專利名稱：環(huán)狀硝酮和含有它們的藥用組合物的制作方法
本申請(qǐng)是同名中國(guó)專利申請(qǐng)96196877.X號(hào)的分案申請(qǐng)，原案國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/US96/13312，國(guó)際申請(qǐng)日1996年8月15日。
本發(fā)明涉及環(huán)狀硝酮，它們?cè)陬A(yù)防由自由基所引起的氧化性組織損傷中的用途，它們治療多種疾病的用途，在所述疾病中自由基通過(guò)氧化作用引起組織損傷或破壞，此外本發(fā)明還涉及含有這些環(huán)狀硝酮的藥物組合物。
含有未成對(duì)電子的分子稱為自由基。自由基非常活潑。哺乳動(dòng)物生理系統(tǒng)對(duì)氧的部分還原產(chǎn)生自由基、超氧化物和羥基。還會(huì)產(chǎn)生氧的雙電子還原產(chǎn)物過(guò)氧化氫，但該產(chǎn)物中不含未成對(duì)電子。然而，它通常是三種自由基中最活潑的羥自由基的前體。羥自由基幾乎可與所有生物分子反應(yīng)。這些生物分子的例子包括核酸、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)。羥自由基可以通過(guò)從生物分子中帶走氫原子或直接加到生物分子上使生物分子氧化。這種羥自由基引起的氧化反應(yīng)將生物分子轉(zhuǎn)變成自由基，該自由基很容易與分子氧反應(yīng)，形成被稱為過(guò)氧化氫自由基的產(chǎn)物。形成的過(guò)氧化氫自由基可與另一個(gè)生物分子反應(yīng)產(chǎn)生自由基，該自由基也能如上所述轉(zhuǎn)變成另一個(gè)過(guò)氧化氫自由基。起始存在的氧自由基引發(fā)鏈反應(yīng)，在該反應(yīng)中，機(jī)體中的大量生物分子被氧化。通過(guò)氧化脂質(zhì)，這些自由基可以影響細(xì)胞膜、其通透性、離子通道、細(xì)胞功能等。通過(guò)氧化蛋白質(zhì)，它們可以改變酶、肌肉功能、神經(jīng)等。通過(guò)氧化核酸，它們可以影響DNA、RNA、以及它們的表達(dá)產(chǎn)物。
最近的研究表明，這些氧自由基的過(guò)量與多種疾病如中風(fēng)、心肌梗塞、老年性癡呆、休克等中出現(xiàn)的組織損傷有關(guān)。中風(fēng)和膿毒性休克尤其是大量存在自由基介導(dǎo)的組織損傷的疾病。最近的研究還證實(shí)，自旋捕捉劑可用于終止上述反應(yīng)的放大，從而防止組織損傷或使其減至最小程度。氧自由基和以碳為中心的自由基與自旋捕捉劑的反應(yīng)比與生物分子容易得多。與自旋捕捉劑反應(yīng)可形成穩(wěn)定的自由基加合物，從而終止通常與氧自由基有關(guān)的鏈反應(yīng)。大部分組織損傷是由氧自由基引發(fā)的鏈反應(yīng)所引起，而并不是由于氧自由基本身。氧自由基造成組織損傷的作用機(jī)理，以及自旋捕捉劑防止該損傷的應(yīng)用更詳細(xì)地記載于Floyd，F(xiàn)ASEB雜志，第4卷，2588頁(yè)(1990)。
硝酮3，4-二氫-3，3-二甲基異喹啉N-氧化物(A)和螺[環(huán)己烷-1，3′]3，4-二氫異喹啉N-氧化物(B)(

圖1)是以前開(kāi)發(fā)的、已知的自由基清除劑PBN的環(huán)狀類似物。
將硝酮部分嵌入環(huán)系中可以得到基本是平面的分子，在該分子中，硝酮的雙鍵和芳環(huán)之間存在良好的軌道交疊。分子模型研究表明，在A的最低能量構(gòu)象中，硝酮的雙鍵與芳環(huán)共平面，而相應(yīng)的關(guān)系對(duì)于PBN則存在大約30°的角。這些預(yù)測(cè)得到了X-射線結(jié)晶學(xué)的支持。相對(duì)于PBN的共軛角度的增加，預(yù)期可以使環(huán)狀類似物中的硝酮功能基更易被自由基接近，并生成更穩(wěn)定的產(chǎn)物自由基。在實(shí)驗(yàn)中，A和B均是比PBN更強(qiáng)效的脂質(zhì)氧化抑制劑和更好的羥自由基捕捉劑。參見(jiàn)美國(guó)專利，5397789，1995年3月14日授權(quán)，該專利引入本文作為參考。
圖1 本文公開(kāi)的化合物是下式的環(huán)狀硝酮及其可藥用鹽 式I其中R1和R2彼此獨(dú)立地表示C1-3烷基，或R1和R2一起形成C5-6亞烷基環(huán)或如下結(jié)構(gòu)的環(huán)
其中R1和R2均是CH2；Z表示(CHx)n，其中n是2，x是相應(yīng)于R3的0或1-2的整數(shù)；R3表示選自氫、C1-4烷基、OH、OAc或＝O的取代基；并且X所表示的環(huán)是選自如下的取代基 或 其中，暗的描影區(qū)表示與硝酮環(huán)連接的一側(cè)，R4、R5、R6和R7彼此獨(dú)立地選自氫、C1-3烷基、OH或C1-3烷氧基。
在本申請(qǐng)中a)術(shù)語(yǔ)“C1-3烷基”指含有1-3個(gè)碳原子的支鏈或直鏈烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基等；b)術(shù)語(yǔ)“C1-4烷基”指含有1-4個(gè)碳原子的支鏈或直鏈烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基等；c)術(shù)語(yǔ)“C1-3烷氧基”指含有1-3個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基等；d)術(shù)語(yǔ)“C5-6亞烷基環(huán)”分別指如下的閉環(huán)結(jié)構(gòu)， 和 其中R1和R2均是CH2。
使用三種通用方法制備環(huán)狀硝酮。“甲酰胺路線”在任何可能的情況下使用。當(dāng)由于底物或反應(yīng)中間體的酸敏感性而不能使用“甲酰胺路線”時(shí)，使用“異氰酸酯路線”?！跋趸甭肪€用于制備A的主要代謝物及相關(guān)化合物。這些路線將在代表性實(shí)施例中詳細(xì)說(shuō)明。
甲酰胺路線以下通過(guò)萘化合物9和10的合成中來(lái)說(shuō)明“甲酰胺路線”(參見(jiàn)反應(yīng)方案1)。對(duì)酯1和2的Grignard加成以良好的收率得到叔醇3和4。這些底物與氰化鈉的Ritter反應(yīng)生成相應(yīng)的甲酰胺5和6。將甲酰胺與草酰氯反應(yīng)，隨后用FeCl3環(huán)化并進(jìn)行酸水解(以裂解草酸酯殘基)得到環(huán)狀亞胺7和8(參見(jiàn)Larsen，R.D.；Reamer，R.A.；Corley，E.G.；Dayis，P.；Grabowski，E.J.J.；Reider，P.J.；Shinkai，I.，有機(jī)化學(xué)雜志，1991，56，6034)。在各種情況下僅得到單一的區(qū)域異構(gòu)體。將亞胺首先用硼氫化鈉還原成相應(yīng)的胺后，氧化成硝酮9和10可以更容易更有效地進(jìn)行?？梢岳斫猓谝韵路磻?yīng)方案、實(shí)施例和文章中，鎢酸鈉(Na2WO4)催化劑是二水合物的形式，即Na2WO4.2H2O。
反應(yīng)方案1 圖2所示的化合物均可以通過(guò)該甲酰胺路線或其改變形式進(jìn)行制備。
圖2 螺吡喃類似物11和12的合成過(guò)程與萘化合物類似，所不同的是中間體叔醇17和18是通過(guò)芐基或苯乙基鹵化鎂與所需吡喃酮加成得到(反應(yīng)方案2)。
反應(yīng)方案2 酚類似物15的合成如反應(yīng)方案4所示。叔醇29很容易在準(zhǔn)備Ritter反應(yīng)時(shí)得到。經(jīng)溴化將對(duì)位保護(hù)后，通過(guò)雙Mannich反應(yīng)用胺和甲醛水溶液在酚羥基的鄰位引入潛在的甲基。
反應(yīng)方案3
將32用對(duì)甲氧芐基硫醇處理以良好的收率得到二(硫醚)37(參見(jiàn)Popplesdorf，F(xiàn).；Holt，S.，化學(xué)會(huì)志，1954，1124)。然后將37用阮內(nèi)鎳(RaNi)處理得到33。
33與NaCN的Ritter反應(yīng)直接得到環(huán)化的亞胺38(反應(yīng)方案4)。然后按照反應(yīng)方案4所示將亞胺38轉(zhuǎn)變?yōu)?5。
反應(yīng)方案3和4所示的化學(xué)方法可用于制備相應(yīng)的7元環(huán)類似物16。在該情況下，所需的酯中間體42按照反應(yīng)方案5所示從可購(gòu)買到的酸40合成。
反應(yīng)方案5
