一種螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于飼料添加劑技術(shù)領(lǐng)域，具體是一種螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物 添加劑及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 微量元素是動(dòng)物體必需的營(yíng)養(yǎng)要素之一，直接或間接地參與到機(jī)體幾乎所有的生 理和生化過(guò)程。雖然微量元素在動(dòng)物飼料中的含量極少，但是它們?cè)趧?dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育、生產(chǎn) 繁殖以及抵抗疾病等方面都發(fā)揮著非常重要的作用。
[0003] 微量元素作為飼料添加劑的研究和應(yīng)用一直是動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)課題之 一。目前，市場(chǎng)上的微量元素飼料添加劑主要有微量元素?zé)o機(jī)鹽、微量元素簡(jiǎn)單有機(jī)酸鹽和 微量元素氨基酸螯合物，但是前兩種微量元素添加劑穩(wěn)定性差，易受體內(nèi)PH值、無(wú)機(jī)離子、 有機(jī)大分子等拮抗影響;對(duì)動(dòng)物胃腸刺激性大，會(huì)破壞飼料中的其它營(yíng)養(yǎng)成分;消化吸收率 低，排放的糞便重金屬含量高，對(duì)環(huán)境污染大。微量元素氨基酸螯合物克服了前兩代微量元 素添加劑的缺點(diǎn)，但是由于氨基酸來(lái)源少，成本高，制備技術(shù)不夠成熟，其應(yīng)用受到限制。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的目的是提供一種螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加 劑及其應(yīng)用，旨在以低廉的價(jià)格獲得大量安全穩(wěn)定、易吸收及適口性好的氨基酸小肽微量 元素螯合物添加劑，提高動(dòng)物對(duì)微量元素的吸收利用率，減少環(huán)境污染。
[0005] 實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
[0006] -種螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑，所述螺旋藻氨基酸小肽微量元素 螯合物添加劑的制備方法包括以下步驟：
[0007] a.取20-50份螺旋藻粉于蒸餾水中，攪拌均勻至終濃度為15%~20% (1八)后在-16°C和45°C反復(fù)凍融5次，然后在600W的超聲功率下超聲IOs間隔15s，共超聲90次，隨后將 獲得的溶液于4°C、6000r/min離心40min，得到螺旋藻蛋白上清液；
[0008] b.于上述螺旋藻蛋白上清液中加入2 %~4.5 %的植物蛋白酶或中性蛋白酶進(jìn)行 水解反應(yīng)，期間每隔40-50min攪拌一次；
[0009] 所述植物蛋白酶或中性蛋白酶水解的pH值為5.5~8.0;
[0010]所述植物蛋白酶或中性蛋白酶水解的溫度為45°C~65°C ;
[0011 ]所述植物蛋白酶或中性蛋白酶水解的時(shí)間分別為4h、9h;
[0012] c.將螺旋藻蛋白上清液的水解產(chǎn)物置于98°C恒溫箱中保持25min，使酶失活，然后 在3500r/min離心30min，收集澄清提取物，即得螺旋藻氨基酸小肽混合物；
[0013] d.按重量份稱(chēng)取微量元素?zé)o機(jī)鹽6-15份，將其用l-60°c的水完全溶解后倒入螺旋 藻氨基酸小肽混合物中，攪拌均勻后放入恒溫箱中反應(yīng)2.5-5小時(shí)，期間每隔35-50min攪拌 一次，即得螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物；
[0014] e .按重量份稱(chēng)取植物類(lèi)飼料6-15份，粉碎，過(guò)40-60目篩，將篩下物加入到螺旋藻 氨基酸小肽微量元素螯合物中，充分?jǐn)嚢韬蠓湃?00-120°C的烘干機(jī)直至內(nèi)部水分含量低 于15%，然后粉粹至粒度為80目，即得本發(fā)明螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑。
