專利名稱：一種抗感染藥物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種抗感染藥物，是由從中藥當中提取獲得的有效部位為活性成分制備而成，具有解熱、抗炎等功效，屬于中藥領域。
背景技術：
上呼吸道感染是常見的外感疾病，由人體感受外邪而引起。現(xiàn)代醫(yī)學認為，主要由細菌和病毒所致。常年發(fā)病，治療不及時會造成較重的并發(fā)癥。腸炎是由于腸道內致病菌所引起的炎性反應，輕者為里急后重，嚴重時可形成敗血癥。目前用于治療上呼吸道感染的藥物很多，包括復方中藥制劑和含有單一有效部位的中藥制劑。但是，目前大部分的抗炎和抗病毒中藥制劑，以復方混合物制劑較多，以有效部位組合而成的組合物制成的制劑較少。造成這種局面的重要原因是依據(jù)當前的技術手段，難以從復方藥物制劑當中尋找到能夠代表全方方劑功效的具體有效成分，以致于很多以從中藥當中提取的有效部位為活性成分制備的制劑不能夠保留原方的功效，甚至還不如原方混合物制劑的療效。因此，如何以科學的方法和手段尋找復方藥物制劑當中有代表性的有效部位，將其配伍組合，能夠保留原方功效，且因活性成分的純度提高而療效增加，是目前復方中藥制劑研究的重要課題。黃連解毒湯源于唐·王燾所著《外臺秘要》，由黃連、黃芩、黃柏、梔子四味中藥所組成，是清熱解毒的代表方，中醫(yī)認為該方具有瀉火解毒，清化濕熱之功效。主要用于治療三焦熱盛，溫熱黃疸，感染性腹瀉等病癥。現(xiàn)代藥理學研究證明，該方具有抑菌、抗病毒和解熱抗炎等藥理作用。但是，由于至今該方的有效成分尚不清楚，所制成的混合物制劑因有效成分純度較低，單位劑量制劑當中有效成分含量不高，直接影響了該藥物制劑的療效。
我們通過口服中藥復方吸收入血有效成分的分析，證明該方吸收入血的諸種成分中，鹽酸黃連素、黃芩總苷和梔子總苷具有抑菌、抗病毒和解熱、抗炎等作用。為此，我們將鹽酸黃連素、黃芩總苷和梔子總苷組成復方，用于治療腸炎痢疾、肺炎和上呼吸道感染以及敗血癥等細菌和病毒性感染等病癥，完成了本發(fā)明。

發(fā)明內容
本發(fā)明目的在于提供一種藥物組合物。
本發(fā)明還提供了該組合物在制備治療細菌和病毒感染性疾病的藥物中的用途。
本發(fā)明藥物組合物的組成按照重量份為鹽酸黃連素50-150 黃芩總苷50-150 梔子總苷50-150本發(fā)明上述藥物組合物的優(yōu)選配比為鹽酸黃連素80-130 黃芩總苷80-130 梔子總苷80-130本發(fā)明上述藥物組合物的優(yōu)選配比為鹽酸黃連素100 黃芩總苷100 梔子總苷100本發(fā)明的藥物組合物按照常規(guī)的制劑工藝，可以制備成常用的藥物劑型，如片劑、丸劑、散劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液、注射劑等。本發(fā)明藥物制劑當中可以含有常用的賦形劑，例如，填充劑、崩解劑、潤滑劑、調味劑、稀釋劑、粘合劑等。
本發(fā)明藥物膠囊劑的制備方法如下取上述處方量的鹽酸黃連素、黃芩總苷和梔子總苷加入適量淀粉制粒，80℃干燥后，裝膠囊即得。
本發(fā)明藥物片劑的制備方法是取上述處方量的鹽酸黃連素、黃芩總苷和梔子總苷加入適量淀粉制粒，80℃干燥后，打片即得。
本發(fā)明藥物顆粒劑的制備方法是取上述處方量的鹽酸黃連素、黃芩總苷和梔子總苷加入適量淀粉制粒，80℃干燥后，即得顆粒劑。
本發(fā)明注射劑的制備方法是取上述處方量的鹽酸黃連素、黃芩總苷和梔子總苷加入適量的吐溫-80水溶液制成2ml安瓶的肌肉注射劑。
