一種養(yǎng)生保健枸杞葉茶新品種選育方法及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種養(yǎng)生保健枸杞葉茶專用新品種的選育方法及其茶葉制備方法，采用壓片法進行細胞學觀察；利用超親優(yōu)勢法、超對照優(yōu)勢法測定突變體葉面積、葉厚、莖粗、可食部分長度、嫩莖葉鮮重的生長優(yōu)勢；大區(qū)生產(chǎn)試驗法測定新品種產(chǎn)量表現(xiàn)；病情指數(shù)法進行抗病性鑒定；半微量凱氏法測定粗蛋白含量；索氏提取法測定粗脂肪含量；原子吸收法測定鈣、鉀、鎂、鈉、磷、銅、鐵、等元素含量；熒光分光光度法測定硒含量；L-8500A氨基酸分析儀測定氨基酸含量；超聲提取法測定枸杞多糖、黃酮的含量；分光光度計法測定甜菜堿含量，選育的多倍體新品種生長優(yōu)勢強大，遺傳性穩(wěn)定；超高產(chǎn)；高抗根腐病等，營養(yǎng)品質(zhì)、藥用品質(zhì)優(yōu)良，生產(chǎn)的枸杞葉茶品質(zhì)優(yōu)良。
【專利說明】一種養(yǎng)生保健枸杞葉茶新品種選育方法及其制備方法
【技術(shù)領域】
[0001]本發(fā)明屬于枸杞葉茶生產(chǎn)【技術(shù)領域】，尤其涉及一種養(yǎng)生保健枸杞葉茶新品種的選育方法及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]枸杞葉是滋補強身的中草藥，中醫(yī)稱“天精草”，其藥性涼，味苦、甘，能補虛生精、清熱、止渴、扶風明目?！侗静菥V目》寫道:“枸杞葉藥性苦、甘、涼，去上焦心肺客熱”?！端幮哉摗分袑懙?枸杞葉“甘、平，能補益精諸不足，易顏色，變白，明目，安神”?！妒朝煴静荨分袑懙?枸杞葉“堅精耐老，除風，補益精骨，能益人，去虛勞?！薄吨腥A本草》載枸杞葉“味苦；甘;性涼，補虛益精；清熱明目。主虛勞發(fā)熱；煩渴；目赤昏痛”?！端幮哉摗酚涊d枸杞葉“若渴可煮作飲，代茶飲之；發(fā)熱諸毒煩悶，可單煮汁解之”。上述證明，由古人開始都證實了枸杞葉是地道中藥材，具有悠久的應用歷史。
[0003]近年來，隨著我國枸杞產(chǎn)業(yè)化的發(fā)展，以果用枸杞和野生枸杞為資源，采收其嫩莖葉進行枸杞葉茶開發(fā)，如寧夏枸杞葉茶的加工主要采用果用枸杞寧杞一號的嫩芽、葉，經(jīng)過制茶工藝加工而成。
[0004]枸杞茶的加工技術(shù)一般采用傳統(tǒng)的茶葉加工技術(shù)，其工藝流程為:適時采摘一清洗一萎凋一殺青一揉捻一解塊一制干一包裝。根據(jù)這個工藝制成的茶，茶體清澈碧綠，風味獨特，口感純正，茶味清香，是夏季清暑之佳品。枸杞葉茶不含咖啡因，具有健體安神、通便利尿的作用，老少婦孺皆宜。
[0005]目前我國枸杞葉茶生產(chǎn)上沒有適宜的超高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的專用栽培品種，大多枸杞葉茶生產(chǎn)以果用枸杞和野生枸杞為加工原料。果用枸杞只能在春季適量采摘嫩莖梢，每年4月20日~5月20日為枸杞葉芽最佳采制時間，由于果用枸杞以生產(chǎn)果實為主，過多的采摘嫩莖葉會影響果實的產(chǎn)量，采摘時間也不宜超過5月20日，因此使用果用枸杞生產(chǎn)枸杞葉茶原料，采集時間和采集產(chǎn)量均受到限制。野生枸杞資源越來越少，以野生枸杞資源提供枸杞葉茶生產(chǎn)原料潛力很小。上述兩種枸杞葉茶原料生產(chǎn)途徑，產(chǎn)量難于保障，障礙枸杞葉茶的產(chǎn)業(yè)化開發(fā)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明實施例的目的在于提供一種養(yǎng)生保健枸杞葉茶專用新品種的選育方法、栽培技術(shù)及枸杞葉茶制備方法，旨在解決目前我國枸杞葉茶生產(chǎn)上沒有適宜的超高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的專用栽培品種以及產(chǎn)量難于保障，障礙枸杞葉茶的產(chǎn)業(yè)化開發(fā)的問題。
[0007]本發(fā)明實施例的養(yǎng)生保健枸杞葉茶專用新品種的選育方法為多次誘變選育法，并形成與新品種相應的快速豐產(chǎn)配套栽培技術(shù)，包括以下步驟:
[0008]步驟一，從燕山山麓、環(huán)渤海灣低平原區(qū)廣泛收集野生枸杞種質(zhì)資源，并進行產(chǎn)量、營養(yǎng)品質(zhì)、藥用品質(zhì)、抗病性、抗癭螨鑒定，鑒定出高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗白粉病、抗癭螨病的優(yōu)異種質(zhì)昌選I號、昌選2號、昌選3號，其中昌選I號尤為珍貴；[0009]步驟二，第一次誘變:室溫下用0.05%秋水仙素和2%的二甲基亞砜混合水溶液間歇浸泡昌選I號種子48h，即種子先在藥液中浸泡24h，取出進行有氧呼吸24h，再放入藥液中浸泡24h，然后將處理的種子裸播(促進有氧呼吸)在小拱棚內(nèi)，15°C~16°C (有利于根細胞分化)條件下保濕培養(yǎng)，直至長成幼苗，根據(jù)育種目標對Ml植株進行形態(tài)學鑒定及選擇，選出的優(yōu)異突變體自交，在自交群體中選擇2n卵子與2n精子受精形成的新一代多倍體個體，減少細胞嵌合型，增加多倍體的遺傳穩(wěn)定性；
