專利名稱：一種利用泰樂(lè)菌素藥渣生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種利用泰樂(lè)菌素藥渣的方法，尤其是涉及一種利用泰樂(lè) 菌素藥渣生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑的方法。
背景技術(shù)：
中國(guó)是大環(huán)內(nèi)酯類抗生素生產(chǎn)第一大國(guó)，年產(chǎn)量超過(guò)世界總產(chǎn)量的
2/3。然而在抗生素生產(chǎn)過(guò)程中，會(huì)產(chǎn)生大量的廢棄藥渣，這些藥渣主要是 發(fā)酵醪液進(jìn)行固液分離時(shí)形成的菌餅部分，其主要成分是微生物菌絲體、 未代謝利用完的有機(jī)物、無(wú)機(jī)鹽、少量未分離完的抗生素及其降解產(chǎn)物。 長(zhǎng)期以來(lái)，抗生素藥渣多采用簡(jiǎn)單晾曬或烘干后，作為動(dòng)物飼料或肥料使 用，經(jīng)濟(jì)附加值較低。與此同時(shí)，藥渣中因存在未分離完的抗生素，使其 直接作為飼料或肥料使用受到質(zhì)疑。
詞用酶制劑是動(dòng)物科技發(fā)展過(guò)程中出現(xiàn)的一種新型飼料添加劑。它具 有提高伺料利用效率、提高畜禽生產(chǎn)性能、減少畜禽排泄物中氮磷排泄量、 降低飼料生產(chǎn)成本等功效，是一種綠色環(huán)保型詞料添加劑。近年來(lái)，隨著 生物技術(shù)的不斷發(fā)展，詞用酶制劑的應(yīng)用研究取得了較大進(jìn)展，酶制劑作 為飼料添加劑具有廣闊的應(yīng)用前景。我國(guó)的飼用酶制劑還主要依賴于進(jìn) 口，存在較大的開發(fā)市場(chǎng)。由于詞用酶制劑的生產(chǎn)原料主要是大豆、玉米 等，價(jià)格較高，因而造成酶制劑的生產(chǎn)成本還處在一個(gè)比較高的水平，難 以達(dá)到實(shí)際且實(shí)惠的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種生產(chǎn)成本低、制備工 藝簡(jiǎn)捷、使廢棄藥渣得以高值化利用、有效避免藥渣不合理利用對(duì)環(huán)境造 成危害的一種利用泰樂(lè)菌素藥渣生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑的方法。
本發(fā)明通過(guò)如下方式實(shí)現(xiàn)
一種利用泰樂(lè)菌素藥渣生產(chǎn)詞用復(fù)合酶制劑的方法，其特征在于該 方法包括如下步驟
1)制備生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑的黑曲霉種子將黑曲霉接入黑曲霉復(fù)壯培養(yǎng)基，菌株經(jīng)活化和擴(kuò)大培養(yǎng)后，以5~10%的接種量接種于黑曲霉種 子培養(yǎng)基，28 32-C培養(yǎng)72 120h后，可制得生產(chǎn)詞用復(fù)合酶制劑的黑曲 霉種子；
2) 制備降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌種子將降解藥渣泰樂(lè)菌素的降 解菌，接入降解菌復(fù)壯培養(yǎng)基，降解菌經(jīng)活化和擴(kuò)大培養(yǎng)后，以5~10%接 種量接種于一級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，28 32'C培養(yǎng)18 24h后再轉(zhuǎn)接入二級(jí) 降解菌種子培養(yǎng)基，28 32i:培養(yǎng)26~30h后再轉(zhuǎn)接入三級(jí)降解菌種子培養(yǎng) 基，28 32"C培養(yǎng)34 38h后，可制得降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌種子；
3) 將上述l)制備的生產(chǎn)詞用復(fù)合酶制劑的黑曲霉種子和上述2)制 備的降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌種子分別按發(fā)酵底物總質(zhì)量的5 10%接 種量接入固體藥渣培養(yǎng)基中，28 32。C循環(huán)通風(fēng)培養(yǎng)48 72h，期間翻曲 一次，即微生物固體發(fā)酵生產(chǎn)詞用復(fù)合酶制劑結(jié)束；
4) 將上述3)發(fā)酵產(chǎn)物在50 70。C下干燥，粉碎后即為飼用復(fù)合酶 制劑；
