專(zhuān)利名稱(chēng)：一種非洲菊組培穴盤(pán)苗的繁育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植物組培穴盤(pán)苗的繁育方法，尤其涉及非洲菊組培穴盤(pán)苗的繁育方法。
背景技術(shù)：
非洲菊又名扶郎花，其花朵碩大，花枝挺拔、花色豐富，姿態(tài)各異，裝飾性強(qiáng)，產(chǎn)量高，瓶插壽命長(zhǎng)，在適宜條件下可周年生產(chǎn)，是世界花卉市場(chǎng)上最重要的切花之一，占世界切花銷(xiāo)售量的第5位。非洲菊作為大宗鮮切花種類(lèi)，在我國(guó)占有重要地位，正受到越來(lái)越多人的喜愛(ài)，其栽培面積僅次于玫瑰、百合和康乃馨，生產(chǎn)上迫切需要優(yōu)質(zhì)非洲菊種苗。非洲菊品種雜合性高，采用種子繁殖的后代易發(fā)生變異。一般采用分株和扦插等無(wú)性繁殖方法進(jìn)行繁殖。但是分株和扦插的繁殖系數(shù)低，很難滿(mǎn)足大規(guī)模生產(chǎn)需要。采用組織培養(yǎng)可以快速繁育種苗，并能保持母株的優(yōu)良性狀。目前非洲菊組織培養(yǎng)繁殖中，普遍存在外植體污染率高，不定芽的誘導(dǎo)分化率低，誘導(dǎo)周期長(zhǎng)，組培苗移栽成活率低等問(wèn)題， 特別是用傳統(tǒng)的苗床進(jìn)行育苗，苗與苗之間易發(fā)生串根現(xiàn)象，起苗時(shí)根系極易受損傷，使之種植后緩苗時(shí)間長(zhǎng)，成活率低。穴盤(pán)育苗與苗床培育的根系裸露的苗相比，提高了成苗率和更有效地利用了種植空間，具有生長(zhǎng)期短，植株生長(zhǎng)整齊，移植不易傷根，操作簡(jiǎn)單，節(jié)約勞動(dòng)力，移植后緩苗期短，病害傳播幾率低等優(yōu)點(diǎn)。經(jīng)檢索國(guó)內(nèi)外未見(jiàn)報(bào)道非洲菊組培苗穴盤(pán)育苗技術(shù)。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)上述情況，本發(fā)明提供一種非洲菊組培穴盤(pán)苗的繁育方法，提高非洲菊的繁殖速度和苗的整齊度，更好的保持了其母本優(yōu)良性狀。本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的
本發(fā)明提供的非洲菊組培穴盤(pán)苗繁育方法，其特征在于 (1)無(wú)菌材料的獲得
采取直徑小于1cm、未露出小花的非洲菊幼小花蕾，用自來(lái)水流水沖洗20min，然后在超凈工作臺(tái)內(nèi)將花蕾置于無(wú)菌瓶中，依次用70%酒精浸泡30s，0. 1%升汞中加入其體積0. 1% 吐溫-80浸泡8-10分鐘，再用無(wú)菌水沖洗4-6遍后待用。(2)不定芽的誘導(dǎo)分化
將步驟(1)得到的無(wú)菌材料用小鑷子剝?nèi)セɡ偕系乃邪?，再切掉花蕾表面小花及苞片基部，剩余花托部分，將花托切?塊，接種于不定芽誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基上，將培養(yǎng)瓶置于溫度25°C，光照強(qiáng)度1500-25001X，光照時(shí)間14小時(shí)/天的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，1_2周后外植體膨大，3-4周后出現(xiàn)黃綠色愈傷組織，4-6周后可分化出不定芽。(3)不定芽的增殖
將步驟(2)得到的不定芽接種到增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)，培養(yǎng)室內(nèi)溫度25°C，光照強(qiáng)度1500-25001X，光照時(shí)間14小時(shí)/天，4周繼代培養(yǎng)一次，增殖系數(shù)為3_6。
