專利名稱：適合用作碘化物氧化酶的含銅氧化酶的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種碘化物氧化的方法。更確切地說，本發(fā)明涉及含銅氧化酶、特別是漆酶，在碘化物的氧化中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
許多年以來碘(I2)就已被用作許多場合下的消毒劑。皮膚清潔劑、傷口消毒、接觸透鏡的清洗和飲水衛(wèi)生只是使用碘的幾個用途。此外，碘也適用于催化劑中，用作一種動物飼料添加劑。適用于藥物中和作為聚合物前體添加劑。盡管碘基消毒體系是極其有效的，一些因素限制了碘直接應(yīng)用的范圍。尤其是，碘的生產(chǎn)、儲存、運輸和處理是極其危險的，這里由于生產(chǎn)中所涉及的化學(xué)品以及即使是在中等濃度時碘自身的毒性所造成的。通常，碘是從天然來源，如鹽水，通過使用強無機酸，氯氣和其它危險藥品的方法制得的。已經(jīng)開發(fā)了作為I2載體的碘遞體來替代普通的I2溶液用于工業(yè)和家庭消毒。此外，能夠從一種I-鹽和一種化學(xué)氧化劑中產(chǎn)生I2的二元體系也是可得到的。這兩種體系需要對大量潛在毒性副產(chǎn)物的處理。對工業(yè)規(guī)模大量生產(chǎn)I2和將I2用作消毒劑來說，在過氧化物酶基產(chǎn)生I2中已發(fā)現(xiàn)了另一種可供選擇的方法(美國專利第4,282,324；4,617,190；4,588,586；4,937,072；5,055,287；5,227,161；5,169,455；4,996,146；4,576,817號)。這類方法包括使用過氧化物酶，氧化劑H2O2，和一種離子型碘化物源。令人遺憾的是，這種方法具有需要危險的和揮發(fā)性的過氧化物或過酸的缺點，該物質(zhì)不得不經(jīng)過運輸或者通過額外的酶催化或化學(xué)步驟就地生成，因此使得該體系更復(fù)雜和/或更昂貴。
因此仍然需要一種碘的生產(chǎn)方法，這種方法避免了必須在工廠或就地處理有害藥品而又能有效地產(chǎn)生足夠量的所需產(chǎn)品?，F(xiàn)在本發(fā)明提供了達到這一點的手段。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)碘的方法，該方法包括在一種水溶液中，在足以使離子型碘化物在酶作用下轉(zhuǎn)化成碘的一段時間和條件下將一種含銅氧化酶和一種離子型碘化物(I-)源相接觸。在一個優(yōu)選的實施方案中，酶可以是漆酶或膽紅素氧化酶。在另一優(yōu)選的實施方案中，該方法也可以在有一種對含銅酶具有高親合性的底物存在下來實施。底物在反應(yīng)中擔(dān)當(dāng)介體，即，穿梭電子，由此增加發(fā)生I-氧化反應(yīng)的速度。在使用漆酶或膽紅素氧化酶時，在氧化過程中底物ABTS是特別適用的介體。
附圖的簡要說明

圖1說明了重組體嗜熱毀絲霉(Myceliophthora thermophila)漆酶(r-MtL)催化的I-氧化反應(yīng)的雙重倒數(shù)圖。(A)在不同pH下使用14μMr-MtL起始速率和I-濃度的關(guān)系。(B)Km和Vmax(從圖1A中求出的)對pH的依賴性。
圖2說明了ABTS輔助的，rMtL-催化的I-氧化反應(yīng)。(A)起始I-氧化反應(yīng)速率對ABTS和r-MtL(nM)濃度的依賴，(B)用2.4nMr-MtL和10μm ABTS時起始I-氧化反應(yīng)速率的pH分布型。
