專利名稱：用于治療胰島素耐受性的鄰位取代苯甲酸衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及某些新型的苯甲酸衍生物、制備該類化合物的方法、其在治療與胰島素耐受性有關(guān)的臨床病癥中的應(yīng)用、其治療應(yīng)用的方法以及包含其的藥物組合物。
背景技術(shù)：
胰島素耐受性綜合征(IRS)包括2型糖尿病，其涉及一系列表現(xiàn)，包括伴有高胰島素血癥的胰島素耐受性、可能的2型糖尿病、動(dòng)脈壓過高、中心性(內(nèi)臟性)肥胖、通過脂蛋白水平錯(cuò)亂所觀察到的血脂障礙，其特征一般為VLDL(極低密度脂蛋白)、小密度LDL顆粒和HDL(高密度脂蛋白)濃度降低和纖維蛋白溶解減少。
最近的流行病學(xué)研究已經(jīng)證明具有胰島素耐受性的個(gè)體心血管發(fā)病率和致死率的風(fēng)險(xiǎn)大大增加，尤其是患心肌梗死和中風(fēng)的風(fēng)險(xiǎn)大大增加。在2型糖尿病中，與動(dòng)脈粥樣硬化有關(guān)的病癥是高至80％的死亡的原因。
在臨床醫(yī)學(xué)中，意識(shí)到需要增加患有IRS患者對胰島素的敏感性，從而糾正認(rèn)為是造成動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程加速的原因的血脂障礙。但是，目前這種疾病一般不能被很好地確定。
在PCT申請WO99/62872中公開了下面式C化合物2-乙氧基-3-[4-(2-{4-甲烷磺酰氧基苯基}乙氧基)苯基]丙酸的S-對映異構(gòu)體。
據(jù)報(bào)道，這種化合物是過氧化物酶體增殖劑活化的受體的調(diào)節(jié)劑(PPAR，對PPAR的綜述見T.M.Willson等人，J Med Chem 2000，第43卷，527)并且具有聯(lián)合的PPARα/PPARγ激動(dòng)劑活性(Structure，2001，第9卷，699，P.Cronet等人)。這種化合物可有效治療與胰島素耐受性有關(guān)的病癥。
令人吃驚地是，現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)了一系列可以作為選擇性PPARα調(diào)節(jié)劑的化合物。
本發(fā)明的內(nèi)容本發(fā)明提供了式I的化合物以及其可藥用的鹽和前藥 其中n是0、1或2；R1表示鹵素、可以任選地被一個(gè)或多個(gè)氟所取代的C1-4烷基、可以任選地被一個(gè)或多個(gè)氟所取代的C1-4烷氧基并且其中當(dāng)n是2時(shí)取代基R1可以相同或不同；R2表示無支鏈的C2-7烷基；R3表示H或OCH3；和W表示O或S。
現(xiàn)在，下面給出式I化合物中R1、R2、R3和W的進(jìn)一步的值。應(yīng)當(dāng)清楚的是，可以在上下文中所限定的定義、權(quán)利要求或?qū)嵤┓桨钢械娜魏我环N來使用這些值。
在第一方面，R1是鹵素、C1-4烷基或C1-4烷氧基和n是0、1或2。特別當(dāng)n是1時(shí)，R1是氟、氯或三氟甲基。特別當(dāng)n是2時(shí)，R1是氟。
在第二方面，R2表示乙基或己基。
在第三方面，R3表示H。
在第四方面，R3表示OMe。
在第五方面，W表示O。
在第六方面，W表示S。
術(shù)語無支鏈的C2-7烷基指的是具有2至7個(gè)碳原子的直鏈飽和脂族烴。所說烷基的實(shí)例包括乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基和正庚基。
本領(lǐng)域技術(shù)人員清楚的是，上面所用的被中斷的術(shù)語指的是氧原子位于烷基鏈中而不是末端原子。本說明書中所用的術(shù)語“前藥”包括在哺乳動(dòng)物，特別是人體內(nèi)可以被轉(zhuǎn)化成羧酸基團(tuán)或其鹽或共軛物的羧酸基團(tuán)的衍生物。應(yīng)當(dāng)清楚的是，雖然不受理論束縛，但是認(rèn)為與該前藥有關(guān)的大多數(shù)活性都來源于該前藥將轉(zhuǎn)化成的式I的化合物的活性。可以用本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的常規(guī)方法來制備前藥。羧基的各種前藥在現(xiàn)有技術(shù)中是已知的。該類前藥衍生物的實(shí)例例如可參見a)前藥的設(shè)計(jì)(Design at Prodrugs)，H.Bundgaard主編，(Elsevier，1985)和酶學(xué)中的方法(Methods in Enzymdogy).42309-396，K.Widder等人主編(Academic Press，1985)；b)藥物設(shè)計(jì)和開發(fā)教程(A Textbook of Drugs Design andDevelopment)，Krogsgaard-Larsen和H.Bundgaard主編，第5章“前藥的設(shè)計(jì)和應(yīng)用”，H.Bundgaard編寫，第113-191頁(1991)；c)H.Bundgaard，Advanced Drug Delivery Reviews，81-38(1992)；d)H.Bundgaard等人，Journal of PharmaceuticalSciences，77285(1988)；和e)N.Kakeya等人，Chem Pharm Bull，32692(1984)。
上述文獻(xiàn)a至e在這里都被引入作為參考。
體內(nèi)可裂解的酯就是一類母體分子前藥。
式I的化合物具有作為藥物的活性，式I的化合物特別是PPARα的選擇性激動(dòng)劑，即其對PPARα的EC50至少比其各自對PPARγ的EC50低四倍，優(yōu)選地至少低10或50倍，其中所說的EC50是如本文后面試驗(yàn)部分所描述的那樣來進(jìn)行測量和計(jì)算的。式I的化合物有效并且具有選擇性。
本發(fā)明提供了選自下面化合物的化合物2-[2-(4-{2-[乙基(2-氟芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟芐基)(庚基)氨基]-2-氧代乙氧基}-3-甲氧基苯基)-乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(4-氯芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙硫基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(4-氯芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[乙基(4-三氟甲基芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[乙基(4-三氟甲基芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙硫基]苯甲酸；2-{2-[4-(2-{丁基[2-氟-4-(三氟甲基)芐基]氨基}-2-氧代乙氧基)苯基]-乙氧基}苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟芐基)(丙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[芐基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-{[2-(4-{2-[芐基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(4-叔丁基芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[乙基(4-氟芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[乙基(2-氟芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸；或2-{[2-(4-{2-[(2-氯芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸以及它們可藥用的鹽。
該化合物特別優(yōu)選地選自2-[2-(4-{2-[乙基(2-氟芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(4-氯芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙硫基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟芐基)(丙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[芐基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；或2-[2-(4-{2-[乙基(4-氟芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；還應(yīng)當(dāng)清楚的是，本發(fā)明的某些化合物可以以溶劑化以及未溶劑化的形式存在。應(yīng)當(dāng)清楚的是，本發(fā)明包括所有該類溶劑化的形式。本發(fā)明的某些化合物可以以互變異構(gòu)體的形式存在。應(yīng)當(dāng)清楚的是，本發(fā)明包括所有該類互變異構(gòu)體。
在說明書和所附的權(quán)利要求中，所給出的化學(xué)式或名稱應(yīng)包括其所有立體和光學(xué)異構(gòu)體及其外消旋體以及不同比例的其中存在該類異構(gòu)體和對映體的各對映體的混合物、以及其可藥用的鹽?？梢杂贸Ｒ?guī)技術(shù)，例如色譜法或分級結(jié)晶法進(jìn)行異構(gòu)體的分離。可以通過例如分級結(jié)晶、拆分或HPLC將外消旋體分離來進(jìn)行對映體的分離。可以通過例如分級結(jié)晶、HPLC或閃柱色譜法分離異構(gòu)體混合物來進(jìn)行非對映體的分離。或者，可以在不會(huì)造成外消旋作用或差向異構(gòu)化作用的情況下由手性起始材料開始進(jìn)行手性合成，或者通過用手性試劑衍生化來制備立體異構(gòu)體。所有立體異構(gòu)體均包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
制備方法本發(fā)明化合物可如下所述進(jìn)行制備。但是，本發(fā)明并不僅限于這些方法，還可以如現(xiàn)有技術(shù)中所描述的結(jié)構(gòu)相關(guān)化合物的制備那樣來制備這些化合物。可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)操作或者如下面實(shí)驗(yàn)部分的描述來進(jìn)行這些反應(yīng)。
可以通過將式II化合物與去保護(hù)劑進(jìn)行反應(yīng)來制備式I的化合物 其中R1、R2、R3、W和n的定義如上所述，并且PG表示在標(biāo)準(zhǔn)課本“有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán)”Greene和Wuts，第2版(1991)中所述的羧基羥基的保護(hù)基團(tuán)。所說的保護(hù)基也可以是樹脂，如Wang樹脂或2-氯三苯甲基氯樹脂?？梢杂帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的技術(shù)來除去保護(hù)基。一種該類保護(hù)基是其中PG表示C1-6烷氧基或芳基烷氧基例如芐基，從而COPG表示一種酯?？梢栽?-200℃的溫度下或者通過使用微波輻射將該類酯與水解劑，例如氫氧化鋰在存在溶劑例如THF和水的混合物的情況下進(jìn)行反應(yīng)，或者將其與氫氧化鉀在C1-3醇例如甲醇中進(jìn)行反應(yīng)，得到式I的化合物。
式II的化合物可以通過將式III的化合物或其鹽，例如鹽酸鹽與式IV的化合物或其酰氯在惰性溶劑，例如二氯甲烷中進(jìn)行反應(yīng)來進(jìn)行制備， 其中R1、R2和n的定義如上所述， 其中R3、W和PG的定義如上所述，該反應(yīng)可以任選地在存在偶合劑，例如4-二甲基氨基吡啶或1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳在二亞胺鹽酸鹽的情況下進(jìn)行，反應(yīng)溫度為-25℃至150℃。
式II的化合物還可以通過將式V的化合物與式VI的化合物進(jìn)行反應(yīng)來進(jìn)行制備， 其中PG的定義如上所述， 其中R1、R2、R3、W和n的定義如上所述并且L表示一種離去基團(tuán)，例如甲基磺酰氧基或鹵素，例如溴，該反應(yīng)可以任選地在存在溶劑，例如乙腈的情況下進(jìn)行，并且可以任選地在存在堿，例如碳酸鉀的情況下進(jìn)行，反應(yīng)溫度為0至150℃。
式III、IV、V和VI的化合物可以用實(shí)施例中所描述的方法或者用與本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法相似的方法來進(jìn)行制備。
式II、III、IV和V的化合物在式I化合物的制備中是有用的中間體。認(rèn)為這些化合物中的某些化合物是新的。這里所要求保護(hù)的式II、III、IV或V的新型化合物是本發(fā)明的另一方面。
可以用常規(guī)技術(shù)將本發(fā)明的化合物從反應(yīng)混合物中分離出來。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將意識(shí)到，為了選擇替代性地或者在一些場合中以更方便的方式獲得本發(fā)明的化合物，可以以不同的次序進(jìn)行上述的各加工步驟，和/或可以在整個(gè)路線的不同階段進(jìn)行各反應(yīng)(即由特定反應(yīng)使不同的中間體進(jìn)行化學(xué)轉(zhuǎn)化形成上述相關(guān)的化合物)。
需要時(shí)，在上面制備方法中的任何一種中，可以用如標(biāo)準(zhǔn)教材“有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán)”，第2版(1991)(Greene和Wuts)所述的保護(hù)基團(tuán)R，將羥基、氨基或其它反應(yīng)基團(tuán)保護(hù)起來。該保護(hù)基團(tuán)還可以是樹脂，如Wang樹脂或2-氯三苯甲基氯樹脂?？梢栽谏鲜龇磻?yīng)步驟的任何一步之前或之后進(jìn)行官能團(tuán)的保護(hù)和去保護(hù)。可以用本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的技術(shù)來除去保護(hù)基團(tuán)。
“惰性溶劑”的表述指的是不會(huì)以對目標(biāo)產(chǎn)物的收率產(chǎn)生不利反應(yīng)的方式與起始材料、試劑、中間體或產(chǎn)物發(fā)生發(fā)應(yīng)的溶劑。
藥物制劑本發(fā)明的化合物一般是以在可藥用劑型中包含游離酸或可藥用鹽形式活性成分的藥物制劑形式通過口服、胃腸外、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下或其它注射的方式、口腔、直腸、陰道、經(jīng)皮和/或鼻途徑和/或通過吸入來進(jìn)行給藥的。根據(jù)所治療的病癥和患者以及給藥途徑，可以將該組合物以各種劑量進(jìn)行給藥。
