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      一種促進肌肉細胞中g(shù)lut4基因表達的方法

      文檔序號:470872閱讀:569來源:國知局
      一種促進肌肉細胞中g(shù)lut4基因表達的方法
      【專利摘要】一種促進肌肉細胞中GLUT4基因表達的方法,它涉及一種促進GLUT4基因表達的方法。本發(fā)明是要建立能夠有效提高GLUT4基因表達的方法,尤其是提高肌肉細胞中GLUT4基因表達,進而促進肌肉細胞的葡萄糖吸收的方法。本發(fā)明方法為:首先,將肌肉前驅(qū)細胞(C2C12)進行誘導(dǎo)分化培養(yǎng)成為成熟的肌肉細胞之后,向培養(yǎng)基中添加1~10mmol/L的4-PBA,在溫度是37℃,CO2的體積濃度為5%的細胞培養(yǎng)條件下進行培養(yǎng),培養(yǎng)時間為12~24h,回收細胞。然后,分別檢測肌肉細胞的GLUT4基因表達以及肌肉細胞的葡萄糖吸收變化等情況。本發(fā)明應(yīng)用于降低糖尿病高血糖等科研與臨床應(yīng)用領(lǐng)域。
      【專利說明】—種促進肌肉細胞中GLUT4基因表達的方法
      【技術(shù)領(lǐng)域】
      [0001]本發(fā)明涉及一種促進GLUT4基因表達的方法。
      【背景技術(shù)】
      [0002]4-苯基丁酸(4-phenlybutyrate,4_PBA)是一種小分子化合物,分子式為CltlH12O2,分子量為164(式1.1)。FDA已經(jīng)批準4-PBA應(yīng)用于臨床實驗,但是目前4-PBA只作為一種特殊的氨類清除劑,應(yīng)用于人類尿素循環(huán)障礙的臨床試驗。在治療尿素循環(huán)障礙的過程中,4-PBA作為乙酸苯酯的前體,通過β-氧化形成乙酸苯酯。乙酸苯酯可以與谷氨酰胺結(jié)合形成共軛物苯乙酰谷氨酰胺,將血液中對人體有害的血氨轉(zhuǎn)化成無害的化合物,并通過尿液直接排出到體外。4-ΡΒΑ除了作為氨清除劑外,常作為去乙酰化酶抑制劑和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激抑制劑應(yīng)用于一些疾病的臨床研究。4-ΡΒΑ常被用于研究糖尿病、代謝綜合癥、肥胖癥、癌癥、囊腫性纖維化疾病、阿茲海默癥、帕金森癥和神經(jīng)退行性病變等與HDAC和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激有關(guān)的疾病。Ckcari等人證實4-ΡΒΑ作為化學分子伴侶,可作用于肥胖型糖尿病小鼠,能有效地減少由于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激增強而引起的相關(guān)蛋白的錯誤折疊,使得肥胖型糖尿病小鼠的胰島素抵抗及高血糖得以改善。
      [0003]
      【權(quán)利要求】
      1.一種促進肌肉細胞中GLUT4基因表達的方法,其特征在于它是按照以下步驟進行的:將肌肉細胞進行誘導(dǎo)分化培養(yǎng),在誘導(dǎo)分化培養(yǎng)的第七天,向誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基中添加I~lOmmol/L的4-PBA后,在細胞培養(yǎng)條件為37°C,CO2的體積濃度為5%的條件下進行培養(yǎng),培養(yǎng)時間為12~24h,然后回收細胞,即完成促進肌肉細胞中GLUT4基因表達的方法。
      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促進肌肉細胞中GLUT4基因表達的方法,其特征在于所述的4-PBA添加量為I~8mmol/L。
      3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種促進肌肉細胞中GLUT4基因表達的方法,其特征在于所述的4-PBA添加量為2~7mmol/L。
      4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種促進肌肉細胞中GLUT4基因表達的方法,其特征在于所述的4-PBA添加量為3~7mmol/L。
      5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種促進肌肉細胞中GLUT4基因表達的方法,其特征在于所述的4-PBA添加量為4~Bmmol /I,η
      6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種促進肌肉細胞中GLUT4基因表達的方法,其特征在于所述的4-ΡΒΑ添加量為5mmol/L。
      7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促進肌肉細胞中GLUT4基因表達的方法,其特征在于所述的培養(yǎng)時間為15~24h。
      8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種促進肌肉細胞中GLUT4基因表達的方法,其特征在于所述的培養(yǎng)時間為18~24h。
      9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種促進肌肉細胞中GLUT4基因表達的方法,其特征在于所述的培養(yǎng)時間為20~24h。
      10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的一種促進肌肉細胞中GLUT4基因表達的方法,其特征在于所述的培養(yǎng)時間為22~24h。
      【文檔編號】C12N5/077GK103820384SQ201410076511
      【公開日】2014年5月28日 申請日期:2014年3月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月4日
      【發(fā)明者】顧寧, 胡海龍, 毛軻, 郭倩 申請人:哈爾濱工業(yè)大學
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