專利名稱：多標(biāo)記連續(xù)注射免疫及基因分析系統(tǒng)的制作方法
免疫檢測和基因分析技術(shù)在當(dāng)今生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域內(nèi)得到了廣泛的應(yīng)用，并已經(jīng)在臨床診斷、科學(xué)研究、環(huán)境及衛(wèi)生檢測、法醫(yī)鑒定等諸多部門中成為必備的常規(guī)技術(shù)手段，發(fā)揮著不可替代的作用。其中大量的工作是對同一標(biāo)本進(jìn)行多指標(biāo)平行測定，如內(nèi)分泌疾病的臨床診斷中，常常需要對整個垂體-性腺軸及相關(guān)腺體所分泌的激素及其代謝物水平進(jìn)行多項測定；器官移植配型及法醫(yī)個體識別和親子鑒定中更需要同時分析人類組織相容抗原(HLA)的多個位點。然而，由于以往的技術(shù)均屬于單標(biāo)記分析系統(tǒng)，即僅使用一種標(biāo)記作為示蹤劑，因而每次實驗僅能測定一個指標(biāo)，在遇到上述情況時，盡管每個實驗的流程幾乎完全一致，也只能進(jìn)行多次重復(fù)實驗。這不僅使實驗周期、試劑消耗和工作量成倍增加，既不利于實現(xiàn)快速診斷，又加重了醫(yī)院和患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)；而且其標(biāo)本需要量也大幅度增長，既提高了工作難度，也加重了患者的痛苦；更為重要的是，由于所需數(shù)據(jù)是在不同時間下的獨立實驗中分別獲得的，所以會因儀器零點的漂移和實驗操作的誤差導(dǎo)致相互不匹配甚至矛盾的狀況，這又常常造成最終結(jié)果難于判定的局面，乃至誤診或漏診的后果。
為此，人們一直在尋找一種簡單、廉價、快速、靈敏的多指標(biāo)平行測定技術(shù)，1999年底，美國人Chandler等以流式細(xì)胞計(Flow Cytometer)為基礎(chǔ)，通過增加一套接口電路及其相應(yīng)計算機數(shù)據(jù)處理軟件，建立了一個多標(biāo)記分析系統(tǒng)(專利號5,981,180)。該設(shè)計在樣品輸送及信號獲取方面完全沿用了流式細(xì)胞計的硬件設(shè)備，而利用帶有兩個以上熒光標(biāo)志的微粒(Micro-Particle)作為載體，以第三種熒光物質(zhì)標(biāo)記生物大分子；在流式細(xì)胞計中，以前兩種熒光信號來區(qū)分不同的微粒，即不同的檢測項目；而以后一種熒光信號衡量免疫及核酸結(jié)合強度；其專利的核心技術(shù)基本限于微粒標(biāo)記、數(shù)據(jù)處理和應(yīng)用領(lǐng)域等方面。
但由于流式細(xì)胞計是專門進(jìn)行單個細(xì)胞免疫學(xué)分型的設(shè)備，一般只承擔(dān)細(xì)胞的定性和半定量分析任務(wù)，將其應(yīng)用于定量免疫及基因分析領(lǐng)域時不免存在種種不足。首先，流式細(xì)胞計采用了信噪比較低的普通熒光標(biāo)記技術(shù)，其用于定量免疫分析時的最低檢測限在納克(ng)水平，大大低于可達(dá)到皮克(pg)水平以下的第三代標(biāo)記技術(shù)，如生物發(fā)光及化學(xué)發(fā)光(Bioluminescence & Chemiluminescence)、場致發(fā)光(Electroluminescence，或稱電化學(xué)發(fā)光，Electrochemiluminescence)、時間延遲光致發(fā)光(Time Delayed Photoluminescence，或稱時間分辨熒光，Time Resolved Fluorescence)等，事實上，目前在定量免疫分析領(lǐng)域內(nèi)，常規(guī)熒光標(biāo)記技術(shù)已經(jīng)趨于淘汰。