一種利用薯渣通過發(fā)酵制備動(dòng)物蛋白飼料的方法以及由該方法制得的飼料的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種用于薯渣發(fā)酵的多菌種菌曲，所述多菌種菌曲包含或者由如下菌曲組成：產(chǎn)朊假絲酵母(Candida utilis)菌曲、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)菌曲和植物乳桿菌(lactobacillus planticola)菌曲。本發(fā)明還提供了一種利用多菌種菌曲對(duì)薯渣進(jìn)行發(fā)酵來制備飼料的方法、由該方法制得的飼料及其應(yīng)用。與現(xiàn)有產(chǎn)品相比，本發(fā)明能夠?qū)我坏臓I養(yǎng)成分快速轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌麪I養(yǎng)物質(zhì)，豐富和優(yōu)化其營養(yǎng)組分，能夠明顯提高飼料粗蛋白含量，改善其適口性，能夠明顯降低料肉比，顯著降低飼養(yǎng)成本。
【專利說明】
一種利用薯渣通過發(fā)酵制備動(dòng)物蛋白飼料的方法以及由該方 法制得的飼料
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種利用微生物發(fā)酵食品工業(yè)有機(jī)廢棄物，尤其是利用微生物技術(shù)發(fā) 酵薯類作物加工后所剩的薯渣制備固態(tài)發(fā)酵動(dòng)物蛋白飼料的方法。 技術(shù)背景
[0002] 薯類作物是非常重要的一類作物，主要指具有可供食用塊根或地下莖的一類的陸 生作物，一般包括馬鈴薯、紅薯、木薯、薯蕷、魔芋和涼薯等。中國是世界上薯類作物生產(chǎn)大 國，薯類作物主糧化已成為保障我國糧食安全的新措施，其中三大薯類作物馬鈴薯、紅薯和 木薯等在農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。薯類作物在工業(yè)上大多數(shù)是用作生產(chǎn)淀粉，每 年會(huì)產(chǎn)生大量的薯渣，但對(duì)其的再利用并不充分。大多是被直接丟棄只有少量的薯渣被直 接用作飼料，但是由于含水量大蛋白含量低其營養(yǎng)價(jià)值并不高。薯渣的產(chǎn)生有季節(jié)性，通常 加工廠是在每年薯類作物收獲的特定月份集中加工生產(chǎn)淀粉，此時(shí)會(huì)有大量的薯渣產(chǎn)生。 傳統(tǒng)的處理方式并不能大量高效的將其轉(zhuǎn)化利用，所以薯渣會(huì)被長時(shí)間的堆放，最終導(dǎo)致 霉變，如此不僅會(huì)浪費(fèi)資源，而且還會(huì)造成環(huán)境污染。
[0003] 現(xiàn)有技術(shù)已經(jīng)有采用發(fā)酵的方式將薯渣制備成飼料的嘗試。例如， CN201410039337.3提供了一種馬鈴薯渣發(fā)酵飼料的制備方法，包括以下步驟：（1)以馬鈴薯 薯渣75~80重量％、干棗粉10~15重量％和脫脂米糠5~15重量％為原輔料，在此原輔料基 礎(chǔ)上加入試劑:尿素0.75~1.5重量％、硫酸銨0.75~1.5重量％、磷酸二氫鉀0.5~0.7重 量％和硫酸鎂0.4~0.6重量％，混合均勻，制成發(fā)酵底物;所述馬鈴薯薯渣的含水量小于或 者等于14重量％; (2)上述發(fā)酵底物以枯草芽孢桿菌、扣囊復(fù)膜孢酵母、黑曲霉和植物乳桿 菌的菌液混合成組合發(fā)酵菌種菌液，發(fā)酵底物與組合發(fā)酵菌種菌液按1:1~1.2的重量比均 勻混合，28~30 °C好氧發(fā)酵48~72小時(shí)，然后厭氧發(fā)酵24~48小時(shí)，烘干粉碎;所述枯草芽 孢桿菌、扣囊復(fù)膜孢酵母、黑曲霉和植物乳桿菌的菌液濃度均為IX 106個(gè)/ml，組合發(fā)酵菌 種菌液由枯草芽孢桿菌、扣囊復(fù)膜孢酵母、黑曲霉和植物乳桿菌的菌液按照體積比為1~3: 1~3:1~3:1~3的比例混合而成。該方法能夠提高真蛋白含量為并降低粗纖維含量，但是 并無法顯著地降低料肉比(FCR)(料肉比是指飼養(yǎng)的畜禽增重量與飼料消耗量的比）。又例 如，CN201410039421.5提供了一種甘薯渣發(fā)酵飼料的制備方法，包括以下步驟：（1)以甘薯 薯渣75~80重量％和小麥麩皮20~25重量％為原輔料，在此原輔料基礎(chǔ)上加入試劑:尿素 0.75~1.5重量％、硫酸銨0.75~1.5重量％、磷酸二氫鉀0.5~0.7重量％和硫酸鎂0.4~ 0.6重量％，混合均勻，制成發(fā)酵底物;所述甘薯薯渣的含水量小于或者等于14重量％; (2) 上述發(fā)酵底物以枯草芽孢桿菌、扣囊復(fù)膜孢酵母、綠色木霉和植物乳桿菌的菌液混合成組 合發(fā)酵菌種菌液，發(fā)酵底物與組合發(fā)酵菌種菌液按1:1~1.2的重量比均勻混合，28~30°C 好氧發(fā)酵48~72小時(shí)，烘干粉碎;所述枯草芽孢桿菌、扣囊復(fù)膜孢酵母、綠色木霉和植物乳 桿菌的菌液濃度均為IX 1〇6個(gè)/ml，組合發(fā)酵菌種菌液由枯草芽孢桿菌、扣囊復(fù)膜孢酵母、 綠色木霉和植物乳桿菌的菌液按照體積比為1~3:1~3:1~3:1~3的比例混合而成。但是 該方法存在與CN201410039337.3的方法一樣的問題。
