隆、氟磺隆、吡嘧磺隆、砜嘧磺隆、甲嘧磺隆、磺?；锹?、噻吩磺隆、醚苯磺隆、苯磺隆、三氟啶磺隆、氟胺磺隆、三氟甲磺隆、咪草酸(iinazamethabenz)、咪草啶酸、甲滅草煙、滅草煙、滅草喹、咪草煙、氯酯磺草胺、雙氯磺草胺、雙氟磺草胺、唑嘧磺草胺、磺草唑胺、五氟磺草胺、雙草醚、嘧草醚、丙苯磺隆、氟酮磺隆、嘧啶將草醚、環(huán)酯草醚、嘧草硫醚及其混合物。優(yōu)選地，本發(fā)明的AHAS抑制性除草劑是咪唑啉酮類除草劑。術語"種子處理"包括本領域已知的所有合適的種子處理技術，例如拌種(seeddressing)、種子包衣(seedcoating)、種子涂粉(seeddusting)、浸種(seedsoaking)和種子丸?；?seedpelleting)。根據(jù)本發(fā)明的一個變化形式，本發(fā)明的進一步目的是處理土壤的方法，其通過施用任一作為組合物/制劑的包含咪唑啉酮類除草劑的顆粒制劑(例如任選地具有一種或多種固體或液體的、農(nóng)業(yè)上可接受的載體和/或任選地具有一種或多種農(nóng)業(yè)上可接受的表面活性劑的顆粒制劑)來進行，特別是施用到條播機中。有利地，在例如谷類、玉米、棉花和向日葵的苗床中使用該方法。本發(fā)明還包括用含有至少一種ALS抑制劑的種子處理制劑包被的或包含所述種子處理制劑的種子，所述ALS抑制劑選自酰嗜磺隆、四唑嘧磺隆、芐嘧磺隆、氯嘧磺隆、綠磺隆、醚磺隆、環(huán)丙嘧磺隆、胺苯磺隆、乙氧嘧磺隆、啶嘧磺隆、氟啶嘧磺隆、甲酰胺磺隆、吡氯磺隆、唑吡嘧磺隆、碘磺隆、甲磺胺磺隆、甲磺隆、煙嘧磺隆、環(huán)氧嘧磺隆、氟嘧磺隆、氟磺隆、吡嘧磺隆、砜嘧磺隆、甲嘧磺隆、磺?；锹?、噻吩磺隆、醚苯磺隆、苯磺隆、三氟啶磺隆、氟胺磺隆、三氟甲磺隆、咪草酸、咪草啶酸、甲滅草煙、滅草煙、滅草喹、咪草煙、氯酯磺草胺、雙氯磺草胺、雙氟磺草胺、唑嘧磺草胺、磺草唑胺、五氟磺草胺、雙草醚、嘧草醚、丙苯磺隆、氟酮磺隆、嘧啶肟草醚、環(huán)酯草醚和嘧草硫醚。術語"種子"包括所有種類的種子和植物繁殖體，其包括但不限30于真正的種子、插條、吸根、球莖、鱗莖、果實、塊莖、谷粒、扦插條(cuttings)、伐條(cutshoot)等，和在優(yōu)選的實施方案中表示真正的種子。術語"用...包被和/或包含"一般表示，活性成分在施用時絕大部分存在于繁殖產(chǎn)品的表面上，盡管依賴于施用方法，或多或少的成分可能滲透入繁殖產(chǎn)品中。當(重新)種植所述繁殖產(chǎn)品時，其可能吸收活性成分。在植物播種前和植物出苗前，通過對種子進行噴灑或撒粉，使用在種子的處理中，通過用有效量的咪唑啉酮類除草劑或包含咪唑啉酮類除草劑的制劑處理種子來施用相應的制劑。此處，施用率通常是O.1g-10kga.i./100kg種子(或a.i.的混合物，或制劑)，優(yōu)選地lg-5kg/100kg種子，特別地lg-2.5kg/100kg種子。對于特定的作物例如萵苣，施用率可更高。本發(fā)明提供了用于防治不希望的植被或控制雜草的方法，所述方法包括在播種前和/或在催芽后將本發(fā)明的抗性植物的種子與咪唑啉酮類除草劑接觸。所述方法還可包括在田間的土壤中或在溫室中的盆栽介質(zhì)中播種種子。所述方法特別地可用于在緊鄰種子的附近防治不希望的植被或控制雜草。"控制不希望的植被"可理解為表示，殺死雜草和/或延緩或抑制雜草的正常生長。雜草，在廣義上理解為表示在不希望其生長的位置處生長的所有植物。本發(fā)明的雜草包括，例如，雙子葉和單子葉的雜草。雙子葉雜草包括，但不限于下列屬的雜草白芥屬(W/2"")、獨行菜屬(Ze/2V/wz7)、拉拉藤屬(Ca/y咖)、繁縷屬(5Ye"ar/a)、母菊屬(#"r/caWa)、春黃菊屬(紐力e范/.s)、牛膝菊屬(CW/z^柳)、藜屬(C力e/7o/70if/咖)、蕁麻屬(^r".ca)、千里光屬(Se/7e".c0、覽屬(J/z7ara/U力i/s)、馬齒莧屬(尸orfu/aca)、蒼耳屬(Zs/UA/wz)、理應用。