一種具有提高免疫功能的保健飲料及其制法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于食品加工技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種保健飲料，具體為一種提高免疫功能的 保健飲料。
【背景技術(shù)】
[0002] 人體內(nèi)的內(nèi)源肽缺乏可引起免疫功能低下，由于免疫功能低下，身體呈現(xiàn)不抵抗 狀態(tài)，感冒病毒乘虛而入，并發(fā)感染，特別是流行性感冒并發(fā)的感染，病情十分嚴(yán)重，死亡率 也很高。
[0003] 隨著現(xiàn)代免疫學(xué)的進(jìn)展，人們對肽與免疫的關(guān)系逐步得到充分認(rèn)識(shí)。人體中的肽 不足可造成免疫器官發(fā)育不全、萎縮，對細(xì)胞免疫、體液免疫、補(bǔ)體功能和吞噬作用等方面 都有著重要影響。
[0004] 免疫力低下的身體易于被感染或患癌癥，免疫力超常也會(huì)產(chǎn)生對身體有害的結(jié) 果，如引發(fā)過敏反應(yīng)、自身免疫疾病等。各種原因使免疫系統(tǒng)不能正常發(fā)揮保護(hù)作用，在此 情況下，極易招致細(xì)菌、病毒、真菌等感染，因此免疫力低下最直接的表現(xiàn)就是容易生病。因 經(jīng)?；疾?，加重了機(jī)體的消耗，所以一般有體質(zhì)虛弱、營養(yǎng)不良、精神萎靡、疲乏無力、食欲 降低、睡眠障礙等表現(xiàn)，生病、打針吃藥便成了家常便飯。每次生病都要很長時(shí)間才能恢復(fù)， 而且常常反復(fù)發(fā)作。長此以往會(huì)導(dǎo)致身體和智力發(fā)育不良，還易誘發(fā)重大疾病。深層原因 是免疫力低下或免疫力不健全。
[0005] 當(dāng)人體免疫功能失調(diào)，或者免疫系統(tǒng)不健全時(shí)，下列問題就會(huì)反復(fù)發(fā)作：感冒反 復(fù)發(fā)作、扁桃體炎反復(fù)發(fā)作、哮喘反復(fù)發(fā)作、支氣管炎反復(fù)發(fā)作、肺炎反復(fù)發(fā)作、腹瀉反復(fù)發(fā) 作，所以千萬不可小視。
[0006] 近年來，發(fā)明人采用本發(fā)明保健飲料用于治療免疫力低下，取得了較好的療效。
[0007] 在本發(fā)明中： 胡枝子花為豆科胡枝子屬植物胡枝子Aicoior T'yrcz.的花。
[0008] 柔毛水楊梅花為薔薇科水楊梅屬植物柔毛路邊青Geum Japonicum Thunb. Var. Chinense F.Bolle 的花序。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明的目的是提供一種具有提尚免疫功能的保健飲料。
[0010] 本發(fā)明的另一目的是提供該保健飲料的制備方法。
[0011] 本發(fā)明的目的是通過以下方式實(shí)現(xiàn)的： 一種具有提高免疫功能的保健飲料，是由下述重量份的原料制成：胡枝子花1~2份， 柔毛水楊梅花1~2份。
[0012] 所述的保健飲料優(yōu)選由下述重量份的原料制成：胡枝子花1份，柔毛水楊梅花1 份。
[0013] 所述的保健飲料優(yōu)選由下述重量份的原料制成：胡枝子花1份，柔毛水楊梅花2 份。
[0014] 所述的保健飲料優(yōu)選由下述重量份的原料制成：胡枝子花2份，柔毛水楊梅花1 份。
[0015] 該保健飲料由下述方法制成：按處方重量配比取胡枝子花、柔毛水楊梅花，加5~ 15倍水煎煮1~2小時(shí)，藥渣再加5~10倍量水煎煮0. 5~1小時(shí)，水煎液合并，過濾，濾 液濃縮，冷卻，加入體積濃度為95%的乙醇至乙醇濃度為60~75%，攪拌后放于4~8°C靜 置12~48小時(shí)，過濾，濾液回收乙醇，得到保健茶提取液，加蔗糖、加水，滅菌，制成保健飲 料。
