預(yù)防雞雁小綱動(dòng)物中壞死性腸炎的組合物的制作方法
【專利說(shuō)明】預(yù)防雞雁小綱動(dòng)物中壞死性腸炎的組合物 發(fā)明領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及至少一種短鏈脂肪酸的甘油酯組合物用于預(yù)防和/或緩解雞雁小綱動(dòng) 物(gal loanserans)的胃腸道中的壞死性腸炎的用途。該甘油酯組合物包含至少75 %重量 的三丁酸甘油酯、低于25%重量的二丁酸甘油酯和低于8%重量的一丁酸甘油酯。本發(fā)明還 涉及該組合物用于調(diào)節(jié)雞雁小綱動(dòng)物的腸道菌群(gut flora)的用途。
[0002] 發(fā)明背景
[0003] 壞死性腸炎是侵害雞雁小綱動(dòng)物的急性感染。雞雁小綱動(dòng)物分成如下亞組:雞形 目（陸禽），如雞、火雞、松雞和雉;和雁形目（水禽），如鴨、鵝和天鵝。壞死性腸炎已經(jīng)成為新 出現(xiàn)的問(wèn)題，尤其是在家禽中，且特征在于腸粘膜的嚴(yán)重性壞死。臨床發(fā)病通常極短且通常 征兆僅為突發(fā)的死亡率增加。然而，還可以觀察到具有抑郁、豎起的羽毛和腹瀉的禽類。肉 眼損傷主要見(jiàn)于小腸(空腸），其可以膨脹、脆弱且包含惡臭氣味的棕色流體。
[0004] 病原體是革蘭氏陽(yáng)性專性厭氧菌產(chǎn)氣莢膜梭菌（Clostridium perfringens)。存 在兩種主要的產(chǎn)氣莢膜梭菌類型A和C，它們與雞雁小綱動(dòng)物的壞死性腸炎相關(guān)。由該細(xì)菌 產(chǎn)生的毒素導(dǎo)致小腸損害，而且導(dǎo)致肝損傷和死亡率。
[0005] 產(chǎn)氣莢膜梭菌是在土壤、粉塵、糞便、飼料和所用的家禽垃圾中易于見(jiàn)到的幾乎遍 在的細(xì)菌。它還是健康雞雁小綱動(dòng)物的腸的正常棲居生物。壞死性腸炎的發(fā)生取決于存在 的傾向因素，例如由球蟲(chóng)病原體導(dǎo)致的粘膜損傷和包含高蛋白質(zhì)水平的飼料。
[0006] 因?yàn)楫a(chǎn)氣莢膜梭菌幾乎遍在，所以重要的是預(yù)防球蟲(chóng)病和可以促進(jìn)其生長(zhǎng)的腸微 生物區(qū)系的改變。這在早期通過(guò)常規(guī)地向飼料中添加抗生素實(shí)現(xiàn)。然而，由于歐盟 (European Union)于2006年禁止用抗生素促進(jìn)生長(zhǎng)，所以壞死性腸炎已經(jīng)變成例如家禽中 的新出現(xiàn)的疾病。對(duì)于抵抗這種疾病或機(jī)能障礙的可替代選擇方法存在巨大需求。
[0007]通過(guò)抗生素抵抗有害菌如產(chǎn)氣莢膜梭菌的可替代選擇方法在于嘗試平衡腸道菌 群或使其正常化。腸道菌群由生活在消化道中的復(fù)雜的微生物種類組成。在本文的上下文 中，腸與腸道和區(qū)系與微生物區(qū)系和微生物菌群是同義詞。微生物執(zhí)行眾多的有用的功能， 例如發(fā)酵無(wú)用的能量底物、訓(xùn)練免疫系統(tǒng)、防止有害致病菌的生長(zhǎng)、調(diào)節(jié)腸發(fā)育，產(chǎn)生宿主 用維生素和產(chǎn)生指導(dǎo)宿主儲(chǔ)存脂肪的激素。然而，在一些條件下，認(rèn)為一些種類能夠通過(guò)產(chǎn) 生宿主感染或增加其癌癥風(fēng)險(xiǎn)而導(dǎo)致疾病或機(jī)能障礙。
[0008] 本發(fā)明公開(kāi)了甘油酯組合物用于預(yù)防和/或緩解雞雁小綱動(dòng)物如雞和火雞的胃腸 道中的壞死性腸炎的用途。還公開(kāi)了該組合物用于調(diào)節(jié)雞雁小綱動(dòng)物的腸道菌群的用途。 本發(fā)明組合物的應(yīng)用平衡了雞雁小綱動(dòng)物中的腸道菌群或使其正?；?，按照這種方式，致 病菌種類的生長(zhǎng)被抑制，且如壞死性腸炎這樣的疾病得以預(yù)防。目前認(rèn)為在這種作用后面 的一種機(jī)制在于有利于有益細(xì)菌的生長(zhǎng)，且這可以通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)結(jié)腸上皮的營(yíng)養(yǎng)和附著位點(diǎn)預(yù) 防致病菌種類的生長(zhǎng)。
[0009] 長(zhǎng)期以來(lái)已知丁酸對(duì)家禽和其它動(dòng)物的腸健康的積極作用。還探究了丁酸的不同 分配形式，其中有以甘油酯形式的丁酸的分配。今年來(lái)，大量關(guān)注涉及作為飼料添加劑的一 丁酸甘油酯在促進(jìn)動(dòng)物腸健康中的用途。
[0010] 目前令人驚奇地發(fā)現(xiàn)主要包含三丁酸甘油酯的甘油酯組合物的應(yīng)用與給予動(dòng)物 一丁酸甘油酯形式的丁酸相比是預(yù)防雞雁小綱動(dòng)物例如肉雞的壞死性腸炎的更有效方式。
[0011] 發(fā)明詳述
[0012] 本發(fā)明涉及包含短鏈脂肪酸的甘油酯組合物的用途，已經(jīng)證實(shí)其為預(yù)防雞雁小綱 動(dòng)物例如肉雞的壞死性腸炎的有效方式。該甘油酯組合物包含至少75%重量的三丁酸甘油 酯、低于25%重量的二丁酸甘油酯和低于8%重量的一丁酸甘油酯。已知丁酸對(duì)雞雁小綱動(dòng) 物的腸健康具有積極作用。本發(fā)明顯示分配主要作為三丁酸甘油酯的丁酸是預(yù)防雞雁小綱 動(dòng)物例如肉雞的壞死性腸炎的有效方式，且證實(shí)它比分配主要為一丁酸甘油酯形式的丁酸 更有效。
