專(zhuān)利名稱(chēng)：酪蛋白及多肽在中草藥/中成藥中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種酪蛋白及多肽在中草藥/中成藥中的應(yīng)用。
近年研究表明，以數(shù)個(gè)氨基酸結(jié)合而成的低肽具有比多個(gè)氨基酸更好的營(yíng)養(yǎng)和生理功能，其中許多多肽類(lèi)還具有原蛋白質(zhì)或組成氨基酸所沒(méi)有的新功能。因而自80年代國(guó)內(nèi)外對(duì)肽類(lèi)的研究不斷深入?，F(xiàn)今已有眾多產(chǎn)品廣泛用于食品加工，例如用于特制育兒奶粉、飲料、口服液、流食、運(yùn)動(dòng)員等專(zhuān)用飲料和食品、治療食品、過(guò)敏反應(yīng)專(zhuān)用食品、養(yǎng)顏?zhàn)o(hù)膚化妝品等領(lǐng)域，隨著研究的不斷深化。新的應(yīng)用領(lǐng)域還在不斷地被拓展，特別在醫(yī)藥領(lǐng)域。MARUYAMAS等從牛乳酪蛋白的蛋白水解物中獲得了十二肽、七肽、五肽及六肽，這些肽的生理功效現(xiàn)已證實(shí)對(duì)高血壓的ACE有明顯明顯抑制作用，即作用于產(chǎn)生高血壓的原因，因此它對(duì)正常人而言可以長(zhǎng)期攝取，起到保健、營(yíng)養(yǎng)雙重作用，極其安全。1986、88年，Georgi、Hosono等發(fā)現(xiàn)酪蛋白在特定的酸制劑作用下，酪蛋白水解中有抗誘變性的活性肽存在，這些肽如繼續(xù)水解到氨基酸水平將失去抗誘變性。
目前在國(guó)外，各種肽的研究在繼續(xù)深化，酪蛋白磷肽的研究最為明朗，并且已有大量的、各類(lèi)型的保健品上市。酪蛋白活性多肽具有抗過(guò)敏性、抗高血壓、抗誘變、免疫調(diào)節(jié)，延緩衰老、激素分泌和細(xì)胞繁殖，增強(qiáng)吞噬細(xì)胞，保護(hù)表皮細(xì)胞，防止黑色素沉淀等多種功效。國(guó)外酪蛋白復(fù)合(活性)多肽在保健品、醫(yī)藥、飲料、嬰兒奶制品、咖哩飯、糖果，營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑、飼料添加劑、家庭副食品、食品添加劑等領(lǐng)域以不同的功效起著特殊的作用。實(shí)踐已證實(shí)它非常安全，無(wú)毒害，其獨(dú)特的生理功效等優(yōu)點(diǎn)，顯示出它具有強(qiáng)大的優(yōu)越性。1998年，德國(guó)已將酪蛋白磷肽純化后用于醫(yī)藥，并列入德國(guó)國(guó)家藥典中。在美國(guó)，含肽藥物已獲準(zhǔn)用來(lái)醫(yī)治某些疾病，諸如侏儒癥、不育癥、早熟癥等。還有些肽類(lèi)可能用來(lái)治療癌、抗抑郁、防治失眠等。后天免疫缺乏病及老年性癡呆癥等。
本發(fā)明的公開(kāi)本發(fā)明的目的是為了提供一種將酪蛋白及多肽添加至中草藥或中成藥中，由肽在中草藥中起導(dǎo)向作用，帶領(lǐng)中草藥中的有效成份、有方向、有目的地作用于病灶，可有效地提高治療效果、縮短治療時(shí)間。
本發(fā)明的目的可通過(guò)如下措施來(lái)實(shí)現(xiàn)一種酪蛋白及多肽在中草藥/中成藥中的應(yīng)用是將酪蛋白和/或多肽添加至中草藥/中成藥中。
在中草藥/中成藥中添加其總量的0.1-40％的酪蛋白和/或多肽。所述的酪蛋白及多肽選自市售產(chǎn)品。所述的多肽選自酪蛋白多肽、大豆糖聚肽、白蛋白肽、魚(yú)蛋白肽、谷物蛋白肽中的至少一種。
本發(fā)明相比現(xiàn)有技術(shù)具有如下優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明在中草藥或中成藥中添加酪蛋白及多肽，使在中草藥的植物蛋白基礎(chǔ)上添加大分子多肽類(lèi)蛋白質(zhì)；使多肽成為中草藥的導(dǎo)向物質(zhì)，帶領(lǐng)中草藥中的有效成份、有方向、有目的地作用于病灶，可有效地提高治療效果，縮短治療時(shí)間。