[0004]因此，仍存在能夠降低料肉比的由薯渣通過發(fā)酵制得的飼料的需要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明通過如下方面提供的技術(shù)方案來解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的一個(gè)或者多個(gè)上 述問題。
[0006] 本發(fā)明在第一方面提供了一種用于薯渣發(fā)酵的多菌種菌曲，所述多菌種菌曲包含 或者由如下菌曲組成：產(chǎn)骯假絲酵母（Candida utilis)菌曲、枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis)菌曲和植物乳桿菌（lactobacillus planticola)菌曲。
[0007] 本發(fā)明在第二方面提供了一種利用薯渣來制備飼料的方法，所述方法使用本發(fā)明 第一方面提供的所述多菌種菌曲進(jìn)行。
[0008] 本發(fā)明在第三方面提供了由本發(fā)明的第二方面所述的方法制得的飼料。
[0009] 本發(fā)明在第四方面提供了本發(fā)明第三方面提供的所述飼料在用于豬飼料尤其是 育肥豬用飼料中的應(yīng)用。
[0010] 本發(fā)明在第五方面提供了本發(fā)明第三方面提供的所述飼料在用作固態(tài)發(fā)酵動(dòng)物 蛋白飼料中的應(yīng)用。
[0011] 本發(fā)明提供了一種利用微生物技術(shù)將大量薯渣在短時(shí)間內(nèi)轉(zhuǎn)化成營養(yǎng)價(jià)值高，保 質(zhì)期長的動(dòng)物飼料的方法。如在技術(shù)背景中已經(jīng)介紹的那樣，薯類作物加工廠會(huì)在一年中 的很短的一段時(shí)間內(nèi)生產(chǎn)出大量的薯渣，利用傳統(tǒng)的處理方式不能快速高效的利用大量的 薯渣，最終導(dǎo)致其霉變腐爛，喪失其二次利用價(jià)值并且危害環(huán)境。本發(fā)明通過改變發(fā)酵所用 的菌種組合和/或改善了工藝條件，利用由產(chǎn)朊假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌制成 的菌曲可以在薯渣產(chǎn)出的同時(shí)進(jìn)行發(fā)酵處理，并且在發(fā)酵過程中會(huì)抑制有害雜菌的生長延 長其保質(zhì)期，所以解決了薯渣長期堆放的過程中雜菌生長導(dǎo)致霉變從而產(chǎn)生不可預(yù)知的有 毒物質(zhì)的問題，尤其是解決了由薯渣制得飼料的料肉比高的問題，提高了所制得的飼料的 重量，尤其是提高了飼料的適口性。在一些優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明所選用的產(chǎn)朊假絲酵 母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌菌體蛋白含量均大于或者等于60%，并且在發(fā)酵過程中菌 體會(huì)能夠更充分地利用薯渣中單一的營養(yǎng)物質(zhì)纖維素和淀粉，將其更徹底轉(zhuǎn)換成菌體蛋 白、維生素、有機(jī)酸等，從而在豐富其營養(yǎng)物質(zhì)的同時(shí)進(jìn)一步增強(qiáng)其適口性，更好地解決了 直接投喂時(shí)營養(yǎng)單一適口性不高的問題。
[0012] 本發(fā)明的有益效果是:利用薯類產(chǎn)品加工廠生產(chǎn)出的薯渣作為主要原料來生產(chǎn)動(dòng) 物蛋白飼料，原料來源廣泛，價(jià)格低廉，經(jīng)發(fā)酵過得飼料蛋白含量達(dá)到14 %以上，相較未處 理的薯渣增加了多種維生素和氨基酸，并且擁有特殊的發(fā)酵香味增強(qiáng)了飼料的適口性，而 且還利于環(huán)保。所制得的飼料是一種價(jià)格低廉，保質(zhì)期長，營養(yǎng)豐富的動(dòng)物蛋白飼料，并且 以該飼料飼喂牲畜例如豬，可以顯著地降低料肉比。
【具體實(shí)施方式】
[0013] 如上所述，本發(fā)明在第一方面提供了一種用于薯渣發(fā)酵的多菌種菌曲，所述多菌 種菌曲包含或者由如下菌曲組成：產(chǎn)骯假絲酵母(Candida util is)菌曲、枯草芽孢桿菌 (Bacillus subtilis)菌曲和植物乳桿菌（lactobacillus planticola)菌曲。