本發(fā)明原料藥的生產工藝包括1、鹽酸黃連素生產工藝取小檗(Berberis Poiretii Schneid)根，加0.5％硫酸冷浸24小時，酸水浸出液，用石灰乳中和過剩硫酸，使pH＝7，棄去沉淀物(硫酸鈣的雜質)，水溶液加濃鹽酸至pH2～3，再加4～5％食鹽鹽析，棄去溶液(含小檗胺等)，得沉淀物，即為鹽酸黃連素粗品。
將鹽酸黃連素粗品加熱溶于水，再加石灰水調至pH8.5～9，趁熱過濾。棄去不容物，溶液加鹽酸調pH2～3，放冷，結晶，過濾，得鹽酸黃連素結晶。用少量水洗至中性，抽干，80℃以下干燥。得精制鹽酸黃連素(純度95％以上)。
2、黃芩總苷(黃芩苷和漢黃芩苷)生產工藝取黃芩(Scutellaria baicalensis Georgi)根粗粉，分別以10倍、8倍量水煎煮兩次，每次1小時，過濾，棄去藥渣，濾液加HCI調pH1～2，80℃保溫30min，靜止，離心沉淀。棄去上清液，沉淀物加適量水攪勻，加40％NaOH，調至pH7再加適量乙醇，過濾。棄去濾渣，加鹽酸調pH1～2攪勻，加熱80℃保溫30min，過濾。濾液回收乙醇，沉淀物水洗，50％乙醇洗滌，再用95％乙醇洗滌或重結晶。得黃芩總苷(純度95％以上)。
3、梔子總苷(梔子苷和京尼平苷)生產工藝梔子(Gardenia jasminoides Ellis)果仁粗粉，加乙醚多次回流提取，棄去藥渣，合并乙醚提取液，回收乙醚，殘留物加70％乙醇溶解，過濾，棄去不容物，將70％乙醇溶液進行氧化鋁吸附柱層析，70％乙醇洗脫，洗脫液，濃縮，析晶，過濾。得白色晶體梔子總苷(純度95％以上)。
本發(fā)明藥物具有抑菌、抗病毒、解熱、抗炎等作用。用于治療腸炎痢疾、肺炎和上呼吸道感染、敗血癥等細菌和病毒性感染。
因此，本發(fā)明還要求保護本發(fā)明所述藥物組合物在制備治療腸炎痢疾、肺炎和上呼吸道感染、敗血癥等細菌和病毒性感染等疾病的藥物中的應用。
用法和用量3粒/次，3次/日，溫水送服。
實驗例實驗材料1、動物 昆明種小鼠，雌、雄各半，體重20±2g，動物合格證號10-6065，購自長春高新醫(yī)學動物實驗研究中心；新西蘭大耳白兔，雌雄兼用，體重1.5～2.5kg，動物合格證號10-1028，購自長春高新醫(yī)學動物實驗研究中心；2、藥品芩梔黃膠囊，批號20011116；鹽酸黃連素，批號20010922；黃芩總苷，批號20010817；梔子總苷，批號20010807.以上藥物由本單位植化室提供.阿斯匹林腸溶片，規(guī)格0.3g/片，批號970805，黑龍江醫(yī)藥工業(yè)實驗廠生產；氨芐西林鈉，華北制藥股份有限公司產品；病毒唑，規(guī)格100mg/ml，批號020926，蘇州第六制藥廠出品；硫酸慶大霉素注射液，規(guī)格150mg/ml，批號020708煙臺只楚藥業(yè)有限公司出品；雙黃連，規(guī)格600mg/瓶，批號20011237，哈爾濱松花江藥業(yè)有限公司產品；青霉素，規(guī)格160萬單位/瓶，批號C0203106，華北制藥股份有限公司產品；流感病毒、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、變形桿菌及肺炎雙球菌由長春中醫(yī)學院微生物教研室引入。傷寒副傷寒疫苗，購自于長春生物制品研究所。
