專利名稱::一種發(fā)酵生產(chǎn)阿魏菇多糖及其口服液的方法
技術(shù)領(lǐng)域:
:本發(fā)明涉及一種發(fā)酵生產(chǎn)阿魏菇多糖及其口服液的方法,具體地涉及一種基于阿魏菇的生物學特性、通過液體深層發(fā)酵實現(xiàn)阿魏菇多糖及其口服液工業(yè)化生產(chǎn)的方法。
背景技術(shù):
:阿魏菇(PleurotusferulaeLanzi)又名阿魏側(cè)耳、阿魏蘑菇、白靈菇,是南歐、北非、中亞內(nèi)陸地區(qū)春末夏初發(fā)生的品質(zhì)極為優(yōu)質(zhì)的一種大型肉質(zhì)珍稀食用真菌,是近幾年發(fā)展起來的食用菌新秀之一。我國野生阿魏菇僅分布于新疆荒漠地區(qū)(木壘、托里、阿勒泰、伊犁、塔城等地)的阿魏灘上,因其生長于傘形花科植物阿魏(Ferula,asafoetide)的根上而得名。阿魏菇集食用、藥用于一身,營養(yǎng)成份全面豐富且含量又高,被學者美譽為當今食用菌皇后,在食用菌族中獨秀一枝,與另一種高檔藥食兩用菌_羊肚菌并稱為姊妹菌。阿魏菇生物活性有效組分食藥用真菌多糖的含量很高,其子實體多糖和液態(tài)深層發(fā)酵培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的真菌多糖入藥有消積殺蟲的作用,對腹部腫痛、腹部腫塊、癌癥等均有顯著療效。目前,阿魏菇多糖的藥用價值及其應用已為世界各國重視。近年來,國內(nèi)的研究重點已經(jīng)由阿魏菇的栽培及菌種的馴化轉(zhuǎn)移到其多糖的深層發(fā)酵、提取、分離純化及活性功能等方面。傳統(tǒng)的阿魏菇多糖的生產(chǎn)方法是從阿魏菇子實體中提取,但該法生產(chǎn)受子實體生產(chǎn)的季節(jié)性限制且生產(chǎn)成本高,而經(jīng)液態(tài)深層發(fā)酵培養(yǎng)獲得的阿魏菇菌絲體和發(fā)酵液,其營養(yǎng)價值和有效成分與子實體相當,并且液態(tài)深層發(fā)酵法具有生產(chǎn)周期短、生長條件易控制、產(chǎn)量高等優(yōu)點,相對傳統(tǒng)方法而言更易實現(xiàn)大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化、周年化生產(chǎn),且降低了生產(chǎn)成本。阿魏菇多糖的提取要根據(jù)多糖的存在形式及提取部位不同而采用不同的提取方法。從近年來報道的阿魏菇多糖酸提、堿提、熱水浸提的實驗結(jié)果來看,熱水浸提法時間長、效率低,酸堿法又極易導致多糖的立體結(jié)構(gòu)破壞及生物活性改變。而采用有關(guān)酶類對阿魏菇子實體和菌絲體進行預處理,或者借助超聲波、微波等輔助手段來提高其多糖的提取率,將會有利于其糖類物質(zhì)的溶出和分離,還降低了生產(chǎn)成本。從近幾年的研究成果綜合來看,無論是通過何種方法制備的阿魏菇多糖都含有半乳糖和葡萄糖,但分子量差別很大,試驗原料不同、提取方法不同,得到的真菌多糖種類也不盡相同。近年來阿魏菇多糖的活性功能主要集中在免疫、抗氧化和抗腫瘤等方面的研究,研究發(fā)現(xiàn),阿魏菇子實體粗多糖具有非特異性免疫功能和特異性細胞免疫功能,其菌絲體水溶性粗多糖和子實體水溶性純多糖免疫活性不明顯;熱提阿魏菇多糖對0H—和02均能有效清除,且對連苯三酚自氧化速率有明顯的抑制作用,說明具有較強的抗氧化作用;阿魏菇水提多糖對各類型腫瘤細胞株的生長及蛋白質(zhì)合成均有明顯抑制作用,且表現(xiàn)出劑量依賴關(guān)系。