使用酸處理的乳清蛋白提取物水溶液治療過敏癥的制作方法
【專利說明】使用酸處理的乳清蛋白提取物水溶液治療過敏癥
[0001]本申請(qǐng)是申請(qǐng)?zhí)枮椤?01080055545.2”，申請(qǐng)日為“2010年10月14日”，發(fā)明名稱為“使用酸處理的乳清蛋白提取物水溶液治療過敏癥”的申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。
發(fā)明領(lǐng)域
[0002]本發(fā)明涉及乳清蛋白提取物的制造，涉及嬰兒配方奶粉并且涉及減少或預(yù)防食物過敏。
[0003]發(fā)明背景
[0004]不用母乳喂養(yǎng)的嬰兒必須依靠嬰兒配方奶粉作為他們的營養(yǎng)素來源，并且用來確保正常生長(zhǎng)和發(fā)育。
[0005]嬰兒配方奶粉通常基于牛奶。然而大約2%至3%的嬰兒對(duì)于牛奶中的蛋白質(zhì)的具有過敏癥。雖然存在著許多調(diào)節(jié)針對(duì)過敏原的免疫應(yīng)答的因子，在嬰兒中的Th I /Th2平衡在免疫發(fā)育中是重要的，然而嬰兒配方奶粉在促進(jìn)免疫調(diào)節(jié)機(jī)制并且驅(qū)動(dòng)Thl和Th2分化的細(xì)胞因子方面是缺乏的。同樣地，對(duì)于促進(jìn)適當(dāng)免疫應(yīng)答和發(fā)育的膳食補(bǔ)充劑、食品或嬰兒配方奶粉存在著需要。
[0006]發(fā)明概述
[0007]在一個(gè)實(shí)施方案中提供了一種用于從含乳清蛋白的組合物生產(chǎn)乳清蛋白提取物的方法，該方法包括:
[0008]使含乳清蛋白的組合物與一種水溶液接觸，由此形成包括含可溶性蛋白的成分和不溶性成分的一種樣品；
[0009]從該樣品回收含可溶性蛋白的成分；
[0010]酸化該含可溶性蛋白的成分；
[0011]由此形成乳清蛋白提取物。
[0012]在某些實(shí)施方案中，該含乳清蛋白的組合物可包括甜乳清、酸乳清、低乳糖乳清、脫礦物乳清、乳清蛋白濃縮物(WPC)或乳清蛋白分離物(WPI)的一種或多種。優(yōu)選地，在該含乳清蛋白的組合物中的蛋白質(zhì)的量可以是基于干重計(jì)至少大約10 %至大約95 % w/w。
[0013]在某些實(shí)施方案中，該含乳清蛋白的組合物可包括碳水化合物和脂肪中的至少一種。優(yōu)選地，在該含乳清蛋白的組合物中的碳水化合物的量可以是基于干重計(jì)至少大約1%至小于大約80%w/w。優(yōu)選地，在該含乳清蛋白的組合物中的脂肪的量可以是基于干重計(jì)至少大約0.5%至小于大約10%w/w。
[0014]在某些實(shí)施方案中，該含乳清蛋白的組合物可包括基于干重計(jì)大約80%至82 % w/w的蛋白質(zhì)、大約4%至8%w/w的乳糖以及大約4%至8%w/w的脂肪。
[0015]在某些實(shí)施方案中，該含乳清蛋白的組合物可以是一種WPC。優(yōu)選地，該WPC可以是WPC 80。
[0016]在某些實(shí)施方案中，該含乳清蛋白的組合物可被提供為一種與水溶液接觸的粉末形式。
[0017]在某些實(shí)施方案中，該水溶液可以是水。
[0018]在某些實(shí)施方案中，該含乳清蛋白的組合物可以以至少大約0.5%至10%w/w的含乳清蛋白的組合物的量被提供為與該水溶液接觸。
[0019]在某些實(shí)施方案中，該含可溶性蛋白的成分可以是通過將該含可溶性蛋白的成分從不溶性固體中分離來回收的。優(yōu)選地，可通過使該樣品經(jīng)受離心、色譜法、離子交換、電滲析、過濾或吸附的一項(xiàng)或多項(xiàng)將該含可溶性蛋白的成分從該不溶性固體中分離出來。
[0020]在某些實(shí)施方案中，該含可溶性蛋白的成分可以是通過對(duì)該含可溶性蛋白的成分提供至少大約2.5的pH來酸化的。
[0021]在某些實(shí)施方案中，該含可溶性蛋白的成分可以是在該含可溶性蛋白的成分已經(jīng)被酸化之后從該樣品中回收的。
[0022]在某些實(shí)施方案中，所述方法還可包括以下另外的步驟:將所酸化的含可溶性蛋白的成分中和。