在對人進(jìn)行治療時(shí)，本發(fā)明化合物適宜的日劑量為約0.0001-100mg/kg體重，優(yōu)選地為0.001-10mg/kg體重。
口服制劑特別優(yōu)選地是可以用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法來制備從而可以提供范圍在0.5mg至500mg之間，例如1mg、3mg、5mg、10mg、25mg、50mg、100mg和250mg的活性化合物劑量的片劑或膠囊。
因此，本發(fā)明另一方面提供了一種包含本發(fā)明任何一種化合物或其可藥用鹽與可藥用的助劑、稀釋劑和/或載體混合的藥物制劑。
藥理學(xué)性質(zhì)本發(fā)明式(I)的化合物可用于預(yù)防和/或治療與固有或誘發(fā)性胰島素敏感性(胰島素耐受性)降低有關(guān)的和與代謝病癥(也被稱為代謝綜合征)有關(guān)的臨床病癥。這些臨床病癥非限制性地包括一般性肥胖、腹部肥胖、動(dòng)脈壓過高、高胰島素血癥、高血糖、2型糖尿病和特征為表現(xiàn)出胰島素耐受性的血脂障礙。這種血脂障礙(也被稱為致動(dòng)脈粥樣化的脂蛋白性)的特征為未酯化的脂肪酸適當(dāng)升高、極低密度脂蛋白(VLDL)甘油三酯富集的顆粒增加、高Apo B水平、與低apoAI顆粒水平有關(guān)的低高密度脂蛋白(HDL)水平和在存在少量、濃密低密度脂蛋白(LDL)微粒，表型B情況下的高Apo B水平。
期望本發(fā)明的化合物可用于治療患有合并或混合的高血脂癥或各種程度的高甘油三酯血癥以及伴有或不伴有代謝綜合征的其它表現(xiàn)的食后血脂障礙的患者。
期望用本發(fā)明化合物進(jìn)行的治療由于其抗血脂障礙以及抗炎性，可以降低與動(dòng)脈粥樣硬化有關(guān)的心血管致病率和死亡率。所說的心血管疾病病癥包括造成心肌梗死、充血性心衰、腦血管疾病和下肢外周動(dòng)脈機(jī)能不全的各種內(nèi)部器官的大血管病。因?yàn)槠湟葝u素敏化作用，所以期望式I的化合物還可以預(yù)防或延遲由代謝綜合征和妊娠糖尿病而導(dǎo)致的2型糖尿病的形成。因此，期望其可延遲與糖尿病中的慢性高血糖有關(guān)的長期并發(fā)癥的形成，所說的長期并發(fā)癥如引起腎疾病、視網(wǎng)膜損害和下肢的外周血管疾病的微血管病。此外，所說的化合物還可用于治療無論是否與胰島素耐受性有關(guān)的心血管系統(tǒng)外的各種病癥，如多囊卵巢綜合征、肥胖、癌癥和炎性疾病狀態(tài)，包括神經(jīng)變性性病癥如溫和的認(rèn)識(shí)缺損、阿耳茨海默氏病、帕金森氏病和多發(fā)性硬化。
期望本發(fā)明的化合物可用于控制患有2型糖尿病患者的葡萄糖水平。
本發(fā)明提供了一種治療或預(yù)防血脂障礙、胰島素耐受性綜合征和/或代謝病癥(如上所述)的方法，其包括給需要其的哺乳動(dòng)物(特別是人)使用式I的化合物。
本發(fā)明提供了一種治療或預(yù)防2型糖尿病的方法，其包括給需要其的哺乳動(dòng)物(特別是人)使用有效量的式I的化合物。
本發(fā)明另一方面提供了式I的化合物作為藥物的應(yīng)用。
本發(fā)明另一方面提供了式I的化合物在制造治療胰島素耐受性和/或代謝病癥的藥物中的應(yīng)用。
聯(lián)合治療本發(fā)明的化合物可以與用于治療與動(dòng)脈粥樣硬化如高血壓、高血脂癥、血脂障礙、糖尿病和肥胖的形成和進(jìn)行有關(guān)的病癥的另一種治療劑聯(lián)合應(yīng)用。本發(fā)明的化合物可以與降低LDL∶HDL比例的另一種治療劑或者造成LDL-膽固醇循環(huán)水平降低的試劑聯(lián)用。對患有糖尿病的患者而言，還可以將本發(fā)明的化合物與用于治療與微血管病有關(guān)的并發(fā)癥的治療劑聯(lián)用。
本發(fā)明的化合物可以與治療代謝綜合征或2型糖尿病以及其相關(guān)并發(fā)癥的其它治療劑一起使用，所說的這些治療劑包括雙胍類藥物，例如二甲雙胍、苯乙雙胍和丁二胍、胰島素(合成的胰島素類似物、糊精)和口服抗高血糖藥(其被分成膳食性葡萄糖調(diào)節(jié)劑和α-葡萄糖苷酶抑制劑)。α-葡萄糖苷酶抑制劑的實(shí)例有阿卡糖或伏格列波糖或米格列醇。膳食性葡萄糖調(diào)節(jié)劑的實(shí)例有瑞格列奈或那格列奈。
在本發(fā)明的另一方面，式I的化合物或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或其前藥可以與另一種PPAR調(diào)節(jié)劑一起給藥。PPAR調(diào)節(jié)劑非限制性地包括PPARα和/或γ和/或δ激動(dòng)劑、或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥。適宜的PPARα和/或γ激動(dòng)劑、其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或其前藥在本領(lǐng)域中是眾所周知的。所說的這些物質(zhì)包括在WO01/12187、WO01/12612、WO99/62870、WO99/62872、WO99/62871、WO98/57941、WO01/40170、J Med Chem，1996，39，665，治療專利的專家意見(Expert Opinion onTherapeutic Patents)，10(5)，623-634(特別是列于該專利申請的第634頁中所述的化合物)和J Med Chem，2000，43，527中描述的化合物，所說的文件在這里都被引入作為參考。PPARα和/或γ激動(dòng)劑特別是指BMS 298585、氯貝特、非諾貝特、苯扎貝特、吉非貝特和環(huán)丙貝特；GW 9578、吡格列酮、羅格列酮、rivoglitazone、balaglitazone、KRP-297、JTT-501、SB 213068、GW 1929、GW 7845、GW 0207、L-796449、L-165041和GW 2433。PPARα和/或γ激動(dòng)劑特別是指(S)-2-乙氧基-3-[4-(2-{4-甲烷磺酰氧基-苯基}乙氧基)苯基]丙酸及其可藥用的鹽。
此外，本發(fā)明的聯(lián)合還可以與磺酰脲類例如格列美脲、格列本脲(優(yōu)降糖)、格列齊特、格列吡嗪、格列喹酮、氯磺丙脲、甲苯磺丁脲、醋磺己脲、glycopyramide、氨磺丁脲、格列波脲、格列派特、格列噻唑、glibuzole、格列己脲、格列嘧啶、格列平脲、苯磺丁脲、tolcylamide和妥拉磺脲聯(lián)用?；酋ｋ鍍?yōu)選地是格列美脲或格列本脲(優(yōu)降糖)?；酋ｋ甯鼉?yōu)選地是格列美脲。因此，本發(fā)明包括將本發(fā)明的化合物與一種、兩種或多種本段中所描述的現(xiàn)存治療劑聯(lián)用。用于治療2型糖尿病以及其相關(guān)并發(fā)癥的其它現(xiàn)存治療劑的劑量在本領(lǐng)域中是眾所周知的并且已經(jīng)獲得了管理機(jī)構(gòu)例如FDA的批準(zhǔn)，并且可以在FDA所印刷的橙色書中找到?；蛘?，聯(lián)合用藥所獲得的益處是可以使用較低的劑量。本發(fā)明還包括本發(fā)明的化合物與降低膽固醇的試劑的聯(lián)合。本申請中降低膽固醇的試劑非限制性地包括HMG-CoA還原酶(3-羥基-3-甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶)抑制劑。適宜的HMG-CoA還原酶抑制劑是選自阿伐它汀、柏伐它汀、西立伐它汀、達(dá)伐它汀、氟伐它汀、伊伐它汀、洛伐它汀、美伐它汀、nicostatin、nivastatin、帕伐它汀和新伐它汀、或其可藥用的鹽，尤其是鈉鹽或鈣鹽、或其溶劑化物、或該類鹽的溶劑化物的它汀類物質(zhì)。一種特定的它汀類物質(zhì)是阿伐它汀，或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥。一種更特別的它汀類物質(zhì)是阿伐它汀鈣鹽。但是，一種特別優(yōu)選的它汀類物質(zhì)是化學(xué)名為(E)-7-[4-(4-氟苯基)-6-異丙基-2-[甲基(甲基磺?；?-氨基]-嘧啶-5-基](3R，5S)-3，5-二羥基庚-6-烯酸，[也被稱為(E)-7-[4-(4-氟苯基)-6-異丙基-2-[N-甲基-N-(甲基磺?；?-氨基]嘧啶-5-基](3R，5S)-3，5-二羥基庚-6-烯酸]的化合物或其可藥用的鹽或溶劑化物、或該類鹽的溶劑化物。在歐洲專利申請EP-A-0521471和Bioorganic and Medicinal Chemistry，(1997)，5(2)，437-444中公開了化合物(E)-7-[4-(4-氟苯基)-6-異丙基-2-[甲基-(甲基磺?；?-氨基]-嘧啶-5-基](3R，5S)-3，5-二羥基庚-6-烯酸以及其鈣和鈉鹽。后一種它汀類物質(zhì)現(xiàn)在以通用名羅蘇伐它汀而被公知。
在本申請中，術(shù)語“降低膽固醇劑”還包括HMG-CoA還原酶抑制劑的化學(xué)活性或沒有活性的變型，如酯、前藥和代謝物。
本發(fā)明還包括與膽汁酸螯合劑，例如考來替泊或消膽胺或考來膠聯(lián)合的本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明還包括與回腸膽汁酸轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的抑制劑(IBAT抑制劑)聯(lián)用的本發(fā)明的化合物。
已經(jīng)對具有IBAT抑制活性的適宜化合物進(jìn)行了描述，見例如在WO93/16055、WO94/18183、WO94/18184、WO94/24087、WO96/05188、WO96/08484、WO96/16051、WO97/33882、WO98/07749、WO98/38182、WO98/40375、WO98/56757、WO99/32478、WO99/35135、WO99/64409、WO99/64410、WO00/01687、WO00/20392、WO00/20393、WO00/20410、WO00/20437、WO01/34570、WO00/35889、WO00/47568、WO00/61568、WO01/68637、WO01/68096、WO02/08211、WO00/38725、WO00/38726、WO00/38727、WO00/38728、WO00/38729、DE19825804、JP10072371、US5070103、EP251 315、EP417 725、EP489 423、EP549 967、EP573 848、EP624 593、EP624 594、EP624 595、EP869 121、EP864 582、和EP1 070 703中所描述的化合物，這些專利申請的內(nèi)容，特別是權(quán)利要求1和指定實(shí)施例中所描述的化合物在這里都被引入作為參考。
適用于本發(fā)明的特定類別的IBAT抑制劑是苯并硫雜類(benzothiepines)物質(zhì)，以及在這里被引入作為參考的WO00/01687、WO96/08484和WO97/33882的權(quán)利要求，特別是權(quán)利要求1中所描述的化合物。其它適宜類別的IBAT抑制劑有1，2-苯并硫雜氮雜類物質(zhì)、1，4-苯并硫雜氮雜類(benzothiazepines)物質(zhì)和1，5-苯并硫雜氮雜類物質(zhì)。另一類適宜的IBAT抑制劑是1，2，5-苯并硫雜二氮雜類(benzothiazepines)物質(zhì)。
一種特定的具有IBAT抑制活性的適宜化合物是(3R，5R)-3-丁基-3-乙基-1，1-二氧橋-5-苯基-2，3，4，5-四氫-1，4-苯并硫雜氮雜-8-基β-D-吡喃葡萄糖醛酸(EP 864 582)。其它適宜的IBAT抑制劑包括下面物質(zhì)中的一種1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-1′-苯基-1′-[N′-(羧基甲基)氨基甲?；鵠甲基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜??；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N′-(羧基甲基)氨基甲?；鵠-4-羥基芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-1′-苯基-1′-[N′-(2-磺基乙基)氨基甲?；鵠甲基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜?。?，1-二氧代-3-丁基-3-乙基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-1′-苯基-1′-[N′-(2-磺基乙基)氨基甲酰基]甲基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N′-(2-磺基乙基)氨基甲?；鵠-4-羥基芐基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜?。?，1-二氧代-3-丁基-3-乙基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N′-(2-磺基乙基)氨基甲?；鵠-4-羥基芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜??；1，1-二氧代-3-丁基-3-乙基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N′-(2-羧基乙基)氨基甲?；鵠芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜?。?，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N{(R)-α-[N′-(2-羧基乙基)氨基甲?；鵠-4-羥基芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜；1，1-二氧代-3-丁基-3-乙基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N′-(5-羧基戊基)氨基甲?；鵠芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N′-(2-羧基乙基)氨基甲酰基]芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{α-[N′-(2-磺基乙基)氨基甲酰基]-2-氟芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜??；1，1-二氧代-3-丁基-3-乙基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N′-(R)-(2-羥基-1-羧基乙基)氨基甲?；鵠芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜??；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{{R)-α-[N′-(R)-(2-羥基-1-羧基乙基)氨基甲?；鵠芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜?。?