專利名稱：用漆酶使油產(chǎn)品脫氧的方法
發(fā)明所屬領(lǐng)域本發(fā)明涉及一種使油或者含油產(chǎn)品脫氧的一種簡單和有效的方法。
背景技術(shù)：
一些食品組分如色拉調(diào)味品(例如，法國調(diào)味品和蛋黃醬)都是利用植物油(如大豆油)制備的。大豆油中包含大量的亞油酸和亞麻酸，這些物質(zhì)很容易和產(chǎn)品中溶解的氧進(jìn)行反應(yīng)，產(chǎn)生不合意的易揮發(fā)的物質(zhì)。已經(jīng)有過報(bào)道可以通過減少油中溶解的氧來提高油的調(diào)味品質(zhì)(參考食品科學(xué)雜志57(1)，1992，P.196)。
抗氧化劑(如丁基化羥基茴香醚、2，6-二叔丁基對(duì)甲酚)已被加入到含有脂肪的食品中以改進(jìn)食品對(duì)氧化的穩(wěn)定性。
已經(jīng)有人描述了利用葡糖氧化酶的酶促脫氧能顯著地減少色拉調(diào)味品中溶解的氧的量(參考食品科學(xué)雜志57(1)，1992，P.199)在儲(chǔ)存期間0.5％葡萄糖在5天內(nèi)足以除去92％的色拉調(diào)味品中溶解的氧。
葡糖氧化酶在氧分子存在的條件下催化d-葡萄糖氧化為d-葡萄糖酸。可以看到這個(gè)反應(yīng)的副產(chǎn)品是H2O2，H2O2可以破壞油脂產(chǎn)品。為了避免這種問題，曾有人建議把過氧化氫酶與葡糖氧化酶一起加入油中。過氧化氫酶催化下面的反應(yīng)，但這又產(chǎn)生了氧！然而，通過利用過氧化氫酶和葡糖氧化酶組合的酶促反應(yīng)的整體效果除去了每摩爾氧化的D-葡萄糖中的0.5摩爾氧氣。
本發(fā)明的目的是發(fā)現(xiàn)一種除去油或含油產(chǎn)品中氧氣的簡單而又有效的酶系統(tǒng)，其中不涉及過氧化氫。
發(fā)明概述令人驚奇地發(fā)現(xiàn)漆酶能非常有效地減少色拉調(diào)味品中的氧含量。
因此，本發(fā)明提供了使油或者含油產(chǎn)品脫氧的方法，這種方法包括在所說的油或產(chǎn)品中加入有效量的漆酶。
附圖的簡單描述通過參考所附的附圖能進(jìn)一步說明本發(fā)明，其中圖.1表明加入漆酶后在不同的色拉調(diào)味品中氧的百分?jǐn)?shù)和時(shí)間之間的關(guān)系，進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)如實(shí)施例1所述。
圖.2表明加入漆酶后在不同的色拉調(diào)味品中氧的百分?jǐn)?shù)和時(shí)間之間的關(guān)系，進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)如實(shí)施例2所述。
發(fā)明詳述按照本發(fā)明，可以通過加入一種有效量的漆酶進(jìn)行油或者含油產(chǎn)品的脫氧。
在本發(fā)明中，油被定義和表征為任何油或脂肪或蠟或類脂，如Frank D.Gunstone等人在“脂手冊(cè)”(第二版，Chapman和Hall，1994，PP.49-223)所公開的，包括aceituno油、巴巴蘇油、buffalo葫蘆油、燭果油、巴西棕櫚油、蓖麻油、中國的植物牛脂和stilingia油、可可油、椰子油、玉米油、無腺棉籽油、crambe油、Cuphea物種油、夜櫻草油、魚油、葡萄子油、花生油、大麻種子油、illipe butter、蟲蠟、西蒙得木油、木棉種子油、羊毛脂、亞麻子油、乳脂、長葉霧冰藜黃油、芥子種子油、oiticica油、橄欖油、棕櫚油、棕櫚核油、罌粟籽油、油菜籽油、米糠油、紅花油、婆羅雙樹脂肪、芝麻油、shea果油、大豆油、皇后根屬油、向日葵油、妥爾油、茶種子油、煙草種子油、桐油、ucuhuba油、鳩菊油、小麥胚油和鯨油。
按照本發(fā)明，植物油是優(yōu)選的，特別是大豆油、棕櫚油、玉米油、油菜籽油、橄欖油和可可油。