阿魏菇是深受消費者歡迎的食藥用真菌,對其真菌多糖的研究及開發(fā)是今后阿魏菇研究和應用的重點。液態(tài)深層發(fā)酵是獲取大量阿魏菇活性多糖的有效途徑,提高阿魏菇多糖的提取率是進行多糖產(chǎn)品開發(fā)首要解決的關(guān)鍵問題。因此,應基于阿魏菇的生物學特性,更加深入地研究阿魏菇深層發(fā)酵的工藝條件,建立發(fā)酵過程動力學模型應,并結(jié)合阿魏菇細胞結(jié)構(gòu)組成的特點,對阿魏菇多糖的提取方式和工藝進行進一步的研究,盡可能地提高多糖得率,減少多糖破壞。本申請的發(fā)明人經(jīng)過近幾年對發(fā)酵法生產(chǎn)阿魏菇多糖工藝的潛心研究和對阿魏菇多糖口服液生產(chǎn)經(jīng)驗的全面總結(jié),設(shè)計了一種基于阿魏菇生物學特性、通過液體深層發(fā)酵實現(xiàn)阿魏菇多糖及其口服液生產(chǎn)的方法,并在新疆離子束生物工程中心(有限公司)得到了實踐驗證,結(jié)果表明該方法是一種適用于阿魏菇多糖及其口服液工業(yè)化生產(chǎn)的新方法。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的一個方面提供基于阿魏菇生物學特性的罐批發(fā)酵方法,該方法包括母種的斜面培養(yǎng)、原種的種瓶培養(yǎng)、種液的150L-1500L種子罐擴大培養(yǎng)和10m3發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)。優(yōu)選地,在阿魏菇的罐批發(fā)酵的步驟中還包括通過pH變化判斷阿魏菇的生理周期和以pH驟降時間作為發(fā)酵終點結(jié)束的判據(jù),以此為判據(jù)結(jié)束發(fā)酵,阿魏菇菌絲體多糖的產(chǎn)量達到900mg/L的最高水平。其中,培養(yǎng)基是食用菌深層發(fā)酵過程中的關(guān)鍵因素之一,由于深層培養(yǎng)是在液體中培養(yǎng)菌絲體,培養(yǎng)液是菌絲體賴以生存的營養(yǎng)條件和進行物質(zhì)、能量交換的場所,培養(yǎng)基的組成對菌體生長繁殖、產(chǎn)物的生物合成、產(chǎn)品的分離純化、乃至產(chǎn)品的質(zhì)量和產(chǎn)量都有重要的影響。大量研究表明,碳氮比對阿魏菇的生長和產(chǎn)物形成有很大的影響,碳氮比不但會妨礙菌絲按比例吸收營養(yǎng)物;氮不足表現(xiàn)為菌絲繁殖慢,碳不足表現(xiàn)為菌體易衰老和自溶;同樣速效性和遲效性的碳源或氮源,以及有機的和無機的氮源的比例也會影響其菌絲對營養(yǎng)物的均勻吸收。pH值是食用菌菌絲體在一定環(huán)境條件下代謝活動的綜合指標,它涉及各種酶系的活力,是一項重要的發(fā)酵參數(shù),它對菌絲的生長和多糖的積累有很大的影響。阿魏菇以偏酸性環(huán)境中生長較快,在發(fā)酵過程中培養(yǎng)液逐漸變酸,在配制培養(yǎng)液時,一般接近6.5左右,發(fā)酵幾天后即達到菌絲體的最適pH環(huán)境。