旋花屬(Co/2Fo/Kw/i/s)、番薯屬(/po邁oea)、蓼屬(尸o7/go/7w邁)、田*屬(^es6a/7/a)、脈草屬(J邁6ros/a)、薊屬(C/rs/"邁)、飛廉屬(6W廳)、苦苣菜屬(So/7由s)、癡屬W廳邁)、薄菜屬(紐Z，)、節(jié)節(jié)菜屬(i0"/a)、母草屬("/2^i7/S)、野芝麻屬(Za/zz/w/z7)、婆婆納屬(Kero//ca)、苘麻屬(/^i/〃7o/j)、刺酸模屬(齒e力、曼陀羅屬(/a"ra)、堇菜屬(r/o/a)、鼬瓣花屬(Ca/eo;^/s)、器粟屬(尸a戸er)、矢車菊屬(Ce自wrea)、車軸草屬(7W/"o7/咖)、毛K屬(Aa/7W2Ci/7:/51)和蒲公英屬(raraiaci/邁)。單子葉雜草包括，但不限于下列屬的雜草稗屬(Ac力2'/70c力/oa)、狗尾草屬(5WaWa)、黍?qū)?戶a/72.國)、馬唐屬("/g/"Ws)、梯牧草屬(戶力/ei/邊)、早熟禾屬(戶oa)、羊茅屬(尸eWwca)、蟋蟀草屬(i7euW/2e)、臂形草屬(SracA/ar/a)、黑麥草屬(Zo77"邁)、雀麥屬(萬i7旭M)、燕麥屬(Jre/7a)、莎草屬(OTeiT^)、高梁屬(Soi^力w邁)、水草屬(^卿y擺)、狗牙根屬(C/"油/2)、雨久花屬(l歸由r/a)、飄拂草屬(/Y/z76r/W/;//、)、慈姑屬(5^g/〃ar/a)、荸齊屬(^/eoc力ar/s)、薦草屬(Sc2'777i/s)、雀稗屬(戶as/7a7"/z7)、甲鳥觜草屬(/sc/ae邁wiZ7)、尖瓣花屬(S/7力e/2oc/ea)、龍爪茅屬(Zac0^o"e//"邁)、剪股穎屬(爿^ro"/51)、看麥^良屬(J/o/7ecwr^)和阿披拉草屬(Jpera)。此外，本發(fā)明的雜草可包括，例如，生長在不希望的位置處的作物植物。例如，如果在大豆植物的田中不想要玉米植物，那么可以將在主要包含大豆植物的田中的自生自長的玉米植物當作雜草。此處所用的冠詞"a"和"an"是指該冠詞的一個或多于一個(即，至少一個)的語法對象。舉例來說，"要素(anelement)"表示一種或多種要素。如此處所用的，單詞"包含"或"包括"，將理解為表示包括所述的要素、整數(shù)或步驟或者要素、整體或步驟的組，但不排除任何其他的要素、整數(shù)或步驟或者要素、整數(shù)或步驟的組。以舉例說明的方式而不是以限定的方式提供下列實施例。實施例l:向日葵品系RHA266的誘變和抗咪唑啉酮類的植物的選擇在第l個生長季節(jié)的春季，在AdvantaSemillasBiotechResearchStation,Balcarce，BsAs，Argentina,在戶夕卜播種40行向日葵(〃e/2'a/^力Ma/myM)品系RHA266，然后用甲磺酸乙酯(EMS，也稱作甲磺酸乙基酯)處理一部分所述植物。EMS是通常在DM中誘導G.C至A.T轉(zhuǎn)換的已知的誘變劑(Jander等人(2003)尸7a/7f/%/;y/o7.131:139-146)。用包含O.5°/、5%或10%U/v)EMS的溶液處理植物。對于每種EMS處理，處理13行向日葵植物。在開花前，給所有M。植物套袋以確保所得的Mi種子是自花傳粉的產(chǎn)物。收獲這些來自每種EMS處理的種子頭狀花序，并批量脫粒。在下一個生長季節(jié)，在戶外播種Mi種子，每種處理在分開的地塊中。20天后，當植物處于2-4對葉的生長階段時，用2xSWEEPER70DG(100ga.i./ha)噴灑所有經(jīng)EMS處理的植物。SWEEPER中的活性成分是咪草啶酸。在噴施除草劑后，總共54林植物存活，并選擇作為假定的抗性植物。44林抗性植物達到開花，產(chǎn)生花粉和M2種子。每種EMS處理中的44林能育的抗性植物的分布顯示于表1中。表l.從每種EMS處理重新獲得的Mi抗咪唑啉酮類的向日葵植物的數(shù)目EMS濃度(％)重新獲得的抗性植物的數(shù)目0.5195.091016從每抹單個存活Mi植物中采集組織樣品，并提取來自每個樣品的DNA以進行在下面實施例2中所描述的PCR擴增和測序研究。