專利名稱：荊芥內(nèi)酯及其提取工藝和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種單萜化合物，具體地說，涉及由荊芥提取的荊芥內(nèi)酯，及它作為藥物的用途。
單萜類化合物已經(jīng)被廣泛的研究，如(+)異薄荷內(nèi)酯也已被合成(參見Tetrahedron Vol.49,No.29,pp.6429-6436,1993)，但至今未有報導從藥材荊芥中提取得到一種薄荷烷型的單萜化合物荊芥內(nèi)酯。
本發(fā)明的目的在于提供一種從藥材荊芥中提取的荊芥內(nèi)酯以及它的提取方法和作為藥物的用途。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下述。
荊芥內(nèi)酯，它的分子式為C10H14O3，熔點為188-189℃，其比旋光度為[α]D20=+46.7°(乙酸乙酯溶液)，它的結(jié)構(gòu)式如圖1所示，本發(fā)明人暫命名為荊芥內(nèi)酯(Schizonepetin)。
本發(fā)明的荊芥內(nèi)酯的提取方法包括如下步驟A．將荊芥藥材用乙醇加熱提取，得乙醇提取液，乙醇提取液減壓回收乙醇后得醇浸膏，B．將A步驟得到的醇浸膏用乙酸乙酯萃取，將乙酸乙酯萃取液減壓回收乙酸乙酯得乙酸乙酯萃取物，C．將乙酸乙酯萃取物用層析硅膠裝柱進行柱層析，用石油醚-乙酸乙酯進行梯度洗脫，收集含有荊芥內(nèi)酯的流份，靜置析出粗晶，即為荊芥內(nèi)酯粗品，將荊芥內(nèi)酯粗品用乙酸乙酯-石油醚重結(jié)晶，得到荊芥內(nèi)酯粒狀晶體，純度可達99％以上。
具體的操作如下取荊芥生藥材飲片(荊芥藥材潤后切制成0.5-1.0cm長的小段)13kg，用10倍量(130kg)95％醫(yī)用乙醇溫浸(50±2℃)5次(分別為2天，1天，1天，1天，1天)，每天攪拌2-3次，過濾，合并浸提液，于70℃減壓回收乙醇至無醇味而得到醇浸膏。
將所得醇浸膏用乙酸乙酯(A·R)1500ml分2次萃取，每次750ml，乙酸乙酯萃取液減壓濃縮(60℃,0.09Mpa)至干，得乙酸乙酯溶解物430g；以柱層析硅膠(100-200目)500g拌樣，干法裝柱。硅膠與樣品量之比為8∶1；以石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯進行常壓梯度洗脫，每500ml為一流份，從純石油醚開始，每20000ml增加2％的乙酸乙酯，合并石油醚∶乙酸乙酯=100∶6-100∶8段流份，靜置2-3天即有粗晶析出。
將粗晶以乙酸乙酯(A·R)-石油醚重結(jié)晶可得粒狀結(jié)晶，純度可達99.4％(HPLC歸一化法測得)；將母液濃縮，以薄層層析用硅膠H拌樣并干法上柱，以石油醚∶乙酸乙酯=100∶7加壓洗脫，又有大量粗晶洗脫出柱，同前法用乙酸乙酯一石油醚重結(jié)晶，即可得較純的荊芥內(nèi)酯結(jié)晶。
荊芥內(nèi)酯的藥理試驗表明，它具有較強的生理活性。試驗表明1．它對流感病毒感染小鼠死亡具有明顯的保護作用，并且能降低流感病毒感染小鼠的肺指數(shù)值，因此可用于制備抗感冒病毒藥物；2．它能明顯抑制巴豆油所致的小鼠耳腫脹和明顯抑制腹腔注射HAC導致小鼠毛細血管滲透性的增加，具有明顯的抗炎作用，因此可用于制備消炎藥物；3．它對乙型鏈球菌具有較強的抗菌作用，因此可用于制備抑制乙型鏈球菌的藥物；4．它既能有效減少腹腔注射化學致痛劑HAC所致小鼠扭體的次數(shù)，又能明顯提高小鼠對溫熱刺激的痛閾值，因此可用于制備鎮(zhèn)痛劑；5．它能使磷酸組胺致痙的豚鼠氣管螺旋條松弛，因此可以用于制備抗過敏藥物；6．它對大鼠足跖部汗腺有較顯著的興奮作用，因此可以用于制備發(fā)汗劑。
本發(fā)明的荊芥內(nèi)酯是一種新的薄荷烷型單萜類化合物，它結(jié)構(gòu)簡單，提取方法簡便價廉，具有較強的生理活性。


圖1為荊芥內(nèi)酯的結(jié)構(gòu)圖；圖2為荊芥內(nèi)酯高分辨質(zhì)譜圖；圖3為荊芥內(nèi)酯的紅外光譜圖；圖4為荊芥內(nèi)酯紫外光譜圖；圖5為荊芥內(nèi)酯H1-NMR譜圖；圖6為荊芥內(nèi)酯C13-NMR譜圖；圖7為荊芥內(nèi)酯X-ray譜圖；圖8為荊芥內(nèi)酯高壓液相色譜圖。