(4)不定芽的生根
將步驟(3)得到的不定芽接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根誘導(dǎo)培養(yǎng)，培養(yǎng)室內(nèi)溫度 250C，光照強(qiáng)度1500-25001x，光照時(shí)間14小時(shí)/天，10天后生根率可達(dá)99%，生根數(shù)目平均 3-4條/株，根長(zhǎng)度為0. 5-1. Ocm0(5)煉苗
將步驟(4)得到的生根苗在培養(yǎng)室內(nèi)打開(kāi)培養(yǎng)瓶的瓶口煉苗2-3天。(6)穴盤(pán)移栽
煉苗結(jié)束后，將組培苗從培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)取出，洗凈根部存留的培養(yǎng)基，避免傷害組培苗的幼根，然后移栽到盛有基質(zhì)的穴盤(pán)中，穴盤(pán)填充的移栽基質(zhì)含水量為60%-70%，移栽后覆塑料薄膜保溫保濕。(7)穴盤(pán)苗管理
組培苗移栽后保持白天溫度2(T30°C，夜間最低溫度不低于12°C，濕度90%以上；10天后揭開(kāi)塑料薄膜使小苗逐步適應(yīng)濕度50%-70%的環(huán)境條件，移栽2周后開(kāi)始施用肥料，在此條件下培養(yǎng)30-40天。上述的不定芽誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基是在1/2MS培養(yǎng)基中添加2. 0-10. Omg/L 6_芐基腺嘌呤、0. 1-0. 5mg/L吲哚乙酸、30g/L蔗糖和3_4g/L瓊脂粉，調(diào)節(jié)pH為5. 8-6. 2。上述的不定芽增殖培養(yǎng)基是在MS培養(yǎng)基中添加0. 5-2. Omg/L 6_芐基腺嘌呤或 0-10. Omg/L激動(dòng)素、0. 1-0. 5 mg/L吲哚乙酸、30g/L蔗糖和3_4g/L瓊脂粉，調(diào)節(jié)pH為 5. 8-6. 2。上述的不定芽生根培養(yǎng)基是在1/2MS培養(yǎng)基中添加0. 1-0. 5mg/L吲哚乙酸或 0. 05-0. 5mg/L吲哚丁酸或0. 01-0. 02mg/L萘乙酸、30g/L蔗糖和3_4g/L瓊脂粉，調(diào)節(jié)pH 為 5. 8-6. 2。上述的育苗穴盤(pán)規(guī)格為72 1 孔，72孔穴盤(pán)口徑38mm，高40mm，規(guī)格 540mmX 280mm ； 105 孔穴盤(pán)口 徑 33mm，高 40mm，規(guī)格 540mmX 280mm ；128 孔穴盤(pán)口 徑 30mm，高 40mm,規(guī)格 540mm X 280mm。上述的移栽基質(zhì)配方為重量75%泥炭加25%蛭石。上述移栽2周后施用肥料為氮、磷、鉀復(fù)合肥，采用兩種重量比例為20 10 :20或 14 0 14，兩種比例氮磷鉀復(fù)合肥分別用重量2000倍液交替施用。本發(fā)明與傳統(tǒng)非洲菊的繁殖方法相比，提高了非洲菊的繁殖速度和苗的整齊度， 更好的保持了其母本優(yōu)良性狀，是一種適合非洲菊種苗工廠(chǎng)化生產(chǎn)的有效方法。


圖1是非汧
圖2是非汧
圖3是非汧
圖4是非汧
圖5是非汧
圖6是非汧
圖7是非汧
圖8是非洲菊組培穴盤(pán)苗的示意圖片。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。實(shí)施例1
(1)無(wú)菌材料的獲得
采取直徑小于1cm、未露出小花的非洲菊幼小花蕾，用自來(lái)水流水沖洗20min，然后在超凈工作臺(tái)內(nèi)將花蕾置于無(wú)菌瓶中，依次用70%酒精浸泡30s，0. 1%升汞中加入其體積0. 1% 吐溫-80浸泡8分鐘，再用無(wú)菌水沖洗4-6遍后待用。(2)不定芽的誘導(dǎo)分化