異氰酸酯路線異氰酸酯路線如反應(yīng)方案6所示。用氯甲基噻吩將異丁酸乙酯烷基化，隨后水解酯44得到Curt ius重排底物45。異氰酸酯46溫和地形成，并在用水后處理后可以方便地分離。當(dāng)用無(wú)水H3PO4在熱二氯乙烷(DCE)中處理時(shí)，化合物46很容易環(huán)化。Umezawa，B.；Hoshino，O.；Sawaki，S.；Mori，K.Chem.Pharm.Bull.1980，28，1003。用硼烷將形成的內(nèi)酰胺47還原成相應(yīng)的胺，將其進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)氧化反應(yīng)得到48。
反應(yīng)方案6 使用類似的途徑制備呋喃類似物53。在該情況下，BF3乙醚配合物被證實(shí)是較好的環(huán)化催化劑。
異氰酸酯56易于以高的總收率大規(guī)模制備，如下所示(反應(yīng)方案7)。
反應(yīng)方案7
將56用FeCl3在DCE中處理時(shí)以55％的收率得到57和區(qū)域異構(gòu)的內(nèi)酰胺61(7-甲氧基-3，3-二甲基-2，3-二氫異吲哚-1-酮)[未列出](3∶1比例)。
可以如合成主要異構(gòu)體57所示(反應(yīng)方案7)來(lái)對(duì)各種內(nèi)酰胺57(61未列出)進(jìn)行合成。在類似的方法中，化合物4-甲氧基-1，1-二甲基-1H-異吲哚N-氧化物(參見(jiàn)實(shí)施例14)可以從內(nèi)酰胺61開(kāi)始制備。
反應(yīng)方案8 為了制備不帶甲氧基的5元環(huán)狀硝酮65，將內(nèi)酰胺57進(jìn)行反應(yīng)方案8中所示的反應(yīng)過(guò)程。酚的脫氧化，Musliner，W.J.；Gates，Jr.J.W.；美國(guó)化學(xué)會(huì)志，1966，88，4271。部分中間體羥基內(nèi)酰胺可以轉(zhuǎn)變成64。
當(dāng)以高劑量對(duì)大鼠給藥時(shí)，化合物A(參見(jiàn)圖1，見(jiàn)前)產(chǎn)生鎮(zhèn)靜作用。事實(shí)上，從一開(kāi)始，主要目標(biāo)就是尋找沒(méi)有這種在化合物A中觀察到的副作用的強(qiáng)效抗氧劑。就此而言，以下觀察結(jié)果非常有意義。鎮(zhèn)靜作用迅速達(dá)頂峰并下降，而體內(nèi)活性則持續(xù)相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間。鎮(zhèn)靜用的下降與A的主要代謝物的出現(xiàn)相一致，由此推測(cè)代謝物保留了母體化合物的抗氧劑活性而不會(huì)產(chǎn)生鎮(zhèn)靜作用。為了研究這種可能性，從體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中分離出主要的代謝物C和次要的、可能是第二種代謝物(代謝物2)，通過(guò)HPLC純化并指定為如下結(jié)構(gòu)(圖3)。
圖3 化合物C在體內(nèi)遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于代謝物2，并且保留的硝酮的功能，因此更有可能成為推定的無(wú)鎮(zhèn)靜作用的抗氧劑。
目的分子C從可購(gòu)買到的原料2-硝基丙烷和鄰苯二甲醛以三步制備(反應(yīng)方案9)。這兩種底物在新制備的甲醇鈉的甲醇溶液存在下反應(yīng)，然后酸化，色譜分離后以70％的收率得到環(huán)狀縮醛71(約1∶1順式和反式異構(gòu)體的混合物)。Marquard，F(xiàn)-H.；Edwards，S.有機(jī)化學(xué)雜志，1972，37，1861?；蛘?，可將粗產(chǎn)物(定量粗品收率，86％的氣相色譜(GC)純度)不經(jīng)純化用于下一步(見(jiàn)下)。
根據(jù)文獻(xiàn)中的方法，將硝基縮醛71用鋁汞齊在乙醚/水中還原成羥胺72。Calder，A；Forrester，A.R.；Hepburn，S.P.Org.Syn.Coll.第6卷，1988，803。無(wú)論中間體硝基縮醛71是否純化，從鄰苯二甲醛得到純凈72的收率均為約45％。
最后，將羥胺基縮醛72用HCl水溶液在THF中處理迅速得到純凈的C?？梢杂铆h(huán)己烷/乙酸乙酯或己烷/二氯甲烷結(jié)晶1次將粗產(chǎn)物純化至結(jié)構(gòu)均一，以67％的產(chǎn)率得到C。該反應(yīng)的產(chǎn)率受到產(chǎn)物相對(duì)高的水溶性的限制。
最后，制備了數(shù)種C的衍生物和類似物。特別令人感興趣的是酮類似物，因?yàn)檫@些化合物的極性比醇小，有吸電子基團(tuán)與硝酮共軛并且沒(méi)有手性中心。很容易將C轉(zhuǎn)變?yōu)橥?7和乙酸酯76衍生物(反應(yīng)方案10)。
反應(yīng)方案10 C的螺環(huán)己基和螺環(huán)戊基類似物和MDL 77(圖4)以完全相同的方式制備，但分別用硝基環(huán)己烷和硝基環(huán)戊烷代替硝基丙烷作為原料。
圖4
某些本發(fā)明的化合物含有不對(duì)稱中心，從而可以存在光學(xué)異構(gòu)體。本申請(qǐng)中由關(guān)圖3所示任一種化合物的引用均包括任何一種特定的光學(xué)異構(gòu)體或光學(xué)異構(gòu)體的混合物。可通過(guò)本領(lǐng)域已知的技術(shù)，例如在手性固定相上進(jìn)行色譜或用本領(lǐng)域已知的立體選擇性酯酶進(jìn)行酶水解來(lái)分離和回收特定的光學(xué)異構(gòu)體。
化合物評(píng)估細(xì)胞大分子，包括脂質(zhì)和DNA的氧化作用與許多疾病的病因?qū)W有關(guān)。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中，認(rèn)為中風(fēng)和神經(jīng)外傷均會(huì)引發(fā)最終導(dǎo)致神經(jīng)元細(xì)胞死亡的氧化過(guò)程的后遺癥(Kontos，H.A.(1989)Chem.-Biol.Interactions72，229-255)。腦神經(jīng)膜含有高百分比的多不飽和脂肪酸以及豐富的鐵和抗壞血酸?？偟膩?lái)說(shuō)，這些特性產(chǎn)生了極易受氧自由基形成和脂質(zhì)過(guò)氧化作用攻擊的神經(jīng)組織。鐵和抗壞血酸可參與自由基如羥自由基(·OH)的形成，所述自由基能夠引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化。細(xì)胞對(duì)缺血性和缺氧性環(huán)境的反應(yīng)加速了氧自由基的產(chǎn)生，所述環(huán)境是由于動(dòng)脈阻塞或創(chuàng)傷性損傷所引起的。例如，由于缺氧而引起的異常線粒體電子轉(zhuǎn)運(yùn)會(huì)導(dǎo)致還原等價(jià)物的積累，所述還原等價(jià)物在再灌時(shí)可將分子氧部分還原產(chǎn)生超氧化物(O2·-)和過(guò)氧化氫(H2O2)。兒茶酚胺積累、黃嘌呤脫氫酶轉(zhuǎn)變成其氧化酶形式、花生四烯酸從磷脂中釋放以及缺血組織對(duì)中性白細(xì)胞的吸引是所報(bào)道的其它有利于高度氧化環(huán)境的改變。
全身性和局部性的局部缺血的動(dòng)物模型提供了氧自由基產(chǎn)生和脂質(zhì)過(guò)氧化作用出現(xiàn)的證據(jù)。在經(jīng)腦缺血再灌的大鼠中已經(jīng)觀察到脂質(zhì)衍生的共軛二烯的增加和保護(hù)性抗氧劑α-生育酚(維生素E)的減少。Hall，E.D.和Braughler，J.M.(1989)J.Free Rad.Biol.Med.6，303-313。與此相一致的是，來(lái)自維生素E缺陷型動(dòng)物的腦組織對(duì)局部缺血誘發(fā)的損傷更敏感，而補(bǔ)充維生素E有一定的保護(hù)作用。Yoshida，S.，Busto，R.，Watson，B.D.，Santiso，M.和Ginsberg，M.(1985)J.Neurochem.44，1593-1601。在經(jīng)全身性局部缺血和再灌的沙鼠呼出的氣息中發(fā)現(xiàn)了從脂質(zhì)過(guò)氧化作用產(chǎn)生的戊烷，這也支持在這些條件下會(huì)發(fā)生神經(jīng)元脂質(zhì)氧化的論點(diǎn)。Mickel，H.S.，Vaishnav，S.Y.N.，Kempski，O.，von Lubitz，D.，Weiss，J.F.，and Feuerstein，G.(1987)Stroke18，426-430。
