一種蘿卜胞質(zhì)雄性不育系選育的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及蘿卜雜種優(yōu)勢培育領(lǐng)域，特別涉及一種蘿卜胞質(zhì)雄性不育系選育的方 法。
【背景技術(shù)】
[0002] 蘿卜（Raphanus sativus L.)又名萊菔、蘆菔，是十字花科蘿卜屬的常異花授粉植 物。蘿卜起源于中國，栽培歷史悠久，分布較廣，種質(zhì)資源豐富，具有顯著的雜種優(yōu)勢。利用 雜種優(yōu)勢能大幅度提高產(chǎn)量和改善品質(zhì)，雄性不育是利用雜種優(yōu)勢的重要途徑，具有種子 純度高、節(jié)省人力的優(yōu)點(diǎn)。培育新型不育系是利用雜種優(yōu)勢的前提和基礎(chǔ)。在育種實(shí)踐中， 轉(zhuǎn)育是改良原有不育系缺陷，獲得性狀優(yōu)異不育系的重要工作。傳統(tǒng)上蘿卜不育系轉(zhuǎn)育需 要人工進(jìn)行大量的雜交、回交篩選工作?？焖?、準(zhǔn)確建立不育系是蘿卜雜交育種工作中急需 解決的技術(shù)問題。
[0003] 蘿卜雄性不育的遺傳背景復(fù)雜，不同種質(zhì)具有不同的雄性不育基因，在轉(zhuǎn)育不育 系的過程中，不同種質(zhì)對(duì)不育性的保持能力有差異，可分為4個(gè)類型一一完全保持型、易保 持型、不穩(wěn)定保持型和不易保持型。因此保持系篩選是轉(zhuǎn)育不育系能否取得成功的關(guān)鍵。蘿 卜作為常異花授粉植物，具有嚴(yán)重的自交衰退現(xiàn)象，保持系作為不育系轉(zhuǎn)育的輪回親本，隨 著轉(zhuǎn)育世代的增加，多代自交的保持系易出現(xiàn)嚴(yán)重退化，影響不育系的穩(wěn)定，降低不育系配 合力。
[0004] 20世紀(jì)70年代以來，蘿卜雄性不育系轉(zhuǎn)育、利用、遺傳機(jī)制的研究等工作大量開 展，尤其是分子標(biāo)記輔助選擇等現(xiàn)代生物技術(shù)的應(yīng)用促進(jìn)了保持系篩選工作的優(yōu)化，但通 過人工進(jìn)行自交、雜交的傳統(tǒng)方式?jīng)]有得到改善，不育系轉(zhuǎn)育的田間工作沒有能夠優(yōu)化，因 此改進(jìn)蘿卜不育系的田間轉(zhuǎn)育工作的操作方式十分迫切。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 有鑒于此，本發(fā)明的目的是針對(duì)目前蘿卜雄性不育系選育工作中消耗大量人工的 不足之處，提供一種省工、高效的選育方法。
[0006] 本發(fā)明通過以下技術(shù)手段解決上述問題：
[0007] 本發(fā)明的一種蘿卜胞質(zhì)雄性不育系選育的方法，包括以下步驟：
[0008] 步驟1 :雜交產(chǎn)生F1 ;
[0009] 步驟1. 1 :保持系選擇；
[0010] 保持系選擇具有優(yōu)異性狀的自交系，要求種性純，一致性高，無明顯自交衰退，自 交結(jié)實(shí)率高；保持系種株符合種質(zhì)特征，生長整齊一致；
[0011] 步驟1.2:母本選擇；
[0012] 選種圃選擇生長良好的具有不育性狀的植株作為母本；
[0013] 步驟1.3:種株定植；
[0014] 父本5株，母本5株連片定植，并與其它小區(qū)間隔1.5米；
[0015] 步驟1.4:花期處理；
[0016] 花期前種株用防蟲網(wǎng)罩進(jìn)行隔離，開花后再次調(diào)查父本一致性，拔除不符合一致 性的雜株；母本調(diào)查育性，拔除可育株，調(diào)查完成之后所有種株去花，然后放熊蜂或壁蜂進(jìn) 行授粉；
[0017] 步驟1.5:收種；
[0018] 保持系單株收種保存，匕雜交種混收保存；
[0019] 步驟2 :雜交產(chǎn)生BC^;
[0020] 步驟2. 1 :播種；
[0021] 保持系選用步驟1. 5中保存的種子，母本為步驟1. 5中保存的匕雜交種；
[0022] 步驟2. 2 :種株定植；
[0023] 調(diào)查保持系純度，符合步驟1. 1的要求后，篩選種株10株；母本挑選生長良好種株 50株以上；保持系與母本連片種植，并與其它小區(qū)間隔1. 5米；
[0024] 步驟2. 3 :花期處理；