溫度是影響食用菌生長和產(chǎn)物合成的重要因素之一,溫度的變化對發(fā)酵過程可產(chǎn)生兩方面的影響一方面是影響各種酶反應的速率和蛋白質(zhì)的性質(zhì),另一方面是影響發(fā)酵液的物理性質(zhì);不同的菌株及同一菌株在不同的代謝階段,其適宜的發(fā)酵溫度也不同,因此選擇控制適宜的發(fā)酵溫度可以促使菌絲體增長。接種量是影響食用菌發(fā)酵周期的重要因素。為了在盡量短的發(fā)酵時間內(nèi)獲得所需的菌絲體,發(fā)酵液接種一定量的壯年菌種是必需的,適宜的接種量可以縮短發(fā)酵階段的菌體生長的延滯期,從而縮短發(fā)酵周期,最終提高發(fā)酵產(chǎn)物的生產(chǎn)強度。研究發(fā)現(xiàn),阿魏菇每一級接種量為10%15%時,菌絲生長較快,菌球小,菌液澄清,但以10%接種量菌絲產(chǎn)量最尚。攪拌轉(zhuǎn)速也是發(fā)酵過程中較重要的參數(shù)之一,改變攪拌轉(zhuǎn)速可改變供氧條件使菌體處于最佳溶解氧值,并使菌絲體處于均勻懸浮狀態(tài)。大量實驗表明,阿魏菇液體發(fā)酵轉(zhuǎn)速以120r/min160r/min為宜,生成的菌球均勻而稠密;低于此轉(zhuǎn)速,生長較緩慢,菌絲球直徑大小不一;進一步提高轉(zhuǎn)速,雖菌絲球直徑變小,發(fā)酵周期縮短,但最終菌絲體干重無顯者差升。本發(fā)明的另一個方面提供基于阿魏菇多糖理化特性和阿魏菇菌體細胞結(jié)構(gòu)組成特點的后提取方法,該方法包括包括發(fā)酵產(chǎn)物的預處理、阿魏菇多糖的連續(xù)提取及濃縮、低溫醇析、兩步脫溶的步驟。優(yōu)選地,在阿魏菇多糖后提取的步驟中還包括超聲波輔助兩次連續(xù)提取和兩步脫溶的步驟,兩次連續(xù)提取后阿魏菇多糖的提取率在95%以上,兩步脫溶后阿魏菇多糖的溶劑殘留量可控制在50ppm以內(nèi)。本發(fā)明的另一個方面還提供基于阿魏菇多糖營養(yǎng)保健功能的口服液生產(chǎn)方法,該方法包括配料、勻質(zhì)、灌封、殺菌、抽檢及包裝的步驟。優(yōu)選地,在阿魏菇多糖口服液生產(chǎn)的步驟中還包括高壓勻質(zhì)的步驟,高壓勻質(zhì)后灌封生產(chǎn)的阿魏菇多糖口服液呈淺棕黃色、澄清、無分層、無沉淀。該方法已經(jīng)在新疆離子束生物工程中心(有限公司)得到了實踐驗證,結(jié)果表明該方法是一種適用于阿魏菇多糖及其口服液工業(yè)化生產(chǎn)的新方法。具體實施例方式實施例1、基于阿魏菇生物學特性的罐批發(fā)酵方法基于阿魏菇生物學特性的罐批發(fā)酵方法包括母種的斜面培養(yǎng)、原種的種瓶培養(yǎng)、種液的150L-1500L種子罐擴大培養(yǎng)和10m3發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)幾個階段。經(jīng)過種瓶恒溫培養(yǎng)菌絲體長滿種瓶后,用無菌接種鏟將菌絲塊攪碎并瓶于裝有1500mL無菌水的2000mL三角瓶中,加入適量廣譜抗菌劑后接入一級種子罐,待菌絲體生物量最大化后,進行移種逐級擴培,發(fā)酵培養(yǎng)。