專(zhuān)利名稱(chēng)：一種從納豆中提取微生物生產(chǎn)納豆的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從納豆中提取微生物生產(chǎn)納豆的方法。
背景技術(shù)：
納豆是由大豆經(jīng)納豆芽孢桿菌發(fā)酵而成的一種微生態(tài)、有機(jī)健康保健食品。近幾 年來(lái)，經(jīng)各國(guó)的醫(yī)學(xué)家、生理學(xué)家研究得知，大豆的蛋白質(zhì)具有不溶解性，而做成納豆后，大 多數(shù)蛋白質(zhì)變得可溶并產(chǎn)生大量的氨基酸，更利于人體吸收，而且原料中不存在的各種酵 素也會(huì)由于納豆菌及關(guān)聯(lián)細(xì)菌產(chǎn)生，從而幫助腸胃消化吸收。經(jīng)納豆芽孢桿菌發(fā)酵成熟后 的納豆，表面附著一層白色透明的納豆菌膜，納豆芽孢桿菌在通過(guò)吞噬大豆蛋白來(lái)繁殖的 時(shí)候，可以產(chǎn)生出無(wú)數(shù)酵素和維生素，并可在納豆的周?chē)a(chǎn)生多聚谷氨酸和多聚果糖的混 合性粘性物質(zhì)，具有神奇的功效。發(fā)酵成熟后的納豆具有溶血栓、抗腫瘤、降血壓、血脂及預(yù) 防動(dòng)脈粥樣硬化、抗氧化、抑菌等多種功能。納豆的生產(chǎn)具有廣闊的應(yīng)用前景，是當(dāng)今醫(yī)藥和食品工業(yè)共同關(guān)注的焦點(diǎn)，可以 對(duì)血栓等疾病預(yù)防提供一定的幫助、也可以豐富食品市場(chǎng)的品種，在生產(chǎn)的同時(shí)有利于大 豆深加工產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，也帶動(dòng)了地方的經(jīng)濟(jì)發(fā)展。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是為了解決菌種易污染、保存麻煩的問(wèn)題，而提出了用市售的納豆來(lái)提取 生產(chǎn)用菌發(fā)酵納豆。用市售的納豆來(lái)提取生產(chǎn)用菌發(fā)酵納豆的工藝通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn)一、 將從市面上買(mǎi)來(lái)，在冰箱中冷凍的納豆放入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)解凍，并打開(kāi)紫外線殺菌lOmin。 在這段時(shí)間配制固體(液體)培養(yǎng)基并對(duì)培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌，在數(shù)分鐘后納豆解凍，將定 量0. Ig 3g的納豆置于30ml 90ml的生理鹽水中浸提，并不時(shí)震蕩。將滅菌后的培養(yǎng)基 倒平板，待平板冷卻后，用接種環(huán)(針)深入菌液中沾取菌液以平板劃線法接種到平板上， 放入20°C 37°C下恒溫培養(yǎng)18h 30h。重復(fù)此操作2 4次。挑選生長(zhǎng)優(yōu)良的菌落接種 到液體培養(yǎng)基內(nèi)擴(kuò)培以備用；二、將大豆與水以1 2 1 4的比浸泡20h，再浙去浸泡 水，將浙水后的大豆放在高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)在121°C下蒸煮25 30min，取出放在無(wú)菌操作 臺(tái)內(nèi)冷卻，冷卻至60 90°C接入培養(yǎng)好的納豆芽孢桿菌；三、把培養(yǎng)好的納豆芽孢桿菌以 4%的接種量接種到蒸煮的大豆中，放入恒溫振蕩培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。同時(shí)以同種方法接種納 豆芽孢桿菌到蒸煮大豆中，從而調(diào)節(jié)發(fā)酵溫度在20°C 37°C，發(fā)酵時(shí)間20h 30h，和后熟 時(shí)間20h 30h等工藝參數(shù)，以求最佳生產(chǎn)工藝。四、在最佳發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間和后熟時(shí) 間的條件下接入納豆芽孢桿菌，發(fā)酵納豆，對(duì)此時(shí)生產(chǎn)出的納豆進(jìn)行感官檢測(cè)，并測(cè)定此時(shí) 發(fā)酵的納豆的營(yíng)養(yǎng)素含量與傳統(tǒng)發(fā)酵的納豆?fàn)I養(yǎng)素含量進(jìn)行比較。在采用微生物法生產(chǎn)納豆的工藝中，在微生物法生產(chǎn)納豆的工藝中，確定的工藝 參數(shù)更易實(shí)施，納豆的營(yíng)養(yǎng)素含量有顯著提高，接入的納豆芽孢桿菌，無(wú)雜菌污染，操作步 驟簡(jiǎn)單。本發(fā)明操作簡(jiǎn)單，污染少，可用于大規(guī)模工業(yè)生生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式具體實(shí)施方式