所述黑曲霉復(fù)壯培養(yǎng)基、降解菌復(fù)壯培養(yǎng)基、黑曲霉種子培養(yǎng)基、一 級(jí)、二級(jí)或三級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，固體藥渣培養(yǎng)基配制方法分別是
1) 黑曲霉復(fù)壯培養(yǎng)基將下述重量或體積的原料混合即可得黑曲霉 復(fù)壯培養(yǎng)基蛋白胨20g，酵母粉10g，葡萄糖20g，水1000mL;
2) 降解菌復(fù)壯培養(yǎng)基將下述重量或體積的原料混合即可得降解菌 復(fù)壯培養(yǎng)基酵母浸出粉10g，蛋白胨10g，泰樂(lè)菌素藥渣浸出液1000ml;
3) 黑曲霉種子培養(yǎng)基將下述重量或體積的原料混合即可得黑曲霉
種子培養(yǎng)基K2HPO40.3g， KH2PO41.0g, FeS04.7H20 0.15g，麩皮500g， 水500ml;
4) 一級(jí)、二級(jí)或三級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基將下述重量或體積的原料 混合即可得一級(jí)、二級(jí)或三級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基泰樂(lè)菌素藥渣200g，
K2HPO40.15g， FeS04.7H20 0.2g，水800ml;
5) 固體藥渣培養(yǎng)基將下述重量或體積的原料混合即可得固體藥渣 培養(yǎng)基K2HPO40,l 0.5g， KH2PO40.5 1.5g， FeS04.7H20 0.1 0,5g， 泰樂(lè)菌素藥渣500 900g，麩皮450 50g，玉米胚芽粕50 450g，培養(yǎng)基 水分含量為55 75%;
5該詞用復(fù)合酶制劑是由酶活性》120000U/g的p-葡聚糖酶、酶活性^ 110000U/g的木聚糖酶、酶活性^6000U/g的果膠酶、酶活性》4000 U/g 的纖維素酶、酶活性^4000U/g的酸性蛋白酶混合組成。
本發(fā)明有如下效果
1) 制作方法簡(jiǎn)單、獨(dú)特本發(fā)明提供的制備飼用復(fù)合酶制劑是利用 泰樂(lè)菌素藥渣為主要原料，；通過(guò)固體發(fā)酵、烘干、粉碎后制得，在發(fā)酵生 產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑的同時(shí)，可降解藥渣中殘留的泰樂(lè)菌素，經(jīng)微生物法未 檢測(cè)到飼用復(fù)合酶制劑中殘留泰樂(lè)菌素的存在，飼用復(fù)合酶制劑生產(chǎn)中所 用菌種是黑曲霉和降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌。
2) 產(chǎn)酶活力高、應(yīng)用范圍廣利用本發(fā)明配方進(jìn)行固體發(fā)酵生產(chǎn)的 詞用復(fù)合酶制劑是由酶活性^120000U/g的P-葡聚糖酶、酶活性》 110000U/g的木聚糖酶、酶活性^6000U/g的果膠酶、酶活性》4000 U/g 的纖維素酶、酶活性^4000U/g的酸性蛋白酶混合組成，具有很高的木聚 糖酶活性和P-葡聚糖酶活性，同時(shí)還有較高活性的纖維素酶、酸性蛋白酶 和果膠酶，不僅適用于飼用粗飼料的反芻動(dòng)物，而且還適用于豬禽及魚類 等動(dòng)物。
3) 生產(chǎn)成本低本發(fā)明詞用復(fù)合酶制劑在發(fā)酵原料的選擇上主要是 以泰樂(lè)菌素生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生的廢棄藥渣為主，配以麩皮、玉米胚芽粕為輔 料，不僅來(lái)源豐富而且價(jià)格低廉。此外，本發(fā)明實(shí)現(xiàn)了發(fā)酵工藝條件的優(yōu) 化，降低了產(chǎn)酶成本，增加了投產(chǎn)后的產(chǎn)品競(jìng)爭(zhēng)力。
4) 安全可靠、環(huán)保效果好本發(fā)明生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑所使用的固 體發(fā)酵原料均不含任何有毒有害物質(zhì)，具有安全性和補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)的特點(diǎn)，對(duì) 環(huán)境無(wú)直接或間接的污染作用。