在Fargo，ND的單個地塊中播種由所述44林能育的Mi植物中的每林植物所產(chǎn)生的M2種子，然后在2-4對葉的生長階段時用0.5xSWEEPER3370DG(25gai/ha的咪草啶酸)進行噴灑。選擇所述地塊之一作為純合的耐受性植物，并且命名為MUT31。收獲MUT31的19林M2植物，在2003-2004的夏天在Balcarce播種它們的M2:3后代，并且讓所得的植物成熟，然后自花授粉。收獲來自一塊地塊的M4種子，并且基于表型觀察將其宣布為原原種(breederseed)。(原原種是通過植物育種者的直接控制而產(chǎn)生的種子，并且是原種(foundationseed)的首次和再次增加的基礎)。實施例2:編碼抗咪唑啉酮類的和野生型的AHASL1蛋白的向日葵多核苷酸的PCR擴增和測序為了試圖確定實施例l的向日葵植物中的咪唑啉酮類耐受性的來源，采用基因組DM的聚合酶鏈式反應(PCR)擴增來擴增向日葵^W5X入^^5X2和^^5ZJ基因中每一個基因的完整編碼區(qū)。關于PCR擴增，從M,MUT31向日葵植物的組織中分離出基因組DNA。還從RHA266向日葵植物的組織中分離出對照即野生型基因組DNA，以用于所述野生型AHASL基因中每一個基因的PCR擴增。對所得的PCR產(chǎn)物進行測序，以確定來自MUT31和RHA266植物的jW5X入^^SZ2和」W5ZJ基因的DNA序列。令人驚訝的是，當將來自MUT31的^W5X入^7ASX2和^^^^基因的DNA序列與來自RHA266的它們的相應DNA序列進行比對和比較時，未檢測出差異(數(shù)據(jù)未顯示)。盡管本發(fā)明不受任何特定的生物學機制束縛，但這些結(jié)果表明，MUT31的向日葵植物包含新型除草劑抗性機制，所述新型除草劑抗性機制不依賴于在一個或多個AHASL基因中的突變。實施例3:由MUT31所產(chǎn)生的除草劑解毒作用的分析為了評估MUT31向日葵植物的解毒能力，在溫室中進行實驗。本實驗的目的是確定MUT31植物的咪草啶酸耐受性是否與由P450單加氧酶(此處稱為"P450酶")所介導的解毒機制相關。先前報道，有機磷34酸酯殺蟲劑馬拉硫磷(二曱氧基硫代磷酰硫基琥珀酸二乙酯)通過阻斷除草劑解毒活性而特異性地抑制P450酶(Yu等人(2004)Pe〃."/oc力e瓜尸力/;/0/.78:21-30)。因此，預期包含由于經(jīng)改變的P450酶而產(chǎn)生的增強的除草劑耐受性的植物，當在用所述除草劑處理所述植物之前向它們施用馬拉疏磷時，變得對于所述除草劑的耐受性降低或?qū)τ谒龀輨┮赘?。在隨機化裂-裂區(qū)區(qū)組設計(randomizedsplit-spiitplotblockdesign)中安排具有下列3個因素的析因?qū)嶒灮蛐?MUT31和RHA266)、除草劑劑量(對照、0.25X和0.50X;其中X=50gai/ha的咪草啶酸)和馬拉硫磷(使用或不使用馬拉硫磷)。在3-4葉的生長階段時，噴施咪草啶酸(SWEEPER)。在噴施除草劑前30分鐘，以IOOOgai/ha的比率噴施P450抑制劑馬拉硫磷。在噴施除草劑后7天，使用表2中所示的標準來對植物進行評估。表2.用于植物評估的除草劑損害得分的標準癥狀_損害得分褪綠，黃色光澤(yellowflash)5-10%生長速率降低，節(jié)間縮短10-20%葉畸形20-30%壞死30-45%死亡的植物+50°/0在除草劑不存在的情況下，馬拉疏磷的施用對于MUT31和RHA266向日葵品系的應答沒有影響；平均值和方差都為0(表3)。當在咪草啶酸之前不噴施馬拉硫磷時，這兩個品系都更具耐受性(較低的損害％得分)。當僅用O.5X咪草啶酸處理植物時，相比于對照RHA266而言，MUT31顯示出除草劑耐受性顯著增加。在馬拉硫磷處理后，MUT31的除草劑耐受性顯著降低(較高的得分)(表3,圖l)。統(tǒng)計學分析的結(jié)果顯示在表4中。