一用微生物法生產(chǎn)納豆的工藝通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn)一、將從市面 上買(mǎi)來(lái)，在冰箱中冷凍的納豆放入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)解凍，并打開(kāi)紫外線殺菌lOmin。在這段 時(shí)間配制固體(液體)培養(yǎng)基并對(duì)培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌，在數(shù)分鐘后納豆解凍，將定量 0. Ig 3g的納豆置于30ml 90ml的生理鹽水中浸提，并不時(shí)震蕩。將滅菌后的培養(yǎng)基倒 平板，待平板冷卻后，用接種環(huán)(針)深入菌液中沾取菌液以平板劃線法接種到平板上，放 入20°C 37°C下恒溫培養(yǎng)18h 30h。重復(fù)此操作2 4次。挑選生長(zhǎng)優(yōu)良的菌落接種到 液體培養(yǎng)基內(nèi)擴(kuò)培以備用；二、將大豆與水以1 1 1 5的比浸泡20h，再浙去浸泡水， 將浙水后的大豆放在高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)在121°C下蒸煮20 35min，取出放在無(wú)菌操作臺(tái) 內(nèi)冷卻，冷卻至60 90°C接入培養(yǎng)好的納豆芽孢桿菌；三、把培養(yǎng)好的納豆芽孢桿菌以4% 的接種量接種到蒸煮的大豆中，放入恒溫振蕩培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。同時(shí)以同種方法接種納豆 芽孢桿菌到蒸煮大豆中，從而調(diào)節(jié)發(fā)酵溫度在18°C 40°C，發(fā)酵時(shí)間15h 36h，和后熟時(shí) 間15h 36h等工藝參數(shù)，以求最佳生產(chǎn)工藝。四、在最佳發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間和后熟時(shí)間 的條件下接入納豆芽孢桿菌，發(fā)酵納豆，對(duì)此時(shí)生產(chǎn)出的納豆進(jìn)行感官檢測(cè)，并測(cè)定此時(shí)發(fā) 酵的納豆的營(yíng)養(yǎng)素含量與傳統(tǒng)發(fā)酵的納豆?fàn)I養(yǎng)素含量進(jìn)行比較。
具體實(shí)施方式
二 本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一的不同點(diǎn)在于步驟一中將接好的 蒸煮大豆放入25°C 37°C下恒溫培養(yǎng)18h 30h。其它步驟與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施方式
三本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一的不同點(diǎn)在于步驟一中將接好的 蒸煮大豆放入20°C 37°C下恒溫培養(yǎng)20h 30h。其它步驟與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施方式
四本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一的不同點(diǎn)在于步驟二中將將大豆 與水以1 1 1 3的比浸泡20h。其它步驟與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施方式
五本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一的不同點(diǎn)在于步驟二中將浙水后 的大豆放在高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)在121°C下蒸煮20 30min。其它步驟與具體實(shí)施方式
一相 同。
具體實(shí)施方式
六本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一的不同點(diǎn)在于步驟三中在調(diào)節(jié)發(fā) 酵溫度在20°C 37°C，發(fā)酵時(shí)間15h 36h，后熟時(shí)間15h 36h等工藝參數(shù)發(fā)酵納豆。其 它步驟與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施方式