5) 本發(fā)明針對(duì)目前大量抗生素藥渣治理和再利用現(xiàn)狀，以選育優(yōu)化 的黑曲霉為復(fù)合酶制劑的生產(chǎn)菌株，所產(chǎn)生的酶活力較高，種類較多，不 僅使廢棄藥渣得以資源化利用，而且還提高其經(jīng)濟(jì)附加值，變廢為寶。
6) 本發(fā)明方法生產(chǎn)的詞用復(fù)合酶制劑不僅可以用于植物性飼料的發(fā) 酵生產(chǎn)，也可將其直接與植物性飼料拌和在一起飼喂動(dòng)物。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例l:1) 將黑曲霉接入黑曲霉復(fù)壯培養(yǎng)基，菌株經(jīng)活化和擴(kuò)大培養(yǎng)后，以
5%的接種量接種于黑曲霉種子培養(yǎng)基，32。C培養(yǎng)120h后，制得生產(chǎn)詞用 復(fù)合酶制劑的黑曲霉種子。
2) 將降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌，接入降解菌復(fù)壯培養(yǎng)基，降解菌 經(jīng)活化和擴(kuò)大培養(yǎng)后，以5%接種量接種于一級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，32°C 培養(yǎng)24h后再轉(zhuǎn)接入二級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，32'C培養(yǎng)30h后再轉(zhuǎn)接入三 級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，32t:培養(yǎng)38h后，制得降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌 種子。
3) 將上述l)制備的生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑的黑曲霉種子和上述2)制 備的降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌種子分別按發(fā)酵底物總質(zhì)量的10%接種 量接入固體藥渣培養(yǎng)基中，32'C循環(huán)通風(fēng)培養(yǎng)48h，期間翻曲一次，即微 生物固體發(fā)酵生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑結(jié)束。
其中所用固體藥渣培養(yǎng)基按下述重量或體積的原料混合而成 K2HPO40.3g， KH2PO41.0g， FeS04.7H20 0.3g,泰樂(lè)菌素藥渣600g，麩皮 200g，玉米胚芽粕200g，培養(yǎng)基水分含量為60%。
4) 將上述3)發(fā)酵產(chǎn)物在60'C下干燥，粉碎后即為飼用復(fù)合酶制劑， 并測(cè)定酶活力和殘留泰樂(lè)菌素的含量。
5) 結(jié)果
經(jīng)測(cè)定j3-葡聚糖酶活力為130300U/g,木聚糖酶活力為111500U/g， 果膠酶活力為6500U/g，纖維素酶活力為4200U/g,酸性蛋白酶活力為 4600U/g。經(jīng)微生物法未檢測(cè)到飼用復(fù)合酶制劑中殘留泰樂(lè)菌素的存在。
實(shí)施例2:
1) 將黑曲霉接入黑曲霉復(fù)壯培養(yǎng)基，菌株經(jīng)活化和擴(kuò)大培養(yǎng)后，以 10%的接種量接種于黑曲霉種子培養(yǎng)基，32。C培養(yǎng)72h后，制得生產(chǎn)飼用 復(fù)合酶制劑的黑曲霉種子。
2) 將降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌，接入降解菌復(fù)壯培養(yǎng)基，降解菌 經(jīng)活化和擴(kuò)大培養(yǎng)后，以10%接種量接種于一級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，32 "C培養(yǎng)18h后再轉(zhuǎn)接入二級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，32"C培養(yǎng)26h后再轉(zhuǎn)接入 三級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，32t:培養(yǎng)34h后，制得降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解 菌種子。3) 將上述1)制備的生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑的黑曲霉種子和上述2)制 備的降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌種子分別按發(fā)酵底物總質(zhì)量的5%接種量 接入固體藥渣培養(yǎng)基中，32'C循環(huán)通風(fēng)培養(yǎng)72h，期間翻曲一次，即微生 物固體發(fā)酵生產(chǎn)伺用復(fù)合酶制劑結(jié)束。