[0014] 產(chǎn)朊假絲酵母又叫產(chǎn)朊圓酵母或食用圓酵母。其蛋白質(zhì)和維生素 B的含量都比啤 酒酵母高，它能以尿素和硝酸作為氮源，在培養(yǎng)基中不需要加入任何生長因子即可生長。產(chǎn) 朊假絲酵母一般可以在瓊脂培養(yǎng)基上形成原始假菌絲或不發(fā)達(dá)的假菌絲，或無假菌絲。產(chǎn) 朊假絲酵母能利用薯渣中的五碳糖和六碳糖例如來生產(chǎn)出飼料中所需的可食用蛋白質(zhì)等。
[0015] 枯草芽胞桿菌是芽胞桿菌屬的一種，屬于革蘭氏陽性菌，是一種需氧菌，廣泛分布 在土壤及腐敗的有機(jī)物中，易在枯草浸汁中繁殖，故名枯草芽孢桿菌?？莶菅挎邨U菌菌體自 身合成淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶等酶類，具有較強(qiáng)的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶的 活性，有利于將薯渣中的營養(yǎng)素降解以便利用。
[0016] 植物乳桿菌是乳酸菌的一種革蘭氏陽性菌種，屬厭氧或兼性厭氧菌種。該菌種具 有較高的活菌數(shù)，能產(chǎn)生酸。本發(fā)明主要用來將所述薯渣中的含量豐富的纖維素、淀粉通過 菌種的新陳代謝轉(zhuǎn)換成維生素、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸等物增加其營養(yǎng)物質(zhì)含量，豐富其營養(yǎng)組 分，改善其適口性。
[0017] 本發(fā)明中使用的產(chǎn)骯假絲酵母（Candida utilis)、枯草芽孢桿菌（Bacillus 811131：；[1丨8)和植物乳桿菌（13(31：(^3(3；[11118口13111：；[(3013)均可以商購獲得。例如可以從西安 紫瑞生物科技有限公司（陜西省眉縣濱河新區(qū)眉?jí)]大道東段)商購獲得。
[0018] 在一些實(shí)施方式中，所述多菌種菌曲中的所述產(chǎn)朊假絲酵母菌曲：枯草芽孢桿菌 菌曲：植物乳桿菌菌曲的重量比為1~3(例如1、2或3):1~3(例如1、2或3):1~3(例如1、2或 3)。在一些實(shí)施方式中，所述重量比為1:1:1。
[0019] 在一些實(shí)施方式中，所述多菌種菌曲中的所述產(chǎn)朊假絲酵母菌曲：枯草芽孢桿菌 菌曲：植物乳桿菌菌曲的總菌體蛋白含量大于或者等于60重量％。在一些優(yōu)選的實(shí)施方式 中，所述產(chǎn)朊假絲酵母菌曲：枯草芽孢桿菌菌曲：植物乳桿菌菌曲的菌體蛋白含量在混合形 成所述多菌種菌曲之前各自各自獨(dú)立地大于或者等于60重量％。
[0020] 在一些實(shí)施方式中，所述多菌種菌曲中的有效活菌數(shù)大于或者等于109Cfu/g。
[0021] 在一些實(shí)施方式中，所述產(chǎn)朊假絲酵母菌曲和/或枯草芽孢桿菌菌曲通過如下方 式制得：（1)將菌種依次通過試管培養(yǎng)、搖瓶培養(yǎng)和種子罐培養(yǎng)，得到菌種發(fā)酵液;和(2)將 所述菌種發(fā)酵液接種至無菌麩皮培養(yǎng)基中混合均勻，同時(shí)將水分控制在40重量％~50重 量％，在25 °C~30°C發(fā)酵48小時(shí)，從而得到菌曲。在一些實(shí)施方式中，所述試管培養(yǎng)的培養(yǎng) 溫度為28°C~35°C，培養(yǎng)時(shí)間為48小時(shí);所述搖瓶培養(yǎng)的培養(yǎng)溫度為28°C~31°C，搖瓶速度 為150轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)時(shí)間為24小時(shí);和/或所述種子罐培養(yǎng)以10重量％的接種量接種至液體 種子罐中并且在攪拌狀態(tài)下于25°C~30°C培養(yǎng)24小時(shí)的方式進(jìn)行。其中所使用的各種培養(yǎng) 基都是已知的培養(yǎng)基，例如可以從北京奧博星生物技術(shù)有限公司購得各培養(yǎng)基配料，再自 行調(diào)配獲得。
[0022] 在一些實(shí)施方式中，所述植物乳桿菌菌曲通過如下方式制得：
[0023] (1)對(duì)菌種進(jìn)行斜面厭氧培養(yǎng)，再接種至無菌糖化玉米糊中在37°C厭氧培養(yǎng)，從而 得到菌種發(fā)酵液;和
[0024] (2)向無菌麩皮培養(yǎng)基中接種所述菌種發(fā)酵液，在厭氧條件下在35°C培養(yǎng)，得到菌 曲。