受性，并且暗示MUT31的耐受除草劑的表型可能是由于由一種或多種經(jīng)改變的P"0酵所介導的解毒機制而導致的。盡管本發(fā)明不依賴于任何特定的關于增強的除草劑抗性的生物學機制，但這些結(jié)果進一步暗示，MUT31向日葵植物在其基因組中包含處于一個或多個編碼P450酶的基因中的一個或多個突變。表3.平均除草劑損害得分值除草劑劑量OX(對照)0.25X0.50X馬拉硫磷否是否是否是MUT310.000.009.5030.3520.1340.31RHA2660.000.0027.9545.3042.3545.50表4.所述析因?qū)嶒灥慕y(tǒng)計學分析MUT-31和RHA266來源肚平均SqPr(>F)顯著性重復38.2馬拉硫磚11893.43122.010.001589誤差(a)315.52除草劑劑量1619.0834.9660.001041**馬拉》克磷x劑量1110.456.23810.046678誤差(b)17.71品系11849.08101.67943.27E-07本*馬拉石克磷x品系1210.8911.59690.005217劑量x品系117.930.98570.340397馬拉硫磷x劑量X品系191.635.03880.044418*殘差(Residuals)1218.19實施例4:具有MUT31和耐受除草劑的AHASL基因的向日葵品系的除草劑耐受性。進行田間試驗以比較攜帶MUT31性狀和在向日葵^^SX基因中的A205V突變(A205V/A205V)的向日葵雜種的除草劑耐受性。具有A205V突變的向日葵JW5X基因編碼這樣的AHASL蛋白，該AHASL蛋白在相應于擬南芥(JraWc^/^/sMah'a/za)AHASL蛋白的氨基酸位置205的氨基酸處具有纈氨酸。在野生型向日葵AHASL蛋白中的相同位置處的氨基酸為丙氨酸。在向日葵AHASL蛋白的氨基酸序列中，該丙氨酸至纈氨酸的氨基酸置換位于氨甚酸位置190處。按照慣例，植物AHASL蛋白中的已知引起除草劑抗性的氨基酸置換位點通常參照擬南芥AHASL蛋白的氨基酸序列中的置換位置。表5.受試向日葵品系的描述條目材料的類型突變事件接合性條目描述1IMI恢復系A205V純合雜種2IMIcmsxIMI恢復系A205V純合雜種3WTxIMI恢復系A205V雜合雜種4WTxIMI恢復系A205V雜合雜種5A837cmsxIMI恢復系A205V雜合雜種6IMIcmsxMUT31恢復系A205V/MUT31雜合雜種WT------品系8MUT31恢復系MUT31純合品系在2005/2006,在南美洲于最佳種子生產(chǎn)條件下產(chǎn)生來自各條目(entry)的種子。在2006年，在NorthDakota,USA的一個地方進行田間試驗。使用裂區(qū)設計(其由對于每種處理組合進行3次重復組成)以隨機化完全區(qū)組(randomizedcompleteblock)來組織所述條目。因素A是除草劑處理，和因素B是向日葵條目。地塊大小為4行x12英尺，和播種量與當?shù)剞r(nóng)藝學實踐相一致。對于條目l-6，每種處理的除草劑比率顯示在表6中。對于條目8，每種處理的除草劑比率顯示在表7中。對于背負式噴霧器，噴施體積為10加侖/英畝(GPA)(或100升/公項)，或者對于拖拉機懸掛式噴桿，噴施體積為20GPA(或200升/公項)。37在2-4葉的生長階段時實施除草劑處理。表6.因素A,關于條目l-6的除草劑處理列表處理編號處理1未處理的250gai/ha咪草啶酸+0.25%(v/v)NIS100gai/ha咪草咬酸+0.25%(v/v)NIS4200gai/ha咪草咬酸+0.25%(v/v)NIS5160gai/ha滅草煙+0.25%('v/v)NISNIS=非離子型表面活性劑表7.因素A，關于條目8的除草劑處理列表處理編號處理1未處理的212.5gai/ha咪草啶酸+0.25%(v/v)NIS325gai/ha咪草啶酸+0.25%(v/v)NIS437.5gai/ha咪草啶酸+0.25%(v/v)NIS580gai/ha滅草煙+0.25%(v/v)NISNIS=非離子型表面活性劑在所有處理區(qū)組中留下條目7(WT保持系)不噴施。