專利名稱：一種羊棲菜受精卵和胚胎保存方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及經(jīng)濟(jì)褐藻的培育，具體的說是一種羊棲菜受精卵和胚胎保存方法。
背景技術(shù)：
羊棲菜是雌雄異體的經(jīng)濟(jì)褐藻，受精率低，而且發(fā)育不同步，現(xiàn)階段通常采用全人 工苗種培育方法，此方法使用發(fā)育性成熟的親本種菜，或者是取自自然種群的個體，或者是 人工栽培的個體，或者是在人工培養(yǎng)系統(tǒng)中通過生物技術(shù)方法實現(xiàn)的雌雄親本同步成熟， 采集受精卵，完成布苗過程。這些技術(shù)方法需要在采集了受精卵之后迅速完成布苗過程，以 便能夠讓受精卵在產(chǎn)生假根的時候已經(jīng)附著在附著基上。因此，當(dāng)需要完成跨地區(qū)異地育 苗和需要干露運(yùn)輸大量的種菜時，此方法會給實際生產(chǎn)帶來很多的困難。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種延緩發(fā)育過程、提高培育成功率的棲菜受精卵和胚胎保存方法。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為 保存方法將同步排放的卵子和精子在受精后的8-16小時內(nèi)完成于低溫0-8t:下 收集受精卵和胚胎，同時將收集的受精卵和胚胎在營養(yǎng)液中于低溫0-8°C、0-500勒克斯下 保存即可；所述營養(yǎng)液中含NaN03 :l-10卯m， KH2P04 :0. 1-lppm，為海水配制。
所述同步排放的卵子和精子將羊棲菜雌雄親本在光照強(qiáng)度1-5萬勒克斯，光照 周期12-16小時，溫度18-24度的條件下培養(yǎng)，并且24小時以內(nèi)更換一次水，培養(yǎng)7_10天， 使得親本實現(xiàn)同步排放卵子精子，待親本同步排放卵子精子后12-24小時內(nèi)將其收集。所
述羊棲菜雌雄親本的雌雄比例為io : i。所述同步排放的卵子精子比例為i : io-ioo。所
述收集受精卵和胚胎時采用自然沉降或人工攪拌收集。 本發(fā)明所具有的優(yōu)點 1.本發(fā)明在羊棲菜卵子受精后8-16小時內(nèi)利用低溫方法，將其在適宜的培養(yǎng)基 中培養(yǎng)繼而保存受精卵和胚胎，這樣可大幅度的延緩發(fā)育過程，使其在假根尚沒有形成之 前完成異地跨地區(qū)運(yùn)輸從而進(jìn)行苗種培育。 2.本發(fā)明實施對象羊棲菜是雌雄異體的經(jīng)濟(jì)褐藻，受精率低，而且發(fā)育不同步，本 發(fā)明利用同步受精技術(shù)獲得自然脫落的受精卵和胚胎后，可以跨地區(qū)實現(xiàn)異地苗種培育， 提高成功率。同時本發(fā)明也適用于馬尾藻屬中其它的經(jīng)濟(jì)海藻具有相同的效果，如鼠尾藻 和銅藻。 3.采用本發(fā)明保存方法將極大的節(jié)省異地運(yùn)輸種菜所帶來的麻煩，提高苗種培育 的成功率。
具體實施例方式
羊棲菜雌雄親本的選取在人工栽培或者自然生長在潮間帶的羊棲菜種群中選取 雌雄生殖托發(fā)育良好的雌雄親本，選取親本的季節(jié)應(yīng)當(dāng)是在自然成熟季節(jié)前的10-15天左右。 1)羊棲菜同步排放的卵子和精子的收集將羊棲菜雌雄親本在光照強(qiáng)度1萬勒克 斯，光照周期12小時，溫度18度的條件下培養(yǎng)，并且24小時以內(nèi)更換一次水，培養(yǎng)7天，使 得親本實現(xiàn)同步排放卵子精子，待親本同步排放卵子精子后12小時內(nèi)將其收集；其中羊棲 菜雌雄親本的雌雄比例為10 : 1。 2)保存將收集的同步排放的卵子精子進(jìn)行受精，同步排放的卵子精子比例為
i : io。在受精后的8小時內(nèi)，在低溫ot:下受精卵和胚胎的收集，同時將收集的受精卵和
胚胎在過量的營養(yǎng)液中于低溫(TC、500勒克斯下保存即可；所述收集受精卵和胚胎可采用 自然沉降和人工攪拌收集。所述營養(yǎng)液為Na冊3 :5卯m ;KH2P04 :0. 5ppm ;PH = 8. 0 ;消毒海水 配制。
應(yīng)用例 2008年6月在我國浙江省洞頭縣采集了受精卵和胚胎，利用低溫保存受精卵和胚 胎的技術(shù)方法，耗時16個小時，運(yùn)輸?shù)角鄭u苗種培育基地，隨后完成了布苗，取得了成功， 共培育了 4000萬幼苗，幼苗成活率達(dá)到了 95%以上。
實施例2 1)羊棲菜同步排放的卵子和精子的收集將羊棲菜雌雄親本在光照強(qiáng)度5萬勒克 斯，光照周期16小時，溫度24度的條件下培養(yǎng)，并且24小時以內(nèi)更換一次水，培養(yǎng)8天，使 得親本實現(xiàn)同步排放卵子精子，待親本同步排放卵子精子后24小時內(nèi)將其收集；其中羊棲 菜雌雄親本的雌雄比例為10 : 1。 2)保存將收集的同步排放的卵子精子進(jìn)行受精，同步排放的卵子精子比例為
