專利名稱：：新型乳酸菌的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及屬于乳球菌(^a"ococcw屬的新型乳酸菌，含有該乳酸菌的菌粉、醫(yī)藥用組合物及腸道功能調(diào)整劑，以及使用該乳酸菌促進(jìn)長(zhǎng)雙歧桿菌(S(/k/o6ac^n'ww/o"gwm)的繁殖性和生存性的方法。本申請(qǐng)要求2007年2月13日提交的日本特愿2007-032645號(hào)的優(yōu)先權(quán)；在此引用其內(nèi)容作為參考。
背景技術(shù)：
：已知乳球菌屬菌、雙歧桿菌(S(/irWoZm"ehww)屬菌(以下稱為"雙歧桿菌")等乳酸菌具有恢復(fù)腸內(nèi)細(xì)菌平衡的調(diào)整腸道作用、免疫增強(qiáng)作用、抗癌作用等。因此，近年來(lái)隨著消費(fèi)者健康意識(shí)的提高，乳酸菌在食品中的利用盛行起來(lái)。特別地，長(zhǎng)雙歧桿菌等雙歧桿菌是在人腸道內(nèi)形成的腸道菌群的優(yōu)勢(shì)菌種之一，對(duì)包含存活的雙歧桿菌的發(fā)酵乳等食品的需求增加。雙歧桿菌在牛奶培養(yǎng)基中的增殖性差。因此，為了在發(fā)酵乳中含有一定量的、例如lx10CFU/mL的雙歧桿菌，通常添加各種各樣繁殖促進(jìn)物質(zhì)。但是，該繁殖促進(jìn)物質(zhì)通常價(jià)格比較高，并且，風(fēng)味可能會(huì)受損。另外，雙歧桿菌難以在酸性條件下保存、易死亡。因此，發(fā)酵乳制品等在流通過(guò)程中，其中存活的雙歧桿菌量急劇減少。因此，通過(guò)改善雙歧桿菌的繁殖性、保存生存性，不但可制造出大量含有存活的雙歧桿菌的發(fā)酵乳，而且期待即使在消費(fèi)者食用時(shí)，也與剛制造完時(shí)同樣富含存活的雙歧桿菌。已公開(kāi)了通過(guò)與雙歧桿菌以外的乳酸菌混合發(fā)酵，不添加該繁殖促進(jìn)物質(zhì)等也可改善雙歧桿菌的繁殖性、保存生存性的種種方法。關(guān)于改善發(fā)酵乳制造中的雙歧桿菌繁殖性的方法，例如(1)公開(kāi)了酸奶及其制造方法，其特征在于，其含有乳酸乳5求菌乳酸亞種(丄""oc(9cci^/acO、subsp./a"/s)、享1酉臾享'LJ求菌乳月旨亞種(丄ac"coccwssubsp.crewo〃、)以及只又A支4干菌(例如參照專利文獻(xiàn)l。)。此外，關(guān)于改善發(fā)酵乳中的雙歧桿菌保存生存性的方法，例如(2)公開(kāi)了雙歧桿菌發(fā)酵乳的制造方法，其特征在于，在以乳為主成分的培養(yǎng)基中，混合培養(yǎng)短雙歧桿菌,5,力Wc^""er,'ww6"ve人以及不生成雙乙酰和乙偶姻的乳酸乳球菌乳酸亞種。(例如參照專利文獻(xiàn)2。)專利文獻(xiàn)l:日本特許第3364491號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)2:日本特許第3068484號(hào)公才艮
發(fā)明內(nèi)容發(fā)明要解決的問(wèn)題可是，上述(1)的方法雖可促進(jìn)雙歧桿菌的繁殖、縮短發(fā)酵時(shí)間，但在專利文獻(xiàn)l中，關(guān)于雙歧桿菌的保存生存性根本沒(méi)有記載。另一方面，上述(2)的方法通過(guò)使用由特定的雙歧桿菌和特定的乳酸菌組成的混合菌，雖可以看到促進(jìn)增殖效果和改善生存性效果，但對(duì)于短雙歧桿菌以外的雙歧桿菌、例如在食品方面廣泛應(yīng)用的長(zhǎng)雙歧桿菌根本沒(méi)有記載。本發(fā)明的目的是提供一種乳酸菌，其可改善雙歧桿菌，特別是長(zhǎng)雙歧桿菌的繁殖性、保存生存性。另外，本發(fā)明的目的是提供含有該乳酸菌的菌粉、醫(yī)藥用組合物及腸道功能調(diào)整劑，以及使用該乳酸菌促進(jìn)長(zhǎng)雙歧桿菌的繁殖性和生存性的方法。解決問(wèn)題的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明人為了解決上述問(wèn)題進(jìn)行了深入研究，結(jié)果，對(duì)在10%(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基中發(fā)酵性優(yōu)異的乳酸菌的菌林，與長(zhǎng)雙歧桿菌混合培養(yǎng)來(lái)進(jìn)行發(fā)酵試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)具有如下性質(zhì)的乳酸菌，其性質(zhì)為促進(jìn)長(zhǎng)雙歧桿菌繁殖的性能，即，pH達(dá)到4.4~4.6時(shí)，長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)在5x1()SCFU/g以上；提高長(zhǎng)雙歧桿菌的保存生存性的性能，即，發(fā)酵結(jié)束后快速冷卻并在1(TC下保持2周時(shí)，長(zhǎng)雙歧桿菌的存活率在30%以上，從而完成了本發(fā)明。即，本發(fā)明提供具有下述菌學(xué)性質(zhì)的乳球菌(^"C^COCC^y*屬菌。(l)發(fā)酵性，即，在10%(w/w)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基中，在25~37。C的溫度范圍內(nèi)培養(yǎng)16小時(shí)的情況下，培養(yǎng)基凝固；(2)促進(jìn)長(zhǎng)雙歧桿菌繁殖的性能，即，在10。/。(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基中，與長(zhǎng)雙歧桿菌(^(/^oZ^c^n'wm/owgwmj混合培養(yǎng)的情況下，pH達(dá)到4.4~4.6時(shí)，長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)在5x1()SCFU/g以上；以及(3)提高長(zhǎng)雙歧桿菌的保存生存性的性能，即，在10%(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基中，與長(zhǎng)雙歧桿菌混合培養(yǎng)的情況下，pH達(dá)到4.4~4.6時(shí)快速冷卻，在10。C下保持2周的情況下，長(zhǎng)雙歧桿菌的存活率在30%以上。另外，本發(fā)明提供一種前述乳球菌屬菌，其特征在于，其不具有木糖同化性，并且，不生成雙乙酰及乙偶姻。另外，本發(fā)明提供一種前述乳球菌屬菌，其為乳酸乳球菌乳酸亞種(丄a"ococcws/""/ssubsp./ac"s)。另外，本發(fā)明提供一種乳球菌屬菌，前述長(zhǎng)雙歧桿菌的菌抹為選自由長(zhǎng)雙歧桿菌FERMBP-7787及長(zhǎng)雙歧桿菌模式菌抹ATCC15707所組成的組中的至少一種。另外，本發(fā)明提供一種乳球菌屬菌，菌抹為乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852(FERMBP-10742)。另外，本發(fā)明提供一種乳球菌屬菌，菌林為乳酸乳球菌乳酸亞種MCC857(FERMBP-10757)。另外，本發(fā)明提供一種乳球菌屬菌，菌林為乳酸乳球菌乳酸亞種MCC859(FERMBP-10744)。另外，本發(fā)明提供一種乳球菌屬菌，菌抹為乳酸乳球菌乳酸亞種MCC865(FERMBP-10745)。