以下通過實施例進一步說明本發(fā)明。
將醇浸膏1.25kg用乙酸乙酯800ml捏溶2次，每次400ml，乙酸乙酯提取液減壓濃縮(60℃,0.08-0.09Mpa)至干，得到乙酸乙酯溶解物196g；以柱層析硅膠(100-200目)220g拌樣，減壓烘干(60℃,0.08-0.09Mpa)，研細，過80目篩，干法裝柱(玻璃柱8cm×120cm)，硅膠與樣品量之比為8∶1(裝柱硅膠為1600g)，以石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯進行常壓洗脫，每500ml為一流份，從純石油醚開始，每20000ml增加2％乙酸乙酯，合并石油醚∶乙酸乙酯=100∶6-100∶8段流份，靜置3-5天即有粗晶自溶液中析出，繼續(xù)放置4周，過濾，結(jié)晶以石油醚-乙酸乙酯重結(jié)晶可得到粒狀結(jié)晶，過濾，減壓干燥，得粒狀晶體725mg，純度為99.7％(HPLC歸一化法測得99.7％，見圖8)；將母液濃縮得稠膏1.6g，以硅膠H4g(200-300目)拌樣，干法上柱(4×100cm)，硅膠用量50g，以石油醚∶乙酸乙酯=100∶8加壓洗脫，收集洗脫液計6000ml(以TLC跟蹤至內(nèi)酯全部洗脫出柱)，減壓濃縮(50℃,0.07MPa)至200ml，趁熱轉(zhuǎn)移至250ml三角瓶中，冷卻后即有粗晶析出，放置2周，使溶劑自然揮發(fā)。將粗晶以石油醚-乙酸乙酯重結(jié)晶，得粒狀晶體241mg，經(jīng)HPLC(C18柱，甲醇∶水=45∶55為流動相，λ=216nm，靈敏度為2AUFS，流速為0.8ml/min)檢測，此處所得241mg與前述725mg晶體為同一化合物，將二者合并共得結(jié)晶化合物966mg，得率為0.0161％。
實施例2荊芥內(nèi)酯結(jié)構(gòu)解析荊芥內(nèi)酯為無色粒晶(乙酸乙酯)，mp:188-189℃。TLC薄層顯紅色(10％硫酸乙醇)，高分辨質(zhì)譜測得的M+為182.0915(圖3，計算值為182.0941)，分子式為C10H14O3，提示可能為一單萜類化合物。文獻報道從荊芥中分離得到的四個單萜類成分皆為薄荷烷型，從生源分析，此單萜類化合物也可能為薄荷烷型。
紅外光譜顯示化合物有羥基(3353cm-1)、羰基(1692cm-1、1743cm-1)及環(huán)狀結(jié)構(gòu)(1743cm-1)(圖4)；紫外光譜λmax(logε):216nm(4.0842)(圖5)顯示化合物具有共軛吸收特征。
1H-NMR(CDCL3)顯示兩個甲基峰δ1.8ppm(3H,d,J=2.1Hz)為連在雙鍵上的甲基；δ0.97ppm(3H,d,J=6.6Hz)為連在次甲基上的甲基(圖6)。
13C-NMR譜測得該結(jié)晶有十個碳(ppm):δ172.2、δ160.3、δ121.3、δ103.4、δ46.0、δ35.0、δ29.1、δ24.3、δ21.0、δ8.1(圖7)。
為了闡明化合物的絕對構(gòu)型，我們作了單晶X-ray分析，化合物的結(jié)構(gòu)顯示鍵長和鍵角基于正常的范圍(圖8)。
化合物的質(zhì)譜裂解峰為(m/z):M+182，基峰為154(M+-CO)，主要碎片離子有164、149、139、137、121、109、93、81(圖2)。實施例3荊芥內(nèi)酯的抗病毒試驗(1)對甲型流感病毒感染小鼠的保護作用。
取昆明種小鼠120只，體重11～13g。隨機分為6組，每組20只，♀♂各半。各組小鼠在乙醚淺麻醉下，以病毒尿囊液滴鼻感染，每鼠30μl(30個LD50攻擊量)。觀察動物感染后發(fā)病癥狀，記錄感染后15d內(nèi)死亡數(shù)。結(jié)果如表1所示。表1荊芥內(nèi)酯對H1N1病毒感染小鼠死亡的保護作用劑量 動物數(shù) 死亡數(shù) 死亡率組別 (mg/kg) (n)(n) (％)X2P正常對照組 - 20 0病毒對照組 - 20 19 95利巴韋林組 75 20 10 508.03＜0.005荊芥內(nèi)酯Ⅰ組1.7 20 14 70 - -荊芥內(nèi)酯Ⅱ組5 20 12 605.16＜0.05荊芥內(nèi)酯Ⅲ組10 20 10 508.03＜0.005與病毒對照組比較P＜0.05 P＜0.005實驗結(jié)果表明，荊芥內(nèi)酯5mg/kg劑量組，對流感病毒感染小鼠死亡具有明顯保護作用。