i : ioo。在受精后的16小時內(nèi)，在低溫8t:下完成受精卵和胚胎的收集，同時將收集的受 精卵和胚胎在營養(yǎng)液中于低溫8t:、0勒克斯下保存即可；所述收集受精卵和胚胎可采用自
然沉降和人工攪拌收集。所述營養(yǎng)液為NaN03 :lppm ;KH2P04 :0. lppm ;PH = 8. 0 ;消毒海水配 制。 實施例3 1)羊棲菜同步排放的卵子和精子的收集將羊棲菜雌雄親本在光照強(qiáng)度3萬勒克 斯，光照周期12小時，溫度20度的條件下培養(yǎng)，并且24小時以內(nèi)更換一次水，培養(yǎng)10天， 使得親本實現(xiàn)同步排放卵子精子，待親本同步排放卵子精子后20小時內(nèi)將其收集；其中羊 棲菜雌雄親本的雌雄比例為10 : 1。 2)保存將收集的同步排放的卵子精子進(jìn)行受精，同步排放的卵子精子比例為
i : 50。在受精后的io小時內(nèi)，于低溫rc下完成受精卵和胚胎的收集，同時將收集的受精 卵和胚胎在營養(yǎng)液中于低溫rc、2oo勒克斯下保存即可；所述收集受精卵和胚胎可采用自
然沉降和人工攪拌收集。所述營養(yǎng)液為NaN03 :3卯m ;KH2P04 :0. 8ppm ;PH = 8. 0 ;消毒海水配 制。 實施例4 1)羊棲菜同步排放的卵子和精子的收集將羊棲菜雌雄親本在光照強(qiáng)度4萬勒克 斯，光照周期14小時，溫度22度的條件下培養(yǎng)，并且24小時以內(nèi)更換一次水，培養(yǎng)6天，使 得親本實現(xiàn)同步排放卵子精子，待親本同步排放卵子精子后24小時內(nèi)將其收集；其中羊棲 菜雌雄親本的雌雄比例為10 : 1。
2)保存將收集的同步排放的卵子精子進(jìn)行受精，同步排放的卵子精子比例為
i : io-ioo。在受精后的14小時內(nèi)于低溫5t:下完成受精卵和胚胎的收集，同時將收集的
受精卵和胚胎在營養(yǎng)液中于低溫5°C、50勒克斯下保存即可；所述收集受精卵和胚胎可采用自然沉降和人工攪拌收集。所述營養(yǎng)液為NaN03 :8卯m ;KH2P04 :0. 9ppm ;PH = 8. 0 ;消毒海水配制。
權(quán)利要求
一種羊棲菜受精卵和胚胎保存方法，其特征在于將同步排放的卵子和精子在受精后的8-16小時內(nèi)完成于低溫0-8℃下收集受精卵和胚胎，同時將收集的受精卵和胚胎在營養(yǎng)液中于低溫0-8℃、0-500勒克斯下保存即可；所述營養(yǎng)液中含NaNO31-10ppm，KH2PO40.1-1ppm，為海水配制。
2. 按權(quán)利要求1所述的羊棲菜受精卵和胚胎保存方法，其特征在于所述同步排放 的卵子和精子將羊棲菜雌雄親本在光照強(qiáng)度1-5萬勒克斯，光照周期12-16小時，溫度 18-24度的條件下培養(yǎng)，并且24小時以內(nèi)更換一次水，培養(yǎng)7-10天，使得親本實現(xiàn)同步排放 卵子精子，待親本同步排放卵子精子后12-24小時內(nèi)將其收集。
3. 按權(quán)利要求2所述的羊棲菜受精卵和胚胎保存方法，其特征在于所述羊棲菜雌雄 親本的雌雄比例為10 : 1。
4. 按權(quán)利要求1所述的羊棲菜受精卵和胚胎保存方法，其特征在于所述同步排放的 卵子精子比例為1 : 10-100。
5. 按權(quán)利要求1所述的羊棲菜受精卵和胚胎保存方法，其特征在于所述收集受精卵 和胚胎時采用自然沉降或人工攪拌收集。
全文摘要
本發(fā)明涉及經(jīng)濟(jì)褐藻的培育，具體的說是一種羊棲菜受精卵和胚胎保存方法。具體為將羊棲菜雌雄親本在光照強(qiáng)度10000-50000勒克斯，光照周期12-16小時，溫度18-24攝氏度的條件下培養(yǎng)，并且24小時以內(nèi)更換一次水，培養(yǎng)7-10天，使得親本實現(xiàn)同步排放卵子精子，待親本同步排放卵子精子后12-24小時內(nèi)收集受精卵，在受精后的8-16小時內(nèi)，在0-8℃下完成受精卵和胚胎的收集，繼而保存。本發(fā)明在羊棲菜卵子受精后8-16小時內(nèi)利用低溫方法，將其在適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，繼而保存受精卵和胚胎，這樣可大幅度的延緩發(fā)育過程，使其在假根尚沒有形成之前完成異地跨地區(qū)運(yùn)輸從而進(jìn)行苗種培育。
文檔編號C12N5/04GK101760451SQ20081024954
公開日2010年6月30日 申請日期2008年12月23日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月23日
發(fā)明者張志懷, 張玉榮, 逄少軍 申請人:中國科學(xué)院海洋研究所