專利名稱：一種腸道益生菌固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是一種腸道益生菌固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體培養(yǎng)方法，生產(chǎn)的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體益生菌不 需要分離凍干，可直接作為益生菌服用，常溫下可長(zhǎng)期保存，活力不但不降低且有所升高。 比液態(tài)培養(yǎng)益生菌的產(chǎn)品及益生菌凍干粉有諸多優(yōu)點(diǎn)和較高的活力，其貨架壽命顯著的延長(zhǎng)。 其方法是將兩歧雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、嗜熱鏈球菌、德氏乳桿菌保加利亞亞種、青春雙歧 桿菌、長(zhǎng)雙歧桿菌、、短雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、鼠李糖乳桿菌、干酪乳桿菌、植物乳桿菌、 動(dòng)物雙歧桿菌等乳酸菌在含有瓊脂、明膠、魚(yú)膠粉、果凍粉的營(yíng)養(yǎng)載體上直接培養(yǎng)，培 養(yǎng)一定時(shí)間后即可作為產(chǎn)品。
(二)
背景技術(shù)：
益生菌(Probiotics)是一類改善人類腸道微生態(tài)平衡，對(duì)人體健康具有調(diào)理作用的有 益的微生物，它們主要是通過(guò)維護(hù)腸道的微生態(tài)平衡而起到促進(jìn)人體健康的作用，它的生理 學(xué)功能得到全世界科技界普遍認(rèn)同。全世界每年發(fā)表關(guān)于研究益生菌的論文極其豐富，概括 起來(lái)益生菌具有以下幾方面的作用
(1)提高免疫力雙歧桿菌和嗜酸乳桿菌可產(chǎn)生大量的免疫球蛋白。從而激活機(jī)體的免疫細(xì) 胞，使得外在菌難以留存體內(nèi)，達(dá)到免疫調(diào)節(jié)作用。(2)改善胃腸道功能雙歧桿菌和嗜 酸乳桿菌在腸道粘膜表面形成保護(hù)屏障，抵御有害菌對(duì)腸道粘膜的侵襲破壞，能產(chǎn)生乳酸和 醋酸等酸性物質(zhì)，造成不利于有害菌生長(zhǎng)的環(huán)境，抑制有害菌的生長(zhǎng)、繁殖，起到調(diào)節(jié)腸道 菌群的作用。(3)營(yíng)養(yǎng)作用雙歧桿菌和嗜酸乳桿菌在人體腸道內(nèi)發(fā)酵后可產(chǎn)生乳酸和醋
酸，能提高鈣、磷、鐵的利用率，促進(jìn)鐵和維生素D的吸收，產(chǎn)生維生素K及維生素B，產(chǎn)
生乳糖酶幫助消化乳糖。(4)通腸潤(rùn)便雙歧桿菌和嗜酸乳桿菌在腸內(nèi)可產(chǎn)生大量的短鏈
脂肪酸等酸性物質(zhì)，能刺激腸道蠕動(dòng)，增加糞便濕度，起到通便的效果。(5)恢復(fù)因使用
抗生素后而被破壞的腸道正常微生物菌群抗生素是引起腸道菌群失調(diào)的重要因素?？股?在殺滅有害菌的同時(shí)，也殺滅了很多的有益菌，及時(shí)補(bǔ)充雙岐桿菌和嗜酸乳桿菌，對(duì)幫助腸
道恢復(fù)菌群平衡、提高營(yíng)養(yǎng)吸收能力是非常必要的。(6)降低膽固醇、防止動(dòng)脈硬化。(7) 抑制內(nèi)毒素的產(chǎn)生，延緩衰老。(8)抑制腸道中致癌因子的產(chǎn)生，預(yù)防腫瘤的發(fā)生。(9)抗 輻射等。因此，腸道微生態(tài)制劑的研究已成為當(dāng)前世界微生物學(xué)領(lǐng)域一個(gè)研究重點(diǎn)。目前， 雖然市場(chǎng)上益生菌產(chǎn)品極其豐富，但是，益生菌產(chǎn)品只有液體益生菌和益生菌凍干粉兩種形 式。而采用固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體培養(yǎng)腸道益生菌，培養(yǎng)成熟，經(jīng)包裝后作為活性較高、且易于長(zhǎng)期 保存的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體益生菌則具有極大的創(chuàng)新性。這項(xiàng)技術(shù)的研究和開(kāi)發(fā)會(huì)給人類的健康帶 來(lái)積極的促進(jìn)意義，同時(shí)也具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和社會(huì)效益。