將步驟(1)得到的無(wú)菌材料用小鑷子剝?nèi)セɡ偕系乃邪偾械艋ɡ俦砻嫘』鞍?，剩余花托部分，將花托切?塊，接種于不定芽誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基上，將培養(yǎng)瓶置于溫度25°C，光照強(qiáng)度1500-25001X，光照時(shí)間14小時(shí)/天的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，1_2周后外植體膨大，3周后出現(xiàn)黃綠色愈傷組織(見(jiàn)圖1)，5周后可分化出不定芽(見(jiàn)圖2)。所述的不定芽誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基是在1/2MS培養(yǎng)基中添加2. 0-10. Omg/L 6_芐基腺嘌呤、0. 1-0. 5mg/L吲哚乙酸、30g/L蔗糖和3_4g/L瓊脂粉，調(diào)節(jié)pH為5. 8-6. 2。(3)不定芽的增殖
將步驟(2)得到的不定芽接種到增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)，培養(yǎng)室內(nèi)溫度25°C，光照強(qiáng)度1500-25001x，光照時(shí)間14小時(shí)/天，4周繼代培養(yǎng)一次(見(jiàn)圖3)，增殖系數(shù)為5。所述的不定芽增殖培養(yǎng)基是在MS培養(yǎng)基中添加0. 5-2. Omg/L 6_芐基腺嘌呤或 0-10. Omg/L激動(dòng)素、0. 1-0. 5 mg/L吲哚乙酸、30g/L蔗糖和3_4g/L瓊脂粉，調(diào)節(jié)pH為 5. 8-6. 2。(4)不定芽的生根
將步驟(3)得到的不定芽接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根誘導(dǎo)培養(yǎng)，培養(yǎng)室內(nèi)溫度 250C，光照強(qiáng)度1500-25001x，光照時(shí)間14小時(shí)/天，10天后生根率可達(dá)99%，生根數(shù)目平均 3-4條/株，根長(zhǎng)度為0. 5-1. Ocm (見(jiàn)圖4、5)。所述的不定芽生根培養(yǎng)基是在1/2MS培養(yǎng)基中添加0. 1-0. 5mg/L吲哚乙酸或 0. 05-0. 5mg/L吲哚丁酸或0. 01-0. 02mg/L萘乙酸、30g/L蔗糖和3_4g/L瓊脂粉，調(diào)節(jié)pH 為 5. 8-6. 2。(5)煉苗
將步驟(4)得到的生根苗在培養(yǎng)室內(nèi)打開(kāi)培養(yǎng)瓶的瓶口煉苗2-3天。(6)穴盤(pán)移栽
煉苗結(jié)束后，將組培苗從培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)取出，洗凈根部存留的培養(yǎng)基，避免傷害組培苗的幼根，然后移栽到盛有基質(zhì)的72孔的穴盤(pán)中(見(jiàn)圖6)，移栽基質(zhì)為重量75%泥炭加25%蛭石， 移栽基質(zhì)的含水量為60%-70%，移栽后覆塑料薄膜保溫保濕。(7)穴盤(pán)苗管理
組培苗移栽后保持白天溫度2(T30°C，夜間最低溫度不低于12°C，濕度90%以上；10天后揭開(kāi)塑料薄膜使小苗逐步適應(yīng)濕度50%-70%的環(huán)境條件，移栽2周后開(kāi)始施用肥料，在此條件下培養(yǎng)30-40天(見(jiàn)圖7、8)。施用的肥料為氮、磷、鉀復(fù)合肥，采用兩種比例為20 10 20或14 0 :14，兩種比例氮磷鉀復(fù)合肥分別用重量2000倍液交替施用。實(shí)施例2
(1)無(wú)菌材料的獲得