按照本發(fā)明，含油產(chǎn)品可以是一種食品組分(如色拉調(diào)味品)或個(gè)人養(yǎng)護(hù)產(chǎn)品(personal care product)。
在本發(fā)明中，把色拉調(diào)味品分為可匙用的(spoonable)(如蛋黃醬和奶油)和可傾倒的(pourabIe)(例如法國調(diào)味品)。在“食品成分的功能性質(zhì)”(第二版，學(xué)院出版公司，P.268-269，本文一并參考)中也給出了色拉調(diào)味品的這種定義。
蛋黃醬是一種半固體食品，其是典型地利用食用植物油、蛋黃或者蛋(新鮮、冷凍或者是干燥的)、醋和可有可無的一種或多種下列組分制作而成的鹽、胡椒、甜味劑、芥子、辣椒粉、谷氨酸鈉、檸檬和/或梨莓汁、穩(wěn)定劑、防腐劑、水和其它調(diào)味品。成品通常包含至少65％的植物油。以下列出一種蛋黃醬的例子油 75.0-80.0％(W/W)醋(4.5％醋酸)9.4-10.8％(W/W)蛋黃 7.0-9.0％(W/W)食糖 1.5-2.5％(W/W)鹽 1.5％(W/W)芥子 0.5-1.0％(W/W)白胡椒 0.1-0.2％(W/W)可傾倒的調(diào)味品除了含油量少一些外，其它和蛋黃醬相同。它們可以包含淀粉作為增稠劑?？梢酝ㄟ^多種方式生產(chǎn)可傾倒的色拉調(diào)味品；一般的多用途色拉調(diào)味品可以含有下列組合物(參見，INFORM Vo1.3，1992，P.1277)水 39.5％(W/W)醋 10.0％(W/W)蔗糖 10.0％(W/W)淀粉 2.0％(W/W)油 30.0％(W/W)鹽 2.0％(W/W)固體膠 1.0％(W/W)調(diào)味劑 5.0％(W/W)防腐劑 0.5％(W/W)在個(gè)人養(yǎng)護(hù)產(chǎn)品上，特別是在護(hù)膚品(如乳膏或洗液)上，本發(fā)明的方法也非常有用。在護(hù)膚品上特別有益的油(脂肪和蠟)可以是羊毛脂、蟲蠟、蓖麻油、canuba油和西蒙得木油。酚類物質(zhì)根據(jù)本發(fā)明，依據(jù)所研究的油或油產(chǎn)品，有時(shí)加入酚類物質(zhì)(phenoliccompounds)也可以是有用的，酚類物質(zhì)作為漆酶的底物，從而增加所說的油或者是油產(chǎn)品的脫氧。
本發(fā)明中可以使用的酚類物質(zhì)可以是花色素苷或者是香料或者是調(diào)味劑或者是多種酚類物質(zhì)的組合體(如香料和調(diào)味劑)。這樣的物質(zhì)(compounds)的例子是如實(shí)施例2所描述的辣椒粉、的芥子和檸檬汁。
當(dāng)然，所利用的酚類物質(zhì)應(yīng)該是正常允許用作食品組分的一種物質(zhì)。
加入到油或油產(chǎn)品中的酚類物質(zhì)的最理想的量取決于很多因素，其中最重要的是酚類物質(zhì)的量有一個(gè)上限，在這個(gè)上限濃度上因?yàn)橛刑嗟南懔匣蛘{(diào)味劑存在，油或油產(chǎn)品變得不能食用。
可以通過以下方法確定各酚類物質(zhì)的合乎需要的范圍，經(jīng)組合各種濃度的酚類物質(zhì)和各種濃度的漆酶進(jìn)行一系列實(shí)驗(yàn)，并且判斷所獲得的脫氧效果，同時(shí)進(jìn)行一組試驗(yàn)來試驗(yàn)油或者油產(chǎn)品是否是可接受的。漆酶漆酶(EC 1.10.3.2)被表征為一組作用在o-和p-醌醇上(從而氧氣被還原為水)低特異性的多銅蛋白質(zhì)。
按照本發(fā)明，微生物漆酶是優(yōu)選的。微生物漆酶可以從細(xì)菌或真菌(包括絲霉菌和酵母)中分離獲得。優(yōu)選地從真菌中獲得漆酶。