發(fā)明詳述已經(jīng)有許多文件證明，一些鹵化物分子能夠抑制漆酶。具體地說，已經(jīng)敘述了氟化物(F-)對樹木和真菌漆酶的抑制作用(koudelka和Ettinger，生物化學(xué)學(xué)報(J.Biol.Chem.)2633698-3705，1988)，以及溴化物(Br-)和氯化物(Cl-)對真菌漆酶的抑制作用(Naki和Varfolomeev，Biokhimya 461694-1702，1981)?？梢约俣ㄟ@些鹵化物與漆酶II型銅位點相互作用導(dǎo)致從I型位點到二氧位點電子轉(zhuǎn)移的中斷。以前沒有任何關(guān)于漆酶與碘化物(I-)相互作用的報道。由于鹵化物抑制作用能力是與離子半徑尺寸成反比關(guān)系，可以預(yù)期，具有最大離子半徑的碘I-會具有很弱的漆酶抑制作用。然而，非常驚人地發(fā)現(xiàn)，事實上通過放棄一個電子給I型銅I-起到一種底物的作用。
觀察到的I-能起到一種漆酶底物的作用導(dǎo)致開發(fā)一種方法，用這種方法通過使用漆酶或其它含銅氧化酶I-被氧化成元素碘。在水溶液中，提供了一種離子型碘化物源，漆酶緩慢地將I-轉(zhuǎn)化成I2。轉(zhuǎn)化不需要任何危險的或揮發(fā)性化學(xué)藥品如氯氣。離子型碘化物源可以是現(xiàn)在已知的任何源，如二元碘消毒劑中的堿金屬鹽，粗的或開始富含碘的鹽水溶液，鹽鹵，離子型碘化物溶液，其中生硝中的碘酸鹽被還原為碘化物，或海草。在對于所用的酶氯化物是抑制性的情況下，在起始物料中剩余的氯化物首先要被減少至低于抑制常數(shù)。在毀絲霉屬漆酶情況下，抑制常數(shù)大約是70mM。
在本發(fā)明的方法中所用的酶可以是各種含銅氧化酶中的任一種。如下列實施例所示，盡管在I-氧化反應(yīng)中漆酶是最具活性的，還有其它相似的酶也能提供性質(zhì)相似的活性(盡管在許多情況下是以比漆酶低很多的程度)。尤其是膽紅素氧化酶表現(xiàn)出與漆酶活性基本相當(dāng)?shù)幕钚?。然而，試驗的其它含銅酶，如酪氨酸酶和血漿銅藍蛋白，也表現(xiàn)出一定程度的活性，這表明不限于使用漆酶。
含銅氧化酶可以從大量的植物、真菌、細(xì)菌和動物源來獲得，許多是商業(yè)上可得到的。除了上述所列的酶以外，還包括多酚氧化酶、亞鐵氧化酶II、吩噁嗪酮合酶、甘油氧化酶和細(xì)胞色素氧化酶。優(yōu)選的氧化酶，即漆酶、是可以從許多菌種中得到的，尤其是真菌種，例如，曲霉屬、脈孢菌屬、柄孢殼菌屬、葡萄孢屬、金錢屬、層孔菌屬、香菇屬、側(cè)耳屬、栓菌屬、絲核菌屬(美國序號08/172,331在此合并作為參考)、鬼傘屬、小脆柄菇屬、毀絲霉屬(美國序號08/253,781，在此合并作為參考)。小柱孢菌屬(美國序號08/253,784，在此合并作為參考)、松蕈屬(美國序號08/265,534，在此合并作為參考)、射脈菌屬(WO 92/01046)、和草蓋菌屬(JP2-238885)。此外，膽紅素氧化酶可以很容易地從疣孢漆斑菌和Trachyderma tsunodae中得到。
反應(yīng)是在水溶液中進行的。酶可以是游離的，純的或粗的形式，或是用在領(lǐng)域中已知的任何方法固定化在一種有機或無機載體上的，這些載體如，聚丙烯酰胺、纖維素、玻璃珠、瓊脂糖、葡聚糖，甲基丙烯酸基聚合物或乙烯馬來酸共聚物。與固定化酶的反應(yīng)可以在罐中或柱中進行。反應(yīng)也可以用能產(chǎn)生酶的微生物細(xì)胞來進行。
水溶液被緩沖至能提供所使用的酶最佳活性的pH，因此，溶液優(yōu)選的pH將隨所使用的酶而改變。通過使用適當(dāng)?shù)木彌_劑將pH保持在優(yōu)選的范圍中。這些緩沖劑包括磷酸鈉或鉀，葡萄糖酸鹽，檸檬酸鹽，甲酸鹽或乙酸鹽緩沖劑。所使用的酶的量也將隨所用酶的個性而變化，但通常是在nM至μM范圍。在反應(yīng)混合物中所用的I-量優(yōu)選地應(yīng)在或高于mM水平。反應(yīng)可以在大約15-50℃的溫度范圍內(nèi)實施，但優(yōu)選地是在大約20-30℃的溫度下來實施。