其中所用固體藥渣培養(yǎng)基按下述重量或體積的原料混合而成-K2HPO40.5g， KH2P041.5g， FeS04.7H20 O.lg，泰樂(lè)菌素藥渣500g，麩皮 300g，玉米胚芽粕200g，培養(yǎng)基水分含量為55%。
4) 將上述3)發(fā)酵產(chǎn)物在5(TC下干燥，粉碎后即為飼用復(fù)合酶制劑， 并測(cè)定酶活力和殘留泰樂(lè)菌素的含量。
5) 結(jié)果
經(jīng)測(cè)定P-葡聚糖酶活力為143200U/g，木聚糖酶活力為125000U/g， 果膠酶活力為7300U/g，纖維素酶活力為5100 U/g，酸性蛋白酶活力為 5500U/g。經(jīng)微生物法未檢測(cè)到飼用復(fù)合酶制劑中殘留泰樂(lè)菌素的存在。
實(shí)施例3:
1) 將黑曲霉接入黑曲霉復(fù)壯培養(yǎng)基，菌株經(jīng)活化和擴(kuò)大培養(yǎng)后，以 8%的接種量接種于黑曲霉種子培養(yǎng)基，30'C培養(yǎng)84h后，制得生產(chǎn)飼用 復(fù)合酶制劑的黑曲霉種子。
2) 將降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌，接入降解菌復(fù)壯培養(yǎng)基，降解菌 經(jīng)活化和擴(kuò)大培養(yǎng)后，以8%接種量接種于一級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，30°C 培養(yǎng)22h后再轉(zhuǎn)接入二級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，3(TC培養(yǎng)28h后再轉(zhuǎn)接入三 級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，3(TC培養(yǎng)36h后，制得降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌 種子。
3) 將上述l)制備的生產(chǎn)詞用復(fù)合酶制劑的黑曲霉種子和上述2)制 備的降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌種子分別按發(fā)酵底物總質(zhì)量的8%接種量 接入固體藥渣培養(yǎng)基中，3(TC循環(huán)通風(fēng)培養(yǎng)60h，期間翻曲一次，即微生 物固體發(fā)酵生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑結(jié)束。
其中所用固體藥渣培養(yǎng)基按下述重量或體積的原料混合而成-K2HPO40.2g， KH2PO40.8， FeS04'7H20 0.4g，泰樂(lè)菌素藥渣700g，麩皮 150g，玉米胚芽粕150g，培養(yǎng)基水分含量為65%。
4) 將上述3)發(fā)酵產(chǎn)物在6(TC下干燥，粉碎后即為飼用復(fù)合酶制劑，并測(cè)定酶活力和殘留泰樂(lè)菌素的含量。 5)結(jié)果
經(jīng)測(cè)定P-葡聚糖酶活力為136500U/g，木聚糖酶活力為122600U/g， 果膠酶活力為6800U/g，纖維素酶活力為4500 U/g，酸性蛋白酶活力為 4800U/g。經(jīng)微生物法未檢測(cè)到詞用復(fù)合酶制劑中殘留泰樂(lè)菌素的存在。
實(shí)施例4:
1) 將黑曲霉接入黑曲霉復(fù)壯培養(yǎng)基，菌株經(jīng)活化和擴(kuò)大培養(yǎng)后，以 6%的接種量接種于黑曲霉種子培養(yǎng)基，32。C培養(yǎng)96h后，制得生產(chǎn)伺用 復(fù)合酶制劑的黑曲霉種子。