[0025] 開花前種株用防蟲網(wǎng)罩進(jìn)行隔離，開花后再次調(diào)查父本一致性，拔除不符合一致 性的雜株；母本調(diào)查育性，拔除可育株并計(jì)算匕代不育率X。，調(diào)查完成之后所有種株去花， 然后放熊蜂或壁蜂進(jìn)行授粉，\若為〇,保持系為不易保持型，此保持系淘汰；
[0026] 步驟2. 4 :估算轉(zhuǎn)育世代；
[0027] 根據(jù)X。估算蘿卜不育系轉(zhuǎn)育BC A的不育率，確定轉(zhuǎn)育代數(shù)并估算BC兄的不育 率；
[0028] 步驟2. 5:收種；
[0029] 與步驟1. 5中相同，保持系單株收種保存，BC^混收保存；
[0030] 步驟3 :雜交產(chǎn)生BC2F1;
[0031] 與步驟2相同，根據(jù)實(shí)際調(diào)查的BC^的不育率X i與估算的不育率進(jìn)行比較，當(dāng)實(shí) 際調(diào)查的不育率顯著低于估算的不育率時(shí)，保持系為不穩(wěn)定保持型可疑型，不育率受環(huán)境 等影響較大，此保持系淘汰；
[0032] 步驟4 :雜交產(chǎn)生BC3F1;
[0033] 與步驟3相同，淘汰不穩(wěn)定保持型可疑型的保持系；BCnFi代與輪回親本保持系遺 傳相似成分
BCR與輪回保持系的遺傳相似成分達(dá)到93. 75%，則初步測定 配合力及試配雜交種；
[0034] 步驟5 :不育系選育完成；
[0035] BC3Fi代之后的回交轉(zhuǎn)育過程與步驟4相同，根據(jù)不育系的不育率確定轉(zhuǎn)育進(jìn)程， 直至達(dá)到要求并穩(wěn)定，然后開展后續(xù)新品種選育工作。
[0036] 進(jìn)一步地，所述步驟1. 2中選種圃選擇生長良好的具有不育性狀的植株作為母本 中所述母本為商品種F1或穩(wěn)定不育系。
[0037] 進(jìn)一步地，所述步驟1. 3中的父本為保持系。
[0038] 進(jìn)一步地，所述步驟2. 4中根據(jù)X。估算蘿卜不育系轉(zhuǎn)育BC丸的不育率的公式為 Xn= ι-(ι-χ0)η+1。
[0039] 本發(fā)明的一種蘿卜胞質(zhì)雄性不育系選育的方法具有以下有益效果：
[0040] 本發(fā)明的目的是針對(duì)目前蘿卜雄性不育系選育工作中消耗大量人工的不足之處， 提供一種省工、高效的選育方法。
[0041] 用本發(fā)明選育蘿卜胞質(zhì)雄性不育系具有如下優(yōu)點(diǎn)：
[0042] (1)蘿卜胞質(zhì)雄性不育系的選育是蘿卜雜交育種的重要部分，但生產(chǎn)實(shí)踐表明蘿 卜雄性不育基因復(fù)雜，保持系篩選與不育系轉(zhuǎn)育的工作繁瑣。按照常規(guī)的雄性不育系轉(zhuǎn)育 手段，需要大量的人工進(jìn)行轉(zhuǎn)育工作，而本方法在轉(zhuǎn)育過程中利用壁蜂等蟲媒節(jié)省了人工， 擴(kuò)大了轉(zhuǎn)育規(guī)模，能夠有效排除不穩(wěn)定保持型保持系。
[0043] (2)按照常規(guī)的雄性不育系轉(zhuǎn)育手段，作為輪回親木的保持系隨著自交世代的增 加自交衰退的現(xiàn)象較為嚴(yán)重，不利于選擇優(yōu)良的雄性不育系。因此在轉(zhuǎn)育過程中需要增加 輪回親本的選擇工作，本發(fā)明利用保持系混交的方式進(jìn)行加代，能夠避免自交衰退現(xiàn)象，同 時(shí)利用蟲媒授粉，減少人工。
【具體實(shí)施方式】
[0044] 下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明的
【發(fā)明內(nèi)容】
作進(jìn)一步說明。
[0045] (1)雜交產(chǎn)生F1
[0046] (1. 1)保持系選擇
[0047] 選用自交系A(chǔ)1、A2、A3、A4作為保持系，四個(gè)自交系分別選育自地方品種揚(yáng)州圓白 蘿卜（A1，南京理想種苗有限公司）、里外青蘿卜（A2,青縣鑫農(nóng)蔬菜種苗育種中心）、特級(jí)紅 麗枇杷葉（A3,江西省豐城市蔬菜研究所）、南京紅（A4,南京沃蔬種業(yè)有限公司）。保持系 性狀優(yōu)異，種性純，一致性高，無明顯自交衰退，自交結(jié)實(shí)率高。種株符合地方品種特征，生 長整齊一致。
[0048] (1. 2)母本選擇
[0049] 母本選擇商品種早熟紅小新櫻桃蘿卜，由香港高華種子有限公司生產(chǎn)。
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