CNS局部缺血-再灌后的氧化事件不僅限于脂質(zhì)。在沙鼠中，全身性的局部缺血導(dǎo)致氧化作用誘導(dǎo)的蛋白質(zhì)羰基形成并使谷氨酰胺合成酶(一種對(duì)氧化失活敏感的酶)的活性喪失。Oliver，C.N.，Starke-Reed，P.E.，Stadtman，E.R.，Liu，G.J.，Carney，J.M.，and Floyd，R.A.(1990)Proc.Natl.Acad.Sci USA87，5144-5147。
將腦皮質(zhì)切片進(jìn)行缺氧和再氧合處理或?qū)㈣F注射到CNS組織中會(huì)導(dǎo)致Na+、K+-ATP酶活性的丟失，這可以直接反映蛋白質(zhì)的氧化作用和/或相關(guān)膜雙層的斷裂。Taylor，M.D.，Mellert，T.K.，Parmentier，J.L.，andEddy，L.J.(1985)Brain Res.346，268-273；Anderson，D.K.and Means，E.D.(1983)Neurochem.Pathol.1，249-264。
盡管有關(guān)氧自由基形成是神經(jīng)元損傷的之原因的證據(jù)仍大部分是似是而非的，已經(jīng)對(duì)多種抗氧劑療法進(jìn)行了試驗(yàn)來(lái)測(cè)試其抑制細(xì)胞成活率的損失或使該損失最小的能力。如上所述，已證明預(yù)先施用維生素E可提供有限的保護(hù)作用。用各種形式的超氧化物歧化酶(SOD)得到了有限的成功，而過(guò)度表達(dá)SOD的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物對(duì)局部缺血誘發(fā)的損傷有更強(qiáng)的抗性。Kinouchi，H.，Epstein，C.J.，Mizui，T.，Carlson，E.，Chen，S.F.，andChan，P.H.(1991)Proc.Natl.Acad.Sci.USA88，11158-11162。最近，研究人員已經(jīng)報(bào)道在沙鼠模型中，硝酮自旋捕捉劑α-苯基-四丁基-硝酮(PBN)可顯著消除因中風(fēng)誘發(fā)的神經(jīng)元細(xì)胞損失和神經(jīng)缺陷。Phillis，J.W.，and Clough-Helfman，C.(1990)藥物科學(xué)研究18，403-404.Yue，T.-L.，Gu，J.-L.，Lysko，P.G.，Cheng，H.-Y.，Barone，F(xiàn).C.，andFeuerstein，G.(1992)腦研究，574，193-197。此外，電子自旋共振(ESR)譜表明在這些動(dòng)物的皮質(zhì)組織中PBN可捕獲由脂質(zhì)衍生的自由基。
硝酮自旋捕捉劑如PBN已經(jīng)使用了許多年，用其來(lái)捕獲短暫存活的活潑自由基如·OH。所生成的氮氧化物是較穩(wěn)定的自由基，可用電子自旋共振譜檢測(cè)到。最近，研究人員已證實(shí)硝酮如PBN可抑制脂質(zhì)(包括低密度脂蛋白)和蛋白質(zhì)如谷氨酸合成酶的氧化。Thomas，C.E.，Ku，G.，andKalyanaraman，B.(1994)脂質(zhì)研究雜志，35，610-619；Thomas，C.E.，Ohlweiler，D.F.，and Kalyanaraman，B.(1994)生物化學(xué)雜志，269，28055-28061(抗氧劑在治療動(dòng)脈粥樣硬化中的應(yīng)用)；Carney，J.M.，Starke-Reed，P.E.，Oliver，C.N.，Landrum，R.W.，Cheng，M.S.，Wu，J.F.，and Floyd，R.A.(1991)Proc.Natl.Acad.Sci.USA88，3633-3636。
通常認(rèn)為與氧自由基有關(guān)的另一種病理學(xué)疾病是膿毒性休克，其特征是對(duì)嚴(yán)重感染的全身性反應(yīng)。推測(cè)炎性細(xì)胞如白細(xì)胞的激活會(huì)導(dǎo)致O2·-和H2O2的形成。的確，在內(nèi)毒性休克的動(dòng)物模型和患有膿毒性休克的人中，已經(jīng)報(bào)道了有關(guān)自由基和自由基介導(dǎo)的組織損傷的證據(jù)。Takeda，K.，Shimada，Y.，Okada，T.，Amono，M.，Sakai，T.，and Yoshiya，I.(1986)Crit.Care Med.14，719-723。Novelli，G.P.，Angiolini，P.，Livi，P.，and Paternos tro，E.(1989)Resuscitation18，195-205。Biasi，F(xiàn).，Chiarpotto，E.，Lanfranco，G.，Capra，A.，Zummo，U.，Chiappino，I.，Scavazza，A.，Albano，E.，and Poli，G.(1994)Free Rad.Biol.Med.17，225-233。令人感興趣的是，已證實(shí)PBN可減少與大鼠死亡有關(guān)的內(nèi)毒素。Hamburger，S.A.，and McCay P.B.(1989)Circ.Shock29，329-334。因此，使用自旋捕捉劑如PBN可為治療各種疾病提供新的治療方法。參加“抗氧劑療法的前景”，藥物49(3)1995，345-361。另外，硝酮捕獲和穩(wěn)定自由基的能力可為鑒定體內(nèi)產(chǎn)生的自由基提供潛在的方法。出于這些原因，我們合成并評(píng)估了具有體外自由基捕獲活性的一系列新的硝酮自旋捕捉劑。
材料和方法如上所述制備環(huán)狀硝酮。
化學(xué)物質(zhì)2-脫氧-D-核糖，F(xiàn)eCl2、FeCl3、EDTA二鈉、30％H2O2、抗壞血酸、硫代巴比土酸(TBA)、100％三氯乙酸(TCA)溶液、丁基化的羥甲苯(BHT)、NADPH、對(duì)亞硝基二甲基苯胺(p-NDA)、還原的谷胱甘肽(GSH)、二亞乙基三氨基五乙酸酐(DETAPAC)、黃嘌呤、黃嘌呤氧化酶(來(lái)自酪乳)、N-甲基-D-葡糖胺、HEPES、3-(4，5-二甲基三唑-2基)-2，5-二苯基四唑溴化物(MTT)、Cu，Zn-超氧化物歧化酶(SOD)和1，1，3，3，-四乙氧丙烷均購(gòu)自Sigma化學(xué)公司。大豆磷脂酰膽堿是Avanti Polar Lipids的產(chǎn)品，而PBN和β-環(huán)糊精是從Aldrich購(gòu)買的。細(xì)胞培養(yǎng)補(bǔ)充物是從Gibco或Sigma得到的。所有其它化學(xué)物質(zhì)均是頂級(jí)產(chǎn)品。
通過(guò)1)檢測(cè)硝酮抑制大豆磷脂酰膽堿脂質(zhì)體氧化的能力；2)用對(duì)亞硝基二甲基苯胺或2-脫氧核糖對(duì)捕獲·OH進(jìn)行評(píng)估和3)·OH和O2·-的ESR自旋捕捉來(lái)評(píng)估環(huán)狀硝酮在體外捕獲自由基的情況。
1.對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化的抑制為了確定抑制脂質(zhì)過(guò)氧化的能力，通過(guò)注射乙醇從大豆磷胇酰膽堿制備脂質(zhì)體。將磷脂酰膽堿的等分試樣在N2下于小玻璃瓶中干燥。以10ml/ml脂質(zhì)體的量將脂質(zhì)再溶于乙醇。通常，每管制備體積為8ml的脂質(zhì)體，然后將所有制備物合并以得到用于檢測(cè)的均勻混合物。將含脂質(zhì)的乙醇吸入Hamilton注射器，然后在37℃注射到適宜體積的50mM NaCl/10mM Tris，pH7.0中混合以達(dá)到0.563mM的終脂質(zhì)濃度。
將脂質(zhì)體在37℃加到Dubnoff代謝振蕩器上的25ml燒杯中。向脂質(zhì)體中加入試驗(yàn)化合物(在乙醇或緩沖液中)、組氨酸-FeCl3(250∶50mM最終)，F(xiàn)eCl2(最終為50mM，用經(jīng)N2排空的水制備)以及足夠的緩沖液以得到0.5mM的最終脂質(zhì)濃度。通過(guò)加入Fe2+來(lái)引發(fā)氧化作用，并在空氣中振蕩完成。在0，2，4，6，8，10，12和15分鐘各取1ml樣品，加到2ml0.67％硫代巴比土酸∶10％三氯乙酸(2∶1)的0.25 N HCl溶液中，其中含有0.05ml2％BHT以終止氧化作用。Thomas，C.E.，McLean，L.R.，Parker，R.A.，and Ohlweiler，D.F.(1992)Lipids27，543-550。
將樣品在13×100mm硼硅酸鹽玻璃試管中于100℃加熱20分鐘，用大理石蓋住試管以防止蒸發(fā)。冷卻后，將試管以3000rpm離心10分鐘，然后在532nm-580nm讀出所得上清液的吸收值。通過(guò)與酸催化水解1，1，3，3，-四乙氧丙烷而得到的丙二醛等價(jià)物的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較來(lái)確定硫代巴比土酸活潑物質(zhì)(TBARS)的量。用計(jì)算機(jī)程序GraphPad INPLOT 4，用15分時(shí)間點(diǎn)確定IC50。該程序應(yīng)用在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)上對(duì)S形曲線的非線性回歸。這些結(jié)果列于表1中。