采取直徑小于1cm、未露出小花的非洲菊幼小花蕾，用自來(lái)水流水沖洗20min，然后在超凈工作臺(tái)內(nèi)將花蕾置于無(wú)菌瓶中，依次用70%酒精浸泡30s，0. 1%升汞中加入其體積0. 1% 吐溫-80浸泡10分鐘，再用無(wú)菌水沖洗6遍后待用。(2)不定芽的誘導(dǎo)分化
將步驟(1)得到的無(wú)菌材料用小鑷子剝?nèi)セɡ偕系乃邪?，再切掉花蕾表面小花及苞片基部，剩余花托部分，將花托切?塊，接種于不定芽誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基上(同實(shí)施例1)， 將培養(yǎng)瓶置于溫度25°C，光照強(qiáng)度1500-25001X，光照時(shí)間14小時(shí)/天的條件下進(jìn)行培養(yǎng)， 1-2周后外植體膨大，3周后出現(xiàn)黃綠色愈傷組織，5周后可分化出不定芽。(3)不定芽的增殖
將步驟(2)得到的不定芽接種到增殖培養(yǎng)基(同實(shí)施例1)上進(jìn)行增殖培養(yǎng)，培養(yǎng)室內(nèi)溫度25°C，光照強(qiáng)度1500-25001x，光照時(shí)間14小時(shí)/天，4周繼代培養(yǎng)一次，增殖系數(shù)為 5。(4)不定芽的生根
將步驟(3)得到的不定芽接種到生根培養(yǎng)基(同實(shí)施例1)上進(jìn)行生根誘導(dǎo)培養(yǎng)，培養(yǎng)室內(nèi)溫度25°C，光照強(qiáng)度1500-25001x，光照時(shí)間14小時(shí)/天，10天后生根率可達(dá)99%，生根數(shù)目平均3-4條/株，根長(zhǎng)度為0. 5-1. Ocm0(5)煉苗
將步驟(4)得到的生根苗在培養(yǎng)室內(nèi)打開(kāi)培養(yǎng)瓶的瓶口煉苗2-3天。(6)穴盤(pán)移栽
煉苗結(jié)束后，將組培苗從培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)取出，洗凈根部存留的培養(yǎng)基，避免傷害組培苗的幼根，然后移栽到盛有基質(zhì)的105孔穴盤(pán)中，移栽基質(zhì)為重量75%泥炭加25%蛭石，移栽基質(zhì)的含水量為60%-70%，移栽后覆塑料薄膜保溫保濕。(7)穴盤(pán)苗管理
組培苗移栽后保持白天溫度2(T30°C，夜間最低溫度不低于12°C，濕度90%以上；10天后揭開(kāi)塑料薄膜使小苗逐步適應(yīng)濕度50%-70%的環(huán)境條件，移栽2周后開(kāi)始施用氮、磷、鉀復(fù)合肥(同實(shí)施例1)，在此條件下培養(yǎng)30-40天。實(shí)施例3
(1)無(wú)菌材料的獲得
采取直徑小于1cm、未露出小花的非洲菊幼小花蕾，用自來(lái)水流水沖洗20min，然后在超凈工作臺(tái)內(nèi)將花蕾置于無(wú)菌瓶中，依次用70%酒精浸泡30s，0. 1%升汞中加入其體積0. 1% 吐溫-80浸泡10分鐘，再用無(wú)菌水沖洗4遍后待用。(2)不定芽的誘導(dǎo)分化
將步驟(1)得到的無(wú)菌材料用小鑷子剝?nèi)セɡ偕系乃邪?，再切掉花蕾表面小花及苞片基部，剩余花托部分，將花托切?塊，接種于不定芽誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基上(同實(shí)施例1)， 將培養(yǎng)瓶置于溫度25°C，光照強(qiáng)度1500-25001X，光照時(shí)間14小時(shí)/天的條件下進(jìn)行培養(yǎng)， 1-2周后外植體膨大，3周后出現(xiàn)黃綠色愈傷組織，5周后可分化出不定芽。
(3)不定芽的增殖
將步驟(2)得到的不定芽接種到增殖培養(yǎng)基(同實(shí)施例1)上進(jìn)行增殖培養(yǎng)，培養(yǎng)室內(nèi)溫度25°C，光照強(qiáng)度1500-25001x，光照時(shí)間14小時(shí)/天，4周繼代培養(yǎng)一次，增殖系數(shù)為 5。(4)不定芽的生根