2) 將降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌，接入降解菌復(fù)壯培養(yǎng)基，降解菌 經(jīng)活化和擴(kuò)大培養(yǎng)后，以6%接種量接種于一級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，32°C 培養(yǎng)24h后再轉(zhuǎn)接入二級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，32。C培養(yǎng)30h后再轉(zhuǎn)接入三 級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，32"C培養(yǎng)38h后，制得降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌 種子。
3) 將上述l)制備的生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑的黑曲霉種子和上述2)制 備的降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌種子分別按發(fā)酵底物總質(zhì)量的6%、 10% 接種量接入固體藥渣培養(yǎng)基中，32'C循環(huán)通風(fēng)培養(yǎng)60h，期間翻曲一次， 即微生物固體發(fā)酵生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑結(jié)束。
其中所用固體藥渣培養(yǎng)基按下述重量或體積的原料混合而成 K2HPO40.2g， KH2PO41.0g， FeS04.7H20 0.4g，泰樂(lè)菌素藥渣800g，麩皮 100g，玉米胚芽粕100g，培養(yǎng)基水分含量為70%。
4) 將上述3)發(fā)酵產(chǎn)物在7(TC下干燥，粉碎后即為飼用復(fù)合酶制劑， 并測(cè)定酶活力和殘留泰樂(lè)菌素的含量。
5) 結(jié)果
經(jīng)測(cè)定P-葡聚糖酶活力為128600U/g，木聚糖酶活力為116400U/g， 果膠酶活力為6600U/g，纖維素酶活力為4700 U/g，酸性蛋白酶活力為 5200U/g。經(jīng)微生物法未檢測(cè)到詞用復(fù)合酶制劑中殘留泰樂(lè)菌素的存在。
實(shí)施例5:
1)將黑曲霉接入黑曲霉復(fù)壯培養(yǎng)基，菌株經(jīng)活化和擴(kuò)大培養(yǎng)后，以 7%的接種量接種于黑曲霉種子培養(yǎng)基，32"C培養(yǎng)96h后，制得生產(chǎn)詞用
9復(fù)合酶制劑的黑曲霉種子。
2) 將降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌，接入降解菌復(fù)壯培養(yǎng)基，降解菌 經(jīng)活化和擴(kuò)大培養(yǎng)后，以7%接種量接種于一級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，32°C 培養(yǎng)24h后再轉(zhuǎn)接入二級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，32'C培養(yǎng)30h后再轉(zhuǎn)接入三 級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，32。C培養(yǎng)38h后，制得降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌 種子。
3) 將上述l)制備的生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑的黑曲霉種子和上述2)制 備的降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌種子分別按發(fā)酵底物總質(zhì)量的8%、 10% 接種量接入固體藥渣培養(yǎng)基中，32"C循環(huán)通風(fēng)培養(yǎng)60h，期間翻曲一次， 即微生物固體發(fā)酵生產(chǎn)詞用復(fù)合酶制劑結(jié)束。
其中所用固體藥渣培養(yǎng)基按下述重量或體積)的原料混合而成 K2HPO40.2g， KH2PO40.8g， FeS04'7H20 0.3g，泰樂(lè)菌素藥渣700g，麩皮 200g，玉米胚芽粕100g，培養(yǎng)基水分含量為65%。
4) 將上述3)發(fā)酵產(chǎn)物在6(TC下干燥，粉碎后即為飼用復(fù)合酶制劑， 并測(cè)定酶活力和殘留泰樂(lè)菌素的含量。
5) 結(jié)果
經(jīng)測(cè)定P-葡聚糖酶活力為132900U/g，木聚糖酶活力為120300U/g， 果膠酶活力為6700U/g，纖維素酶活力為4300 U/g，酸性蛋白酶活力為 4500U/g。經(jīng)微生物法未檢測(cè)到飼用復(fù)合酶制劑中殘留泰樂(lè)菌素的存在。