其次，由于該系統(tǒng)以微粒為固相載體，使得激發(fā)光的散射對檢測器的干擾更為嚴(yán)重，從而進(jìn)一步削弱了信噪比，也使其被迫采用靈敏度較低的光電倍增管(Photo multiplier Tube，PMT)，以光電流放大的方式檢測信號，而無法使用更靈敏度更高、線性范圍更寬的單光子計數(shù)器(Single Photon Counter)。第三，由于流式細(xì)胞計的樣品檢測管僅允許單個細(xì)胞通過，所以在選擇載體時只能使用直徑在4微米(μM)左右的微粒，這就產(chǎn)生了一個很大的瓶頸一方面為了提高免疫及核酸結(jié)合的效率必須要求加入大量的微粒(每個樣品約上百萬個)以增加表面積；另一方面由于檢測管直徑、液體流速和檢測器靈敏度的限制，即使最先進(jìn)的流式細(xì)胞計每秒最多也只能檢測2000個顆粒，所以無法將所有微粒均檢測一遍，在實際應(yīng)用中每個項目僅能檢測50個左右的顆粒，這僅占參與反應(yīng)載體的很少部分；加之這樣小的顆粒在大小、形狀、熒光強度等方面很難達(dá)到很好的均一性，因而又大大增加了實驗誤差，降低了靈敏度，因此在該儀器的實際應(yīng)用中，即使將加工好的微粒進(jìn)行代價昂貴的預(yù)篩選，也經(jīng)常出現(xiàn)分類錯誤。第四，由于流式細(xì)胞計裝備有成本極高的微米級光學(xué)聚焦和分光系統(tǒng)，因此其售價均在10萬美元以上，大大高于一般免疫及基因分析設(shè)備的價格。
鑒于上述分析，我們在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上，綜合各項樣品處理及檢測方式的優(yōu)勢，結(jié)合免疫和基因分析的特點，設(shè)計了一套全新的“多標(biāo)記連續(xù)注射免疫及基因分析系統(tǒng)”，較好地解決了上述不足。該系統(tǒng)組成如附

圖1所示，(1)是盛有樣品的反應(yīng)管；(2)是摻有銪(Eu)、鏑(Dy)、釤(Sm)、鋱(Tb)等鑭系或錒系元素螯合物，可以產(chǎn)生時間延遲光致發(fā)光的高分子聚合物小球，其直徑至少在50微米以上；不同的標(biāo)記物種類和含量代表不同類型的小球，當(dāng)其表面包被不同的抗原、抗體或基因探針時，便可用于測定不同項目；由于其單個顆粒的表面積是流式細(xì)胞計所用微粒的上百倍((50/4)2)，因此只要在每個樣品中加入上萬個，即可達(dá)到上百萬個微粒的反應(yīng)效率。(3)是帶有標(biāo)記的游離抗原、抗體或基因探針，當(dāng)其和小球上的特異生物分子結(jié)合以后，該標(biāo)記信號就表示免疫及核酸結(jié)合的強度；這種標(biāo)記可以是時間延遲光致發(fā)光、場致發(fā)光、生物發(fā)光或化學(xué)發(fā)光等諸項之一，其共同特點是至少在檢測信號時無須激發(fā)光。(4)是連續(xù)注射泵，它將樣品輸送到微型檢測池(5)，該檢測池僅能容納一個小球，其入口接連續(xù)注射泵，出口接排放，雖然其容積很小，但由于顆粒數(shù)已經(jīng)下降為上萬個，因此如按每秒測定一千個小球計算，十幾秒內(nèi)便可測完整個樣品，而這個速度正好符合時間延遲光致發(fā)光的最佳測定方式(原因見下)。