，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-{N-[(R)-α-(N′-{(R)-1-[N″-(R)-(2-羥基-1-羧基乙基)氨基甲酰基]-2-羥基乙基)氨基甲?；?芐基]氨基甲酰基甲氧基}-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜??；1，1-二氧代-3-丁基-3-乙基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{α-[N′-(羧基甲基)氨基甲?；鵠芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜；1，1-二氧代-3-丁基-3-乙基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{α-[N′-((乙氧基)(甲基)磷?；?甲基)氨基甲?；鵠芐基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜；1，1-二氧代-3-丁基-3-乙基-5-苯基-7-甲硫基-8-{N-[(R)-α-(N′-{2-[(羥基)(甲基)磷酰基]乙基}氨基甲?；?芐基]氨基甲酰基甲氧基}-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜??；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N′-(2-甲硫基-1-羧基乙基)氨基甲酰基]芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜?。?，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-{N-[(R)-α-(N′-{2-[(甲基)(乙基)磷?；鵠乙基}氨基甲?；?-4-羥基芐基]氨基甲?；籽趸鶀-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-{N-[(R)-α-(N′-{2-[(甲基)(羥基)磷?；鵠乙基}氨基甲?；?-4-羥基芐基]氨基甲?；籽趸鶀-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜?。?，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[(R)-N′-(2-甲基亞磺酰基-1-羧基乙基)氨基甲?；鵠芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜??；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲氧基-8-[N-{(R)-α-[N′-(2-磺基乙基)氨基甲?；鵠-4-羥基芐基}氨基甲酰基甲氧基]-2，3，4，5-四氫-1，5-苯并硫雜氮雜；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-(R)-1-羧基-2-甲硫基-乙基)氨基甲?；鶀-4-羥基芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，2，5-苯并硫雜二氮雜??；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-((S)-1-羧基-2-(R)-羥基丙基)氨基甲?；鵠-4-羥基芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，2，5-苯并硫雜二氮雜?。?，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-((S)-1-羧基-2-甲基丙基)氨基甲?；鵠-4-羥基芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，2，5-苯并硫雜二氮雜??；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-((S)-1-羧基丁基)氨基甲?；鵠-4-羥基芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，2，5-苯并硫雜二氮雜；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-((N-{R)-α-[N-((S)-1-羧基丙基)氨基甲酰基]芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，2，5-苯并硫雜二氮雜??；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-((S)-1-羧基乙基)氨基甲?；鵠芐基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氫-1，2，5-苯并硫雜二氮雜；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-((S)-1-羧基-2-(R)-羥基丙基)氨基甲?；鵠芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，2，5-苯并硫雜二氮雜?。?，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-(2-磺基乙基)氨基甲?；鵠-4-羥基芐基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氫-1，2，5-苯并硫雜二氮雜?。?，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-((S)-1-羧基乙基)氨基甲?；鵠-4-羥基芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，2，5-苯并硫雜二氮雜?。?，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-((R)-1-羧基-2-甲硫基乙基)氨基甲?；鵠芐基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氫-1，2，5-苯并硫雜二氮雜??；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-{(S)-1-[N-((S)-2-羥基-1-羧基乙基)氨基甲?；鵠丙基}氨基甲?；鵠芐基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氫-1，2，5-苯并硫雜二氮雜??；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-((S)-1-羧基-2-甲基丙基)氨基甲?；鵠芐基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氫-1，2，5-苯并硫雜二氮雜?。?，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-((S)-1-羧基丙基)氨基甲?；鵠-4-羥基芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，2，5-苯并硫雜二氮雜?。?，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-[N-((R/S)-α-{N-[1-(R)-2-(S)-1-羥基-1-(3，4-二羥基苯基)丙-2-基]氨基甲?；鶀-4-羥基芐基)氨基甲酰基甲氧基]-2，3，4，5-四氫-1，2，5-苯并硫雜二氮雜；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-(2-(S)-3-(R)-4-(R)-5-(R)-2，3，4，5，6-五羥基己基)氨基甲酰基]-4-羥基芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，2，5-苯并硫雜二氮雜??；和1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-(2-(S)-3-(R)-4-(R)-5-(R)-2，3，4，5，6-五羥基己基)氨基甲?；鵠芐基}氨基甲?；籽趸?-2，3，4，5-四氫-1，2，5-苯并硫雜二氮雜；或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或其前藥。
本發(fā)明另一方面提供了一種聯(lián)合治療，其包括任選地與帶有可藥用稀釋劑或載體一起使用有效量式I的化合物、或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥，同時(shí)、相繼或獨(dú)立地使用一種或多種選自下面的試劑CBTP(膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白)抑制劑，例如在WO00/38725(其在這里被引入作為參考)第7頁第22行-第10頁第17行所引用和描述的試劑；膽固醇吸收拮抗劑，例如氮雜環(huán)丁烷酮如SCH 58235和在US5,767,115(其在這里被引入作為參考)中所描述的試劑；MTP(微粒體轉(zhuǎn)移蛋白)抑制劑，例如在Science，282，751-54，1998(其在這里被引入作為參考)中所描述的試劑；煙酸衍生物，包括緩釋和組合產(chǎn)品，例如煙酸(煙堿酸)、阿西莫司和煙酸戊四醇酯；
植物甾醇化合物，例如stanols；普羅布考；抗肥胖化合物，例如奧利斯特(EP 129,748)和西布曲明(GB2,184,122和US 4,929,629)；ω-3脂肪酸，例如OmacorTM；抗高血壓化合物，例如血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制劑、血管緊張素II受體拮抗劑、腎上腺素能(andrenergic)阻滯劑、α腎上腺素能阻滯劑、β腎上腺素能阻滯劑例如美托洛爾、混合α/β腎上腺素能阻滯劑、腎上腺素能興奮劑、鈣通道阻滯劑、AT-1阻滯劑、排鹽利尿藥、利尿劑或血管舒張藥；CB1拮抗劑或反向激動(dòng)劑，例如在WO 01/70700和EP 65635中所描述的物質(zhì)；阿司匹林；黑色素濃縮激素(MCH)拮抗劑；PDK抑制劑；或核受體調(diào)節(jié)劑，例如LXR、FXR、RXR和RORα；或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥，可任選地將其與可藥用的稀釋劑或載體一起給藥于需要該類治療的溫血?jiǎng)游?，如人?br> 可以與式I的化合物聯(lián)用的特定的ACE抑制劑或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或其前藥非限制性地包括下面的化合物阿拉普利、alatriopril、莫維普利鈣、血管緊張肽轉(zhuǎn)化酶抑制肽、貝那普利、鹽酸貝那普利、貝那普利拉、苯甲?；ㄍ衅绽?benzoylcaptopril)、卡托普利、卡托普利-半胱氨酸、卡托普利-谷胱甘肽、西那普利、ceranopril、西羅普利、西拉普利、西拉普利拉、地拉普利、地拉普利-二酸、依那普利、依那普利拉、enapril、epicaptopril、foroxymithine、fosfenopril、fosenopril、fosenopril鈉、福辛普利、福辛普利鈉、福辛普利拉、fosinoprilicacid、glycopril、hemorphin-4、伊曲普利、咪達(dá)普利、吲哚普利、吲哚普利拉(indolaprilat)、賴苯普利、賴諾普利、lyciumin A、lyciumin B、mixanpril、莫苷普利、莫苷普利拉、莫維普利、muraceinA、muracein B、muracein C、噴托普利、培哚普利、培哚普利拉、pivalopril、匹伏普利、喹那普利、鹽酸喹那普利、喹那普利拉、雷米普利、雷米普利拉、螺普利、鹽酸螺普利、螺普利拉、spiropril、鹽酸spiropril、替莫普利、鹽酸替莫普利、替普羅肽、群多普利、群多普利拉、烏替普利、扎普利、扎普利拉、佐芬普利和佐芬普利拉。用于本發(fā)明的優(yōu)選的ACE抑制劑是雷米普利、雷米普利拉、賴諾普利、依那普利和依那普利拉。用于本發(fā)明的ACE抑制劑更優(yōu)選地是雷米普利和雷米普利拉。
與式I的化合物聯(lián)用的優(yōu)選的血管緊張素II拮抗劑、其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或其前藥非限制性地包括下面的化合物坎地沙坦，坎地沙坦西酯、氯沙坦、纈沙坦、依貝沙坦、他索沙坦、替米沙坦和依普沙坦。用于本發(fā)明的血管緊張素II拮抗劑或其可藥用的衍生物特別優(yōu)選地是坎地沙坦和坎地沙坦西酯。
因此，本發(fā)明的另一個(gè)特征是提供了一種治療需要該類治療的溫血?jiǎng)游?，如人?型糖尿病以及其并發(fā)癥的方法，其包括給所說的哺乳動(dòng)物使用有效量的式I的化合物或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥并同時(shí)、相繼或獨(dú)立地使用有效量的一種在這種聯(lián)合部分所描述的其它化合物、或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥。
因此，本發(fā)明的另一個(gè)特征是提供了一種治療需要該類治療的溫血?jiǎng)游?，如人的高血脂情況的方法，其包括給所說的哺乳動(dòng)物使用有效量的式I的化合物、或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥，并同時(shí)、相繼或獨(dú)立地使用有效量的一種在這種聯(lián)合部分所描述的其它化合物、或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥。
本發(fā)明另一方面提供了一種包含式I的化合物、或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥，和一種在這種聯(lián)合部分所描述的其它化合物或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥，以及可藥用的稀釋劑或載體的藥物組合物。
本發(fā)明另一方面提供了一種包含式I的化合物、或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥，和一種在這種聯(lián)合部分所描述的其它化合物或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥的試劑盒。
本發(fā)明另一方面提供了一種試劑盒，它包含a)第一單位劑型形式的式I的化合物，或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥；b)第二單位劑型形式的一種在這種聯(lián)合部分所描述的其它化合物或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥；和c)用于包含所說的第一和第二劑型的容器裝置。
