一種發(fā)光菌的培養(yǎng)基的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種發(fā)光菌的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基每升中包含胰蛋白胨5～10g，牛肉浸膏5～10g，甘油2～4mL，磷酸二氫鉀0.3～1.5g，十二水合磷酸氫二鈉11～13g，氯化鈉21～35g。本發(fā)明還提供了一種利用上述培養(yǎng)基培養(yǎng)發(fā)光菌的方法，其用于培養(yǎng)發(fā)光菌時接種菌液體積是培養(yǎng)基體積的2%。該培養(yǎng)基可使發(fā)光菌在液體培養(yǎng)基中的菌含量可穩(wěn)定超過1×108CFU/mL，有利于發(fā)光菌的研究應用及其凍干粉的生產。且本發(fā)明提供的發(fā)光菌培養(yǎng)基成本低，有利于發(fā)光菌的推廣應用。
【專利說明】一種發(fā)光菌的培養(yǎng)基
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及生物【技術領域】，具體涉及一種發(fā)光菌培養(yǎng)基的制備，以及利用該培養(yǎng)基培養(yǎng)發(fā)光菌的方法。
【背景技術】
[0002]發(fā)光細菌是進行生物發(fā)光的一類細菌。其多數(shù)為海生，與發(fā)光浮游生物同是引起海面發(fā)光的原因。發(fā)光菌形態(tài)雖多種多樣，但生理特性卻非常相似。一般對明膠不產生液化，分解蛋白質后不形成毒物，常寄生在各種動物體上引起“發(fā)光病”，即寄生發(fā)光。目前，國內常用的3種發(fā)光細菌為:明亮發(fā)光桿菌、費氏弧菌、青海弧菌。
[0003]其中，明亮發(fā)光桿菌是革蘭氏陰性菌，可在水質急性毒性的測定中所使用。費氏弧菌是一種生長在海洋中的革蘭氏陰性菌，普遍存在于海洋環(huán)境及海洋生物體中，是某些海洋魚類的致病菌。研究人員發(fā)現(xiàn)當菌群密度達到一定閾值時費氏弧菌會產生集體發(fā)光現(xiàn)象；后來的研究表明此生物發(fā)光現(xiàn)象是因為其自誘導劑的積累引起的；費氏弧菌通過該自誘導劑進行相互交流，啟動相關基因的表達，從而引起其表型的變化。任何對細胞代謝機制的抑制作用，如各種無機毒物與有機毒物，都會導致其發(fā)光的減少，所以費氏弧菌目前被普遍作為環(huán)境測試指標。青?；【艹掷m(xù)穩(wěn)定地發(fā)射藍綠光(最大發(fā)射波長485nm)，一旦遭遇有毒有害物質，很快會被抑制發(fā)光，其發(fā)光抑制程度與所受的有毒有害物質的毒性及濃度有對應關系，且它是一種淡水菌，所以被廣泛應用于飲用水監(jiān)測中。
[0004]目前，市場上現(xiàn)存的發(fā)光菌的液體培養(yǎng)基成本較高，不利于發(fā)光菌的試驗研究及推廣應用。且對于發(fā)光菌的培養(yǎng)條件尚未有成熟的方案，致使發(fā)光菌的液體培養(yǎng)菌含量不穩(wěn)定。

【發(fā)明內容】

[0005]針對現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明的一個目的是提供一種適于發(fā)光菌生長的培養(yǎng)基。
[0006]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案:
[0007]本發(fā)明提供的發(fā)光菌的培養(yǎng)基，其每升中包含胰蛋白胨4~10g，牛肉浸膏5~10g，甘油2~4mL，磷酸二氫鉀0.3~1.5g，十二水合磷酸氫二鈉11~13g，氯化鈉21~35g。
[0008]優(yōu)選為，其每升中包含胰蛋白胨5g，牛肉浸膏7.5g，甘油3mL，磷酸二氫鉀lg，十二水合磷酸氫二鈉12.6g，氯化鈉30g。
[0009]本發(fā)明的另一個目的是提供了一種使用上述培養(yǎng)基培養(yǎng)發(fā)光菌的方法。
[0010]上述培養(yǎng)方法，包括以下步驟:取復蘇好的菌液，按培養(yǎng)基體積的1.5%~3%接種到上述培養(yǎng)基中，25°C，180rpm培養(yǎng)18h。
[0011]優(yōu)選為，上述培養(yǎng)方法，包括以下步驟:取復蘇好的菌液，按培養(yǎng)基體積的2%接種到上述培養(yǎng)基中，25°C，180rpm培養(yǎng)18h。
[0012]上述方法還包括:將費氏弧菌的凍干粉用3%NaCl溶液進行溶解，復蘇lOmin，接種到上述液體培養(yǎng)基中，25°C，180rpm培養(yǎng)18h。
[0013]使用本發(fā)明提供的用于發(fā)光菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基，以及使用本發(fā)明提供的方法培養(yǎng)發(fā)光菌后，可使發(fā)光菌在液體培養(yǎng)基中的菌含量可穩(wěn)定超過I X 108CFU/mL,有利于發(fā)光菌的研究應用及其凍干粉的生產。且本發(fā)明提供的發(fā)光菌培養(yǎng)基成本低，有效降低了發(fā)光菌的研究成本，有利于發(fā)光菌的推廣應用。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0014]圖1是本發(fā)明提供的培養(yǎng)基與對照組培養(yǎng)基培養(yǎng)菌液發(fā)光度的比較。
【具體實施方式】
[0015]以下實施例用于進一步說明本發(fā)明，但不應理解為對本發(fā)明的限制。在不背離本發(fā)明精神和實質的前提下，對本發(fā)明所作的修飾或者替換，均屬于本發(fā)明的范疇。
[0016]實施例1發(fā)光菌含菌量以及生產成本的對比試驗
[0017]制備不同配比的發(fā)光菌培養(yǎng)基，用于對比試驗，各實驗組的具體成分見表1:
[0018]表1:培養(yǎng)基的成分
[0019]
【權利要求】
1.一種發(fā)光菌的培養(yǎng)基，其特征在于，其每升中包含胰蛋白胨4~10g，牛肉浸膏5~10g，甘油2~4mL，磷酸二氫鉀0.3~1.5g，十二水合磷酸氫二鈉11~13g，氯化鈉21~35g。
2.根據(jù)權利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征在于，其每升中包含胰蛋白胨5g，牛肉浸膏7.5g，甘油30mL，磷酸二氫鉀lg，十二水合磷酸氫二鈉12.6g，氯化鈉30g。
3.一種使用權利要求1或2所述的培養(yǎng)基培養(yǎng)發(fā)光菌的方法。
4.根據(jù)權利要求3所述的培養(yǎng)方法，其特征在于，包括以下步驟:取復蘇好的菌液，按培養(yǎng)基體積1.5%~3%的量接種到培養(yǎng)基中，250C，180rpm培養(yǎng)18h。
5.根據(jù)權利要求4所述的方法，其特征在于，包括以下步驟:取復蘇好的菌液，按培養(yǎng)基體積2%的量接種到培養(yǎng)基中，250C，180rpm培養(yǎng)18h。
6.根據(jù)權利要求4或5所述的方法，其特征在于，還包括以下步驟:將費氏弧菌的凍干粉用3%NaCl溶液進行溶解，復`蘇lOmin，接種到培養(yǎng)基中，25°C，180rpm培養(yǎng)18h。
【文檔編號】C12N1/20GK103484408SQ201310443440
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年9月25日 優(yōu)先權日:2013年9月25日
【發(fā)明者】袁恒 申請人:北京尚洋東方環(huán)境科技股份有限公司