[0010]步驟三，第二次誘變:將第一次誘變獲得的優(yōu)異突變體的種子按第一次的誘變方法進行第二次誘變，進一步改良第一次誘變突變體的產(chǎn)量、抗病性及品質(zhì)性狀；
[0011]步驟四，第三次誘變:將第二次誘變獲得的優(yōu)異突變體的種子按第一次的誘變方法進行第三次誘變，進一步改良第二次誘變突變體的產(chǎn)量、抗病性及品質(zhì)性狀；
[0012]步驟五，經(jīng)過多代誘變選擇，選育出的突變體染色體倍性優(yōu)勢強大，產(chǎn)量、抗病性、營養(yǎng)品質(zhì)、藥用品質(zhì)不斷得到改良，由第二次誘變?nèi)后w中，選育出超高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗病的枸杞葉茶專用新品種天精3號，第三次誘變?nèi)后w中選育出超高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗病的枸杞葉茶專用新品種天精5號；
[0013]步驟六，采用壓片法進行細胞學觀察；超親優(yōu)勢法、超對照優(yōu)勢法測定多倍體生長優(yōu)勢；病情指數(shù)法進行抗病性鑒定；半微量凱氏法測定粗蛋白含量；索氏提取法測定粗脂肪含量；原子吸收法測定鈣、鉀、鎂、鈉、磷、銅、鐵、錳、鋅、鑰礦質(zhì)元素含量；熒光分光光度法測定硒含量；L-8500A氨基酸分析儀測定氨基酸含量；超聲提取法測定枸杞多糖、黃酮的含量；分光光度計法測定甜菜堿含量；研究證明GM-3-18的花粉母細胞具有48條染色體的細胞為63.2%, 24條染色體的細胞占31.5%，還有其他非整倍體的細胞，為混倍體類型，具有強大的染色體倍性優(yōu)勢，超高產(chǎn)、比對照品種增產(chǎn)103.7，藥用成分、營養(yǎng)成分含量高，高抗白粉病、根腐病，對癭螨病免疫，達到育種目標要求，將GM-3-18定名為天精3號。此外，天精5號表現(xiàn)更為優(yōu)異。
`[0014]為了增加多倍突變體的遺傳穩(wěn)定性，將優(yōu)異突變體自交，在自交群體中選擇2n卵子與2n精子受精形成的新一代多倍體個體，減少嵌合型，增加多倍體的遺傳穩(wěn)定性，選育出的天精3號、天精5號無性繁殖6個世代，沒有發(fā)現(xiàn)無性分離現(xiàn)象，遺傳性穩(wěn)定。
[0015]隨著新品種選育成功，進一步研究其快速豐產(chǎn)配套栽培技術(shù)如下:
[0016]枸杞茶園選擇:選擇地勢平坦，有排灌條件，土壤較肥沃的沙壤、輕壤或中壤土，活土層30cm以上的地塊種植；
[0017]重施有機肥:枸杞葉茶專用品種為多年生木本植物，標準化栽培模式下，扦插密度大，定植后難于再補充有機肥料，要求耕地前667m2重施有機肥20000kg，復合肥50kg，然后深耕松土 ；
[0018]扦插方式與密度:將一年生枝條或半木質(zhì)化嫩枝剪成15cm~20cm莖段，作為插條；平整土地做成平畦，畦寬lm，畦埂寬0.5m,兼做工作道；每畦扦插5行，行株距均0.2m,人工定線開溝，將插條下端輕輕斜插入溝內(nèi)，封土踩實，地上部留Icm~2cm，外露I~2個飽滿芽，667m2扦插11000株,栽植后立即灌水；
[0019]打頂尖及控制采收層:莖段扦插后，在日平均溫度20°C條件下，40d地上部高度達35cm時，進入采收期，結(jié)合采嫩莖葉打頂尖，促進側(cè)芽分生，增加單位面積枝條量，采收層高度控制在35cm,對于老化的高于35cm的枝條及時回頭平巷至35cm ；[0020]肥水管理:枸杞葉茶新品種嫩莖葉，富含蛋白質(zhì)、礦質(zhì)元素，嫩莖葉采收后，消耗大量的營養(yǎng)，應立即補充肥料，667m2施水溶性復合肥15kg或灌溉沼液；
[0021]中耕除草及病蟲害防治:溫室大棚生產(chǎn)枸杞葉茶原料，及時拔除雜草，防治二十八星瓢蟲、負泥蟲、蚜蟲害蟲時，采用煙霧劑殺蟲；
[0022]冬季低溫條件下溫室管理:華北地區(qū)半地下式溫室大棚能夠保證枸杞葉茶新品種正常生長，極端天氣時，可增設電暖氣增溫，并噴灑0.006%農(nóng)用赤霉素促進嫩莖葉生長；
[0023]采收及儲藏:采下的枸杞嫩莖葉可用于制茶，收下的枸杞嫩莖葉放入塑料袋中，在3°C~8°C條件下可安全儲藏IOd~15d。
[0024]本發(fā)明的另一目的在于提供一種養(yǎng)生保健枸杞葉茶的制備方法，該養(yǎng)生保健枸杞葉茶的工藝路線科學合理，包括以下步驟:
[0025]步驟一,適時采摘；采集制茶用的嫩葉，葉寬不超過3.5cm、長不超過6.0cm、要求葉形整齊、色正柔軟無病斑、蟲斑、葉片完整、無斷葉、殘葉，采摘后加工不超過36h，在生長期內(nèi)的上午10時前采摘；