2.·OH捕捉劑的評(píng)估
A.p-NDA脫色的抑制作用通過(guò)各種試驗(yàn)評(píng)估環(huán)狀硝酮的·OH捕獲活性。一級(jí)試驗(yàn)依賴于所述化合物抑制p-NDA的·OH-依賴性漂白作用的能力。Bors，W.，Michel，C.，and Saran，M.(1979)生物化學(xué)雜志95，621-627。用50mM NaCl，pH7.0制備1mM的p-NDA。用Fenton化學(xué)法(Fe2+/H2O2)產(chǎn)生羥自由基。將FeCl2溶解在N2排空的雙蒸水中，達(dá)到2.5mM的終濃度。用緩沖液從30％儲(chǔ)備液(8.8M)制備1.25mM的H2O2。根據(jù)溶解度將化合物以1M或5M的的濃度溶解在緩沖液或乙醇中。
玻璃杯中的檢測(cè)混合物含有0.02ml H2O2、0.02ml試驗(yàn)化合物、0.10ml p-NDA和50mM NaCl，pH7.0的溶液，終體積為0.98ml。通過(guò)加入0.02ml Fe2+引發(fā)氧化作用，并通過(guò)測(cè)定在440nm吸收值的減少100秒來(lái)監(jiān)測(cè)p-NDA的脫色作用。為了得到濃度曲線，制備試驗(yàn)化合物的系列稀釋液以便將0.02ml恒定的體積加入到反應(yīng)混合物中。乙醇本身是·OH捕捉劑，因此含等體積乙醇的對(duì)照用于需要該載體的任何試驗(yàn)化合物。用GraphPadINPLOT 4確定硝酮的IC50值，該值表示抑制50％p-NDA脫色作用所需的自旋捕捉劑的量。
B.2-脫氧核糖降解的抑制作用在該試驗(yàn)中，仍用Fenton′s反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基。其隨后與2-脫氧核糖的反應(yīng)使該糖分子斷裂成可與TBA反應(yīng)的產(chǎn)物，該產(chǎn)物可用分光光度計(jì)測(cè)量。用抗壞血酸將該試驗(yàn)中所用的Fe3+還原成Fe2+，用EDTA作為鐵螯合劑以防止由鐵引起的直接對(duì)脫氧核糖分子的點(diǎn)特異性損傷。
儲(chǔ)備液在保溫試驗(yàn)中所用的緩沖液是含40mM NaCl，pH7.4的改性30mMSorenson′s緩沖液。用19％30mM Na2HPO4和81％30mM NaH2PO4制備，加入NaCl達(dá)到40mM的濃度。
如下所述制備儲(chǔ)備液。
1)100mM 2-脫氧核糖＝13.41mg/ml緩沖液2)100mM H2O2＝50μl 30％H2O2溶液+4.4ml緩沖液
3)10mM EDTA/10mM Fe3+＝3.72mgEDTA二鈉+2.70mg FeCl3·6H2O/ml緩沖液4)10mM抗壞血酸＝1.761mg/ml緩沖液5)根據(jù)其溶解度，用緩沖液將待檢測(cè)的自由基清除劑制備為5-100mM的儲(chǔ)備液。不能使用有機(jī)溶劑如甲醇或乙醇，因?yàn)榧词股俚?ml的溶劑本身也會(huì)基本上抑制2-脫氧核糖的降解。
6)0.378％TBA/15.2％TCA/0.014％BHTa)16.7％TCA＝20ml 100％TCA溶液+100ml 0.125 N HClb)0.416％TBA＝0.500g TBA+120ml 16.7％TCA溶液(加熱的)c)100ml TBA/TCA溶液+10ml 0.15％BHT乙醇溶液7)1.0mM丙二醛(MDA)＝200μl 4.4mM MDA+0.880ml 10％TCAa)4.4mM MDA＝10μl 4.4M 1，1，3，3-四羥基丙烷+9.99ml 10％TCA標(biāo)準(zhǔn)物如下所述制備MDA標(biāo)準(zhǔn)物1)0.0nmoles/ml＝1.00ml緩沖液2)10nmoles/ml＝10μl 1.0ml MDA+0.990ml緩沖液3)25nmoles/ml＝25μl 1.0ml MDA+0.975ml緩沖液4)50nmoles/ml＝50μl 1.0ml MDA+0.950ml緩沖液保溫保溫用20ml燒杯在37℃振蕩水浴中并暴露于空氣下進(jìn)行。以所列順序加入下列組分1)緩沖液至5.0ml的終體積(對(duì)照為4.71ml)；2)5μl到4.5ml所需自由基清除劑(終濃度為5μM-4mM)；3)140μl 100mM 2-脫氧核糖(2.8mM)；4)50μl 100mM H2O2(1.0mM)；5)50μl 10mM EDTA/10mM Fe3+(100mM)；6)50μl 10mM抗壞血酸(100mM)。
在加入抗壞血酸后0和15分鐘，將1.0ml的保溫培養(yǎng)液移到含2.0mlTBA/TCA/BHT溶液的試管中。同時(shí)將標(biāo)準(zhǔn)物加到含2.0ml TBA/TCA/BHT的試管中。旋渦振蕩后，在加熱裝置中，將覆蓋的樣品和標(biāo)準(zhǔn)物在100℃加熱20分鐘。冷卻樣品并以1500xg離心10分鐘。讀出A532-A580的吸收值。用GraphPad INPLOT計(jì)算抑制50％TBARS形成的自由基清除劑濃度(IC50)。
羥自由基與自由基清除劑反應(yīng)的速率常數(shù)(ks)的測(cè)定當(dāng)將羥自由基清除劑加到該反應(yīng)液中時(shí)，在清除劑和脫氧核糖分子之間發(fā)生簡(jiǎn)單的競(jìng)爭(zhēng)。根據(jù)Ching T.，Halnen，G.R.M.M.和Bast，A.(1993)Chem-Biol Interactions 86，119-127的方法，可用下列等式計(jì)算清除劑與羥自由基反應(yīng)的速率常數(shù)1/A-1/A*(1+ks[S]/kDR[D])其中A＝存在自由基清除劑時(shí)的吸收值[S]＝自由基清除劑的濃度A*＝不存在自由基清除劑時(shí)的吸收值ks＝清除劑與羥自由基反應(yīng)的速率常數(shù)kDR＝2-脫氧核糖與羥自由基反應(yīng)的速率常數(shù)＝3.1×109M-1秒-1[D]＝2-脫氧核糖的濃度＝2.8mM如果用1/A對(duì)[S]作圖，則斜率＝ks/KDR[D]A*ks＝斜率×KDR×[D]×A*3.對(duì)小腦粒細(xì)胞抗氧化損傷的保護(hù)作用檢測(cè)環(huán)狀硝酮保護(hù)小腦粒細(xì)胞初級(jí)培養(yǎng)物抗氧化損傷的保護(hù)能力，所述損傷是用Fe2+處理誘發(fā)的。如上所述從8日齡的大鼠制備小腦粒細(xì)胞培養(yǎng)物。Levi G.，Aloisi，F(xiàn).，Ciotti，M.T.，Thangnipon，W.，Kingsbury，A.，and Balazs，R.(1989)InA Dissection and Tissue Culture Manualof the Nervous System(Shahar，A.，da Vellis，J.，Vernadakis，A.，andHaber，B.編輯)Alan R.Liss，Inc.New York，NY，211-214頁(yè)。簡(jiǎn)言之，取出8-10個(gè)小腦，放在用BSA和MgSO4補(bǔ)充的Krebs-Ringer碳酸氫鹽培養(yǎng)基中。將小腦細(xì)碎，用胰蛋白酶/Krebs-Ringer溶液消化。通過(guò)用含DNase、MgSO4和胰蛋白酶抑制劑的Krebs-Ringer研磨來(lái)分散細(xì)胞，然后以1×106細(xì)胞/孔鋪在聚-1-賴氨酸包被的、含MEM/10％胎牛血清/KCl/谷氨酰胺/慶大霉素的平板上。24小時(shí)時(shí)更換培養(yǎng)基并加入阿糖胞苷。體外用8-10天的細(xì)胞完成試驗(yàn)。
為了進(jìn)行氧化研究，去掉培養(yǎng)基，用不含Na+并同時(shí)除去了葡萄糖的Locke′s溶液(154.6mM N-甲基-D-葡糖胺、5.6mM KCl、2.3mM CaCl2、1mM MgCl2、3.6mM NaHCO3和5mM HEPES，pH 7.3)代替。將硝酮加入到Locke′s溶液或20％β-環(huán)糊精中，用30分鐘的時(shí)間使其摻入細(xì)胞。此時(shí)，加入20μl 5mM氯化鐵儲(chǔ)備液，達(dá)到100μM的終濃度。45分鐘后，去掉培養(yǎng)基并加到含25μl 2％BHT的1.5ml TBA/TCA(2∶1)中，如上所述檢測(cè)TBARS。從用鐵處理的細(xì)胞的吸收值中減去對(duì)照細(xì)胞(無(wú)鐵)的吸收值，取該值作為分母以確定抑制50％氧化作用所需的硝酮濃度。