本發(fā)明另一方面提供了一種試劑盒，它包含a)第一單位劑型形式的具有可藥用的稀釋劑或載體的式I的化合物，或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥；b)第二單位劑型形式的一種在這種聯(lián)合部分所描述的其它化合物或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥；和c)用于包含所說的第一和第二劑型的容器裝置。
本發(fā)明的另一特征是提供了式I的化合物、或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥，和一種在這種聯(lián)合部分所描述的其它化合物、或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥在制造用于治療溫血?jiǎng)游锶缛说拇x綜合征或2型糖尿病以及其有關(guān)的并發(fā)癥的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明另一特征是提供了式I的化合物、或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥，和一種在這種聯(lián)合部分所描述的其它化合物、或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥在制造治療溫血?jiǎng)游锶缛说母哐“Y的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明另一方面提供了一種聯(lián)合治療，其包括給需要該類治療的溫血?jiǎng)游锶缛巳芜x地與可藥用的稀釋劑或載體一起使用有效量的式I的化合物，或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥，并且同時(shí)、相繼或獨(dú)立地任選地與可藥用的稀釋劑或載體一起使用有效量的一種在這種聯(lián)合部分所描述的其它化合物，或其可藥用的鹽、溶劑化物、該類鹽的溶劑化物或前藥。
加工實(shí)施例1H NMR和13C NMR測量是用Varian Mercury 300或Varian UNITY加400、500或600分光計(jì)進(jìn)行的，其是分別在300、400、500和600MHz的1H頻率下和75、100、125和150MHz的13C頻率下進(jìn)行的。測量是以δ刻度(δ)為基礎(chǔ)進(jìn)行的。
除非另外說明，所給出的化學(xué)位移是在使用作為內(nèi)標(biāo)的溶劑的情況下以ppm為單位給出的。
縮寫IRS 胰島素耐受性綜合征TLC 薄層色譜HOBT1-羥基苯并三唑水合物DIBAH 氫化二異丁基鋁DMSO二甲基亞砜EtOAc 乙酸乙酯DMF N，N-二甲基甲酰胺THF 四氫呋喃HPLC高效液相色譜MeCN乙腈TFA 三氟醋酸Pd/C鈀披炭HATUO-(7-氮雜苯并三唑基-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓(uronium)六氟磷酸鹽DCM 二氯甲烷TBTUO-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽DIPEA N，N-二異丙基乙基胺DMAP4-二甲氨基吡啶三胺三(羥甲基)氨基甲烷ISOLUTEFLASH Si是一種適于色譜法的二氧化硅柱聚合物載體上的硼氫化合物是位于Amberlite IRA-400(得自Aldrich)的硼氫化物。
LC-MS 液相色譜-質(zhì)譜RT 室溫T 三重峰S 單峰D 雙峰Q 四重峰
Qvint五重峰M多重峰br 寬峰bs 寬單峰dm 多重峰的雙峰bt 寬三重峰dd 成對的雙峰實(shí)施例1a)[4-(2-羥基乙基)苯氧基]乙酸叔丁酯將溶解于乙腈(25ml)中的4-(2-羥基乙基)苯酚(3.8ml，25.834mmol)、碳酸鉀(7.085g，51.267mmol)和溴乙酸叔丁酯(5.000g，25.834mmol)的混合物在回流下煮沸16小時(shí)。將溶劑減壓蒸發(fā)。將殘余物溶解于EtOAc中并用鹽水和水對其進(jìn)行洗滌，用MgSO4干燥然后減壓蒸發(fā)，得到目標(biāo)產(chǎn)物(6.00g，收率92.8％)1H-NMR(400MHz，CDCl3)1.52(s，9H)，2.98(t，2H)，3.46(t，2H)，4.92(s，2H)，6.89-6.97(m，4H)b)(4-{2-[(甲基磺?；?氧基]乙基}苯氧基)乙酸叔丁酯將[4-(2-羥基乙基)苯氧基]乙酸叔丁酯(6.000g，23.781mmol)和三乙胺(9.9ml，71.341mmol)溶解于DCM中。將該混合物冷卻至-10℃并向該混合物中滴加甲磺酰氯(2.8ml，35.671mmol)。使該反應(yīng)混合物達(dá)到室溫并將其攪拌16小時(shí)。將該混合物用DCM進(jìn)行稀釋。將有機(jī)層用水、鹽水和0.3M KHSO4進(jìn)行洗滌，用MgSO4干燥，然后減壓蒸發(fā)。得到7.5g淺黃色晶體(收率95.5％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)1.52(s，9H)，2.98(t，2H)，3.10(s，3H)，3.46(t，2H)，4.92(s，2H)，6.89-6.97(m，4H)c)2-{2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙氧基}苯甲酸甲酯將水楊酸甲酯(2.7ml，21.187mmol)溶解于乙腈中，并向其中加入碳酸鉀(5.856g，42.373mmol)。將該混合物冷卻至-10℃，然后向其中加入(4-{2-[(甲基磺?；?氧基]乙基}苯氧基)乙酸叔丁酯。將該混合物在回流下煮沸16小時(shí)，然后將溶劑減壓蒸發(fā)。將殘余物溶解于EtOAc中，用水和鹽水洗滌，然后將有機(jī)層用MgSO4干燥并通過蒸發(fā)除去溶劑。將該粗產(chǎn)物用閃柱色譜進(jìn)行純化(硅膠60 0.004-0.063mm)用EtOAc∶甲苯50∶50作為洗脫劑。匯集包含目標(biāo)產(chǎn)物的級分，并將溶劑蒸發(fā)。得到5.0g純品(收率61.1％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)；1.48(s，9H)，3.08(s，3H)，3.87(t，2H)，4.18(t，2H)，4.49(s，2H)，6.84(d，2H)，6.90-6.98(m，2H)，7.20-7.26(m，2H)，7.38-7.43(m，1H)，7.7(dd，1H)d)(4-{2-[2-(甲氧基羰基)苯氧基]乙基}苯氧基)乙酸將2-{2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙氧基}苯甲酸甲酯(0.400g，1.0351mmol)溶解于DCM中并向其中加入三氟乙酸(0.8ml，8.281mmol)。將該混合物在室溫下攪拌3h。將溶劑蒸發(fā)，得到325mg白色粉末。
1H-NMR(600MHz，CDCl3)；3.08(t，2H)，3.86(s，3H)，4.18(t，2H)，4.64(s，2H)，6.84-6.96(m，4H)，7,23(d，2H)，7.37-7.42(m，1H)，7.75(dd，1H)e)2-[2-(4-{2-[乙基(2-氟芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]-苯甲酸甲酯將(4-{2-[2-(甲氧基羰基)苯氧基]乙基}苯氧基)乙酸(0.200mg，0.605mmol)溶解于DMF中并將其在冰浴上進(jìn)行冷卻。向其中加入N-(2-氟芐基)乙胺(0.102g，0.666mmol)、TBTU(0.214g，0.666mmol)和DIPEA(0.22ml，1.271mmol)。將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16h。加入EtOAc并將有機(jī)相用兩份各20ml的NaCO3(飽和)進(jìn)行洗滌。將有機(jī)相用MgSO4干燥并通過蒸發(fā)除去溶劑。將粗品用制備HPLC純化(開始使用乙腈/緩沖劑60/40，然后在25分鐘將乙腈濃度增加至100％乙腈，所說的緩沖劑是乙腈/水10/90和乙酸銨(0.1M)的混合物，柱KR-100-7-C8，50*500，流速80ml/min)。在冷凍干燥后得到145mg目標(biāo)產(chǎn)物(收率71.1％)1H-NMR(400MHz，CD3CO)(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)；1.08，1.17(t，t，3H)，2.96(s，3H)，3.07(m，2H)，3.31，3.36(m，2H)，4.21(m，2H)，4.85(s，2H)，4.56-4.82(m，2H)，6.18(d，1H)，6.88-7.06(m，3H)，7.18-7.35(m，6H)，7.42(m，1H)，7.70(d，1H)f)2-[2-(4-{2-[乙基(2-氟芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸在Smith合成器小瓶中將2-[2-(4-{2-[乙基(2-氟芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸甲酯(0.200g，0.115mmol)溶解于3ml THF中然后向該小瓶中加入1.5ml水和氫氧化鋰(0.032g，1.335mmol)。給該小瓶蓋上帽，并將其放到微波爐(Smith合成器)中。然后將該反應(yīng)加熱至150℃加熱6分鐘。根據(jù)LC-MS確定反應(yīng)進(jìn)行完全。將溶劑蒸發(fā)掉。將殘余物溶解于乙醚(30ml)中并用NaHCO3(飽和)(2×20ml)洗滌。將堿性水層用2M HCl酸化至pH1。將水層用三份DCM(每份20ml)進(jìn)行萃取，將萃取液合并，干燥，蒸發(fā)，得到160mg純的目標(biāo)產(chǎn)物。
1H-NMR(400MHz，CD3CO)(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)；1.07，1.15(t，t，3H)，3.10(m，2H)，3.30，3.36(m，m，2H)，4.21(m，2H)，4.55-4.67(m，2H)，4.90(s，2H)，6.20(d，1H)，6.87-7.06(m，3H)，7.18-7.35(m，6H)，7.40(m，1H)，7.70(d，1H)實(shí)施例2a)2-溴-N-(2，4-二氟芐基)-N-庚基乙酰胺將N-(2，4-二氟芐基)-N-庚基胺(2.004g，8.304mmol)溶解于DCM(30ml)中。然后將其在冰浴上進(jìn)行冷卻。向其中加入三乙胺(1.092g，10.796mmol)，然后向其中滴入溴乙酰氯(1.438g，9.135mmol)。將該混合物攪拌2小時(shí)(冰浴)。然后將其用水(加有1％鹽酸，pH～3)、水和鹽水進(jìn)行洗滌，然后干燥(硫酸鎂)和蒸發(fā)。將粗品油溶解于DCM中，然后將其負(fù)載到一種柱上(ISOLUTESI 5g/25ml)并用更多的DCM進(jìn)行洗脫。得到2.412g油狀產(chǎn)物，收率80％1H NMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，500MHz，CDCl3)δ0.88-0.93(m，3H)，1.27-1.34(m，8H)，1.52-1.68(m，2H)，3.28-3.35(m，2H)，3.90-4.15(m，2H)，4.61，4.63(s，s，2H)，6.81-6.94(m，2H)和7.15-7.20，7.34-7.39(m，1H).
b)N-(2，4-二氟芐基)-N-庚基-2-[4-(2-羥基乙基)-2-甲氧基苯氧基]乙酰胺將2-溴-N-(2，4-二氟芐基)-N-庚基乙酰胺(135mg，0.373mmol)、高香草醇(homovanillyl alcohol)(63mg，0.373mmol)和無水碳酸鉀(77mg，0.559mmol)在乙腈(10ml)中進(jìn)行混合。將該混合物加熱回流4小時(shí)，然后將其蒸發(fā)至干。將殘余物(另外加入DCM，1ml×2)負(fù)載到一種柱上(ISOLUTESI，1g/6ml)。用DCM，然后用MeOH/DCM(0.5∶99.5，然后1∶99)進(jìn)行洗滌。將產(chǎn)物級分合并并蒸發(fā)。得到132mg油狀產(chǎn)物，收率79％。
1H NMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，400MHz，CDCl3)δ0.82-0.87(m，3H)，1.17-1.28(m，8H)，1.43-1.68(m，2H)，2.75-2.80(m，2H)，3.24-3.32(m，2H)，3.73-3.84(m，5H)，4.58，4.66(s，s，2H)，4.74，4.76(s，s，2H)，6.67-6.86(m，5H)和7.08-7.14，7.23-7.29(m，1H).
c)2-(4-{2-[(2，4-二氟芐基)(庚基)氨基]-2-氧代乙氧基}-3-甲氧基苯基)乙基甲磺酸酯將N-(2，4-二氟芐基)-N-庚基-2-[4-(2-羥基乙基)-2-甲氧基苯氧基]乙酰胺(A)(132mg，0.294mmol)溶解于DCM(10ml)中。將其在冰浴上冷卻。向其中加入三乙胺(0.05ml，0.352mmol)，然后向其中滴入甲磺酰氯(37mg，0.323mmol)。在30分鐘后除去該冷卻浴。將該混合物在室溫下攪拌過夜。LS-MS表明有約50％的A沒有反應(yīng)。將該混合物在冰浴上冷卻并向其中加入0.05ml三乙胺，然后加入0.025ml甲磺酰氯。在加入后，除去該冷卻浴并將該混合物再攪拌5小時(shí)。然后，將其用水(x2)和鹽水進(jìn)行洗滌，干燥(硫酸鎂)和蒸發(fā)。剩下138mg油狀產(chǎn)物，然后不需要進(jìn)一步純化而將其用于下一步。
d)2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟芐基)(庚基)氨基]-2-氧代乙氧基}-3-甲氧基苯基)乙氧基]苯甲酸甲酯將2-(4-{2-[(2，4-二氟芐基)(庚基)氨基]-2-氧代乙氧基}-3-甲氧基苯基)乙基甲磺酸酯(138mg，0.262mmol)溶解于乙腈(10ml)中，向其中加入2-羥基苯甲酸甲酯(40mg，0.262mmol)，然后向其中加入無水碳酸鉀(54mg，0.392mmol)。將該混合物回流過夜，然后蒸發(fā)至干。向其中加入水(10ml)和乙酸乙酯(10ml)并將兩相分開。將有機(jī)相用水和鹽水進(jìn)行洗滌，干燥(硫酸鎂)和蒸發(fā)。將殘余物上柱色譜(ISOLUTESI，2g/6ml)，用DCM，MeOH/DCM(1∶99)作為洗脫劑，得到78mg目標(biāo)產(chǎn)物，收率45％(兩步)。
1H NMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，500MHz，CDCl3)δ0.87-0.91(m，3H)，1.22-1.32(m，8H)，1.48-1.63(m，2H)，3.09-3.14(m，2H)，3.28-3.35(m，2H)，3.80，3.89(s，s，3H)，3.89(s，3H)，4.21-4.25(m，2H)，4.62，4.71(s，s，2H)，4.79，4.81(s，s，2H)，6.77-7.01(m，7H)，7.28-7.33(m，1H)，7.13-7.18，7.28-7.33(m，m，1H)，7.45(t，1H)和7.81(d，1H).
