專利名稱：水解蛋白質(zhì)的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種水解蛋白質(zhì)的方法，由此方法獲得的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物以及含有此蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的食品和非食品。
水解蛋白質(zhì)的方法在例如英國(guó)專利1,507,380，美國(guó)專利3,723,250以及國(guó)際專利申請(qǐng)?zhí)朩O89/00272，WO92/13964和WO90/05462中已有描述。
需要導(dǎo)致高蛋白質(zhì)水解度和具有極好感官特性的水解產(chǎn)物的水解蛋白質(zhì)的方法。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，得自米曲霉并由Novo Nordisk A/S以商品名FlavourzymeTM提供的蛋白水解酶制品具有極好的蛋白質(zhì)水解性能，例如，可能達(dá)到高水解度，得到不帶苦味的水解產(chǎn)物。
本發(fā)明相應(yīng)地提出一種通過(guò)與得自米曲霉并由Novo NordiskA/S，Denmark以商品名FlavourzymeTM提供的蛋白水解制品共同保溫而水解蛋白質(zhì)的方法。
在其第二方面，本發(fā)明提出了由本發(fā)明的方法獲得的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物。
本發(fā)明進(jìn)一步提出了含有本發(fā)明的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的食品和非食品產(chǎn)物。
參考附圖進(jìn)一步闡述本發(fā)明，其中


圖1表示通過(guò)在pH5至pH9的pH范圍內(nèi)將本發(fā)明的方法應(yīng)用于酪蛋白酸鈉而得到的水解度(％DH)對(duì)水解時(shí)間(小時(shí))的關(guān)系(■pH5，▲pH6，○pH7，□pH8，●pH9)；圖2表示按本發(fā)明的方法水解22小時(shí)后的大豆蛋白分離物的水解度(％DH)(■FlavourzymeTM，▲CorolaseTM7092，◇CorolaseTM7093，◆AlcalaseTM，□NeutraseTM)；圖3表示按本發(fā)明的方法水解22小時(shí)后的酪蛋白酸鈉的水解度(％DH)(■FlavourzymeTM，▲CorolasTM7092，◇CorolaseTM7093，◆AlcalaseTM，□NeutraseTM)。
FlavourzymeTM的特征表明，得自米曲霉的蛋白水解制品含有一些蛋白水解成分。該制品似乎含有五種或更多種蛋白水解酶成分，其中每種成分可以具有下面任何大致分子量23kD，27kD，31kD，32kD，35kD，38kD，42kD，47kD，53kD和100kD。
本發(fā)明相應(yīng)地提出一種通過(guò)與蛋白水解酶制品共同保溫而水解蛋白質(zhì)的方法。該蛋白水解酶制品得自米曲霉且至少含有五種蛋白水解成分，這些蛋白水解成分分別具有選自23kD，27kD，31kD，32kD，35kD，38kD，42kD，47kD，53kD和100kD的大致分子量。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，蛋白質(zhì)與蛋白水解制品共同保溫。該蛋白水解制品得自米曲霉，至少含有五種蛋白水解成分。這些蛋白水解成分分別具有大致分子量23kD，31kD，35kD，38kD和53kD。
以此領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的方式通過(guò)使用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS—PAGE)測(cè)定蛋白水解制品中蛋白酶成分的分子量。用這種方法測(cè)定出每種蛋白酶成分的分子量。
本發(fā)明的方法可以完成蛋白質(zhì)的高度水解。本方法產(chǎn)生不帶苦味的水解產(chǎn)物和具有顯著湯味/肉味的水解產(chǎn)物。
