專利名稱：一種裂褶菌菌種保藏方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種裂褶菌菌種保藏方法。
背景技術(shù)：
WMMiSchizophylIum commune Fr.)是一種具重要應(yīng)用價(jià)值的經(jīng)濟(jì)真菌，已進(jìn)行人工栽培。該菌的應(yīng)用價(jià)值主要表現(xiàn)在食用和藥用方面。此外，該菌含有較強(qiáng)活性的纖維素酶，并能產(chǎn)生蘋果酸，菌絲深層發(fā)酵時(shí)可產(chǎn)生大量有機(jī)酸，還可產(chǎn)生植物生長調(diào)節(jié)劑吲哚乙酸等，在食品工業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生、生物化學(xué)等方面也具有較廣泛的應(yīng)用價(jià)值。菌種是重要的生物資源，是菌類及其相關(guān)產(chǎn)品生產(chǎn)的重要生產(chǎn)資料，也是菌類科研、教學(xué)上的重要材料。菌種保藏即在人為創(chuàng)造的條件下，使菌種的新陳代謝活動(dòng)處于不活潑狀態(tài)，從而較長時(shí)間地保持菌種的生命力和原有性狀。裂褶菌的菌種保藏是從事裂褶菌栽培、菌種生產(chǎn)經(jīng)營和相關(guān)教學(xué)、科研單位的一項(xiàng)重要工作。關(guān)于裂褶菌及其它絲狀真菌的菌種保藏，過去常用的保藏方法有
1、斜面低溫保藏法這是菌種保藏最常用的方法。即將著生于試管斜面培養(yǎng)基上的菌絲體置于4 6°C的冰箱中保存。這種保藏方法需要每4 6個(gè)月移植轉(zhuǎn)管一次，即每隔 4 6個(gè)月需將保藏的菌種轉(zhuǎn)接在新的試管斜面培養(yǎng)基上，待菌種在新的試管斜面培養(yǎng)基上生長到合適的狀態(tài)時(shí)再置于4 6°C的冰箱中保存。2、石蠟保藏法(即礦物油保藏法)在著生有菌絲體的試管斜面上注入一層無菌的液體石蠟，使菌絲體與空氣隔絕，以降低代謝活性，從而達(dá)到保藏的目的。此法一般可保藏2 3年，但最好1 2年移植一次。這種保藏方法也可以在室溫下保藏菌種。使用這種保藏方法保存的菌種時(shí)，可用接種鏟直接挑取少許菌絲，接種于另一斜面培養(yǎng)基上。剛從液體石蠟菌種中移出的菌絲體，常沾有較多的石蠟，生長較弱，需再轉(zhuǎn)管1次，方能恢復(fù)正常。3、自然基質(zhì)保藏法根據(jù)培養(yǎng)菌絲體的基質(zhì)不同，可進(jìn)一步分為麩皮保藏法、木屑保藏法和麥粒保藏法等。即將菌絲體培養(yǎng)在麩皮、木屑和麥粒等自然基質(zhì)為主要原料配成的培養(yǎng)基上，然后在冰箱中或常溫下保存，其保存時(shí)間一般不超過2年。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種常溫下能長期保持裂褶菌菌種生命力的裂褶菌菌種保藏方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案，一種裂褶菌菌種保藏方法，包括如下步驟
(1)先將裂褶菌的試管斜面菌種接種到瓶裝或袋裝的木屑培養(yǎng)基上，培養(yǎng)成裂摺菌木屑菌種；
(2)在段木上打孔；
(3)將培養(yǎng)好的裂褶菌木屑菌種接種到段木上的孔中，封住孔口；
(4)按照段木栽培食用菌的常規(guī)方式對(duì)接種后的段木進(jìn)行管理，使段木上長出裂褶菌子實(shí)體；
(5)待段木上長出的裂褶菌子實(shí)體覆蓋段木表面15% 35%時(shí)，把長有裂褶菌子實(shí)體的段木移到干燥通風(fēng)的環(huán)境中，使其自然干燥；
(6)將制好的裂褶菌保藏菌種保存于室內(nèi)自然條件下。裂褶菌木屑菌種接種到段木上的孔中后，孔口用樹皮蓋或蠟封住。裂褶菌可生長在許多樹種的枯木上，故制作裂褶菌保藏菌種可以選用很廣泛樹種的枝干作段木，為便于長期保藏，可選用櫟、蘋果、梨、桃等材質(zhì)較硬樹種的枝干作段木。段木的大小視保藏位置的空間而定，一般可選擇直徑IOcm左右的枝干，截成50cm左右的長度，段木的準(zhǔn)備過程和干濕度控制，同食用菌栽培所用的段木。用電鉆或打孔器在段木上打孔，孔在段木上以三角形排列，行距7cm左右，孔距 20cm左右，孔徑Icm左右，深度1. 5cm左右。在段木上打孔，目的是為了將木屑菌種接種于孔中，讓段木上生出作為保藏菌種的子實(shí)體，其他具有相同作用的洞、穴等，均應(yīng)視作孔的替代形式；段木上孔的排列方式，不影響菌種保藏的效果。