(1)、母種的斜面培養(yǎng)用無菌接種鉤刮取少量阿魏菇菌絲體,接種到PDA斜面培養(yǎng)基上,在28°C培養(yǎng)7d;(2)、原種的種瓶培養(yǎng)用無菌接種鉤挑取一定量的斜面菌絲塊,接種到裝有350ml種瓶培養(yǎng)基的500ml廣口瓶中,28°C恒溫靜置培養(yǎng)15d,其中,種瓶培養(yǎng)基的成分為(w/v)木屑粉30%、麩皮粉7%、白砂糖0.5%、石膏0.5%、石灰2%,其余為無菌水;(3)、種液的150L-1500L種子罐擴大培養(yǎng)菌絲體長滿種瓶后,用無菌接種鏟將菌絲塊攪碎并瓶于裝有1500mL無菌水的2000mL三角瓶中,然后加入0.2%的土霉素等廣譜抗菌素抑止雜菌污染,按120的接種量接種于裝有100L種液培養(yǎng)基一的150L氣升式發(fā)酵罐中,通氣充分攪拌培養(yǎng),28°C發(fā)酵96小時;接著按10%的接種量接入裝有1000L種液培養(yǎng)基二的1500L攪拌釜式發(fā)酵罐中擴培,25°C恒溫培養(yǎng)96h;其中,150L、1500L攪拌釜式發(fā)酵罐的攪拌轉(zhuǎn)速分別為200r/min和160r/min、空氣流量分別為12m3/h和120m3/h,種液培養(yǎng)基一的成分為(w/v)小麥粉1.5%、蔗糖1.0%、酵母膏0.4%、麩皮(煮汁)1.5%、KH2P040.2%,MgS040.15%,種液培養(yǎng)基二的成分為(w/v):小麥粉0.7%、蔗糖0.7%、酵母膏0.28%、麩皮(煮汁)1.0%、KH2P040.2%,MgS040.15%,pH值滅菌前均自然,121°C滅菌30min。(4)、10m3發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)將經(jīng)過擴培的發(fā)酵液按110的比例接種于裝有7m3發(fā)酵培養(yǎng)基的10m3攪拌釜式發(fā)酵罐中,28°C恒溫發(fā)酵120h后結(jié)束發(fā)酵;其中,攪拌轉(zhuǎn)速為120r/min、空氣流量為840m3/h,發(fā)酵培養(yǎng)基的成分為(w/v):小麥粉0.5%、蔗糖0.5%、酵母膏0.2%、麩皮(煮汁)0.7%,KH2P040.2%,MgS040.15%,pH值滅菌前自然,121°C滅菌30min。實施例2、基于阿魏菇多糖理化特性和阿魏菇菌體細胞結(jié)構(gòu)組成特點的后提取方法基于阿魏菇多糖理化特性和阿魏菇菌體細胞結(jié)構(gòu)組成特點的后提取方法包括發(fā)酵產(chǎn)物的預處理、阿魏菇多糖的連續(xù)提取及濃縮、低溫醇析、兩步脫溶幾個階段。經(jīng)過罐批發(fā)酵得到的發(fā)酵產(chǎn)物經(jīng)過離心脫水、球磨破壁等預處理后,打入提取罐,兩次充分連續(xù)提取后經(jīng)過減壓濃縮、低溫醇析、兩步脫溶等處理后,得到阿魏菇菌絲體粗多糖,以備阿魏菇多糖口服液等深加工產(chǎn)品添加之用。(1)、發(fā)酵產(chǎn)物的預處理將經(jīng)過罐批發(fā)酵獲得的發(fā)酵產(chǎn)物50L裝入200目的過濾袋中置于SS800三足式離心機中,在1200r/min的轉(zhuǎn)速下離心30min,再按料液比11.5加入無水乙醇,在上述相同工作轉(zhuǎn)速下離心30min,收集干菌體,然后將得到的干菌體50Kg平均裝入4個25L球磨罐中置于QM-2SP100-GL球磨機中,在700r/min的轉(zhuǎn)速下破壁30min,收集破碎菌體。