[0026]步驟二，清洗；采回的枸杞葉用清水清洗，洗掉葉面上的塵土和其它污物，浙干表面的水分；
[0027]步驟三，萎凋；鮮葉于28°C ±2°C的室溫下室內(nèi)攤放自然萎凋7h，自然萎凋期間翻動I次~2次；自然萎凋7h可明顯減輕枸杞葉茶的青腥味；
[0028]步驟四，殺青；用蒸汽殺青機100°C殺青Imin ;殺青全程不與水直接接觸，防止枸杞葉養(yǎng)分流失；
[0029]步驟五，揉捻；將殺青達到標準的葉冷卻后放入揉捻機中進行揉捻，首先要均勻地將殺青葉裝入揉捻桶，待開機揉捻的同時，可將殺青葉一把一把從揉捻盤加入，加量為揉搶桶的1/2,微揉IOmin,再加壓輕搶7min~8min反復2次~3次,進行加壓重揉2min~3min,反復2次，即可出機；
[0030]步驟六，解塊；用揉捻機揉捻出來的茶葉80%結(jié)塊，需解塊處理；將茶葉倒入解塊機中進行解塊，解塊機機解2~3遍，對于解塊機機解不完全的結(jié)塊，進行人工解塊，將結(jié)塊全部解開；
[0031]步驟七，過篩；經(jīng)過解塊出來的茶葉中有雜質(zhì)、碎末，用孔徑2mm~3mm的竹篩篩I遍,篩去雜質(zhì)；
[0032]步驟八，制干；使用微波干燥法，最佳干燥功率540W，平鋪厚度1.0cm，烘干時間6min ；
[0033]步驟九，包裝；烘干后的枸杞葉茶，按色、形、味進行分級包裝，裝人塑料袋密封，入庫存放即為成品。
[0034]本發(fā)明提高枸杞葉茶加工品質(zhì)的關(guān)鍵步驟，在步驟一中，采集制茶用的嫩葉，要求葉形整齊、色正柔軟、葉寬不超過3.5cm、長不超過6.0cm、無病斑和蟲斑；在步驟三中，鮮葉于(28±2)°C的室溫下室內(nèi)攤放自然萎凋7h，自然萎凋7h可明顯`減輕枸杞葉茶的青腥味，有利于改良枸杞葉茶的口感；在步驟四中，采用蒸汽殺青機100°c殺青l(xiāng)min。殺青全程不與水直接接觸，因此防止了可溶性物質(zhì)流失，有利于獲得高品質(zhì)的枸杞葉茶。在步驟八中，使用微波干燥法，其最佳干燥功率540W,平鋪厚度1.0cm,烘干時間6min。微波干燥處理的枸杞葉茶色澤較綠，口感較好，營養(yǎng)成分較高。[0035]綜上所述，本發(fā)明關(guān)鍵內(nèi)容概括:①從燕山山麓、環(huán)渤海灣低平原區(qū)廣泛收集野生枸杞種質(zhì)資源，通過資源鑒定，獲得了高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗白粉病、抗癭螨病的優(yōu)異種質(zhì)昌選I號、昌選2號、昌選3號，其中昌選I號尤為珍貴，實現(xiàn)了種質(zhì)資源創(chuàng)新。②對珍貴種質(zhì)資源昌選I號進行連續(xù)誘變，不斷地豐富其染色體數(shù)量變異和結(jié)構(gòu)變異，通過相應的多次選擇，即優(yōu)中選優(yōu)的過程，實現(xiàn)染色體倍性優(yōu)勢及優(yōu)異的結(jié)構(gòu)變異的綜合利用，使突變體的產(chǎn)量、抗病性及品質(zhì)性狀不斷地提高，其綜合性狀水平不斷提高。③本發(fā)明證明連續(xù)誘變及選擇的有效性，通過對昌選I號連續(xù)誘變及選擇，連續(xù)選育出超高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗病的枸杞葉茶專用新品種天精3號、天精5號，填補了國內(nèi)外沒有優(yōu)質(zhì)枸杞葉茶專用品種的空白。④隨著枸杞葉茶新品種的選育成功，研發(fā)了相應的快速豐產(chǎn)栽培技術(shù)，該技術(shù)扦插后40d即可進入采摘期，通過控制采菜層等技術(shù)，實現(xiàn)快速豐產(chǎn)。⑤選育出的枸杞葉茶新品種營養(yǎng)品質(zhì)、藥用品質(zhì)優(yōu)良，加之改良的枸杞葉茶加工工藝，生產(chǎn)出的枸杞葉茶品質(zhì)優(yōu)良。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0036]圖1是本發(fā)明實施例提供的養(yǎng)生保健枸杞葉茶的選育方法流程圖；
[0037]圖2是本發(fā)明實施例提供的養(yǎng)生保健枸杞葉茶的制備方法流程圖。
【具體實施方式】
[0038]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點更加清楚明白，以下結(jié)合實施例，對本發(fā)明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0039]下面結(jié)合附圖及具體實施例對本發(fā)明的應用原理作進一步描述。
[0040]如圖1所示，本發(fā)明實施例的養(yǎng)生保健枸杞葉茶的選育方法包括以下步驟:
[0041]SlOl:首先從燕山`山麓、環(huán)渤海灣低平原區(qū)廣泛收集野生枸杞種質(zhì)資源，并進行產(chǎn)量、質(zhì)量、抗病性、抗癭螨鑒定，獲得了高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗白粉病、抗癭螨病的優(yōu)異種質(zhì)昌選I號、昌選2號、昌選3號，其中昌選I號尤為珍貴，為新品種誘變成功奠定了扎實的遺傳物質(zhì)基礎；
[0042]S102:第一次誘變:室溫下用0.05%秋水仙素和2%的二甲基亞砜混合水溶液間歇浸泡昌選I號種子48h ;即種子先在藥液中浸泡24h，取出進行有氧呼吸24h，再放入藥液中浸泡24h，然后將處理的種子裸播(促進有氧呼吸)在小拱棚內(nèi)，15°C~16°C條件下(有利于根細胞的分化)保濕培養(yǎng)，直至長成幼苗；根據(jù)育種目標對Ml植株進行形態(tài)學鑒定；選出的優(yōu)異突變體自交，在自交群體中選擇2n卵子與2n精子受精形成的新一代多倍體，減少嵌合型，增加多倍體的遺傳穩(wěn)定性；
[0043]S103:第二次誘變:對第一次誘變獲得的優(yōu)異突變體的種子按第一次的誘變方法進行第二次誘變，進一步改良第一次誘變突變體的產(chǎn)量、抗病性及品質(zhì)性狀，由第二次誘變中，選育出超高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗病的枸杞葉茶專用新品種天精3號；
[0044]S104:第三次誘變:將第二次誘變獲得的優(yōu)異突變體的種子按第一次的誘變方法進行第三次誘變，進一步改良第二次誘變的突變體的產(chǎn)量、抗病性及品質(zhì)。第三次誘變中選育出超高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗病的枸杞葉茶專用新品種天精5號；
[0045]S105:經(jīng)過多代誘變選育，突變體的產(chǎn)量、抗病性、品質(zhì)性狀得到明顯提高。[0046]S106:采用壓片法進行細胞學觀察；超親優(yōu)勢法、超對照優(yōu)勢法測定突變體葉面積、葉厚、莖粗、可食部分長度、嫩莖葉鮮重等性狀的生長優(yōu)勢；大區(qū)生產(chǎn)試驗法測定GM-3-18的產(chǎn)量表現(xiàn)；病情指數(shù)法進行抗病性鑒定；半微量凱氏法測定粗蛋白含量；索氏提取法測定粗脂肪含量；
[0047]S107:原子吸收法測定鈣、鉀、鎂、鈉、磷、銅、鐵、錳、鋅、鑰礦質(zhì)元素含量；突光分光光度法測定硒含量；L-8500A氨基酸分析儀測定氨基酸含量；超聲提取法測定枸杞多糖、黃酮的含量；分光光度計法測定甜菜堿含量。
[0048]如圖2所示，本發(fā)明實施例的養(yǎng)生保健枸杞葉茶的制備方法包括以下步驟:
[0049]S201:適時采摘；
[0050]S202:清洗；
[0051]S203:萎凋；
[0052]S204:殺青；
[0053]S205:揉捻；
[0054]S206:解塊；
[0055]S207:制干；
[0056]S208:包裝。
[0057]本發(fā)明養(yǎng)生保健枸杞葉茶的制備工藝流程:適時采摘一清洗一萎凋一殺青一揉捻—解塊一制干一包裝。根據(jù)這個工藝制成的枸杞葉茶，茶體清澈碧綠，口感純正，茶味清香，茶品質(zhì)優(yōu)異，為枸杞葉茶中的上品。
[0058]本發(fā)明的具體步驟為:
[0059]本發(fā)明的養(yǎng)生保健枸杞葉茶專用新品種的選育方法及栽培技術(shù)，包括以下步驟:①從燕山山麓、環(huán)渤海灣低平原區(qū)廣泛收集野生枸杞種質(zhì)資源，并進行產(chǎn)量、營養(yǎng)品質(zhì)、藥用品質(zhì)、抗病性、抗癭螨鑒定，鑒定出高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗白粉病、抗癭螨病的優(yōu)異種質(zhì)昌選I號、昌選2號、昌選3號。其中昌選I號尤為珍貴，是本發(fā)明中養(yǎng)生保健枸杞葉茶專用新品種選育成功的關(guān)鍵因素之一，該種質(zhì)資源不僅在產(chǎn)量、營養(yǎng)品質(zhì)、藥用品質(zhì)、抗病性、抗癭螨等性狀表現(xiàn)優(yōu)良，而且遺傳力強。
[0060]②第一次誘變:室溫下用0.05%秋水仙素和2%的二甲基亞砜混合水溶液間歇浸泡昌選I號種子48h，即種子先在藥液中浸泡24h，取出進行有氧呼吸24h，再放入藥液中浸泡24h，然后將處理的種子裸播(促進有氧呼吸)在小拱棚內(nèi)，15°C~16°C (有利于根細胞分化)條件下保濕培養(yǎng)，直至長成幼苗。根據(jù)育種目標對Ml植株進行形態(tài)學鑒定及選擇，選出的優(yōu)異突變體自交，在自交群體中選擇2n卵子與2n精子受精形成的新一代多倍體個體，減少細胞嵌合型，增加多倍體的遺傳穩(wěn)定性。③第二次誘變:將第一次誘變獲得的優(yōu)異突變體的種子按第一次的誘變方法進行第二次誘變，進一步改良第一次誘變突變體的產(chǎn)量、抗病性及品質(zhì)性狀。④第三次誘變:將第二次誘變獲得的優(yōu)異突變體的種子按第一次的誘變方法進行第三次誘變，進一步改良第二次誘變突變體的產(chǎn)量、抗病性及品質(zhì)性狀。