在本發(fā)明方法的一個優(yōu)選的實施方案中，如上所述的反應(yīng)是在有能加速I-向I2轉(zhuǎn)化的一種介體存在下來實施的。雖然如漆酶的含銅酶確定可氧化I-，但由于較低的親合性周轉(zhuǎn)通常是很慢的。因此，對酶具有較高的親合性和通過在酶和I-間穿梭電子起到一種中間體作用的化合物能夠改善反應(yīng)效率。例如，如下面的實施例所示，化合物2，2’-連氮基二(3-乙基苯并噻唑啉-6-碘酸)(ABTS)，是已知的，優(yōu)良的漆酶和膽紅素氧化酶的底物，它能極大地增加I-氧化反應(yīng)的效率。盡管ABTS可能不適用于增強與其它含銅酶，如酪氨酸酶和血漿銅藍蛋白，的反應(yīng)速率，因為它不是這些酶的優(yōu)良的底物，但是使用這些酶時可以使用更適宜的底物作為可替換的介體。在選擇任何給定的酶的可替換介體中，重要的因素是介體是這種酶的一種良好底物。并且這種介體具有與I-相似或更高的氧化還原電位。適用于使用除漆酶和膽紅素氧化酶以外的酶的反應(yīng)的其它介體的實例是酚醛塑料、雜環(huán)化合物，氫醌化合物、和游離的或配位的螯合的過渡金屬離子(如，F(xiàn)e2+、Fe(二吡啶基)22+、Ru(CN)64-等。介體的量將隨所用的化合物的個性而不同，并且其適用性是基于所要這的有利的特性；對于ABTS來說，當(dāng)用所述的判斷標(biāo)準(zhǔn)來判斷時它是漆酶和膽紅素氧化酶的一種理想的介體，需要僅很少的量，大約0.1mM，就可使反應(yīng)比在沒有ABTS存在時觀察到的結(jié)果增加103倍。對于任意給定的介體，所用濃度取決于它對所使用酶的Km，該值可由本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員按常規(guī)確定。
在反應(yīng)過程中產(chǎn)生的碘可用任何適用的方法來回收，如，過濾/離心、惰性氣體吹出、和不溶混的有機溶劑蘋取。
通過下列非限制性的實施例進一步說明了本發(fā)明。
實施例I.材料和方法
A.原料用作緩沖劑和底物的化學(xué)藥品至少是試劑級的商業(yè)產(chǎn)品?？箟难猁}氧化酶(南瓜種)、血漿銅藍蛋白(豬血漿)、膽紅素氧化酶(疣孢漆斑菌)和酪氨酸酶(蘑菇)是從Sigma購買的并可直接使用。冷凍干燥的粉末或溶液中酶的含量用紫外可見吸收和發(fā)表的消光系數(shù)來確認(rèn)?？箟难猁}氧化酶的所述的活性用抗壞血酸來確認(rèn)。
B.方法將重組產(chǎn)生的嗜熱毀絲霉(Myceliophthora thermophila)漆酶(r-MtL；在共同未決的美國序號08,278,473中有述，其中的內(nèi)容在此合并作為參考)純化并用如下的丁香醛連氮和2，2’-連氮基二(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)氧化反應(yīng)來確定其活性丁香醛連氮氧化反應(yīng)是在一個1厘米石英比色杯中于30℃下進行的。60微升丁香醛連氮儲備溶液(50％乙醇中0.28毫摩爾濃度)和20微升樣品與0.8毫升預(yù)加熱的緩沖溶液混合。在530納米處監(jiān)測氧化反應(yīng)5分鐘。ABTS氧化反應(yīng)測定使用0.4毫摩爾ABTS、B&R緩沖劑在各種pH下，于室溫下通過監(jiān)測418納米處吸收度的變化來完成。用36毫摩爾-1厘米-1的消光系數(shù)來計算速率。用分光光度計(Shimadzu UV160)或微板讀數(shù)器(分子裝置)來實施光譜測定。按照標(biāo)準(zhǔn)方案(Quelle，Biochemisches Taschenbuch，H.M.Raaven，II.Teil，S.93u.102，1964)來制備Britton & Robinson(B&R)緩沖劑。