另外，本發(fā)明提供一種乳球菌屬菌，菌林為乳酸乳球菌乳酸亞種MCC866(FERMBP-10746)。另外，本發(fā)明提供一種菌粉，其含有前述任一項(xiàng)所述的乳球菌屬菌。另外，本發(fā)明提供一種醫(yī)藥用組合物，其含有前述任一項(xiàng)所述的乳球菌屬菌。另外，本發(fā)明提供前述任一項(xiàng)所述的乳球菌屬菌。另外，本發(fā)明提供一種促進(jìn)長(zhǎng)雙歧桿菌的繁殖性和生存性的方法，其特;f正在于，4吏用前述任一項(xiàng)所述的乳^求菌屬菌。發(fā)明的效果通過(guò)本發(fā)明的乳球菌屬菌、以及本發(fā)明的促進(jìn)長(zhǎng)雙歧桿菌的繁殖性和生存性的方法，可顯著地改善長(zhǎng)雙歧桿菌的繁殖性、保存生存性，因此，可高效制造目前沒(méi)有的大量含有長(zhǎng)雙歧桿菌的發(fā)酵乳制品。另外，即使在流通過(guò)程中，也可充分維持發(fā)酵乳制品中存活的長(zhǎng)雙歧桿菌含量，因此可提供調(diào)整腸道的效果更高的發(fā)酵乳制品，在健康維護(hù)方面也有用。具體實(shí)施例方式本發(fā)明的乳球菌屬菌，特別是乳酸乳球菌乳酸亞種具有上述(1)、(2)及(3)的特性。(1)涉及發(fā)酵性。在10。/c)(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基中，在25~37。C的溫度范圍內(nèi)培養(yǎng)16小時(shí)時(shí)，培養(yǎng)基越凝固增殖越快，如果是具有強(qiáng)發(fā)酵性的乳酸菌，則在制造發(fā)酵乳時(shí)，可更有效地改善長(zhǎng)雙歧桿菌的繁殖性等。在此，"培養(yǎng)基凝固"是指通過(guò)酸性發(fā)酵，培養(yǎng)基的pH低于乳蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)、乳蛋白質(zhì)凝聚，培養(yǎng)基凝固的情況。另外，"10%(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基，，可通過(guò)將復(fù)原脫脂乳(例如，森永乳業(yè)公司制)以10質(zhì)量％濃度溶解在水中來(lái)調(diào)制。通常，適合于乳球菌屬菌的發(fā)酵溫度范圍為2030°C,但本發(fā)明的乳球菌屬菌為在25~37。C的溫度范圍內(nèi)具有強(qiáng)發(fā)酵性的菌。即，本發(fā)明的乳球菌屬菌在適合于長(zhǎng)雙歧桿菌的發(fā)酵溫度范圍(30~40°C)內(nèi)具有充分的發(fā)酵性。(2)涉及促進(jìn)長(zhǎng)雙歧桿菌繁殖的性能。在10。/。(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基等乳性培養(yǎng)基中，pH達(dá)到4.6左右時(shí)，通常，所含的酪蛋白等沉淀，全部培養(yǎng)基凝固，成為具有優(yōu)異風(fēng)味、口感及外觀的物質(zhì)。因此，制造發(fā)酵乳制品時(shí)，通常，在pH達(dá)到4.6附近時(shí)，通過(guò)快速冷卻等來(lái)停止發(fā)酵。因此，在10o/()(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基中，與長(zhǎng)雙歧桿菌混合培養(yǎng)的情況下，如果是具有如下促進(jìn)繁殖性的性能的乳酸菌，則在制造發(fā)酵乳時(shí)，就可更有效地改善發(fā)酵乳中的長(zhǎng)雙歧桿菌含量，所述促進(jìn)繁殖性的性能為在pH達(dá)到4.4~4.6時(shí)，可使長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)達(dá)到5x1()SCFU/g以上這樣的高濃度。(3)涉及提高長(zhǎng)雙歧桿菌的保存生存性的性能。通常，在l(TC以下的保存條件下，發(fā)酵乳制品的保質(zhì)期為2周左右。因此，在10。/。(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基中，與長(zhǎng)雙歧桿菌混合培養(yǎng)的情況下，如果是具有如下提高保存生存性的性能的乳酸菌，8也可制造即使在保質(zhì)期結(jié)束時(shí)，仍含有充分量的長(zhǎng)雙歧桿菌的發(fā)酵乳，所述提高保存生存性的性能是在pH達(dá)到4.4~4.6時(shí)快速冷卻，并在10。C保持2周的情況下，長(zhǎng)雙歧桿菌的存活率達(dá)到30%以上。例如可通過(guò)以下的方法得到本發(fā)明的乳球菌屬菌。首先，從各種樣品中分離菌林，從其中選出在10%(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基中的發(fā)酵性優(yōu)異的菌抹，即，選擇具有如下發(fā)酵性的菌抹在10%(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基中，在2537。C的溫度范圍內(nèi)培養(yǎng)16小時(shí)時(shí)，可讓培養(yǎng)基凝固。接著，所選擇的菌與長(zhǎng)雙歧桿菌進(jìn)行混合培養(yǎng)試驗(yàn)，通過(guò)選擇具有上述(2)及(3)所規(guī)定的促進(jìn)長(zhǎng)雙歧桿菌繁殖的性能及提高保存生存性的性能的菌抹而獲得本發(fā)明的乳球菌屬菌。進(jìn)一步，優(yōu)選選擇不具有木糖同化性，并且，不生成雙乙酰及乙偶姻的菌抹。以下，更i羊細(xì)地J兌明。1.菌抹的獲得本發(fā)明者發(fā)明人等盡量為了從自然界獲得具有前述性質(zhì)的菌抹，將從日本國(guó)內(nèi)的自然界采集到的樣本樣品用厭氧性稀釋液("TheWorldofEnterobacteria，，publishedbysoubunshaCo.,Ltd.,writtenbyTomotariMitsuoka,Page322，1980:hereinafter,abbreviatedto"Reference1"，以下記載為參考文南足1)稀釋，并涂布在briggsBriggsliverbroth(前述參考文獻(xiàn)l，319頁(yè))的平板上，在30。C下厭氧培養(yǎng)。并且，在得到的菌落中，采集如下的菌顯示鏈球菌的形態(tài)，且通過(guò)涂布標(biāo)本的顯微鏡觀察識(shí)別為革蘭氏陽(yáng)性。將該采集到的菌劃線涂布在BL瓊脂培養(yǎng)基平板上，并用和前述同樣的方法反復(fù)厭氧培養(yǎng)，得到純分離的菌林。將這些菌抹使用下述的方法首先，進(jìn)行10%(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基中的發(fā)酵試驗(yàn)，得到20林具有上述(1)所規(guī)定發(fā)酵性的菌抹。接著，進(jìn)行與長(zhǎng)雙歧桿菌的混合培養(yǎng)試驗(yàn)，得到5林具有如下性質(zhì)的菌林，其性質(zhì)為促進(jìn)繁殖的性能，其在pH達(dá)到4.44.6時(shí)，可使長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)達(dá)到5x108CFU/g以上；提高保存生存性的性能，其在pH達(dá)到4.4~4.6時(shí)快速冷卻，并在10。C下保持2周時(shí)的長(zhǎng)雙歧桿菌的存活率達(dá)到30%以上。