(2)對流感病毒感染小鼠肺指數(shù)的影響取昆明種小鼠50只，體重12-14g，隨機分為5組，♀♂各半，每組10只。各組動物ig給藥，0.2ml/10g鼠重，1次/d，連續(xù)5d，于給藥后第2d，各組小鼠在乙醚淺麻醉下，以病毒尿囊液滴鼻感染，每只30μl，(20個LD50攻擊量)，實驗前禁食(不禁水)，實驗當日各組小鼠稱重，脫頸椎處死，解剖，觀察肺部病變，取全肺稱重，計算各鼠肺指數(shù)值，肺指數(shù)抑制率，試驗結(jié)果見表2.
表2荊芥內(nèi)酯對H1N1病毒感染小鼠肺指數(shù)的影響(x±s)-組別 動物數(shù)劑量肺指數(shù)值 抑制率(只)(mg/kg)(％)病毒對照組 10-1.550-0.12利巴韋林組 10 75.0 1.039±0.111* 33荊芥內(nèi)酯Ⅰ組10 1.71.145±0.32*26荊芥內(nèi)酯Ⅱ組10 5.01.084±0.28*30荊芥內(nèi)酯Ⅲ組10 10.0 1.064±0.28*31與病毒對照組比較*P＜0.005 **P＜0.001
實驗結(jié)果表明荊芥內(nèi)酯三個劑量組，均能降低流感病毒感染小鼠的肺指數(shù)值，與病毒對照組比較，差異非常顯著。
實施例4荊芥內(nèi)酯的抗炎作用采用2種炎癥模型研究了荊芥內(nèi)酯的抗炎作用。結(jié)果荊芥內(nèi)酯以5.00、7.00、9.75mg/kg腹腔注射給藥對小鼠腹腔毛細血管通透性和巴豆油性耳腫脹的抑制作用非常顯著，其高劑量組與阿司匹林組作用相當。
方法與結(jié)果對小鼠耳廓炎癥的影響(耳廓腫脹法)取小鼠50只，雌雄各半，體重18～22g，隨機分為5組。分別按表3腹腔注射給藥，30分鐘后給小鼠左耳兩面涂巴豆油0.1ml/只。4小時后剪下小鼠左右兩耳，用9mm打孔器在同一部位打孔，即時稱重，算出腫脹度，結(jié)果如表3。Table 3 Effect of Schizonepetin on Mice Ear SwellingGroup Number Dose(mg/kg)Swelling Rate(x±S,％)Normal Saline 10 / 182.3±4.5Aspirin 1084.5 138.0±6.7*SchizonepetinⅠ 105.00 164.1±19.9##SchizonepetinⅡ 107.00 156.0±11.8**##SchizonepetinⅢ 109.75 134.1±11.4**SchizonepetinⅠ(S1):lower dose；SchizonepetinⅡ(S2):intermediate doseSchizonepetinⅢ(S3):higher doseVs Normal Saline group*P＜0.05**P＜0.01Vs Aspirin group##P＜0.01對小鼠腹腔毛細血管通透性的影響(腹腔染料滲出法)取體重為18～22g雄性小鼠50只，隨機分為5組，分別按表4腹腔注射給藥。30分鐘后尾靜脈注射0.5％伊文思蘭生理鹽水溶液0.1ml/10g，隨即腹腔注射0.5％HAC 0.2ml/只。20分鐘后處死小鼠，剪開腹腔，用6ml生理鹽水分數(shù)次洗滌腹腔，吸出、合并后，分別吸取2.0ml加生理鹽水稀釋至10ml，于3000rpm離心15分鐘，取上清液于590nm處比色，測定其OD值，進行組間t檢驗，結(jié)果如表4。