(6)為小球探測器，用于探測是否有小球出入檢測池；圖中所示為電容式探測器，其工作原理為由分布在檢測池兩側(cè)的一對電極構(gòu)成一個電容器，當(dāng)有小球進(jìn)入檢測池時，由于高分子聚合物與樣品溶液(水)的介電常數(shù)有很大的不同，從而導(dǎo)致其電容值的變化，本設(shè)計中也可以使用其它類型的小球探測器。(7)是專門為檢測時間延遲光致發(fā)光信號而設(shè)計的脈沖激發(fā)/間歇測量同步器；由于時間延遲光致發(fā)光的量子機制與常規(guī)熒光有很大的差異，前者在吸收激發(fā)光能量后，外層電子先由基態(tài)(ground)躍遷到單線態(tài)(Singlet)，再躍遷到三重態(tài)(Triglet)，而后再回到單線態(tài)，最后恢復(fù)到基態(tài)時才發(fā)射光子；而后者只有基態(tài)和單線態(tài)之間的躍遷；因此時間延遲光致發(fā)光的弛豫(relaxation)時間，即從受激發(fā)到發(fā)射光子的時間間隙，達(dá)到了毫秒級(ms，即10-3秒)，大大高于常規(guī)熒光納秒(ns，即10-9秒)以下的水平；正是基于這一特點，近年來人們對時間延遲光致發(fā)光信號建立了脈沖激發(fā)/同步間歇測量方法，即利用適當(dāng)裝置使激發(fā)光以脈沖方式照射樣品，同時在兩次照射的間隙才打開單光子計數(shù)器測量信號，即“激發(fā)時不測量，測量時不激發(fā)”，而照射與測量的間隔正好相當(dāng)于該物質(zhì)的弛豫時間；從而既保證了檢測信號的完整性，又完全消除了激發(fā)光散射對檢測器的干擾；在靜態(tài)固相載體(微孔板)上進(jìn)行的定量免疫檢測實驗證明，該方法的靈敏度比常規(guī)熒光標(biāo)記提高了數(shù)百至上千倍，而達(dá)到甚至超過了場致發(fā)光、生物發(fā)光或化學(xué)發(fā)光的水平；我們此次將該技術(shù)應(yīng)用于激發(fā)光散射干擾更加嚴(yán)重的動態(tài)固相載體(顆粒)，其效果更為明顯；該檢測方式更為重要的意義在于它打破了常規(guī)檢測方式僅利用波長差異濾除噪聲及分辨不同信號的限制，而增加了利用信號衰減時間或弛豫時間差異來濾除噪聲及分辨不同信號的全新工作方式；換言之，該設(shè)計中不僅可以利用不同標(biāo)記物的信號波長不同來篩選或區(qū)分它們，也可以通過調(diào)節(jié)同步器，利用不同標(biāo)記物的信號衰減時間或弛豫時間不同來篩選或區(qū)分它們；圖中顯示的是一種轉(zhuǎn)盤式同步器，它實際上是一塊按特定速度旋轉(zhuǎn)的多孔圓盤，可使外界的激發(fā)光束按一定時間間隔透過小孔照射到其中心的樣品上，并使樣品發(fā)出的信號也按相應(yīng)方式在激發(fā)的間隙從小孔中投射到檢測器上，調(diào)節(jié)其轉(zhuǎn)速就可改變激發(fā)/測量之間的時間間隙，從而可篩選或區(qū)分具有不同衰減時間或弛豫時間的信號；在實際應(yīng)用中也可用其它方式實現(xiàn)同步器的功能，如脈沖激光器加同步程控單光子計數(shù)器、機械或液晶(LCD)快門等；按弛豫時間為1毫秒計算，每秒可變換激發(fā)/測量方式一千次，即最多可測定一千個小球。(8)為激發(fā)光源，它可以是激光器、也可以是帶有分光系統(tǒng)的普通光源，如氘燈、鹵素?zé)?、鎢燈等；(9)(10)(11)為單光子計數(shù)器，其中一個用于檢測顯示免疫及核酸結(jié)合強度的標(biāo)記信號，其它的均用于檢測小球上的時間延遲光致發(fā)光信號，以作為建立項目分類參數(shù)的依據(jù)(具體方法見以下內(nèi)容)；在實際應(yīng)用中根據(jù)小球上標(biāo)記物種類的多少，其檢測器數(shù)目可以有一個到多個不等，但為表述方便，圖中僅顯示兩個；(12)(13)(14)是為各個單光子計數(shù)器配備的濾光片，以使其能分別測定特定波長的信號。
