一種改進的鳥巢蕨快速繁殖組織培養(yǎng)基的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種改進的鳥巢蕨快速繁殖組織培養(yǎng)基，屬于植物組織培養(yǎng)【技術(shù)領(lǐng)域】；該培養(yǎng)基包括鳥巢蕨兩個不同生長階段的培養(yǎng)基配方：增殖培養(yǎng)基、生根壯苗培養(yǎng)基；增殖培養(yǎng)基：包括1/2MS、6-BA0.5～3mg/L、KT0.05～0.2mg/L、2，4-D0.1～0.4mg/L、椰子汁100～350ml/L、蔗糖15～40g/L、AC1～2g/L；生根壯苗培養(yǎng)基：1/2MS、蛋白胨0.3～0.8g/L、土豆汁15～45g/L、椰子汁30～80ml/L、蔗糖15～30g/L；利用本發(fā)明的培養(yǎng)基進行鳥巢蕨的組織培養(yǎng)，增殖倍數(shù)可達7.6，生根率100%。組培苗對環(huán)境適應能力強，移栽成活率高。
【專利說明】一種改進的鳥巢蕨快速繁殖組織培養(yǎng)基
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)領(lǐng)域，尤其涉及一種改進的鳥巢蕨快速繁殖組織培養(yǎng)基。
【背景技術(shù)】
[0002]鳥巢蕨是一種附生的蕨類植物，原生于亞洲東南部、澳大利亞東部、印度尼西亞、印度和非洲東部，又稱巢蕨、山蘇花、王冠蕨，為鐵角蕨科，屬多年生陰生草本觀葉植物。鳥巢蕨株形豐滿，葉色蔥綠，喜陰涼環(huán)境，較耐低溫，養(yǎng)護管理較為簡單，抗病害能力強，可連續(xù)多年栽培，近年來被用作高檔葉菜栽培，已成為道地的原生蔬菜。其嫩葉鮮綠，炒食質(zhì)脆爽口，無苦澀味，頗受消費者喜愛。鳥巢蕨主要靠孢子繁殖，但要求條件高，自然條件下難以萌發(fā)出苗，不易獲得批量苗木，而采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，可以在短期內(nèi)實現(xiàn)鳥巢蕨的規(guī)模化生產(chǎn)以滿足市場需求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是提供一種改進的鳥巢蕨快速繁殖組織培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基改變傳統(tǒng)的配方，在培養(yǎng)基中加入不同的物質(zhì)，不僅能促進鳥巢蕨的大量增殖，而且使得鳥巢蕨的生根率得到顯著提高， 通過本發(fā)明培養(yǎng)基培養(yǎng)的鳥巢蕨組培苗對環(huán)境適應能力強，移栽成活率高。
[0004]為了達到上述目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下:
一種改進的鳥巢蕨快速繁殖組織培養(yǎng)基，包括鳥巢蕨兩個不同生長階段培養(yǎng)基:
(1)增殖培養(yǎng)基:包括1/2MS、6-BA 0.5 ~3mg/L、KT 0.05 ~0.2mg/L、2，4_D 0.1 ~
0.4mg/L、椰子汁100~350ml/L、蔗糖15~40g/L、AC I~2g/L，增殖培養(yǎng)基用以誘導鳥巢蕨塊莖快速大面積繁殖；
(2)生根壯苗培養(yǎng)基:1/2MS、蛋白胨0.3~0.8g/L、土豆汁15~45g/L、椰子汁30~80ml/L、蔗糖15~30g/L，生根壯苗培養(yǎng)基對鳥巢蕨幼苗進行生根及壯苗培養(yǎng)，用以增強鳥巢蕨苗木對外界的抵抗力。
[0005]作為優(yōu)選，包括鳥巢蕨兩個不同生長階段培養(yǎng)基:(1)增殖培養(yǎng)基:1/2MS、6_BA
1.5 ~2.5mg/L、KT 0.07 ~0.15mg/L、2，4_D 0.1 ~0.3mg/L、椰子汁 150 ~250ml/L、蔗糖20~30g/L、AC I~2g/L ; (2)生根壯苗培養(yǎng)基:1/2MS、蛋白胨0.4~0.6g/L、土豆汁20~40g/L、椰子汁 40 ~60ml/L、鹿糖 18 ~25g/L。
[0006]作為優(yōu)選，6-BA為6-芐氨基腺嘌呤、KT為激動素、2，4_D為二氯苯氧乙酸、AC為
活性炭。
[0007]作為優(yōu)選，所述增殖培養(yǎng)基與所述生根壯苗培養(yǎng)基需進行高溫滅菌處理，在兩者中加入蔗糖之前，先將蔗糖溶解于水后進行過濾滅菌，然后再加到滅過菌的兩個所述培養(yǎng)基。
[0008]作為優(yōu)選，兩個培養(yǎng)基中的椰子汁是直接將椰子水加熱至80°C以上，然后用至少三層紗布過濾后加入到培養(yǎng)基中。
[0009]作為優(yōu)選，所述增殖培養(yǎng)基與所述生根壯苗培養(yǎng)基的PH值范圍均在5.8~6.2之間。