本發(fā)明的實(shí)施本發(fā)明還將結(jié)合實(shí)施例作進(jìn)一步詳述實(shí)施例1將酪蛋白多肽添加至中成藥貞芪扶正沖劑中。添加酪蛋白復(fù)合多肽的扶正沖劑的原料配伍為黃芪30g、女貞子12g、地黃20g、枸杞30g、黨參30g、甘草15g、當(dāng)歸8g、茯苓10g、柴胡6g、大棗20g、酪蛋白多肽18g。
本實(shí)施例，經(jīng)對(duì)衰老模型小鼠免疫作用及過(guò)氧化作用試驗(yàn)證實(shí)酪蛋白多肽添加至貞芪扶正沖劑中可增強(qiáng)衰老模型小鼠腦組織SOD的活性、降低過(guò)氧化脂質(zhì)產(chǎn)物的含量的作用。
本實(shí)施例的實(shí)驗(yàn)方法如下1.材料
1.1材料1.1.1動(dòng)物昆明種小白鼠，雌雄各半，體重20.0±1.0g，由衛(wèi)生部蘭州生物制品研究所提供。動(dòng)物合格證號(hào)醫(yī)動(dòng)字第14-001號(hào)。
1.1.2標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試盒分別由中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院科技開(kāi)發(fā)中心放免研究所、北方放免研究所、南京建成生物工程研究所提供標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試盒，并由蘭州醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科及甘肅中醫(yī)學(xué)院檢測(cè)。
2.方法及結(jié)果2.1對(duì)衰老模型小鼠腦組織SOD活性及腦組織MDA含量的影響小鼠110只，雌雄各半，體重20.0±1.0g，隨機(jī)分為11組，每組10只，生理鹽水組ig等容量生理鹽水6周；余實(shí)驗(yàn)小鼠分別在頸背部皮下注射5％D-半乳糖并同時(shí)ig相應(yīng)的藥物，模型組ig等容量生理鹽水液0.5ML/日，多肽組按大、中、小劑量組ig多肽1.8g/kg及1.2g/kg、0.6g/kg；復(fù)合生命肽I組按大、中、小劑量組ig多肽1.8g/kg+貞芪扶正沖劑1.95g/kg、多肽1.2g/kg+貞芪扶正沖劑1.3g/kg、多肽0.6g/kg+貞芪扶正沖劑0.65g/kg；復(fù)合生命肽II組按大、中、小劑量組ig多肽1.8g/kg+枸杞0.03g/kg、多肽1.2g/kg+枸杞0.02g/kg、多肽0.6g/kg+枸杞0.01g/kg，每日一次，六周末分別取大腦組織制成10％的組織勻漿分別檢測(cè)。過(guò)氧化物岐化酶活性的檢測(cè)應(yīng)用放射免疫法均按標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試盒說(shuō)明測(cè)定，丙二醛含量的檢測(cè)均應(yīng)用7220分光度計(jì)按標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試盒說(shuō)明測(cè)定。
2.1.1復(fù)合生命肽I組對(duì)衰老模型小鼠腦組織SOD活性及MDA含量的影響表1對(duì)衰老模型小鼠腦組織SOD活性及MDA含量的影響(X±S)動(dòng)物數(shù) SODMIDA模型組 10 27.994±0.337 27.948±0.967生理鹽水組 10 34.793±1.762*26.328±1.222**多肽組(大) 10 28.658±0.878 27.517±0.891(中) 10 28.893±1.198 26.850±0.835*(小) 10 