e)2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟芐基)(庚基)氨基]-2-氧代乙氧基}-3-甲氧基苯基)乙氧基]苯甲酸將溶解于THF(2ml)中的2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟芐基)(庚基)氨基]-2-氧代乙氧基}-3-甲氧基苯基)-乙氧基]苯甲酸甲酯(74mg，0.127mmol)與溶解于水(1ml)中的氫氧化鋰(6.1mg，0.254mmol)進(jìn)行混合。將該混合物在微波爐(Smith合成器)中在150℃下輻射8分鐘。LC-MS表明該反應(yīng)不完全。將其在該爐中再輻射10分鐘，LC-MS表明幾乎沒有變化。向其中再加入3mg氫氧化鋰，其后將其在該爐中在150℃下再處理8分鐘。LC-MS表明其仍然與之前相同。向其中再加入3mg氫氧化鋰和1ml水。將所得的混合物在該爐中在150℃下再處理10分鐘，LC-MS表明反應(yīng)完全。蒸發(fā)除去THF。將殘余物用1％鹽酸酸化至pH約為5，然后用乙酸乙酯(10ml)萃取。將萃取物干燥(硫酸鎂)和蒸發(fā)。將殘余物用柱色譜(ISOLUTESI，1g/6ml)進(jìn)行純化，用DCM，然后用MeOH/DCM(1∶99)作為洗脫劑，得到60mg目標(biāo)產(chǎn)物，收率83％。
1H NMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，400MHz，CDCl3)δ0.82-0.87(m，3H)，1.18-1.28(m，8H)，1.43-1.61(m，2H)，3.10-3.15(m，2H)，3.24-3.31(m，2H)，3.77，3.85(s，s，3H)，4.39-4.44(m，2H)，4.59，4.66(s，s，2H)，4.77，4.78(s，s，2H)，6.72-6.91(m，5H)，7.01(d，1H)，7.09(t，1H)，7.10-7.17，7.26-7.32(m，m，1H)，7.51(t，1H)和8.13(d，1H).
13C NMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，75MHz，CDCl3)δ14.07，22.55，26.79，27.02，28.57，28.93，31.70，35.18，41.30，41.34，44.02，45.89，46.99，55.71，55.82，68.19，68.94，70.66，103.38(t)，103 88(t)，111.35(d)，111.39(d)，112.32，112.41，112.46，114.76，117.64，119.60(dd)，120.07(dd)，120.53，122.06，129.50(dd)，130.54，130.59，131.55(dd)，133.60，134.78，146.26，146.39，149.67，157.10，161.60(dd)，160.68(dd)，161.97(dd)，162.24(dd)，165.12，167.75和167.93實(shí)施例3a)N-(4-氯芐基)乙酰胺將乙酸(1.321g，22.000mmol)溶解于DMF(10ml)中，向其中加入1-(4-氯苯基)甲胺(2.804g，19.800mmol)并將該混合物冷卻至0℃。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亞甲基]-N-甲基甲銨四氟硼酸鹽(7.770g，24.200mmol)和N-乙基-N，N-二異丙基胺(5.971g，46.200mmol)。將該溶液在室溫下攪拌2小時(shí)。向其中加入EtOAc(20ml)，將有機(jī)相用Na2CO3(3×20ml，aq)和HCl(0.5M，2×10ml)進(jìn)行洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物用制備HPLC純化(最初的流動(dòng)相用乙腈/緩沖劑60/40等度洗脫，然后將乙腈濃度增至100％，所說的緩沖劑是乙腈/水10/90和乙酸銨的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。將包含產(chǎn)物的級分匯集并通過蒸發(fā)除去乙腈。向其中加入EtOAc(10ml)并將有機(jī)相用兩份鹽水進(jìn)行洗滌，干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到2.337g N-(4-氯芐基)乙酰胺(收率57.8％)。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ1.96(s，3H)，4.31(d，2H)，6.46(bs，1H)，7.16(d，2H)，7.25(d，2H).
b)N-(4-氯芐基)-N-乙基胺將N-(4-氯芐基)乙酰胺(2.337g，12.726mmol)溶解于THF(100ml)中并將其在氬氣氣氛下冷卻至0℃。向其中加入含有硼烷的(甲硫基)甲烷化合物(1∶1)并將該混合物在室溫下回流過夜。逐漸向其中加入HCl(15ml，10％)并將其攪拌過夜。通過蒸發(fā)除去溶劑。向其中加入乙醚(20ml)并用K2CO3(3×15ml)將產(chǎn)物萃取到水相中。將水相用HCl(10ml，10％)酸化并用EtOAc(3×15ml)將產(chǎn)物萃取到有機(jī)相中。將有機(jī)相干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑得到0.938g N-(4-氯芐基)-N-乙基胺(收率43.4％)。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ1.11(t，3H)，2.65(q，2H)，3.74(s，2H)，7.23-7.28(m，4H).
c)2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯將(4-{2-[(甲基磺?；?氧基]乙基}苯氧基)乙酸叔丁酯(5.454g，17.347mmol)溶解于乙腈(100ml)中，向其中加入2-巰基苯甲酸甲酯(3.502g，20.816mmol)和碳酸鉀(4.795g，34.694mmol)。將該溶液在60℃下攪拌10小時(shí)。向其中加入EtOAc(40ml)并將有機(jī)相用兩份鹽水(2×40ml，aq)進(jìn)行洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到6.931g 2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯。將這種材料不進(jìn)行進(jìn)一步純化地用于下一步。
d)[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]-硫基}乙基)-苯氧基]乙酸將2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯(4.630g，11.502mmol)用DCM(50ml)吸收并用三氟乙酸(44.40g，389.405mmol)在室溫下處理4h。將該混合物蒸發(fā)并與甲苯一起共沸。將該粗品用制備HPLC純化(最初的流動(dòng)相為等度洗脫的乙腈/緩沖劑60/40，然后將乙腈濃度增至100％，所說的緩沖劑是乙腈/水10/90和乙酸銨的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。匯集包含產(chǎn)物的級分并通過蒸發(fā)除去乙腈。向其中加入EtOAc(10ml)，將有機(jī)相用兩份鹽水進(jìn)行洗滌，然后干燥(MgSO4).通過蒸發(fā)除去溶劑，得到3.825g[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]-硫基}乙基)-苯氧基]乙酸(兩步的總收率為63.9％)。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ2.93-2.98(m，2H)，3.12-3.17(m，2H)，3.92(s，3H)，4.67(s，2H)，6.88(d，2H)，7.13-7.21(m，3H)，7.33(d，1H)，7.41-7.46(m，1H)，7.96(dd，1H).
e)2-{[2-(4-{2-[(4-氯芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)-乙基]硫基]苯甲酸甲酯將[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]硫基}乙基)苯氧基]乙酸(0.200g，0.577mmol)溶解于DMF(10ml)中，向其中加入N-(4-氯芐基)-N-乙基胺(0.108g，0.635mmol)并將該混合物冷卻至0℃。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亞甲基]-N-甲基甲銨四氟硼酸鹽(0.204g，0.635mmol)和N-乙基-N，N-二異丙基胺(0.157g，1.212mmol)。將該溶液在室溫下攪拌過夜。向其中加入水(100ml)并將水相用乙醚(3×20ml)進(jìn)行萃取。將有機(jī)相用Na2CO3(3×20ml，aq)和HCl(0.5M，2×10ml)洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物用閃柱色譜進(jìn)行純化(用等度洗脫的庚烷/EtOAc 30/70開始，然后將EtOAc濃度增至100％，(硅膠600.004-0.063mm)。匯集包含產(chǎn)物的級分并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.085g 2-{[2-(4-{2-[(4-氯芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸甲酯(收率29.6％)。
1HNMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，300MHz，CDCl3)δ1.09-1.21(m，3H)，2.91-2.99(m，2H)，3.11-3.18(m，2H)，3.32-3.43(m，2H)，3.92(s，3H)，4.57-4.75(m，4H)，6.78，6.92(d，d，2H)，7.12-7.46(m，9H)，7.96(d，1H).