該5林菌抹分別命名為MCC852、MCC857、MCC859、MCC865、MCC866。2.菌學(xué)性質(zhì)以下所示為前述5抹菌抹的菌學(xué)性質(zhì)。再者，用于測(cè)定菌學(xué)性質(zhì)的"i式馬全幾乎依照Bergey，sManualofSystematicBacteriology(Bergey，sManualofSystematicBacteriology、PeterH.A.Sneath編、第2巻、WilliamsandWilkinsCompany、1986年)來(lái)進(jìn)行。(I)菌形(用BL瓊脂培養(yǎng)基平板，30。C厭氧培養(yǎng)72小時(shí)時(shí)用光學(xué)顯微鏡觀察時(shí)的菌形)大小直徑1~2,形狀鏈球菌(II)革蘭氏染色性陽(yáng)性(III)石蔬牛奶凝固(IV)芽孢的形成陰性(V)由葡萄糖產(chǎn)氣無(wú)(VI)運(yùn)動(dòng)性無(wú)(VII)過(guò)氧化氫酶活性陰性(VIII)精氨酸脫羧酶試驗(yàn)陽(yáng)性(IX)由檸檬酸產(chǎn)氣陰性(X)溫度壽丈感性(60。C30分鐘及65。C30分鐘)均為敏感性(XI)葡萄糖降解產(chǎn)物L(fēng)-乳酸表l<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>+:陽(yáng)性；(+):弱陽(yáng)性；±:極弱陽(yáng)性；-陰性；S:緩慢反應(yīng)上述(I)~(XI)所示的菌學(xué)性質(zhì)方面，前述5抹菌抹全部相同，并且，與乳酸乳球菌乳酸亞種的模式菌株即ATCC19435相同。關(guān)于(XII)繁殖溫度、(XIII)耐鹽性、(XIV)耐pH性、(XV)耐亞曱基藍(lán)性、(XVI)由精氨酸的氨的產(chǎn)生及(XVII)糖的發(fā)酵性分別為表1所示的性質(zhì)。再者，糖的發(fā)酵性使用Mitsuoka的糖發(fā)酵性用培養(yǎng)基(TomotariMitsuoka，Thebacteriologyoflacticacidbacteria",ClinicalExamination18,Pages1163to1172,1974)對(duì)28種^t進(jìn)4亍試-驗(yàn)。從以上的結(jié)果可看出，前述5林菌林均具有乳酸乳球菌乳酸亞種菌種的菌學(xué)性質(zhì)。即，前述5抹菌林可確認(rèn)為乳酸乳球菌乳酸亞種。另一方面，從上述(XII)~(XVII)所示的菌學(xué)性質(zhì)可看出，前述5抹菌抹，特別從不具有木糖同化性的方面看，與模式菌株不同。因此，申請(qǐng)人將前述5林菌林作為新菌林保藏在獨(dú)立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所特許生物寄托中心(central6,l-l，Higashi1-ChomeTsukuba-shi,Ibaraki-ken，JAPAN(postalcodenumber:305-8566))。乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌株保藏號(hào)為FERMBP-10742、乳酸乳球菌乳酸亞種MCC857菌林保藏號(hào)為FERMBP-10757、乳酸乳球菌乳酸亞種MCC859菌抹保藏號(hào)為FERMBP-10744、乳酸乳球菌乳酸亞種MCC865菌抹保藏號(hào)為FERMBP-10745、乳酸乳球菌乳酸亞種MCC866菌抹保藏號(hào)為FERMBP-10746。再者，乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852、859、865、及866菌^^的保藏日為2006年12月1日，乳酸乳球菌乳酸亞種MCC857菌林的保藏日為2007年1月10日。3.在10%(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基中的發(fā)酵性試驗(yàn)將復(fù)原脫脂奶(森永乳業(yè)公司制)用水溶解而得到10%(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基，將該10%(w/w)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基在95°C滅菌30分鐘，相對(duì)于該復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基接種3%(V/V)各菌抹的發(fā)酵劑，并在25。C、30°C、及37。C各溫度下培養(yǎng)16小時(shí)。將得到的培養(yǎng)液快速冷卻，并測(cè)定凝固情況、pH、及所含有的乳酸菌數(shù)。乳酸菌數(shù)的測(cè)定用市售的BCP加計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基平板(榮研機(jī)材社制)來(lái)進(jìn)行。測(cè)定結(jié)果如表2所示。再者，作為對(duì)照抹，使用專利文獻(xiàn)2記載的乳酸乳球菌乳酸亞種模式菌抹ATCC19435菌抹。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>4吏用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852、857、859、865、866的各菌株即本發(fā)明的乳球菌屬菌的情況下，在所有溫度條件下，pH降低到4.44.6，培養(yǎng)基凝固。另外，所含有的乳酸菌數(shù)在lxl(^CFU/g左右，具有非常良好的增殖'發(fā)酵性。另一方面，使用乳酸乳球菌乳酸亞種的模式菌抹ATCC19435菌林的情況下，在所有溫度條件下，pH在5.5以上且培養(yǎng)基不凝固。另外，與本發(fā)明的乳球菌屬菌比較，特別在30。C以上時(shí)，乳酸菌數(shù)顯著地減少。4.與長(zhǎng)雙歧桿菌的混合培養(yǎng)試驗(yàn)(1)與長(zhǎng)雙歧桿菌FERMBP-7787菌抹的混合培養(yǎng)試驗(yàn)作為對(duì)照抹，使用乳酸乳球菌乳酸亞種模式菌抹ATCC19435菌林。首先，用后述實(shí)施例l所述的方法，調(diào)制乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852、857、859、865、866這5林菌林的各自培養(yǎng)物、及長(zhǎng)乂又it支4干菌FERMBP—7787菌才朱的i備養(yǎng)凈勿。長(zhǎng)雙歧桿菌FERMBP-7787菌4朱在2001年10月31日保藏于獨(dú)立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所特許生物寄托中心(central6,1-1,Higashil-ChomeTsukuba-shi，Ibaraki-ken,JAPAN(postalcodenumber:305-8566))。另夕卜，將0.2%(W/W)酵母抽提物(Difco公司制)放入1000mL10%(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基并在90。C滅菌30分鐘，接種30mL乳酸乳球菌乳酸亞種的模式菌抹ATCCl9435菌抹的培養(yǎng)物，在30。