在WT邊界地塊上測試每種除草劑處理以確保該產(chǎn)品的效力(在噴施后21天，100%作物損傷)。在施用除草劑后7天和21天，評定植物毒性等級。將植物毒性記錄為植物損害的量(以百分比表示)，其中'0，的等級表示相對于未處理的地塊而言對于在該地塊中的植物無損害。'100，的等級表示相對于未處理的地塊而言在該地塊中的植物完全壞死(死亡)。對數(shù)據(jù)進行ANOVA分析，并且來自3次重復的平均值顯示在表8中(在處理后21天時的植物毒性)。38表8.在處理后21天(21DAT)時記錄的植物毒性等級(°/。作物損傷)<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>在用咪草啶酸和滅草煙處理后21天，在雜合的A205V條目(條目3-5)中的植物毒性顯著高于雙雜合的A205V/MUT31條目(條目6)。純合的A205V條目(條目l-2)顯示出最低水平的植物毒性或作物損傷(表1)。在IOOgai/ha的咪草啶酸時，與關于A205V/MUT31雜合條目的10%的損傷率相比較，A205V雜合條目的植物毒性范圍為25%至47%。在200gai/ha的咪草啶酸時，與關于A205V/MUT31雜合條目的43%的損傷率相比較，A205V雜合條目的植物毒性范圍為73%至78°/。的損傷。使用160gai/ha的滅草煙時，與關于A205V/MUT31雜合條目的10%的損傷率相比較，A205V雜合條目的植物毒性范圍為20°/至43%的損傷。當用37.5gai/ha的咪草啶酸攻擊單獨的MUT31(條目8)時，其在處理后21天顯示出47%的損傷率。根據(jù)先前的研究(數(shù)據(jù)未顯示)，MUT31在75gai的咪草啶酸々^項和100gai的滅草煙々>項的比率時顯示出100。/。的作物損傷。相對于雜合的人205￥/-條目和相對于獨自的MUT31條目，雙雜合的A205V/MUT31條目顯示出顯著更高的對咪草啶酸和滅草煙處理兩者的除草劑耐受性?；谠摂?shù)據(jù)，當與處于雜合狀態(tài)的A205V突變疊加在一起時，MUT31提供了比處于雜合狀態(tài)的A205V突變更強的(增強的)除草劑耐受性。相對于目前的純合A205V/A205V產(chǎn)品而言，具有以雜合狀態(tài)在2x商業(yè)產(chǎn)品比率(100gai的咪草啶酸/ha，和160gai的滅草煙/ha)下運轉(zhuǎn)的產(chǎn)品對于向日葵雜種植物育種者來說是巨大的優(yōu)勢，因為節(jié)省了在培育耐受咪唑啉酮類的向日葵方面的時間和資源。本說明書中提到的所有出版物和專利申請表明了本發(fā)明所屬領域的技術人員的水平。所有出版物和專利申請通過提及而合并入本文，就如同具體地和單獨地指明每一個單個的出版物或?qū)＠暾埻ㄟ^提及而合并入本文一樣。盡管已通過舉例說明和用于使能夠理解得清楚的目的的實施例在一定程度上詳述了上述發(fā)明，但很顯然的是，可在所附權利要求書的范圍內(nèi)實施某些變化和修飾。權利要求1.抗除草劑的向日葵植物，其中所述向日葵植物是在此處被命名為MUT31的向日葵植物，所述向日葵植物的代表性種子已經(jīng)以ATCC專利保藏號PTA-7839進行了保藏；或所述向日葵植物是MUT31的抗咪唑啉酮類的后裔并且包含MUT31性狀。2.權利要求l的向日葵植物，其中所述向日葵植物選自(a)作為MUT31的后代的向日葵植物；(b)作為MUT31的突變體、重組體或基因工程衍生物的向日葵植物；和(c)作為(a)-(b)的向日葵植物中的至少一種向日葵植物的后代的向日葵植物。3.權利要求1或2的方法，其中所述向日葵植物包含可被馬拉硫磚抑制的咪唑啉酮類抗性。4.權利要求1或2的向日葵植物，其中所述向日葵植物具有增加的對至少一種咪唑啉酮類除草劑的抗性。5.