f)2-{[2-(4{-2-[(4-氯芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸將2-{[2-(4-{2-[(4-氯芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)-乙基]硫基}苯甲酸甲酯(0.085g，0.170mmol)溶解于乙腈/水(1/1，4ml)混合物中并向其中加入氫氧化鋰(0.008g，0.341mmol)。該反應(yīng)在單節(jié)微波爐(5min，150℃)中進(jìn)行。通過蒸發(fā)除去溶劑，然后向其中加入HCl(2ml，1M)。將水相用兩份EtOAc(20ml)萃取。將所合并的有機(jī)相干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.073g油狀物形式的2-{[2-(4-{2-[(4-氯芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸(收率88.4％)，通過冷卻和放置使其固化。
1HNMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，400MHz，CDCl3)δ1.09-1.20(m，3H)，2.91-2.98(m，2H)，3.11-3.17(m，2H)，3.33-3.42(m，2H)，4.58-4.77(m，4H)，6.79，6.92(d，d，2H)，7.11-7.49(m，9H)，8.10(d，1H)13C NMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，100MHz，CDCl3)δ12.23，13.77，33.70，33.82，41.09，41.30，47.42，49.64，67.37，67.91，114.69，114.81，123.97-135.58(復(fù)雜多重峰)，142.22，156.45，156.57，168.20，170.63用相似的方式制備下面的兩個(gè)實(shí)施例實(shí)施例42-[2-(4-{2-[(4-氯芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸。
實(shí)施例52-[2-(4-{2-[乙基(4-三氟甲基芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸。
實(shí)施例6a)將乙酸(1.321g，22.000mmol)溶解于DMF(10ml)中，向其中加入1-[4-(三氟甲基)苯基]甲胺(3.468g，19.800mmol)并將該混合物冷卻至0℃。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亞甲基]-N-甲基甲銨四氟硼酸鹽(7.770g，24.200mmol)和N-乙基-N，N-二異丙基胺(5.971g，46.200mmol)。將該溶液在室溫下攪拌2小時(shí)。向其中加入EtOAc(20ml)并將有機(jī)相用Na2CO3(3×20ml，aq)和HCl(0.5M，2×10ml)洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑。將粗品用制備HPLC純化(開始用等度洗脫的乙腈/緩沖劑60/40，然后將乙腈濃度增至100％，所說的緩沖劑是乙腈/水10/90和乙酸銨的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。匯集包含產(chǎn)物的級分并通過蒸發(fā)除去乙腈。向其中加入EtOAc(10ml)，將有機(jī)相用兩份鹽水進(jìn)行洗滌，然后干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到3.085g N-[4-(三氟甲基)芐基]乙酰胺(收率64.6％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ2.0(s，3H)，4.42(d，2H)，6.58(bs，1H)，7.35(d，2H)，7.55(d，2H)b)將N-[4-(三氟甲基)芐基]乙酰胺(3.085g，14.204mmol)溶解于THF(100ml)中并將其在氬氣下冷卻至0℃。向其中加入含有硼烷的(甲硫基)甲烷化合物(1∶1)(2.698g，35.511mmol)并將該混合物在室溫下回流過夜。逐漸向其中加入HCl(15ml，10％)并將其攪拌過夜。通過蒸發(fā)除去溶劑。向其中加入乙醚(20ml)并用K2CO3(3×15ml)將產(chǎn)物萃取到水相中，將水相用HCl(10ml，10％)酸化并用EtOAc(3×15ml)將產(chǎn)物萃取到有機(jī)相中。將有機(jī)相干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.809g N-[4-(三氟甲基)芐基]乙胺(收率28％)。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ1.05(t，3H)，1.3(s，1H)，2.62(q，2H)，3.78(s，2H)，7.38(d，2H)，7.3(d，2H)c)將(4-{2-[(甲基磺酰基)氧基]乙基}苯氧基)乙酸叔丁酯(5.454g，17.347mmol)溶解于乙腈(100ml)中，向其中加入2-巰基苯甲酸甲酯(3.502g，20.816mmol)和碳酸鉀(4.795g，34.694mmol)。將該溶液在60℃下攪拌10小時(shí)。向其中加入EtOAc(40ml)并將有機(jī)相用兩份鹽水(2×40ml，aq)進(jìn)行洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到6.931g 2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯粗品。將該粗品不進(jìn)一步純化地用于下一步。
d)將2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯(4.630g，11.502mmol)用DCM(50ml)吸收并將其在室溫下用三氟乙酸(44.40g，389.405mmol)處理4h。將該混合物蒸發(fā)并與甲苯一起共沸。將粗品用制備HPLC純化(開始用等度洗脫的乙腈/緩沖劑60/40，然后將乙腈濃度增至100％，所說的緩沖劑是乙腈/水10/90和乙酸銨的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。匯集包含產(chǎn)物的級分并通過蒸發(fā)除去乙腈。向其中加入EtOAc(10ml)，將有機(jī)相用兩份鹽水進(jìn)行洗滌并干燥(MgSO4)。通過蒸發(fā)除去溶劑，得到3.825g[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]硫基}乙基)苯氧基]乙酸(兩步的總收率為63.9％)。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ2.82(t，2H)，3.15(t，2H)，3.82(s，3H)，4.35(s，2H)，6.78(d，2H)，7.18(d，2H)，7.23(t，1H)，7.51(d，1H)，7.55(t，1H)，7.85(d，1H)e)將[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]硫基}乙基)苯氧基]乙酸(0.200g，0.577mmol)溶解于DMF(10ml)中，向其中加入N-[4-(三氟甲基)芐基]乙胺(0.129g，0.635mmol)并將該混合物冷卻至0℃。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亞甲基]-N-甲基甲銨四氟硼酸鹽(0.204g，0.635mmol)和N-乙基-N，N-二異丙基胺(0.157g，1.212mmol)。將該溶液在室溫下攪拌過夜。向其中加入水(100ml)并將水相用乙醚(3×20ml)進(jìn)行萃取。將有機(jī)相用Na2CO3(3×20ml，aq)和HCl(0.5M，2×10ml)進(jìn)行洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑。將粗品用閃柱色譜進(jìn)行純化(開始使用等度洗脫的庚烷/EtOAc30/70，然后將EtOAc濃度增至100％，(硅膠60 0.004-0.063mm)。匯集包含產(chǎn)物的級分并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.085g 2-({2-[4-(2-{乙基[4-(三氟甲基)芐基]氨基}-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯(收率27.7％)。
1HNMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，500MHz，CDCl3)δ1.1-1.23(bm，3H)，2.95(q，2H)，3.15(q，2H)，3.42(m，2H)，3.9(s，3H)，4.7-4.82(bm，4H)，6.75-6.95(m，2H)，7.1-7.5(m，9H)，7.97(d，1H)f)將2-({2-[4-(2-{乙基[4-(三氟甲基)芐基]氨基}-2-氧代乙氧基)苯基]-乙基}硫基)苯甲酸甲酯(0.085g，0.160mmol)溶解于乙腈/水(1/1，4ml)的混合物中，然后向其中加入氫氧化鋰(0.008g，0.320mmol)。該反應(yīng)是在單節(jié)微波爐(5min，150℃)中進(jìn)行的。通過蒸發(fā)除去溶劑和加入HCl(2ml，1M)來進(jìn)行后處理。用兩份EtOAc(20ml)對水相進(jìn)行萃取，將有機(jī)相干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.07773g 2-({2-[4-(2-{乙基[4-(三氟甲基)芐基]氨基}-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸(收率93.0％)。
1HNMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，400MHz，CDCl3)δ1.02-1.25(bm，3H)，2.95(q，2H)，3.15(q，2H)，3.38(m，2H)，4.60-4.82(bm，4H)，6.75-6.95(m，2H)，7.1-7.5(m，9H)，7.97(d，1H)實(shí)施例7將2-{2-[4-(2-{丁基[2-氟-4-(三氟甲基)芐基]氨基}-2-氧代乙氧基)苯基]乙氧基}苯甲酸甲酯(0.230g，0.410mmol)溶解于THF/水(1/1，4ml)的混合物中，向其中加入氫氧化鋰(0.015g，0.617mmol)。該反應(yīng)是在單節(jié)微波爐中進(jìn)行的(14min，150℃)。通過蒸發(fā)除去溶劑并加入HCl(2ml，1M)來進(jìn)行后處理。將水相用兩份EtOAc(20ml)進(jìn)行萃取。將有機(jī)相干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.212g 2-{2-[4-(2-{丁基[2-氟-4-(三氟甲基)芐基]氨基}-2-氧代乙氧基)苯基]乙氧基}苯甲酸(收率94.5％)。
1HNMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，500MHz，CDCl3)δ0.82-1.0(bm，3H)，1.2-1.4(bm，2H)，1.65-1.7(bm，2H)，3.13(m，2H)，3.32(m，2H)，4.4(m，2H)，4.63-4.8(M，4H)，6.7-7.6(bm，10H)，8.1(d，1H)實(shí)施例8a)將(4-{2-[2-(甲氧基羰基)苯氧基]乙基}苯氧基)乙酸(0.150g，0.454mmol)溶解于DMF(10ml)中，向其中加入N-(2，4-二氟芐基)-N-丙基胺(0.084g，0.454mmol)并將該混合物冷卻至0℃。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亞甲基]-N-甲基甲銨四氟硼酸鹽(0.160g，0.499mmol)和N-乙基-N，N-二異丙基胺(0.123g，0.954mmol)。將該溶液在室溫下攪拌2小時(shí)。向其中加入EtOAc(20ml)并將水相用Na2CO3(3×20ml，aq)和HCl(0.5M，2×10ml)進(jìn)行洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.220g 2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟芐基)(丙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)-乙氧基]苯甲酸甲酯(收率97.4％)。
1HNMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，500MHz，CDCl3)δ0.8-1.0(bm，3H)，1.45-1.7(bm，2H)3.1(m，2H)，3.28(bm，2H)，3.9(s，3H)，4.2(q，2H)，4.6-4.75(M，4H)，6.7-7.0(bm，6H)，7.1-7.3(bm，3H)，7.4(m，1H)，7.78(d，1H)b)將2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟芐基)(丙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)-乙氧基]苯甲酸甲酯(0.22g，0.442mmol)溶解于THF/水(1/1，4ml)混合物中。向其中加入氫氧化鋰(0.021g，0.884mmol)。該反應(yīng)是在單節(jié)微波爐中進(jìn)行的(14min，150℃)。通過蒸發(fā)除去溶劑并加入HCl(2ml，1M)來進(jìn)行后處理。用兩份EtOAc(20ml)對水相進(jìn)行萃取，將有機(jī)相干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.180g 2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟芐基)(丙基)-氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸(收率84.2％)。
1HNMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，500MHz，CDCl3)δ0.8-1.0(bm，3H)，1.45-1.7(bm，2H)，3.14(m，2H)，3.28(bm，2H)，4.4(q，2H)，4.62(s，2H)，4.75(s，2H)，6.7-7.35(bm，9H)，7.52(t，1H)，8.12(d，1H)實(shí)施例9a)將(4-{2-[2-(甲氧基羰基)苯氧基]乙基}苯氧基)乙酸(0.150g，0.454mmol)溶解于DMF(10ml)中，向其中加入N-芐基-N-乙基胺(0.061g，0.454mmol)并將該混合物冷卻至0℃。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)-(二甲基氨基)亞甲基]-N-甲基甲銨四氟硼酸鹽(0.160g，0.499mmol)和N-乙基-N，N-二異丙基胺(0.123g，0.954mmol)。將該溶液在室溫下攪拌2小時(shí)。向其中加入EtOAc(20ml)并將有機(jī)相用Na2CO3(3×20ml，aq)和HCl(0.5M，2×10ml)進(jìn)行洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.138g 2-[2-(4-{2-[芐基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸甲酯(收率67.9％)。
1HNMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，500MHz，CDCl3)δ1.07-1.22(bm，3H)，3.1(m，2H)，3.20(bm，2H)，3.9(s，3H)，4.2(q，2H)，4.6-4.8(M，4H)，6.8-7.02(bm，4H)，6.18-7.5(bm，8H)，7.78(d，1H)b)將2-[2-(4-{2-[芐基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸甲酯(0.138g，0.308mmol)溶解于THF/水(1/1，4ml)的混合物中。向其中加入氫氧化鋰(0.015g，0.617mmol)。該反應(yīng)是在單節(jié)微波爐中進(jìn)行的(14min，150℃)。通過蒸發(fā)除去溶劑并加入HCl(2ml，1M)來進(jìn)行后處理。將水相用兩份EtOAc(20ml)萃取，將有機(jī)相干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.146g 2-[2-(4-{2-[芐基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸。
1HNMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，500MHz，CDCl3)δ1.02-1.22(bm，3H)，3.1(m，2H)，3.25-3.5(bm，2H)，4.2(q，2H)，4.55-4.8(M，4H)，6.8-7.4(bm，11H)，7.5(m，1H)，8.1(d，1H).