[0025] 在一些實(shí)施方式中，為制得所述植物乳桿菌的菌種發(fā)酵液而進(jìn)行的厭氧培養(yǎng)的時(shí) 間為48小時(shí)，和/或?yàn)橹频盟鲋参锶闂U菌的菌曲而進(jìn)行的厭氧培養(yǎng)的時(shí)間為24小時(shí)。
[0026] 本發(fā)明在第二方面提供了一種利用薯渣來制備飼料的方法，所述方法使用本發(fā)明 第一方面提供的所述多菌種菌曲進(jìn)行。
[0027] 在一些實(shí)施方式中，所述方法包括以下步驟：（1)混合步驟，將所述多菌種菌曲、尿 素和薯渣混合，得到發(fā)酵用物料;和(2)發(fā)酵步驟，將所述發(fā)酵用物料發(fā)酵，得到所述飼料。 在一些實(shí)施方式中，制備所述飼料的方法在最后還可以包括干燥并制粒的步驟。
[0028]在一些實(shí)施方式中，所述混合步驟中使用的所述薯渣的含水量等于或者小于70重 量％，例如等于或者小于65重量％，60重量％或者55重量％。由于新鮮紅薯渣出廠含水率可 達(dá)90%，過高的含水率不利于菌種的生長，所以為了菌種的正常生長用于發(fā)酵的薯渣含水 率要控制到70%以下。
[0029] 在一些實(shí)施方式中，在由所述薯渣和所述多菌種菌曲組成的混合物料中，所述所 述薯渣和所述多菌種菌曲的重量比為15:1~25:1，例如為20:1。
[0030] 在一些實(shí)施方式中，先將所述薯渣與所述多菌種菌曲混合，再添加占所述混合物 料的總重量的0.4重量％~0.6重量％，例如為約0.5%的尿素并攪拌均勻。
[0031] 在一些實(shí)施方式中，發(fā)酵時(shí)將溫度控制在40°C以下，并且發(fā)酵直至微生物計(jì)數(shù)達(dá) 到109cfu/g(-般發(fā)酵48小時(shí)即可確保能夠達(dá)到該微生物計(jì)數(shù)）。
[0032]在一些實(shí)施方式中，所述薯渣通過將新鮮薯渣經(jīng)脫水至等于或者小于70重量％而 制得。在一些實(shí)施方式中，所述新鮮薯渣產(chǎn)出自紅薯淀粉廠和/或馬鈴薯加工廠。在一些實(shí) 施方式中，所述薯渣為紅薯薯渣和/或馬鈴薯薯渣。
[0033] 本發(fā)明在第三方面提供了由本發(fā)明的第二方面所述的方法制得的飼料。
[0034] 本發(fā)明在第四方面提供了本發(fā)明第三方面提供的所述飼料在用于豬等的飼料中 的應(yīng)用。
[0035]本發(fā)明在第五方面提供了本發(fā)明第三方面提供的所述飼料在用作固態(tài)發(fā)酵動(dòng)物 蛋白飼料中的應(yīng)用。
[0036] 在一些更加具體的實(shí)施方式中，本發(fā)明第一方面所述的多菌種菌曲以及本發(fā)明所 述第二方面所述的飼料可以通過如下方法進(jìn)行：
[0037] (1)將產(chǎn)H元假絲酵母(Candida utilis)、枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis)分別 通過試管培養(yǎng)、搖瓶培養(yǎng)，再按10 %的接種量接種至液體種子罐培養(yǎng)24小時(shí)，得到菌劑，植 物乳桿菌（lactobacillus planticola)用斜面厭氧培養(yǎng)，再接入滅菌糖化過的玉米糊中厭 氧培養(yǎng)48小時(shí)；
[0038] (2)在得到各種菌種的發(fā)酵液后，將產(chǎn)朊假絲酵母和枯草芽孢桿菌分別按照10% 的比例接種到滅菌過得麩皮培養(yǎng)基中，水分控制在40~50%混合均勻，25~30°C發(fā)酵48小 時(shí)得到菌曲，向滅菌后的麩皮培養(yǎng)基中接種10 %的植物乳桿菌菌液，厭氧條件下37°C培養(yǎng) 48小時(shí)，即得到植物乳桿菌菌曲，再按產(chǎn)朊假絲酵母菌曲：枯草芽孢桿菌菌曲：植物乳桿菌 菌曲=1:1:1的比例混合，即得到生產(chǎn)用菌曲；
[0039] (3)將紅薯、馬鈴薯等薯渣脫水至含水量小于或者等于70% ;
[0040] (4)將(3)中所述脫水后的薯渣與（2)中所述的生產(chǎn)用菌曲按質(zhì)量比為20:1的比例 混合，再添加物料總質(zhì)量約0.5%的尿素?cái)嚢杈鶆颍瑢囟瓤刂圃?0°C以下發(fā)酵48小時(shí)，從 而制得成品飼料。
[0041] 在一些更加具體的實(shí)施方式中，首先將產(chǎn)朊假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿 菌經(jīng)過斜面活化，培養(yǎng)溫度分別為28 °C、31°C和35°C，時(shí)間為48小時(shí)，得到純種菌株。將得到 的純種產(chǎn)朊假絲酵母和枯草芽孢桿菌菌株接種到有液體培養(yǎng)基的三角搖瓶中，培養(yǎng)溫度控 制在28~31°C，轉(zhuǎn)速為150r/min，培養(yǎng)24小時(shí)得到菌劑;將活化后的植物乳桿菌接入糖化滅 菌后的玉米面糊，厭氧培養(yǎng)48小時(shí)得到植物乳桿菌菌劑。將得到的各種菌劑按10%的接種 量接種至種子罐中，產(chǎn)朊假絲酵母和枯草芽孢桿菌種子罐在攪拌狀態(tài)下25~30°C，培養(yǎng)24 小時(shí);植物乳桿菌厭氧條件下溫度在35°C培養(yǎng)24小時(shí)，得到制曲用菌劑。
