專(zhuān)利名稱(chēng)：高活力液體木瓜蛋白酶的制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種液體酶的制備工藝，特別涉及一種高活力液體木瓜蛋白酶的制備工藝。
背景技術(shù)：
木瓜蛋白酶廣泛應(yīng)用于食品、化妝品、飼料、皮革加工等行業(yè)，用途廣泛。目前全球 年生產(chǎn)木瓜蛋白酶達(dá)1000噸以上，而美國(guó)每年的需求量就在300噸左右，其中大部分靠進(jìn) 口。我國(guó)目前木瓜蛋白酶市場(chǎng)需求量為300噸，但木瓜蛋白酶年產(chǎn)量?jī)H為100噸左右，而且 多為粗制品，即木瓜漿的干燥制品。近年來(lái)，國(guó)際上木瓜蛋白酶的需求量每年都在以5%左 右的速度增長(zhǎng)。市場(chǎng)對(duì)木瓜蛋白酶的需求量巨大。木瓜蛋白酶是一種植物蛋白酶，主要由從木瓜中提取。常見(jiàn)的木瓜蛋白酶有固體 和液體兩種。固體酶雖然有利于長(zhǎng)期保存，但是在生產(chǎn)操作中，存在酶的添加不均勻?qū)е鹿?藝波動(dòng)、酶的粉塵易致過(guò)敏等問(wèn)題，故實(shí)際生產(chǎn)中，使用液體酶更為方便。目前，我國(guó)液體木瓜蛋白酶的生產(chǎn)工藝主要有以下二種①自然靜置浸提，提取率 一般僅有70%左右，商品活力通常低于10萬(wàn)單位/毫升，生產(chǎn)效率低下且周期長(zhǎng)，一般長(zhǎng)達(dá) 15天；②將干木瓜乳研磨成漿狀，雜質(zhì)沒(méi)有分離，商品活力不超過(guò)20萬(wàn)單位/毫升。工藝 ①的產(chǎn)品活力低、生產(chǎn)效率低下且周期長(zhǎng)；工藝②的生產(chǎn)周期雖短，但雜質(zhì)多，衛(wèi)生指標(biāo)也 差。由于木瓜蛋白酶產(chǎn)品的品質(zhì)差，導(dǎo)致木瓜這一易于栽培的農(nóng)作物的附加值低，也影響了 瓜農(nóng)的收益。因此尋求一種產(chǎn)品活力高、衛(wèi)生指標(biāo)及經(jīng)濟(jì)性方面都較好的高活力液體木瓜蛋白 酶提取生產(chǎn)工藝非常重要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種簡(jiǎn)單、高效的高活力液體木瓜蛋白酶的制備工藝。本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是
高活力液體木瓜蛋白酶的制備工藝，包括以下步驟
1)將干木瓜乳與水混合，得到木瓜乳懸濁液，在木瓜乳懸濁液加入淀粉酶、果膠酶、 糖化酶，酶解；
2)將酶解液過(guò)濾，取濾液；
3)將濾液進(jìn)行膜過(guò)濾除菌，得到高活力液體木瓜蛋白酶。優(yōu)選的，每IOOg木瓜乳(干重)，加入1000 3000U的淀粉酶。優(yōu)選的，每IOOg木瓜乳(干重)，加入1000 20000U的果膠酶。優(yōu)選的，每IOOg木瓜乳(干重)，加入5000 10000U的糖化酶。優(yōu)選的，木瓜乳(干重)與水的質(zhì)量比為10 100 :100。酶解的溫度為21 57°C。本發(fā)明的工藝制備的液體木瓜蛋白酶，酶活不低于50萬(wàn)單位/ml，細(xì)菌數(shù)不高于
310000 個(gè) /ml。本發(fā)明的工藝，生產(chǎn)周期短，5天之內(nèi)即可完成整個(gè)生產(chǎn)過(guò)程，生產(chǎn)效率大大提高。 各工藝參數(shù)易于控制，使用的設(shè)備也易于維修。本發(fā)明的工藝，提取率可接近100%，大大減少了原料的浪費(fèi)。本發(fā)明的工藝，能耗低，節(jié)能環(huán)保，綜合生產(chǎn)成本較常規(guī)自然靜置浸提降低30%以 上，是一種綠色、環(huán)保的提取工藝。
具體實(shí)施例方式高活力液體木瓜蛋白酶的制備工藝，包括以下步驟
將干木瓜乳與水混合，得到木瓜乳懸濁液，在木瓜乳懸濁液加入淀粉酶、果膠酶、糖化 酶，酶解；