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種腸道益生菌固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體培養(yǎng)方法，它包括兩歧雙歧桿 菌、嗜酸乳桿菌、嗜熱鏈球菌、德氏乳桿菌保加利亞亞種、青春雙歧桿菌、長(zhǎng)雙歧桿菌、、短 雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、鼠李糖乳桿菌、干酪乳桿菌、植物乳桿菌和動(dòng)物雙歧桿菌這12種 乳酸菌在含有瓊脂、明膠、魚(yú)膠粉、果凍粉的營(yíng)養(yǎng)載體上，在特定的各種材質(zhì)、各種形 狀、各種大小的密閉的無(wú)菌培養(yǎng)容器中直接進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)一定時(shí)間后，經(jīng)過(guò)包裝即可作 為產(chǎn)品。
培養(yǎng)方法步驟如下-
(1) 首先分別培養(yǎng)試管斜面菌種，斜面菌種培養(yǎng)基中加入瓊脂，使瓊脂濃度達(dá)到 2%，然后培養(yǎng)16-72小時(shí)，然后接入三角瓶液體培養(yǎng)基中進(jìn)行分別培養(yǎng)，20'C-45°C 培養(yǎng)8-72小時(shí)，逐級(jí)進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，然后再分別進(jìn)行發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)，2(TC-45'C培 養(yǎng)8-72小時(shí)，使發(fā)酵液中益生菌總數(shù)達(dá)到l.O x104-L0xl07mL，此培養(yǎng)液作為種子液；
三角瓶液體培養(yǎng)基與發(fā)酵罐培養(yǎng)基制作方法為將蛋白胨0. 1-100.0克、濃度 為2. 0%-25%的南瓜汁5-200mL、濃度為2. 0%-25%的西紅柿汁5-200mL、濃度為2. 0%-25% 的胡蘿卜汁5-200mL、乳清粉1.0-5.0克、大豆浸汁2. 0%-25%、葡萄糖1. 0-15. 0克、 乳糖l.O-15.0克、牛肉膏0. 1-IO.O克、酵母膏0. 1-10.0克、檸檬酸鈉0. 1-10.0克、 醋酸鈉0. 1-5. 5克、磷酸氫二鉀0. 1-2. 5克、硫酸鎂0. 01-0. 75克，食用香精0. 001-5 克、色素O. 001-5克，加水定容至1000毫升，pH5. 0-7. 0， 105'C滅菌15分鐘。
(2) 將培養(yǎng)成熟的種子液按濃度為0. 01-20. 0%單獨(dú)或混合接入制備好的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體 中，徹底混合均勻，然后將接種的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體在38'C-55'C注入到密閉的無(wú)菌培養(yǎng)容器中， 然后冷卻至38'C以下凝固，再置于2(TC-45'C下培養(yǎng)10-120小時(shí)，觀察待長(zhǎng)出肉眼可見(jiàn)的菌 落，進(jìn)行檢驗(yàn)分析，包裝成產(chǎn)品。
固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體培養(yǎng)方法，其特征在于所述的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體制作方法為將瓊脂 0. 1-100. 0克(可用明膠0. 1-100. 0克或魚(yú)膠粉0. 1-100. 0克或果凍粉0. 1-100. 0克替代)、 白砂糖1.0-200. 0克、峰蜜1.0-200克、蛋白胨0. 1-10.0克、濃度為2. 0%_25%的南瓜 汁5-200mL、濃度為2. 0%-25%的西紅柿汁5-200mL、濃度為2. 0%-25%的胡蘿卜汁 5-200mL、乳清粉1. 0-5. 0克、濃度為2. 0%_25%的大豆浸汁5-200mL、葡萄糖1. 0-15. 0 克、乳糖1.0-15.0克、牛肉膏0. 1-10.0克、酵母膏0. 1-10.0克、檸檬酸鈉0. 1-10.0 克、醋酸鈉0. 1-5. 5克、磷酸氫二鉀0. 1-2. 5克、硫酸鎂0. 01-0. 75克、食用香精0. 001-5 克、色素0.001-5克，加水定容至1000毫升，pH5.0-7.0， 105'C火菌15分鐘，冷卻 至38°C-55t:備用。本發(fā)明生產(chǎn)的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體益生菌不需要分離凍干，可直接作為益生菌服用，常溫下