將新鮮MEM培養(yǎng)基與100μlMTT一起加到細(xì)胞中。4小時(shí)后，加入1ml冷的異丙醇/0.04N HCl，刮細(xì)胞，充分混合并轉(zhuǎn)移到13×100mm玻璃試管中。測(cè)定線粒體還原MTT得到的吸收值(570nm減630nm)并將其作為存活率的評(píng)估值。通過(guò)與未加鐵的細(xì)胞的吸收值進(jìn)行比較來(lái)確定細(xì)胞死亡的百分率。取鐵處理和對(duì)照細(xì)胞之間的差為100％，防止MTT還原能力(表II中表示為存活率)損失50％的硝酮濃度為IC50。
表I中列出了制備的環(huán)狀硝酮及其體外抑制脂質(zhì)氧化和羥自由基捕獲的IC50。還包括MDL 101002作為比較。
表I
表II抑制Fe2+誘發(fā)的小腦粒細(xì)胞損傷的IC50值化合物 TBARS IC50(μM)存活率
可通過(guò)各種途徑施用本發(fā)明的化合物。這些化合物口服給藥是有效的。所述化合物還可以進(jìn)行胃腸外(即皮下、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、腹腔內(nèi)或鞘內(nèi))給藥。
可用本領(lǐng)域已知的技術(shù)制備藥物組合物。通常將保護(hù)量的化合物與可藥用載體混合。
對(duì)于口服給藥，可將化合物配制成固體或液體制劑如膠囊劑、丸劑、片劑、錠劑、melts、粉末劑、懸浮劑或乳劑。固體單位劑型可以是含例如表面活性劑、潤(rùn)滑劑和惰性填充劑如乳糖、蔗糖和玉米淀粉的普通明膠型膠囊或是緩釋制劑。
在另一實(shí)施方案中，可將本發(fā)明化合物用常規(guī)的片劑基質(zhì)如乳糖、蔗糖和玉米淀粉以及粘合劑如阿拉伯膠、玉米淀粉或明膠，崩解劑如土豆淀粉或藻酸以及潤(rùn)滑劑如硬脂酸或硬脂酸鎂制成片劑。通過(guò)將活性成分溶解在含水或不含水的可藥用溶劑中來(lái)制備液體制劑，所述溶劑還可含有懸浮劑、甜味劑、矯味劑和本領(lǐng)域已知的防腐劑。
對(duì)于胃腸外給藥，可將化合物溶解在生理學(xué)可接受的藥用載體中作為溶液或懸浮劑施用。適宜藥用載體的說(shuō)明性實(shí)例是水、鹽水、右旋糖溶液、果糖溶液、乙醇、或動(dòng)物油、植物油或合成的油。藥用載體還可含有本領(lǐng)域已知的防腐劑、緩沖液等。當(dāng)化合物經(jīng)鞘內(nèi)給藥時(shí)，還可將其溶解在本領(lǐng)域已知的腦脊液中。
還可局部施用本發(fā)明的化合物。這可通過(guò)簡(jiǎn)單地制備待施用化合物的溶液來(lái)完成，優(yōu)選使用已知可促進(jìn)透皮吸收的溶劑如乙醇或二甲亞砜(DMSO)并加或不加其它賦形劑。優(yōu)選通過(guò)藥物儲(chǔ)庫(kù)和多孔膜型的貼劑或固體基質(zhì)貼劑來(lái)完成局部給藥。
在美國(guó)專利3742951、3797494、3996934和4031894中描述了一些適宜的經(jīng)皮給藥裝置。這些裝置通常含有一個(gè)背層(該裝置的外表面)、一個(gè)可透過(guò)活性成分的粘合層(另一表面)和至少一個(gè)位于兩表面之間的含有活性成分的藥物儲(chǔ)庫(kù)。或者，可將活性成分包含在大量遍布通透性粘合層的微膠囊中。在這兩種情況中，活性成分通過(guò)膜從藥物儲(chǔ)庫(kù)或微膠囊連續(xù)釋放到與使用者的皮膚或粘膜接觸的可透過(guò)活性成分的粘合層中。如果活性成分是通過(guò)皮膚吸收的，可以向使用者給予受控的、預(yù)定量的活性成分。在微膠囊的情況中，包封劑還可以起到膜的作用。
在另一經(jīng)皮施用本發(fā)明化合物的裝置中，所述藥物活性化合物包含在一種基質(zhì)中，化合物從該基質(zhì)中以所需的平緩、恒定且受控的速率釋放出來(lái)。所述基質(zhì)是可通透的，以便使所述化合物通過(guò)擴(kuò)散或微孔流釋放。釋放速率是可控的。在美國(guó)專利3921636中描述了不需要膜的系統(tǒng)。在這些系統(tǒng)中至少有兩種可能的釋放類型。當(dāng)基質(zhì)不是多孔的時(shí)，通過(guò)擴(kuò)散進(jìn)行釋放。藥物有效的化合物溶解在基質(zhì)中并通過(guò)基質(zhì)擴(kuò)散。當(dāng)藥物有效化合物通過(guò)液相在基質(zhì)孔中轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)，則通過(guò)微孔流釋放。
根據(jù)各種因素如體重、年齡、性別、待治療的疾病等，可以0.01mg/kg-500mg/kg的量施用本發(fā)明化合物。
盡管已結(jié)合具體實(shí)施方案描述了本發(fā)明，但應(yīng)理解，能夠?qū)Ρ景l(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的修飾，而且本申請(qǐng)覆蓋任何改變、用途或根據(jù)本發(fā)明原理所作的修改，并包括根據(jù)本發(fā)明所應(yīng)用領(lǐng)域內(nèi)的已知或常規(guī)實(shí)踐而從本發(fā)明公開(kāi)所引申的改變。
如在本申請(qǐng)中所用的a)術(shù)語(yǔ)“患者”指恒溫動(dòng)物如豚鼠、小鼠、大鼠、沙鼠、貓、兔、狗、猴、猩猩和人；b)術(shù)語(yǔ)“治療”指化合物減輕、緩解或減慢患者疾病或與疾病有關(guān)的任何組織損傷的發(fā)展的能力；c)術(shù)語(yǔ)“神經(jīng)變性”指以特定疾病的特征方式發(fā)生并導(dǎo)致腦或其它神經(jīng)元損傷的神經(jīng)細(xì)胞種群的進(jìn)行性死亡和消失。
d)術(shù)語(yǔ)“休克”指循環(huán)性休克、膿毒性休克、毒性休克或任何其它氧衍生的自由基通過(guò)循環(huán)系統(tǒng)而使重要器官血液灌注不足的疾病。
e)術(shù)語(yǔ)“氧自由基”是指在任何組織損傷的討論中，以碳為中心的自由基、氧自由基或含不成對(duì)電子的任何生物分子。
還可將本發(fā)明化合物與任何惰性載體混合并按照本領(lǐng)域已知的，用于實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)以確定患者血清、尿等中的化合物濃度。通過(guò)與分子氧形成加合物，還可將該化合物用作研究工具。
實(shí)驗(yàn)一般方法若無(wú)其它說(shuō)明，試劑及原料均通過(guò)一般的商業(yè)途徑得到并直接使用。四氫呋喃(THF)在臨用前從加有二苯酮羰基鈉的四氫呋喃中蒸出。其它反應(yīng)溶劑，以及所有的色譜、重結(jié)晶和后處理的溶劑均為色譜純的，并將購(gòu)得的試劑直接使用。所述“在氮?dú)庀隆边M(jìn)行的反應(yīng)是在干燥氮?dú)獾姆諊略诮?jīng)烘箱干燥的燒瓶中進(jìn)行的。
薄層色譜(TLC)在玻璃硅膠60F-254板(EM)上進(jìn)行，涂層厚度為0.25mm。硅膠板用所述的溶劑系統(tǒng)(v/v)洗脫，并通過(guò)下述的一種或多種方法觀察紫外線，I2蒸汽，或用磷鉬酸、Ce(SO4)2、KMnO4或FeCl3溶液染色，然后加熱(空氣加熱槍)?！氨由V，實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)”，Egon Stahl，Springer-Verlag Berlin Heildeberg-New York，1969。氣相色譜(GC)用裝有HP 3392A積分儀的HP 5890 II系列氣相色譜儀上進(jìn)行。分離在購(gòu)自J&W Scientific的15m×0.32mm ID熔融石英毛細(xì)管柱(DB-5，0.25mm膜)上進(jìn)行。
若無(wú)其它說(shuō)明，“真空濃縮”是指在Buchi裝置上于約50℃和15-20Torr(水抽氣泵)下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)?？焖偕V(FC)用EM Science硅膠60(40-63μm)按照文獻(xiàn)中的方法進(jìn)行。Still，W.C.；Kahn，M.；Mitra，A.有機(jī)化學(xué)雜志，1978，43，2923。
熔點(diǎn)在Thomas Hoover unimelt毛細(xì)管熔點(diǎn)儀上測(cè)定。報(bào)道的熔點(diǎn)和沸點(diǎn)未校正。