[0061]經(jīng)過多代誘變選擇，選育出的突變體染色體倍性優(yōu)勢強大，產(chǎn)量、抗病性、營養(yǎng)品質(zhì)、藥用品質(zhì)均明顯提高。本發(fā)明由第二次誘變?nèi)后w中，選育出超高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗病的枸杞葉茶專用新品種天精3號，第三次誘變?nèi)后w中選育出超高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗病的枸杞葉茶專用新品種天精5號。[0062]本發(fā)明采用的具體測試方法:壓片法進行細胞學觀察；超親優(yōu)勢法、超對照優(yōu)勢法測定多倍體生長優(yōu)勢；病情指數(shù)法進行抗病性鑒定；半微量凱氏法測定粗蛋白含量；索氏提取法測定粗脂肪含量；原子吸收法測定鈣、鉀、鎂、鈉、磷、銅、鐵、錳、鋅、鑰礦質(zhì)元素含量；熒光分光光度法測定硒含量；L-8500A氨基酸分析儀測定氨基酸含量；超聲提取法測定枸杞多糖、黃酮的含量；分光光度計法測定甜菜堿含量；研究證明GM-3-18花粉母細胞具有48條染色體的細胞為63.2%,24條染色體的細胞占31.5%，還有其他非整倍體的細胞，為混倍體類型；GM-3-18具有強大的染色體倍性優(yōu)勢，超高產(chǎn)、比對照品種增產(chǎn)103.7，藥用成分、營養(yǎng)成分含量高，高抗白粉病、根腐病，對癭螨病免疫，將GM-3-18定名為天精3號。此外，多倍體天精5號表現(xiàn)更為優(yōu)異。
[0063]為了增加多倍突變體的遺傳穩(wěn)定性，將優(yōu)異突變體自交，在自交群體中選擇2n卵子與2n精子受精形成的新一代多倍體個體，減少嵌合型，增加多倍體的遺傳穩(wěn)定性，研究證實，選育出的天精3號、天精5號無性繁殖6個世代，沒有發(fā)現(xiàn)無性分離現(xiàn)象，遺傳性穩(wěn)定。
[0064]良種良法配套是新品種推廣的重要步驟，枸杞葉茶專用新品種栽培技術(shù)不同于生產(chǎn)果實的品種，快速豐產(chǎn)技術(shù)主要特征如下:
[0065]枸杞茶園選擇:選擇地勢平坦，有排灌條件，土壤較肥沃的沙壤、輕壤或中壤土，活土層30cm以上的地塊種植。
[0066]重施有機肥:枸杞葉茶專用品種為多年生木本植物，標準化栽培模式下，扦插密度大，定植后難于再補充有機肥料，定植前施足有機肥料是枸杞嫩莖葉持續(xù)高產(chǎn)的關(guān)鍵技術(shù)，要求耕地前667m2重施有機肥20000kg，復合肥50kg，然后深耕松土。
[0067]扦插方式與密度:將一年生枝條或半木質(zhì)化嫩枝剪成15cm~20cm莖段，作為插條；平整土地做成平畦，畦寬`lm，畦埂寬0.5m,兼做工作道；每畦扦插5行，行株距均0.2m,人工定線開溝，將插條下端輕輕斜插入溝內(nèi)，封土踩實，地上部留Icm~2cm，外露I~2個飽滿芽，667m2扦插11000株，栽植后立即灌水。
[0068]打頂尖及控制采收層:莖段扦插后，在日平均溫度20°C條件下，40d地上部高度達35cm時，進入采收期，結(jié)合采嫩莖葉打頂尖，促進側(cè)芽分生，增加單位面積枝條量，采收層高度一直控制在35cm左右，對于老化的高于35cm的枝條及時回頭平茬至35cm。
[0069]肥水管理:枸杞葉茶專用品種的嫩莖葉，富含蛋白質(zhì)、礦質(zhì)元素，嫩莖葉采收后，消耗大量的營養(yǎng)，應立即補充肥料，667m2施水溶性復合肥15kg或灌溉沼液。枸杞葉茶專用品種具有良好的耐濕性，生長迅速，需水量大，采收期間保持土壤濕潤。
[0070]中耕除草及病蟲害防治:溫室大棚生產(chǎn)枸杞葉茶原料，應及時拔除雜草，防治二十八星瓢蟲、負泥蟲、蚜蟲等害蟲時，要求采用煙霧劑殺蟲，不提倡葉面噴灑藥劑的方法。
[0071]冬季低溫條件下溫室管理:華北地區(qū)半地下式溫室大棚基本能夠保證枸杞葉茶專用品種的正常生長，極端天氣時，可增設電暖氣增溫，并噴灑0.006%農(nóng)用赤霉素促進嫩莖葉生長。
[0072]采收及儲藏:采下的枸杞嫩莖葉可用于制茶，收下的枸杞嫩莖葉放入塑料袋中，在3°C~8°C條件下可安全儲藏IOd~15d。
[0073]本發(fā)明的養(yǎng)生保健枸杞葉茶的制備方法，包括以下步驟:
[0074]步驟一,適時采摘；采集制茶用的嫩葉，葉寬不超過3.5cm、長不超過6.0cm、要求葉形整齊、色正柔軟無病斑、蟲斑、葉片完整、無斷葉、殘葉，采摘后加工不超過36h。一般在生長期內(nèi)的上午10時前采摘。
[0075]步驟二，清洗；采回的枸杞葉用清水清洗，洗掉葉面上的塵土和其它污物，浙干其表面的水分。
[0076]步驟三，萎凋；鮮葉于(28±2)°C的室溫下室內(nèi)攤放自然萎凋7h，自然萎凋期間翻動I~2次。自然萎凋7h可明顯減輕枸杞葉茶的青腥味，有利于改良枸杞葉茶的口感。
[0077]步驟四，殺青；用蒸汽殺青機100°C殺青l(xiāng)min。殺青全程不與水直接接觸，因此防止了可溶性物質(zhì)流失，有利于獲得高品質(zhì)的枸杞葉茶。