一些優(yōu)選的真菌包括屬于擔(dān)子菌亞門或子囊菌亞門的菌株。合適的例子包括可以從下列屬的菌株獲得的漆酶曲霉屬、脈孢菌屬(例如粗糙脈孢菌)、柄孢殼屬、柄孢殼屬、葡萄孢屬、金錢菌屬、層孔菌屬、葡萄孢屬、Pyricularia(例如Pyricularia oryzae)、栓菌屬(例如Trametes villosa、雜色栓菌)、絲核菌屬(例如，立枯絲核菌)、鬼傘屬(例如褶紋鬼傘和灰蓋鬼傘)、Pastyrella、毀絲霉屬(例如Myceliophthora thermophila)、Schytalidium(例如Schytalidium thermophilum)、多孔菌屬(例如Polyporus pinsitus)、射脈菌屬(例如Phlebia radita)(WO 92/01046)云芝屬(例如毛云芝)(JP2-238885)、擬蠟傘屬、傘菌屬、Vascellum、白蛋巢菌屬、漆斑菌屬或者是Sporormiella。
特別地，從T.villosa、雜色栓菌、M.thermophila或者P.oryzae獲得的漆酶是優(yōu)選的。
而且所述漆酶還可以是用以下方法生產(chǎn)的，所述方法方法包括在培養(yǎng)基中在允許漆酶表達(dá)的條件條件下培養(yǎng)宿主細(xì)胞(用攜帶編碼所說的漆酶的DNA序列和編碼允許編碼漆酶的DNA序列表達(dá)的功能片斷的DNA序列的重組體DNA載體轉(zhuǎn)化過)，并從培養(yǎng)基中回收所說的漆酶。漆酶活性(LACU)的測定通過利用氧氣氧化2，2’-連氮-雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)來測定漆酶的活性。用光度計(jì)在418nm測定產(chǎn)生的淺綠-藍(lán)色。分析的條件是167mM ABTS、0.1M磷酸鹽緩沖液、pH7.0、30℃、反應(yīng)3分鐘。
1個(gè)漆酶單位(LACU)就是在以上條件下每分鐘催化1μmol ABTS轉(zhuǎn)化的酶量。漆酶的加入可以用以前已知的方式生產(chǎn)本發(fā)明的油或油產(chǎn)品。
按照本發(fā)明，可以在所說的油或油產(chǎn)品的生產(chǎn)過程中的任何一步加入漆酶，經(jīng)常在最后的一步或最后過程的其中一步加入，但是可以在早期加入漆酶作為預(yù)防處理手段以除去進(jìn)入到油或者油產(chǎn)品中的氧。
一般地，加入漆酶的量在每克油0.001-1000LACU范圍內(nèi)，優(yōu)選地是在每克油0.01-500LACU范圍內(nèi)，更優(yōu)選的是0.1-100LACU范圍內(nèi)，最優(yōu)選的是在1-50LACU范圍內(nèi)。
下面的實(shí)施例進(jìn)一步地說明了本發(fā)明，但是沒有意圖以任何形式限制本發(fā)明所要求的范圍。
實(shí)施例1利用漆酶進(jìn)行不同pH值下色拉調(diào)味品的脫氧為表明在不同的pH值下利用漆酶處理的在色拉調(diào)味品中氧的消耗量，使用了以下的調(diào)味劑植物油(油菜油)334g醋110g粒狀糖25.08g碘鹽 2.84g黃原膠 1.70g辣椒粉 1.06g干芥子 1.12g檸檬汁 66g在這種色拉調(diào)味品中，油的總量為62.8％(W/W)。然后把這種色拉調(diào)味品用水稀釋到含油總量為12.6％(W/W)。
在pH為3、4、5時(shí)以每克油33.5或67LACU量(在pH為3只試驗(yàn)每克油67LACU的劑量)的漆酶(從Novo Nordisk A/S(商標(biāo)名為SP504)獲得的一種Trametes villosa漆酶)加入到色拉調(diào)味品中；溫度為環(huán)境溫度(25℃)，在接下來的60分鐘利用Rank Oxygen Electrode測量氧氣的百分比(相當(dāng)于氧氣飽和的水的百分比)。
在

圖1中給出了結(jié)果。使用了以下符號(hào)■(pH3；每克油67LACU)(pH4；每克油67LACU)△(pH4；每克油33.5LACU)(pH5；每克油67LACU)▲(pH5；每克油33.5LACU)如圖1所示，漆酶能明顯地使色拉調(diào)味品脫氧；在30分鐘后pH4和pH5時(shí)氧氣的濃度為0，在pH為3時(shí)在5分鐘后氧氣的濃度為0。