可以用所達(dá)到的水解度確定蛋白質(zhì)水解的程度。在本發(fā)明的上下文中，水解度(DH)是由下式定義的 可以根據(jù)Adler—Nissen；Enzymic Hydrolysis of FoodProteins；Elsvier Applied Science Publishers Ltd.(1986)，P.122的方法計(jì)算DH。
通過(guò)采用本發(fā)明的方法，可能達(dá)到高于35％的DH，優(yōu)選高于60％，更優(yōu)選高于70％，最優(yōu)選高于80％。
通過(guò)本發(fā)明的方法也可能達(dá)到很高的蛋白質(zhì)溶解度。可以通過(guò)Adler—Nissen在所引的書(shū)中描述的蛋白質(zhì)溶解度系數(shù)(PSI)來(lái)描述蛋白質(zhì)的溶解度。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，蛋白質(zhì)溶解度可達(dá)到高于50％PSI，優(yōu)選高于70％PSI，更優(yōu)選高于90％PSI。
可便利地用本發(fā)明方法水解的蛋白質(zhì)或蛋白原料可以是任何植物蛋白象大豆蛋白，谷物蛋白如小麥谷蛋白或玉米蛋白，菜籽蛋白，苜蓿蛋白，豌豆蛋白，蠶豆蛋白，棉籽蛋白或芝麻籽蛋白，或者是任何動(dòng)物蛋白或蛋白原料象牛乳蛋白質(zhì)，乳清蛋白質(zhì)，酪蛋白，肉蛋白，魚(yú)蛋白，血蛋白，蛋清或明膠。
為獲得令人滿意的水解度，可適當(dāng)?shù)叵虻鞍踪|(zhì)或蛋白原料加入蛋白質(zhì)量為0.05—15AU/100g蛋白質(zhì)，優(yōu)選0.1—8AU/100g蛋白質(zhì)的蛋白水解酶。
保溫可在pH為約4和約10之間進(jìn)行，優(yōu)選在約5和約10之間。如實(shí)施例2中所示，即使在極端pH條件下即pH在5至9的全部范圍內(nèi)，本發(fā)明的方法也可很好地進(jìn)行。
在任何不會(huì)使酶制品失活的方便的溫度下，即在從約20℃至約70℃的范圍內(nèi)，可以進(jìn)行保溫。
按照常規(guī)作法，通過(guò)將保溫混合物的溫度升至高于約70℃或?qū)⒈鼗旌衔锏膒H降至低于約4.0可適當(dāng)?shù)厥沟鞍姿饷钢破肥Щ睢?br> 而在另一優(yōu)選的實(shí)施例中，蛋白質(zhì)或蛋白基質(zhì)的保溫可與FlavourzymeTM和一種或多種其它蛋白酶制品的混合物一同進(jìn)行。
優(yōu)選的蛋白酶制品包括中性或堿性蛋白酶。合適的中性蛋白酶的例子是得自芽孢桿菌的中性蛋白酶，優(yōu)選得自枯草桿菌的中性蛋白酶，例如由Novo Nordisk，Denmark以商品名NeutraseTM提供的酶制品。合適的堿性蛋白酶的例子是得自芽孢桿菌的堿性蛋白酶，優(yōu)選得自地衣芽孢桿菌的堿性蛋白酶，例如由Novo Nordisk，Denmark以商品名AlcalaseTM提供的含有枯草桿菌蛋白酶A(Substilisin Carlsberg)作為活性成分的堿性蛋白酶。
本發(fā)明的方法中所進(jìn)行的保溫也可與FlavourzymeTM和一種或多種其它脂肪酶制品的混合物一同進(jìn)行。
優(yōu)選的脂肪酶制品包括真菌脂肪酶。合適的真菌脂肪酶的例子是得自毛霉的脂肪酶，優(yōu)選得自Rhizomucor miehei的脂肪酶，例如由Novo Nordisk，Denmark以商品名PalataseTMM提供的酶制品；和得自曲霉的脂肪酶，優(yōu)選得自黑曲霉的脂肪酶，例如由Novo Nordisk，Denmark以商品名PalaiaseTMA提供的酶制品。
另一方面，本發(fā)明提供了由本發(fā)明的方法獲得的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物。AU的確定用血紅蛋白作底物可以確定蛋白質(zhì)水解活性。
在用于確定蛋白質(zhì)水解活性的Anson—血紅蛋白方法中，變性的血紅蛋白被消化，未消化的血紅蛋白用三氯醋酸(TCA)沉淀。用酚試劑確定TCA可溶性產(chǎn)物的量，酚試劑遇酪氨酸和色氨酸產(chǎn)生藍(lán)色。
一個(gè)Anson單位定義為，標(biāo)準(zhǔn)條件(即25℃，pH7.5和10分鐘反應(yīng)時(shí)間)下以初始速度消化血紅蛋白的酶量，該酶量使每分鐘釋放的TCA可溶性產(chǎn)物遇酚試劑可產(chǎn)生和一毫當(dāng)量酪氨酸遇酚試劑相同的顏色。