[0078]步驟五，揉捻；將殺青達到標準的葉冷卻后放入揉捻機中進行揉捻，首先要均勻地將殺青葉裝入揉捻桶，以輕松裝滿為宜，待開機揉捻的同時，可將殺青葉一把一把從揉捻盤加入，加量為揉捻桶的1/2為宜。微揉IOmin左右，再加壓輕捻7~8min反復2~3次，進行加壓重揉2~3min,反復2次為宜，即可出機。
[0079]步驟六，解塊；用揉捻機揉捻出來的茶葉80%左右結(jié)塊，需解塊處理。方法是將茶葉倒入解塊機中進行解塊，解塊機機解2~3遍為宜，對于解塊機機解不完全的結(jié)塊，進行人工解塊，將結(jié)塊全部解開。
[0080]步驟七，過篩；經(jīng)過解塊出來的茶葉中有少量雜質(zhì)、碎末，用孔徑2~3_的竹篩篩I遍，篩去雜質(zhì)。
[0081]步驟八，制干；使用微波干燥法，其最佳干燥功率540W，平鋪厚度1.0cm，烘干時間6min。微波干燥處理的枸杞葉茶色澤較綠，口感較好，營養(yǎng)成分較高。
[0082]步驟九，包裝；烘干后的枸杞葉茶，按色、形、味進行分級包裝，裝人塑料袋密封，入庫存放即為成品。
[0083]本發(fā)明提高枸杞葉茶加工品質(zhì)的關(guān)鍵步驟:在步驟一中，采集制茶用的嫩葉，要求葉形整齊、色正柔軟、葉寬不超過3.5cm、長不超過6.0cm、無病斑和蟲斑；在步驟三中，鮮葉于(28±2)°C的室溫下室內(nèi)攤放自然萎凋7h，自然萎凋7h可明顯減輕枸杞葉茶的青腥味，有利于改良枸杞葉茶的口感；在步驟四中，采用蒸汽殺青機100°c殺青l(xiāng)min。殺青全程不與水直接接觸，因此防止了可溶性物質(zhì)流失，有利于獲得高品質(zhì)的枸杞葉茶。在步驟八中，使用微波干燥法，其最佳干燥功率540W,平鋪厚度1.0cm,烘干時間6min。微波干燥處理的枸杞葉茶色澤較綠，口感較好，營養(yǎng)成分較高。
[0084]結(jié)合具體實施例對本發(fā)明的養(yǎng)生保健枸杞葉茶新品種的選育方法做進一步的說明:
[0085]秋水仙素作用機理:秋水仙素是一種劇毒生物堿，最初萃取于秋水仙，秋水仙素最先由法國化學家PS.波列特和卡文頓1820年提取出來(Pelletier PS, Caventon J.Ann.Chim.Phys.1820 ；14:69)，此后研究表明，該物質(zhì)為三環(huán)類的生物堿，分子式為C22H25O6N，呈白色或黃色粉末或針狀結(jié)晶，有劇毒，易溶于冷水、酒精和氯仿，難溶于熱水、乙醚等，有效誘導濃度為0.0006%~1.6%，常被用作多倍體誘導劑，經(jīng)處理的萌發(fā)種子或幼苗細胞染色體數(shù)量會發(fā)生加倍，其誘導加倍的機理與微管、著絲粒的結(jié)構(gòu)和特性有密切關(guān)系；
[0086]微管是廣泛存在于真核細胞中的一種重要細胞結(jié)構(gòu)，細胞分裂中紡錘體就是由微管組成的，微管管壁由13條原絲縱向平行排列構(gòu)成，主要成分為微管蛋白，而微管蛋白分α微管蛋白和β微管蛋白兩種，α微管蛋白和β微管蛋白組成的異二聚體構(gòu)成微管亞單位，若干個異二聚體相接連成原絲，α微管蛋白與β微管蛋白在化學結(jié)構(gòu)上極為相似，兩者相對分子質(zhì)量均為50000，氨基酸數(shù)目分別為450和445個，兩者42%序列相同，其中β微管蛋白肽鏈中第201位為半胱氨酸，為秋水仙素結(jié)合部位，α微管蛋白和β微管蛋白彼此間具有很強的親和力，常呈二聚體形式存在，每一微管蛋白異二聚體上有與秋水仙素結(jié)合部位，如果結(jié)合的部位被其結(jié)合，微管不僅不能繼續(xù)聚合，而且會引起原有微管解聚，故秋水仙素具有干擾微管裝配，破壞紡錘體形成和終止細胞分裂的作用。
[0087]秋水仙素引起植物的變異，不一定為多倍體，還存在大量的非倍性變異，早在1945~1948年，K.捷列什克維丘克利用秋水仙素誘變番茄多倍體時就已經(jīng)發(fā)現(xiàn)大量非倍性突變體的存在，之后，有許多科研工作者也從不同角度提出利用秋水仙素誘變多倍體時部分染色體在臂比、著絲粒位置等方面有明顯的差異，近年研究證明，秋水仙素也能引起細胞核及亞顯微結(jié)構(gòu)的變化，使細胞形態(tài)發(fā)生不可逆變化，導致分生細胞從胚性轉(zhuǎn)向分化，弓丨起胚胎發(fā)生能力喪失，具有分化細胞特征，Ayashi用秋水仙素誘導胡蘿卜的單細胞胚胎發(fā)生率低于無秋水仙素處理的團聚細胞。本發(fā)明的多次誘變方法，旨在獲取染色體多倍化變異及染色體的結(jié)構(gòu)變異。
[0088]通過以下分析對本發(fā)明的實施例使用效果做補充說明:
[0089]1、連續(xù)誘變及選擇對單葉面積、葉厚、莖粗、可食部分長度、莖梢鮮重的影響:
