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      技術(shù)特征:

      1.一種懷集報春苣苔組織培養(yǎng)和快速繁殖方法,其特征在于,包括以下步驟:

      a.外植體的消毒和初代誘導(dǎo)培養(yǎng):取懷集報春苣苔葉片為外植體,清洗消毒后,將葉片切成0.5~1.0cm×1.0~2.0cm小塊,接種于初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng),誘導(dǎo)芽的形成,得到萌發(fā)幼芽的愈傷組織;所述的初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:每升含有6-BA 0.5~1.5mg、NAA 0.05~0.5mg、蔗糖30g、瓊脂6g,余量為MS培養(yǎng)基,pH為6.5;

      b.芽的誘導(dǎo)和繼代增殖:將萌發(fā)幼芽的愈傷組織切割成只帶3~4個芽的小塊,接種于增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng),誘導(dǎo)叢生芽的形成,得到繼代培養(yǎng)苗;所述的增殖培養(yǎng)基為:每升含有6-BA 0.1~0.5mg、NAA 0.05~0.5mg、蔗糖30g、瓊脂6g,余量為MS培養(yǎng)基,pH為6.5;

      c.壯苗和生根培養(yǎng):待繼代培養(yǎng)苗長到3~4個葉片時,將繼代培養(yǎng)苗切分出來接種到壯苗培養(yǎng)基上培養(yǎng)壯苗,然后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到生根苗;所述的壯苗培養(yǎng)基為:每升含有活性炭0~2g、蔗糖30g、瓊脂6g,余量為MS培養(yǎng)基,pH為6.5;所述的生根培養(yǎng)基為:每升含有NAA 0.1~0.5mg、活性炭0~2g、蔗糖30g、瓊脂6g,余量為1/2MS培養(yǎng)基,pH為6.5;

      d.試管苗移栽:當(dāng)生根苗長至7-8片葉子時,進(jìn)行煉苗,然后洗掉生根苗根部培養(yǎng)基,栽入移栽基質(zhì)中,置于遮陰、濕潤的環(huán)境下培養(yǎng);所述的移栽基質(zhì)是將泥炭土和珍珠巖按體積比2:1混合均勻得到的;

      所述的步驟a、b和c的培養(yǎng)條件均為:溫度25±2℃、光照強(qiáng)度1500lx、光照時間12h/d。

      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步驟a的清洗消毒,是將葉片用洗潔精漂洗20min,流水沖洗30min,然后在超凈工作臺上用體積分?jǐn)?shù)75%乙醇溶液浸泡30s,質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1%HgCl2溶液消毒4~5min,用無菌水漂洗5~6次,用無菌濾紙吸干表面水分。

      3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步驟d的煉苗,是把蓋有瓶塞的培養(yǎng)瓶中的生根苗放置于陰棚里培養(yǎng)2-3d,然后打開瓶塞又繼續(xù)培養(yǎng)3-4d。

      4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:每升含有6-BA 1.0mg、NAA 0.1mg、蔗糖30g、瓊脂6g,余量為MS培養(yǎng)基,pH為6.5。

      5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的增殖培養(yǎng)基為:每升含有6-BA 0.25mg、NAA 0.1mg、蔗糖30g、瓊脂6g,余量為MS培養(yǎng)基,pH為6.5。

      6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的生根培養(yǎng)基為:每升含有NAA 0.1mg、活性炭2g、蔗糖30g、瓊脂6g,余量為1/2MS培養(yǎng)基,pH為6.5。

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