Tab4 Schizonepetin′s Activity on Capillary Pemeability in Mice′s Cavum AbdominisGroup NumberDose OD Value(590nm)(mg/kg)(x±S)NormalSaline10 /1.159±0.263Aspirin 10 84.25 0.702±0.190**SchizonepetinⅠ105.000.859±0.241##SchizonepetinⅡ107.000.874±0.191*#SchizonepetinⅢ109.750.560±0.169**SchizonepetinⅠ(S1):lower dose；SchizonepetinⅡ(S2):intermediate doseSchizonepetinⅢ(S3):higher doseVs Normal Saline group*P＜0.05**P＜0.01Vs Aspirin group#P＜0.05##P＜0.0結(jié)論以上試驗結(jié)果表明，荊芥內(nèi)酯能明顯抑制巴豆油所致小鼠耳腫脹及腹腔注射HAC導致小鼠毛細血管滲透性的增加，與生理鹽水組比較，差異非常顯著(P＜0.05,P＜0.01)，其抑制作用隨劑量增大而增強。
實施例5．荊芥內(nèi)酯的鎮(zhèn)痛作用采用2種疼痛模型研究了荊芥內(nèi)酯的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果荊芥內(nèi)酯以5.00、7.00、9.75mg/kg腹腔注射給藥既能提高小鼠對溫熱刺激的痛閾值，又能減少小鼠對化學致痛劑(HAC)刺激的扭體次數(shù)，與杜冷丁組比較，其鎮(zhèn)痛作用具有起效慢和作用時間長的特點。
方法與結(jié)果扭體法取小鼠50只，雌雄各半，體重為18～22g，隨機分為5組，分別按表5腹腔注射給藥。30分鐘后各鼠均腹腔注射0.5％HAC 0.2ml/只。觀察10分鐘內(nèi)各組出現(xiàn)扭體反應(腹部內(nèi)凹、伸展后肢、臀部抬高)動物數(shù)，結(jié)果如表5。Table 5 Effect of Schizonepetin on Chemical荊芥內(nèi)酯imuli to MiceGroup Number Dose(mg/kg) Twi荊芥內(nèi)酯ingnumber(x±S)NormalSaline 10/ 27.6±2.6Aspirin 1084.5 11.8±3.3**SchizonepetinⅠ 105.00 24.6±5.1##SchizonepetinⅡ 107.00 16.4±3.5**#SchizonepetinⅢ 109.75 9.5±1.6**SchizonepetinⅠ(S1):lowerdose；SchizonepetinⅡ(S2):intermediatedoseSchizonepetinⅢ(S3):higher doseVs Normal Saline group**P＜0.01Vs Aspirin group#P＜0.05##P＜0.01熱板法調(diào)節(jié)恒溫水浴，使水溫控制在55.0℃±0.5℃。取18～22g雌性小鼠70只進行篩選合格小鼠。方法為將小鼠放在熱板上，觀察小鼠舔后足出現(xiàn)的時間(秒)，將該段時間作為該鼠的痛閾值(凡舔后足時間小于5秒或大于30秒或跳躍者棄之不用)。經(jīng)篩選合格的小鼠50只隨機分為5組，重復測其正常痛閾值，取兩次正常痛閾平均值作為該鼠給藥前痛閾值。觀察藥物作用各組均按表6腹腔注射給藥，給藥后15、30、60、90分鐘分別測小鼠痛閾值。如60分鐘仍無反應，將小鼠取出，以免燙傷，其痛閾值以60秒計算，求出痛閾提高百分率，結(jié)果如表6。Table 6 Schizonepetin’s Activity on Hot Plate荊芥內(nèi)酯imuli to MiceGroup Number DoseElaltation of Pain Threshold(X±S)(mg/kg) 15min30min 60min 90minNormal Saline10 / -4.32+41.35 6.26+32.63 11.53+49.06 77.76+95.48SchizonepetinⅠ 105.00 -5.01+40.85* -3.02+35.26*62.44+95.7* 85.04+60.3*SchizonepetinⅢ 107.00 3.25+20.5* -6.6+21.86* 65.28+46.51** 57.05+61.12*SchizonepetinⅢ 109.75 23.91+40.13* 