[0042]將得到產(chǎn)朊假絲酵母、枯草芽孢桿菌菌劑按10%的接種量向滅菌后的麩皮培養(yǎng)基 中分別接種，調(diào)整水分至40~50%，溫度25~30°C發(fā)酵48小時(shí)既得產(chǎn)朊假絲酵母和枯草芽 孢桿菌菌曲；將得到的植物乳桿菌菌劑按10%的接菌量接入滅菌后的麩皮培養(yǎng)基中，厭氧 條件下37°C培養(yǎng)48小時(shí)，即得到植物乳桿菌菌曲。再按產(chǎn)朊假絲酵母菌曲：枯草芽孢桿菌菌 曲：植物乳桿菌菌曲=1:1:1的比例混合，即得到生產(chǎn)用菌曲。
[0043]將得到的生產(chǎn)用菌曲與脫水至含水量小于或者等于70%的脫水薯渣混合均勻，質(zhì) 量比例為1:20，再添加約總質(zhì)量0.5%的尿素。將所有物料混勻堆放成三角錐型，堆溫超過 40°C立即翻堆，發(fā)酵直至微生物計(jì)數(shù)達(dá)到10 9cfu/g，即得成品飼料。
[0044] 實(shí)施例
[0045] 下面將通過實(shí)施例的形式對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】進(jìn)行更加詳細(xì)的說明，但是本 發(fā)明不限于如下實(shí)施例。
[0046] 實(shí)施例中所使用的產(chǎn)朊假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌分別從西安紫瑞生 物科技有限公司商購獲得。各種培養(yǎng)基從西安紫瑞生物科技有限公司購獲得。各種培養(yǎng)基 的組成如下：
[0047] 麩皮培養(yǎng)基由重量比為麩皮:水=2:1的麩皮和水組成。
[0048]試管培養(yǎng)用培養(yǎng)基的各組分及其含量為5g/L牛肉膏，10g/L蛋白胨，5g/LNaCl， 15g/L瓊脂；
[0049] 搖瓶培養(yǎng)用培養(yǎng)基的組成同試管培養(yǎng)用培養(yǎng)基；
[0050] 種子罐培養(yǎng)用培養(yǎng)基的組成同試管培養(yǎng)用培養(yǎng)基；
[0051 ] 實(shí)施例1
[0052] 發(fā)酵處理30噸紅薯渣。新鮮紅薯渣基本組分為:粗蛋白0.68%、粗脂肪0.15%、灰 分0.67，粗纖維29.3 %、淀粉44.7 %，含水量70 %。實(shí)施流程如下。
[0053] (1)將產(chǎn)朊假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌經(jīng)過斜面活化，培養(yǎng)溫度分別為 28°C、31°C和35°C，時(shí)間為48小時(shí)，此時(shí)經(jīng)顯微鏡檢測，微生物計(jì)數(shù)達(dá)到109cfu/g，得到純種 菌株。將得到的純種產(chǎn)朊假絲酵母和枯草芽孢桿菌菌株接種到l〇〇〇mL三角搖瓶中，培養(yǎng)溫 度控制在28~31°C，轉(zhuǎn)速為150r/min，培養(yǎng)24小時(shí)得到菌劑;將lkg玉米糊糖化滅菌后接入 活化后的植物乳桿菌，37°C厭氧培養(yǎng)48小時(shí)得到植物乳桿菌菌劑。將得到的各種菌劑按 10%的接種量接種至種子罐中，產(chǎn)朊假絲酵母和枯草芽孢桿菌種子罐在攪拌狀態(tài)下25~30 °C，培養(yǎng)24小時(shí)；植物乳桿菌種子罐密封，不攪拌，溫度在35°C培養(yǎng)24小時(shí)，得到制曲用菌 劑。
[0054] (2)將得到產(chǎn)朊假絲酵母、枯草芽孢桿菌菌劑按10%的接種量分別向滅菌后的 500kg麩皮培養(yǎng)基中分別接種，調(diào)整水分至50%，溫度25~30°C發(fā)酵48小時(shí)，即得產(chǎn)朊假絲 酵母、枯草芽孢桿菌菌曲；將得到的植物乳桿菌菌劑按10%的接菌量接入滅菌后的500kg麩 皮培養(yǎng)基中，密封37°C培養(yǎng)48小時(shí)，即得到植物乳桿菌菌曲。再按產(chǎn)朊假絲酵母菌曲：枯草 芽孢桿菌菌曲：植物乳桿菌菌曲=1:1:1的比例混合，即得到生產(chǎn)用菌曲。
[0055] (3)將得到的1.5噸生產(chǎn)用菌曲與30噸脫水紅薯渣分別分為三份，按重量比為1:20 混合均勻，即為實(shí)驗(yàn)組的三個(gè)重復(fù)，，每組再添加總質(zhì)量0.5%的尿素。將所有物料混勻堆放 成三角錐型，保持40°C以下(堆溫超過40°C立即翻堆)發(fā)酵48小時(shí)，再經(jīng)低溫干燥（25°C)和 制粒成為成品飼料。