[0090]室溫下用0.05%秋水仙素和2%的二甲基亞砜混合水溶液間歇浸泡昌選I號種子48h，通過形態(tài)鑒定、細胞學鑒定、產(chǎn)量因素選擇，選育出多倍混倍體枸杞新品種天精I號；以天精I號種子為試驗材料，以相同的方法進行第二輪誘變處理，通過形態(tài)鑒定、細胞學鑒定、產(chǎn)量因素選擇，選育出枸杞葉茶專用新品種天精3號；進而以天精3號種子為試驗材料，選育出多倍體枸杞葉茶專用品種天精5號,昌選I號一天精I號一天精3號一天精5號的葉面積、葉厚、莖粗、可食部分長度、莖梢鮮重的比較試驗結(jié)果見表1，由表1可見，連續(xù)誘變除對葉厚影響較小外，單葉面積、嫩梢莖粗、采食嫩梢長度、莖稍鮮重均有顯著的連續(xù)選擇效應，如昌選I號單葉面積8.93cm2，一次誘變處理后，選育出的天精I號的單葉面積32.21cm2,與昌選I比較，生長優(yōu)`勢達260.7 % ；以天精I號為試驗材料，繼續(xù)誘變處理，選育出的枸杞茶專用新品種天精3號葉面積達36.92cm2，與天精I號比較，生長優(yōu)勢達14.6%;以天精3號為誘變材料繼續(xù)誘變及選擇，選育出的枸杞葉茶專用品種天精5號單葉面積達到38.37cm2，與天精3號比較，生長優(yōu)勢達3.9 %，表現(xiàn)出連續(xù)誘變及選擇對單葉面積有不斷增大的趨勢，此外莖粗、嫩梢長度、莖梢鮮重都表現(xiàn)出隨連續(xù)誘變及選擇不斷增大的趨勢，說明連續(xù)誘變可引起連續(xù)變異，并且選擇有效，因此使化學誘變育種具有了累加性效應，即方向性效應，對枸杞葉茶新品種選育十分有利。
[0091]表1連續(xù)誘變對葉面積、葉厚、莖粗、可食部分長度、莖梢鮮重的影響
[0092]
【權(quán)利要求】
1.一種養(yǎng)生保健枸杞葉茶專用新品種的選育方法，其特征在于，該選育方法采用壓片法進行細胞學觀察；超親優(yōu)勢法、超對照優(yōu)勢法測定多倍體生長優(yōu)勢；病情指數(shù)法進行抗病性鑒定；半微量凱氏法測定粗蛋白含量；索氏提取法測定粗脂肪含量；原子吸收法測定鈣、鉀、鎂、鈉、磷、銅、鐵、錳、鋅、鑰礦質(zhì)元素含量；熒光分光光度法測定硒含量；L-8500A氨基酸分析儀測定氨基酸含量；超聲提取法測定枸杞多糖、黃酮的含量；分光光度計法測定甜菜堿含量。
2.如權(quán)利要求1所述的養(yǎng)生保健枸杞葉茶的選育方法，其特征在于，該養(yǎng)生保健枸杞葉茶新品種的選育方法為多次誘變選育法，并形成新品種相應的配套栽培技術(shù)，包括以下步驟: 步驟一，收集野生枸杞種質(zhì)資源，并進行產(chǎn)量、營養(yǎng)品質(zhì)、藥用品質(zhì)、抗病性、抗癭螨鑒定，鑒定出高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗白粉病、抗癭螨病的優(yōu)異種質(zhì)； 步驟二，第一次誘變:室溫下用0.05%秋水仙素和2%的二甲基亞砜混合水溶液間歇浸泡種子48h，即種子先在藥液中浸泡24h，取出進行有氧呼吸24h，再放入藥液中浸泡24h，然后將處理的種子裸播，促進有氧呼吸，在小拱棚內(nèi)，15°C~16°C的飽和濕度條件下培養(yǎng)，直至長成幼苗，根據(jù)育種目標對Ml植株進行形態(tài)學鑒定及選擇，選出的優(yōu)異突變體自交，在自交群體中選擇2n卵子與2n精子受精形成的新一代多倍體個體，減少細胞嵌合型，增加多倍體的遺傳穩(wěn)定性； 步驟三，第二次誘變:將第一次誘變獲得的優(yōu)異突變體的種子按第一次的誘變方法進行第二次誘變，進一步改良第一次誘變突變體的產(chǎn)量、抗病性及品質(zhì)性狀； 步驟四，第三次誘變:將第二次誘變獲得的優(yōu)異突變體的種子按第一次的誘變方法進行第三次誘變，進一步改良第二次誘變突變體的產(chǎn)量、抗病性及品質(zhì)性狀； 步驟五，經(jīng)過多代誘變選擇，選育出的多倍體染色體倍性優(yōu)勢強大，產(chǎn)量、抗病性、營養(yǎng)品質(zhì)、藥用品質(zhì)不斷得到改良，由第二次誘變?nèi)后w中，選育出超高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗病的枸杞葉茶專用新品種，第三次誘變?nèi)后w中選育出超高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗病的枸杞葉茶專用新品種； 步驟六，采用壓片法進行細胞學觀察；超親優(yōu)勢法、超對照優(yōu)勢法測定多倍體生長優(yōu)勢；病情指數(shù)法進行抗病性鑒定；半微量凱氏法測定粗蛋白含量；索氏提取法測定粗脂肪含量；原子吸收法測定鈣、鉀、鎂、鈉、磷、銅、鐵、錳、鋅、鑰礦質(zhì)元素含量；熒光分光光度法測定硒含量；L-8500A氨基酸分析儀測定氨基酸含量；超聲提取法測定枸杞多糖、黃酮的含量；分光光度計法測定甜菜堿含量；研究證明，GM-3-18生長優(yōu)勢強大，超高產(chǎn)，比對照品種增產(chǎn)103.7 ;藥用成分、營養(yǎng)成分含量高；高抗白粉病、根腐病，對癭螨病免疫。