80.87+80.0**108.95+57.24* 102.6+56.7*Dolantin 1050 133.67+46.8*** 106.5+96.4*** 153.4+146.1** 125.02+60.2*SchizonepetinⅠ(S1):lower dose；SchizonepetinⅡ(S2):intermediate doseSchizonepetinⅢ(S3):higher doseVs Normal Saline group*P＞0.05**P＜0.05***P＜0.01實驗結(jié)果表明，荊芥內(nèi)酯能明顯提高小鼠對溫熱刺激的痛閾值。
結(jié)論結(jié)果表明，荊芥內(nèi)酯既能有效減少腹腔注射化學致痛劑HAC所致小鼠扭體的次數(shù)，又能明顯提高小鼠對溫熱刺激的痛閾值；與生理鹽水組比較，差異非常顯著(P＜0.05,P＜0.01)。其作用隨劑量增大而增強。
實施例6．荊芥內(nèi)酯的抗過敏作用荊芥內(nèi)酯對豚鼠離體氣管平滑肌的影響(氣管螺旋條法)方法1．氣管螺旋條的制備及肌張力調(diào)節(jié)實驗前調(diào)節(jié)恒溫水浴使溫度控制在37±0.5℃，將麥氏浴槽置于水浴中，于麥氏浴槽中加入Krebs營養(yǎng)液，通以適量(保持每秒鐘1-2個氣泡)純氧，備用。取350-400g豚鼠，用木棰猛擊頭部致死。迅速切開頸部皮膚，分離氣管，從甲狀軟骨下至氣管下端分叉處將整段氣管剪下，放入盛有營養(yǎng)液的培養(yǎng)皿中(營養(yǎng)液預先用氧氣飽和)，仔細剔除氣管周圍的結(jié)締組織，將氣管剪成螺旋條狀，一段氣管制成2個螺旋條。在氣管螺旋條兩端各用縫針穿一根線，將其一端系在L型通氣管的小鉤上，小心放入麥氏浴槽中。用雙凹夾將通氣管的另一端固定在鐵支架上。將一個重2g的砝碼掛于肌力換能器上，記錄2g負荷使描筆上升的高度。取下砝碼，將氣管條的另一端用線連接于換能器上，調(diào)節(jié)其張力，使描筆剛好升高到2g負荷的高度，此時氣管條所承受的拉力即為2g。
2．觀察藥物作用穩(wěn)定30分鐘后，接通記錄儀電源[時間常數(shù)(S)DC，濾波(Hz)10，靈敏度(mV/cm)1，走紙速度4mm/min]，記錄一段正常曲線，然后加入磷酸組胺，使浴槽內(nèi)濃度為1.67×10-6g/ml，當氣管平滑肌張力升到最高點時，用藥組每個標本加入荊芥內(nèi)酯混懸液，使槽內(nèi)濃度為1.85×10-2mg/ml，對照組加入同體積的生理鹽水，觀察比較兩組標本給藥后曲線下降幅度，并按下列公置于離心機中以2000rpm離心10分鐘得血漿，以血漿測定其比粘度。檢測指標如下全血比粘度=全血流速(秒)/NS流速(秒)低切變率、中切變率和高切變率之全血比粘度分別計算。
血漿比粘度=血漿流速(秒)/NS流速(秒)RBC壓積(HCT)將全血混勻注入RBC壓積管內(nèi)，以3000rpm離心30分鐘，觀察RBC壓積管刻度(白細胞部分不計入)。
結(jié)果荊芥內(nèi)酯可使大鼠全血粘度降低，使RBC聚集指數(shù)降低，從而降低血液粘度，改善血流變。如表10Table 10 Effect of Schizonepetin on Hemorrheology of RatsDoseWhole Blood Specific ViscosityRBCGroup Number (mg/kg)L.T. M.T.H.T.Aggregation(8 1/S) (60 1/S)(120 1/S) IndexNormal Saline 10 / 15.25±2.26 7.59±1.19 5.84±0.74 2.90±0.45SchizonepetinⅠ105.016.46±2.01 7.27±0.63 5.62±0.25 3.28±0.82SchizonepetinⅡ1010.0 13.69±1.48 6.78±0.32*4.86±0.30**2.66±0.68SchizonepetinⅢ1020.0 10.9±2.04**6.18±1.30*4.80±0.85*3.11±0.80Pilocarpine1035.0 11.4±0.91**6.12±0.81**4.90±0.57*2.50±0.23*SchizonepetinⅠ(S1):lower dose；SchizonepetinⅡ(S2):intermediate doseSchizonepetinⅢ(S3):higher doseVs Normal Saline group*P＜0.05**P＜0.01實施例9．荊芥內(nèi)酯的抑菌試驗結(jié)果荊芥內(nèi)酯藥液對乙型鏈球菌具有較強的抗菌作用(其MIC為0.08mg/ml)，而對其他菌種抗菌效果不明顯，見表11。