31.233±2.416*26.707±1.271*注與模型組比較*P＜0.05**P＜0.012.1.2復(fù)合生命肽I組對(duì)衰老模型小鼠腦組織SOD活性及MDA含量的影響表2對(duì)衰老模型小鼠腦組織SOD活性及MDA含量的影響(X±S)動(dòng)物數(shù) SOD MDA模型組 10 27.994±0.33727.948±0.967生理鹽水組 10 34.793±1.762**26.328±1.222**復(fù)合生命肽I組(大) 10 31.311±2.753**25.672±1.039**(中) 10 36.340±1.690**24.896±0.764**(小) 10 42.197±1.075**22.655±1.636**注與模型組比較**P＜0.012.1.3復(fù)合生命肽II組對(duì)衰老模型小鼠腦組織SOD活性及MDA含量的影響表3對(duì)衰老模型小鼠腦組織SOD活性及MDA含量的影響(X±S)動(dòng)物數(shù) SODMDA模型組 10 27.994±0.337 27.948±0.967生理鹽水組 10 34.793±1.762**26.328±1.222**復(fù)合生命肽II組(大) 10 29.650±1.458*26.931±1.043*(中) 10 41.003±2.809**23.776±0.866**(小) 10 44.334±1.693**22.759±1.318**注與模型組比較*P＜0.05**P＜0.012.2對(duì)衰老模型小鼠免疫功能的影響小鼠150只，雌雄各半，實(shí)驗(yàn)分15組及給藥同上，六周末分別取血清檢測(cè)白細(xì)胞介素2(IL-2)、白細(xì)胞介素6(IL-6)含量的檢測(cè)均放射免疫法按標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試盒說(shuō)明測(cè)定。
2.2.1多肽組對(duì)衰老模型小鼠血清IL-2含量的影響表4對(duì)衰老模型小鼠含量的血清IL-2含量的影響(X±S)動(dòng)物數(shù)IL-2模型組 10 0.949±0.068生理鹽水組 10 1.211±0.076**多肽組(大) 10 1.002±0.076(中) 10 1.002±0.060(小) 10 1.167±0.116*注與模型組比較*P＜0.05**P＜0.012.2.2復(fù)合生命肽I組對(duì)衰老模型小鼠血清IL-2含量的影響表5對(duì)衰老模型小鼠含量的血清IL-2含量的影響(X±S)動(dòng)物數(shù) IL-2模型組 10 0.949±0.068生理鹽水組 10 1.211±0.076**復(fù)合生命肽I組(大) 10 1.190±0.095**(中) 10 1.241±0.068**(小) 10 1.330±0.125**注與模型組比較*P＜0.05**P＜0.012.2.3復(fù)合生命肽II組對(duì)衰老模型小鼠血清IL-2含量的影響表6對(duì)衰老模型小鼠含量的血清IL-2含量的影響(X±S)動(dòng)物數(shù) IL-2模型組 10 0.949±0.068生理鹽水組 10 1.211±0.076**復(fù)合生命肽I組(大) 10 1.050±0.082*(中) 10 1.174±0.101**(小) 10 1.260±0.086**注與模型組比較*P＜0.05**P＜0.013、討論衰老是生命過(guò)程中正常而又復(fù)雜的生理現(xiàn)象，是機(jī)體內(nèi)各種生化反應(yīng)的綜合過(guò)程。隨著年齡的增長(zhǎng)，自由基產(chǎn)生增多而清除自由基的相關(guān)酶活性下降以及機(jī)體免疫功能下降等多種因素均是機(jī)體發(fā)生衰老的重要機(jī)理。超氧化物岐化酶(SOD)可催化氧自由基的岐化反應(yīng)，是機(jī)體清除氧自由基的重要酶，而機(jī)體隨著年齡的增長(zhǎng)，氧自由基產(chǎn)生增加，同時(shí)組織SOD活性降低，導(dǎo)致氧自由基堆積。自由基(如O2、-OOH等)可通過(guò)過(guò)氧化作用攻擊細(xì)胞膜、RNA和蛋白質(zhì)等成分，引起脂質(zhì)過(guò)氧化和促進(jìn)分子交聯(lián)、DNA基因突變和DNA復(fù)制異常；促進(jìn)細(xì)胞膜上的不飽和脂肪酸產(chǎn)生過(guò)氧化反應(yīng)，形成丙二醛(MDA)等，同時(shí)可形成大分子脂褐素(Lipofascin，LK)在酶體中沉積，導(dǎo)致細(xì)胞功能?chē)?yán)重受損，機(jī)體因而逐漸趨于衰老。