更為詳盡地描述該分析方法的folder AF4/5可購(gòu)自NovoNordisk A/S，DK—2880 Bagsvaerd，Denmark，根據(jù)需求通過(guò)參考包括在內(nèi)。LU的確定脂肪酶活性的分析通過(guò)以阿拉伯樹(shù)膠作乳化劑乳化甘油三丁酸酯(MERCK)來(lái)制備脂肪酶的底物。
在pH7下用pH控制(pH stat)方法分析脂肪酶活性。一個(gè)脂肪酶活性單位(LU/mg)定義為每分鐘釋放一微摩爾脂肪酸所需脂肪酶的量。步驟1—離子發(fā)酵上清液，廢棄沉淀物。調(diào)節(jié)上清液pH至7，逐步加入等體積的96％冷乙醇。使混合物在冰浴中靜置30分鐘。離心并廢棄沉淀物。步驟2—離子交換色譜法。過(guò)濾上清液，加到用pH7的50mM tris—醋酸鹽緩沖液平衡過(guò)的DEAE一高速(Pharmacia TM)柱上。用同種緩沖液洗柱直到280nm下的吸收低于0.05OD。用五倍柱體積的同種緩沖液中的線性鹽梯度(0至0.5M NaCl)洗脫未結(jié)合的酶活性。將含有酶活性的級(jí)分合并在一起。步驟3—疏水色譜法。通過(guò)加入固體乙酸銨將含有酶活性的池的摩爾濃度調(diào)至0.8M。把酶加到用0.8M乙酸銨預(yù)平衡過(guò)的TSK凝膠Butyl—Toyopearl 650C柱上。用0.8M乙酸銨洗未結(jié)合的原料，用蒸餾水洗脫結(jié)合的原料。步驟4—用水稀釋含有脂肪酶活性的池，以調(diào)節(jié)電導(dǎo)至2ms，pH至7。將池加到用pH7的50mM tris—醋酸鹽緩沖液預(yù)平衡過(guò)的高效Q瓊脂糖凝膠(Pharmacia)柱上。用線性鹽梯度洗脫結(jié)合的酶。食品在更深入的方面，本發(fā)明涉及含有本發(fā)明的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的食品。
食品中加入的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的典型量在1—30％(重量)范圍內(nèi)。
本發(fā)明的一種重要食品是嬰兒用母乳代用品的一種配料。由于通過(guò)本發(fā)明的方法達(dá)到的高水解度，本發(fā)明的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物可便利地加入到母乳代用品中，該水解產(chǎn)物具有比未水解的牛乳蛋白質(zhì)低得多的過(guò)敏性。母乳代用品可用與有關(guān)此類產(chǎn)品的在先文獻(xiàn)中所述方法基本相同的方法(參見(jiàn)例如歐洲專利申請(qǐng)322,589)配制，只是用本發(fā)明的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物代替已有產(chǎn)品中所含蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物。
本發(fā)明的食品還可包括本發(fā)明的用作蛋白質(zhì)添加劑或給食品提供其它特性的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物。因此，食品中添加的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物例如可以以用本發(fā)明的方法處理碎骨而從骨頭得到的肉或肉下腳料(例如，所謂的機(jī)械回收的肉，即屠宰場(chǎng)里已從動(dòng)物屠體上割掉成塊的肉后骨頭上所殘留的肉。有關(guān)此一般過(guò)程的更為詳細(xì)的描述可參見(jiàn)申請(qǐng)人共同未決的國(guó)際專利申請(qǐng)WO90/05462)為基準(zhǔn)。也可使用來(lái)自肉加工工業(yè)的其它蛋白質(zhì)副產(chǎn)品。
得到的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物可以再適當(dāng)?shù)靥砑拥饺榛忸愂称?，例如香腸或餡餅中，或者在湯或其它食品中作為風(fēng)味成分。
一種通過(guò)本發(fā)明的方法從牛乳得到的食品是優(yōu)選的一種干酪味產(chǎn)品。令人驚奇的是，牛乳蛋白的高度水解產(chǎn)生具有非常獨(dú)特干酪味的風(fēng)味化合物。本發(fā)明的這些干酪味產(chǎn)品在小吃產(chǎn)品、仿制干酪產(chǎn)品中有應(yīng)用，或者作為一般的干酪增味劑。采用如常規(guī)應(yīng)用中所用脂肪酶調(diào)整干酪味。