[0016] 該保健飲料優(yōu)選由下述方法制成：按處方重量配比取胡枝子花、柔毛水楊梅花，加 10倍水煎煮1. 5小時(shí)，藥渣再加6倍量水煎煮1小時(shí)，兩次水煎液合并，過濾，濾液濃縮，冷 卻，加入體積濃度為95%的乙醇至乙醇濃度為70%，攪拌后放于5°C靜置24小時(shí)，過濾，濾液 回收乙醇，得到保健茶提取液，加蔗糖、加水，滅菌，制成保健飲料。
[0017] 該保健飲料采用下述方法進(jìn)行質(zhì)量檢測： 采用高效液相色譜法測定紫云英苷（astragalin)含量： (1) 色譜條件：色譜柱為C1S色譜柱；以比例為40~60 :40~60的乙腈-1%冰醋酸溶 液為流動(dòng)相；檢測波長300~330nm，柱溫25~45°C ; (2) 對照品溶液的制備：精密稱取紫云英苷對照品置于容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至 刻度，搖勻；移取上述溶液置容量瓶，加甲醇定容，作為對照品貯備液； (3) 供試品溶液的制備：取本發(fā)明保健飲料，精密稱量，置具塞錐形瓶中，精密加入甲 醇，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，微孔濾膜 過濾，取續(xù)濾液，即得供試品溶液； (4) 測定：分別精密量取上述供試品溶液、對照品溶液各5~20 μ L，注入高效液相色譜 儀，進(jìn)行檢測。
[0018] 該保健飲料優(yōu)選采用下述方法進(jìn)行質(zhì)量檢測：采用高效液相色譜法測定紫云英苷 含量： (1) 色譜條件：色譜柱為C1S色譜柱；以比例為40 :60的乙腈-1%冰醋酸溶液為流動(dòng)相； 檢測波長315nm，柱溫25°C ;理論板數(shù)按紫云英苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000 ; (2) 對照品溶液的制備：精密稱取紫云英苷對照品10.0 Omg置于100ml容量瓶中，加甲 醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；移取上述溶液l〇ml置25ml容量瓶，加甲醇定容，作為對照品貯 備液； (3) 供試品溶液的制備：取本發(fā)明保健飲料10mL，精密稱量，置具塞錐形瓶中，精密加 入甲醇10mL，密塞，稱定重量，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量， 搖勻，0. 45 μ m微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得供試品溶液； (4) 測定：分別精密量取上述供試品溶液、對照品溶液各10 μ L，注入高效液相色譜儀， 進(jìn)行檢測。
[0019] 所述的保健飲料可以用于制備治療免疫力低下的保健飲料。
[0020] 實(shí)驗(yàn)一：本發(fā)明保健飲料增強(qiáng)免疫力的實(shí)驗(yàn)研究 1實(shí)驗(yàn)材料 1. 1受試物 本發(fā)明保健飲料：處方：胡枝子花5kg，柔毛水楊梅花5kg。制法：按處方重量配比取胡 枝子花、柔毛水楊梅花，加10倍水煎煮1. 5小時(shí)，藥渣再加6倍量水煎煮1小時(shí)，兩次水煎 液合并，過濾，濾液濃縮，冷卻，加入體積濃度為95%的乙醇至乙醇濃度為70%，攪拌后放于 5°C靜置24小時(shí)，過濾，濾液回收乙醇，得到本發(fā)明保健茶提取液。
[0021] 對比保健飲料A :處方：胡枝子花10kg。制法：按處方重量取胡枝子花，加10倍水 煎煮1. 5小時(shí)，藥渣再加6倍量水煎煮1小時(shí)，兩次水煎液合并，過濾，濾液濃縮，冷卻，加入 體積濃度為95%的乙醇至乙醇濃度為70%，攪拌后放于5°C靜置24小時(shí)，過濾，濾液回收乙 醇，得到對比保健飲料A提取液。
[0022] 對比保健飲料B :處方：柔毛水楊梅花10kg。制法：按處方重量配比取柔毛水楊梅 花，加10倍水煎煮1. 5小時(shí)，藥渣再加6倍量水煎煮1小時(shí)，兩次水煎液合并，過濾，濾液濃 縮，冷卻，加入體積濃度為95%的乙醇至乙醇濃度為70%，攪拌后放于5°C靜置24小時(shí)，過 濾，濾液回收乙醇，得到對比保健飲料B提取液。
