專利名稱：一種促進紫色非硫細菌懸浮生長培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于微生物學、微生態(tài)學領(lǐng)域。具體的說，涉及一種促進紫色非硫細菌懸浮生長的培養(yǎng)基。
背景技術(shù)：
紫色非硫細菌屬于紅螺菌科(Iihodospirillaceae)是一類變化多樣的紫色光合細菌(phototrophic purple bacteria，PNS)。能在厭氧光照、好氧黑暗條件下以不同的生理代謝方式生長繁殖，具有豐富的代謝多樣性。由于它的細胞干物質(zhì)中蛋白質(zhì)含量高達到 60%以上，其蛋白質(zhì)氨基酸組成比較齊全，細胞中還含有多種維生素，尤其是B族維生素極為豐富，Vb2、葉酸、泛酸、生物素的含量也較高，同時還含有大量的類胡蘿卜素、輔酶Q等生理活性物質(zhì)。因此具有很高的營養(yǎng)價值，這正是它在水產(chǎn)養(yǎng)殖中作為餌料及作為飼料添加成分物質(zhì)基礎(chǔ)。同時，菌體在生長過程中可以有效利用水體中有機物有效降低水體COD值， 實現(xiàn)水產(chǎn)飼料和水處理的雙重作用。紫色非硫細菌推廣和應(yīng)用的關(guān)鍵是培養(yǎng)的菌體應(yīng)有較高的菌體濃度，目前的常規(guī)培養(yǎng)基主要配方為氯化銨1. Og,乙酸鈉3. 5g，氯化鎂0. Ig,氯化鈣0. Ig,磷酸二氫鉀 0. 6g，磷酸氫二鉀0. 4g，酵母膏0. lg，水IOOOmI，pH7. 2.使用此培養(yǎng)基配方在培養(yǎng)過程中菌體會出現(xiàn)沉淀生長現(xiàn)象，影響菌體生長的微環(huán)境，不利于菌體總濃度的提高。

發(fā)明內(nèi)容
為解決以上問題，本發(fā)明提供了一種促進紫色非硫細菌懸浮生長培養(yǎng)基，本發(fā)明的紫色非硫細菌培養(yǎng)基，可有效促進菌體懸浮生長，提高菌體最終培養(yǎng)濃度。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是在前述常規(guī)培養(yǎng)基中，添加0.2% 的吐溫80，即每1000ml基本培養(yǎng)基，添加2 IOml吐溫80。優(yōu)選的培養(yǎng)基每1000ml加IOml吐溫80。調(diào)節(jié)本發(fā)明培養(yǎng)基pH為7. 2，121°C滅菌25分鐘，將紫色非硫細菌接種于培養(yǎng)基中，置于光照培養(yǎng)箱中，光照條件20001UX，溫度32°C。紫色非硫細菌沉淀現(xiàn)象隨吐溫80的增加而減弱，當每1000ml加IOml吐溫80時， 基本不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象，培養(yǎng)6天OD66tl達3. 5，繼續(xù)增加吐溫80對菌體生長有抑制作用，因此選用10ml/L吐溫80的添加比較適宜，但考慮添加成本可根據(jù)實際情況適當增加。本發(fā)明的有益效果1、采用本發(fā)明培養(yǎng)基培養(yǎng)紫色非硫細菌，最大生長量明顯提高。具體表現(xiàn)為采用本發(fā)明培養(yǎng)基培養(yǎng)的紫色非硫細菌較常規(guī)培養(yǎng)基培養(yǎng)菌體的OD66tl最終濃度提供70%以上，采用本發(fā)明培養(yǎng)基菌體的最終OD66tl可達到3. 5以上，見附圖中a ；而常規(guī)培養(yǎng)基一般僅能達到1. 9 2.0，見附圖中b。2、用本發(fā)明培養(yǎng)基培養(yǎng)的紫色非硫細菌用于水產(chǎn)養(yǎng)殖水體的凈化，效果明顯。按紫色非硫細菌的20kg/hm2用量一次性撒入魚塘，試驗池比對照池改善明顯，COD下降40%， 氨氮減少55.6%


