專利名稱：：一種泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液或營養(yǎng)粉的制備方法一種泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液或營養(yǎng)粉的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
一種泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液或營養(yǎng)粉的制備方法，具體涉及利用酶法水解以及利用納濾膜濃縮脫鹽的方法，用泥鰍蛋白制備泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液或營養(yǎng)粉，屬于生物工程和膜
技術(shù)領(lǐng)域：
。技術(shù)背景泥鰍被譽為"水中人參"，味道鮮美，營養(yǎng)價值極高，蛋白質(zhì)、糖類、礦物質(zhì)(鈣，磷，鐵)和維生素(Vs，VA，Vc)均比一般魚蝦高。蛋白質(zhì)含量達到18克/100克泥鰍，有機硒含量達到35微克/100克泥鰍。自古以來，泥鰍就被人們認為具有較高的藥用價值。據(jù)《醫(yī)學(xué)入門》査考，泥鰍性甘、平，具"補中、止泄"之功能?！侗静菥V目》中記載泥鰍有暖中益氣之功效，對治療肝炎、小兒盜汗、痔瘡、皮膚瘙癢、跌打損傷、手指疔、陽痿、乳癰等癥都有一定療效。經(jīng)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)臨床驗證，采取泥鰍食療，既能強身增加體內(nèi)營養(yǎng)，又可補中益氣、護肝除黃、壯陽利尿、清熱解毒、消痞散結(jié)等藥用功效。綜合考慮泥鰍在食品領(lǐng)域和醫(yī)藥領(lǐng)域的利用價值，利用其營養(yǎng)豐富和藥用價值高的特點，可將泥鰍開發(fā)成各種保健食品。泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液、營養(yǎng)粉是泥鰍蛋白水解的中間產(chǎn)物，泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液與泥鰍的氨基酸組成相同，但其分子量比泥鰍蛋白要小得多。因此，泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液具有良好的水溶性，優(yōu)良的吸濕保濕功能，較好的酸、熱穩(wěn)定性。水解蛋白富含具有多種生理活性的多肽和氨基酸，這些肽可以充分被人體吸收，補充人體所需的營養(yǎng)，調(diào)節(jié)機體功能，促進身體健康。隨著生物技術(shù)和其它高新技術(shù)的發(fā)展，國內(nèi)外對泥鰍的食用研究也越來越重視。泥鰍肉中蛋白含量占其干重的80%，氨基酸組成完善，具有很高的營養(yǎng)價值。據(jù)報道，泥鰍提取物具有保肝護肝、防治肝炎、增強基體免疫力等功效。因此，富含泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液的食品具有很好的營養(yǎng)保健價值，可以作為一種功能性食品，其研究開發(fā)也因此受到重視。因為泥鰍的營養(yǎng)價值豐富，國內(nèi)外對以泥鰍為原料的保健品和藥品的開發(fā)剛剛開始，僅有少量粗加工的專利和研究報道，尚未能對泥鰍進行深度加工和綜合利用。膜分離技術(shù)是用天然或人工合成的高分子膜，以外界能量或化學(xué)位差為推動力，對雙組分或多組分的溶質(zhì)和溶劑進行分離、分級、提純和富集的方法。此技術(shù)具有分離效率高、分離條件溫和、流程簡單及能耗較低，而它具有效率、設(shè)備價格、運行費用等都相差不大等優(yōu)點，因此在蛋白質(zhì)的濃縮、酶的分離與精制、發(fā)酵產(chǎn)品的分離與精制等方面應(yīng)用廣泛。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的是提供一種采用酶法水解一納濾濃縮脫鹽工藝制備泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液或營養(yǎng)粉的方法。