方法與結果(1)離體抑菌試驗測定方法是將10支試管分為一組，每管內均裝有血清肉湯培養(yǎng)基(每升牛肉浸液中含蛋白凍10g，氯化鈉5g，調pH7.4，高壓滅菌，加入無菌鮮兔血清10％)1ml，取藥物原液1ml加入第1管中，以后倍比稀釋至第8管。在震蕩器上混合均勻，將第8管棄去1ml，第9、10管為陽性對照。每管加入各試驗菌株0.05ml，在震蕩器上混合均勻，37℃孵育18小時。觀察各管的混濁度，判斷藥物的最小抑菌濃度，結果見表1。
表1-1鹽酸黃連素離體抑菌的影響管號1 2 3 4 5 678氨芐 慶大濃度(μg/ml)5 10 20 40 80 160 320 640 5μg/ml 50μg/ml金葡菌 + + + + + -----大腸桿菌+ + + + + -----綠濃桿菌+ + + + + +--+-變形桿菌+ + + + + +----肺炎雙球菌 + + + + + ----+
表1-2黃芩總苷離體抑菌的影響管號 1 23456 7 8 氨芐 慶大濃度(μg/ml) 5 10 20 40 80 160 320 640 5μg/ml 50μg/ml金葡菌 + ++++- - - - -大腸桿菌 + ++++- - - - -綠濃桿菌 + +++++ - - + -變形桿菌 + ++++- - - - -肺炎雙球菌 + ++++- - - - +表1-3梔子總苷離體抑菌的影響管號 1 23456 7 8 氨芐 慶大濃度(μg/ml) 5 10 20 40 80 160 320 640 5μg/ml 50μg/ml金葡菌 + ++++- - - - -大腸桿菌 + +++-- - - - -綠濃桿菌 + +++++ - - + -變形桿菌 + ++++- - - - -肺炎雙球菌 + ++++- - - - +表1-4芩梔黃膠囊離體抑菌的影響管號 1 23456 7 8 氨芐 慶大濃度(μg/ml) 5 10 20 40 80 160 320 640 5μg/ml 50μg/ml金葡菌 + +++-- - - - -大腸桿菌 + +++-- - - - -綠濃桿菌 + +++++ - - + -變形桿菌 + +++-- - - - -肺炎雙球菌 + +++-- - - - +(2)離體抗流感病毒試驗生長成單層的MDCK細胞(犬腎細胞株)，棄生長液，用PBS液沖洗3次后，加入10 PFU/ml的病毒液100μl(其中包含1％BSA的PBS)放置溫箱4℃吸附1h。吸附后的細胞用PBS洗滌，加入含1％BSA、抗生素及所試藥物的MEM(維持液)于37℃，5％CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)12h，棄培養(yǎng)液，用PBS洗去由于感染病毒而死去的細胞，活的細胞用MTT法測得每孔加入20μl MTT，37℃培養(yǎng)5h，小心吸去培養(yǎng)上清液，每孔加入150μl二甲基亞砜，震蕩10分鐘，490nm測OD值，結果詳見表2。
表2芩梔黃膠囊及有效成分對離體流感病毒感染MDCK細胞增殖的影響X±SD組別給藥量 OD值(490nm)P值正常對照 0.533±0.034 ＜0.001病毒感染對照組 0.317±0.007病毒唑 50μg/ml0.559±0.062 ＜0.001雙黃連 500μg/ml 0.539±0.129 ＜0.05芩梔黃 300μg/ml 0.521±0.044 ＜0.001鹽酸黃連素 100μg/ml 0.371 ±0.037 ＜0.05黃芩總苷 100μg/ml 0.362±0.032 ＜0.05梔子總苷 100μg/ml 0.371±0.040 ＜0.05(3)整體抑菌試驗昆明小鼠50只雌、雄各半，體重20±2g，隨機分為對照(20ml/kg)；青霉素(10萬單位/kg)；芩梔黃膠囊(140mg/kg、70mg/kg和35mg/kg)，共5組，每組10只。每日口服給藥，兩日后，腹腔注射金黃色葡萄球菌0.5ml/只，記錄24小時各組小鼠死亡的時間和死亡率。比較芩梔黃膠囊組與對照組之間的差異，結果表明，芩梔黃對感染金黃色葡萄球菌小鼠有保護作用，呈量效關系，詳見表3。
