專利名稱：一株強穩(wěn)定性中溫中性α-淀粉酶高產(chǎn)菌及其酶學(xué)性質(zhì)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一株具有工業(yè)應(yīng)用潛力的，強穩(wěn)定性中溫中性α “淀粉酶產(chǎn)生菌的篩 選及其產(chǎn)酶性質(zhì)，屬生物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
α -淀粉酶(α -amylase, EC3. 2. 1. 1)又稱液化酶，長鏈淀粉水解為短鏈糊精和還 原糖，因生成的糖為α型，故稱α-淀粉酶，它將淀粉分子鏈中的α_1，4葡萄糖苷鍵隨機 切斷成長短不一的短鏈糊精、少量麥芽糖和葡萄糖。α “淀粉酶是淀粉加工過程中的主要 酶類之一，反應(yīng)不需要輔酶，且條件溫和，副產(chǎn)物少，因此廣泛應(yīng)用于洗滌劑、啤酒、食品、醫(yī) 藥、制革、紡織等領(lǐng)域。其中微生物源的α-淀粉酶由于其生產(chǎn)成本低、環(huán)境危害小、產(chǎn)酶活 性高，便于工業(yè)生產(chǎn)，成為最具發(fā)展前途的工業(yè)酶之一。我國上世紀70年代已有了 α -淀粉酶工業(yè)化生產(chǎn)，相繼開發(fā)出中溫淀粉酶、高溫 淀粉酶、酸性淀粉酶，堿性淀粉酶等，但淀粉酶的酶學(xué)性質(zhì)仍無法完全滿足現(xiàn)代工業(yè)的需 求。本發(fā)明所涉及的中溫中性α-淀粉酶不僅溫度、PH適應(yīng)范圍廣且耐溫耐酸性能好，展 示了誘人的工業(yè)應(yīng)用前景和商業(yè)價值，是實現(xiàn)化學(xué)工業(yè)過程向建立高效率、低成本生物技 術(shù)加工過程轉(zhuǎn)化的最佳催化劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一株生產(chǎn)強穩(wěn)定性中溫中性淀粉酶菌株(枯草芽孢桿菌 XLG-1)，以及對其產(chǎn)酶性質(zhì)的初步研究，然后通過初步的紫外誘變篩選出一株α “淀粉酶
高產(chǎn)菌。本發(fā)明提供的產(chǎn)中溫中性淀粉酶菌株從淀粉加工廠污泥中篩選得到，通過考察其 形態(tài)特征、生理生化特性，將其鑒定為枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis，命名為XLG-1，經(jīng) 誘變后的菌株于2010年5月24日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心 (簡稱中國微生物菌種保藏中心)，保藏號CGMCCN0. 3871。對該菌株的相關(guān)研究得到如下結(jié)論1.菌落形態(tài)特征及生理生化特征該菌在酸性培養(yǎng)基上生長良好，為好氧菌，菌 落表面干燥，不透明，邊緣整齊，乳白色。革蘭氏染色陽性，鏡檢為長桿狀。其生理生化特征 見表1。表1 XLG-I的生理生化特征
權(quán)利要求
1.一株高產(chǎn)強穩(wěn)定性中溫中性α-淀粉酶的枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis XLG-1，現(xiàn)保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱中國微生物菌種 保藏中心)，保藏號CGMCC NO. 3871。
2.如權(quán)利要求1的XLG-I，其最高產(chǎn)酶活性為4255U/mL。
3.如權(quán)利要求1的XLG-I屬枯草芽胞桿菌(Bacillussubtilis)，其形態(tài)特征為長桿 狀、在篩選固體培養(yǎng)基上菌落圓形、邊緣不齊、菌苔干燥、不透明、乳白色。
4.如權(quán)利要求1的XLG-1，其產(chǎn)中溫中性α-淀粉酶的初始發(fā)酵培養(yǎng)基為玉米粉 5-15%，豆餅粉 4-10%，(NH)2SO4 0. 4%，K2HPO4O. 8%，CaCl2O. 2%。培養(yǎng)條件為250mL 三 角瓶裝30mL的發(fā)酵培養(yǎng)基，接種量為10% (體積比)，37°C，200-250r/min，發(fā)酵72h。
5.如權(quán)利要求3的中溫中性α-淀粉酶，其酶學(xué)特性在于(1)最適作用溫度為40-60°C；(2)最適反應(yīng)pH為pH5-7 ；(3)該酶分子量在58KD左右。
全文摘要
本發(fā)明屬生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一株高產(chǎn)強穩(wěn)定性中溫中性淀粉酶枯芽胞桿菌(Bacillus subtilis)XLG-1的篩選及此酶的酶學(xué)性質(zhì)的初步研究。該菌株保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱中國微生物菌種保藏中心)，保藏號CGMCC NO.3871。其生物學(xué)特性為形態(tài)為長桿狀，在淀粉篩選固體培養(yǎng)基上菌落圓形、邊緣不齊、菌苔干燥、不透明、乳白色。在37℃搖瓶培養(yǎng)72h，酶活可達2200U/mL，經(jīng)過紫外線-氯化鋰復(fù)合誘變后最高產(chǎn)酶達6183U/mL，此酶廣泛引用于洗滌劑、啤酒、食品、醫(yī)藥、制革、紡織，造紙業(yè)等領(lǐng)域。
文檔編號C12R1/125GK102127514SQ201010567018
公開日2011年7月20日 申請日期2010年12月1日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月1日
發(fā)明者史勁松, 張旦旦, 張曉梅, 李文秀, 竇文芳, 許正宏, 許泓瑜, 陸震鳴, 陳敬華 申請人:江南大學(xué)