測定I-氧化反應(yīng)的酶催化測定是在含有1-20納摩爾MtL(亞單位濃度)和10至200毫摩爾NaI的B&R緩沖劑中在20℃進行5-10分鐘。使用26毫摩爾-1厘米-1的消光系數(shù)來計算速率。I-的氧化反應(yīng)在340或353納米進行光譜監(jiān)測，并且發(fā)現(xiàn)氧化反應(yīng)產(chǎn)物的光譜與I-3的光譜相同(Hosoya，生物化學(xué)(東京)53381，1963)。由速率和濃度數(shù)據(jù)的非線性回歸擬合(Prism，graph Pad)得到速率＝Vmax*[底物]/Km+[底物]的方程來求出動力學(xué)參數(shù)。
在相似條件下也測試了濃度高至微摩爾的抗壞血酸鹽氧化酶、血漿銅藍蛋白、膽紅素氧化酶和酪氨酸酶對I-氧化反應(yīng)的催化。
II結(jié)果rMtL和其它含銅酶對I-氧化反應(yīng)的催化作用-在通氣的溶液中，I-能被緩慢地氧化成I2。當(dāng)I-(以NaI形式)過量時，從I-和I2可逆地形成I-3產(chǎn)生一個具有集中在353附近的一個條譜帶的特征性光譜(Hosoy，見上文)。r-MtL能夠加速這一過程；在pH3左右，催化的I-氧化反應(yīng)可比非酶催化的I-氧化反應(yīng)快許多倍。
I2形成的起始速率的倒數(shù)和I-濃度的倒數(shù)表現(xiàn)出典型的線性關(guān)系(圖1A)。在試驗的1-15微摩爾的范圍中，最大起始速率是與r-MtL濃度成比例的。在pH3.4時活性最佳。高于pH6時，反應(yīng)最小。作為一種底物I-表現(xiàn)出一個取決于pH的表觀Km。在pH3.4時，發(fā)現(xiàn)最小的Km，0.16±0.02摩爾，Vmax的pH依賴性是不太顯著的(圖1B)。在pH3.4時，發(fā)現(xiàn)Vmax為2.7±0.2轉(zhuǎn)換/分鐘。作為r-MtL的底物I-不如丁香醛連氮好，丁香醛連氮的Km和Vmax在最佳的pH7時分別是大約10微摩爾和大約400轉(zhuǎn)換/分鐘的水平。
在pH5時，濃度高至1.5微摩爾的抗壞血酸鹽氧化酶表現(xiàn)出低于0.1轉(zhuǎn)換/分鐘的活性。在微摩爾水平時，血漿銅藍蛋白在pH6時在用0.1摩爾NaI的I-氧化反應(yīng)中表現(xiàn)出很小的催化作用大約0.1/分鐘)。作為一種I-氧化酶。酪氨酸酶具有在pH4.1、5.2、6.0和＞7時相對活性相應(yīng)地為在pH2.7時活性的-58，33，10和＜59的pH-活性分布型。在其最佳pH2.7時，酪氨酸酶以Km-0.1M和Vmax-0.1/分鐘來催化I-氧化反應(yīng)。在酪氨酸酶濃度在2至20微摩爾時起始I-氧化反應(yīng)速率與酪氨酸酶濃度成比例。作為一種I-氧化酶，膽紅素氧化酶具有在pH2.7，5.2，6.0，7.0，8.2和＞9時相對活性相應(yīng)地為在pH4.1時活性的～95，91，80，59，32和＜69的pH活性分布型。在其最佳pH4.1時，膽紅素氧化酶以Km～0.15±0.03摩爾和Vmax1.7±0.1轉(zhuǎn)換/分鐘來催化I-氧化反應(yīng)。在0.5-5微摩爾的膽紅素氧化酶濃度范圍內(nèi)，起始速率與膽紅素氧化酶濃度成比例。