實(shí)施例6:
1) 將黑曲霉接入黑曲霉復(fù)壯培養(yǎng)基，菌株經(jīng)活化和擴(kuò)大培養(yǎng)后，以 9%的接種量接種于黑曲霉種子培養(yǎng)基，3(TC培養(yǎng)84h后，制得生產(chǎn)飼用 復(fù)合酶制劑的黑曲霉種子。
2) 將降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌，接入降解菌復(fù)壯培養(yǎng)基，降解菌 經(jīng)活化和擴(kuò)大培養(yǎng)后，以9%接種量接種于一級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，30°C 培養(yǎng)20h后再轉(zhuǎn)接入二級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，3(TC培養(yǎng)28h后再轉(zhuǎn)接入三 級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，3(TC培養(yǎng)36h后，制得降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌 種子。
3) 將上述l)制備的生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑的黑曲霉種子和上述2)制 備的降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌種子分別按發(fā)酵底物總質(zhì)量的9%、 10%接種量接入固體藥渣培養(yǎng)基中，3(TC循環(huán)通風(fēng)培養(yǎng)72h，期間翻曲一次， 即微生物固體發(fā)酵生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑結(jié)束。
其中所用固體藥渣培養(yǎng)基按下述重量或體積的原料混合而成 K2HPO40.1g， KH2PO40.5g, FeS04.7H20 0.5g，泰樂(lè)菌素藥渣900g，麩皮 50g，玉米胚芽粕50g，培養(yǎng)基水分含量為75%。
4) 將上述3)發(fā)酵產(chǎn)物在7(TC下干燥，粉碎后即為伺用復(fù)合酶制劑， 并測(cè)定酶活力和殘留泰樂(lè)菌素的含量。
5) 結(jié)果
經(jīng)測(cè)定卩-葡聚糖酶活力為159000U/g，木聚糖酶活力為132800U/g， 果膠酶活力為7700U/g，纖維素酶活力為5500 U/g，酸性蛋白酶活力為 5700U/g。經(jīng)微生物法未檢測(cè)到飼用復(fù)合酶制劑中殘留泰樂(lè)菌素的存在。
采用上述方法得到的飼用復(fù)合酶制劑，可以達(dá)到以下指標(biāo)
1. 感官指標(biāo)黃褐色粉粒，無(wú)結(jié)塊。
2. 衛(wèi)生指標(biāo)
大腸桿菌《3000個(gè)/100g;
沙門氏菌不得檢出； 黃曲霉毒素Bl:《10pg/kg;
鉛《10mg/kg; 石申《3mg/kg。
權(quán)利要求
1. 一種利用泰樂(lè)菌素藥渣生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑的方法，其特征在于該方法包括如下步驟1)制備生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑的黑曲霉種子將黑曲霉接入黑曲霉復(fù)壯培養(yǎng)基，菌株經(jīng)活化和擴(kuò)大培養(yǎng)后，以5～10％的接種量接種于黑曲霉種子培養(yǎng)基，28～32℃培養(yǎng)72～120h后，可制得生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑的黑曲霉種子；2)制備降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌種子將降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌，接入降解菌復(fù)壯培養(yǎng)基，降解菌經(jīng)活化和擴(kuò)大培養(yǎng)后，以5～10％接種量接種于一級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，28～32℃培養(yǎng)18～24h后再轉(zhuǎn)接入二級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，28～32