用于生產(chǎn)作為風(fēng)味產(chǎn)品的水解植物蛋白(HVP)的傳統(tǒng)方法是根據(jù)高溫下在鹽酸中長(zhǎng)時(shí)間蒸煮。已知這會(huì)引起不希望的含氯化合物的形成?，F(xiàn)在可能通過(guò)本發(fā)明的方法得到酶法生產(chǎn)的HVP產(chǎn)品，這些HVP產(chǎn)品被認(rèn)為是更好的保健食品。用本發(fā)明的方法可達(dá)到的高DH能產(chǎn)生所需的風(fēng)味特性和風(fēng)味增強(qiáng)性質(zhì)。
鑒于通過(guò)本發(fā)明的方法得到不帶苦味的風(fēng)味，此方法也可用于營(yíng)養(yǎng)食品的蛋白質(zhì)強(qiáng)化。與本發(fā)明的方法有關(guān)的在很寬的pH范圍內(nèi)具有很高的蛋白質(zhì)水解度也是有益的。
已出乎意料地發(fā)現(xiàn)，通過(guò)用本發(fā)明的方法處理牛乳可產(chǎn)生極好的發(fā)酵培養(yǎng)基。通過(guò)加入相對(duì)較少的量，這些牛乳水解產(chǎn)物在酸奶生產(chǎn)或乳酸菌發(fā)酵培養(yǎng)物的生產(chǎn)中可用于加速發(fā)酵。生產(chǎn)時(shí)間的縮短增大了生產(chǎn)能力，降低了污染如噬菌體污染的危險(xiǎn)。
本發(fā)明的方法也可相應(yīng)地與發(fā)酵過(guò)程聯(lián)合使用，優(yōu)選用于食品生產(chǎn)的發(fā)酵過(guò)程。因此，為提高發(fā)酵過(guò)程的生產(chǎn)率，可在發(fā)酵過(guò)程中(優(yōu)選食品發(fā)酵過(guò)程中)加入本發(fā)明的方法中使用的蛋白水解酶制品例如FlavourzymeTM，或本發(fā)明的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物或兩者一同加入。這些發(fā)酵過(guò)程的例子是涉及或發(fā)酵魚(yú)(魚(yú)制調(diào)味汁)、可可豆或大豆(象醬油、天培、味噌)的過(guò)程。加入蛋白水解酶制品或加入蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物對(duì)減少總生產(chǎn)時(shí)間即提高發(fā)酵速率是有用的。非食品產(chǎn)物本發(fā)明的方法在非食品領(lǐng)域也有應(yīng)用。將本發(fā)明的方法得到的風(fēng)味特性用于觀賞動(dòng)物食物的生產(chǎn)也是有益的。
從明膠生產(chǎn)很高水解度的水解產(chǎn)物改進(jìn)了用于加入化妝品象霜和洗發(fā)劑的明膠產(chǎn)品。
希望如上述發(fā)酵培養(yǎng)基的有益效果也能使本發(fā)明的水解產(chǎn)物用于其它發(fā)酵。
下面的實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明，它們絕不意味著對(duì)所要求的發(fā)明范圍的限制。
實(shí)施例1牛肉水解本實(shí)施例中用下面酶制品(以蛋白質(zhì)含量％(重量)表示)進(jìn)行兩個(gè)實(shí)驗(yàn)制品A)2％FlavourzyneTM(2.30AU/g)
制品B)1％FlavourzymeTM，2％NeutraseTM0.5L和0.15％AlcalaseTM2.4L。
所有的酶購(gòu)自NOVO NORDISK A/S，Denmark。FlavourzymeTM是一種得自米曲霉的蛋白水解制品，NeutraseTM0.5L是一種得自枯草桿菌的蛋白水解制品，AlcalaseTM2.4L是一種得自地衣芽孢桿菌的蛋白水解制品。
將408g牛肉絞兩次并與392g水混合，使蛋白質(zhì)含量為10％W/W。攪拌混合物30秒鐘并加熱至55℃。測(cè)定初始滲透性(mosm)和可溶性干物質(zhì)(°Brix)，用這些值控制后繼的水解。
保溫4小時(shí)后，通過(guò)在90℃下加熱30分鐘使酶失活。水解產(chǎn)物在3000XG下離心15分鐘并稱重。離心液于冰箱中貯藏直到次日，脂相分離并稱重。離心液中pH為5.85。