將酶解液過(guò)濾，取濾液；
將濾液進(jìn)行膜過(guò)濾除菌，得到高活力液體木瓜蛋白酶。優(yōu)選的，每IOOg木瓜乳(干重)，加入1000 3000U的淀粉酶。優(yōu)選的，每IOOg木瓜乳(干重)，加入1000 20000U的果膠酶。優(yōu)選的，每IOOg木瓜乳(干重)，加入5000 10000U的糖化酶。優(yōu)選的，木瓜乳(干重)與水的質(zhì)量比為10 100 :100。酶解的溫度為21 57°C。下面結(jié)合實(shí)施例，進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。以下實(shí)施例中所使用的份數(shù)，如無(wú)特別說(shuō)明，均指質(zhì)量份。實(shí)施例1
將10份干木瓜乳與100份水混合，得到木瓜乳懸濁液，
1)按每IOOg干木瓜乳加入1000U淀粉酶、6000U果膠酶、6000U糖化酶的比例加入淀 粉酶、果膠酶、糖化酶，30°c酶解；
2)將酶解液通過(guò)鼓膜壓榨過(guò)濾，取濾液；
3)將濾液超濾除菌，得到高活力液體木瓜蛋白酶。整個(gè)生產(chǎn)周期為4天5小時(shí)，木瓜蛋白酶的收率為99. 8%，酶活為60萬(wàn)單位/ml。實(shí)施例2
1)將50份干木瓜乳與100份水混合，得到木瓜乳懸濁液，
2)按每IOOg干木瓜乳加入1800U淀粉酶、10000U果膠酶、5000U糖化酶的比例加入 淀粉酶、果膠酶、糖化酶，37°C酶解；
3)將酶解液通過(guò)鼓膜壓榨過(guò)濾，取濾液；
4)將濾液超濾除菌，得到高活力液體木瓜蛋白酶。整個(gè)生產(chǎn)周期為4天，木瓜蛋白酶的收率為99. 5%，酶活為70萬(wàn)單位/ml。實(shí)施例3
1)將30份干木瓜乳與100份水混合，得到木瓜乳懸濁液，
2)按每IOOg干木瓜乳加入1300U淀粉酶、1000U果膠酶、7000U糖化酶的比例加入淀 粉酶、果膠酶、糖化酶，57°C酶解；
3)將酶解液通過(guò)鼓膜壓榨過(guò)濾，取濾液；4)將濾液超濾除菌，得到高活力液體木瓜蛋白酶。整個(gè)生產(chǎn)周期為3天15小時(shí)，木瓜蛋白酶的收率為97. 2%，酶活為50萬(wàn)單位/ml。實(shí)施例4
1)將80份干木瓜乳與100份水混合，得到木瓜乳懸濁液，
2)按每IOOg干木瓜乳加入2500U淀粉酶、20000U果膠酶、10000U糖化酶的比例加入 淀粉酶、果膠酶、糖化酶，42°C酶解；
3)將酶解液通過(guò)鼓膜壓榨過(guò)濾，取濾液；
4)將濾液超濾除菌，得到高活力液體木瓜蛋白酶。整個(gè)生產(chǎn)周期為4天14小時(shí)，木瓜蛋白酶的收率為99. 0%，酶活為67萬(wàn)單位/ml。實(shí)施例5
1)將100份干木瓜乳與100份水混合，得到木瓜乳懸濁液，
2)按每IOOg干木瓜乳加入3000U淀粉酶、15000U果膠酶、8500U糖化酶的比例加入 淀粉酶、果膠酶、糖化酶，21°C酶解；
3)將酶解液通過(guò)鼓膜壓榨過(guò)濾，取濾液；
4)將濾液超濾除菌，得到高活力液體木瓜蛋白酶。整個(gè)生產(chǎn)周期為4天20小時(shí)，木瓜蛋白酶的收率為98. 5%，酶活為68萬(wàn)單位/ml。本發(fā)明通過(guò)選取合適的酶以及合適的量，可以快速地將木瓜蛋白酶從木瓜乳中釋 放出來(lái)，有效縮短了整個(gè)工藝流程，提高了生產(chǎn)效率。雖然高溫下也可以進(jìn)行提取，但是整個(gè)生產(chǎn)工藝的溫度可控制在40°C以下，這樣 可以保持木瓜蛋白酶的酶活在較高的水平。同時(shí)，過(guò)濾、超濾都是純物理操作，處理量大，能 耗低，可進(jìn)一步提高生產(chǎn)效率，降低生產(chǎn)成本。本發(fā)明的工藝制備的液體木瓜蛋白酶，酶活不低于50萬(wàn)單位/ml，細(xì)菌數(shù)不高于 10000個(gè)/ml，是一種性能優(yōu)異的產(chǎn)品。