[0010]作為優(yōu)選，所述增殖培養(yǎng)基與所述生根壯苗培養(yǎng)基兩種培養(yǎng)基的MS均為瓊脂為支撐物的固體培養(yǎng)基。
[0011]本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明在傳統(tǒng)的鳥巢蕨增殖培養(yǎng)基中加入了 KT-激動素，2，4-D，椰子汁；激動素不僅能促進細胞分裂，還具有延緩離體葉片和切花衰老，誘導芽分化和發(fā)育及增加氣孔開度的作用；2，4_D能促進根的形成和配合細胞分裂素使用，還能誘導組織脫分化，促進愈傷組織的增殖，其效果要明顯好于2，4-D-萘乙酸；所述鳥巢蕨生根培養(yǎng)基中加入土豆汁，土豆汁一般含有都含有植物生長所需的碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水，能促進鳥巢蕨高效成長；所述鳥巢蕨增殖和生根壯苗培養(yǎng)基中均含有椰子汁，椰子汁含有蛋白質(zhì)、脂肪、維生素C及鈣、磷、鐵、鉀、鎂、鈉等礦物質(zhì)，營養(yǎng)極為豐富，結(jié)合了鳥巢蕨生長所需的各種大量元素，有利于培育優(yōu)質(zhì)鳥巢蕨幼苗。
【具體實施方式】
[0012]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步的描述。
[0013]本發(fā)明提出一種改進的鳥巢蕨快速繁殖組織培養(yǎng)基，包括鳥巢蕨兩個不同生長階段培養(yǎng)基:
增殖培養(yǎng)基:包括 1/2MS、6-BA 0.5 ~3mg/L、KT 0.05 ~0.2mg/L、2，4_D 0.1 ~0.4mg/L、椰子汁100~350ml/L、 蔗糖15~40g/L、AC I~2g/L，增殖培養(yǎng)基用以誘導鳥巢蕨塊莖快速大面積繁殖；
生根壯苗培養(yǎng)基:包括1/2MS、蛋白胨0.3~0.8g/L、土豆汁15~45g/L、椰子汁30~80ml/L、蔗糖15~30g/L，生根壯苗培養(yǎng)基對鳥巢蕨幼苗進行生根及壯苗培養(yǎng)，用以增強鳥巢蕨苗木對外界的抵抗力。
[0014]其中，6-BA為6-芐氨基腺嘌呤、KT為激動素、2，4_D為二氯苯氧乙酸、AC為活性炭。
[0015]實施例一:
(I)外植體:鳥巢蕨組織培養(yǎng)叢生芽；(2)增殖培養(yǎng):在無菌環(huán)境中將上述叢生芽切成包含I或2個芽點的小塊接種到增殖培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基配方為:1/2MS、6-BA 2.0mg/L、KT0.lmg/L、2，4-D 0.2mg/L、椰汁 200ml/L、蔗糖 25g/L、AC lg/L、瓊脂 5.0g/L，PH 6.0 ;(3)生根壯苗培養(yǎng):增殖培養(yǎng)35d左右，將具有3片以上葉、株高1.5cm以上的增殖苗分成單株，置于生根壯苗培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)基配方為:1/2MS、蛋白胨0.5g/L、椰汁50ml/L、土豆30g/L、蔗糖20g/L、瓊脂5.0g/L, PH 5.8 ； (4)培養(yǎng)過程環(huán)境條件:溫度為24±2°C，光照強度為2500~3500Lx，光照時間為10h/d，所述增殖培養(yǎng)基與所述生根壯苗培養(yǎng)基需進行高溫滅菌處理，在兩者中加入蔗糖之前，先將蔗糖溶解于水后進行過濾滅菌，然后再加到滅過菌的兩個所述培養(yǎng)基，防止蔗糖產(chǎn)生水解反應。
[0016]利用本發(fā)明的培養(yǎng)基進行鳥巢蕨的組織培養(yǎng)，增殖倍數(shù)可達7.6，生根率100%。組培苗對環(huán)境適應能力強，移栽成活率高。
[0017]實施例二:與實施例一不同的是:
增殖培養(yǎng)基配方為:6-BA 2.5mg/L、KT 0.15mg/L、2，4-D 0.3mg/L、椰汁 250ml/L、糖30g/L、AC 2g/L, PH 5.8 ；
生根壯苗培養(yǎng)基配方為:蛋白胨0.6g/L、土豆40g/L、椰汁60ml/L、蔗糖25g/L，PH
6.2。
[0018]實施例三:
與實施例一不同的是:
增殖培養(yǎng)基配方為:6-BA 1.5mg/L、KT 0.07mg/L、2，4-D 0.lmg/L、椰汁 150ml/L、糖20g/L、AC lg/L, PH 6.0 ；
生根壯苗培養(yǎng)基:蛋白胨0.4g/L、土豆20g/L、椰汁40ml/L、蔗糖18g/L，PH 6.00
[0019]實施例四:
與實施例一不同的是:增殖培養(yǎng)基配方為:6-BA 0.5mg/L、KT 0.2mg/L、2，4-D 0.4mg/L、椰汁 350ml/L、糖 15g/L、AC2g/L, PH 5.9 ；
生根壯苗培養(yǎng)基:蛋白胨0.8g/L、土豆15g/L、椰汁80ml/L、蔗糖15g/L，PH 5.9。