[0023] 1. 2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 飼養(yǎng)清潔級昆明種雄性小鼠150只，體質(zhì)量18~21g，由南京中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心 提供，在溫度18~24°C、濕度40%~70%的環(huán)境中飼養(yǎng)。
[0024] 1.3主要試劑 綿羊紅細(xì)胞（SRBC)，HanK液（pH值7. 2~7. 4)，RPMI1640培養(yǎng)液。小牛血清，青鏈霉 素，刀豆蛋白A (ConA)，MTT，補(bǔ)體(豚鼠血清)，SA緩沖液，印度墨汁，都氏試劑，YAC-1細(xì)胞 等。
[0025] 1.4主要儀器 潔凈工作臺(tái)，二氧化碳（C02)培養(yǎng)箱，離心機(jī)，TU-1901雙光束紫外可見光分光光度計(jì) (北京普析)，酶標(biāo)儀，顯微鏡，游標(biāo)卡尺等。
[0026] 2實(shí)驗(yàn)方法 2. 1動(dòng)物分組及給藥方法 參照文獻(xiàn)（1.中華人民共和國衛(wèi)生部.保健食品功能學(xué)評價(jià)程序和檢驗(yàn)方法
[S]. 2003. ;2.徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M]. 3版.北京：人民衛(wèi)生出版社， 2002:1420-1460)。實(shí)驗(yàn)分3大組，每大組60只小鼠。免疫1組測定遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)（DTH) 和抗體生成細(xì)胞數(shù)；免疫2組進(jìn)行ConA誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)、NK細(xì)胞活性測定； 免疫3組進(jìn)行碳廓清實(shí)驗(yàn)。
[0027] 每大組50只小鼠隨機(jī)分為陰性對照組、陽性對照組及本發(fā)明保健飲料組、對比保 健飲料A組、對比保健飲料B組，每組10只。
[0028] 陰性對照組給予純化水lmL/10g ;陽性對照組給予配制成15. Omg/mL靈芝全粉溶 液，給予lmL/10g ;本發(fā)明保健飲料組給予lmL/10g本發(fā)明保健茶提取液，對比保健飲料A 組給予lmL/10g對比保健飲料A提取液；對比保健飲料B組給予2mL/10g對比保健飲料B 提取液。連續(xù)灌胃15d。
[0029] 2. 2細(xì)胞免疫功能測定 檢測給藥后各組小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)（DTH)的情況，采用足跖增厚法。每鼠腹腔注射 2% (V/V)SRBC懸液0. 2mL。致敏后4d，測量左后足跖厚度。在測量部位皮下注射20%SRBC。 每鼠20 μ L，24h后測量左后足跖腫脹厚度，連續(xù)測3次，取均值。以前后足跖厚度差值表示 DTH程度。
[0030] ConA誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，采用MTT法檢測小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化及增殖情 況。無菌取脾，于無菌HanK液中制成細(xì)胞懸液，200目篩網(wǎng)過濾，HanK液洗3次。用RPmL1640 培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為3 X 106個(gè)·!Λ 1。而后分兩孔加入24孔培養(yǎng)板，每孔1. OmL，一孔加 ConA液50 μ L，一孔作對照，置5%C02、37°C培養(yǎng)72h。培養(yǎng)結(jié)束前4h，每孔吸去上清液0. 7mL， 加入不含小牛血清的R