一種鑒定鳳梨花粉活力的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種鑒定鳳梨花粉活力的方法，屬于植物花粉活力的鑒定【技術領域】。方法包括(1)培養(yǎng)液的配制；(2)花粉培養(yǎng)的裝置設計；(3)花粉的萌發(fā)培養(yǎng)；(4)萌發(fā)花粉的觀察、統(tǒng)計與選擇等步驟工藝。本發(fā)明具有設備簡單，方法便捷，直觀、準確、可靠的特點。
【專利說明】一種鑒定鳳梨花粉活力的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及植物花粉活力的鑒定【技術領域】，具體涉及一種鑒定鳳梨花粉活力的方法。
【背景技術】
[0002]花粉的采集、貯藏以及對它活力的鑒定是植物雜交育種的重要環(huán)節(jié)，花粉活力的高低大大影響了自交和雜交的成功率。目前鑒定花粉活力的方法已有多種，主要有顯微鏡形態(tài)觀測法、氯化三苯基四氮唑染色法(TTC染色法)和碘-碘化鉀染色法(1-KI染色法)、離體萌發(fā)法等。其中離體萌發(fā)法是測定花粉活力最簡單、可靠的方法。因為花粉萌發(fā)率是衡量花粉生活力狀況的重要指標，同時花粉管的長度在一定程度上也反映了該花粉的生活力狀況。目前用的離體萌發(fā)法均采用固體培養(yǎng)基，需要進行溶液配制、分裝、滅菌、凝固等步驟，過程較麻煩、耗時長，而且必須提前準備。
【發(fā)明內容】
[0003]本發(fā)明目的是，針對現(xiàn)有花粉離體萌發(fā)法存在有固體培養(yǎng)基需提前配制、分裝、滅菌、凝固等步驟，過程麻煩、耗時長等缺陷，提出一種簡單、快速、準確鑒定鳳梨花粉活力的方法。
[0004]本發(fā)明目的通過以下技術方案得以實現(xiàn):
[0005]一種鑒定鳳梨花粉活力的方法，該方法按如下步驟進行:
[0006](I)配制培養(yǎng)液:每10ml蒸懼水中加入20g鹿糖和5-lOmg硼酸,混合均勻并調ph至6.4-6.6后，備用；
[0007](2)在玻璃培養(yǎng)皿中先平臥放置普通載玻片I片，再將培養(yǎng)液倒入培養(yǎng)皿中至剛淹沒載玻片的頂面；
[0008](3)在載玻片上均勻、松散撒上采后保存0_24h的鳳梨花粉后，蓋上玻璃培養(yǎng)皿的蓋子，在20-30°C室溫中靜置2-4小時；
[0009](4)將載玻片放置于20倍顯微鏡下觀察5-7個視野中花粉的萌發(fā)情況，統(tǒng)計獲得花粉的平均萌發(fā)率，篩選出花粉萌發(fā)率在50% -90%以上的批樣花粉。
[0010]本發(fā)明的有益效果是:
[0011]1、本發(fā)明對鳳梨花粉活力的鑒定改常規(guī)的固體培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)法，該培養(yǎng)液的配制簡單，不需要經過滅菌、冷卻、凝固等耗時、復雜的步驟，可隨配隨用；所用的培養(yǎng)皿、載玻片等都是實驗室的常用物品，比較方便；
[0012]2、在培養(yǎng)皿中平臥放置一載玻片，既利于顯微鏡觀察，又可使花粉不致于沉入培養(yǎng)液底部而影響萌發(fā)；
[0013]3、本發(fā)明通過觀察花粉的萌發(fā)情況即可統(tǒng)計、鑒定出鳳梨花粉的活力，具有可靠、直觀、快捷的特點。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0014]圖1鳳梨花粉活力鑒定的裝置示意圖
[0015]其中，1-花粉、2-載玻片、3-玻璃培養(yǎng)皿、4-培養(yǎng)液
[0016]圖2鳳梨花粉活力鑒定裝置的側面示意圖