人到中年以后，正常免疫功能隨著年齡增長(zhǎng)而逐漸衰退，免疫功能衰退是人體衰老的原因之一。IL-2的主要生物活性是促進(jìn)CTL和NK細(xì)胞增殖；促進(jìn)B細(xì)胞分化和增殖，促進(jìn)抗體生成，誘導(dǎo)生成淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞。LI-2和IL-2受體系統(tǒng)，是T細(xì)胞轉(zhuǎn)化和混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)的介質(zhì)。老年人產(chǎn)生IL-2能力，IL-2受體表達(dá)能力及自身混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)能力降低，是T細(xì)胞分裂能力降低的主要原因。IL-2在免疫應(yīng)答、免疫調(diào)節(jié)，在抗腫瘤免疫中具有重要作用，因而IL-2產(chǎn)生減少可加速人體衰老的過(guò)程。
應(yīng)用中醫(yī)藥防治惡性腫瘤及延緩衰老亦是近年來(lái)研究的熱點(diǎn)，并取得了長(zhǎng)足進(jìn)展。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)從整體觀(guān)點(diǎn)出發(fā)，如《素問(wèn)、生氣通天論》曰“陰平陽(yáng)秘，精神乃治；陰陽(yáng)離決，精氣乃絕”，指出機(jī)體的衰老以及死亡的根本原因在于六淫外邪，五臟虛損所致的陰陽(yáng)失調(diào)或離決，扶正固體、協(xié)調(diào)陰陽(yáng)乃延緩衰老之關(guān)鍵。惡性腫瘤屬中醫(yī)“癌”、“巖”、“惡腫”、“積聚”等范疇，系正氣虛弱、留滯客邪、氣滯血瘀、邪毒積聚、蘊(yùn)郁成塊所致，其治療法則有扶正固本法、通經(jīng)活絡(luò)法、活血化瘀法、軟堅(jiān)散結(jié)法、疏肝理氣法等。如枸杞等為延緩衰老、抗腫瘤的要藥。
現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)枸杞子對(duì)KATO-III細(xì)胞有明顯的抑制作用，主要表現(xiàn)為抑制DNA合成、干擾細(xì)胞分裂增殖；超微結(jié)構(gòu)顯示細(xì)胞變化、細(xì)胞器受不同程度的破壞。枸杞多糖注射可顯著促進(jìn)脾細(xì)胞增殖，LAK細(xì)胞抗瘤活性升高，體外IL-2用量減少75％。尤以提高快速LAK活性為明顯。枸杞子的丙酮提取液對(duì)致癌劑誘導(dǎo)的突變株TA98、TA100有抑制突變作用，抑制率分別為91.8％、82.6％。說(shuō)明枸杞子有抗突變物質(zhì)和具有抗御、阻斷致突變作用。枸杞提取液在試管內(nèi)及體內(nèi)試驗(yàn)均有明顯抑制小鼠肝過(guò)氧化脂質(zhì)(LPO)的生成作用，并呈劑量反應(yīng)關(guān)系；并使活體小鼠血中谷肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)活力和紅細(xì)胞超氧化物岐化酶(SOD)活力增高人體試驗(yàn)顯示可明顯抑制血清LPO生成，使血中GSH-PX活力增高。預(yù)先口服枸杞，可以明顯降低誘變劑絲裂霉素C誘發(fā)的老年人姐妹染色單體互換頻率，說(shuō)明枸杞能提高老年人DNA修復(fù)能力，對(duì)遺傳物質(zhì)損傷有保護(hù)作用，提示枸杞提取液具有延緩衰老作用。葛根有效成分S86019對(duì)人急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞株HL-60細(xì)胞增殖有明顯抑制作用，是一個(gè)有效的HL-60細(xì)胞分化誘導(dǎo)劑。有研究證實(shí)，葛根有明顯誘生腫瘤壞死因子(TNF)作用。