實(shí)施例10a)將(4-{2-[(甲基磺酰基)氧基]乙基}苯氧基)乙酸叔丁酯(5.454g，17.347mmol)溶解于乙腈(100ml)中，向其中加入2-巰基苯甲酸甲酯(3.502g，20.816mmol)和碳酸鉀(4.795g，34.694mmol)。將該溶液在60℃下攪拌10小時(shí)。向其中加入EtOAc(40ml)并將有機(jī)相用兩份鹽水(2×40ml，aq)進(jìn)行洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到6.931g 2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯粗品。將該粗品不進(jìn)行進(jìn)一步純化地用于下一步中。
b)將2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯(4.630g，11.502mmol)用DCM(50ml)吸收并用三氟乙酸(44.40g，389.405mmol)在室溫下處理4h。將該混合物蒸發(fā)并與甲苯一起共沸。將粗品用制備HPLC純化(開始使用等度洗脫的乙腈/緩沖劑60/40，然后將乙腈濃度增加至100％，所說的緩沖劑是乙腈/水10/90和乙酸銨的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。匯集包含產(chǎn)物的級分并通過蒸發(fā)除去乙腈。向其中加入EtOAc(10ml)，將有機(jī)相用兩份鹽水進(jìn)行洗滌，然后干燥(MgSO4)。通過蒸發(fā)除去溶劑，得到3.825g[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]硫基}乙基)-苯氧基]乙酸(兩步的總收率為63.9％)。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ2.82(t，2H)，3.15(t，2H)，3.82(s，3H)，4.35(s，2H)，6.78(d，2H)，7.18(d，2H)，7.23(t，1H)，7.51(d，1H)，7.55(t，1H)，7.85(d，1H)c)將[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]硫基}乙基)苯氧基]乙酸(0.200g，0.577mmol)溶解于DMF(10ml)中，向其中加入N-芐基-N-乙基胺(0.086g，0.635mmol)并將該混合物冷卻至0℃。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亞甲基]-N-甲基甲銨四氟硼酸鹽(0.204g，0.635mmol)和N-乙基-N，N-二異丙基胺(0.157g，1.212mmol)。將該溶液在室溫下攪拌過夜。向其中加入水(100ml)并將水相用乙醚(3×20ml)萃取。將有機(jī)相用Na2CO3(3×20ml，aq)和HCl(0.5M，2×10ml)進(jìn)行洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑。將粗品用閃柱色譜進(jìn)行純化(開始使用等度洗脫的庚烷/EtOAc 30/70，然后將EtOAc濃度增至100％，(硅膠600.004-0.063mm)。匯集包含產(chǎn)物的級分并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.137g 2-{[2-(4-{2-[芐基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)-乙基]硫基}苯甲酸甲酯(收率51.2％)。
d)將2-{[2-(4-{2-[芐基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸甲酯(0.137g，0.296mmol)溶解于乙腈/水(1/1，4ml)的混合物中，向其中加入氫氧化鋰(0.014g，0.591mmol)。該反應(yīng)是在單節(jié)微波爐中進(jìn)行的(5min，150℃)、通過蒸發(fā)除去溶劑并加入HCl(2ml，1M)來進(jìn)行后處理。將水相用兩份EtOAc(20ml)進(jìn)行萃取，將有機(jī)相干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.111g 2-{[2-(4-{2-[芐基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸(收率83.5％)。
1HNMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，400MHz，CDCl3)δ1.02-1.30(bm，3H)，2.95(q，2H)，3.15(q，2H)，3.40(m，2H)，4.58(s，2H)，4.63-4.92(bm，4H)，6.85-7.0(bm，2H)，7.0-7.53(m，10H)，7.97(d，1H)實(shí)施例11a)N-(4-叔丁基芐基)-N-乙基胺(0.143g，0.746mmol)在N2下溶解于干燥乙腈中并向其中加入N-乙基-N，N-二異丙基胺(0.371g，2.867mmol)。將該混合物攪拌30分鐘并向其中加入2-{2-[4-(2-氯-2-氧代乙氧基)苯基]乙氧基}苯甲酸甲酯(0.200g，0.573mmol)。將該溶液在室溫下攪拌過夜。將粗品用閃柱色譜法進(jìn)行純化(開始使用等度洗脫的庚烷/EtOAc 50/50，然后將EtOAc濃度增至100％，(硅膠60 0.004-0.063mm)。匯集包含產(chǎn)物的級分并通過蒸發(fā)除去EtOAc，得到0.229g 2-[2-(4-{2-[(4-叔丁基芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸甲酯(收率79.3％)。
1HNMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，500MHz，CDCl3)δ1.07-1.23(bm，3H)，2.23(m，9H)，3.08(m，2H)，3.30-3.5(bm，2H)，3.87(s，3H)，4.18(m，2H)，4.58(d，2H)，4.63-4.8(m，2H)6.77-7.43(m，11H)，7.78(d，1H)b)將2-[2-(4-{2-[(4-叔丁基芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)-乙氧基]苯甲酸甲酯(0.2290g，0.455mmol)溶解于THF(新蒸餾的)/水(2/1，3ml)的混合物中，向其中加入氫氧化鋰(0.218g，0.909mmol)。該反應(yīng)是在單節(jié)微波爐中進(jìn)行的(5min，150℃)。通過蒸發(fā)除去THF。加入水(10ml)并將堿性水相用乙醚(2×10ml)進(jìn)行洗滌。加入HCl(2ml，1M，pH1)。將水相用兩份DCM(20ml)進(jìn)行萃取，將有機(jī)相干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.163g 2-[2-(4-{2-[(4-叔丁基芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸(收率73.2％)。
1HNMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，500MHz，CDCl3)δ1.07-1.21(bm，3H)，2.28(m，9H)，3.12(m，2H)，3.28-3.5(bm，2H)，4.4(m，2H)，4.58(d，2H)，4.63-4.78(m，2H)6.80-7.55(m，11H)，8.1(d，1H)實(shí)施例12a)將乙酸(1.321g，22.000mmol)溶解于DMF(10ml)中，向其中加入1-(4-氟苯基)甲胺(2.478g，19.800mmol)并將該混合物冷卻至0℃。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亞甲基]-N-甲基甲銨四氟硼酸鹽(7.770g，24.200mmol)和N-乙基-N，N-二異丙基胺(5.971g，46.200mmol)。將該溶液在室溫下攪拌2小時(shí)。向其中加入EtOAc(20ml)并將有機(jī)相用Na2CO3(3×20ml，aq)和HCl(0.5M，2×10ml)進(jìn)行洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑。將粗品用制備HPLC純化(開始使用等度洗脫的乙腈/緩沖劑60/40，然后將乙腈濃度增至100％，所說的緩沖劑是乙腈/水10/90和乙酸銨的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。匯集包含產(chǎn)物的級分并通過蒸發(fā)除去乙腈。向其中加入EtOAc(10ml)，將有機(jī)相用兩份鹽水進(jìn)行洗滌，然后干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到1.344g N-(4-氟芐基)乙酰胺(收率36.5％)。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ1.98(s，3H)，4.35(d，2H)，6.25(bs，1H)，6.95-7.25(bm，4H)b)將N-(4-氟芐基)乙酰胺(1.344g，8.039mmol)溶解于THF(100ml)中并將其在氬氣下冷卻至0℃。向其中加入含有硼烷的(甲硫基)甲烷化合物(1∶1)(1.527g，20.098mmol)并將該混合物在室溫下回流過夜。逐漸向其中加入HCl(15ml，10％)并將其攪拌過夜。通過蒸發(fā)除去溶劑。向其中加入乙醚(20ml)并用K2CO3(3×15ml)將產(chǎn)物萃取到水相中。用HCl(10ml，10％)將水相酸化并用EtOAc(3×15ml)將產(chǎn)物萃取到有機(jī)相中。將有機(jī)相干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.309g N-(4-氟芐基)乙胺(收率25.1％)。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.05(t，3H)，1.1(s，1H)，2.58(q，2H)，3.64(s，2H)，6.9(t，2H)，7.2(t，2H).
c)將N-(4-氟芐基)乙胺(0.114g，0.745mmol)在N2下溶解于干燥乙腈中并向其中加入N-乙基-N，N-二異丙基胺(0.371g，2.876mmol)。將該混合物攪拌30分鐘并向其中加入2-{2-[4-(2-氯-2-氧代乙氧基)苯基]-乙氧基}苯甲酸甲酯(0.200g，0.573mmol)。將該溶液在室溫下攪拌過夜。將粗品用閃柱色譜法進(jìn)行純化(開始使用等度洗脫的庚烷/EtOAc 50/50，然后將EtOAc濃度增至100％，(硅膠600.004-0.063mm)。匯集包含產(chǎn)物的級分并通過蒸發(fā)除去EtOAc，得到0.223g 2-[2-(4-{2-[乙基(4-氟芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸甲酯(收率83.5％)。
1HNMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，500MHz，CDCl3)δ1.07-1.23(bm，3H)，3.08(m，2H)，3.30-3.45(bm，2H)，3.87(s，3H)，4.18(m，2H)，4.58(s，2H)，4.63-4.8(m，2H)6.77-7.45(m，11H)，7.78(d，1H)d)將2-[2-(4-{2-[乙基(4-氟芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)-乙氧基]苯甲酸甲酯(0.223g，0.479mmol)溶解于THF(新蒸餾的)/水(2/1，3ml)的混合物中，向其中加入氫氧化鋰(0.229g，0.958mmol)。該反應(yīng)是在單節(jié)微波爐中進(jìn)行的(5min，150℃)。通過蒸發(fā)除去THF。加入水(10ml)并將堿水相用乙醚(2×10ml)進(jìn)行洗滌。加入HCl(2ml，1M，pH1)。將水相用兩份DCM(20ml)進(jìn)行萃取，將有機(jī)相干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.196g 2-[2-(4-{2-[乙基(4-氟芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸(收率90.6％)。
1HNMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，500MHz，CDCl3)δ1.03-1.21(bm，3H)，3.1(m，2H)，3.23-3.4(bm，2H)，4.38(m，2H)，4.55(s，2H)，4.63-4.78(m，2H)，6.75-7.22(m，10H)，7.47(t，1H)，8.07(d，1H)實(shí)施例13a)將(4-{2-[(甲基磺酰基)氧基]乙基}苯氧基)乙酸叔丁酯(5.454g，17.347mmol)溶解于乙腈(100ml)中，向其中加入2-巰基苯甲酸甲酯(3.502g，20.816mmol)和碳酸鉀(4.795g，34.694mmol)。將該溶液在60℃下攪拌10小時(shí)。向其中加入EtOAc(40ml)并將有機(jī)相用兩份鹽水(2×40ml，aq)進(jìn)行洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到6.931g 2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯。該粗品不進(jìn)行進(jìn)一步純化地被用于下一步。
b)將2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯(4.630g，11.502mmol)用DCM(50ml)吸收并用三氟乙酸(44.40g，389.405mmol)在室溫下處理4h。將該混合物蒸發(fā)并與甲苯一起共沸。將粗品用制備HPLC純化(開始使用等度洗脫的乙腈/緩沖劑60/40，然后將乙腈濃度增至100％，所說的緩沖劑是乙腈/水10/90和乙酸銨的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。匯集包含產(chǎn)物的級分并通過蒸發(fā)除去乙腈。向其中加入EtOAc(10ml)，將有機(jī)相用兩份鹽水進(jìn)行洗滌，然后干燥(MgSO4)。通過蒸發(fā)除去溶劑，得到3.825g[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]硫基}乙基)苯氧基]-醋酸(兩步的總收率為63.9％)。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ2.82(t，2H)，3.15(t，2H)，3.82(s，3H)，4.35(s，2H)，6.78(d，2H)，7.18(d，2H)，7.23(t，1H)，7.51(d，1H)，7.55(t，1H)，7.85(d，1H).