附圖2是該系統(tǒng)的整體運行流程圖，首先通過啟動指令(Start)使單光子計數(shù)器D1、D2、D3和小球檢測器Db進(jìn)入工作狀態(tài)，其中D1、D2用于檢測小球上的時間延遲光致發(fā)光信號，即分類信號；D3用于檢測顯示免疫及核酸結(jié)合強度的標(biāo)記信號；如前所述，檢測分類信號的檢測器可以有多個，為表述方便，此時僅顯示兩個，即D1和D2。這些檢測器將得到的數(shù)據(jù)(X1、X2、X)分別保存在相應(yīng)的寄存器(S1、S2、S3)中，并不斷刷新；小球檢測器Db的工作方式基本相同，只是僅輸出邏輯信號，即檢測到小球時輸出(Sb)為1，否則為0。當(dāng)Sb為1，即小球出現(xiàn)時，邏輯判別器將檢測數(shù)據(jù)X1X2和X送到預(yù)處理器；否則，系統(tǒng)重新回到前端使寄存器清零，并不斷接受來自檢測器的數(shù)據(jù)，直到下一個小球出現(xiàn)。在預(yù)處理器中，分類數(shù)據(jù)X1和X2通過預(yù)先設(shè)定的閾值參數(shù)(T1、T2)和取整函數(shù)換算為該小球分類參數(shù)(C1、C2)。每一個小球有數(shù)個分類參數(shù)，取決于其標(biāo)記物種類的多少，在該圖中顯示每個小球有兩個分類參數(shù)，這些參數(shù)共同組成了該小球的類別標(biāo)識，就如同人類社會中身份證號的構(gòu)成，代表不同含義的幾個數(shù)字連接在一起，形成了每一個個體終生唯一的獨特數(shù)字標(biāo)簽。在得到這個類別標(biāo)識以后，在一連串的邏輯判別器中將其與預(yù)先設(shè)定的，對應(yīng)于特定小球的各個檢測項目分類標(biāo)識一一比較，如果發(fā)現(xiàn)該小球的類別標(biāo)識與某一檢測項目的分類標(biāo)識相同，則將免疫及核酸結(jié)合強度信號X累加在相應(yīng)的存儲區(qū)內(nèi)并累計該項目的已檢測小球數(shù)(Na、Nb、Nn)，同時系統(tǒng)依舊回到前端使寄存器清零，并不斷接受來自檢測器的數(shù)據(jù)，直到下一個小球出現(xiàn)。上述過程不斷重復(fù)，直到整個測量完畢后，在停止信號的作用下系統(tǒng)停機，同時計算單元分別計算出各個檢測項目的平均免疫及核酸結(jié)合強度信號(Fa、Fb、Fn)。
該設(shè)計具有以下幾個突出的優(yōu)勢首先它使用了目前最先進(jìn)的第三代標(biāo)記系統(tǒng)，其中包括用于檢測分類信號的時間延遲光致發(fā)光；用于檢測免疫及核酸結(jié)合強度信號的場致發(fā)光、生物發(fā)光或化學(xué)發(fā)光等，這使得該系統(tǒng)的最低檢測限達(dá)到了pg水平以下；同時由于時間延遲光致發(fā)光標(biāo)記物的種類繁多，也使得該系統(tǒng)的容量，即可同時檢測的項目數(shù)大大提高。在檢測技術(shù)方面，該系統(tǒng)同樣使用了目前最先進(jìn)的脈沖激發(fā)/間歇測量方式和單光子計數(shù)器，不僅完全避免了標(biāo)記顆粒的散射作用對檢測器的干擾，而且也大大提高了信噪比。