七本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一的不同點(diǎn)在于步驟三中將調(diào)節(jié)發(fā) 酵溫度在18°C 40°C，發(fā)酵時(shí)間18h 30h，后熟時(shí)間15h 36h等工藝參數(shù)發(fā)酵納豆。其 它步驟與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施方式
八本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一的不同點(diǎn)在于步驟三中調(diào)節(jié)發(fā)酵 溫度在18°C 40°C，發(fā)酵時(shí)間15h 36h，后熟時(shí)間18h 30h等工藝參數(shù)發(fā)酵納豆。其它 步驟與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施方式
九本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一的不同點(diǎn)在于步驟四中選擇步驟 三中確定的最佳工藝參數(shù)生產(chǎn)納豆。其它步驟與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施方式
十本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一的不同點(diǎn)在于步驟四中選用最佳 生產(chǎn)參數(shù)生產(chǎn)的納豆與傳統(tǒng)納豆?fàn)I養(yǎng)素含量進(jìn)行比較及感官評(píng)定。其它步驟與具體實(shí)施方 式一相同。
權(quán)利要求
1.一種從納豆中提取微生物生產(chǎn)納豆的方法，其特征在于用市售的納豆來(lái)提取分離純 化納豆芽孢桿菌進(jìn)而發(fā)酵生產(chǎn)納豆，確定納豆生產(chǎn)的工藝參數(shù)通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn)一、將從 市面上買(mǎi)來(lái)，在冰箱中冷凍的納豆放入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)解凍，并打開(kāi)紫外線殺菌lOmin。在這 段時(shí)間配制固體(液體)培養(yǎng)基并對(duì)培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌，在數(shù)分鐘后納豆解凍，將定量 0. Ig 3g的納豆置于25ml IOOml的生理鹽水中浸提，并不時(shí)震蕩。將滅菌后的培養(yǎng)基 倒平板，待平板冷卻后，用接種環(huán)(針)深入菌液中沾取菌液以平板劃線法接種到平板上， 放入18°C 40°C下恒溫培養(yǎng)15h 36h。重復(fù)此操作2 4次。挑選生長(zhǎng)優(yōu)良的菌落接 種到液體培養(yǎng)基內(nèi)擴(kuò)培以備用；二、將大豆與水以1 1 1 5的比浸泡20h，再浙去浸 泡水，將浙水后的大豆放在高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)在121°C下蒸煮20 35min，取出放在無(wú)菌操 作臺(tái)內(nèi)冷卻，冷卻至60 90°C接入培養(yǎng)好的納豆芽孢桿菌；三、把培養(yǎng)好的納豆芽孢桿菌 以4%的接種量接種到蒸煮的大豆中，放入恒溫振蕩培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。同時(shí)以同種方法接種 納豆芽孢桿菌到蒸煮大豆中，從而調(diào)節(jié)發(fā)酵溫度在18°C 40°C，發(fā)酵時(shí)間15h 36h，和后 熟時(shí)間15h 36h等工藝參數(shù)，以求最佳生產(chǎn)工藝。四、在最佳發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間和后熟 時(shí)間的條件下接入納豆芽孢桿菌，發(fā)酵納豆，對(duì)此時(shí)生產(chǎn)出的納豆進(jìn)行感官檢測(cè)，并測(cè)定此 時(shí)發(fā)酵的納豆的營(yíng)養(yǎng)素含量與傳統(tǒng)發(fā)酵的納豆?fàn)I養(yǎng)素含量進(jìn)行比較，蛋白質(zhì)含量為18% 25%較常規(guī)方法生產(chǎn)的納豆平均提高1%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用微生物法生產(chǎn)納豆的工藝，其特征在于步驟一中將市售的 0. Ig 3g的納豆放入25ml 90ml的生理鹽水中浸提，不時(shí)震蕩。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用微生物法生產(chǎn)納豆的工藝，其特征在于步驟一中將市售的 定量0. Ig 3g的納豆放入25ml 90ml的生理鹽水中浸提，不時(shí)震蕩，并以無(wú)菌操作法接 入平板中，放入25°C 37°C下恒溫培養(yǎng)18h 30h。