專利名稱：富硒桑黃菌菌種馴化、栽培、富集方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種在桑黃菌中添加一種微量元素“硒”的菌種馴化、栽培、富集方法。
背景技術(shù)：
硒作為一種化學(xué)元素是1818年由瑞士化學(xué)家Berzalius發(fā)現(xiàn)的，硒的原子序數(shù)是34，近年來(lái)，作為一種人體內(nèi)無(wú)法合成的微量元素，硒的營(yíng)養(yǎng)研究已成為世界各國(guó)，尤其是歐美亞各國(guó)微量元素營(yíng)養(yǎng)研究最受關(guān)注的熱點(diǎn)之一。硒能夠參與酶的催化反應(yīng)，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，參與阻斷自由基反應(yīng)，是體內(nèi)拮抗有毒物質(zhì)的保護(hù)劑，具有抗癌功能。
桑黃的現(xiàn)代科學(xué)名稱為鮑氏層孔菌，也叫作桑耳、針裂蹄、裂蹄針層孔菌等到，是一種寄生于腐爛桑樹(shù)上的真菌，屬擔(dān)子菌亞門、非褶菌目、多孔菌科的真菌，在自然界十分罕見(jiàn)?！侗静菥V目》記載可治癖飲積聚，腹痛金瘡。20世紀(jì)90年代中期以后，韓國(guó)和日本的研究人員發(fā)現(xiàn)桑黃的提取物對(duì)腫瘤等有抵制作用。目前尚未有一種在桑黃菌中添加微量元素“硒”的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種富硒桑黃菌菌種馴化、栽培、富集方法，該方法是根據(jù)桑黃菌的富集能力，確定硒的施加濃度，在各級(jí)菌種的馴化過(guò)程中，硒的施加量逐級(jí)增加以達(dá)到菌種逐步適應(yīng)，直至菌絲濃白、粗壯、生長(zhǎng)不受抑制，大大提高子實(shí)體的硒含量。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)一種富硒桑黃菌菌種馴化、栽培、富集方法，該方法包括以下步驟1)富硒桑黃一級(jí)種，即母種制作方法用PDA方法由桑黃子實(shí)體進(jìn)行組織分離培養(yǎng)，生產(chǎn)出首代母種，再由首代母種轉(zhuǎn)接到一級(jí)液體菌種瓶?jī)?nèi)，其配方為馬鈴薯200克，葡萄糖20克、蛋白棟3克、硫酸鎂1克、磷酸二氫鉀1克、食鹽1克、VB1，25毫克、酵母粉3克、亞硒酸鈉20毫克、桑木木屑100克、水1000毫升；先將木屑在100℃沸水中煮沸15分鐘后，馬鈴薯洗凈去皮去芽眼切成小片，放入煮好的桑木木屑水中，將馬鈴薯煮至熟而不爛濾去木屑和馬鈴薯片，補(bǔ)足1000毫升水，再將其余物質(zhì)放入瓶?jī)?nèi)塑料布封口，進(jìn)行高壓滅菌；當(dāng)鍋內(nèi)壓力達(dá)0.05MPa時(shí)，放凈冷空氣，指針回零后，重新升至121℃～126℃維持30分鐘，指針回零后取出降至30℃以下時(shí)在接種內(nèi)接入母種，在黑暗、恒溫25℃培養(yǎng)6～7天，經(jīng)檢查無(wú)雜菌感染，即培養(yǎng)出富硒桑黃母種；2)富硒桑黃二級(jí)種，即原種制作方法桑木木屑78克、麩皮20克、硫酸鎂1克、石膏1克、亞硒酸鈉30mg/公斤料，料與水比1∶1.2～1.3