為了長久保持裂褶菌子實(shí)體的生命力，作為保藏菌種的子實(shí)體要著生于段木上， 連同段木一起保藏，而不可從段木上采下來單獨(dú)保藏。本發(fā)明保藏方法可保持裂褶菌菌種的生命力20年以上。段木栽培食用菌的常規(guī)方式比較粗放、簡單，各地采用的方法也不太一致，但都能達(dá)到一定的效果，故本發(fā)明步驟(4)中對(duì)段木栽培食用菌的具體方法不做特殊要求。用本發(fā)明方法保存的菌種進(jìn)行生產(chǎn)或擴(kuò)大繁殖時(shí)，先從段木上采下所需數(shù)量的裂褶菌子實(shí)體，在子實(shí)體被面(無菌褶的面)噴水霧，使子實(shí)體吸收水分舒展開來，然后按照孢子彈射分離法獲得菌絲體菌種供生產(chǎn)或擴(kuò)大繁殖使用。接種和培養(yǎng)基制作均遵循微生物實(shí)驗(yàn)的無菌操作要求。本發(fā)明裂褶菌菌種保藏方法的優(yōu)點(diǎn)為1、本方法保藏的菌種是處于干燥狀態(tài)的休眠子實(shí)體，能保持菌種生命力長達(dá)數(shù)十年(20年以上)；2、本發(fā)明保藏方法不需要特殊的保藏設(shè)備，存放于室內(nèi)的標(biāo)本柜中即可；3、本發(fā)明保藏方法保藏的菌種同時(shí)具有標(biāo)本的作用， 可直接反映出用該菌種生產(chǎn)出子實(shí)體的性狀。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1采用本發(fā)明的方法保存裂褶菌菌種的方法如下所述
(1)先用裂褶菌的試管斜面菌種接種到袋裝的木屑培養(yǎng)基上，培養(yǎng)成裂摺菌木屑菌
種；
(2)在段木上用電鉆打孔，孔在段木上以三角形排列，行距7cm，孔距20cm，孔徑1cm，深度 1. 5 cm ；
(3)將培養(yǎng)好的裂褶菌木屑菌種接種到段木上的孔中，孔口用蠟封??；
(4)按照段木栽培食用菌的常規(guī)方式對(duì)接種后的段木進(jìn)行管理，使段木上長出裂褶菌子實(shí)體；
(5)待段木上長出的裂褶菌子實(shí)體覆蓋段木表面25%時(shí)，不再采取保濕措施，并把長有裂褶菌子實(shí)體的段木移到干燥通風(fēng)的環(huán)境中，使其自然干燥，以這種著生于干燥段木上的裂褶菌子實(shí)體作為保藏菌種；
(6)將制好的裂褶菌保藏菌種保存于室內(nèi)自然條件下。
權(quán)利要求
1.一種裂褶菌菌種保藏方法，其特征在于，該方法包括如下步驟(1)先將裂褶菌的試管斜面菌種接種到木屑培養(yǎng)基上，培養(yǎng)成裂摺菌木屑菌種；(2)在段木上打孔；(3)將培養(yǎng)好的裂褶菌木屑菌種接種到段木上的孔中，封住孔口 ；(4)對(duì)接種后的段木進(jìn)行管理，使段木上長出裂褶菌子實(shí)體；(5)待段木上長出的裂褶菌子實(shí)體覆蓋段木表面15% 35%時(shí)，將段木移到干燥通風(fēng)的環(huán)境中，使其自然干燥；(6)將制好的裂褶菌保藏菌種保存于室內(nèi)自然條件下。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裂褶菌菌種保藏方法，其特征在于，步驟(3)所述封住孔口是用樹皮蓋住或用蠟封住孔口。
全文摘要
本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種裂褶菌菌種保藏方法。該方法如下所述(1)先用裂褶菌的試管斜面菌種接種到木屑培養(yǎng)基上，培養(yǎng)成木屑菌種；(2)在段木上打孔；(3)將培養(yǎng)好的裂褶菌木屑菌種接種到段木上的孔中，封住孔口；(4)按照常規(guī)方式對(duì)接種后的段木進(jìn)行管理，使段木上長出裂褶菌子實(shí)體；(5)待段木上長出的裂褶菌子實(shí)體覆蓋段木表面15%～35%時(shí)，將其移到干燥通風(fēng)的環(huán)境中，使其自然干燥；(6)將制好的裂褶菌保藏菌種保存于室內(nèi)自然條件下。該方法可長期保持裂褶菌菌種的生命力，且不需要特殊的保藏設(shè)備，常溫自然條件保存即可。
文檔編號(hào)C12N1/04GK102154109SQ201110054518
公開日2011年8月17日 申請(qǐng)日期2011年3月8日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月8日
發(fā)明者侯軍, 崔林開, 李永麗, 林曉民, 王少先 申請(qǐng)人:河南科技大學(xué)