C培養(yǎng)16小時(shí)，并調(diào)制乳酸乳球菌乳酸亞種模式菌林ATCC19435菌抹的培養(yǎng)物。將10。/。(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基在90。C滅菌10分鐘，相對(duì)于該復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基，接種P/。(V/V)如上述調(diào)制的乳酸乳球菌乳酸亞種的各菌抹的培養(yǎng)物和1%(V/V)長(zhǎng)雙歧桿菌FERMBP-7787菌抹的培養(yǎng)物，并在37。C培養(yǎng)16小時(shí)得到發(fā)酵乳。將該發(fā)酵乳快速冷卻并測(cè)定pH及所含有的長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)。長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)的測(cè)定用TOS丙酸酯瓊脂培養(yǎng)基平板(YAKULTPHARMACEUTICALINDUSTRYCO.，LTD制造)進(jìn)行。測(cè)定結(jié)果如表3所示。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>分別使用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852、857、859、865、866這5抹菌抹的發(fā)酵乳，發(fā)酵后pH約為4.5,長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)達(dá)到5x1()SCFU/g以上。另外，將該發(fā)酵乳在10。C保存2周時(shí)的長(zhǎng)雙歧桿菌的菌存活率都在80%以上。另一方面，使用乳酸乳球菌乳酸亞種的模式菌抹ATCC19435菌抹的發(fā)酵乳，發(fā)酵不能進(jìn)行，發(fā)酵后pH在5.0以上，不能進(jìn)行在1(TC的保存試驗(yàn)。另外，發(fā)酵剛結(jié)束后的長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)也在約lx108CFU/g,與本發(fā)明的乳球菌屬菌比較，顯著地少。即，可明確乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852、857、859、865、及866的5林菌抹與其它已知的乳酸乳球菌乳酸亞種的菌抹相比，對(duì)于長(zhǎng)雙歧桿菌FERMBP-7787菌一朱的促進(jìn)繁殖的性能及提高保存生存性的性能更優(yōu)異。另夕卜，也可明確將專利文獻(xiàn)2記載的不生成雙乙酰和乙偶姻的乳酸乳球菌乳酸亞種與長(zhǎng)雙歧桿菌混合培養(yǎng)的情況下，與使用短雙歧桿菌的情況不同，像專利文獻(xiàn)2所記載的那樣，得不到長(zhǎng)雙歧桿菌的增殖促進(jìn)效果和生存性改善效果的任何效果。(2)與長(zhǎng)雙歧桿菌模式菌林ATCC15707菌4朱的混合培養(yǎng)試驗(yàn)使用長(zhǎng)雙歧桿菌FERMBP-7787菌林和長(zhǎng)雙歧桿菌模式菌抹ATCC15707菌抹，確認(rèn)本發(fā)明的乳球菌屬菌對(duì)長(zhǎng)雙歧桿菌的促進(jìn)繁殖的性能及提高保存生存性的性能。首先，用后述實(shí)施例l記載的方法，調(diào)制乳酸乳^求菌乳酸亞種MCC857菌林的培養(yǎng)物、及長(zhǎng)雙歧桿菌FERMBP-7787菌林的培養(yǎng)物。另外，用后述實(shí)施例2H己載的方法，調(diào)制嗜熱鏈球菌(S/re/^ococcwsZ/2ermoj9/n7z^)及j呆力口利亞孝L才干菌(^La"oZac〃/ws6w/gar/cw)的混合培養(yǎng)物。再將加入了0.2%(W/W)酵母抽提物的11%(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基在90。C滅菌30分鐘，對(duì)該培養(yǎng)基接種10%(V/V)乳酸乳球菌乳酸亞種模式菌株ATCC15707菌抹的發(fā)酵劑，在37。C培養(yǎng)至pH達(dá)到4.6,以調(diào)制長(zhǎng)雙歧桿菌模式菌抹ATCC15707菌抹的培養(yǎng)物。將10%(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基在90。C滅菌10分鐘，對(duì)該復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基接種1%(V/V)如上述調(diào)制的乳酸乳球菌乳酸亞種MCC857菌林的培養(yǎng)物和1。/。(V/V)長(zhǎng)雙歧桿菌FERMBP-7787菌抹的培養(yǎng)物或接種1%(V/V)長(zhǎng)雙歧桿菌模式菌抹ATCC15707菌林的培養(yǎng)物和0.01。/c)(V/V)嗜熱鏈球菌及保加利亞乳桿菌的混合培養(yǎng)物，并在37。C培養(yǎng)至pH達(dá)到4.6,得到發(fā)酵乳。將該發(fā)酵乳快速冷卻并測(cè)定所含有的長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)。數(shù)。另一方面，作為對(duì)照，將10。/。(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基在90。C滅菌10分鐘，對(duì)該復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基接種1.5%(V/V)如上述調(diào)制的長(zhǎng)雙歧桿菌FERMBP-7787菌抹的培養(yǎng)物或接種1.5%(V/V)長(zhǎng)雙歧桿菌模式菌林ATCC15707菌抹的培養(yǎng)物和0.4%(V/V)嗜熱鏈球菌及保加利亞乳桿菌的混合培養(yǎng)物，并在37。C培養(yǎng)至pH達(dá)到4.6，得到發(fā)酵乳，同樣測(cè)定該發(fā)酵乳的長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)。測(cè)定結(jié)果如表4所示。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>長(zhǎng)雙歧桿菌FERMBP-7787菌林和長(zhǎng)雙歧桿菌模式菌株ATCC15707菌抹這2個(gè)菌抹通過(guò)與乳酸乳球菌乳酸亞種MCC857菌林的混合培養(yǎng)，發(fā)酵乳中的長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)顯著增多。另外，在10。C保存2周后的長(zhǎng)雙歧桿菌的菌存活率為用長(zhǎng)雙歧桿菌FERMBP-7787菌4朱為71%，用長(zhǎng)雙歧桿菌才莫式菌才朱ATCC15707菌林為310/。，都在30%以上。相對(duì)于此，沒(méi)有與乳酸乳球菌乳酸亞種MCC857菌4朱混合培養(yǎng)的情況下，在10。C保存2周后的長(zhǎng)雙歧桿菌的菌存活率為用長(zhǎng)雙歧桿菌FERMBP-7787菌林為20%,用長(zhǎng)雙歧桿菌模式菌抹ATCC15707菌抹沒(méi)有檢測(cè)出存活的長(zhǎng)雙歧桿菌。