實(shí)施例2色拉調(diào)味品調(diào)味劑對(duì)脫氧率的影響通過向基本的色拉調(diào)味品中僅加入一種調(diào)味劑然后測量特殊試劑的脫氧率顯示調(diào)味劑(如檸檬汁、辣椒粉和芥子)對(duì)漆酶脫氧率的影響。使用了以下的基本調(diào)味劑植物油(油菜籽油)334g醋 110g粒狀糖 25.08g碘鹽2.84g黃原膠 1.70g
在基本調(diào)味品中加入以下調(diào)味劑中的一種1)12.8％種檸檬汁2)0.4％辣椒粉粉劑和12.4％的水3)0.4％干芥子和12.4％的水。
把形成的調(diào)味品用水稀釋到含油總量為12％(W/W)，并把pH調(diào)整到4。
以每克油60LACU量的漆酶(從Novo Nordisk A/S(商標(biāo)名為SP504)獲得的一種Trametes villosa漆酶)加入到不同的色拉調(diào)味品中；溫度為環(huán)境溫度(25℃)，在接下來的60分鐘利用Rank Oxygen Electrode測量氧氣的百分比(相當(dāng)于氧氣飽和的水的百分比)。
在圖2中給出了結(jié)果，使用了以下符號(hào)■沒有調(diào)味劑的色拉調(diào)味品(對(duì)照)+芥子▲+辣椒粉●+檸檬汁如圖所示，調(diào)味劑對(duì)脫氧率有非常顯著的正作用；當(dāng)加入芥子或檸檬汁時(shí)，35-40分鐘后的氧氣濃度為0；當(dāng)加入辣椒粉時(shí)，60分鐘后的氧氣濃度為0，然而沒有加入調(diào)味劑的對(duì)照在反應(yīng)60分鐘后仍然有大約10％的氧氣。
權(quán)利要求
1.一種油或含油產(chǎn)品的脫氧方法，該方法包括向所述油或所述產(chǎn)品中加入有效量的漆酶。
2.按照權(quán)利要求1的方法，其中所說的油是植物油。
3.按照權(quán)利要求2的方法，其中所說的油選自由大豆油、棕櫚油、玉米油、油菜籽油、橄欖油和可可油組成的組。
4.按照權(quán)利要求1的方法，其中所說的含油產(chǎn)品是食品組分。
5.按照權(quán)利要求4的方法，其中所說的食品組分是色拉調(diào)味品。
6.按照權(quán)利要求5的方法，其中所說的色拉調(diào)味品是蛋黃醬。
7.按照權(quán)利要求1的方法，其中所說的含油產(chǎn)品是個(gè)人養(yǎng)護(hù)產(chǎn)品。
8.按照權(quán)利要求1-7的方法，其中所說的漆酶是一種微生物漆酶。
9.按照權(quán)利要求8的方法，其中所說的微生物漆酶是從真菌獲得的，特別是從屬于擔(dān)子菌亞門或子囊菌亞門的真菌獲得的。
10.按照權(quán)利要求9的方法，其中所說的微生物漆酶是從下列屬的菌株獲得的曲霉屬、脈孢菌屬、柄孢殼屬、葡萄孢屬、金錢菌屬、層孔菌屬、香菇屬、側(cè)耳屬、栓菌屬、絲核菌屬、鬼傘屬、小脆柄菇、毀絲霉屬、Schytalidium、多孔菌屬、射脈菌屬、Pyricularia、云芝屬、擬蠟傘屬、傘菌屬、Vascellum、白蛋巢菌屬、漆斑菌屬或Spororrmiella。
11.按照權(quán)利要求10的方法，其中所說的微生物漆酶是從T.villosa、雜色栓菌、M.thermophila或者P.oryzae獲得的。
12.按照權(quán)利要求1-11任一之方法，其中所說的漆酶的量在每克油0.01-100LACU的范圍內(nèi)。
13.按照權(quán)利要求1-12的方法，該方法還包括另外加入至少一種作為漆酶底物的物質(zhì)。
14.按照權(quán)利要求13的方法，其中所說的物質(zhì)是芥子、辣椒粉或檸檬汁。
全文摘要
本發(fā)明提供了通過向油或含油產(chǎn)品(如色拉調(diào)味品)中加入有效量的漆酶使所述油或所述產(chǎn)品脫氧的方法。
文檔編號(hào)C12P7/64GK1190984SQ9619386
公開日1998年8月19日 申請(qǐng)日期1996年4月30日 優(yōu)先權(quán)日1995年5月11日
發(fā)明者B·R·彼得森, T·E·馬賽厄森, B·皮倫, H·安德森 申請(qǐng)人:諾沃挪第克公司