上述兩項技術(shù)使得該系統(tǒng)的檢測靈敏度和線性范圍達(dá)到了現(xiàn)今檢測技術(shù)所能達(dá)到的最高水平。第三，該系統(tǒng)將小球的直徑提高到50微米以上，同時選用了與之配套的微型檢測池，這不僅提高了檢測效率，使該系統(tǒng)可在完全不影響免疫及核酸結(jié)合效率的情況下，在十幾秒內(nèi)測完所有小球；而且由于小球體積變大，使其在同樣精度下的加工難度減小，從而在提高檢測精度的同時降低了成本。第四，該系統(tǒng)采用了單獨的小球檢測器和相應(yīng)的邏輯判斷器，使得由于實驗誤差和儀器擾動造成的誤讀被輕易地排除。第五，該系統(tǒng)省去了價格昂貴，調(diào)試和維護(hù)技術(shù)難度高的微米級光學(xué)聚焦和分光系統(tǒng)，從而既大大降低了儀器成本，也方便了基層醫(yī)療單位的使用。
以下是該發(fā)明的兩個實施例，這些實施例僅用于說明本發(fā)明，但本發(fā)明的內(nèi)容不限于以下實施例。
實施例一利用多標(biāo)記連續(xù)注射免疫及基因分析系統(tǒng)同時定量檢測五項甲狀腺內(nèi)分泌功能指標(biāo)，即總甲狀腺素(TT4)、總?cè)饧谞钕偎?TT3)、游離甲狀腺素(FT4)、游離三碘甲狀腺素(FT3)、促甲狀腺素(TSH)。分別選用五種摻有不同含量Eu和Dy螯合物的小球包被各自特異抗體，若將螯合物單位含量定義為1，則五種小球的類別標(biāo)識(即檢測項目的分類標(biāo)識)分別為TT4--1Eu-0Dy、TT3--0Eu-1Dy、FT4--2Eu-0Dy、FT3--0Eu-2Dy、TSH--1Eu-1Dy。而這五種檢測項目中，均采用同一種標(biāo)記物，即辣根過氧化物酶(HRP)催化的增敏化學(xué)發(fā)光(Enhanced Chemiluminescence，ECL)用于顯示免疫結(jié)合強度。檢測步驟如下(1)將標(biāo)準(zhǔn)品系列和血清樣品分別與上述五種小球及標(biāo)記物混合，37℃反應(yīng)15-30分鐘后洗滌，并加入發(fā)光底物。
(2)將兩個分類檢測器D1和D2的工作波長分別調(diào)整到Eu和Dy螯合物的發(fā)射波長；將免疫結(jié)合強度檢測器D3的工作波長調(diào)整到HRP催化ECL的波長。
(3)將上述反應(yīng)混合物通過連續(xù)注射泵注入微型檢測池，適當(dāng)調(diào)節(jié)流速使其達(dá)到每秒1000個左右小球的通過率。開動檢測系統(tǒng)，直到樣品全部檢測完畢，計算每種小球(檢測項目)各自的平均信號強度(FTT4、FTT3、FFT4、FFT3、FTSH)。
(4)每一個標(biāo)準(zhǔn)品或樣品進(jìn)行一次(3)所述步驟。
(5)以標(biāo)準(zhǔn)品中的已知濃度為橫坐標(biāo)，以相應(yīng)平均信號強度為縱坐標(biāo)進(jìn)行曲線回歸，以此建立五種檢測指標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(6)將各個樣品中的五種平均信號強度分別代入相應(yīng)的(5)所述標(biāo)準(zhǔn)曲線，分別計算出每個樣品中的TT4、TT3、FT4、FT3及TSH的濃度。