IR譜用Mattson Galaxy Series 5020紅外分光光度計(jì)上記錄并按照所說(shuō)明的制備樣品，用波數(shù)(cm-1)表示。若無(wú)其它說(shuō)明，1H NMR譜用VarianGemini儀器(300MHz)記錄并用相對(duì)于四甲基硅烷(0.00ppm)或氯仿(7.36ppm)的化學(xué)位移值(δ)以ppm表示。將信號(hào)指定為s(單峰)、d(兩重峰)、t(三重峰)、q(四重峰)、p(五重峰)、m(多重峰)、br(寬峰)等。偶合常數(shù)(J)以Hz報(bào)道。盡可能對(duì)圖譜進(jìn)行一級(jí)分析；多重峰的化學(xué)位移和偶合常數(shù)只能是近似的。若無(wú)其它說(shuō)明，13C NMR譜用Varian Gemini儀器(75MHz)記錄并用相對(duì)于氘代氯仿(77.00ppm)的化學(xué)位移值(δ)以ppm表示。質(zhì)譜(MS)在Finnigan MAT TSQ700型質(zhì)譜儀系統(tǒng)上用電子碰撞或化學(xué)電離的方法測(cè)得，將分子離子用(M)表示。
MeMgBr與酯反應(yīng)的一般方法(方法A)將MeMgBr溶液(2.5當(dāng)量3M的乙醚溶液)和THF(等體積)置于氮?dú)庀隆⑷芤豪鋮s至-78℃，直接加入底物(1當(dāng)量)或底物的THF溶液。移走冷卻浴，將反應(yīng)混合物升至室溫。加入飽和氯化銨溶液除去過(guò)量的MeMgBr，將得到的混合物倒入稀鹽酸中并用乙酸乙酯提取(2次)。將有機(jī)相用飽和氯化鈉溶液(鹽水)洗滌，干燥(硫酸鎂或Na2SO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)。將殘余物根據(jù)說(shuō)明進(jìn)行純化。
Ritter反應(yīng)的一般方法(方法B)將NaCN粉末(1.5-2.5當(dāng)量)在氮?dú)庀轮糜诟稍锏臒恐?，在冰浴中冷卻。加入乙酸(HOAc)，將混合物劇烈攪拌，并同時(shí)通過(guò)滴液漏斗加入預(yù)先制備的濃硫酸和等體積乙酸的混合物(小心，有HCN生成)。然后直接加入底物(1當(dāng)量)或底物在最少量體積的乙酸中的溶液，移走冷卻浴，將混合物在室溫下攪拌直至TLC分析表明反應(yīng)結(jié)束。然后在氮?dú)饬飨率笻CN蒸發(fā)1-2小時(shí)。將殘余物緩慢加入飽和碳酸氫鈉溶液中(劇烈的氣體溢出)，然后將混合物用乙酸乙酯充分提取。將有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并濃縮。將殘余物按照說(shuō)明進(jìn)行純化。
聚酰胺環(huán)化的一般方法(方法C)將聚酰胺(1當(dāng)量)在氮?dú)庀氯苡诙燃淄椴⒃诒≈欣鋮s。通過(guò)注射器加入草酰氯(1.1當(dāng)量)，移走冷卻浴并將混合物在室溫下攪拌1-2小時(shí)。然后將再次冷卻至0℃，一次性加入固體FeCl3(1.2當(dāng)量)。移走冷卻浴，將混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。將得到的反應(yīng)混合物倒入0.5M HCl溶液中并用乙酸乙酯提取(2次)。將有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)。將殘余物加入乙醇中，用催化量的濃硫酸處理并加熱回流至TLC分析表明反應(yīng)完全(約3小時(shí))。將混合物冷卻，倒入飽和碳酸氫鈉溶液中并用乙酸乙酯提取(3次)。將有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)。將殘余物按照說(shuō)明進(jìn)行純化。
還原亞胺的一般方法(方法D)將亞胺(1當(dāng)量)在氮?dú)庀氯苡诩状肌Ｏ蛉芤褐行∨考尤牍腆wNaBH4(1.5當(dāng)量(有氣體溢出并放熱)。將得到的混合物在室溫下加熱1-2小時(shí)，然后小心加入1M HCl溶液中。將水相用乙酸乙酯洗滌(棄去)，加入氫氧化鉀片將其調(diào)至堿性。將釋放出的游離胺提取到乙酸乙酯中(3次)。將有機(jī)相用鹽水洗波，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物按照說(shuō)明進(jìn)行純化。
胺還原成硝酮的一般方法(方法E)將胺(1當(dāng)量)溶于MeOH，隨后用Na2WO4(0.1當(dāng)量)和30％H2O2(3當(dāng)量)處理。于室溫?cái)嚢杷没旌衔?，直至TLC分析表明反應(yīng)完全(約4小時(shí))。把反應(yīng)混合物倒入含Na2S2O3的鹽水中(以破壞過(guò)量過(guò)氧化物)并用EtOAc萃取幾遍(直至用TLC表明水相不含或含很少的產(chǎn)物為止)。干燥有機(jī)相(Na2SO4)，過(guò)濾和蒸發(fā)。粗品按說(shuō)明純化。
異丁酸乙酯烷基化的一般方法(方法F)將(二)三甲基硅烷基氨基鋰(LiN(TMS)2，1M的THF溶液，1.5當(dāng)量)的THF溶液在氮?dú)庀吕鋮s至-78℃并向其中加入異丁酸乙酯(1當(dāng)量)。繼續(xù)在-78℃攪拌1小時(shí)，然后加入1，3-二甲基-3，4，5，6-四氫-2(1H)-吡啶酮(DMPU，2％體積)，隨后加入親電試劑。移走冷卻浴，將反應(yīng)混合物攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物倒入冷的1M HCl中并用乙酸乙酯提取(3次)。將有機(jī)相用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)。將殘余物通過(guò)FC(二氯甲烷)純化。
乙酯水解的一般方法(方法G)將酯(1當(dāng)量)加入氫氧化鉀(2.5當(dāng)量)的10％含水甲醇溶液中，將得到的混合物加熱回流至TLC顯示原料消失。冷卻混合物，大部分MeOH蒸發(fā)，將殘余物用水稀釋并用乙醚提取(2次，棄去)。加入稀鹽酸將水相酸化，然后用乙酸乙酯提取(3次)。將有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)。粗產(chǎn)物不經(jīng)純化直接使用。
Curtius重排的一般方法(方法H)0℃及氮?dú)庀拢螋人?1當(dāng)量)的甲苯溶液中加入三乙胺(0.95當(dāng)量)和二苯基磷酸疊氮化物(0.95當(dāng)量)。將混合物在0℃攪拌30分鐘，然后加熱回流3小時(shí)。將混合物冷卻，用冷的碳酸氫鈉溶液(2次)和鹽水(2次)洗滌，然后干燥(MgSO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)。粗產(chǎn)物不經(jīng)純化直接使用。
還原內(nèi)酰胺的一般方法(方法I)將內(nèi)酰胺(1當(dāng)量)在氮?dú)庀滦⌒募尤隑H3·THF溶液(1M的THF溶液，2.5當(dāng)量)(氣體溢出)。當(dāng)氣體溢出停止后，將混合物加熱回流過(guò)夜。將反應(yīng)混合物冷卻，小心用甲醇(約50％體積)和1M氫氧化鈉溶液處理，然后加熱回流7小時(shí)。將得到的混合物冷卻并用乙酸乙酯提取(2次)。將有機(jī)相用1M HCl提取(2次)，然后加入碳酸氫鈉中和水相。將產(chǎn)物用乙酸乙酯提取(2次)，將有機(jī)相用鹽水洗滌，然后干燥(MgSO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)。得到的胺不經(jīng)純化直接使用。
以下實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明上述反應(yīng)過(guò)程。然而，這些實(shí)施例并不以任何方式構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的限制。
實(shí)施例12，2-二甲基-1，2-二氫苯并[f]異喹啉N-氧化物(9)2-甲基-1-萘-1-基-丙-2-醇(3)將酯1(參見(jiàn)Acton，N.；Berliner，E..美國(guó)化學(xué)會(huì)志，1984，86，3312)(20.0g，100mmol)用MeMgBr根據(jù)一般方法A進(jìn)行處理。蒸除溶劑后得到白色固體狀產(chǎn)物3，mp 47-48℃。該產(chǎn)物無(wú)需進(jìn)一步純化。產(chǎn)率19.4g(97％)1H NMR(CDCl3)8.16(d，1，J＝7.5)，7.85-7.75(m，2)，7.50-7.35(m 4)，3.27(s，2)，1.27(s，6)；13C NMR(CDCl3)134.18，133.96，133.06，129.01，128.60，127.29，125.70，125.42，125.15，125.04，71.64，45.08，29.69；MS(MW＝200.3，CI/CH4，eE＝70eV)m/z 200(M+)，185，184，183，171，167，155，143，142(基峰)，115，89.