可長(zhǎng)期保存，活力不但不降低且有所升高。比液態(tài)培養(yǎng)益生菌的產(chǎn)品及益生菌凍干粉有諸多
優(yōu)點(diǎn)和較高的活力，其貨架壽命顯著的延長(zhǎng)。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例一
1、首先培養(yǎng)嗜酸乳桿菌試管斜面菌種，斜面菌種培養(yǎng)基中加入瓊脂，使瓊脂濃度
達(dá)到2%，培養(yǎng)48小時(shí)，然后將試管斜面菌種接入三角瓶液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，37 'C培養(yǎng)24小時(shí)，再逐級(jí)進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，進(jìn)行100L發(fā)酵罐培養(yǎng)，使發(fā)酵液中益生菌總數(shù) 達(dá)到l.O x104-1.0xl0VmL，此培養(yǎng)液作為種子液。
液體二角瓶及大罐培養(yǎng)基制備方法蛋白胨5.0克、濃度為15%的南瓜汁100mL、 濃度為15%的西紅柿汁100mL、濃度為15%的胡蘿卜汁100mL、乳清粉1.5克、濃度為 10%的大豆浸汁lOOmL、葡萄糖2. 0克、乳糖1.5克、牛肉膏2.0克、酵母膏2.0克、 檸檬酸鈉1. 5克、醋酸鈉1. 5克、磷酸氫二鉀0. 5克、硫酸鎂0. 1克，加水定容至1000 毫升，pH6. 5， 105。C滅菌15分鐘。
2、 將培養(yǎng)成熟的種子液按濃度為3.oy。接入制備好的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體中，徹底混合均勻。
然后將接種的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體在44'C注入到50mL的聚乙烯塑料小盒中，密封，然后冷卻至37 'C凝固，再置于37'C培養(yǎng)室中，培養(yǎng)48小時(shí)。
固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體制備瓊脂8. 0克、白砂糖80. 0克、蜂蜜20. 0克、濃度為15%的南 瓜汁lOOmL、濃度為15%的西紅柿汁lOOmL、濃度為15%的胡蘿卜汁100mL、乳清粉1.5 克、濃度為10%的大豆浸汁100mL、葡萄糖2. 0克、乳糖1.5克、牛肉膏2.0克、酵母 膏2.0克、檸檬酸鈉1.5克、醋酸鈉1.5克、磷酸氫二鉀0.5克、硫酸鎂0. 1克，加 水定容至1000毫升，p服.5， 105。C滅菌15分鐘。冷卻至44。C,置于44。C恒溫水浴中
備用o
3、 觀察待長(zhǎng)出肉眼可見(jiàn)的菌落，進(jìn)行檢驗(yàn)分析，包裝成產(chǎn)品。 實(shí)施例二-
1、首先培養(yǎng)干酪乳桿菌試管斜面菌種，斜面菌種培養(yǎng)基中加入瓊脂，使瓊脂濃度 達(dá)到2%，培養(yǎng)48小時(shí)，然后將試管斜面菌種接入三角瓶液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，37 。C培養(yǎng)24小時(shí)，再逐級(jí)進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，進(jìn)行100L發(fā)酵罐培養(yǎng)，使發(fā)酵液中益生菌總數(shù) 達(dá)到l.O x104-1.0xl07mL，此培養(yǎng)液作為種子液。
液體三角瓶及發(fā)酵罐培養(yǎng)基配方蛋白胨5.0克、濃度為15%的南瓜汁lOOmL、濃度為15%的西紅柿汁lOOmL、濃度為15%的胡蘿卜汁lOOmL、乳清粉1.5克、濃度為10% 的大豆浸汁100mL、葡萄糖2.0克、乳糖1.5克、牛肉膏2.0克、酵母膏2.0克、檸檬 酸鈉1. 5克、醋酸鈉1. 5克、磷酸氫二鉀0. 5克、硫酸鎂0. 1克，加水定容至1000毫 升，pH6. 5， 105'C滅菌15分鐘。