[0056] (4)選取體重為30kg左右的仔豬120頭隨機(jī)分為6組，分別為實(shí)驗(yàn)組的三個(gè)重復(fù)和 對(duì)照組的三個(gè)重復(fù)。實(shí)驗(yàn)組設(shè)置為期5天的預(yù)實(shí)驗(yàn)，每天按20%的梯度替換實(shí)驗(yàn)組的傳統(tǒng)飼 料，直至全部替換為發(fā)酵飼料。正式試驗(yàn)為期85天，實(shí)驗(yàn)組投喂發(fā)酵飼料，對(duì)照組投喂傳統(tǒng) 飼料，傳統(tǒng)飼料配方為:玉米60%、豆柏27%、麩皮5%、精料8%，其他條件全部相同。實(shí)驗(yàn)期 間使豬自由采食每天查看采食量及時(shí)補(bǔ)料，并且記錄每次添料的重量。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后為每頭 豬稱重，計(jì)算料肉比。最后實(shí)驗(yàn)結(jié)果為實(shí)驗(yàn)組的料肉比平均為2.609±0.07,對(duì)照組的料肉 比平均為2.88±0.08,統(tǒng)計(jì)學(xué)的顯著性分析顯示實(shí)驗(yàn)組的料肉比顯著低于對(duì)照組。
[0057] 實(shí)施例2
[0058] 發(fā)酵處理30噸馬鈴薯渣。新鮮馬鈴薯渣基本組分為：粗蛋白0.72%、粗脂肪 0.50 %、灰分0.52 %，粗纖維11.3 %、淀粉43.8 %，含水量70 %。實(shí)施流程如下。
[0059] (1)將產(chǎn)朊假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌經(jīng)過斜面活化，培養(yǎng)溫度分別為 28°C、31°C和35°C，時(shí)間為48小時(shí)，得到純種菌株。將得到的純種產(chǎn)朊假絲酵母和枯草芽孢 桿菌菌株接種到l〇〇〇mL三角搖瓶中，培養(yǎng)溫度控制在28~31°C，轉(zhuǎn)速為150r/min，培養(yǎng)24小 時(shí)得到菌劑;將lkg玉米糊糖化滅菌后接入活化后的植物乳桿菌，37°C厭氧培養(yǎng)48小時(shí)得到 植物乳桿菌菌劑。將得到的各種菌劑按10%的接種量接種至種子罐中，產(chǎn)朊假絲酵母和枯 草芽孢桿菌種子罐在攪拌狀態(tài)下25~30°C，培養(yǎng)24小時(shí);植物乳桿菌種子罐密封，不攪拌， 溫度在35 °C培養(yǎng)24小時(shí)，得到制曲用菌劑。
[0060] (2)將得到產(chǎn)朊假絲酵母、枯草芽孢桿菌菌劑按10%的接種量分別向滅菌后的 500kg麩皮培養(yǎng)基中分別接種，調(diào)整水分至50%，溫度25~30°C發(fā)酵48小時(shí)，即得產(chǎn)朊假絲 酵母、枯草芽孢桿菌菌曲；將得到的植物乳桿菌菌劑按10%的接菌量接入滅菌后的500kg麩 皮培養(yǎng)基中，密封37°C培養(yǎng)48小時(shí)，即得到植物乳桿菌菌曲。再按產(chǎn)朊假絲酵母菌曲：枯草 芽孢桿菌菌曲：植物乳桿菌菌曲=1:1:1的比例混合，即得到生產(chǎn)用菌曲。
[0061] (3)將得到的1.5噸生產(chǎn)用菌曲與30噸脫水馬鈴薯渣分別分為三份，按重量比為1: 20混合均勻，即為實(shí)驗(yàn)組的三個(gè)重復(fù)，每組再添加總質(zhì)量0.5%的尿素。將所有物料混勻堆 放成三角錐型，保持40°C以下（堆溫超過40°C立即翻堆)發(fā)酵48小時(shí)，再經(jīng)低溫干燥(25°C) 制粒成為成品飼料。
[0062] (4)選取體重為30kg左右的仔豬120頭隨機(jī)分為6組，分別為實(shí)驗(yàn)組的三個(gè)重復(fù)和 對(duì)照組的三個(gè)重復(fù)，設(shè)置為期5天的預(yù)實(shí)驗(yàn)，每天按20%的梯度替換實(shí)驗(yàn)組的傳統(tǒng)飼料，直 至全部替換為發(fā)酵飼料。正式試驗(yàn)為期85天，實(shí)驗(yàn)組投喂發(fā)酵飼料，按照實(shí)施例1的方式進(jìn) 行對(duì)照組傳統(tǒng)飼料的投喂，其他條件全部相同，實(shí)驗(yàn)期間每天記錄各組飼料投喂量。實(shí)驗(yàn)結(jié) 束后為每頭豬稱重，計(jì)算料肉比。最后實(shí)驗(yàn)結(jié)果為對(duì)照組的料肉比平均為3.81±0.07,試驗(yàn) 組的料肉比平均為2.613±0.05,分析得到實(shí)驗(yàn)組料肉比顯著低于對(duì)照組。
[0063] 實(shí)施例3