[0023]在某些實(shí)施方案中，該含可溶性蛋白的成分可以是通過對(duì)該含可溶性蛋白的成分提供大約為7的pH來中和的。
[0024]在某些實(shí)施方案中，該含可溶性蛋白的成分可以是在該含可溶性蛋白的成分已經(jīng)被中和之后從該樣品中回收的。
[0025]在某些實(shí)施方案中，所述方法還可包括將該含可溶性蛋白的成分干燥以形成一種粉末的步驟。在另一實(shí)施方案中，提供了一種用于從含乳清蛋白的溶液生產(chǎn)乳清蛋白提取物的方法，包括:
[0026]將在含乳清蛋白的溶液中的可溶性乳清蛋白從不溶性乳清蛋白分離出來；
[0027]酸化該可溶性乳清蛋白；
[0028]由此形成乳清蛋白提取物。
[0029]在另一實(shí)施方案中，提供了包括酸處理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液的乳清蛋白提取物。在某些實(shí)施方案中，該提取物是根據(jù)以上說明的方法生產(chǎn)的。
[0030]在某些實(shí)施方案中，形成該酸處理的含可溶性乳清蛋白的成分的水溶液的蛋白質(zhì)可以是基本上未水解的。
[0031]在其他實(shí)施方案中，提供了包括酸處理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液用于制造嬰J L配方奶粉、膳食補(bǔ)充劑或食品的用途。
[0032]在相關(guān)實(shí)施方案中，提供了包括乳清蛋白提取物的嬰兒配方奶粉、膳食補(bǔ)充劑或食品，該乳清蛋白提取物包括酸處理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液。
[0033]在另外的實(shí)施方案中，提供了包括酸處理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液的乳清蛋白提取物用于制造預(yù)防食物過敏或使其減輕至最低程度的藥物的用途。
[0034]在另一個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種預(yù)防食物過敏或使其減輕至最低程度的方法，包括以下步驟:向個(gè)體提供包括酸處理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液的乳清蛋白提取物。
[0035]在另外的實(shí)施方案中，提供了一種用于減少在易于食物過敏的個(gè)體中的TNF或IL-2釋放的方法，包括向個(gè)體提供包括酸處理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液的乳清蛋白提取物的步驟。
[0036]仍然在另外的實(shí)施方案中，提供了一種用于增加在易于食物過敏的個(gè)體中的IL-18釋放的方法，包括向個(gè)體提供包括酸處理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液的乳清蛋白提取物的步驟。
[0037]仍然在另外的實(shí)施方案中，提供了一種用于增強(qiáng)在易于食物過敏的個(gè)體中的腸上皮細(xì)胞屏障功能的方法，包括向個(gè)體提供包括酸處理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液的乳清蛋白提取物的步驟。
[0038]仍然在另外的實(shí)施方案中，提供了一種用于增強(qiáng)在易于食物過敏的個(gè)體中的Thl免疫應(yīng)答的方法，包括向個(gè)體提供包括酸處理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液的乳清蛋白提取物的步驟。
[0039]在另一實(shí)施方案中，提供了一種用于使在易于食物過敏的個(gè)體中的Th2免疫應(yīng)答降至最低程度的方法，包括向個(gè)體提供包括酸處理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液的乳清蛋白提取物的步驟。
[0040]附圖簡(jiǎn)要說明