結(jié)果示于下面的表1和表2中。
表1初始滲透性(mosm)和可溶性干物質(zhì)(°Brix)時(shí)間制品A制品B分鐘 mosm/kg Δmosm/kg °Brix mosm/kg Δmosm/kg °Brix0 203 0 3.9202 0 4.515 360158 9.945490 28711.148428211.160534 33111.690576 37312.353433212.3120623 42012.757937712.8180685 48213.562442213.3240726 52313.866346113.7
表2制品A混合物重量蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 產(chǎn)率 DS*g ％ g ％％肉/水 800 1080 15脫脂離心液689 9.46 65.281.5 10.6*干物質(zhì)如表中計(jì)算的那樣，這些實(shí)驗(yàn)中FlavourzymeTM的使用量使產(chǎn)率從通常的45％提高到81.5％，溶解度從通常的57％提高到89.9％PSI。達(dá)到70.2％DH的水解度。
4％的水解液送到品嘗員面前。由制品A得到的水解產(chǎn)物中的肉味非常顯著。
實(shí)施例2在不同pH下的水解本實(shí)驗(yàn)中以酪蛋白酸鈉為底物在5—10pH范圍內(nèi)完成本發(fā)明的方法。
通過(guò)加熱至80℃制備8％(W/W)酪蛋白酸鈉(MiprodanTM30，得自MDFOODSAmba，Denmark)溶液。向800g此溶液中加入1g 4—經(jīng)基苯甲酸甲酯和0.15g 4—羥基苯甲酸丙酯，將溶液溫度降至50℃。用4N NaOH或4NHCl調(diào)節(jié)pH至所需值。
1％W/W(以蛋白含量計(jì))FlavourzymeTM(2.30AU/g，NOVONORDISK A/S，Denmark)加到溶液中，使保溫進(jìn)行到最大水解度(約22小時(shí))。
在一個(gè)pH控制器(pH stat)中，在pH9.00，8.00和7.00下進(jìn)行水解，通過(guò)NaOH的消耗監(jiān)測(cè)保溫。在pH6.00和5.00(初始pH)下，通過(guò)降低的pH和升高的滲透性監(jiān)測(cè)水解。
保溫0.25，1，2，4.5和22小時(shí)后得到樣品。通過(guò)加熱至85℃持續(xù)3分鐘再于冰水中冷卻使酶失活。
結(jié)果示于圖1中。從圖可以清楚地看出，本發(fā)明的方法可在pH5至pH9的pH值范圍內(nèi)進(jìn)行水解。
實(shí)施例3對(duì)比實(shí)施例本實(shí)驗(yàn)中，將由本發(fā)明的方法(和FlavourzymeTM保溫)得到的水解度(DH)與由和其它已知水解制品保溫得到的DH進(jìn)行比較。
本實(shí)驗(yàn)在50℃下以非pH控制(non—pH stat)水解(在水解過(guò)程中不調(diào)節(jié)pH)的形式進(jìn)行，在用4N NaOH調(diào)節(jié)的pH7.00下開(kāi)始。為保證酶用量相同，每一水解過(guò)程都在以AU/g(參見(jiàn)上述AU的確定)計(jì)的相同酶活性下進(jìn)行。
測(cè)試了兩種蛋白質(zhì)原料1)酪蛋白酸鈉(由MD Foods Amba，Denmark提供)2)大豆蛋白分離物(由Protein Technologies International，U.S.A提供)。
制備2500g 8％(W/W，以蛋白質(zhì)含量計(jì))蛋白質(zhì)原料溶液。85℃下熱處理蛋白質(zhì)溶液3分鐘，再冷卻至水解溫度50℃。
為水解制備400g樣品。
使用下面的酶及其用量<
>水解過(guò)程進(jìn)行22小時(shí)。
水解5小時(shí)和22小時(shí)后分別測(cè)定水解度。結(jié)果示于圖2(大豆蛋白分離物)和圖3(酪蛋白酸鈉)中。
從結(jié)果可清楚地看出，通過(guò)使用Flavourzyme的水解可達(dá)到最高的水解度。
實(shí)施例4干酪風(fēng)味的生產(chǎn)全脂奶在100℃下熱處理2分鐘再冷卻到50℃。制備每份為200ml共四份(％W/W，以蛋白含量計(jì))