實施例二利用多標(biāo)記連續(xù)注射免疫及基因分析系統(tǒng)進(jìn)行人類組織相容抗原HLA-DQA位點配型。HLA-DQA位點的編碼序列存在多態(tài)性，在一般人群中約有10種常見等位基因分布，且多數(shù)個體為雜合子，而正是這種基因差異決定了該個體的HLA-DQA位點類型。我們利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction，PCR)及生物素標(biāo)記的引物將該基因片段擴增出數(shù)百萬個帶有生物素標(biāo)記的拷貝；同時將針對各種等位基因的探針分別包被到不同的小球上，通過分子雜交使這些拷貝分別與特異小球結(jié)合；最后加入親和素-辣根過氧化物酶結(jié)合物(Avidin-HRP)，通過親和素與生物素的特異結(jié)合使該小球可產(chǎn)生酶促增敏化學(xué)發(fā)光，以此達(dá)到檢測之目的。具體方法是分別選用十二種摻有不同含量Eu和Dy螯合物的小球包被十種等位基因特異探針(A1-A10)和陽性對照(PC)及陰性對照(NC)探針，若將螯合物單位含量定義為1，則十二種小球的類別標(biāo)識(即檢測項目的分類標(biāo)識)分別為A1--1Eu-0Dy、A2--0Eu-1Dy、A3--1Eu-1Dy、A4--2Eu-0Dy、A5--0Eu-2Dy、A6--2Eu-2Dy、A7--2Eu-1Dy、A8--1Eu-2Dy、A9--3Eu-0Dy、A10--0Eu-3Dy、NC--3Eu-1Dy、PC--1Eu-3Dy。而這十二種檢測項目中，均采用同一種間接標(biāo)記物，即Avidin-HRP催化的增敏化學(xué)發(fā)光用于顯示核酸結(jié)合(分子雜交)強度。檢測步驟如下(1)將標(biāo)本的DNA粗提物與特異引物、TagDNA聚合酶、四種脫氧核苷酸(dNTP)及緩沖液混合后，在DNA熱循環(huán)擴增儀中進(jìn)行PCR。
(2)將上述PCR產(chǎn)物與十二種小球及雜交緩沖液混合，加熱至95℃以上變性5分鐘以后，降至特定雜交溫度(經(jīng)過實驗確定)反應(yīng)60分鐘；洗滌后加入Avidin-HRP，37℃反應(yīng)30分鐘；再次洗滌后加入發(fā)光底物。
(3)將兩個分類檢測器D1和D2的工作波長分別調(diào)整到Eu和Dy螯合物的發(fā)射波長；將分子雜交強度檢測器D3的工作波長調(diào)整到HRP催化ECL的波長。
(4)將上述反應(yīng)混合物通過連續(xù)注射泵注入微型檢測池，適當(dāng)調(diào)節(jié)流速使其達(dá)到每秒1000個左右小球的通過率。開動檢測系統(tǒng)，直到樣品全部檢測完畢，計算每種小球(檢測項目)各自的平均信號強度(FA1--FA10、FNC、FPC)。
(5)每一個樣品進(jìn)行一次(4)所述步驟。
(6)計算每個樣品中各個檢測項目的信噪比(S/N)，即S1/N＝FA1/FNC；S2/N＝FA2/FNC，依次類推，其中P/N＝FPC/FNC。
利用經(jīng)過實驗確定的各信噪比界值(Cutoff)判斷實驗結(jié)果。具體做法是首先比較P/N值，如果該標(biāo)本的P/N值不小于其界值(通常該值大于5)，則表示該次實驗結(jié)果可信，即可以進(jìn)行下一步型別判定，否則表明實驗過程有誤，需重新進(jìn)行實驗；其次分別針對各個等位基因的S/N比值界值(通常該值均大于2)判斷其型別，若某等位基因的S/N值不小于其界值，則該等位基因為陽性。如果一個標(biāo)本中僅有一個等位基因陽性，則該標(biāo)本為純合子；兩個等位基因陽性者為雜合子(最為多見)，三個以上等位基因陽性說明樣品有交叉污染，或者為多人混合標(biāo)本；無陽性說明該標(biāo)本可能為罕見等位基因亞型。