Table 11 Effect of Schizonepetin on some kinds of BacteriaDilution 1∶2 1∶4 1∶8 1∶16 1∶32 1∶64 1∶128 1∶256 Positive NegativeFactor Control ControlStreptococci A++ ++ + + + + -+Streptococci B-- -- - - + + -+StaphylococcusAureus ++ ++ + + + + -+BacillusDiphtheriae ++ ++ + + + + -+TyphoidBacillus ++ ++ + + + + -+BacillusDysenteriae ++ ++ + + + + -+“+”means Bacteria is active；“-”means no Bacterial growth.Table 9 Image Analysis of Schizonepetin’s Activity onSweat Gland Epithelia of Rats’Toes(four fields of view,the total statistical area is 109809.97μm2)Dose Physalis Physalis DigitalAreal DensityGroup Num (mg/kg) Number Area Density(×10-4)(um2) (×10-5)Normal Saline 10 /12.1 ±2.2 572.7±123.0 1.1±0.2 5.22±1.12SchizonepetinⅠ102.018.0±1.6 977.2±170.3 1.6±0.1**8.91±1.55**SchizonepetinⅡ104.020.1±2.6 1296.5±175.61.8±0.2**11.81±1.60**SchizonepetinⅢ108.019.0±1.8 1193.7±193.51.7±0.2**10.87±1.76**Pilocarpine1035.0 19.3±2.6 909.5±146.9 1.8±0.4**8.28±1.34**SchizonepetinⅠ(S1):lower dose；SchizonepetinⅡ(S2):intermediate doseSchizonepetinⅢ(S3):higher doseVs Normal Saline group**P＜0.01(t)實施例8．荊芥內(nèi)酯對血液流變性的影響方法取150-200g大鼠50只，稱重編號，隨機分為5組，每組雌雄各半。各組于給藥后1小時齊髁關(guān)節(jié)處瞬時截斷雙后肢(供發(fā)汗實驗組織形態(tài)觀察用)，立刻于大鼠眼眶靜脈叢取血約5ml，用肝素鈉(0.2ml/管)抗凝。單層紗布過濾以除去血凝塊。將抗凝血置于離心機中以2000rpm離心10分鐘得血漿，以血漿測定其比粘度。檢測指標如下全血比粘度=全血流速(秒)/NS流速(秒)低切變率、中切變率和高切變率之全血比粘度分別計算。
血漿比粘度=血漿流速(秒)/NS流速(秒)RBC壓積(HCT)將全血混勻注入RBC壓積管內(nèi)，以3000rpm離心30分鐘，觀察RBC壓積管刻度(白細胞部分不計入)。