這一工藝的實(shí)施，也將進(jìn)一步提高木瓜的附加值，有 利于提高瓜農(nóng)的收入。本發(fā)明的工藝，生產(chǎn)周期短，5天之內(nèi)即可完成整個(gè)生產(chǎn)過(guò)程，生產(chǎn)效率大大提高。 各工藝參數(shù)易于控制，使用的設(shè)備也易于維修。本發(fā)明的工藝，提取率可接近100%，大大減少了原料的浪費(fèi)。本發(fā)明的工藝，能耗低，節(jié)能環(huán)保，綜合生產(chǎn)成本較常規(guī)自然靜置浸提降低30%以 上，是一種綠色、環(huán)保的提取工藝。
權(quán)利要求
高活力液體木瓜蛋白酶的制備工藝，包括以下步驟1)將干木瓜乳與水混合，得到木瓜乳懸濁液，在木瓜乳懸濁液加入淀粉酶、果膠酶、糖化酶，酶解；2) 將酶解液過(guò)濾，取濾液；3) 將濾液進(jìn)行膜過(guò)濾除菌，得到高活力液體木瓜蛋白酶。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高活力液體木瓜蛋白酶的制備工藝，其特征在于每IOOg木 瓜乳(干重)，加入1000 3000U的淀粉酶。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高活力液體木瓜蛋白酶的制備工藝，其特征在于每IOOg木 瓜乳(干重)，加入1000 20000U的果膠酶。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高活力液體木瓜蛋白酶的制備工藝，其特征在于每IOOg木 瓜乳(干重)，加入5000 10000U的糖化酶。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高活力液體木瓜蛋白酶的制備工藝，其特征在于木瓜乳懸 濁液中還添加有木瓜乳(干重)質(zhì)量0. 1 1. 2%的螯合劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的高活力液體木瓜蛋白酶的制備工藝，其特征在于螯合劑為 EDTA-Na20
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高活力液體木瓜蛋白酶的制備工藝，其特征在于酶解的溫 度為21 57°C。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高活力液體木瓜蛋白酶的制備工藝，其特征在于木瓜乳(干 重)與水的質(zhì)量比為10 100 :100。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了高活力液體木瓜蛋白酶的制備工藝，包括將干木瓜乳與水混合，得到木瓜乳懸濁液，在木瓜乳懸濁液加入淀粉酶、果膠酶、糖化酶，酶解；將酶解液過(guò)濾，取濾液；將濾液進(jìn)行膜過(guò)濾除菌，得到高活力液體木瓜蛋白酶。本發(fā)明的工藝制備的液體木瓜蛋白酶，酶活不低于50萬(wàn)單位/ml，細(xì)菌數(shù)不高于10000個(gè)/ml。本發(fā)明的工藝，生產(chǎn)周期短，5天之內(nèi)即可完成整個(gè)生產(chǎn)過(guò)程，生產(chǎn)效率大大提高。各工藝參數(shù)易于控制，使用的設(shè)備也易于維修。本發(fā)明的工藝，提取率可接近100%，大大減少了原料的浪費(fèi)。本發(fā)明的工藝，能耗低，節(jié)能環(huán)保，綜合生產(chǎn)成本較常規(guī)自然靜置浸提降低30%以上，是一種綠色、環(huán)保的提取工藝。
文檔編號(hào)C12N9/50GK101962636SQ20101051588
公開(kāi)日2011年2月2日 申請(qǐng)日期2010年10月22日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月22日
發(fā)明者聶振泰 申請(qǐng)人:江門(mén)市天成生物科技有限公司