將中醫(yī)藥與多肽類(lèi)物質(zhì)有機(jī)結(jié)合研制的復(fù)合生命肽保健、治療效果更佳，應(yīng)用于人們保健治療中，適應(yīng)人類(lèi)醫(yī)療“回歸大自然”的趨勢(shì)，可以滿(mǎn)足綠色天然藥品的社會(huì)需要，為人類(lèi)身體的健康開(kāi)拓一片新的保健、治療天地。
本實(shí)驗(yàn)過(guò)程觀(guān)察了多肽組、復(fù)合生命肽I組(多肽+扶正沖劑)、復(fù)合生命肽II組(多肽+枸杞)對(duì)D-半乳糖所致衰老小鼠腦組織SOD活性的影響作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)復(fù)合生命肽I組、復(fù)合生命肽II組、復(fù)合生命肽III組均有一定的增強(qiáng)衰老模型小鼠腦組織SOD的活性、降低過(guò)氧化脂質(zhì)產(chǎn)物(MDA)含量的作用，且I、II組強(qiáng)與I組，并與劑量呈正相關(guān)，表明該制劑具有抗過(guò)氧化作用，此作用可能為該制劑的抗衰老作用機(jī)理之一。
另外，多肽I組、復(fù)合生命肽I組、復(fù)合生命肽II組勻可增加衰老模型小鼠血清白細(xì)胞介素2(IL-2)含量的作用，且I、II組強(qiáng)與多肽組，并與劑量呈正相關(guān)。
綜上所述，復(fù)合生命肽可增強(qiáng)衰老模型小鼠抗過(guò)氧化作用以及免疫功能，從而可發(fā)揮延緩衰老過(guò)程。
實(shí)施例二將酪蛋白添加至傳統(tǒng)中成藥香砂養(yǎng)胃丸中。其配伍為黨參20g、白術(shù)10g、茯苓8g、蒼術(shù)5g、甘草5g、半夏曲6g、陳皮5g、砂仁25g、木香20g、香附10g、枳殼10g、厚樸15g、六神曲10g、南山楂20g、麥芽15g、菜菔子10g、酪蛋白36g。
實(shí)施例三將大豆糖聚肽添加至傳統(tǒng)中成藥朱砂安神丸中。其配伍為朱砂200g、黃蓮300g、生地黃200g、當(dāng)歸200g、甘草200g、大豆糖聚肽44g。
實(shí)施例四將白蛋白肽添加至傳統(tǒng)中成藥牛黃解毒片中。其配伍為牛黃5g、大黃200g、黃芩150g、石膏200g、桔梗100g、雄黃50g、冰片25g、甘草50g、白蛋白肽200g。
權(quán)利要求
1.一種酪蛋白及多肽在中草藥/中成藥中的應(yīng)用；其特征在于將酪蛋白和/或多肽添加至中草藥/中成藥中。
2.如權(quán)利要求1所述的酪蛋白及多肽在中草藥/中成藥中的應(yīng)用，其特征在于在中草藥/中成藥中添加其總量的0.1-40％的酪蛋白和/或多肽。
3.如權(quán)利要求1所述的酪蛋白及多肽在中草藥/中成藥中的應(yīng)用，其特征在于所述的多肽選自酪蛋白肽、大豆糖聚肽、白蛋白肽、魚(yú)蛋白肽、谷物蛋白肽中的至少一種。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種酪蛋白及其復(fù)合多肽在中草藥/中成藥中的應(yīng)用，其特征在于將酪蛋白及其復(fù)合多肽添加至中草藥/中成藥中。
文檔編號(hào)A61K47/42GK1401391SQ0211444
公開(kāi)日2003年3月12日 申請(qǐng)日期2002年2月5日 優(yōu)先權(quán)日2002年2月5日
發(fā)明者陸曉民, 丁亞鋒 申請(qǐng)人:陸曉民