2、 將培養(yǎng)成熟的種子液按濃度為3.0%接入制備好的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體中，徹底混合均勻。 然后將接種的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體在44'C注入到50mL的聚乙烯塑料小盒中，密封，然后冷卻至37 'C凝固，再置于37'C培養(yǎng)室中，培養(yǎng)48小時(shí)。
固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體配方果凍粉35.0克、白砂糖80.0克、蜂蜜20.0克、蛋白胨5.0 克、濃度為15%的南瓜汁]OOmL、濃度為15%的西紅柿汁lOOmL、濃度為15%的胡蘿卜汁 lOOmL、乳清粉1. 5克、濃度為10%的大豆浸汁100mL、葡萄糖2. 0克、乳糖1. 5克、 牛肉膏2.0克、酵母膏2.0克、檸檬酸鈉1.5克、醋酸鈉1.5克、磷酸氫二鉀0.5克、 硫酸鎂O. l克，加水定容至1000毫升，p服.5， 105'C滅菌15分鐘。冷卻至44'C，置 于44'C恒溫水浴中備用。
3、 將培養(yǎng)成熟的種子接入制備好的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體中，徹底混合均勻。然后將接種的 固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體在44'C注入到50mL的聚乙烯塑料小盒中，密封，然后冷卻至37'C凝固，再置 于37。C培養(yǎng)室中，培養(yǎng)48小時(shí)。
3、觀察待長(zhǎng)出肉眼可見(jiàn)的菌落，進(jìn)行檢驗(yàn)分析，包裝成產(chǎn)品。 實(shí)施例三-
1、 首先培養(yǎng)鼠李糖乳桿菌試管斜面菌種，斜面菌種培養(yǎng)基中加入瓊脂，使瓊脂濃 度達(dá)到2%，培養(yǎng)48小時(shí)，然后將試管斜面菌種接入三角瓶液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)， 37X:培養(yǎng)24小時(shí)，再逐級(jí)進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，進(jìn)行100L發(fā)酵罐培養(yǎng)，使發(fā)酵液中益生菌 總數(shù)達(dá)到l.O x104-1.0xl07mL，此培養(yǎng)液作為種子液。
液體三角瓶及發(fā)酵罐培養(yǎng)基配方蛋白胨5. 0克、濃度為15%的南瓜汁100mL、濃 度為15%的西紅柿汁100mL、濃度為15%的胡蘿卜汁100mL、乳清粉1.5克、濃度為10% 的大豆浸汁100mL、葡萄糖2.0克、乳糖1.5克、牛肉膏2.0克、酵母膏2.0克、檸檬 酸鈉1. 5克、醋酸鈉1. 5克、磷酸氫二鉀0. 5克、硫酸鎂0. 1克，加水定容至1000毫 升，pH6.5， 105"C滅菌15分鐘。
2、 將培養(yǎng)成熟的種了液按濃度為3.0%接入制備好的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體中，徹底混合均勻。 然后將接種的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體在44。C注入到50mL的聚乙烯塑料小盒中，密封，然后冷卻至37 。C凝同，再置于37。C培養(yǎng)室中，培養(yǎng)48小時(shí)。
固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體配方魚(yú)膠粉70.0克、瓊脂5.0克、白砂糖80.0克、蜂蜜20.0克、
6蛋白胨5. 0克、濃度為15%的南瓜汁100mL、濃度為15%的西紅柿汁lOOmL、濃度為15%
的胡蘿卜汁100mL、乳清粉1. 5克、濃度為10%的大豆浸汁100mL、葡萄糖2. 0克、乳
糖1.5克、牛肉膏2.0克、酵母膏2.0克、檸檬酸鈉1.5克、醋酸鈉1.5克、磷酸氫
二鉀O. 5克、硫酸鎂O. l克，加水定容至1000毫升，p服.5， 105。C滅菌15分鐘。冷
卻至44'C，置于44"恒溫水浴中備用。
3、觀察待長(zhǎng)出肉眼可見(jiàn)的菌落，進(jìn)行檢驗(yàn)分析，包裝成產(chǎn)品。
實(shí)施例四
兩歧雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、嗜熱鏈球菌、德氏乳桿菌保加利亞亞種、青春雙歧桿菌、 長(zhǎng)雙歧桿菌、鼠李糖乳桿菌、短雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、植物乳桿菌、動(dòng)物雙歧桿菌的培 養(yǎng)方法