[0041 ]圖1.在用提取物(123)治療之后從RAW細(xì)胞的TNF-α釋放的抑制。
[0042]圖2.在用提取物(123)治療之后從THP-1細(xì)胞的IL-18釋放的增強(qiáng)。
[0043]圖3.在用提取物(123)治療之后從初級(jí)⑶4+T細(xì)胞的IL_2釋放的抑制。
[0044]圖4.提取物(123)對(duì)⑶4T細(xì)胞的IL_2釋放的影響。
[0045]圖5.在CD3和CD28刺激作用之后提取物(123)(酸化的或中性的)對(duì)CD4T細(xì)胞的IL-2釋放的影響。
[0046]圖6.在用中性的或酸化的提取物(123)或乳鐵蛋白治療之后T84細(xì)胞的跨上皮電阻。
[0047]圖7.在用中性的(123-中性的)或酸活化的(123-酸化的)的提取物治療之后T84細(xì)胞的跨上皮電阻。
[0048]圖8.在用以1/8或1/12稀釋到配方中或作為3次/天的快速推注給藥的提取物(123)治療之后的血清IgE。
[0049]圖9.在用以1/8或1/12稀釋到配方中或作為3次/天的快速推注給藥的提取物(123)治療之后的BLG特異性IgGl濃度(包括離群值，用x表示)。
[0050]圖10.在用以1/8或1/12稀釋到配方中或作為3次/天的快速推注給藥的提取物(123)治療之后的血清RMCPII濃度。
[0051 ]圖11.在用以1/8或1/12稀釋到配方中或作為3次/天的快速推注給藥的提取物(123)治療之后的肥大細(xì)胞計(jì)數(shù)/mm2固有層。
[0052]圖12.在用以1/8或1/12稀釋到配方中或作為3次/天的快速推注給藥的提取物
(123)治療之后的在腸中的IL-1O(A)、IFN-Y(B)和IL-4(C)。
[0053]圖13.斷奶研究:血清BLG特異性IgGl(A)、IgE(B)和RMCPII(C)。在第4天開始用提取物(123)并且在第14天開始口服BLG的強(qiáng)飼法。
[0054]實(shí)施方案的詳細(xì)說明
[0055]將會(huì)理解的是，在本說明書中披露和限定的本發(fā)明涉及兩個(gè)或更多個(gè)從正文或附圖提到的或顯而易見的個(gè)體特征的所有可替代組合。所有這些不同組合都構(gòu)成本發(fā)明的不同替代方面。
[0056]現(xiàn)在將詳細(xì)地參考本發(fā)明的某些實(shí)施方案。雖然將結(jié)合這些實(shí)施方案來說明本發(fā)明，將會(huì)理解的是并不旨在將本發(fā)明限制于那些實(shí)施方案。相反，本發(fā)明旨在覆蓋所有替代方案、修改、和等效物，它們都可以包括在如通過權(quán)利要求書所限定的本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
[0057]本領(lǐng)域的熟練技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到類似或等價(jià)于在此說明的那些的許多方法和材料，這些都可以在實(shí)踐本發(fā)明中使用。絕非將本發(fā)明局限于所說明的這些方法和材料。
[0058]將會(huì)理解的是，在本說明書中披露和限定的本發(fā)明涉及兩個(gè)或更多個(gè)從正文或附圖提到的或顯而易見的個(gè)體特征的所有可替代組合。所有這些不同組合都構(gòu)成本發(fā)明的不同替代方面。
[0059]如在此所使用的，除非在上下文另外要求的地方，術(shù)語“包括”(comprise)和該術(shù)語的變化，例如“包括” ("comprising")、“包括”(comprises)和“包括” ("comprised")并不旨在排除其他添加劑、成分、整體或步驟。
[0060]本發(fā)明人已經(jīng)驚奇地發(fā)現(xiàn)，處于酸處理的含可溶性乳清蛋白成分的水溶液的形式的乳清蛋白提取物具有免疫調(diào)節(jié)特性。特別是，在此說明的體外研究顯示，提取物(另外稱為“123”)增加了是Thl應(yīng)答的特征的生物標(biāo)記，而使Th2應(yīng)答的標(biāo)記降至最低。具體地，這些體外研究顯示，該提取物減少了 CD4+T細(xì)胞的IL-2分泌，并且增加了 I