重復(fù)此操作2 4次，并挑選生長(zhǎng)優(yōu)良 的菌落進(jìn)行接種到液體培養(yǎng)基內(nèi)擴(kuò)培以備用。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用微生物法生產(chǎn)納豆的工藝，其特征在于步驟二中將大豆與 水以1 1 1 4的比浸泡20h，再浙去浸泡水，將浙水后的大豆放在干壓蒸汽滅菌鍋內(nèi) 在121°C下蒸煮20 30min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用微生物法生產(chǎn)納豆的工藝，其特征在于步驟二中將大豆與 水以1 1 1 4的比浸泡20h，再浙去浸泡水，將浙水后的大豆放在干壓蒸汽滅菌鍋內(nèi) 在121°C下蒸煮20 30min，放在無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)冷卻至60V 90°C接入納豆芽孢桿菌。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用微生物法生產(chǎn)納豆的工藝，其特征在于步驟三中將培養(yǎng)優(yōu) 秀的納豆芽孢桿菌無(wú)菌操作法以4%的接種量接入到蒸煮后的大豆中，放入發(fā)酵溫度30 37°C、發(fā)酵時(shí)間15h 36h、后熟時(shí)間15h 36h的情況下發(fā)酵納豆。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用微生物法生產(chǎn)納豆的工藝，其特征在于步驟三中把培養(yǎng)優(yōu) 秀的納豆芽孢桿菌無(wú)菌操作法以4%的接種量接入到蒸煮后的大豆中，放入發(fā)酵溫度30 37°C、發(fā)酵時(shí)間18h 30h、后熟時(shí)間15h 36h的情況下發(fā)酵納豆。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用微生物法生產(chǎn)納豆的工藝，其特征在于步驟三中在發(fā)酵溫 度為30 37°C，發(fā)酵時(shí)間為18h 30h，后熟時(shí)間為18h 30h的情況下發(fā)酵納豆。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用微生物法生產(chǎn)納豆的工藝，其特征在于步驟四中在最佳發(fā) 酵溫度、發(fā)酵時(shí)間和后熟時(shí)間的條件下接入納豆芽孢桿菌，發(fā)酵納豆，對(duì)此時(shí)生產(chǎn)出的納豆 進(jìn)行感官檢測(cè)，判斷納豆感官上與傳統(tǒng)納豆的異同。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用微生物法生產(chǎn)納豆的工藝，其特征在于步驟四中在最佳 的發(fā)酵條件下生產(chǎn)納豆并測(cè)定此法發(fā)酵的納豆的營(yíng)養(yǎng)素含量與傳統(tǒng)發(fā)酵納豆的營(yíng)養(yǎng)素含 量進(jìn)行比較，蛋白質(zhì)含量為19 % 23 %較常規(guī)方法生產(chǎn)的納豆平均提高1 %，確定此時(shí)用 的工藝參數(shù)生產(chǎn)的納豆口味更好且營(yíng)養(yǎng)更加豐富。
全文摘要
一種從納豆中提取微生物生產(chǎn)納豆的方法，本發(fā)明涉及采用分離純化的方法提取生產(chǎn)納豆的納豆芽孢桿菌，將分離純化后的該菌接入蒸煮大豆中發(fā)酵生產(chǎn)納豆，在此過(guò)程中確定生產(chǎn)納豆的最佳生產(chǎn)工藝用3倍的清水浸泡大豆12h，瀝水后，在121℃條件下蒸煮30min；隨即，將從納豆中提取出的納豆芽孢桿菌接入到蒸煮大豆中；最后，對(duì)影響納豆生產(chǎn)的發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間和后熟時(shí)間等因素進(jìn)行考察。最優(yōu)工藝條件發(fā)酵溫度35℃、發(fā)酵時(shí)間24h、后熟時(shí)間24h。此時(shí)，蛋白質(zhì)含量為19.34％較常規(guī)方法生產(chǎn)的納豆平均提高1％，得到納豆的口味佳，營(yíng)養(yǎng)豐富。
文檔編號(hào)A23L1/29GK101999600SQ20101050885
公開(kāi)日2011年4月6日 申請(qǐng)日期2010年10月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月18日
發(fā)明者于殿宇, 劉晶, 周曉丹, 孫博, 常云鶴, 李寧, 江連洲, 王妍, 王立琦, 韓建春 申請(qǐng)人:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)