本發(fā)明的技術(shù)方案一種泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液或營養(yǎng)粉的制備方法，利用酶法水解泥鰍蛋白，再用納濾技術(shù)濃縮并脫鹽，步驟為1)以泥鰍為原料，搗碎制備勻漿；2)泥鰍勻漿以1:1比例加水，采用蛋白酶在pH310，30-6(TC下進行酶解反應(yīng)，蛋白酶用量為泥鰍勻漿和水總重量的1%-3%，酶解2-10h，采用pH-STAT或TNBS法控制水解度DH為12%~20%;3)反應(yīng)結(jié)束后滅酶，離心過濾，得濾液即酶解液；4)酶解液用納濾膜進行納濾脫鹽及初步濃縮，得到泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液；或酶解液用納濾膜進行納濾脫鹽濃縮，然后噴霧干燥，即制得泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)粉。酶解液的納濾脫鹽濃縮，納濾的截留分子量為150—300Dalton。納濾后濃縮液進行噴霧干燥，干燥條件為進風(fēng)溫度150°C-220°C，出風(fēng)溫度60°C-100°C。制備的泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液或營養(yǎng)粉用于直接制成膠囊、沖劑、口服液或口服含片；或作為功能性食品配料用于保健食品或普通食品的配方中。納濾(NF)膜是介于反滲透(RO)膜和超濾(UF)膜之間的一種膜，其膜表面孔徑處于納米級范圍(10—9米)。納濾膜由于截留分子量介于超濾和反滲透之間，同時還存在道南(Donnan)離子效應(yīng)的影響，因此對低分子量有機物和鹽的分離有很好的效果，且具有不影響分離物質(zhì)的生物活性、節(jié)能、無公害等特點。粗蛋白的測定微量凱氏定氮法。糖原的測定苯酚-硫酸法。本發(fā)明的有益效果首先采用酶法水解泥鰍蛋白，雖然傳統(tǒng)的酸法和自溶法水解簡單、便宜，但其缺點是水解度不易控制，且氨基酸破壞大。酶法水解條件溫和，水解度易控制，對氨基酸破壞小，而且具有專一性。因此，采用酶法水解泥鰍蛋白，不僅可以大大提高泥鰍肽的產(chǎn)量，而且產(chǎn)品的相對分子質(zhì)量可以得到控制，大大提高產(chǎn)品的功能性。然后利用納濾膜分離技術(shù)進行濃縮及脫鹽，具有處理量大、分離條件溫和、流程簡單及能耗較低等優(yōu)點，是一種高效的濃縮方法，可實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。圖1納濾膜脫鹽濃縮壓力與滲透通量的關(guān)系。圖2納濾膜脫鹽濃縮溫度與滲透通量的關(guān)系(AP:0.9MPa)。圖3納濾膜脫鹽濃縮時間與滲透通量的關(guān)系(AP=0.9MPa)。具體實施方式實施例1水解度(DH)=18%的泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液和營養(yǎng)粉的制備泥鰍肉搗碎得勻漿，以1:1比例加水，采用酸性蛋白酶在pH3.0^4.0、40°C下進行酶解反應(yīng)，酶用量為泥鰍勻槳和水總重量的1%-3%，酶解2-10h，采用TNBS法控制水解度在18%，反應(yīng)結(jié)束后加熱滅酶，離心過濾后，濾液用美國陶氏化學(xué)公司提供的截留分子量150Dalton的聚酰胺納濾膜進行脫鹽濃縮，在脫鹽過程中不斷加水稀釋料液，并保持濃縮液的體積不變。脫鹽后，料液經(jīng)進一步濃縮即得泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液，或繼續(xù)進行噴霧干燥即制得泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)粉。DH^18。/。的泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液溶液納濾濃縮實驗圖1顯示，隨著操作壓力的增大，膜兩側(cè)的壓力差增加，膜的滲透通量增大，從圖中看出，清水通量和酶解液通量隨壓力近似成線性增大，但由于濃差極化、膜面污染及膜孔堵塞等原因，水解液的滲透通量增加幅度小于清水通量的增加幅度。圖2顯示，隨溫度升高，膜的滲透通量增大。溫度高，料液粘度小，流動狀態(tài)好，擴散及傳質(zhì)系數(shù)高，各種分子的活化能提高，減小濃差極化的影響，從而膜的滲透通量提高。圖3顯示，隨時間的延長，通量呈現(xiàn)下降趨勢。初期，料液中的大分子在膜的表面迅速沉積，產(chǎn)生濃差極化、凝膠層、膜孔堵塞及膜吸附等現(xiàn)象，使透過液阻力劇增，通量驟減；然后，膜表面的沉積層逐漸增加，濃差極化及阻力加強，通量的下降趨勢趨于緩和；后期，當邊界層的濃度和厚度達到一定的動態(tài)后，膜通量較為穩(wěn)定。產(chǎn)品為淡黃色粉末，復(fù)水性良好。