對ABTS氧化反應(yīng)的催化-在pH5.0時，抗壞血酸鹽氧化酶在濃度高至1.5微摩爾時表現(xiàn)出對ABTS的氧化反應(yīng)無活性。在試驗的酪氨酸酶的濃度為0.2-2微摩爾的范圍中，酪氨酸酶催化的ABTS氧化反應(yīng)速率與酪氨酸酶濃度成比例。在pH2.7時酪氨酸酶具有最佳的活性，從中發(fā)現(xiàn)Km為0.18±0.01毫摩爾和Vmax為3.1±0.1轉(zhuǎn)換/分鐘。在試驗的血漿銅藍蛋白濃度為0.1至1微摩爾的范圍中，血漿銅藍蛋白催化的ABTS氧化反應(yīng)的起始速率與血漿銅藍蛋白濃度成比例。在pH4時，血漿銅藍蛋白具有最佳的ABTS氧化酶活性，從中發(fā)現(xiàn)Km為0.11±0.04毫摩爾和Vmax為9.3±1.3轉(zhuǎn)換/分鐘。在試驗的膽紅素氧化酶濃度為1-10納摩爾范圍中，膽紅素氧化酶催化的ABTS氧化反應(yīng)的起始速率與氧化酶濃度成比例。pH分布型表明最佳pH為4.1，從中發(fā)現(xiàn)Km為0.12±0.01毫摩爾和Vmax為(1310±40)轉(zhuǎn)換/分鐘。rMtL具有最佳pH≤2.7的pH活性分布型。在pH4.1時，發(fā)現(xiàn)ABTS具有Km為5.6±0.5微摩爾和Vmax為1460±31轉(zhuǎn)換/分鐘。
ABTS-輔助催化反應(yīng)-通過用漆酶預(yù)溫育制得的氧化的ABTS(ABTS+)很容易氧化I-。在有微量ABTS存在時，漆酶催化的I-氧化反應(yīng)能被大大地增強(圖2A)。動力學(xué)分析表明限速步驟在于漆酶對ABTS的氧化。
當(dāng)ABTS和I-均以足夠量存在時，只要I-保持在此ABTS過量就只能檢測到I-3光譜。當(dāng)全部I-被消耗時，出現(xiàn)氧化了的ABTS光譜。在ABTS-輔助的I-氧化反應(yīng)酶催化作用中，pH-活性分布型(圖2B)與rMtL-催化的ABTS氧化反應(yīng)的pH-活性分布型是相似的(最佳pH從3.4位移至≤2.7)。從I-氧化反應(yīng)速率對ABTS濃度的依賴性中求出的表觀Km和Vmax(6.4±0.8微摩爾和860±40轉(zhuǎn)換/分鐘)是與r-MtL-催化的ABTS本身的氧化反應(yīng)物表觀Km和Vmax相近的。
由于它們的ABTS氧化酶活性差，抗壞血酸鹽氧化酶，血漿銅藍蛋白和酪氨酸酶均表現(xiàn)出對I-氧化反應(yīng)很小的ABTS-輔助的催化作用。當(dāng)在膽紅素氧化酶催化的I-氧化反應(yīng)中包括有ABTS時，觀察到在pH4.1時活性最大。在該pH時，觀察到I-氧化反應(yīng)表觀Km為0.18±0.02毫摩爾和Vmax為600±40轉(zhuǎn)換/分鐘。這些動力學(xué)參數(shù)(接近于氧化酶催化的ABTS氧化反應(yīng)本身的參數(shù))說明在輔助的催化作用中限速步驟是ABTS的氧化反應(yīng)。
討論-此前還未有報告敘述漆酶的I-氧化酶活性或氧化酶催化的I-氧化反應(yīng)。盡管已知F-和可能還有Cl-和Br-，結(jié)合于漆酶中的II型銅，觀察到的在I-氧化反應(yīng)中漆酶的催化作用暗示I-必須與I型銅相互作用。I型銅的氧化還原電位(與標(biāo)準(zhǔn)氫電極(NHE)相比較)對r-MtL和膽紅素氧化酶來說是在480至530毫伏(與NHE相比較)的范圍；對松蕈屬漆酶來說大約800毫伏(Reinhammar，Biochi.Biophys.Acta 275245-259，1972)。對ABTS+/ABTS電偶來說電位是大約700毫伏。這些電位是接近或高于I-3/I-電偶(540毫伏)的電位的，因此使得I型銅或ABTS+氧化I-在熱力學(xué)上是可實行的。