1、 首先分別培養(yǎng)試管斜面菌種，斜面菌種培養(yǎng)基中加入瓊脂，使瓊脂濃度達(dá)到
2%，然后培養(yǎng)16-72小時(shí)，然后接入三角瓶液體培養(yǎng)基中進(jìn)行分別培養(yǎng)，20°C-45°C 培養(yǎng)8-72小時(shí)，再逐級(jí)進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，然后再分別進(jìn)行發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)，20°C-45°C 培養(yǎng)8-72小時(shí)，使發(fā)酵液中益生菌總數(shù)達(dá)到l.O x104-1.0xl07mL，此培養(yǎng)液作為種子液； 液體三角瓶及發(fā)酵罐培養(yǎng)基配方蛋白胨5.0克、濃度為15%的南瓜汁100mL、濃 度為15%的西紅柿汁100mL、濃度為15%的胡蘿卜汁100mL、乳清粉1. 5克、濃度為10% 的大豆浸汁100mL、葡萄糖2.0克、乳糖1.5克、牛肉膏2.0克、酵母膏2.0克、檸檬 酸鈉1. 5克、醋酸鈉1. 5克、磷酸氫二鉀0. 5克、硫酸鎂0. 1克，加水定容至1000毫 升，pH6.5， 105'C滅菌15分鐘。
2、 將培養(yǎng)成熟的種子液按等比例混合，按濃度為3.0%接入制備好的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體中， 徹底混合均勻。然后將接種的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體在44。C注入到50mL的聚乙烯塑料小盒中，密封， 然后冷卻至37r凝固，再置于37'C培養(yǎng)室中，培養(yǎng)48小時(shí)。
固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體配方魚(yú)膠粉70.0克、瓊脂5.0克、白砂糖80.0克、蜂蜜20.0克、 蛋白胨5.0克、濃度為15%的南瓜汁100mL、濃度為15%的西紅柿汁lOOraL、濃度為15% 的胡蘿卜汁lOOmL、乳清粉1.5克、濃度為10%的大豆浸汁100mL、葡萄糖2.0克、乳 糖1.5克、牛肉膏2.0克、酵母膏2.0克、檸檬酸鈉1.5克、醋酸鈉1.5克、磷酸氫 二鉀O. 5克、硫酸鎂O. l克，加水定容至IOOO毫升，p服.5， 105。C滅菌15分鐘。冷 卻至44X:，置于44'C恒溫水浴中備用。
3、觀察待長(zhǎng)出肉眼可見(jiàn)的菌落，進(jìn)行檢驗(yàn)分析，包裝成產(chǎn)品。
權(quán)利要求
1、一種腸道益生菌固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體培養(yǎng)方法其特征在于步驟如下(1)首先分別培養(yǎng)試管斜面菌種，斜面菌種培養(yǎng)基中加入瓊脂，使瓊脂濃度達(dá)到2％，然后培養(yǎng)16-72小時(shí)，然后接入三角瓶液體培養(yǎng)基中進(jìn)行分別培養(yǎng)，20℃-45℃培養(yǎng)8-72小時(shí)，再逐級(jí)進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，然后再分別進(jìn)行發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)，20℃-45℃培養(yǎng)8-72小時(shí)，使發(fā)酵液中益生菌總數(shù)達(dá)到1.0×104-1.0×109/mL，此培養(yǎng)液作為種子液；(2)將培養(yǎng)成熟的種子液按濃度為0.01-20.0％接入制備好的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體中，徹底混合均勻，然后將接種的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體在38℃-55℃注入到密閉的無(wú)菌培養(yǎng)容器中，冷卻至38℃以下凝固，再置于20℃-45℃下培養(yǎng)10-120小時(shí)，觀察待長(zhǎng)出肉眼可見(jiàn)的菌落，進(jìn)行檢驗(yàn)分析，包裝成產(chǎn)品。