權利要求4的向日葵植物，其中所述咪唑啉酮類除草劑選自[2-(4-異丙基-4-甲基-5-氧代-2-]咪唑啉-2-基)-煙酸、2-(4-異丙基)-4-甲基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-3-喹啉羧酸、[5-乙基-2-(4-異丙基-4-甲基-]5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-煙酸、2-(4-異丙基-4-曱基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-5-(甲氧基甲基)-煙酸、2-(4-異丙基-4-曱基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-5-甲基煙酸、和6-(4-異丙基-4-甲基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-間-甲苯曱酸甲酯與[2-(4-]異丙基-4-曱基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-對-甲苯曱酸甲酯的混合物、以及其混合物。6.權利要求4的向日葵植物，其中所述咪唑啉酮類除草劑是咪草啶酸。7.權利要求1至6中任一項的向日葵植物的種子，其中所述種子是MUT31的抗咪唑啉酮類的后代并且包含MUT31性狀。8.權利要求7的種子，其中用咪唑啉酮類除草劑處理所述種子。9.權利要求1至6中任一項的植物的細胞，其中所述細胞包含MUT31性狀。10.權利要求9的細胞，其中所述細胞是花粉細胞或種子細胞。11.權利要求1至6中任一項的植物的花粉粒，其中所述花粉粒包含MUT31性狀。12.在向日葵植物附近控制雜草的方法，所述方法包括向所述雜草和向所述向日葵植物施用有效量的咪唑啉酮類除草劑，其中所述向曰葵植物是在此處被命名為MUT31的向日葵植物，所述向日葵植物的代表性種子已經(jīng)以ATCC專利保藏號PTA-7839進行了保藏；或所述向日葵植物是MUT31的抗咪唑啉酮類的后裔并且包含MUT31性狀。13.權利要求12的方法，其中所述向日葵植物選自(a)作為MUT31的后代的向日葵植物；(b)作為MUT31的突變體、重組體或基因工程衍生物的向日葵植物；和(c)作為(a)-(b)的向日葵植物中的至少一種向日葵植物的后代的向日葵植物。14.權利要求12或13的方法，其中所述咪唑啉酮類除草劑選自[2-(4-異丙基-4-甲基-5-氧代-2-]咪唑啉-2-基)-煙酸、2-(4-異丙基)-4-曱基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-3-喹啉羧酸、[5-乙基-2-(4-異丙基-4-甲基-]5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-煙酸、2-(4-異丙基-4-甲基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-5-(甲氧基曱基)-煙酸、2-(4-異丙基-4-曱基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-5-甲基煙酸、和6-(4-異丙基-4-曱基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-間-甲苯甲酸甲酯與[2-(4-]異丙基-4-甲基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-對-甲苯甲酸甲酯的混合物、以及其混合物。15.用于產(chǎn)生抗除草劑的向日葵植物的方法，其包括下列步驟(a)將抗咪唑啉酮類除草劑的第一向日葵植物與不抗咪唑啉酮類除草劑的第二向日葵植物雜交，其中所述第一向日葵植物是在此處被命名為MUT31的向日葵植物，所述向日葵植物的代表性種子已經(jīng)以ATCC專利保藏號PTA-7839進行了保藏，或所述第一向日葵植物是MUT31的抗咪唑啉酮類的后裔并且包含MUT31性狀；和(b)選擇抗咪唑啉酮類除草劑的后代植物。