[0015] 螺旋藻是藍(lán)藻門(mén)顫藻科螺旋藻屬的一類(lèi)低等原核生物，喜堿性環(huán)境，不易受雜藻、 菌物及原生動(dòng)物污染，易養(yǎng)殖。具有防病毒、抗癌、抗氧化和增強(qiáng)免疫等生理功能，營(yíng)養(yǎng)豐 富，其中蛋白質(zhì)是其最主要的營(yíng)養(yǎng)成分，高達(dá)干重的60%~70%，是目前已知植物中蛋白質(zhì) 含量最尚的一種。同時(shí)螺旋澡對(duì)鈣、梓、鐵、鵬等微量兀素具有很強(qiáng)的富集能力，對(duì)錯(cuò)和砸的 有機(jī)化程度高達(dá)94.8%和93.5 %。螺旋藻蛋白質(zhì)中很多生物活性肽常以非活性狀態(tài)存于其 中，并且在加工過(guò)程中螺旋藻蛋白質(zhì)易變性，若將其水解，不僅可以提高它的溶解性能，而 且能釋放出隱藏于其中的活性肽，發(fā)揮比原有蛋白更多的生物活性。
[0016] 進(jìn)一步的，所述螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑的制備方法中步驟d的 微量元素?zé)o機(jī)鹽為硝酸硒、硝酸錳或硝酸亞鐵。
[0017] 進(jìn)一步的，所述螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑的制備方法中步驟e的 植物類(lèi)飼料為甘薯粉、米糠或椰子柏(餅)。
[0018] 本發(fā)明的另一個(gè)技術(shù)方案為提供上述螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑 在飼料中的應(yīng)用。
[0019] 進(jìn)一步的，所述飼料為鴨飼料、雞飼料或鵝飼料。
[0020] 本發(fā)明提供的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物可以借助小分子肽依賴(lài)于腸粘 膜細(xì)胞膜上的載體蛋白的主動(dòng)運(yùn)輸而被吸收利用，這種方式是機(jī)體吸收金屬離子的主要形 式，吸收快、不易飽和、耗能低，且不與氨基酸的吸收相競(jìng)爭(zhēng)，同時(shí)小肽本身易消化吸收，能 加快動(dòng)物生長(zhǎng)，提高動(dòng)物的免疫力和抗應(yīng)急能力。
[0021] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明技術(shù)方案的有益效果為：
[0022] 1.利用易繁殖的螺旋藻作為氨基酸小肽源，成本低，安全性好。
[0023] 2.螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物具有氨基酸特有的香味，適口性好。
[0024] 3.食用螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物飼料添加劑能提高動(dòng)物對(duì)微量元素的 吸收利用率，降低糞便高金屬殘留量對(duì)環(huán)境造成的污染。
[0025] 4.食用螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物飼料添加劑能提高動(dòng)物的免疫力。
[0026] 5.將螺旋藻蛋白質(zhì)酶解成氨基酸小肽，克服螺旋藻蛋白質(zhì)在加工過(guò)程中易變性的 問(wèn)題，促進(jìn)螺旋藻蛋白質(zhì)的利用率。
【具體實(shí)施方式】
[0027]下面結(jié)合實(shí)施例詳述本發(fā)明。
[0028] 下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。
[0029] 下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無(wú)特殊說(shuō)明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0030] 下述螺旋藻粉購(gòu)于購(gòu)于河南盛之德商貿(mào)有限公司，超聲波破碎儀購(gòu)于深圳市欣禾 興電子有限公司，離心機(jī)購(gòu)于上?；C(jī)械廠(chǎng)有限公司，蛋白酶購(gòu)于鄭州荔諾生物科技有 限公司，恒溫箱購(gòu)于東莞市劍喬試驗(yàn)設(shè)備有限公司，烘干機(jī)購(gòu)于廣州東奧電氣有限公司。
[0031] 實(shí)施例1