權(quán)利要求
1.多標(biāo)記連續(xù)注射免疫及基因分析系統(tǒng)，由可產(chǎn)生時間延遲光致發(fā)光的高分子聚合物小球，帶有標(biāo)記的游離抗原、抗體或基因探針，連續(xù)注射泵，微型檢測池，小球探測器，脈沖激發(fā)/間歇測量同步器，激發(fā)光源，單光子計數(shù)器及濾光片等組成；其特征在于該系統(tǒng)使用了可產(chǎn)生時間延遲光致發(fā)光的高分子聚合物小球，小球探測器，多種標(biāo)記系統(tǒng)，脈沖激發(fā)/間歇測量方式以及單光子計數(shù)器。
2.根據(jù)權(quán)利要求1，可產(chǎn)生時間延遲光致發(fā)光的高分子聚合物小球的特征為小球是由摻有鑭系或錒系元素螯合物的高分子聚合物制成，其直徑至少在50微米以上，其表面包被有不同的抗原、抗體或基因探針。
3.根據(jù)權(quán)利要求1，小球探測器的特征為安裝在微型檢測池內(nèi)部或附近，利用電容或其它原理檢測小球進(jìn)出微型檢測池的簡單電子裝置。
4.根據(jù)權(quán)利要求1，多種標(biāo)記系統(tǒng)的特征為以高分子聚合物小球內(nèi)所含的鑭系或錒系元素螯合物產(chǎn)生的時間延遲光致發(fā)光信號代表小球即檢測項目分類信號，以帶有標(biāo)記的游離抗原、抗體或基因探針?biāo)a(chǎn)生的信號代表免疫及核酸結(jié)合強度信號。
5.根據(jù)權(quán)利要求4，代表免疫及核酸結(jié)合強度的標(biāo)記信號為時間延遲光致發(fā)光、場致發(fā)光、生物發(fā)光或化學(xué)發(fā)光等諸項之一，其特征為至少在檢測信號時無須激發(fā)光。
6.根據(jù)權(quán)利要求1，脈沖激發(fā)/間歇測量方式是利用信號衰減時間或弛豫時間差異來濾除噪聲及分辨不同信號的全新工作方式，其特征為利用脈沖激發(fā)/間歇測量同步器等適當(dāng)裝置使激發(fā)光以脈沖方式照射樣品，同時在兩次照射的間隙才打開單光子計數(shù)器測量信號。
7.根據(jù)權(quán)利要求6，脈沖激發(fā)/間歇測量同步器的特征為利用旋轉(zhuǎn)的多孔圓盤、脈沖激光器加同步程控單光子計數(shù)器、機械或液晶(LCD)快門以及其它類似原理，使激發(fā)光按一定時間間隔照射到樣品上，并使樣品發(fā)出的信號也按相應(yīng)方式在激發(fā)的間隙投射到檢測器上的機械或電子裝置。
全文摘要
多標(biāo)記連續(xù)注射免疫及基因分析系統(tǒng)，由于采用了多種標(biāo)記系統(tǒng)及脈沖激發(fā)/間歇測量方式，使其可以同時檢測多種分類信號和結(jié)合強度信號，并保證很高的靈敏度和極寬的線性范圍。該系統(tǒng)徹底打破了現(xiàn)有技術(shù)中各檢測指標(biāo)必須分別測定的限制，實現(xiàn)了對同一標(biāo)本的多指標(biāo)平行測定，而且具有檢測指標(biāo)可任意靈活組合，操作簡單快速，系統(tǒng)維護(hù)簡單，造價及運行成本低等優(yōu)勢，可廣泛應(yīng)用于臨床診斷、科學(xué)研究、環(huán)境及衛(wèi)生檢測、法醫(yī)鑒定等諸多部門。
文檔編號C12Q1/68GK1409112SQ01141479
公開日2003年4月9日 申請日期2001年9月27日 優(yōu)先權(quán)日2001年9月27日
發(fā)明者楊曉林, 陳格, 吳曉東 申請人:北京緯曉生物技術(shù)開發(fā)有限責(zé)任公司