結(jié)果荊芥內(nèi)酯可使大鼠全血粘度降低，使RBC聚集指數(shù)降低，從而降低血液粘度，改善血流變。如表10Table 10 Effect of Schizonepetin on Hemorrheology of RatsDoseWhole Blood Specific Viscosity RBCGroup Number (mg/kg)L.T. M.T. H.T. Aggregation(8 1/S)(60 1/S) (120 1/S) IndexNormal Saline 10 / 15.25±2.26 7.59±1.195.84±0.742.90±0.45SchizonepetinⅠ105.0 16.46±2.01 7.27±0.635.62±0.253.28±0.82SchizonepetinⅡ1010.0 13.69±1.48 6.78±0.32*4.86±0.30**2.66±0.68SchizonepetinⅢ1020.0 10.9±2.04**6.18±1.30*4.80±0.85*3.11±0.80Pilocarpine1035.0 11.4±0.91**6.12±0.81**4.90±0.57*2.50±0.23*SchizonepetinⅠ(S1):lower dose；SchizonepetinⅡ(S2):intermediate doseSchizonepetinⅢ(S3):higher doseVs Normal Saline group*P＜0.05**P＜0.01實施例9．荊芥內(nèi)酯的抑菌試驗結(jié)果荊芥內(nèi)酯藥液對乙型鏈球菌具有較強的抗菌作用(其MIC為0.08mg/ml)，而對其他菌種抗菌效果不明顯，見表11。
Table 11 Effect of Schizonepetin on some kinds of BacteriaDilution1∶2 1∶4 1∶8 1∶16 1∶32 1∶64 1∶128 1∶256 Positive NegativeFactor Control ControlStreptococciA ++++ ++ + + - +Streptococci B---- -- + + - +StaphylococcusAureus ++++ ++ + + - +BacillusDiphtheriae ++++ ++ + + - +TyphoidBacillus ++++ ++ + + - +BacillusDysenteriae ++++ ++ + + - +“+”means Bacteria is active；“-”means no Bacterial growth.
權(quán)利要求
1．荊芥內(nèi)酯，其特征是分子式為C10H14O3，熔點為188-189℃，其比旋光度為[α]D20=+46.70，具有如下結(jié)構(gòu)
2．一種權(quán)利要求1所述的荊芥內(nèi)酯的提取方法，其特征是包括如下步驟A．將荊芥藥材用乙醇加熱提取，得乙醇提取液，乙醇提取液減壓回收乙醇后得醇浸膏，B．將A步驟得到的醇浸膏用乙酸乙酯萃取，將乙酸乙酯萃取液減壓回收乙酸乙酯得乙酸乙酯萃取物，C．將乙酸乙酯萃取物用層析硅膠裝柱進行柱層析，用石油醚-乙酸乙酯進行梯度洗脫，收集含有荊芥內(nèi)酯的流份，靜置析出粗晶，即為荊芥內(nèi)酯粗品，
3．根據(jù)權(quán)利要求2所述的提取方法，其特征是將荊芥內(nèi)酯粗品用乙酸乙酯-石油醚重結(jié)晶，得到荊芥內(nèi)酯粒狀晶體，純度為99％以上。
4．一種權(quán)利要求1所述的荊芥內(nèi)酯的用途，其特征是用于制備抗感冒病毒藥物。
5．一種權(quán)利要求1所述的荊芥內(nèi)酯的用途，其特征是用于制備消炎藥物。
6．一種權(quán)利要求1所述的荊芥內(nèi)酯的用途，其特征是用于制備抑制乙型鏈球菌的藥物。
7．一種權(quán)利要求1所述的荊芥內(nèi)酯的用途，其特征是用于制備鎮(zhèn)痛劑。
8．一種權(quán)利要求1所述的荊芥內(nèi)酯的用途，其特征是用于制備抗過敏藥物。
9．一種權(quán)利要求1所述的荊芥內(nèi)酯的用途，其特征是用于制備發(fā)汗劑。
全文摘要
荊芥內(nèi)酯,其特征是分子式為C
文檔編號A61P37/08GK1323793SQ0110818
公開日2001年11月28日 申請日期2001年4月9日 優(yōu)先權(quán)日2001年4月9日
發(fā)明者丁安偉, 張麗, 丁婕 申請人:南京中醫(yī)藥大學