[0032] a.取20份螺旋藻粉于蒸餾水中，攪拌均勻至終濃度為15%(W/V)后在-16°C和45°C 反復(fù)凍融5次，然后在600W的超聲功率下超聲IOs間隔15s，共超聲90次，隨后將獲得的溶液 于4°C、6000r/min離心40min，得到螺旋藻蛋白上清液；
[0033] b.調(diào)節(jié)上述螺旋藻蛋白上清液pH值至5.5,升溫至45°C，加入2%的植物蛋白酶水 解4h，期間每隔40min攪拌一次；
[0034] c.將螺旋藻蛋白上清液的水解產(chǎn)物置于98°C恒溫箱中保持25min，使酶失活，然后 在3500r/min離心30min，收集澄清提取物，即得螺旋藻氨基酸小肽混合物；
[0035] d.按重量份稱(chēng)取微量元素?zé)o機(jī)鹽硝酸硒6份，將其用1°C的水完全溶解后倒入螺旋 藻氨基酸小肽混合物中，攪拌均勻后放入恒溫箱中反應(yīng)2.5h，期間每隔35min攪拌一次，即 得螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物；
[0036] e .按重量份稱(chēng)取甘薯粉6份，粉碎，過(guò)40目篩，將篩下物加入到螺旋藻氨基酸小肽 微量元素螯合物中，充分?jǐn)嚢韬蠓湃?00°C的烘干機(jī)直至內(nèi)部水分含量低于15%，然后粉粹 至粒度為80目，即得本發(fā)明螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑。
[0037] 實(shí)施例2
[0038] a.取35份螺旋藻粉于蒸餾水中，攪拌均勻至終濃度為17%(W/V)后在-16°C和45°C 反復(fù)凍融5次，然后在600W的超聲功率下超聲IOs間隔15s，共超聲90次，隨后將獲得的溶液 于4°C、6000r/min離心40min，得到螺旋藻蛋白上清液；
[0039] b.調(diào)節(jié)上述螺旋藻蛋白上清液pH值至7.8,升溫至55°C，加入3.2%的中性蛋白酶 水解9h，期間每隔45min攪拌一次；
[0040] C.將螺旋藻蛋白上清液的水解產(chǎn)物置于98°C恒溫箱中保持25min，使酶失活，然后 在3500r/min離心30min，收集澄清提取物，即得螺旋藻氨基酸小肽混合物；
[0041] d.按重量份稱(chēng)取微量元素?zé)o機(jī)鹽硝酸錳10份，將其用30°C的水完全溶解后倒入螺 旋藻氨基酸小肽混合物中，攪拌均勻后放入恒溫箱中反應(yīng)3.8h，期間每隔40min攪拌一次， 即得螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物；
[0042] e.按重量份稱(chēng)取米糠10份，粉碎，過(guò)50目篩，將篩下物加入到螺旋藻氨基酸小肽微 量元素螯合物中，充分?jǐn)嚢韬蠓湃?10°c的烘干機(jī)直至內(nèi)部水分含量低于15%，然后粉粹至 粒度為80目，即得本發(fā)明螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑。
[0043] 實(shí)施例3
[0044] a.取50份螺旋藻粉于蒸餾水中，攪拌均勻至終濃度為20%(W/V)后在-16°C和45°C 反復(fù)凍融5次，然后在600W的超聲功率下超聲IOs間隔15s，共超聲90次，隨后將獲得的溶液 于4°C、6000r/min離心40min，得到螺旋藻蛋白上清液；
[0045] b.調(diào)節(jié)上述螺旋藻蛋白上清液pH值至8.0，升溫至65°C，加入4.5 %的中性蛋白酶 水解9h，期間每隔50min攪拌一次；
[0046] c.將螺旋藻蛋白上清液的水解產(chǎn)物置于98°C恒溫箱中保持25min，使酶失活，然后 在3500r/min離心30min，收集澄清提取物，即得螺旋藻氨基酸小肽混合物；
[0047] d.按重量份稱(chēng)取微量元素?zé)o機(jī)鹽硝酸亞鐵15份，將其用60°C的水完全溶解后倒入 螺旋藻氨基酸小肽混合物中，攪拌均勻后放入恒溫箱中反應(yīng)5h，期間每隔50min攪拌一次， 即得螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物；
[0048] e.按重量份稱(chēng)取椰子柏15份，粉碎，過(guò)60目篩，將篩下物加入到螺旋藻氨基酸小肽 微量元素螯合物中，充分?jǐn)嚢韬蠓湃?20°C的烘干機(jī)直至內(nèi)部水分含量低于15%，然后粉粹 至粒度為80目，即得本發(fā)明螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑。