將步驟(3)得到的不定芽接種到生根培養(yǎng)基(同實(shí)施例1)上進(jìn)行生根誘導(dǎo)培養(yǎng)，培養(yǎng)室內(nèi)溫度25°C，光照強(qiáng)度1500-25001x，光照時(shí)間14小時(shí)/天，10天后生根率可達(dá)99%，生根數(shù)目平均3-4條/株，根長(zhǎng)度為0. 5-1. Ocm0(5)煉苗
將步驟(4)得到的生根苗在培養(yǎng)室內(nèi)打開(kāi)培養(yǎng)瓶的瓶口煉苗2-3天。(6)穴盤(pán)移栽
煉苗結(jié)束后，將組培苗從培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)取出，洗凈根部存留的培養(yǎng)基，避免傷害組培苗的幼根，然后移栽到盛有基質(zhì)的1 孔穴盤(pán)中，移栽基質(zhì)為重量75%泥炭加25%蛭石，移栽基質(zhì)的含水量為60%-70%，移栽后覆塑料薄膜保溫保濕。(7)穴盤(pán)苗管理
組培苗移栽后保持白天溫度2(T30°C，夜間最低溫度不低于12°C，濕度90%以上；10天后揭開(kāi)塑料薄膜使小苗逐步適應(yīng)濕度50%-70%的環(huán)境條件，移栽2周后開(kāi)始施用氮、磷、鉀復(fù)合肥(同實(shí)施例1)，在此條件下培養(yǎng)30-40天。
權(quán)利要求
1.一種非洲菊組培穴盤(pán)苗的繁育方法，其特征在于，該方法包括以下步驟(1)無(wú)菌材料的獲得采取直徑小于1cm、未露出小花的非洲菊幼小花蕾，用自來(lái)水流水沖洗20min，然后在超凈工作臺(tái)內(nèi)將花蕾置于無(wú)菌瓶中，依次用70%酒精浸泡30s，0. 1%升汞中加入其體積0. 1% 吐溫-80浸泡8-10分鐘，再用無(wú)菌水沖洗4-6遍后待用；(2)不定芽的誘導(dǎo)分化將步驟(1)得到的無(wú)菌材料用小鑷子剝?nèi)セɡ偕系乃邪?，再切掉花蕾表面小花及苞片基部，剩余花托部分，將花托切?塊，接種于不定芽誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基上，將培養(yǎng)瓶置于溫度25°C，光照強(qiáng)度1500-25001X，光照時(shí)間14小時(shí)/天的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，1-2周后外植體膨大，3-4周后出現(xiàn)黃綠色愈傷組織，4-6周后可分化出不定芽；(3)不定芽的增殖將步驟(2)得到的不定芽接種到增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)，培養(yǎng)室內(nèi)溫度25°C，光照強(qiáng)度1500-25001X，光照時(shí)間14小時(shí)/天，4周繼代培養(yǎng)一次，增殖系數(shù)為3_6 ；(4)不定芽的生根將步驟(3)得到的不定芽接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根誘導(dǎo)培養(yǎng)，培養(yǎng)室內(nèi)溫度 250C，光照強(qiáng)度1500-25001x，光照時(shí)間14小時(shí)/天，10天后生根率可達(dá)99%，生根數(shù)目平均 3-4條/株，根長(zhǎng)度為0. 5-1. Ocm ；(5)煉苗將步驟(4)得到的生根苗在培養(yǎng)室內(nèi)打開(kāi)培養(yǎng)瓶的瓶口煉苗2-3天；(6)穴盤(pán)移栽煉苗結(jié)束后，將組培苗從培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)取出，洗凈根部存留的培養(yǎng)基，避免傷害組培苗的幼根，然后移栽到盛有基質(zhì)的穴盤(pán)中，穴盤(pán)填充的移栽基質(zhì)含水量為60%-70%，移栽后覆塑料薄膜保溫保濕；(7)穴盤(pán)苗管理組培苗移栽后保持白天溫度2(T30°C，夜間最低溫度不低于12°C，濕度90%以上；10天后揭開(kāi)塑料薄膜使小苗逐步適應(yīng)濕度50%-70%的環(huán)境條件，移栽2周后開(kāi)始施用肥料，在此條件下培養(yǎng)30-40天。