(2)、阿魏菇多糖的連續(xù)提取及濃縮將經(jīng)過預處理的發(fā)酵產(chǎn)物130Kg按料液比15加入650L經(jīng)過去離子處理的自來水平均打入700L1、2號提取罐中,經(jīng)過功率6KW的超聲波處理5min后,在100°C的提取溫度、50r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌提取60min,然后將1號罐中的提取液放入暫存罐中,關(guān)閉閥門再將2號提取罐的提取液打入1號提取罐中,暫存罐中的提取液打入2號提取罐中,在上述相同的提取條件下攪拌提取60min,接著將提取液放入暫存罐中,開啟減壓閥門在0.08Mpa的負壓下提取液被倒吸入2.5m2刮膜式旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中在95°C、200r/min減壓濃縮,蒸發(fā)的水蒸氣經(jīng)過10m2冷凝器在0°C液化回收到1.5m3溶劑回收罐中,得到的濃縮物打入醇析罐中結(jié)晶。(3)、低溫醇析將得到的濃縮物按料液比15打入裝有150L無水乙醇的200L醇析罐中在_4°C結(jié)晶12h,然后放入12-15個孔徑38ym的尼龍袋中掛于300L存儲罐中過濾24h,將得到的結(jié)晶物倒入30L不銹鋼桶中以備后續(xù)脫溶。(4)、兩步脫溶稱量30Kg結(jié)晶物倒入脫溶鍋中,在60°C的脫溶溫度、0.08MPa工作壓力下減壓脫溶2h;然后從脫溶鍋底部通入N2,在上述相同的條件下減壓脫溶1.5h。最后,收集阿魏菇菌絲體粗多糖,以備阿魏菇多糖口服液等深加工產(chǎn)品添加之用。實施例3、基于阿魏菇多糖營養(yǎng)保健功能的口服液生產(chǎn)方法基于阿魏菇多糖營養(yǎng)保健功能的口服液生產(chǎn)方法包括配料、高壓勻質(zhì)、脫氣灌封、殺菌、抽檢及包裝幾個階段,經(jīng)過上述操作生產(chǎn)的阿魏菇多糖口服液呈淺棕黃色、澄清、清涼爽口、酸甜適中、無分層、無沉淀,阿魏菇多糖含量>1.0g/L、總酸(以檸檬酸計)<1.0%、pH值4.20,細菌數(shù)<lOOOcfu/g、霉菌數(shù)<100cfu/g、大腸菌群、致病菌未檢出。(1)、調(diào)配按照正交優(yōu)化獲得的阿魏菇多糖口服液配方稱量配料,然后將原料邊攪拌邊加入50°C的蒸餾水中進行調(diào)配,其中,口服液配方為(w/v):5.0g/L的阿魏菇多糖溶液20%、甜味劑蔗糖12%、酸味劑(檸檬酸、檸檬酸鈉質(zhì)量比101)0.1%、穩(wěn)定劑(海藻酸鈉、CMC-Na(2)、高壓勻質(zhì)將調(diào)配好的漿液加入穩(wěn)定劑后均質(zhì),均質(zhì)壓力為1520MPa。(3)、脫氣灌封均質(zhì)后,將料液進行脫氣處理,適宜條件為0.05MPa脫氣lOmin,脫氣后,按10mL/瓶的量在全自動灌裝生產(chǎn)線上灌裝、壓蓋密封。(4)、殺菌采用高溫滅菌,滅菌條件115°C滅菌30min。(5)、抽檢及包裝冷卻后,對產(chǎn)品進行隨機抽樣進行理化指標(見表1)、微生物指標檢驗,最后,對合格品進行貼簽、裝盒、裝箱入庫。表1理化指標<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>通過上述具體的實施例,更容易理解本發(fā)明。上述實施例只是舉例性的描述,而不應當被理解為用來限制本發(fā)明的范圍。質(zhì)量比21)0.2%,Vc0.02%。