[0020]實施例五:
與實施例一不同的是:增殖培養(yǎng)基配方為:6-BA3mg/L、KT 0.05mg/L、2，4-D 0.lmg/L、椰汁 100ml/L、糖 40g/L，PH 6.1 ；
生根壯苗培養(yǎng)基:蛋白胨0.3g/L、土豆45g/L、椰汁30ml/L、蔗糖30g/L，PH6.1。
[0021] 本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明在傳統(tǒng)的鳥巢蕨增殖培養(yǎng)基中加入了 KT-激動素，2，4-D，椰子汁；激動素不僅能促進細胞分裂，還具有延緩離體葉片和切花衰老，誘導芽分化和發(fā)育及增加氣孔開度的作用；2，4-D能促進根的形成和配合細胞分裂素使用，還能誘導組織脫分化，促進愈傷組織的增殖，其效果要明顯好于2，4-D-萘乙酸；所述鳥巢蕨生根培養(yǎng)基中加入土豆汁，土豆汁一般含有都含有植物生長所需的碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水，能促進鳥巢蕨高效成長；所述鳥巢蕨增殖和生根壯苗培養(yǎng)基中均含有椰子汁，椰子汁含有蛋白質(zhì)、脂肪、維生素C及鈣、磷、鐵、鉀、鎂、鈉等礦物質(zhì)，營養(yǎng)極為豐富，結(jié)合了鳥巢蕨生長所需的各種大量元素，有利于培育優(yōu)質(zhì)鳥巢蕨幼苗。
【權(quán)利要求】
1.一種改進的鳥巢蕨快速繁殖組織培養(yǎng)基，其特征在于，包括鳥巢蕨兩個不同生長階段培養(yǎng)基: (1)增殖培養(yǎng)基:包括1/2MS、6-BA 0.5 ~3mg/L、KT 0.05 ~0.2mg/L、2，4_D 0.1 ~0.4mg/L、椰子汁100~350ml/L、蔗糖15~40g/L、AC I~2g/L，增殖培養(yǎng)基用以誘導鳥巢蕨塊莖快速大面積繁殖； (2)生根壯苗培養(yǎng)基:1/2MS、蛋白胨0.3~0.8g/L、土豆汁15~45g/L、椰子汁30~80ml/L、蔗糖15~30g/L，生根壯苗培養(yǎng)基對鳥巢蕨幼苗進行生根及壯苗培養(yǎng)，用以增強鳥巢蕨苗木對外界的抵抗力。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的改進的鳥巢蕨快速繁殖組織培養(yǎng)基，其特征在于，步驟(1)增殖培養(yǎng)基為:1/2MS、6-BA 1.5 ~2.5mg/L、KT 0.07 ~0.15mg/L、2，4_D 0.1 ~0.3mg/L、椰子汁150~250ml/L、蔗糖20~30g/L、AC I~2g/L ；(2)生根壯苗培養(yǎng)基為:1/2MS、蛋白胨0.4~0.6g/L、土豆汁20~40g/L、椰子汁40~60ml/L、鹿糖18~25g/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的改進的鳥巢蕨快速繁殖組織培養(yǎng)基，其特征在于，6-BA為6-芐氨基腺嘌呤、KT為激動素、2，4-D為二氯苯氧乙酸、AC為活性炭。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的改進的鳥巢蕨快速繁殖組織培養(yǎng)基，其特征在于，所述增殖培養(yǎng)基與所述生根壯苗培養(yǎng)基需進行高溫滅菌處理，在兩者中加入蔗糖之前，先將蔗糖溶解于水后進行過濾滅菌，然后再加到滅過菌的兩個所述培養(yǎng)基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的改進的鳥巢蕨快速繁殖組織培養(yǎng)基，其特征在于，兩個培養(yǎng)基中的椰子汁是直接 將椰子水加熱至80°C以上，然后用至少三層紗布過濾后加入到培養(yǎng)基中。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的改進的鳥巢蕨快速繁殖組織培養(yǎng)基，其特征在于，所述增殖培養(yǎng)基與所述生根壯苗培養(yǎng)基的PH值范圍均在5.8~6.2之間。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的改進的鳥巢蕨快速繁殖組織培養(yǎng)基，其特征在于，所述增殖培養(yǎng)基與所述生根壯苗培養(yǎng)基兩種培養(yǎng)基的MS均為瓊脂為支撐物的固體培養(yǎng)基。
【文檔編號】A01H4/00GK104026018SQ201410278170
【公開日】2014年9月10日 申請日期:2014年6月20日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月20日
【發(fā)明者】張本厚, 胡燕花, 陳集雙 申請人:南京工業(yè)大學大豐海洋產(chǎn)業(yè)研究院