[0064] 采用與實(shí)施例2中基本相同的方式進(jìn)行實(shí)施例3,不同之處在于，在步驟(2)中在麩 皮培養(yǎng)基中接種時(shí)，調(diào)整水分至40%。發(fā)酵前的薯渣的各種組分含量不再測量，只是測量發(fā) 酵后的各種組分的含量，結(jié)果見下表1、表2。另外，料肉比采用實(shí)施例2的對(duì)照組作為對(duì)照， 不再另設(shè)對(duì)照組，結(jié)果見下表3、表4。
[0065] 實(shí)施例4
[0066] 采用與實(shí)施例2中基本相同的方式進(jìn)行實(shí)施例4,不同之處在于，按產(chǎn)朊假絲酵母 菌曲：枯草芽孢桿菌菌曲：植物乳桿菌菌曲= 1:3:3的比例混合。發(fā)酵前的薯渣的各種組分 含量不再測量，只是測量發(fā)酵后的各種組分的含量，結(jié)果見下表1、表2。另外，料肉比采用實(shí) 施例2的對(duì)照組作為對(duì)照，不再另設(shè)對(duì)照組，結(jié)果見下表3、表4。
[0067] 實(shí)施例5
[0068] 采用與實(shí)施例2中基本相同的方式進(jìn)行實(shí)施例5,不同之處在于，按產(chǎn)朊假絲酵母 菌曲：枯草芽孢桿菌菌曲：植物乳桿菌菌曲= 1:2:2的比例混合。發(fā)酵前的薯渣的各種組分 含量不再測量，只是測量發(fā)酵后的各種組分的含量，結(jié)果見下表1、表2。另外，料肉比采用實(shí) 施例2的對(duì)照組作為對(duì)照，不再另設(shè)對(duì)照組，結(jié)果見下表3、表4。
[0069] 實(shí)施例6
[0070] 采用與實(shí)施例2中基本相同的方式進(jìn)行實(shí)施例6,不同之處在于，按產(chǎn)朊假絲酵母 菌曲：枯草芽孢桿菌菌曲：植物乳桿菌菌曲=3:1:1的比例混合。發(fā)酵前的薯渣的各種組分 含量不再測量，只是測量發(fā)酵后的各種組分的含量，結(jié)果見下表1、表2。另外，料肉比采用實(shí) 施例2的對(duì)照組作為對(duì)照，不再另設(shè)對(duì)照組，結(jié)果見下表3、表4。
[0071] 實(shí)施例7
[0072] 采用與實(shí)施例2中基本相同的方式進(jìn)行實(shí)施例7,不同之處在于，按產(chǎn)朊假絲酵母 菌曲：枯草芽孢桿菌菌曲：植物乳桿菌菌曲=2:1:1的比例混合。發(fā)酵前的薯渣的各種組分 含量不再測量，只是測量發(fā)酵后的各種組分的含量，結(jié)果見下表1、表2。另外，料肉比采用實(shí) 施例2的對(duì)照組作為對(duì)照，不再另設(shè)對(duì)照組，結(jié)果見下表3、表4。
[0073] 實(shí)施例8
[0074] 采用與實(shí)施例2中基本相同的方式進(jìn)行實(shí)施例8,不同之處在于，不制備產(chǎn)朊假絲 酵母菌曲，并且將枯草芽孢桿菌菌曲：植物乳桿菌菌曲=1:1的比例混合。發(fā)酵前的薯渣的 各種組分含量不再測量，只是測量發(fā)酵后的各種組分的含量，結(jié)果見下表1、表2。另外，料肉 比采用實(shí)施例2的對(duì)照組作為對(duì)照，不再另設(shè)對(duì)照組，結(jié)果見下表3、表4。
[0075] 實(shí)施例9
[0076] 采用與實(shí)施例2中基本相同的方式進(jìn)行實(shí)施例9,不同之處在于，不制備枯草芽孢 桿菌菌曲，并且將產(chǎn)朊假絲酵母菌曲：植物乳桿菌菌曲=1:1的比例混合。發(fā)酵前的薯渣的 各種組分含量不再測量，只是測量發(fā)酵后的各種組分的含量，結(jié)果見下表1、表2。另外，料肉 比采用實(shí)施例2的對(duì)照組作為對(duì)照，不再另設(shè)對(duì)照組，結(jié)果見下表3、表4。
[0077] 實(shí)施例10
[0078] 采用與實(shí)施例2中基本相同的方式進(jìn)行實(shí)施例9,不同之處在于，不制備植物乳桿 菌菌曲枯草芽孢桿菌菌曲，并且將產(chǎn)朊假絲酵母菌曲：枯草芽孢桿菌菌曲=1: 1的比例混 合。發(fā)酵前的薯渣的各種組分含量不再測量，只是測量發(fā)酵后的各種組分的含量，結(jié)果見下 表1、表2。另外，料肉比采用實(shí)施例2的對(duì)照組作為對(duì)照，不再另設(shè)對(duì)照組，結(jié)果見下表3、表 4〇
[0079] 表1發(fā)酵紅薯渣飼料中基本組分對(duì)比（％ )
[0081] #:紅薯薯渣發(fā)酵前數(shù)據(jù);
[0082] 如表1所示，應(yīng)用本發(fā)明所述多菌種菌曲和發(fā)酵方法能夠明顯的降低紅薯渣中粗 纖維和淀粉含量，將其轉(zhuǎn)化成粗蛋白含和脂肪。
[0083] 表2發(fā)酵馬鈴薯薯渣中基本組分對(duì)比（％ )
[0086] '馬鈴薯薯渣發(fā)酵前數(shù)據(jù)；