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種腸道益生菌固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體培養(yǎng)方法，其特征在于所述的 三角瓶液體培養(yǎng)基與發(fā)酵罐培養(yǎng)基制作方法為將蛋白胨0.1-100.0克、濃度為 2. 0%-25%的南瓜汁5-200mL、濃度為2. 0%-25%的西紅柿汁5-200mL、濃度為2. 0%-25% 的胡蘿卜汁5-200raL、乳清粉1. 0-5. 0克、大豆浸汁2. 0%-25%、葡萄糖1. 0-15. 0克、 乳糖1.0-15. 0克、牛肉膏0. 1-10. 0克、酵母膏0. 1-10. 0克、檸檬酸鈉0. 1-10.0克、 醋酸鈉0. 1-5. 5克、磷酸氫二鉀0. 1-2. 5克、硫酸鎂0. 01-0. 75克，食用香精0. 001-5 克、色素O. 001-5克，加水定容至1000毫升，pH5. 0-7.0， 105。C滅菌15分鐘。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種腸道益生菌固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體培養(yǎng)方法，其特征在于所述的 固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體制作方法為將瓊脂0. 1-100.0克、白砂糖1.0-200. 0克、蜂蜜1.0-200.0 克、蛋白胨O. 1-10. 0克、濃度為2.0%-25%的南瓜汁5-200mL、濃度為2.0%-25%的西紅 柿汁5-200mL、濃度為2. 0%-25%的胡蘿卜汁5-200mU乳清粉1.0-5.0克、濃度為 2. 0%-25%的大豆浸汁5-200mL、葡萄糖1.0-15.0克、乳糖1. 0-15. 0克、牛肉膏0. 1-10.0 克、酵母膏0. 1-10. 0克、檸檬酸鈉0. 1-10. 0克、醋酸鈉0. 1-5. 5克、磷酸氫二鉀0.卜2. 5 克、硫酸鎂0.01-0. 75克、食用香精0.001-5克、色素0.001-5克，加水定容至1000 毫升，pH5.0-7.0， 105。C滅菌15分鐘，冷卻至38°055°。備用。
4、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體制作方法，其特征在于所述的瓊脂0. 1-100. 0 克可用明膠0. 1-100. 0克或魚(yú)膠粉0. 1—100. 0克或果凍粉0. 1-100. 0克替代。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)的是一種腸道益生菌固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體培養(yǎng)方法是將益生菌用發(fā)酵容器在適宜的培養(yǎng)基中進(jìn)行分別培養(yǎng)或混合培養(yǎng)一段時(shí)間，發(fā)酵液中益生菌總數(shù)達(dá)到1.0×10⁴-1.0×10⁹/mL，此培養(yǎng)液作為種子，然后將種子接入一種適宜的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體中，可分別接種單獨(dú)培養(yǎng)，亦可多菌種混合接種培養(yǎng)，混合均勻，然后將接種的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體在一定溫度范圍內(nèi)注入密閉的無(wú)菌培養(yǎng)容器中，然后冷卻凝固，置于20℃-45℃下培養(yǎng)一段時(shí)間即可。本發(fā)明生產(chǎn)的固態(tài)營(yíng)養(yǎng)載體益生菌不需要分離凍干，可直接作為益生菌服用，常溫下可長(zhǎng)期保存，活力不但不降低且有所升高。比液態(tài)培養(yǎng)益生菌的產(chǎn)品及益生菌凍干粉有諸多優(yōu)點(diǎn)和較高的活力，其貨架壽命顯著的延長(zhǎng)。
文檔編號(hào)C12R1/01GK101671637SQ200910072749
公開(kāi)日2010年3月17日 申請(qǐng)日期2009年8月28日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月28日
發(fā)明者林楓翔, 梁金鐘 申請(qǐng)人:哈爾濱美華生物技術(shù)股份有限公司