表3.芩梔黃膠囊對金葡菌所致小鼠死亡率的影響組別 給藥量 動物數(shù) 死亡數(shù)(只) 死亡率對照組 20ml/kg10 10 100％青霉素組 10萬單位/kg10 110％雙黃連 1g/kg 10 550％芩梔黃膠囊 140mg/kg 10 330％芩梔黃膠囊 70mg/kg10 660％芩梔黃膠囊 35mg/kg10 990％
(4)整體抗病毒試驗選昆明小鼠100只雌、雄各半，體重15±2g，隨機分為對照(20ml/kg)；病毒唑(100mg/kg)；芩梔黃膠囊(140mg/kg、70mg/kg和35mg/kg)，共5組，每組20只。每日口服給藥，三日后，用乙醚輕度麻醉滴鼻感染流感病毒(0.05ml/只)感染后三日停藥，觀察10天，逐日記錄動物的發(fā)病癥狀和死亡數(shù)，結果詳見表4。
表4.芩梔黃膠囊對流感病毒所致小鼠死亡率的影響組別給藥量 動物數(shù) 死亡數(shù) 死亡率 P值對照組 20ml/kg 20 15 75％病毒唑組100mg/kg 20 5 25％P＜0.05芩梔黃膠囊 140mg/kg 20 3 15％P＜0.01芩梔黃膠囊 70mg/kg 20 5 25％P＜0.05芩梔黃膠囊 35mg/kg 20 10 50％P＜0.05(5)解熱試驗取體溫合格的健康大耳白兔30只，體重1.5～2.5kg，雌、雄兼用，稱重標記，隨機分為陰性對照組(10ml/kg)；陽性對照組(10ml/kg)；芩梔黃膠囊(140mg/kg、70mg/kg和35mg/kg)，共五組，每組6只，分別測量肛溫兩次，以均值作為正常體溫。陰性對照組分別耳緣靜脈注射生理鹽水1ml/kg，其余四組分別耳緣靜脈注射傷寒、副傷寒疫苗1ml/kg，待后四組體溫升高超過1℃后，口服給藥，給藥后分別測量記錄30、60、90、120分鐘的肛溫，芩梔黃膠囊能降低傷寒、副傷寒疫苗所致發(fā)熱白兔的體溫，詳見表5。
表5芩梔黃膠囊對白兔體溫的影響體溫(℃)組別劑量 給藥后時間表(min)正常 致熱后 30 60 90 120陰對組 10ml/kg38.6±0.3 38.5±0.338.66±0.3 38.9±0.4 38.3±0.338.7±0.4陽對組 10ml/kg38.5±0.2 40.5±0.4△△△40.1±0.5△△△39.9±0.6△△40.0±0.6△△△39.7±0.6△△芩梔黃 140mg/kg 38.8±0.2 40.7±0.9#38.9±0.7**38.7±0.7**38.6±0.7**38.4±0.5**芩梔黃 70mg/kg38.3±0.3 40.1±0.9#39.1±0.7*39.0±0.7*39.1±0.7*38.8±0.5*芩梔黃 35mg/kg38.6±0.6 40.5±0.6#40.0±1.1#39.9±1.0#39.6±0.6#39.7±0.9#
注△△△P＜0.001△△P＜0.01陰性對照組與陽性對照組比較；**P＜0.01*P＜0.05 #P＞0.05 給藥組與陽性對照組比較.