盡管I-可能是潛在地比ABTS更強的還原劑，動力學(xué)因素使前者對漆酶的反應(yīng)性弱很多。作為一種底物，與I-相比較ABTS具有小～103倍的Km和大～103倍的Vmax。由于氧化了的ABTS在溶液中明顯地與I-自由地交換電子，通過ABTS在I-和漆酶間的電子穿棱極大地增強了漆酶催化的I-氧化反應(yīng)。由于限速步驟是在ABTS的氧化反應(yīng)，有可能通過ABTS的濃度或其它適當(dāng)?shù)慕轶w來調(diào)節(jié)對I-氧化反應(yīng)的催化。
在試驗的含銅酶中，膽紅素氧化酶功能上大致相似于漆酶，而試驗的其它酶則表現(xiàn)出對I-直接氧化反應(yīng)更弱的有效作用。由于ABTS本身對抗壞血酸鹽氧化酶，血漿銅藍蛋白、和酪氨酸酶不是一種優(yōu)良的底物，預(yù)期ABTS在輔助這些酶催化的I-氧化反應(yīng)中只具有較小的作用。但是，能夠用作為這些酶的良好底物的其它物料，如適當(dāng)?shù)姆尤┧芰?、氫醌化合物、雜環(huán)化合物和游離的或螯合的過渡金屬離子作為可選擇的介體與這些酶一起用于I-氧化反應(yīng)中。
權(quán)利要求
1.一種碘化物氧化的方法，包括在一種水溶液中，在足以使離子型碘化物在酶作用下轉(zhuǎn)化成碘的一段時間和條件下將一種含銅氧化酶和一種離子型碘化物(I-)源相接觸。
2.權(quán)利要求1的方法，其中的酶是漆酶或膽紅素氧化酶。
3.權(quán)利要求2的方法，其中的酶是真菌漆酶或膽紅素氧化酶。
4.權(quán)利要求3的方法，其中酶是一種漆酶。
5.權(quán)利要求3的方法，其中的酶是選自下列的一種漆酶毀絲霉屬漆酶、小柱孢菌屬漆酶、松蕈屬漆酶、和絲核菌屬漆酶、曲霉屬漆酶、脈孢菌屬漆酶、柄孢殼菌屬漆酶、葡萄孢屬漆酶、金錢屬漆酶、層孔菌屬漆酶、香菇屬漆酶、側(cè)耳屬漆屬、栓菌屬漆酶、鬼傘屬漆酶、小脆柄菇屬漆酶、射脈菌屬漆酶、和革蓋菌屬漆酶。
6.權(quán)利要求1的方法，其中酶是毀絲霉屬漆酶、小柱孢菌屬漆酶、松蕈屬漆酶或絲核菌屬漆酶。
7.權(quán)利要求1的方法，其中酶是毀絲霉屬漆酶。
8.權(quán)利要求3的方法，其中酶是一種膽紅素氧化酶。
9.權(quán)利要求3的方法，其中酶是毀絲霉屬或Trachyderma膽紅素氧化酶。
10.權(quán)利要求3的方法，其中酶是毀絲霉屬膽紅素氧化酶。
11.權(quán)利要求1的方法，該方法在一種介體存在下實施。
12.權(quán)利要求11的方法，其中的介體是ABTS。
13.一種碘化物氧化的方法，該方法包括在一種水溶液中，在有介體存在下，在足以使離子型碘化物在酶作用下轉(zhuǎn)化成碘的一段時間和條件下將一種真菌漆酶或一種膽紅素氧化酶和一種離子型碘化物(I-)源相接觸。
14.權(quán)利要求13的方法，其中介體是ABTS。
15.權(quán)利要求14的方法，其中酶是一種漆酶。
16.權(quán)利要求15的方法，其中酶是毀絲霉屬漆酶。
17.權(quán)利要求14的方法，其中酶是一種膽紅素氧化酶。
18.權(quán)利要求17的方法，其中膽紅素氧化酶是毀絲霉屬膽紅素氧化酶。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種碘化物氧化的方法,該方法包括在一種水溶液中,在足以使離子型碘化物在酶作用下轉(zhuǎn)化成磺的一段時間和條件下將一種含銅氧化酶和一種離子型碘化物(Ⅰ
文檔編號C12N9/02GK1170436SQ95196945
公開日1998年1月14日 申請日期1995年11月20日 優(yōu)先權(quán)日1994年11月22日
發(fā)明者徐豐 申請人:諾沃諾爾迪斯克生物技術(shù)有限公司