再者，分別-使用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852、859、865或866菌抹代替乳酸乳球菌乳酸亞種MCC857的情況下，也可得到同樣的結(jié)果。即，可明確乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852、857、859、865、及866各菌抹即使對(duì)于保存生存性優(yōu)異的長(zhǎng)雙歧桿菌FERMBP-7787菌林以外的長(zhǎng)雙歧桿菌，也具有優(yōu)異的促進(jìn)繁殖的性能及提高保存生存性的性能。5.專利文獻(xiàn)1記載的乳酸乳球菌乳酸亞種與乳酸乳球菌乳脂亞種混合物的比較試驗(yàn)首先，用上述4(2)記載的方法，調(diào)制乳酸乳球菌乳酸亞種MCC857菌抹的培養(yǎng)物、長(zhǎng)雙歧桿菌模式菌抹ATCC15707菌抹的培養(yǎng)物、及嗜熱鏈球菌和保加利亞乳桿菌的混合培養(yǎng)物。將10。/。(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基在90。C滅菌10分鐘，對(duì)該復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基接種1%(V/V)如上述調(diào)制的乳酸乳球菌乳酸亞種MCC857菌抹的培養(yǎng)物和P/。(V/V)長(zhǎng)雙歧桿菌模式菌株ATCC15707菌林的培養(yǎng)物和0.01。/。(V/V)嗜熱鏈球菌及保加利亞乳桿菌的混合培養(yǎng)物，并在37。C培養(yǎng)至pH達(dá)到4.6得到發(fā)酵乳。將該發(fā)酵乳快速冷卻并測(cè)定所含有的長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)。另一方面，作為對(duì)照，將10%(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基在90°C滅菌1O分鐘，相對(duì)于該復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基，接種1%(V/V)如上述調(diào)制長(zhǎng)雙歧桿菌模式菌抹ATCC15707菌抹的培養(yǎng)物和2%(V/V)乳酸乳球菌乳酸亞種與乳酸乳球菌乳脂亞種的混合物"EZALMA14"(Rhodia7/^司制)，并在38。C;會(huì)養(yǎng)至pH達(dá)到4.6得到發(fā)酵乳，同樣測(cè)定該發(fā)酵乳的長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)。再者，"EZALMA14"是相當(dāng)于專利文獻(xiàn)l記載的"EZALMR014"(Rhodia^》司制)的混合物。在使用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC857菌株的發(fā)酵乳中，長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)為5.5xi08CFU/g。相對(duì)于此，將使用"EZALMA14"的發(fā)酵乳稀釋106倍，從該稀釋溶液中完全檢測(cè)不到長(zhǎng)雙歧桿菌，認(rèn)為該發(fā)酵乳所含有的長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)在1x1()6CFU/g以下。即，可明確將專利文獻(xiàn)l記載的乳酸乳球菌乳酸亞種和乳酸乳球菌乳脂亞種與長(zhǎng)雙歧桿菌混合培養(yǎng)的情況下，如專利文獻(xiàn)1所記載的那樣，不能得到雙歧桿菌的繁殖促進(jìn)及縮短發(fā)酵時(shí)間的效果。如以上所述，本發(fā)明的乳球菌屬菌在適合于雙歧桿菌的發(fā)酵溫度范圍的10%(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基中，顯示出強(qiáng)的發(fā)酵性，再者，與長(zhǎng)雙歧桿菌混合培養(yǎng)的情況下，對(duì)于長(zhǎng)雙歧公知的菌抹所看不到的性質(zhì)。另外，因?yàn)榫哂蟹浅?qiáng)的發(fā)酵性，所以可高效制造發(fā)酵乳等發(fā)酵物。另外，因?yàn)椴簧呻p乙酰和乙偶姻，所以可期待制造出風(fēng)味良好的發(fā)酵物。凈爭(zhēng)另'Ji也，享'L酉臾^5求菌豸L酉臾亞種MCC852、857、859、865、866菌抹這5抹菌林是從自然界分離的乳酸菌中，選出發(fā)酵性良好、具有促進(jìn)長(zhǎng)雙歧桿菌的繁殖的性能及保存生存性的性能的菌林，因此，可安全地利用在以發(fā)酵性食品等為首的各種各樣的飲食品中。本發(fā)明的乳球菌屬菌可以與其它的乳球菌同樣地以菌粉的形態(tài)使用。該菌粉，例如可添加于食品、飼料中來(lái)使用。另外，本發(fā)明的乳球菌屬菌也優(yōu)選作為腸道功能調(diào)整劑等醫(yī)藥品組合物。在作為腸道功能調(diào)整劑使用的情況下，本發(fā)明乳球菌屬菌在腸道功能調(diào)整劑中的含量、每天的攝取量等，只要為可獲得調(diào)整腸道效果的量，就沒(méi)有特別的限定。例如，優(yōu)選每天攝取lx1C^CFU左右的乳球菌屬菌。在本發(fā)明中，長(zhǎng)雙歧桿菌與乳球菌屬菌的預(yù)培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基，只要為通常所用的培養(yǎng)基，就沒(méi)有特別的限定，但優(yōu)選為乳性培養(yǎng)基。為了處理簡(jiǎn)便，特別優(yōu)選為復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基。該復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基的濃度優(yōu)選為3%(W/W)以上，特別優(yōu)選為8。/。(W/W)以上。其它，在預(yù)培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基中，可添加酵母抽提物等繁殖促進(jìn)物質(zhì)、L-半胱氨酸等還原劑等。特別地，因?yàn)殡p歧桿菌在乳性培養(yǎng)基中的增殖性低，所以優(yōu)選使用添加繁殖促進(jìn)物質(zhì)的培養(yǎng)基。例如，可使用含有O.l~1%(W/W)的酵母抽提物的培養(yǎng)基。另外，預(yù)培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基使用經(jīng)過(guò)滅菌處理的培養(yǎng)基。該滅菌處理可用通常所用的方法進(jìn)行，例如，可通過(guò)在80~122。C用5~40分鐘、優(yōu)選在85~95。C用5~35分鐘的加熱處理來(lái)進(jìn)4亍。通過(guò)本發(fā)明的長(zhǎng)雙歧桿菌的繁殖性和生存性促進(jìn)方法，可簡(jiǎn)便且高效地改善長(zhǎng)雙歧桿菌的繁殖和保存生存性。該方法具體來(lái)說(shuō)，通過(guò)將本發(fā)明的乳球菌屬菌與長(zhǎng)雙歧桿菌混合培養(yǎng)來(lái)進(jìn)行。對(duì)混合培養(yǎng)時(shí)長(zhǎng)雙歧桿菌、本發(fā)明乳球菌屬菌發(fā)酵劑在混合培養(yǎng)用基本培養(yǎng)基中的接種比例沒(méi)有特別的限定，但優(yōu)選為100:1~1:10,特別優(yōu)選為10:1~1:1。