(6)抗炎試驗昆明小鼠50只雌、雄各半，隨機分為對照(20ml/kg)；阿司匹林(400mg/kg)；芩梔黃膠囊(140mg/kg、70mg/kg和35mg/kg)，共5組，每組10只。連續(xù)ig給藥3天，于末次給藥后1小時，用棉簽醮少許二甲苯涂于小鼠右耳正反兩面。15min后將動物處死，用內徑為6mm的打孔器，沿左右耳廓相同部位打孔，沖下相同面積的耳片稱重，以重量差作為耳腫脹程度，比較給藥組與對照組之間的差異結果詳見表6。
表6. 芩梔黃膠囊對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響組別 給藥量動物數(shù)耳腫脹程度(mg)對照組20ml/kg 1018.42±1.8阿司匹林 400mg/kg 1011.11±1.9***芩梔黃膠囊140mg/kg 1015.08±3.0**芩梔黃膠囊70mg/kg 1015.72±2.5*芩梔黃膠囊35mg/kg 1016.27±1.9*注***P＜0.001**P＜0.01 *P＜0.05 #P＞0.05通過試驗證明，組成芩梔黃膠囊復方的鹽酸黃連素、黃芩總苷和梔子總苷在上述抑菌和抗病毒作用方面有協(xié)同效應。關于鹽酸黃連素、黃芩總苷和梔子總苷及三種成分組成復方進行試驗的研究，從來未見過報道。這是從傳統(tǒng)中藥名方中，二次開發(fā)的現(xiàn)代中成藥。綜上所述，芩梔黃膠囊具有較強的抑菌、抗病毒和解熱抗炎等功效，在藥效學方面，各成分之間其作用有協(xié)同效應。
最佳實施方式實施例1鹽酸黃連素50黃芩總苷150 梔子總苷150取上述處方量的鹽酸黃連素、黃芩總苷和梔子總苷加入適量淀粉制粒，80℃干燥后，即得顆粒劑。
實施例2鹽酸黃連素130 黃芩總苷80 梔子總苷80
取上述處方量的鹽酸黃連素、黃芩總苷和梔子總苷加入適量淀粉制粒，80℃干燥后，打片即得。
實施例3鹽酸黃連素50 黃芩總苷150 梔子總苷150取上述處方量的鹽酸黃連素、黃芩總苷和梔子總苷加入適量的吐溫-80水溶液制成2ml安瓶的肌肉注射劑。
實施例4鹽酸黃連素80 黃芩總苷80 梔子總苷130取上述處方量的鹽酸黃連素、黃芩總苷和梔子總苷加入適量淀粉制粒，80℃干燥后，打片即得。
實施例5鹽酸黃連素100黃芩總苷100 梔子總苷100取上述處方量的鹽酸黃連素、黃芩總苷和梔子總苷加入適量淀粉制粒，80℃干燥后，打片即得。
權利要求
1.一種藥物組合物，其特征在于該組合物含有下述重量比的組分鹽酸黃連素50-150 黃芩總苷50-150梔子總苷50-150。
2.根據(jù)權利要求1的藥物組合物，其特征在于該組合物含有下述重量比的組分鹽酸黃連素80-130 黃芩總苷80-130梔子總苷80-130。
3.根據(jù)權利要求1的藥物組合物，其特征在于該組合物含有下述重量比的組分鹽酸黃連素100 黃芩總苷100 梔子總苷100。
4.根據(jù)權利要求1-3中任一藥物組合物，其特征在于還含有藥物賦形劑。
5.根據(jù)權利要求4的藥物組合物，其特征在于該藥物的劑型是片劑、丸劑、散劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液、注射劑當中的一種。
6.權利要求1-3所述任一藥物組合物在制備治療腸炎痢疾、肺炎和上呼吸道感染、敗血癥等細菌和病毒性感染性疾病的藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種藥物組合物，由鹽酸黃連素、黃芩總苷和梔子總苷組成，用于治療腸炎痢疾、肺炎和上呼吸道感染、敗血癥等細菌和病毒性感染等疾病。本發(fā)明還公開了所述藥物的制備方法。
文檔編號A61K31/7048GK1517095SQ0310044
公開日2004年8月4日 申請日期2003年1月14日 優(yōu)先權日2003年1月14日
發(fā)明者王巖, 王本祥, 陳聲武, 王懷生, 張志國, 楊冬華, 王 巖 申請人:吉林天藥科技股份有限公司