[0049] 含實(shí)施1制得的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑的鴨飼料:玉米60.7%、 麩皮12.8%、豆柏13.2%、棉籽餅3.5%、菜籽餅3.5%、魚(yú)粉3.5%、石粉0.4%、骨粉1.6%、 食鹽0.3%、0.5%實(shí)施1制得的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑。
[0050] 普通鴨飼料:玉米60.7 %、麩皮12.8 %、豆柏13.2 %、棉籽餅3.5 %、菜籽餅3.5 %、 魚(yú)粉3.5%、石粉0.4%、骨粉1.6%、食鹽0.3%、0.5%甘薯粉與硝酸硒的混合物。
[0051 ] 實(shí)施例4
[0052]隨機(jī)挑選品種、大小、食性相同的鴨30只，分成2組，早晚分別喂食含實(shí)施1制得的 螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑的鴨飼料和普通鴨飼料，待鴨取食完后，分別稱(chēng) 量鴨飼料的剩余量，連續(xù)稱(chēng)量14次即1周，取平均值，結(jié)果見(jiàn)表1。
[0053] 表1鴨飼料剩余量統(tǒng)計(jì)表

[0055]從表1可知普通鴨飼料的平均剩余量202g，遠(yuǎn)大于含實(shí)施例1制得添加劑鴨飼料的 剩余量53g，說(shuō)明含實(shí)施1制得的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑的鴨飼料具有更 好的適口性。
[0056]含實(shí)施2制得的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑的雞飼料:玉米58.5%， 粗蛋白13.5%，麩皮3.0%，豆柏14.0%，魚(yú)粉2.0%，玉米蛋白粉4.0%，酵母粉2.0%，磷酸 氫鈣1.2%，石粉1.0%，食鹽0.3%，0.5%含實(shí)施2制得的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合 物添加劑。
[0057] 普通雞飼料:玉米60.7%、麩皮12.8%、豆柏13.2%、棉籽餅3.5%、菜籽餅3.5%、 魚(yú)粉3.5%、石粉0.4%、骨粉1.6%、食鹽0.3%、0.5%米糠與硝酸錳的混合物。
[0058] 實(shí)施例5
[0059] 隨機(jī)挑選品種、大小、食性相同的雞30只，分成2組，早晚分別喂食含實(shí)施2制得的 螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑的雞飼料和普通雞飼料，每天收集雞糞檢測(cè)其微 量元素錳的殘留量，連續(xù)檢測(cè)10次，取平均值，結(jié)果見(jiàn)表2。
[0060] 表2雞糞中微量元素錳殘留量統(tǒng)計(jì)表

[0063]從表2可知喂食含實(shí)施例2所得添加劑的雞飼料的錳殘留量10.52ppm遠(yuǎn)低于喂食 普通雞飼料的錳殘留量45.17ppm，表明用螺旋藻氨基酸小肽螯合微量元素，能提高雞對(duì)微 量元素的利用率，減少微量元素的糞便殘留。
[0064] 實(shí)施例6
[0065] 含實(shí)施3制得的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑的鵝飼料:秸桿生物飼 料70 %，骨粉1 %，豆餅5 %，魚(yú)粉3.1 %，玉米粉15 %，麩皮3.5 %，食鹽0.4 %，貝殼粉2 %，含 實(shí)施3制得的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑1 %。
[0066] 普通飼料:秸桿生物飼料70%，骨粉1 %，豆餅5%，魚(yú)粉3.1 %，玉米粉15%，麩皮 3.5 %，食鹽0.4%，貝殼粉2 %，椰子柏與硝酸亞鐵的混合物1 %。
[0067]隨機(jī)挑選品種、大小、食性相同的鵝30只，分成2組，早晚分別喂食含實(shí)施3制得的 螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑的鴨飼料和普通鵝飼料，喂食半年，期間統(tǒng)計(jì)各 組鵝生病的次數(shù)。
[0068]表3半年內(nèi)鵝生病次數(shù)統(tǒng)計(jì)表

[0070] 從表3可知喂食含實(shí)施例3制得添加劑鵝飼料的鵝半年內(nèi)才生病1次，而喂食普通 鵝飼料的鵝半年內(nèi)卻生病了4次，由此可見(jiàn)含本發(fā)明螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添 加劑的飼料能夠提高動(dòng)物的免疫力。