[0087] 注：同行肩標(biāo)不同表示差異顯著(P〈0.05)，字母相同及未標(biāo)注行表示彼此之間差 異不顯著。下表同。
[0088] 由表2可以看出，實(shí)施例8發(fā)酵數(shù)據(jù)中粗蛋白含量明顯低于實(shí)施例1~實(shí)施例7發(fā)酵 薯渣中的粗蛋白含量，這是由于實(shí)施例8中沒有添加產(chǎn)朊假絲酵母的緣故。實(shí)施例9的發(fā)酵 薯渣中粗纖維和淀粉含量過高，這是由于發(fā)酵用菌曲沒有枯草芽孢桿菌的緣故。
[0089] 表3紅薯渣實(shí)施例中的料肉比
[0091] 對(duì)照組數(shù)據(jù)。
[0092] 表4馬鈴薯渣實(shí)施例中料肉比
[0095] #:對(duì)照組數(shù)據(jù)。
[0096]由上表4可以看出，實(shí)施例10中料肉比僅低于對(duì)照組，這是由于其發(fā)酵用菌曲中沒 有植物乳桿菌的緣故。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種用于薯渣發(fā)酵的多菌種菌曲，其特征在于，所述多菌種菌曲包含或者由如下菌 曲組成:產(chǎn)H元假絲酵母(Candida utilis)菌曲、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)菌曲和 植物乳桿菌（lactobacillus planticola)菌曲。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的多菌種菌曲，其特征在于，所述多菌種菌曲中的所述產(chǎn)朊假絲 酵母菌曲：枯草芽孢桿菌菌曲：植物乳桿菌菌曲的重量比為1~3:1~3:1~3。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的多菌種菌曲，其特征在于，所述重量比為1: 1:1。4. 根據(jù)權(quán)利要求1~3中任一項(xiàng)所述的多菌種菌曲，其特征在于，所述多菌種菌曲中的 所述產(chǎn)朊假絲酵母菌曲、枯草芽孢桿菌菌曲和植物乳桿菌菌曲的總菌體蛋白含量為大于或 者等于60重量％。5. 根據(jù)權(quán)利要求1~3中任一項(xiàng)所述的多菌種菌曲，其特征在于，所述產(chǎn)朊假絲酵母菌 曲和/或枯草芽孢桿菌菌曲通過如下方式制得： (1) 將菌種依次通過試管培養(yǎng)、搖瓶培養(yǎng)和種子罐培養(yǎng)，得到菌種發(fā)酵液;和 (2) 將所述菌種發(fā)酵液接種至無菌麩皮培養(yǎng)基中混合均勻，同時(shí)將水分控制在40重 量％~50重量％，在25°C~30°C發(fā)酵48小時(shí)，從而得到菌曲； 所述試管培養(yǎng)的培養(yǎng)溫度為28°C~35°C，培養(yǎng)時(shí)間為48小時(shí);所述搖瓶培養(yǎng)的培養(yǎng)溫 度為28°C~31°C，搖瓶速度為150轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)時(shí)間為24小時(shí)；和/或所述種子罐培養(yǎng)以10 重量％的接種量接種至液體種子罐中并且在攪拌狀態(tài)下于25°C~30°C培養(yǎng)24小時(shí)的方式 進(jìn)行。6. 根據(jù)權(quán)利要求1~3中任一項(xiàng)所述的多菌種菌曲，其特征在于，所述植物乳桿菌菌曲 通過如下方式制得： (1) 對(duì)菌種進(jìn)行斜面厭氧培養(yǎng)，再接種至無菌糖化玉米糊中在37°C厭氧培養(yǎng)，從而得到 菌種發(fā)酵液;和 (2) 向無菌麩皮培養(yǎng)基中接種所述菌種發(fā)酵液，在厭氧條件下在35°C培養(yǎng)，得到菌曲。7. -種利用薯渣來制備飼料的方法，其特征在于，所述方法使用權(quán)利要求1~6中任一 項(xiàng)所述的多菌種菌曲進(jìn)行。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟： (1) 混合步驟，將所述多菌種菌曲、尿素和薯渣混合，得到發(fā)酵用物料； (2) 發(fā)酵步驟，將所述發(fā)酵用物料發(fā)酵，得到所述飼料。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述混合步驟中使用的所述薯渣的含水量 等于或者小于70重量％ ;以及 在由所述薯渣和所述多菌種菌曲組成的混合物料中，所述所述薯渣和所述多菌種菌曲 的重量比為15~25:1。10. 由權(quán)利要求7所述的方法制得的飼料。
【文檔編號(hào)】A23K10/37GK105901282SQ201610239900
【公開日】2016年8月31日
【申請(qǐng)日】2016年4月18日
【發(fā)明人】陳五嶺, 郭彥釗
【申請(qǐng)人】福建美家園生物科技股份有限公司