權(quán)利要求一種基于阿魏菇生物學特性的罐批發(fā)酵方法,其特征在于母種的斜面培養(yǎng)用無菌接種鉤刮取少量阿魏菇菌絲體,接種到PDA斜面培養(yǎng)基上,在28℃培養(yǎng)7d;原種的種瓶培養(yǎng)用無菌接種鉤挑取一定量的斜面菌絲塊,接種到裝有350ml種瓶培養(yǎng)基的500ml廣口瓶中,28℃恒溫靜置培養(yǎng)15d,其中,種瓶培養(yǎng)基的成分為(w/v)木屑粉30%、麩皮粉7%、白砂糖0.5%、石膏0.5%、石灰2%,其余為無菌水;種液的150L-1500L種子罐擴大培養(yǎng)菌絲體長滿種瓶后,用無菌接種鏟將菌絲塊攪碎并瓶于裝有1500mL無菌水的2000mL三角瓶中,然后加入0.2%的土霉素等廣譜抗菌素抑止雜菌污染,按1∶20的接種量接種于裝有100L種液培養(yǎng)基一的150L氣升式發(fā)酵罐中,通氣充分攪拌培養(yǎng),28℃發(fā)酵96小時,接著按10%的接種量接入裝有1000L種液培養(yǎng)基二的1500L攪拌釜式發(fā)酵罐中擴培,25℃恒溫培養(yǎng)96h,其中,150L、1500L攪拌釜式發(fā)酵罐的攪拌轉(zhuǎn)速分別為200r/min和160r/min、空氣流量分別為12m3/h和120m3/h,種液培養(yǎng)基一的成分為(w/v)小麥粉1.5%、蔗糖1.0%、酵母膏0.4%、麩皮(煮汁)1.5%、KH2PO40.2%、MgSO40.15%,種液培養(yǎng)基二的成分為(w/v)小麥粉0.7%、蔗糖0.7%、酵母膏0.28%、麩皮(煮汁)1.0%、KH2PO40.2%、MgSO40.15%,pH值滅菌前均自然,121℃滅菌30min;10m3發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)將經(jīng)過擴培的發(fā)酵液按1∶10的比例接種于裝有7m3發(fā)酵培養(yǎng)基的10m3攪拌釜式發(fā)酵罐中,28℃恒溫發(fā)酵120h后結(jié)束發(fā)酵;其中,攪拌轉(zhuǎn)速為120r/min、空氣流量為840m3/h,發(fā)酵培養(yǎng)基的成分為(w/v)小麥粉0.5%、蔗糖0.5%、酵母膏0.2%、麩皮(煮汁)0.7%、KH2PO40.2%、MgSO40.15%,pH值滅菌前自然,121℃滅菌30min。2.一種基于阿魏菇多糖理化特性和阿魏菇菌體細胞結(jié)構(gòu)組成特點的后提取方法,其特征在于發(fā)酵產(chǎn)物的預處理將經(jīng)過罐批發(fā)酵獲得的發(fā)酵產(chǎn)物50L裝入200目的過濾袋中置于SS800三足式離心機中,在1200r/min的轉(zhuǎn)速下離心30min,再按料液比11.5加入無水乙醇,在上述相同工作轉(zhuǎn)速下離心30min,收集干菌體,然后將得到的干菌體50Kg平均裝入4個25L球磨罐中置于QM-2SP100-GL球磨機中,在700r/min的轉(zhuǎn)速下破壁30min,收集破碎菌體;阿魏菇多糖的連續(xù)提取及濃縮將經(jīng)過預處理的發(fā)酵產(chǎn)物130Kg按料液比15加入650L經(jīng)過去離子處理的自來水平均打入700L1、2號提取罐中,經(jīng)過功率6KW的超聲波處理5min后,在100°C的提取溫度、50r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌提取60min,然后將1號罐中的提取液放入暫存罐中,關(guān)閉閥門再將2號提取罐的提取液打入1號提取罐中,暫存罐中的提取液打入2