16.權利要求15的方法，其中所述第一向日葵植物選自(i)作為MUT31的后代的向日葵植物；(ii)作為MUT31的突變體、重組體或基因工程衍生物的向日葵植物j和(iii)作為(i)-(n)的向日葵植物中的至少一種向日葵植物的后代的向日葵植物。17.權利要求15或16的方法，其中所述第一向日葵植物具有增加的對至少一種咪唑啉酮類除草劑的抗性。18.權利要求17的方法，其中所述咪唑啉酮類除草劑選自[2-(4-異丙基-4-甲基-5-氧代-2-]咪唑啉-2-基)-煙酸、2-(4-異丙基)-4-甲基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-3-喹啉羧酸、[5-乙基-2-(4-異丙基-4-甲基-]5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-煙酸、2-(4-異丙基-4-曱基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-5-(曱氧基甲基)-煙酸、2-(4-異丙基-4-甲基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-5-甲基煙酸、和6-(4-異丙基-4-甲基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-間-甲苯曱酸甲酯與[2-(4-]異丙基-4-甲基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-對-曱苯甲酸甲酯的混合物、以及其混合物。19.通過權利要求15-18中任一項的方法產(chǎn)生的抗除草劑的向日葵植物。20.權利要求19的向日葵植物的種子，其中所述種子包含MUT31性狀。21.用于增加向日葵植物的除草劑抗性的方法，其包括下列步驟(a)將第一向日葵植物與第二向日葵植物雜交，其中所述第一向曰葵植物是在此處被命名為MUT31的向日葵植物，所述向日葵植物的代表性種子已經(jīng)以ATCC專利保藏號PTA-7839進行了保藏，或所述第一向日葵植物是MUT31的抗咪唑啉酮類的后裔并且包含MUT31性狀；和(b)選擇包含MUT31性狀并且包含相比于所述第二向日葵植物對咪唑啉酮類除草劑的抗性而言增加的對咪唑啉酮類除草劑的抗性的后代22.權利要求21的方法，其中所述第一向日葵植物選自(i)作為MUT31的后代的向日葵植物；(ii)作為MUT31的突變體、重組體或基因工程衍生物的向日葵植物j和(iii)作為a)-(ii)的向日葵植物中的至少一種向日葵植物的后代的向日葵植物。23.權利要求21或22的方法，其中所述第一向日葵植物具有增加的對至少一種選自下列的咪唑啉酮類除草劑的抗性[2-(4-異丙基-4-甲基-5-氧代-2-]咪唑啉-2-基)-煙酸、2-(4-異丙基)-4-甲基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-3-喹啉羧酸、[5-乙基-2-(4-異丙基-4-甲基-]5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-煙酸、2-(4-異丙基-4-甲基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-5-(甲氧基甲基)-煙酸、2-(4-異丙基-4-曱基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-5-甲基煙酸、和6-(4-異丙基-4-甲基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-間-甲苯甲酸甲酯與[2-(4-]異丙基-4-甲基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基)-對-甲苯甲酸甲酯的混合物、以及其混合物。24.