另外，對(duì)該基本培養(yǎng)基的添加量也沒(méi)有特別的限定，相對(duì)于該基本培養(yǎng)基，長(zhǎng)雙歧桿菌與乳-求菌屬菌總計(jì)添加量?jī)?yōu)選為O.Ol~10(V/V)%,特別優(yōu)選為O.l~5(V/V)%。該基本培養(yǎng)基只要為雙歧桿菌與乳酸菌混合培養(yǎng)中通常所用的基本培養(yǎng)基，就沒(méi)有特別的限定，但優(yōu)選以乳為主成分的基本培養(yǎng)基。這是因?yàn)橥ㄟ^(guò)本發(fā)明的長(zhǎng)雙歧桿菌的繁殖性和生存性促進(jìn)方法，即使在不太適合于雙歧桿菌繁殖的乳性培養(yǎng)基中，也可改善長(zhǎng)雙歧桿菌的繁殖性和生存性。該基本培養(yǎng)基例如可在牛奶、脫脂奶、鮮牛奶、黃油、全脂奶粉、脫脂奶粉等中，根據(jù)需要配合蔗糖等甜味劑、果膠、果實(shí)、果汁、瓊膠、明膠、油脂、香料、著色劑、穩(wěn)定劑、還原劑等，并依照常規(guī)方法滅菌、均勻化、冷卻等來(lái)調(diào)制。特別優(yōu)選在含有長(zhǎng)雙歧桿菌的發(fā)酵乳等制造中使用。以下示出實(shí)施例來(lái)更詳細(xì)地說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明并不限定于以下的實(shí)施例。實(shí)施例1將1000mL10。/c)(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基在90。C滅菌30分鐘，接種30mL乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌林的種子培養(yǎng)物，并在25。C培養(yǎng)16小時(shí)。另一方面，將1000ml加入了0.2%(W/W)酵母抽提物的11%(W/W)脫脂乳培養(yǎng)基在90。C滅菌30分鐘，接種1OOmL長(zhǎng)雙歧桿菌模式菌抹FERMBP-7787菌抹的種子培養(yǎng)物，并在37。C培養(yǎng)6小時(shí)。此外，將包含脫脂奶粉、全脂奶粉、果膠、及蔗糖的原料混合溶解，得到50L包含0.5。/。(W/W)乳脂、8.0%(W/W)非脂乳固體成分、5力o/。(W/W)蔗糖、0.2%(W/W)果膠的基本培養(yǎng)基，將該基本培養(yǎng)基在卯。C滅菌10分鐘并冷卻到4(TC。在該滅菌的基本培養(yǎng)基中，接種50mL按照前述進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)的乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌抹的培養(yǎng)物與500mL長(zhǎng)雙歧桿菌FERMBP-7787菌抹的培養(yǎng)物，并在37。C培養(yǎng)16小時(shí)得到發(fā)酵乳。將該發(fā)酵乳立即攪拌冷卻，將冷卻發(fā)酵乳用15MPa的壓力均勻化，并填充于200mL容積的玻璃容器中、密封，得到酸性乳飲料。得到的酸性乳飲料pH為4.64,含有6.8x1()SCFU/g的長(zhǎng)雙歧桿菌。將該酸性乳飲料在l(TC保存14天時(shí)的長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)為5.8x108CFU/g，存活率為85%。實(shí)施例2使用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC857菌林代替乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌^^朱，除此之外，與實(shí)施例l同樣地得到酸性乳飲料。得到的酸性乳飲料pH為4.62，含有8.5x1()SCFU/g的長(zhǎng)雙歧桿菌。將該酸性乳飲料在10°C保存14天時(shí)的長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)為7.6xlo8CFU/g,存活率為89%。實(shí)施例3使用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC859菌抹代替乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌4朱，除此之外，與實(shí)施例l同樣地得到酸性乳飲料。得到的酸性乳飲料pH為4.56,含有7.2x1()8CFU/g的長(zhǎng)雙歧桿菌。將該酸性乳飲料在10°C保存14天時(shí)的長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)為5.8xl08CFU/g,存活率為81%。實(shí)施例4使用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC865菌林代替乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌抹，除此之外，與實(shí)施例l同樣地得到酸性乳飲料。得到的酸性乳飲料pH為4.54，含有6.9x1()8CFU/g的長(zhǎng)雙歧桿菌。將該酸性乳飲料在l(TC保存14天時(shí)的長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)為6.6xl08CFU/g,存活率為96%。實(shí)施例5使用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC866菌抹代替乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌4朱，除此之外，與實(shí)施例l同樣地得到酸性乳飲料。得到的酸性乳飲料pH為4.55，含有6.5x1()8CFU/g的長(zhǎng)雙歧桿菌。將該酸性乳飲料在l(TC保存14天時(shí)的長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)為6.2xio8CFU/g,存活率為95%。實(shí)施例6將500mL乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌抹的種子培養(yǎng)物接種到10L與前述培養(yǎng)基組成相同的培養(yǎng)基，并在37。C培養(yǎng)16小時(shí)，所述乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌抹的種子培養(yǎng)物是在由50g肉浸膏、100g酵母浸膏、100g蛋白胨、200gfL糖、50gK2HP04、10gKH2PO4、4g胱氨酸及9.5L水組成的培養(yǎng)基中37°C預(yù)培養(yǎng)MCC852菌抹16小時(shí)獲得的。進(jìn)一步，在90。C滅菌30分鐘的與前述培養(yǎng)基組成相同的200L培養(yǎng)基中，4妻種全部前述培養(yǎng)液(10.5L),并在37。C培養(yǎng)16小時(shí)。培養(yǎng)后的存活菌數(shù)為3.0x109CFU/mL。接著，使用Sharpless型離心分離機(jī)(TOMYSEIKOCO.,LTD.，制造，商品名D-201V),通過(guò)離心分離(15000rpm)收集菌體，在與培養(yǎng)基同量的生理鹽水(90。