；先將木屑、麩皮、石膏混合拌勻，再將硫酸鎂、亞硒酸鈉溶于水中拌料，水按標(biāo)準(zhǔn)加入，PH值6.5左右，二級(jí)種丙稀塑料袋或滴流瓶生產(chǎn)，用棉花封口；滅菌方法是加熱壓力達(dá)0.05MPa時(shí)，排出冷空氣，指針回零后重新升溫至121℃～126℃，保持2小時(shí)停火自動(dòng)回零取出，菌袋或瓶降至30℃以下時(shí)，在接種箱內(nèi)無(wú)菌情況接入一級(jí)液體母種，接種量為10毫升，正常在25℃左右無(wú)光培養(yǎng)，25天左右菌絲長(zhǎng)滿即可轉(zhuǎn)接三級(jí)種；3)富硒桑黃三級(jí)種，即栽培種制作方法桑木木屑78克、麩皮20克、硫酸鎂1克、石膏1克、亞硒酸鈉40mg/公斤料，其余同二級(jí)種。
4)富硒桑黃菌生產(chǎn)過(guò)程富硒桑黃栽培方法與三級(jí)種袋裝相同，滅菌可高壓或常壓，高壓滅菌同三級(jí)種滅菌，常壓滅菌鍋內(nèi)溫度達(dá)100℃，保持20小時(shí)，待袋溫降至30℃以下時(shí)接種，正常在3月中旬生產(chǎn)；5)菌絲生長(zhǎng)過(guò)程富硒桑黃菌生產(chǎn)袋接種后，放在20℃～25℃室溫下培養(yǎng)，相對(duì)濕度65％左右無(wú)光通風(fēng)條件培養(yǎng)，菌絲長(zhǎng)滿菌袋時(shí)間為30～40天；6)子實(shí)體生長(zhǎng)管理菌絲長(zhǎng)滿菌袋后，轉(zhuǎn)入生理生長(zhǎng)階段，這時(shí)溫度控制在18～28℃，要有一定的溫差，濕度為85～95％，要求空氣流通，較強(qiáng)的散射光，一般經(jīng)過(guò)15天左右形成子實(shí)體，子實(shí)體從開(kāi)始形成到成熟需20天左右，采收后自然曬干或烘干，放入塑料袋中保管。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于該方法是根據(jù)桑黃菌的富集能力，確定硒的施加濃度，在各級(jí)菌種的馴化過(guò)程中，硒的施加量逐級(jí)增加以達(dá)到菌種逐步適應(yīng)，直至菌絲濃白、粗壯、生長(zhǎng)不受抑制，大大提高子實(shí)體的硒含量?？商岣呙廊荨⒈＝?、醫(yī)療等方面的應(yīng)用效果。桑黃菌也是目前國(guó)際公認(rèn)的生物抗癌療效最佳藥用菌，而富硒桑黃比桑黃列車長(zhǎng)應(yīng)用價(jià)值高出幾倍。
具體實(shí)施例方式
一種富硒桑黃菌菌種馴化、栽培、富集方法，該方法包括以下步驟1)富硒桑黃一級(jí)種，即母種制作方法用PDA方法由桑黃子實(shí)體進(jìn)行組織分離培養(yǎng)，生產(chǎn)出首代母種，再由首代母種轉(zhuǎn)接到一級(jí)液體菌種瓶?jī)?nèi)，其配方為馬鈴薯200克，葡萄糖20克、蛋白棟3克、硫酸鎂1克、磷酸二氫鉀1克、食鹽1克、VB1，25毫克、酵母粉3克、亞硒酸鈉20毫克、桑木木屑100克、水1000毫升；先將木屑在100℃沸水中煮沸15分鐘后，馬鈴薯洗凈去皮去芽眼切成小片，放入煮好的桑木木屑水中，將馬鈴薯煮至熟而不爛濾去木屑和馬鈴薯片，補(bǔ)足1000毫升水，再將其余物質(zhì)放入瓶?jī)?nèi)塑料布封口，進(jìn)行高壓滅菌；當(dāng)鍋內(nèi)壓力達(dá)0.05MPa時(shí)，放凈冷空氣，指針回零后，重新升至121℃～126℃維持30分鐘，指針回零后取出降至30℃以下時(shí)在接種內(nèi)接入母種，在黑暗、恒溫25℃培養(yǎng)6～7天，經(jīng)檢查無(wú)雜菌感染，即培養(yǎng)出富硒桑黃母種；2)富硒桑黃二級(jí)種，即原種制作方法桑木木屑78克、麩皮20克、硫酸鎂1克、石膏1克、亞硒酸鈉30mg/公斤料，料與水比1∶1.2～1.3；先將木屑、麩皮、石膏混合拌勻，再將硫酸鎂、亞硒酸鈉溶于水中拌料，水按標(biāo)準(zhǔn)加入，PH值6.5左右，二級(jí)種丙稀塑料袋或滴流瓶生產(chǎn)，用棉花封口；滅菌方法是加熱壓力達(dá)0.05MPa時(shí)，排出冷空氣，指針回零后重新升溫至121℃～126℃，保持2小時(shí)?；鹱詣?dòng)回零取出，菌袋或瓶降至30℃以下時(shí)，在接種箱內(nèi)無(wú)菌情況接入一級(jí)液體母種，接種量為10毫升，正常在25℃左右無(wú)光培養(yǎng)，25天左右菌絲長(zhǎng)滿即可轉(zhuǎn)接三級(jí)種；3)富硒桑黃三級(jí)種，即栽培種制作方法桑木木屑78克、麩皮20克、硫酸鎂1克、石膏1克、亞硒酸鈉40mg/公斤料，其余同二級(jí)種。
4)富硒桑黃菌生產(chǎn)過(guò)程富硒桑黃栽培方法與三級(jí)種袋裝相同，滅菌可高壓或常壓，高壓滅菌同三級(jí)種滅菌，常壓滅菌鍋內(nèi)溫度達(dá)100℃，保持20小時(shí)，待袋溫降至30℃以下時(shí)接種，正常在3月中旬生產(chǎn)；5)菌絲生長(zhǎng)過(guò)程富硒桑黃菌生產(chǎn)袋接種后，放在20℃～25℃室溫下培養(yǎng)，相對(duì)濕度65％左右無(wú)光通風(fēng)條件培養(yǎng)，菌絲長(zhǎng)滿菌袋時(shí)間為30～40天；6)子實(shí)體生長(zhǎng)管理菌絲長(zhǎng)滿菌袋后，轉(zhuǎn)入生理生長(zhǎng)階段，這時(shí)溫度控制在18～28℃，要有一定的溫差，濕度為85～95％，要求空氣流通，較強(qiáng)的散射光，一般經(jīng)過(guò)15天左右形成子實(shí)體，子實(shí)體從開(kāi)始形成到成熟需20天左右，采收后自然曬干或烘干，放入塑料袋中保管。
權(quán)利要求
1.一種富硒桑黃菌菌種馴化、栽培、富集方法，該方法包括以下步驟1)富硒桑黃一級(jí)種，即母種制作方法用PDA方法由桑黃子實(shí)體進(jìn)行組織分離培養(yǎng)，生產(chǎn)出首代母種，再由首代母種轉(zhuǎn)接到一級(jí)液體菌種瓶?jī)?nèi)，其配方為馬鈴薯200克，葡萄糖20克、蛋白棟3克、硫酸鎂1克、磷酸二氫鉀1克、食鹽1克、VB1，25毫克、酵母粉3克、亞硒酸鈉20毫克、桑木木屑100克、水1000毫升；先將木屑在100℃沸水中煮沸15分鐘后，馬鈴薯洗凈去皮去芽眼切成小片，放入煮好的桑木木屑水中，將馬鈴薯煮至熟而不爛濾去木屑和馬鈴薯片，補(bǔ)足1000毫升水，再將其余物質(zhì)放入瓶?jī)?nèi)塑料布封口，進(jìn)行高壓滅菌；當(dāng)鍋內(nèi)壓力達(dá)0.05MPa時(shí)，放凈冷空氣，指針回零后，重新升至121℃～126℃維持30分鐘，指針回零后取