N-(1，1-二甲基-2-萘-1-基-乙基)-甲酰胺(5)將醇3(3.00g，15.0mmol)根據(jù)一般方法B進(jìn)行Ritter反應(yīng)。FC(1∶1，己烷/乙酸乙酯)后得到褐色固體狀產(chǎn)物5，mp 79-80℃。產(chǎn)2.76g，81％。以下是約70∶30酰胺旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物的1H NMR譜。將主要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的信號(hào)指定為A，次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的信號(hào)指定為B。1H NMR(CDCl3)8.18(d，0.7，J＝8.5，A)，8.05-8.00(m，1.3)，7.85-7.75(m，2)，7.55-7.33(m，4)，5.90(br d，0.3，J＝9.0，B)，5.25(br s，0.7，A)，3.56(s，1.4，A)，3.29(s，0.6，B)，1.40(s，4.2，A)，1.39(s，1.8，B)；MS(MW＝227.3，EI，eE＝70eV)m/z 227(M+)，209，183，182，167，165，141，139，128，115，89，86(基峰)，76，63，58，42.
2，2-二甲基-1，2-二氫苯并[f]異喹啉(7)將甲酰胺5(2.27g，10.0mmol)根據(jù)一般方法C進(jìn)行環(huán)化。快速色譜(FC)(19∶1，CH2Cl2/MeOH)后得到深棕色固體狀亞胺7(1.61g，77％)。
1H NMR(CDCl3)8.31(s，1)，8.08(d，1，J＝7.8)，7.90-7.75(m，2)，7.60-7.50(m，2)，7.42(d，1，J＝8.1)，3.12(s，2)，1.35(s，6)；13C NMR(CDCl3)157.76，134.78，128.57，126.85，126.34，124.32，124.23，123.79，123.41，54.75，33.69，28.49；MS(MW＝209.3，EI，e＝70eV)m/z209(M+，基峰)，194，181，167，152，139，115，97，82，75，63，41.
2，2-二甲基-1，2，3，4-四氫苯并[f]異喹啉根據(jù)一般方法D將亞胺7(1.61g，7.7mmol)還原得到深色液體狀胺(1.61g，100％)，未對(duì)該產(chǎn)物進(jìn)行鑒定，而將其直接用于下一步反應(yīng)。
2，2-二甲基-1，2-二氫苯并[f]異喹啉N-氧化物(9)將上一步反應(yīng)的粗品胺(1.481g，7.024mmol)根據(jù)一般方法E進(jìn)行氧化，用1∶9二氯甲烷/己烷重結(jié)晶后得到褐色固體，mp155-157℃。產(chǎn)率0.866g(55％)。1H NMR(CDCl3)7.96(d，1，J＝8.3)，7.85-7.75(m，2)，7.81(s，1)，7.55-7.50(m，2)，7.22(d，1，J＝8.5)，3.45(s，2)，1.54(s，6)；13C NMR(CDCl3)133.76，132.95，130.75，128.89，127.80，127.09，126.45，125.72，125.47，123.25，122.55，66.89，38.32，25.42；MS(EI，eE＝70eV)m/z 225(M+，基峰)，210，194，193，165，139，115，89，76，63，41；元素分析C15H15NO(MW＝225.3)分析值C，79.97H，6.71N，6.22。
實(shí)測(cè)值C，78.79H，6.66N，6.22。
實(shí)施例23，3-二甲基-3，4-二氫苯并[h]異喹啉N-氧化物(10)2-甲基-1-萘-2-基-丙-2-醇(4)將酯2(參見(jiàn)Acton，N.；Berliner，E..美國(guó)化學(xué)會(huì)志，1984，86，3312)(7.87g，39.3mmol)用MeMgBr根據(jù)一般方法A進(jìn)行處理。蒸除溶劑后得到白色固體狀產(chǎn)物4，mp 79-80℃。該產(chǎn)物無(wú)需進(jìn)一步純化。產(chǎn)率5.88g(75％)1H NMR(CDCl3)7.80-7.75(m，3)，7.66(s，1)，7.45-7.35(m，3)，2.92(s，2)，1.26(s，6)；13C NMR(CDCl3)135.37，133.33，132.19，129.06，128.80，127.57，125.96，125.46，70.95，49.80，29.25；MS(MW＝200.3，EI，e＝70eV)m/z200(M+)，185，167，165，143，142，141(基峰)，128，115，89，63，59，57，43，31.
N-(1，1-二甲基-2-萘-2-基-乙基)-甲酰胺(6)將醇4(3.00g，15.0mmol)根據(jù)一般方法B進(jìn)行Ritter反應(yīng)。FC(二氯甲烷)后得到黃色固體狀產(chǎn)物6(3.31g，97％)，mp59-63℃。以下是約67∶33酰胺旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物的1H NMR譜。將主要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的信號(hào)指定為A，次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的信號(hào)指定為B。
1H NMR(CDCl3)8.10-8.05(m，1)，7.80-7.75(m，3)，7.60(m，1)，7.50-7.45(m，2)，7.30-7.25(m，1)，5.95(brs，0.33，B)，5.22(br s，0.67，A)，3.20(s，1.3，A)，2.92(s，0.7，B)，1.40-1.30(m，6)；MS(MW＝227.3，EI，eE＝70eV)m/z 227(M+)，209，183，182，152，141，139，115，89，86(基峰)，63，58，42，32.
3，3-二甲基-3，4-二氫苯并[h]異喹啉(8)將甲酰胺6(2.27g，10.0mmol)根據(jù)一般方法C進(jìn)行環(huán)化得到褐色固體狀亞胺8(1.55g，74％)，該產(chǎn)物不經(jīng)純化直接使用。1H NMR(CDCl3)9.08(s，1)，8.31(d1，J＝8.4)，7.90-7.85(m，2)，7.60-7.55(m，1)，7.50(m，1)，7.29(s，1)，2.88(s，2)，1.30(s，6)；13C NMR(CDCl3)153.38，134.69，132.61，131.07，129.12，128.50，127.04，126.44，125.18，121.34，121.02，53.97，38.59，27.71；MS(MW＝209.3，EI，eE＝70eV)m/z 209(M+，基峰)，194，180，167，152，139，115，97，82，76，63，51，41.