c)將[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]硫基}乙基)苯氧基]乙酸(0.250g，0.722mmol)溶解于DCM(10ml)中，向其中加入N-(2-氟芐基)乙胺(0.105g，0.686mmol)。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亞甲基]-N-甲基甲銨四氟硼酸鹽(0.255g，0.794mmol)和N-乙基-N，N-二異丙基胺(0.187g，1.443mmol)。將該溶液在室溫下攪拌2小時(shí)。將粗品用閃柱色譜進(jìn)行純化(開始使用等度洗脫的DCM100％，然后將MeOH濃度從0.5％增至20％，(硅膠600.004-0.063mm)。匯集包含產(chǎn)物的級分并通過蒸發(fā)除去EtOAc。所需的物質(zhì)需要再進(jìn)行純化并用制備HPLC對其進(jìn)行純化(開始使用等度洗脫的乙腈/緩沖劑60/40，然后將乙腈濃度增至100％，所說的緩沖劑是乙腈/水10/90和乙酸銨的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。匯集包含產(chǎn)物的級分并通過蒸發(fā)除去乙腈。通過將該產(chǎn)物冷凍干燥過夜除去乙酸銨，得到0.1g 2-{[2-(4-{2-[乙基(2-氟芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸甲酯(收率29.1％)1HNMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，500MHz，CDCl3)δ1.03-1.23(bm，3H)，2.95(q，2H)，3.15(q，2H)，3.40(m，2H)，3.9(s，3H)，4.6-4.8(bm，4H)，6.75-6.95(m，2H)，6.97-7.5(m，9H)，7.97(d，1H)d)將2-{[2-(4-{2-[乙基(2-氟芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}-苯甲酸甲酯溶解于THF(新蒸餾的)/水(2/1，3ml)的混合物中，向其中加入氫氧化鋰(0.015g，0.629mmol)。該反應(yīng)是在單節(jié)微波爐中進(jìn)行的(5min，150℃)。通過蒸發(fā)除去THF。加入水(10ml)并將堿性水相用乙醚(2×10ml)進(jìn)行洗滌。加入HCl(2ml，1M，pH1)。將水相用兩份DCM(20ml)進(jìn)行萃取，將有機(jī)相干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.095g 2-{[2-(4-{2-[乙基(2-氟芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]-硫基}苯甲酸(收率96.9％)1HNMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，400MHz，CDCl3)δ1.02-1.25(bm，3H)，2.95(q，2H)，3.15(q，2H)，3.42(m，2H)，4.60-4.80(bm，4H)，6.75-6.95(m，2H)，6.95-7.5(m，9H)，8.1(d，1H)實(shí)施例14a)將(4-{2-[(甲基磺酰基)氧基]乙基}苯氧基)乙酸叔丁酯(5.454g，17.347mmol)溶解于乙腈(100ml)中，向其中加入2-巰基苯甲酸甲酯(3.502g，20.816mmol)和碳酸鉀(4.795g，34.694mmol)。將該溶液在60℃下攪拌10小時(shí)。向其中加入EtOAc(40ml)并將有機(jī)相用兩份鹽水(2×40ml，aq)進(jìn)行洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到6.931g 2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯粗品。該粗品不進(jìn)行進(jìn)一步純化地用于下一步。
b)將2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯(4.630g，11.502mmol)用DCM(50ml)吸收并用三氟乙酸(44.40g，389.405mmol)在室溫下處理4h。將該混合物蒸發(fā)并與甲苯一起共沸。將粗品用制備HPLC純化(開始使用等度洗脫的乙腈/緩沖劑60/40，然后將乙腈濃度增至100％，所說的緩沖劑是乙腈/水10/90和乙酸銨的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。匯集包含產(chǎn)物的級分并通過蒸發(fā)除去乙腈.向其中加入EtOAc(10ml)，將有機(jī)相用兩份鹽水進(jìn)行洗滌，然后干燥(MgSO4)。通過蒸發(fā)除去溶劑，得到3.825g[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]硫基}乙基)苯氧基]乙酸(兩步的總收率為63.9％)。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ2.82(t，2H)，3.15(t，2H)，3.82(s，3H)，4.35(s，2H)，6.78(d，2H)，7.18(d，2H)，7.23(t，1H)，7.51(d，1H)，7.55(t，1H)，7.85(d，1H)。
c)將[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]硫基}乙基)苯氧基]乙酸(0.250g，0.722mmol)溶解于DCM(10ml)中并向其中加入N-(2-氯芐基)-N-乙基胺(0.116g，0.686mmol)。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亞甲基]-N-甲基甲銨四氟硼酸鹽(0.255g，0.794mmol)和N-乙基-N，N-二異丙基胺(0.187g，1.443mmol)。將該溶液在室溫下攪拌2小時(shí)。將粗品用閃柱色譜進(jìn)行純化(開始使用等度洗脫的DCM100％，然后將MeOH濃度從0.5％增至20％，(硅膠60 0.004-0.063mm)。匯集包含產(chǎn)物的級分并通過蒸發(fā)除去EtOAc。該物質(zhì)需要再進(jìn)行純化并用制備HPLC對其進(jìn)行純化(開始使用等度洗脫的乙腈/緩沖劑60/40，然后將乙腈濃度增至100％，所說的緩沖劑是乙腈/水10/90和乙酸銨的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。匯集包含產(chǎn)物的級分并通過蒸發(fā)除去乙腈。通過將該產(chǎn)物冷凍干燥過夜來除去乙酸銨，得到0.111g 2-{[2-(4-{2-[(2-氯芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸甲酯(收率30.9％)。
1HNMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體.500MHz，CDCl3)δ1.10-1.25(bm，3H)，2.95(m，2H)，3.15(m，2H)，3.40(m，2H)，3.9(s，3H)，4.6-4.8(bm，4H)，6.75-6.95(m，2H)，7.02-7.5(m，9H)，7.95(d，1H)d)將2-{[2-(4-{2-[(2-氯芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}-苯甲酸甲酯溶解于THF(新蒸餾的)/水(2/1，3ml)的混合物中，向其中加入氫氧化鋰(0.015g，0.629mmol)。該反應(yīng)是在單節(jié)微波爐中進(jìn)行的(5min，150℃)。通過蒸發(fā)除去THF。加入水(10ml)并將該堿性水相用乙醚(2×10ml)進(jìn)行洗滌。加入HCl(2ml，1M，pH1)。將水相用兩份DCM(20ml)進(jìn)行萃取。將有機(jī)相干燥(MgSO4)并通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.103g 2-{[2-(4-{2-[(2-氯芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}-苯甲酸(收率95.5％)1HNMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，400MHz，CDCl3)δ1.07-1.25(bm，3H)，2.95(m，2H)，3.15(m，2H)，3.42(m，2H)，4.62-4.85(bm，4H)，6.75-6.95(m，2H)，7.02-7.5(m，9H)，8.1(d，1H)。
生物學(xué)活性配制將化合物溶解于DMSO中，得到16mM的儲(chǔ)備液。在試驗(yàn)前，用DMSO和培養(yǎng)基對儲(chǔ)備液進(jìn)行稀釋。
一般化學(xué)品和試劑熒光素酶試驗(yàn)試劑購自Packard，USA。限制酶得自Boehringer和Vent聚合酶得自New England Biolabs。
細(xì)胞系和細(xì)胞培養(yǎng)條件U2-OS，(成骨肉瘤，人)購自ATCC，USA。使這些細(xì)胞生長并從第六代起將其成批再冷凍。將細(xì)胞在含有25mM葡萄糖、2mM谷酰胺或4m ML-丙氨酰-L-谷酰胺、10％胎牛血清的Dulbecco改性的Eagle介質(zhì)(DMEM)中在5％CO2下進(jìn)行培養(yǎng)。使用沒有加入鈣或鎂的磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)。所有的細(xì)胞培養(yǎng)試劑都得自Gibco(USA)，96-孔細(xì)胞培養(yǎng)板購自Wallach。
異種表達(dá)的質(zhì)粒構(gòu)造如Ausubel(7)所述進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的重組DNA技術(shù)。熒光素酶報(bào)道載體，pGL5UAS(由五個(gè)GAL4 DNA結(jié)合序列的副本，5′-CGACGGAGTACTGTCCTCCGAGCT-3′所組成的克隆被克隆到pGL3-啟動(dòng)子(Promega)的SacI/XhoI部位中)。用退火(annealed)的重疊低聚核苷酸來構(gòu)造帶有UAS部位的SacI/XhoI片段。
所用的表達(dá)載體是以pSG5(Stratagene)為基礎(chǔ)的。所有的載體都包含編碼GAL4的DNA結(jié)合區(qū)域(編碼數(shù)據(jù)庫登記號為P04386的1-145位氨基酸)的EcoRI/NheI片段，其之后被符合讀框地融合至得自多形瘤病毒的T抗原的編碼核定位化序列的片段上。所說的核定位化序列是用產(chǎn)生NheI/KpnI粘端(5′-CTAGCGCTCCTAGAAGAAACGCAAGGTTGGTAC-3′)的退火重疊低聚核苷酸來構(gòu)造的。得自人和小鼠PPARα以及人和小鼠PPARγ的配體結(jié)合區(qū)域是被放大為KpnI/BamHI片段的PCR，并且被符合讀框地克隆到GAL4 DNA結(jié)合區(qū)域和核定位化序列上。所用所有質(zhì)粒構(gòu)造的序列都是通過排序來進(jìn)行證實(shí)的。
用下面的表達(dá)載體來進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

1指的是用于表達(dá)配體結(jié)合區(qū)域的數(shù)據(jù)庫入口的核苷酸位置。
瞬時(shí)轉(zhuǎn)染將得自第六代的冷凍的細(xì)胞原料解凍并在轉(zhuǎn)染前使其生長至第八代。將融合的細(xì)胞用胰蛋白酶消化，洗滌，并通過在270xg下離心2分鐘來使其成粒。將該細(xì)胞粒重新懸浮于冷PBS中，使細(xì)胞濃度為約18×106個(gè)細(xì)胞/ml。在加入DNA后，將該細(xì)胞懸浮液在冰上培養(yǎng)約5分鐘，然后，將其在Biorad′s Gene PulserTM中以0.5ml的批量在230V，960μF下電穿孔。向各0.5ml批量的細(xì)胞中一共加入50μg DNA，其包括2.5μg表達(dá)載體、25μg報(bào)道載體和22.5μg非特異性DNA(pBluescript，Stratagene)。
在電穿孔后，在沒有苯酚紅的DMEM中將細(xì)胞稀釋至320′000個(gè)細(xì)胞/ml的濃度，并以約25′000個(gè)細(xì)胞/孔將其接種到96-孔板中。為了使細(xì)胞恢復(fù)，在加入試驗(yàn)化合物前，將進(jìn)行了接種的板在37℃下培養(yǎng)3-4小時(shí)。在對PPARα的試驗(yàn)中，細(xì)胞基質(zhì)還加入進(jìn)行了樹脂-炭剝離的胎牛血清(FCS)以避免FCS的脂肪酸組分的背景活化作用。樹脂-炭剝離的FCS的制備如下對于500ml熱滅活的FCS而言，加入10g炭和25g Bio-Rad分析級陰離子交換樹脂(200-400目)，將該溶液在室溫下在磁力攪拌器上放置過夜。第二天，將FCS離心并將該剝離操作重復(fù)4-6小時(shí)。在第二次處理后，將FCS離心并過濾滅菌以除去殘余的炭和樹脂。
試驗(yàn)方法在樣板中將化合物在DMSO中的儲(chǔ)備液稀釋至適宜的濃度范圍。從該樣板，將化合物用培養(yǎng)介質(zhì)進(jìn)行稀釋從而得到最后劑量的試驗(yàn)化合物溶液。
在將各孔細(xì)胞基質(zhì)的數(shù)量調(diào)節(jié)至75μl后，加入50μl試驗(yàn)化合物溶液。在進(jìn)行熒光素酶探測試驗(yàn)前，將瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞與該化合物接觸約24小時(shí)。對于熒光素酶試驗(yàn)而言，向各孔中手動(dòng)加入100μl試驗(yàn)試劑并將該板放置約20分鐘以使細(xì)胞溶解。在溶胞后，用得自Wallach的1420多孔計(jì)數(shù)器，Victor對熒光素酶活性進(jìn)行測量。
參照化合物用TZD吡格列酮作為人和鼠PPARγ活化的參照物質(zhì)。用5，8，11，14-二十碳四酸(Eicosatetrayonicacid)(ETYA)作為人PPARα的參照物質(zhì)。
計(jì)算和分析對于EC50值的計(jì)算而言，確立一種濃度-效應(yīng)曲線。所用的值得自兩次或三次獨(dú)立測量的平均值(該平均值是減去背景均值后的值)并將其表示為參照化合物所得最大活化作用的百分比。用該值對試驗(yàn)化合物濃度的對數(shù)作圖。通過數(shù)據(jù)點(diǎn)之間的線性相關(guān)和計(jì)算達(dá)到參照化合物所獲得的最大活化的50％所需的濃度來估算EC50值。
式I的化合物對于PPARα的EC50小于50μmol/l，而參照化合物的EC50小于5μmol/l。例如實(shí)施例的一些化合物對于人PPARα的EC50值為實(shí)施例3 0.499μmol/l；和實(shí)施例5 0.048μmol/l
權(quán)利要求
1.式I的化合物及其可藥用的鹽和前藥 其中n是0、1或2；R1表示鹵素、可以任選地被一個(gè)或多個(gè)氟所取代的C1-4烷基、可以任選地被一個(gè)或多個(gè)氟所取代的C1-4烷氧基并且其中當(dāng)n是2時(shí)，所說的取代基R1可以相同或不同；R2表示無支鏈的C2-7烷基；R3表示H或OCH3；和W表示O或S。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中W是O。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中W是S。
4.一種選自下列化合物的化合物及其可藥用的鹽2-[2-(4-{2-[乙基(2-氟芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟芐基)(庚基)氨基]-2-氧代乙氧基}-3-甲氧基苯基)-乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(4-氯芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基)苯基)乙硫基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(4-氯芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[乙基(4-三氟甲基芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[乙基(4-三氟甲基芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙硫基]苯甲酸；2-{2-[4-(2-{丁基[2-氟-4-(三氟甲基)芐基]氨基}-2-氧代乙氧基)苯基]-乙氧基}苯甲酸；2-[2-(4-{2-[2，4-二氟芐基)(丙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[芐基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-{[2-(4-{2-[芐基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(4-叔-丁基芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[乙基(4-氟芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-{[2-(4-{2-[乙基(2-氟芐基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸；或2-{[2-(4-{2-[(2-氯芐基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸。
5.一種包含根據(jù)前面任意一項(xiàng)權(quán)利要求的化合物與可藥用的助劑、稀釋劑和/或載體混合的藥物制劑。
6.一種治療或預(yù)防胰島素耐受性的方法，其包括給需要其的哺乳動(dòng)物使用根據(jù)權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)的化合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)的化合物在制備治療胰島素耐受性的藥物中的應(yīng)用。
8.一種制備式I的化合物的方法，其包括將式II的化合物與去保護(hù)劑進(jìn)行反應(yīng) 其中R1、R2、R3、W和n的定義如前所述并且PG表示一種羧羥基保護(hù)基。
9.如權(quán)利要求8所述的式II的化合物。
10.一種聯(lián)合治療，其包括將根據(jù)權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)的化合物與可用于治療與動(dòng)脈粥樣硬化如高血壓、高血脂癥、血脂障礙、糖尿病和肥胖的形成和發(fā)展有關(guān)的病癥的另一種治療劑聯(lián)用。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種式(I)的化合物以及其可藥用的鹽和前藥，其中n是0、1或2；R
文檔編號A61P9/12GK1674883SQ03819853
公開日2005年9月28日 申請日期2003年6月17日 優(yōu)先權(quán)日2002年6月20日
發(fā)明者L·李 申請人:阿斯特拉曾尼卡有限公司