權利要求21-23中任一項的方法，其中所述第二向日葵植物包含至少一個抗除草劑的AHASL基因。25.權利要求24的方法，其中所述第二向日葵植物包含至少一個抗除草劑的AHASL基因，所述抗除草劑的AHASL基因編碼包含A205V氨基酸置換的AHASL蛋白。26.權利要求21-25中任一項的方法，其中所述后代植物包含相比于所述第一向日葵植物、所述第二向日葵植物或者所述第一和所述第二向日葵植物兩者而言增加的對至少一種除草劑的抗性。27.權利要求21-26中任一項的方法，其中所述后代植物包含相比于所述第一向日葵植物、所述第二向日葵植物或者所述第一和所述第二向曰葵植物兩者而言增加的對至少一種咪唑啉酮類除草劑的抗性。28.權利要求27的方法，其中所述后代植物包含相比于所述第一向曰葵植物、所述第二向日葵植物或者所述第一和所述第二向日葵植物兩者而言增加的對除草劑咪草啶酸、滅草煙或者咪草啶酸和滅草煙兩者的抗性。29.權利要求21-28中任一項的方法，其中所述第二植物包含對草甘膦的抗性。30.通過權利要求21-29中任一項的方法產(chǎn)生的植物。31.權利要求30的植物的種子，其中所述種子包含MUT31性狀。32.向日葵植物或種子，其包含MUT31性狀和至少一個抗除草劑AHASL基因。33.權利要求32的向日葵植物或種子，其中所述向日葵植物對于MUT31性狀和所述抗除草劑的AHASL基因而言是雜合的。34.權利要求33的向日葵植物或種子，其中抗除草劑的AHASL基因編碼包含A205V氨基酸置換的AHASL蛋白。35.權利要求32-34的任一項的向日葵植物的種子，其中所述種子包含MUT31性狀。36.用于防治不希望的植被的方法，其包括在播種前和/或在催芽后，將權利要求l-6、19、30和32-34中任一項的向日葵植物的向日葵種子與咪唑啉酮類除草劑接觸。37.權利要求36的方法，其還包括在有利于向日葵植物生長的環(huán)境中種植所述向日葵種子。38.權利要求37的方法，其中所述環(huán)境包含不希望的植被。39.被命名為MUT31的向日葵品系的種子，所述品系的代表性種子已經(jīng)以ATCC登錄號PTA-7839進行了保藏。40.通過使權利要求39的種子進行生長而產(chǎn)生的向日葵植物或其部分。41.從權利要求40的植物或其部分產(chǎn)生的可再生細胞的組織培養(yǎng)物。42.權利要求41的組織培養(yǎng)物，其中所述組織培養(yǎng)物的細胞來自選自下列的組織葉、花粉、胚、子葉、下胚軸、根、根尖、花藥、莖和花。43.從權利要求40的植物或其部分或者權利要求41的組織培養(yǎng)物產(chǎn)生的原生質(zhì)體。44.從權利要求41的組織培養(yǎng)物再生出的向日葵植物，所迷植物具有向日葵品系MUT31的所有形態(tài)學和生理學特征，所述品系的代表性種子已經(jīng)以ATCC登錄號PTA-7839進行了保藏。45.權利要求44的向日葵植物，其中在再生之前，將目的轉(zhuǎn)基因穩(wěn)定地整合到所述向日葵植物的基因組中。46.權利要求44或45的向日葵植物的種子，其中所述種子包含MUT31性狀。47.權利要求45的向日葵植物的種子，其中所述種子包含所述轉(zhuǎn)基因。48.用于產(chǎn)生雜種向日葵種子的方法，其包括將權利要求40的植物與不同的向日葵植物雜交，以及收獲所得到的雜種向日葵種子。全文摘要提供了被命名為MUT31的新型抗除草劑的向日葵植物以及其抗除草劑的后裔。當與野生型向日葵植物相比較時，MUT31向日葵植物以及其抗除草劑的后裔包含增加的對至少一種咪唑啉酮類除草劑的抗性。還提供了用于在這些抗除草劑的向日葵植物附近控制雜草的方法以及用于增加向日葵植物的除草劑抗性的方法。文檔編號A01H5/10GK101657090SQ200780049043公開日2010年2月24日申請日期2007年12月11日優(yōu)先權日2006年12月12日發(fā)明者A·D·贊貝利,A·J·利昂,M·M·莫拉塔申請人:巴斯夫農(nóng)業(yè)化學產(chǎn)品公司;阿德芳塔種子有限公司