C滅菌30分鐘)中再次懸浮，與前述同樣離心分離并再次收集菌體。將收集的菌體懸浮在20L由10%(W/W)脫脂奶粉、P/。(W/W)蔗糖、1%(W/W)谷氨酸鈉組成的溶液(90。C滅菌30分鐘后)中，并依照常規(guī)方法冷凍千燥，得到約2.2kg包含8.6x10"CFU/g乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852的粉末。實(shí)施例7使用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC857菌抹代替乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌抹，除此之外，與實(shí)施例6同樣地得到約2.2k包含9.2x10"CFU/g乳酸乳球菌乳酸亞種MCC857的粉末。實(shí)施例8使用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC859菌抹代替乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌林，除此之外，與實(shí)施例6同樣地得到約2.2kg包含8.5x10"CFU/g乳酸乳球菌乳酸亞種MCC859的粉末。實(shí)施例9使用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC865菌株代替乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌林，除此之外，與實(shí)施例6同樣地得到約2.2kg包含9.4x10"CFU/g乳酸乳球菌乳酸亞種MCC865的粉末。實(shí)施例10使用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC866菌抹代替乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌4朱，除此之外，與實(shí)施例6同樣地得到約2.2kg包含8.8x101GCFU/g乳酸乳球菌乳酸亞種MCC866的粉末。實(shí)施例11在干燥滅菌的14kg淀粉及6kg乳糖中，添加20g實(shí)施例6得到的包含乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852的粉末并均一地混合，得到約20kg含有乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852的粉末的腸道功能調(diào)整劑。實(shí)施例12在干燥滅菌的14kg淀粉及6kg乳糖中，添加20g實(shí)施例7得到的包含乳酸乳球菌乳酸亞種MCC857的粉末并均一地混合，得到約20kg含有乳酸乳球菌乳酸亞種MCC857的粉末的腸道功能調(diào)整劑。實(shí)施例13在干燥滅菌的14kg淀粉及6kg乳糖中，添加20g實(shí)施例8得到的包含乳酸乳-求菌乳酸亞種MCC859的粉末并均一地混合，得到約20kg含有乳酸乳球菌乳酸亞種MCC859的粉末的腸道功能調(diào)整劑。實(shí)施例14在干燥滅菌的14kg淀粉及6kg乳糖中，添加20g實(shí)施例9得到的包含乳酸乳球菌乳酸亞種MCC865的粉末并均一地混合，得到約20kg含有乳酸乳球菌乳酸亞種MCC865的粉末的腸道功能調(diào)整劑。實(shí)施例15在干燥滅菌的14kg淀粉及6kg乳糖中，添加20g實(shí)施例10得到的包含乳酸乳球菌乳酸亞種MCC866的粉末并均一地混合，得到約20kg含有乳酸乳球菌乳酸亞種MCC866的粉末的腸道功能調(diào)整劑。實(shí)施例16將1000mL10y。(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基在90。C滅菌30分鐘，接種30mL乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌抹的種子培養(yǎng)物，并在25。C培養(yǎng)16小時(shí)。此外，將由3.0。/o(W/W)乳脂、9.5%(W/W)非脂乳固體成分組成的50L原^"奶加熱到70。C,并用15MPa的壓力均勻化后，90。C滅菌10分鐘并冷卻到4(TC。在該滅菌的基本培養(yǎng)基中，接種500mL按照前述進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)的乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌抹的培養(yǎng)物，并填充于500mL容積的樹(shù)脂容器中、密封，并在37。C培養(yǎng)16小時(shí)后立即冷卻。得到的發(fā)酵乳pH為4.70、含有1.3x1(^CFU/g的乳酸菌。實(shí)施例17使用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC857菌抹代替乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌抹，除此之外，與實(shí)施例16同樣地得到發(fā)酵乳，得到的發(fā)酵乳pH為4.69、含有1.5x1(^CFU/g的乳酸菌。實(shí)施例18使用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC859菌株代替乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌抹，除此之外，與實(shí)施例16同樣地得到發(fā)酵乳，得到的發(fā)酵乳pH為4.65、含有1.4x1(^CFU/g的乳酸菌。實(shí)施例19使用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC865菌抹代替乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌抹，除此之外，與實(shí)施例16同樣地得到發(fā)酵乳，得到的發(fā)酵乳pH為4.64、含有1.5x1(^CFU/g的乳酸菌。實(shí)施例20使用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC866菌抹代替乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌抹，除此之外，與實(shí)施例16同樣地得到發(fā)酵乳，得到的發(fā)酵乳pH為4.62、含有1.3x1()9CFU/g的乳酸菌。實(shí)施例21將1000mL10。/。(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基在90。C滅菌30分鐘，接種30mL乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌林的種子培養(yǎng)物，并在25。C培養(yǎng)16小時(shí)。另夕卜，將1500mL100/0(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基在9(TC滅菌30分鐘，接種50mL嗜熱鏈球菌(HANSEN公司產(chǎn))及保加利亞乳桿菌(HANSEN公司產(chǎn))的混合培養(yǎng)物，并在37。C培養(yǎng)5小時(shí)。25此外，將由3.0。/o(W/W)乳脂、9.0%(W/W)非脂乳固體成分組成的50L原料奶加熱到70°C，并用15MPa的壓力均勻化后，9(TC滅菌10分鐘并冷卻到4(TC。