號提取罐中,在上述相同的提取條件下攪拌提取60min,接著將提取液放入暫存罐中,開啟減壓閥門在0.OSMpa的負壓下提取液被倒吸入2.5m2刮膜式旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中在95°C、200r/min減壓濃縮,蒸發(fā)的水蒸氣經(jīng)過IOm2冷凝器在0°C液化回收到1.5m3溶劑回收罐中,得到的濃縮物打入醇析罐中結(jié)晶;低溫醇析將得到的濃縮物按料液比15打入裝有150L無水乙醇的200L醇析罐中在-4°C結(jié)晶12h,然后放入12-15個孔徑38μm的尼龍袋中掛于300L存儲罐中過濾24h,將得到的結(jié)晶物倒入30L不銹鋼桶中以備后續(xù)脫溶;兩步脫溶稱量30Kg結(jié)晶物倒入脫溶鍋中,在60°C的脫溶溫度、0.OSMPa工作壓力下減壓脫溶2h;然后從脫溶鍋底部通入N2,在上述相同的條件下減壓脫溶1.5h,最后,收集阿魏菇菌絲體粗多糖,以備阿魏菇多糖口服液等深加工產(chǎn)品添加之用。3.一種基于阿魏菇多糖營養(yǎng)保健功能的口服液生產(chǎn)方法,其特征在于調(diào)配按照正交優(yōu)化獲得的阿魏菇多糖口服液配方稱量配料,然后將原料邊攪拌邊加入50°C的蒸餾水中進行調(diào)配,其中,口服液配方為(w/v):5.0g/L的阿魏菇多糖溶液20%、甜味劑蔗糖12%、酸味劑(檸檬酸、檸檬酸鈉質(zhì)量比101)0.1%、穩(wěn)定劑(海藻酸鈉、CMC-Na質(zhì)量比21)0.2%,Vc0.02%;高壓勻質(zhì)將調(diào)配好的漿液加入穩(wěn)定劑后均質(zhì),均質(zhì)壓力為1520MPa;脫氣灌封均質(zhì)后,將料液進行脫氣處理,適宜條件為0.05MPa脫氣lOmin,脫氣后,按IOmL/瓶的量在全自動灌裝生產(chǎn)線上灌裝、壓蓋密封;殺菌采用高溫滅菌,滅菌條件115°C滅菌30min;抽檢及包裝冷卻后,對產(chǎn)品進行隨機抽樣進行理化指標(見表1)、微生物指標檢驗,最后,對合格品進行貼簽、裝盒、裝箱入庫。表1理化指標<table>tableseeoriginaldocumentpage3</column></row><table>全文摘要一種發(fā)酵生產(chǎn)阿魏菇多糖及其口服液的方法,本發(fā)明的一個方面提供基于阿魏菇生物學特性的罐批發(fā)酵方法,該方法包括母種的斜面培養(yǎng)、原種的種瓶培養(yǎng)、種液的150L-1500L種子罐擴大培養(yǎng)和10m3發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)。本發(fā)明的另一個方面提供基于阿魏菇多糖理化特性和阿魏菇菌體細胞結(jié)構(gòu)組成特點的后提取方法,該方法包括包括發(fā)酵產(chǎn)物的預處理、阿魏菇多糖的連續(xù)提取及濃縮、低溫醇析、兩步脫溶的步驟。本發(fā)明的另一個方面還提供基于阿魏菇多糖營養(yǎng)保健功能的口服液生產(chǎn)方法,該方法包括配料、勻質(zhì)、灌封、殺菌、抽檢及包裝的步驟。文檔編號C12P19/04GK101812491SQ20101011579公開日2010年8月25日申請日期2010年1月31日優(yōu)先權(quán)日2010年1月31日發(fā)明者呂長武,林增祥,陳小龍,陳恒雷申請人:陳恒雷;林增祥;呂長武