1)1％FlavourzymeTM(2.30AU/g)2)1％FlavourzymeTM(2.30AU/g)＋0.15％PalataseTMM200L(200LU/g得自NOVO NORDISK A/S，Denmark)3)0.15％PalataseTMM200L(200LU/g得自NOVONORDISK A/S，Denmark)4)對(duì)照水解在50℃下進(jìn)行20小時(shí)。樣品1，2和3中產(chǎn)生強(qiáng)烈的干酪味，而對(duì)照幾乎是中性的。
現(xiàn)將風(fēng)味樣品1，2和3在乳脂干酪中稀釋，第4個(gè)樣品作為對(duì)照。
1.1)0.5g樣品No.1＋20g干酪2.1)6.0g樣品No.2＋20g干酪3.1)6.0g樣品No.3＋20g干酪4.1)6.0g鮮奶＋20g干酪樣品No.1.1(FlavourzymeTM)似乎具有強(qiáng)烈的風(fēng)味和成熟干酪的滋味。樣品No.2.1(FlavourzymeTM＋PalataseTM)似乎具有非常協(xié)調(diào)的干酪風(fēng)味。與樣品No.1.1和No.2.1相比，證明樣品No.3.1給人的滋味最弱。評(píng)價(jià)出樣品No.4.1(對(duì)照)是酸味的/略帶酸味的。
總之，可能直接向牛奶中加入酶FlavourzymeTM和FlavourzymeTM與PalataseTM的混合物以形成極好的干酪風(fēng)味。
生產(chǎn)干酪風(fēng)味的傳統(tǒng)方法是通過(guò)向干酪中加入脂肪酶和蛋白酶進(jìn)行的。也就是說(shuō)，使用FlavourzymeTM以及一同使用FlavourzymeTM和PalataseTM創(chuàng)造了一種生產(chǎn)干酪風(fēng)味的新穎而大為簡(jiǎn)化的方法。
實(shí)施例5快速酸奶發(fā)酵全脂奶在100℃下熱處理2分鐘，再冷卻至50℃。制備兩份200ml的(％W/W，以蛋白含量計(jì))1)1％FlavourzymeTM(2.30AU/g)2)對(duì)照在50℃下水解進(jìn)行20小時(shí)。再通過(guò)80℃下熱處理5分鐘使酶失活。
脫脂奶在90℃下熱處理2分鐘，制備3份200ml的樣品。
1.1)200ml奶＋10ml樣品No.12.1)200ml奶＋10ml樣品No.23.1)200ml奶調(diào)節(jié)溫度至41℃，向所有3份樣品中加入106細(xì)菌/g得自Chr.Hansens Lab.的酸奶菌種YC DVS。
發(fā)酵過(guò)程后測(cè)定pH，參見(jiàn)下面的表4。
表4酸化進(jìn)程(pH) 1)Flavour-2) 空白 3)空白/空白zymeTM初始pH值6.6 6.56.5200分鐘后的pH 5.9 6.46.4360分鐘后的pH 4.4 5.96.3
從pH測(cè)定看來(lái)，加入FlavourzymeTM水解的奶加速發(fā)酵過(guò)程，也就意味著大大減少發(fā)酵乳產(chǎn)品的生產(chǎn)時(shí)間。
權(quán)利要求
1.一種通過(guò)與蛋白水解酶制品共同保溫而水解蛋白質(zhì)的方法，其特征在于，該蛋白水解制品得自米曲霉且至少含有五種蛋白水解成分，每種成分分別具有選自23kD，27kD，31kD，32kD，35kD，38kD，42kD，47kD，53kD和100kD的大致分子量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中，蛋白水解制品至少含有五種蛋白水解成分，各成分分別具有23kD，31kD，35kD，38kD和53kD的大致分子量。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，通過(guò)該方法達(dá)到的蛋白質(zhì)水解度(DH)高于35％，優(yōu)選高于60％，更優(yōu)選高于70％，特別優(yōu)選高于80％。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，通過(guò)該方法達(dá)到的蛋白質(zhì)溶解度(蛋白質(zhì)溶解度系數(shù)(PSI))高于50％PSI，優(yōu)選高于70％PSI，更優(yōu)選高于90％PSI。
5.根據(jù)權(quán)利要求1—4任何權(quán)利要求的方法，其中，蛋白質(zhì)是一種植物蛋白質(zhì)，優(yōu)選大豆蛋白；谷物蛋白，如小麥谷蛋白或玉米蛋白；菜籽蛋白；苜蓿蛋白；豌豆蛋白；蠶豆蛋白；棉籽蛋白；或者芝麻籽蛋白。