出降至30℃以下時(shí)在接種內(nèi)接入母種，在黑暗、恒溫25℃培養(yǎng)6～7天，經(jīng)檢查無(wú)雜菌感染，即培養(yǎng)出富硒桑黃母種；2)富硒桑黃二級(jí)種，即原種制作方法桑木木屑78克、麩皮20克、硫酸鎂1克、石膏1克、亞硒酸鈉30mg/公斤料，料與水比1∶1.2～1.3；先將木屑、麩皮、石膏混合拌勻，再將硫酸鎂、亞硒酸鈉溶于水中拌料，水按標(biāo)準(zhǔn)加入，PH值6.5左右，二級(jí)種丙稀塑料袋或滴流瓶生產(chǎn)，用棉花封口；滅菌方法是加熱壓力達(dá)0.05MPa時(shí)，排出冷空氣，指針回零后重新升溫至121℃～126℃，保持2小時(shí)停火自動(dòng)回零取出，菌袋或瓶降至30℃以下時(shí)，在接種箱內(nèi)無(wú)菌情況接入一級(jí)液體母種，接種量為10毫升，正常在25℃左右無(wú)光培養(yǎng)，25天左右菌絲長(zhǎng)滿即可轉(zhuǎn)接三級(jí)種；3)富硒桑黃三級(jí)種，即栽培種制作方法桑木木屑78克、麩皮20克、硫酸鎂1克、石膏1克、亞硒酸鈉40mg/公斤料，其余同二級(jí)種。4)富硒桑黃菌生產(chǎn)過(guò)程富硒桑黃栽培方法與三級(jí)種袋裝相同，滅菌可高壓或常壓，高壓滅菌同三級(jí)種滅菌，常壓滅菌鍋內(nèi)溫度達(dá)100℃，保持20小時(shí)，待袋溫降至30℃以下時(shí)接種，正常在3月中旬生產(chǎn)；5)菌絲生長(zhǎng)過(guò)程富硒桑黃菌生產(chǎn)袋接種后，放在20℃～25℃室溫下培養(yǎng)，相對(duì)濕度65％左右無(wú)光通風(fēng)條件培養(yǎng)，菌絲長(zhǎng)滿菌袋時(shí)間為30～40天；6)子實(shí)體生長(zhǎng)管理菌絲長(zhǎng)滿菌袋后，轉(zhuǎn)入生理生長(zhǎng)階段，這時(shí)溫度控制在18～28℃，要有一定的溫差，濕度為85～95％，要求空氣流通，較強(qiáng)的散射光，一般經(jīng)過(guò)15天左右形成子實(shí)體，子實(shí)體從開(kāi)始形成到成熟需20天左右，采收后自然曬干或烘干，放入塑料袋中保管。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種富硒桑黃菌菌種馴化、栽培、富集方法，栽培種由桑木木屑78克、麩皮20克、硫酸鎂1克、石膏1克、亞硒酸鈉40mg/公斤料，料與水比1∶1.2～1.3制成，該方法是根據(jù)桑黃菌的富集能力，確定硒的施加濃度，在各級(jí)菌種的馴化過(guò)程中，硒的施加量逐級(jí)增加以達(dá)到菌種逐步適應(yīng)，直至菌絲濃白、粗壯、生長(zhǎng)不受抑制，大大提高子實(shí)體的硒含量?？商岣呙廊?、保健、醫(yī)療等方面的應(yīng)用效果。桑黃菌也是目前國(guó)際公認(rèn)的生物抗癌療效最佳藥用菌，而富硒桑黃比桑黃列車長(zhǎng)應(yīng)用價(jià)值高出幾倍。
文檔編號(hào)C12N1/14GK101058793SQ20071001101
公開(kāi)日2007年10月24日 申請(qǐng)日期2007年4月19日 優(yōu)先權(quán)日2007年4月19日
發(fā)明者張壽祿, 鄒玉華 申請(qǐng)人:鄒玉華