℃培養(yǎng)26～30h后再轉(zhuǎn)接入三級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，28～32℃培養(yǎng)34～38h后，可制得降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌種子；3)將上述1)制備的生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑的黑曲霉種子和上述2)制備的降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌種子分別按發(fā)酵底物總質(zhì)量的5～10％接種量接入固體藥渣培養(yǎng)基中，28～32℃循環(huán)通風(fēng)培養(yǎng)48～72h，期間翻曲一次，即微生物固體發(fā)酵生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑結(jié)束；4)將上述3)發(fā)酵產(chǎn)物在50～70℃下干燥，粉碎后即為飼用復(fù)合酶制劑。
2. 如權(quán)利要求1所述的一種利用泰樂(lè)菌素藥渣生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑 的方法，其特征在于所述黑曲霉復(fù)壯培養(yǎng)基、降解菌復(fù)壯培養(yǎng)基、黑曲 霉種子培養(yǎng)基、 一級(jí)、二級(jí)或三級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基，固體藥渣培養(yǎng)基配 制方法分別是1) 黑曲霉復(fù)壯培養(yǎng)基將下述重量或體積的原料混合即可得黑曲霉 復(fù)壯培養(yǎng)基蛋白胨20g,酵母粉10g，葡萄糖20g，水1000mL;2) 降解菌復(fù)壯培養(yǎng)基將下述重量或體積的原料混合即可得降解菌復(fù)壯培養(yǎng)基酵母浸出粉10g,蛋白胨10g，泰樂(lè)菌素藥渣浸出液1000ml;3) 黑曲霉種子培養(yǎng)基將下述重量或體積的原料混合即可得黑曲霉種子培養(yǎng)基K2HPO40.3g， KH2PO41.0g， FeS04.7H20 0.15g，麩皮500g， 水500ml;4) 一級(jí)、二級(jí)或三級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基將下述重量或體積的原料 混合即可得一級(jí)、二級(jí)或三級(jí)降解菌種子培養(yǎng)基泰樂(lè)菌素藥渣200g，K2HPO40.15g， FeS04,7H20 0.2g，水800ml;5) 固體藥渣培養(yǎng)基將下述重量或體積的原料混合即可得固體藥渣培養(yǎng)基K2HPO40.1 0.5g， KH2PO40.5 1.5g， FeS04.7H20 t).l 0.5g， 泰樂(lè)菌素藥渣500 900g，麩皮450 50g，玉米胚芽粕50 450g，培養(yǎng)基 水分含量為55 75%。
3.如權(quán)利要求1和2所述的一種利用泰樂(lè)菌素藥渣生產(chǎn)飼用復(fù)合酶 制劑的方法，其特征在于該飼用復(fù)合酶制劑是由酶活性》120000U/g的 卩-葡聚糖酶、酶活性^110000U/g的木聚糖酶、酶活性》6000U/g的果膠 酶、酶活性》4000U/g的纖維素酶、酶活性^4000U/g的酸性蛋白酶混合 組成。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種利用泰樂(lè)菌素藥渣的方法，尤其是涉及一種利用泰樂(lè)菌素藥渣生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑的方法，該方法為固體發(fā)酵、烘干、粉碎后制得；本發(fā)明提供的方法在發(fā)酵生產(chǎn)飼用復(fù)合酶制劑的同時(shí)，可降解藥渣中殘留的泰樂(lè)菌素，經(jīng)微生物法未檢測(cè)到飼用復(fù)合酶制劑中殘留泰樂(lè)菌素的存在，飼用復(fù)合酶制劑生產(chǎn)中所用菌種是黑曲霉和降解藥渣泰樂(lè)菌素的降解菌。
文檔編號(hào)C12R1/01GK101423826SQ20081023380
公開日2009年5月6日 申請(qǐng)日期2008年12月15日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月15日
發(fā)明者劉寧普, 張作義, 麗 謝, 馬玉龍 申請(qǐng)人:寧夏大學(xué)