6.根據(jù)權(quán)利要求1—4任何權(quán)利要求的方法，其中，蛋白質(zhì)是一種動(dòng)物蛋白質(zhì)，優(yōu)選牛乳蛋白質(zhì)，乳清蛋白質(zhì)，酪蛋白，肉蛋白，魚(yú)蛋白，血蛋白，蛋清或者明膠。
7.根據(jù)權(quán)利要求1—6任何權(quán)利要求的方法，其中，保溫是在約4和約10之間，優(yōu)選約5和約9之間的pH下進(jìn)行的。
8.根據(jù)權(quán)利要求1—7任何權(quán)利要求的方法，其中，蛋白質(zhì)與蛋白水解制品和一種或多種其它蛋白酶制品共同保溫。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中，蛋白酶制品是一種得自芽孢桿菌，優(yōu)選得自枯草桿菌的中性蛋白酶。
10.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中，蛋白酶制品是一種得自芽孢桿菌，優(yōu)選得自地衣芽孢桿菌的堿性蛋白酶。
11.根據(jù)權(quán)利要求1—10任何權(quán)利要求的方法，其中，蛋白質(zhì)與蛋白水解制品和一種或多種脂肪酶制品共同保溫。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中，脂肪酶制品含有一種得自毛霉，優(yōu)選得自Rhizomucor miehei的真菌脂肪酶。
13.根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中，脂肪酶制品含有一種得自曲霉，優(yōu)選得自黑曲霉的真菌脂肪酶。
14.根據(jù)權(quán)利要求1—13任何權(quán)利要求的方法，其中，蛋白質(zhì)被水解并同時(shí)發(fā)酵成一種食品。
15.通過(guò)根據(jù)權(quán)利要求1—13任何權(quán)利要求的方法得到的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物，其中，水解的蛋白質(zhì)是一種選自牛乳蛋白質(zhì)，乳清蛋白質(zhì)，酪蛋白，肉蛋白，魚(yú)蛋白，血蛋白，蛋清和明膠的動(dòng)物蛋白質(zhì)。
17.根據(jù)權(quán)利要求15的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物，其中，水解的蛋白質(zhì)是一種選自大豆蛋白；谷物蛋白如小麥谷蛋白或玉米蛋白；菜籽蛋白；苜蓿蛋白；豌豆蛋白；蠶豆蛋白；棉籽蛋白和芝麻籽蛋白的植物蛋白質(zhì)。
18.含有根據(jù)權(quán)利要求15—17任何權(quán)利要求的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的食品。
19.根據(jù)權(quán)利要求18的食品，是母乳代用品的一種配料；干酪風(fēng)味產(chǎn)品；酶法生產(chǎn)的水解植物蛋白(HVP)；蛋白質(zhì)強(qiáng)化營(yíng)養(yǎng)食品；湯，羹或肉風(fēng)味產(chǎn)品；肉浸膏；或用于改進(jìn)發(fā)酵劑培養(yǎng)物生產(chǎn)的水解產(chǎn)物。
20.含有根據(jù)權(quán)利要求15—17任何權(quán)利要求的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的非食品產(chǎn)物。
21.根據(jù)權(quán)利要求20的非食品產(chǎn)物，是一種玩賞動(dòng)物食物，化妝品或發(fā)酵液。
全文摘要
一種通過(guò)與得自米曲霉的蛋白水解酶制品共同保溫來(lái)水解植物或動(dòng)物蛋白質(zhì)的方法。該蛋白水解酶制品至少含有五種蛋白水解成分，每種成分分別具有選自23kD，27kD，31kD，32kD，35kD，38kD，42kD，47KD，53kD和100kD的大致分子量，如Flavourzyme
文檔編號(hào)C12R1/10GK1121732SQ9419190
公開(kāi)日1996年5月1日 申請(qǐng)日期1994年4月25日 優(yōu)先權(quán)日1993年4月26日
發(fā)明者P·M·尼爾森, P·赫瓦斯, K·漢森, G·布多爾夫森 申請(qǐng)人:諾沃挪第克公司