專利名稱：預(yù)防腫瘤生長的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種預(yù)防炎癥、自身免疫性疾病以及腫瘤生長的方法，該方法是通過抑制由β-淋巴毒素受體(LRBR)介導(dǎo)的活化作用。
β-淋巴毒素膜蛋白(Browning et.al.，Cell Vol.72，847-856，1993)以同聚和異聚的形式與特定的β-淋巴毒素受體(LTBR)相結(jié)合(Croweet.al.，Science Vol.264，29 April 1994，707-709)。
Browning等人(J.Exp.Med.Vol.183，March 1996，867-878)描述β-淋巴毒素受體系統(tǒng)發(fā)出的信號可以導(dǎo)致某些腺癌細(xì)胞的死亡，因此他們建議將β-淋巴毒素受體的活化作為一種可能的抗癌治療方法。
Degli-Esposti(Journal of Immunology，1997，158；1756-1762)等人報(bào)道了通過激活LTBR系統(tǒng)能抑制黑色素瘤細(xì)胞的生長，因此他們也提議用β-淋巴毒素治療實(shí)體瘤。
與之相反，我們的發(fā)現(xiàn)顯示抑制LTBR的活化能減慢或預(yù)防腫瘤的生長。
本發(fā)明的目的是提供一種通過抑制或至少降低LTBR介導(dǎo)的活化作用從而預(yù)防炎癥、自身免疫性疾病和腫瘤生長的方法。
該方法特別適于急性和慢性炎癥，如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、結(jié)腸炎和實(shí)體瘤。
LTBR系統(tǒng)可在不同水平上被抑制。
例如，使用反義分子能抑制LTBR的基因表達(dá)。另一種特異性抑制LTBR的基因表達(dá)的方法是，例如通過合適的核酶進(jìn)行特異性水解作用消除LTBR的mRNA。
更進(jìn)一步抑制LTBR基因表達(dá)的可能方法是阻斷相應(yīng)的信號序列的轉(zhuǎn)錄，如阻斷LTBR基因的促進(jìn)區(qū)域的轉(zhuǎn)錄。
抑制LTBR系統(tǒng)活化作用的另一種可能性在于應(yīng)用β-淋巴毒素拮抗劑，即那些能夠與β-淋巴毒素受體結(jié)合卻不能激活受體系統(tǒng)的分子。通過檢測細(xì)胞檢測系統(tǒng)中受試物質(zhì)在加入β-淋巴毒素后使LTBR系統(tǒng)活化作用降低的能力可檢測出這些物質(zhì)。
本發(fā)明的另一目的是能抑制LTBR活化作用的物質(zhì)來制備細(xì)胞抑制劑和抑制炎癥藥物的應(yīng)用。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)抑制LTBR的活化作用能使腫瘤血管生成受阻，從而能抑制實(shí)體瘤的生長。
因此，用上述物質(zhì)及方法預(yù)防LTBR活化作用特別適于抑制腫瘤的血管生成。
以下的實(shí)驗(yàn)將解釋本發(fā)明。
實(shí)驗(yàn)1用LTBR和免疫球蛋白的融合蛋白轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞(BFS-1)(BFS-LTR)。這種LTBR和免疫球蛋白的融合蛋白作為LTBR抑制劑。在接種入同基因小鼠后，這些轉(zhuǎn)染后的腫瘤細(xì)胞與野生型腫瘤細(xì)胞相比，其腫瘤生長受抑(圖)。
實(shí)驗(yàn)2在第二個(gè)實(shí)驗(yàn)中，這些腫瘤細(xì)胞被種入配體缺陷小鼠(即既不能產(chǎn)生α-淋巴毒素也不能產(chǎn)生β-淋巴毒素的雙重缺陷小鼠)后，轉(zhuǎn)染后的腫瘤細(xì)胞與野生型腫瘤細(xì)胞相比，腫瘤生長未見明顯差異(圖)。
實(shí)驗(yàn)3用活體顯微鏡觀察腫瘤在小鼠體內(nèi)的生長。
將普通腫瘤細(xì)胞、用LTBR受體抑制劑(BSF-1-LTβR-IgFc)轉(zhuǎn)染后的腫瘤細(xì)胞及用對照質(zhì)粒(p55TNF-受體-Ig-Fc)轉(zhuǎn)染后的腫瘤細(xì)胞種入小鼠(C57BL/6)皮下，通過活體顯微鏡觀察腫瘤的生長和血管生成。腫瘤細(xì)胞接種后2天接種LTβ-受體抑制劑轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞的小鼠的水腫形成較對照中的明顯減小。當(dāng)普通腫瘤細(xì)胞和被對照質(zhì)粒轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞接種后5～9天，小鼠已有明顯的血管生成和相應(yīng)的腫瘤生長；而接種LTβ-受體抑制劑轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞的小鼠在腫瘤接種區(qū)域及周圍皮膚未見血管生成，腫瘤亦未見進(jìn)一步生長。
附圖
所示分別是腫瘤細(xì)胞接種2天(圖2)及9天(圖3)后的照片，上圖為對照腫瘤，下圖為LTβ受體抑制劑轉(zhuǎn)染腫瘤。
權(quán)利要求
1.一種通過抑制LTBR活化作用從而預(yù)防炎癥、自身免疫性疾病和腫瘤生長的方法。
2.如權(quán)利要求1的方法，其特征在于抑制LTBR基因表達(dá)。
3.如權(quán)利要求2的方法，其特征在于應(yīng)用LTBR反義分子。
4.如權(quán)利要求2的方法，其特征在于特異性地水解LTBR的mRNA。
5.如權(quán)利要求2的方法，其特征在于特定性地阻斷LTBR轉(zhuǎn)錄的信號序列。
6.如權(quán)利要求2的方法，其特征在于將作用于LTBR轉(zhuǎn)錄信號序列的轉(zhuǎn)錄因子特定性阻斷。
7.如權(quán)利要求1的方法，其特征在于應(yīng)用LTBR拮抗劑。
8.如權(quán)利要求1的方法，其特征在于阻斷內(nèi)源性LTBR配體。
9.具有抑制LTBR介導(dǎo)的活化作用的物質(zhì)用于制備細(xì)胞抑制藥物和抑制炎癥藥物的應(yīng)用。
10.權(quán)利要求9的應(yīng)用，用于抑制腫瘤血管生成。
全文摘要
一種通過抑制LTBR介導(dǎo)的活化作用從而預(yù)防炎癥、自身免疫性疾病和腫瘤生長的方法。
文檔編號A61K48/00GK1359297SQ00809675
公開日2002年7月17日 申請日期2000年6月21日 優(yōu)先權(quán)日1999年6月28日
發(fā)明者D·N·曼奈爾, T·希爾岡斯, C·塞茨 申請人:巴斯福股份公司