[0071] 以上實(shí)施例僅僅是本發(fā)明的兩個(gè)實(shí)施例，但本發(fā)明并非局限于此。基于本發(fā)明中 的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有做出任何創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下所得到的所有其它實(shí) 施方式，都屬于本發(fā)明所保護(hù)的范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑，其特征在于，所述螺旋藻氨基酸小 肽微量元素螯合物添加劑的制備方法包括以下步驟： a. 取20-50份螺旋藻粉于蒸餾水中，攪拌均勻至終濃度為15%~20% (W/V)后在-16°C 和45 °C反復(fù)凍融5次，然后在600W的超聲功率下超聲10s間隔15s，共超聲90次，隨后將獲得 的溶液于4°C、6000r/min離心40min，得到螺旋藻蛋白上清液； b. 于上述螺旋藻蛋白上清液中加入2%~4.5%的植物蛋白酶或中性蛋白酶進(jìn)行水解 反應(yīng)，期間每隔40-50min攪拌一次； 所述植物蛋白酶或中性蛋白酶水解的pH值為5.5~8.0; 所述植物蛋白酶或中性蛋白酶水解的溫度為45°C~65°C ; 所述植物蛋白酶或中性蛋白酶水解的時(shí)間分別為4h、9h; c. 將螺旋藻蛋白上清液的水解產(chǎn)物置于98°C恒溫箱中保持25min，使酶失活，然后在 3500r/min離心30min，收集澄清提取物，即得螺旋藻氨基酸小肽混合物； d. 按重量份稱(chēng)取微量元素?zé)o機(jī)鹽6-15份，將其用1-60°C的水完全溶解后倒入螺旋藻氨 基酸小肽混合物中，攪拌均勻后放入恒溫箱中反應(yīng)2.5-5小時(shí)，期間每隔35-50min攪拌一 次，即得螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物； e .按重量份稱(chēng)取植物類(lèi)飼料6-15份，粉碎，過(guò)40-60目篩，將篩下物加入到螺旋藻氨基 酸小肽微量元素螯合物中，充分?jǐn)嚢韬蠓湃雔〇〇_120°C的烘干機(jī)直至內(nèi)部水分含量低于 15%，然后粉粹至粒度為80目，即得本發(fā)明螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑，其特征在于，所述 螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑的制備方法中步驟d的微量元素?zé)o機(jī)鹽為硝酸 硒、硝酸錳或硝酸亞鐵。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑，其特征在于，所 述螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑的制備方法中步驟e的植物類(lèi)飼料為甘薯粉、 米糠或椰子柏(餅）。4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑在飼料中的 應(yīng)用。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述飼料為鴨飼料、雞飼料或鵝飼料。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑及其應(yīng)用。該添加劑以螺旋藻為氨基酸小肽源，首先通過(guò)反復(fù)凍融加超聲破碎的方法提取螺旋藻蛋白，接著酶解螺旋藻蛋白并將酶解液依次與微量元素?zé)o機(jī)鹽、植物類(lèi)飼料混合，烘干即得螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加劑。充分利用易繁殖的螺旋藻，安全，成本低，適口性好，提高動(dòng)物對(duì)微量元素利用率的同時(shí)增強(qiáng)其免疫力，降低了糞便重金屬殘留量大對(duì)環(huán)境造成的污染。
【IPC分類(lèi)】A23K20/147, A23K50/75, A23K20/20
【公開(kāi)號(hào)】CN105707471
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610136948
【發(fā)明人】楊廣群, 曹麗萍
【申請(qǐng)人】廣州聚注專(zhuān)利研發(fā)有限公司