本發(fā)明培養(yǎng)基(添加IOml吐溫80/L)與常規(guī)培養(yǎng)基，在培養(yǎng)紫色非硫細菌的過程中，光密度OD66tl的變化圖。附圖中a代表發(fā)明培養(yǎng)基、b代表常規(guī)培養(yǎng)基。
具體實施例方式實施例1 (一 )促進紫色非硫細菌懸浮生長培養(yǎng)基配制基本培養(yǎng)基氯化銨1. Og,乙酸鈉3. 5g，氯化鎂0. Ig,氯化鈣0. Ig,磷酸二氫鉀 0. 6g，磷酸氫二鉀0. 4g，酵母膏0. lg,7jc 1000mI,pH7. 2.在上述培養(yǎng)基中，加吐溫805ml。( 二 )紫色非硫細菌的培養(yǎng)將上述培養(yǎng)基pH調(diào)節(jié)為7. 2，121°C滅菌25分鐘，將紫色非硫細菌按培養(yǎng)基體積 3%接種于培養(yǎng)基中，置于光照培養(yǎng)箱中，光照條件20001UX，溫度32°C。培養(yǎng)結(jié)果光照培養(yǎng)6天后，菌體生長進入穩(wěn)定期，菌液中無菌體沉淀現(xiàn)象，菌液 OD660 到達 3. 0實施例2:(一 )促進紫色非硫細菌懸浮生長培養(yǎng)基配制基本培養(yǎng)基氯化銨1. Og,乙酸鈉3. 5g，氯化鎂0. Ig,氯化鈣0. lg，磷酸二氫鉀 0. 6g，磷酸氫二鉀0. 4g，酵母膏0. lg,7jc IOOOmI, pH7. 2.在上述培養(yǎng)基中，加加吐溫80 10ml。( 二)紫色非硫細菌的培養(yǎng)將上述培養(yǎng)基pH調(diào)節(jié)為7. 2，121°C滅菌25分鐘，將紫色非硫細菌按培養(yǎng)基體積 3%接種于培養(yǎng)基中，置于光照培養(yǎng)箱中，光照條件20001UX，溫度32°C。培養(yǎng)結(jié)果光照培養(yǎng)4天后，菌體生長進入穩(wěn)定期，菌液OD66tl到達3. 5。
權(quán)利要求
1.一種促進紫色非硫細菌懸浮生長培養(yǎng)基，其特征有常規(guī)培養(yǎng)基、吐溫80組成。在常規(guī)培養(yǎng)基中每IOOOml添加0. 2% 的吐溫80。常規(guī)培養(yǎng)基為氯化銨1. Og,乙酸鈉3. 5g，氯化鎂0. Ig,氯化鈣0. Ig,磷酸二氫鉀0. 6g，磷酸氫二鉀0. 4g，酵母膏0. Ig,水 IOOOmI，ρΗ7· 2.
2.根據(jù)權(quán)利1的要求，培養(yǎng)的紫色非硫細菌菌液或干粉制劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種經(jīng)過改造可以有效促進紫色非硫細菌懸浮生長的培養(yǎng)基。采用的技術(shù)方案是在常規(guī)培養(yǎng)基中添加添加0.2％～1％的吐溫80。采用此培養(yǎng)基培養(yǎng)紫色非硫細菌可有效解決菌體生長過程中沉淀問題，與常規(guī)培養(yǎng)基相比，用本發(fā)明的培養(yǎng)基培養(yǎng)菌體最終培養(yǎng)濃度更高，菌液OD660達到3.5。
文檔編號C12N1/20GK102477409SQ20111025921
公開日2012年5月30日 申請日期2011年9月5日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月5日
發(fā)明者周浩, 張柏松, 方井霞, 杜鳳梅 申請人:周浩