在該滅菌的基本培養(yǎng)基中，接種500mL按照前述進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)的乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌林的培養(yǎng)物、及50mL嗜熱鏈球菌與保加利亞乳桿菌的混合培養(yǎng)物，并填充于500mL容積的樹(shù)脂容器中、密封，并在37。C培養(yǎng)7小時(shí)后立即冷卻。得到的發(fā)酵乳pH為4.75、含有9.8x1()8CFU/g的乳酸菌。實(shí)施例22使用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC857菌抹代替乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌林，除此之外，與實(shí)施例21同樣地得到發(fā)酵乳，得到的發(fā)酵乳pH為4.74、含有1.2x1(^CFU/g的乳酸菌。實(shí)施例23使用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC859菌抹代替乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌抹，除此之外，與實(shí)施例16同樣地得到發(fā)酵乳，得到的發(fā)酵乳pH為4.70、含有1.6x1()9CFU/g的乳酸菌。實(shí)施例24使用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC865菌株代替乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌抹，除此之外，與實(shí)施例16同樣地得到發(fā)酵乳，得到的發(fā)酵乳pH為4.72、含有1.7x1(^CFU/g的乳酸菌。實(shí)施例25使用乳酸乳球菌乳酸亞種MCC866菌抹代替乳酸乳球菌乳酸亞種MCC852菌抹，除此之外，與實(shí)施例16同樣地得到發(fā)酵乳，得到的發(fā)酵乳pH為4.70、含有1.5x1(^CFU/g的乳酸菌。工業(yè)上的可利用性本發(fā)明的乳球菌屬菌可高效地維持酸奶、酸乳飲料、酸性乳飲料等發(fā)酵乳制品中的長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)及保存生存性，因此，在健康管理上及發(fā)酵乳制品的制造上有用，可利用在發(fā)酵乳制品等制造領(lǐng)域。權(quán)利要求1.一種乳球菌(Lactococcus)屬菌，其具有如下的菌學(xué)性質(zhì)(1)發(fā)酵性，即，在10％(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基中，在25～37℃的溫度范圍內(nèi)培養(yǎng)16小時(shí)的情況下，培養(yǎng)基凝固；(2)促進(jìn)長(zhǎng)雙歧桿菌繁殖的性能，即，在10％(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基中，與長(zhǎng)雙歧桿菌(Bifidobacteriumlongum)混合培養(yǎng)的情況下，pH達(dá)到4.4～4.6時(shí)，長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)在5×108CFU/g以上；以及(3)提高長(zhǎng)雙歧桿菌的保存生存性的性能，即，在10％(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基中，與長(zhǎng)雙歧桿菌混合培養(yǎng)的情況下，pH達(dá)到4.4～4.6時(shí)快速冷卻，并在10℃保持2周的情況下，長(zhǎng)雙歧桿菌的存活率在30％以上。2.根據(jù)權(quán)利要求l所述的乳球菌屬菌，其特征在于，其不具有木糖同化性，并且，不生成雙乙酰及乙偶姻。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的乳球菌屬菌，其為乳酸乳球菌乳酸亞種(丄a"ococcws/ac"5"subsp./"c"51)。4.根據(jù)權(quán)利要求l~3任一項(xiàng)所述的乳球菌屬菌，所述長(zhǎng)雙^支桿菌的菌抹為選自由長(zhǎng)雙歧桿菌FERMBP-7787及長(zhǎng)雙歧桿菌模式菌株ATCC15707所組成的組中的至少一種。5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的乳球菌屬菌，其菌抹為乳酸乳3求菌乳酸亞種MCC852(FERMBP-10742)。6.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的乳球菌屬菌，其菌抹為乳酸乳球菌乳酸亞種MCC857(FERMBP-10757)。7.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的乳球菌屬菌，其菌抹為乳酸乳球菌乳酸亞種MCC859(FERMBP-10744)。8.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的乳球菌屬菌，其菌抹為乳酸乳球菌乳酸亞種MCC865(FERMBP-10745)。9.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的乳球菌屬菌，其菌抹為乳酸乳球菌乳酸亞種MCC866(FERMBP-10746)。10.—種菌粉，其含有權(quán)利要求l~9任一項(xiàng)所述的乳球菌屬菌。11.一種醫(yī)藥用組合物，其含有權(quán)利要求l~9任一項(xiàng)所述的乳3求菌屬菌。12.—種腸道功能調(diào)整劑，其含有權(quán)利要求l~9任一項(xiàng)所述的乳5求菌屬菌。13.—種促進(jìn)長(zhǎng)雙歧桿菌的繁殖性和生存性的方法，其特征在于，其使用權(quán)利要求l~9任一項(xiàng)所述的乳球菌屬菌。全文摘要本發(fā)明提供一種乳球菌(Lactococcus)屬菌，其具有如下性質(zhì)(1)發(fā)酵性，即，在10％(W/W)復(fù)原脫脂乳培養(yǎng)基中，在25～37℃的溫度范圍內(nèi)培養(yǎng)16小時(shí)的情況下，培養(yǎng)基凝固；(2)促進(jìn)長(zhǎng)雙歧桿菌繁殖的性能，即，在上述培養(yǎng)基中，與長(zhǎng)雙歧桿菌(Bifidobacteriumlongum)混合培養(yǎng)的情況下，pH達(dá)到4.4～4.6時(shí)，長(zhǎng)雙歧桿菌的菌數(shù)在5×10⁸CFU/g以上；以及(3)提高長(zhǎng)雙歧桿菌保存生存性的性能，即，在上述培養(yǎng)基中，與長(zhǎng)雙歧桿菌混合培養(yǎng)的情況下，pH達(dá)到4.4～4.6時(shí)快速冷卻，并在10℃保持2周的情況下，長(zhǎng)雙歧桿菌的存活率在30％以上。文檔編號(hào)C12N1/20GK101522887SQ20078000407公開(kāi)日2009年9月2日申請(qǐng)日期2007年11月2日優(yōu)先權(quán)日2007年2月13日發(fā)明者八重島智子,清水金忠申請(qǐng)人:森永乳業(yè)株式會(huì)社