3.如權(quán)利要求1所述的養(yǎng)生保健枸杞葉茶的選育方法，其特征在于，利用了強大的染色體倍性優(yōu)勢及自交法穩(wěn)定多倍體的育種技術(shù)。采用壓片法對GM-3-18的花粉母細胞進行染色體數(shù)量鑒定，具有48條染色體的細胞為63.2%,24條染色體的細胞占31.5%，還有其他非整倍體的細胞，為混倍體類型，并表現(xiàn)強大生長優(yōu)勢。將優(yōu)異突變體自交,在自交群體中選擇2n卵子與2n精子受精形成的新一代多倍體個體，減少嵌合型，增加多倍體的遺傳穩(wěn)定性，選育出的GM-3 -18無性繁殖6個世代，沒有發(fā)現(xiàn)無性分離現(xiàn)象，遺傳性穩(wěn)定。
4.如權(quán)利要求1所述的養(yǎng)生保健枸杞葉茶新品種的栽培技術(shù)，其特征在于，快速豐產(chǎn)栽培技術(shù): 枸杞茶園選擇:選擇地勢平坦，有排灌條件，土壤較肥沃的沙壤、輕壤或中壤土，活土層30cm以上的地塊種植； 重施有機肥:枸杞葉茶專用品種為多年生木本植物，標準化栽培模式下，扦插密度大，定植后難于再補充有機肥料，要求耕地前667m2重施有機肥20000kg，復合肥50kg，然后深耕松土 ； 扦插方式與密度:將一年生枝條或半木質(zhì)化嫩枝剪成15cm~20cm莖段,作為插條；平整土地做成平畦，畦寬lm，畦埂寬0.5m，兼做工作道；每畦扦插5行，行株距均0.2m，人工定線開溝，將插條下端輕輕斜插入溝內(nèi)，封土踩實，地上部留Icm~2cm，外露I~2個飽滿芽，667m2桿插11000株，栽植后立即灌水； 打頂尖及控制采收層:莖段扦插后，在日平均溫度20 V條件下，40d地上部高度達35cm時，進入采收期，此時結(jié)合采嫩莖葉打頂尖，促進側(cè)芽分生，增加單位面積枝條量，采收層高度控制在35cm,對于老化的高于35cm的枝條及時回頭平巷至35cm ； 肥水管理:枸杞葉茶專用品種的嫩莖葉，富含蛋白質(zhì)、礦質(zhì)元素，嫩莖葉采收后，消耗大量的營養(yǎng)，應立即補充肥料，667m2施水溶性復合肥15kg或灌溉沼液； 中耕除草及病蟲害防治:溫室大棚生產(chǎn)枸杞葉茶原料，及時拔除雜草，防治二十八星瓢蟲、負泥蟲、蚜蟲害蟲時，采用煙霧劑殺蟲； 冬季低溫條件下溫室管理:華北地區(qū)半地下式溫室大棚能夠保證枸杞葉茶專用新品種正常生長，極端天氣時，可增設電暖氣增溫，并噴灑0.006%農(nóng)用赤霉素促進嫩莖葉生長；采收及儲藏:采下的枸杞嫩莖葉可用于制茶，收下的枸杞嫩莖葉放入塑料袋中，在3°C~8°C條件下可安全儲藏IOd~15d。
5.一種養(yǎng)生保健枸杞葉茶的制備方法，其特征在于，該養(yǎng)生保健枸杞葉茶的工藝路線科學合理，包括以下步驟: 步驟一，適時采摘；采集制茶用的嫩葉，葉寬不超過3.5cm、長不超過6.0cm、要求葉形整齊、色正柔軟無病斑、蟲斑、葉片完整、無斷葉、殘葉，采摘后加工不超過36h，在生長期內(nèi)的上午10時前采摘； 步驟二，清洗；采回的枸杞葉用清水清洗，洗掉葉面上的塵土和其它污物，浙干表面的水分； 步驟三，萎凋；鮮葉于28°C ±2°C的室溫下室內(nèi)攤放自然萎凋7h，自然萎凋期間翻動I次~2次；自然萎凋7h可明顯減輕枸杞葉茶的青腥味； 步驟四，殺青；用蒸汽殺青機100°C殺青Imin ;殺青全程不與水直接接觸，防止枸杞葉養(yǎng)分流失； 步驟五，揉捻；將殺青達到標準的葉冷卻后放入揉捻機中進行揉捻，首先要均勻地將殺青葉裝入揉捻桶，待開機揉捻的同時，可將殺青葉一把一把從揉捻盤加入，加量為揉捻桶的1/2,微揉IOmin,再加壓輕搶7min~8min反復2次~3次,進行加壓重揉2min~3min,反復2次，即可出機； 步驟六，解塊；用揉捻機揉捻出來的茶葉80%結(jié)塊，需解塊處理；將茶葉倒入解塊機中進行解塊，解塊機機解2~3遍，對于解塊機機解不完全的結(jié)塊，進行人工解塊，將結(jié)塊全部解開； 步驟七，過篩；經(jīng)過解塊出來的茶葉中有雜質(zhì)、碎末，用孔徑2mm~3mm的竹篩篩I遍，篩去雜質(zhì)；步驟八，制干；使用微波干燥法，最佳干燥功率540W，平鋪厚度1.0cm，烘干時間6min ；步驟九，包裝；烘干后的枸杞葉茶，按色、形、味進行分級包裝，裝人塑料袋密封，入庫存放即為成品； 本發(fā)明提高枸杞葉茶加工品質(zhì)的關(guān)鍵步驟，在步驟一中，采集制茶用的嫩葉，要求葉形整齊、色正柔軟、葉寬不超過3.5cm、長不超過6.0cm、無病斑和蟲斑；在步驟三中，鮮葉于(28±2)°C的室溫下室內(nèi)攤放自然萎凋7h，自然萎凋7h可明顯減輕枸杞葉茶的青腥味，有利于改良枸杞葉茶的口感；在步驟四中，采用蒸汽殺青機100°c殺青l(xiāng)min。殺青全程不與水直接接觸，因此防止了可溶性物質(zhì)流失，有利于獲得高品質(zhì)的枸杞葉茶。在步驟八中，使用微波干燥法， 其最佳干燥功率540W,平鋪厚度1.0cm,烘干時間6min。微波干燥處理的枸杞葉茶色澤較綠，口感較好，營養(yǎng)成分較高。
【文檔編號】A23F3/34GK103749289SQ201410009110
【公開日】2014年4月30日 申請日期:2014年1月8日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月8日
【發(fā)明者】王鳳寶 申請人:河北科技師范學院