表1納濾膜分離前后泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液產(chǎn)品的成分比較<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>實施例2水解度(DH)=20%的泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液和營養(yǎng)粉的制備泥鰍肉搗碎得勻漿，以l:l比例加水，采用堿性蛋白酶Alcalase，于60。C、pH8.5下進行酶解反應(yīng)，酶用量為泥鰍勻漿和水總重量的1%-3%，酶解2-10h，采用pH-STAT法控制水解度在20y。，反應(yīng)結(jié)束后加熱滅酶，離心過濾后，濾液用截留分子量為300Dalton的納濾膜進行脫鹽濃縮，在脫鹽過程中不斷加水稀釋料液，并保持濃縮液的體積不變。脫鹽后，料液經(jīng)進一步濃縮即得泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液，繼續(xù)進行噴霧千燥即制得泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)粉末。權(quán)利要求1、一種泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液或營養(yǎng)粉的制備方法，其特征在于利用酶法水解泥鰍蛋白，再用納濾技術(shù)濃縮并脫鹽，步驟為1)以泥鰍為原料，搗碎制備勻漿；2)泥鰍勻漿以1∶1比例加水，采用蛋白酶在pH3～10，30-60℃下進行酶解反應(yīng)，蛋白酶用量為泥鰍勻漿和水總重量的1％-3％，酶解2-10h，采用pH-STAT或TNBS法控制水解度DH為12％～20％；3)反應(yīng)結(jié)束后滅酶，離心過濾，得濾液即酶解液；4)酶解液用納濾膜進行納濾脫鹽及初步濃縮，得到泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液；或酶解液用納濾膜進行納濾脫鹽濃縮，然后噴霧干燥，即制得泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)粉。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液或營養(yǎng)粉的制備方法，其特征在于酶解液的納濾脫鹽濃縮，納濾的截留分子量為150—300Dalton。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液或營養(yǎng)粉的制備方法，其特征在于納濾后濃縮液進行噴霧干燥，干燥條件為進風(fēng)溫度150°C-220°C，出風(fēng)溫度60°C-100°C。4、權(quán)利要求1所述方法制備的泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液或營養(yǎng)粉的應(yīng)用，其特征是泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液或營養(yǎng)粉用于直接制成膠囊、沖劑、口服液或口服含片；或作為功能性食品配料用于保健食品或普通食品的配方中。全文摘要一種泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液或營養(yǎng)粉的制備方法，屬于生物工程和膜
技術(shù)領(lǐng)域：
。本發(fā)明采用酶法水解—納濾濃縮脫鹽工藝制備泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液或營養(yǎng)粉的方法，本發(fā)明以泥鰍為原料，以1∶1比例加水，采用蛋白酶在pH3～10，30℃～60℃下進行酶解反應(yīng)，蛋白酶用量為泥鰍勻漿和水總重量的1％-3％，酶解2-10h，米用pH-STAT或TNBS法控制水解度在12％～20％，反應(yīng)結(jié)束后加熱滅酶，離心過濾，得濾液即酶解液，酶解液用納濾膜進行納濾濃縮脫鹽，得到泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)液，再經(jīng)噴霧干燥，即制得泥鰍富硒活性肽營養(yǎng)粉。本發(fā)明優(yōu)點是處理量大、分離條件溫和、流程簡單及能耗較低，可實現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)。文檔編號A23P1/02GK101233937SQ20081002062公開日2008年8月6日申請日期2008年2月4日優(yōu)先權(quán)日2008年2月4日發(fā)明者盧蓉蓉,張文斌,楊瑞金申請人:江南大學(xué)