[0017]其中，1-花粉、2-載玻片、3-玻璃培養(yǎng)皿、4-培養(yǎng)液
【具體實施方式】
[0018]通過以下實施例并結合附圖對本發(fā)明作進一步的詳細描述，但本發(fā)明的內容并不局限于此。
[0019]對實施例所涉試劑和儀器的說明:
[0020]顯微鏡為萊卡公司生產的Leica M205C
[0021]實施例1:
[0022]一種鑒定鳳梨花粉活力的方法，該方法按如下步驟進行:
[0023](I)配制培養(yǎng)液:每10ml蒸懼水中加入20g鹿糖和7.5mg硼酸,混合均勻并調ph至6.4后，備用；
[0024](2)在玻璃培養(yǎng)皿中先平臥放置普通載玻片I片，再將培養(yǎng)液倒入培養(yǎng)皿中至剛淹沒載玻片的頂面；
[0025](3)在載玻片上均勻、松散撒上采后保存5h的鳳梨花粉后，蓋上玻璃培養(yǎng)皿的蓋子，在25°C室溫中靜置3小時；
[0026](4)將載玻片放置于20倍顯微鏡下觀察5個視野中花粉的萌發(fā)情況，統(tǒng)計獲得花粉的平均萌發(fā)率，篩選出花粉平均萌發(fā)率在90%以上的批樣花粉。
[0027]實施例2:
[0028](I)配制培養(yǎng)液:每10ml蒸懼水中加入20g鹿糖和5mg硼酸,混合均勻并調ph至6.5后,備用；
[0029](2)在玻璃培養(yǎng)皿中先平臥放置普通載玻片I片，再將培養(yǎng)液倒入培養(yǎng)皿中至剛淹沒載玻片的頂面；
[0030](3)在載玻片上均勻、松散撒上采后保存14h的鳳梨花粉后，蓋上玻璃培養(yǎng)皿的蓋子，在20°C室溫中靜置4小時；
[0031](4)將載玻片放置于20倍顯微鏡下觀察6個視野中花粉的萌發(fā)情況，統(tǒng)計獲得花粉的平均萌發(fā)率，篩選出花粉萌發(fā)率在75%以上的批樣花粉。
[0032]實施例3:
[0033](I)配制培養(yǎng)液:每10ml蒸懼水中加入20g鹿糖和1mg硼酸,混合均勻并調ph至6.6后，備用；
[0034](2)在玻璃培養(yǎng)皿中先平臥放置普通載玻片I片，再將培養(yǎng)液倒入培養(yǎng)皿中至剛淹沒載玻片的頂面；
[0035](3)在載玻片上均勻、松散撒上采后保存24h的鳳梨花粉后，蓋上玻璃培養(yǎng)皿的蓋子，在30°C室溫中靜置2小時；
[0036](4)將載玻片放置于20倍顯微鏡下觀察7個視野中花粉的萌發(fā)情況，統(tǒng)計獲得花粉的平均萌發(fā)率，篩選出花粉萌發(fā)率在50%以上的批樣花粉。
【權利要求】
1.一種鑒定鳳梨花粉活力的方法，其特征在于該方法按如下步驟進行: (1)配制培養(yǎng)液:每1001111蒸懼水中加入208鹿糖和5-1011?硼酸，混合均勻并調迪至.6.4-6.6后，備用； (2)在玻璃培養(yǎng)皿中先平臥放置普通載玻片1片，再將培養(yǎng)液倒入培養(yǎng)皿中至剛淹沒載玻片的頂面； (3)在載玻片上均勻、松散撒上采后保存0-241！的鳳梨花粉后，蓋上玻璃培養(yǎng)皿的蓋子，在20-301室溫中靜置2-4小時； (4)將載玻片放置于20倍顯微鏡下觀察花粉的萌發(fā)情況和花粉管的長度，并統(tǒng)計、篩選出花粉萌發(fā)率在50% -90%以上的批樣花粉。
【文檔編號】C12Q1/02GK104313107SQ201410502446
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年9月26日 優(yōu)先權日:2014年9月26日
【發(fā)明者】沈曉嵐, 王煒勇, 田丹青, 葛亞英, 俞信英, 潘曉韻, 張智 申請人:浙江省蕭山棉麻研究所