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的非洲菊的組培穴盤(pán)苗的繁育方法，其特征在于所述的不定芽誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基是在V2MS培養(yǎng)基中添加2. 0-10. Omg/L 6-芐基腺嘌呤、0. 1-0. 5mg/L 吲哚乙酸、30g/L蔗糖和3-4g/L瓊脂粉，調(diào)節(jié)pH為5. 8-6. 2。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的非洲菊的組培穴盤(pán)苗的繁育方法，其特征在于所述的不定芽增殖培養(yǎng)基是在MS培養(yǎng)基中添加0. 5-2. Omg/L 6-芐基腺嘌呤或0-10. Omg/L激動(dòng)素、 0. 1-0. 5 mg/L吲哚乙酸、30g/L蔗糖和3_4g/L瓊脂粉，調(diào)節(jié)pH為5. 8-6. 2。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的非洲菊的組培穴盤(pán)苗的繁育方法，其特征在于所述的不定芽生根培養(yǎng)基是在1/2MS培養(yǎng)基中添加0. 1-0. 5mg/L吲哚乙酸或0. 05-0. 5mg/L吲哚丁酸或0. 01-0. 02mg/L萘乙酸、30g/L蔗糖和3_4g/L瓊脂粉，調(diào)節(jié)pH為5. 8-6. 2。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的非洲菊的組培穴盤(pán)苗的繁育方法，其特征在于所述的育苗穴盤(pán)規(guī)格為72 1觀(guān)孔。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的非洲菊的組培穴盤(pán)苗的繁育方法，其特征在于移栽基質(zhì)為重量75%泥炭加25%蛭石。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的非洲菊的組培穴盤(pán)苗的繁育方法，其特征在于移栽2周后施用肥料為氮、磷、鉀復(fù)合肥，采用兩種比例為20 10 20或14 0 14，兩種比例氮磷鉀復(fù)合肥分別用2000倍液交替施用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種非洲菊組培穴盤(pán)苗的繁育方法，包括無(wú)菌材料的獲得，不定芽的誘導(dǎo)分化，不定芽的增殖，不定芽的生根，煉苗與穴盤(pán)移栽等步驟。與傳統(tǒng)非洲菊的繁殖方法相比，本發(fā)明提高了非洲菊的繁殖速度和苗的整齊度，更好的保持了其母本優(yōu)良性狀。另外，采用穴盤(pán)移栽的無(wú)土育苗方法不僅減少了對(duì)土地資源的消耗，極大地提高了移栽成活率，而且避免了土傳病菌通過(guò)種苗的傳播危害，是一種適合非洲菊種苗工廠(chǎng)化生產(chǎn)的有效方法。
文檔編號(hào)A01H4/00GK102415337SQ20111026889
公開(kāi)日2012年4月18日 申請(qǐng)日期2011年9月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月13日
發(fā)明者畢曉穎, 程超, 鄭洋, 雷家軍, 魏秀娟 申請(qǐng)人:沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)