[0013] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，所述甘油酯組合物包含至少80%重量的三丁酸甘油 酯、低于20%重量的二丁酸甘油酯和低于5%重量的一丁酸甘油酯。
[0014] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案，所述甘油酯組合物包含至少85%重量的三丁 酸甘油酯、低于15%重量的二丁酸甘油酯和低于4%重量的一丁酸甘油酯。
[0015] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案，所述甘油酯組合物包含至少90%重量的三 丁酸甘油酯、低于10%重量的二丁酸甘油酯和低于2.5%重量的一丁酸甘油酯。
[0016] 游離丁酸具有非常令人不愉快的氣味，其導(dǎo)致處理問(wèn)題。這些問(wèn)題可以通過(guò)以甘 油酯形式分配丁酸來(lái)避免。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，甘油酯組合物中游離丁酸的量低 于1%，優(yōu)選低于0.5%，且最優(yōu)選低于0.2%重量?？刂朴坞x丁酸的量還確保甘油酯組合物 中的pH保持在這樣的水平，其中甘油酯不會(huì)水解成甘油和游離酸，由此產(chǎn)物保持穩(wěn)定。
[0017] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，所述甘油酯組合物被吸附在惰性載體例如二氧化硅 載體上。這使得該組合物作為干燥產(chǎn)品被分配。這類二氧化硅載體優(yōu)選包含具有20-70μπι平 均粒度的二氧化硅顆粒。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，所述甘油酯組合物以50-80%甘油酯 與20-50 %二氧化硅顆粒的重量比被吸附在二氧化硅顆粒上。
[0018] 可以將本發(fā)明的甘油酯組合物添加到任何用于雞雁小綱動(dòng)物的商購(gòu)飼料中?？梢?將該甘油酯組合物直接摻入到商購(gòu)飼料中或作為補(bǔ)充加入商購(gòu)飼料。
[0019] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，飼喂給雞雁小綱動(dòng)物的甘油酯組合物的量為0.05-1.5%重量，優(yōu)選0.1-1.0%重量的雞雁小綱動(dòng)物每日飼料配給量。
[0020] 根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案，將所述甘油酯組合物的用量在5-10天的時(shí)間間隔 施用并且在1-5周期限內(nèi)減少。
[0021] 根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案，所述用量的減少為在上述間隔期間給予的用量的 20-50% 〇
[0022]實(shí)施方案的實(shí)施例
[0023] 丁酸甘油酯在控制肉雞中產(chǎn)氣莢膜梭菌-誘發(fā)的壞死性腸炎中的效能的體內(nèi)試 驗(yàn)。
[0024] 菌株和疫苗
[0025] 用于體內(nèi)試驗(yàn)的攻擊性菌株產(chǎn)氣莢膜梭菌菌株56分離自存在體重增加問(wèn)題的群 居的具有壞死性損傷的肉雞的腸，并且已經(jīng)在體內(nèi)試驗(yàn)中證實(shí)為早期有高度毒力的。將該 菌株分類為Α型菌株（netB陽(yáng)性，β-2和腸毒素陰性）并且在體外產(chǎn)生中等量的α毒素 (Gholamiandehkordi等人，2006)。
[0026] 為了接種，使該菌株在腦心浸液肉湯（BHI，0xoid，Basingstoke，England)中生長(zhǎng) Ml 〇
[0027] 包含活的減毒堆形艾美耳球蟲(chóng)(Eimeria(E. )acervulina) (2個(gè)品系）、布氏艾美耳 球蟲(chóng)(E.brunetti)、巨型艾美耳球蟲(chóng)(E.maxima)、毒害艾美耳球蟲(chóng)(E.necatrix)、早熟艾美 耳球蟲(chóng)(E.praecox)、和緩艾美耳球蟲(chóng)(E.mitis)和柔嫩艾美耳球蟲(chóng)(E.tenella)的卵囊的 10倍劑量的抗球蟲(chóng)疫苗ParaCOX? _8(Schering-Plough Animal Health，Brussels， Belgium)用于本研究。
[0028] 在飲用水中給予Nobilis Gumboro D 78疫苗（Schering-Plough Animal Health， Brussels，Belgium)〇
[0029] 動(dòng)物和居室
[0030] 在本實(shí)驗(yàn)中，使用114只混合性別的肉雞。它們?cè)?日齡時(shí)得自商業(yè)孵卵所。在試驗(yàn) 前，用 Me ta tec ty 1 ? (Cl im ' oMediC)和商品抗球蟲(chóng)消毒劑（B:i-00-Cy S tBi01 ink Ltd，York，UK)給全部房間去除污染。將禽類分入4個(gè)l，5m2的籠子中，在木肩上。隨意給予它 們飲用水和飼料。施加23h/lh光照黑暗程序。
[0031] 實(shí)驗(yàn)研