3，3-二甲基-1，2，3，4-四氫苯并[h]異喹啉根據(jù)一般方法D將亞胺8(1.47g，7.03mmol)還原得到深色液體狀胺(1.47g，99％)，未對(duì)該產(chǎn)物進(jìn)行鑒定，而將其直接用于下一步反應(yīng)。
3，3-二甲基-)3，4-二氫苯并[h]異喹啉N-氧化物(10)
將上一步反應(yīng)的粗品胺(1.47g，6.97mmol)根據(jù)一般方法E進(jìn)行氧化，用1∶9二氯甲烷/己烷重結(jié)晶后得到黃色固體，mp157-159℃。產(chǎn)率0.950g(61％)。1H NMR(CDCl3)8.51(s，1)，7.97(d，1，J＝8.5)，7.85-7.75(m，2)，7.55-7.50(m，2)，7.3 1(d，1，J＝8.3)，3.21(s，2)，1.50(s，6)；13CNMR(CDCl3)132.64，129.51，129.27，128.75，128.15，127.58，125.90，125.63，123.06，121.28，66.15，42.34，24.45；MS(CI/CH4，eE＝70eV)m/z 226[(M+H)+，基峰]，210，193，167，152；元素分析C15H15NO(MW＝225.3)，計(jì)算值C，79.97；H，6.71；N，6.22。
實(shí)測(cè)值C，79.58；H，6.72；N，6.02。
實(shí)施例33，4-二氫異喹啉-3-螺-4′-四氫吡喃N-氧化物(11)4-芐基四氫吡喃-4-醇(17)將四氫吡喃-4-酮(4.34g，43.4mmol)用芐基氯化鎂(2M的THF溶液，32.5mL，65.0mmol)根據(jù)一般方法A進(jìn)行處理。將粗產(chǎn)物用硅膠過(guò)濾，先用二氯甲烷，然后用1∶1己烷/乙酸乙酯洗脫得到無(wú)色油狀的醇17(7.3g，87％)。1H NMR(CDCl3)7.40-7.15(m，5)，3.80-3.65(m，4)，2.77(s，2)，1.81(s，1)，1.80-1.70(m，2)，1.50-1.40(m，2)；13C NMR(CDCl3)135.90，130.53，128.32，126.74，68.55，63.65，49.42，37.46；MS(MW＝192.3，CI/CH4，eE＝70eV)m/z 193(M+H)+，191，176，175(基峰)，157，145，129，119，101，92，83，71.
N-(4-芐基四氫吡喃-4-基)-甲酰胺(19)
將叔醇17(13.9g，72.4mmol)根據(jù)一般方法B用NaCN處理。TLC分析(1∶1己烷/乙酸乙酯)顯示17在數(shù)小時(shí)內(nèi)完全轉(zhuǎn)變?yōu)楦逺f的產(chǎn)物。繼續(xù)將反應(yīng)混合物首先在室溫下攪拌(5天)，然后在50℃(16小時(shí))攪拌，僅生成少量低Rf的產(chǎn)物。用一般方法對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行后處理，將混合物用1∶1己烷/乙酸乙酯濾過(guò)硅膠進(jìn)行純化。經(jīng)證實(shí)(1H NMR)，該物質(zhì)(8.0g，64％)為僅從17′消除水后形成的烯烴異構(gòu)體的約1∶1的混合物。用10∶1二氯甲烷/甲醇繼續(xù)洗脫硅膠得到少量甲酰胺(19，1.8g，11％)。將烯烴混合物再次在一般的Ritter反應(yīng)條件下進(jìn)行反應(yīng)(室溫下5天，然后在45-50℃下16小時(shí))，F(xiàn)C(10∶1二氯甲烷/甲醇)后得到5.5g黃色油狀的19。從17計(jì)算，19的產(chǎn)率為7.3g(46％)。以下是約75∶25酰胺旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體混合物的NMR譜。將主要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的信號(hào)指定為A，次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的信號(hào)指定為B。
1H NMR(CDCl3)8.13(s，0.75，A)，7.80(d，0.25，J＝12.3，B)，7.45-7.00(m，5總共)，6.02(brd，0.25，J＝12.3，B)，5.25(br s，0.75，A)，3.90-3.50(m，4總共)，3.08(s，0.75，A)，2.85(s，0.25，B)，2.15-1.65(m，4總共)；13C NMR(CDC13)163.76(B)，161.29(A)，136.13(A)，134.52(B)，131.30(B)，130.82(A)，130.70(B)，130.56(A)，128.36(A)，128.14(B)，127.99(A)，127.84(B)，127.11(B)，126.54(A)，63.19(A)，62.76(B)，54.38(A)，52.93(B)，49.60(B)，43.87(A)，36.11(B)，34.98(A)；MS(MW＝219.3，EI，eE＝70eV)m/z 220(M+H)+，201，174，141，128(基峰)，115，100，98，91，82，70，65，53，42.
3，4-二氫異喹啉-3-螺-4′-四氫吡喃(21)將上一步反應(yīng)得到的甲酰胺19(1.00g，4.57mmol)根據(jù)一般方法C進(jìn)行環(huán)化，經(jīng)FC(1∶1己烷/乙酸乙酯，然后是乙酸乙酯)得到黃色油狀亞胺21。產(chǎn)率0.38g(41％)。1HNMR(CDCl3)8.35(s，1)，7.45-7.30(m，3)，7.16(d，1，J＝7.0)，4.05-3.95(m，2)，3.80-3.70(m，2)，2.75(s，2)，1.80-1.60(m，4)；13C NMR(CDCl3)158.21，134.50，131.33，128.25，128.05，127.18，127.13，63.72，53.85，37.29，37.13；MS(MW＝201.3，EI，eE＝70eV)m/z 201(M+)，200，186，170，156(基峰)，144，118，115，102，89，77，63，51，41.
1，2，3，4-四氫異喹啉-3-螺-4′-四氫吡喃根據(jù)一般方法D將上一步反應(yīng)得到的亞胺21(1.90g，9.45mmol)還原。將胺提取到1M HCl中并用乙酸乙酯(棄去)洗滌。然后加入KOH片將水相調(diào)至堿性(pH8)，用NaCl飽和，然后用乙酸乙酯提取(3次)。將有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)。得到的白色固體無(wú)需進(jìn)一步純化。1HNMR(CDCl3)7.20-7.00(m，4)，4.01(s，2)，3.95-3.80(m，2)，3.75-3.65(m，2)，2.70(s，2)，1.75-1.50(m，5)；13C NMR(CDCl3)134.78，133.42，129.74，126.16，125.93，125.71，63.70，48.23，43.23，40.17，36.13；MS(MW＝203.3，EI，eE＝70eV)m/z203(M+，基峰)，174，158，145，144，128，104，103，91，78，72，65.
3，4-二氫異喹啉-3-螺-4′-四氫吡喃N-氧化物(11)將上一步反應(yīng)得到的胺(0.292g，1.438mmol)根據(jù)一般方法E進(jìn)行氧化。將粗產(chǎn)物通過(guò)FC(20∶1二氯甲烷/甲醇)純化并用己烷/二氯甲烷重結(jié)晶得到白色晶體狀硝酮，MDL 105992(0.205g，66％)，mp 135-136℃。
1H NMR(CDCl3)7.76(s，1)，7.35-7.10(m，4)，4.04(dt，2，J＝11.8，4.5)，3.65(ddd，2，J＝12.0，11.7，3.0)，3.24(s，2)，2.49(ddd，2，J＝13.7，10.2，4.5)，1.60(brd，2，J＝13.7)；13C NMR(CDCl3)132.92，129.22，128.89，128.03，127.73，127.69，124.68，66.83，64.11，37.16，32.15；MS(EI，eE＝70eV)m/z 217(M+)，200，172，170，156(基峰)，144，128，115，102，89，77，63，51，41；
元素分析C13H15NO2(MW＝217.3)，計(jì)算值C，71.87；H，6.96；N，6.45。
實(shí)測(cè)值C，71.79；H，6.96；N，6.54。
實(shí)施例44，5-二氫-3H-苯并[c]吖庚因-3-螺-4′-四氫吡喃N-氧化物(12)4-苯乙基四氫吡喃-4-醇(18)將鎂屑(2.34g，97.6mmol)和THF(100mL)置于氮?dú)庀?。加入少量I2晶體和1mL苯乙基溴，然后將該混合物在室溫下攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物用空氣加熱槍短時(shí)間加熱，直至碘的顏色改變。發(fā)生放熱反應(yīng)。然后，以保持微沸的速率加入剩余的溴化物(10.5mL，總量＝11.5mL，84.6mmol)(約10分鐘)。當(dāng)混合物的溫度達(dá)到室溫時(shí)，將反應(yīng)裝置置于冰水浴中，在5分鐘內(nèi)通過(guò)注射器向反應(yīng)混合物中加入四氫吡喃-4-酮(6.0mL，43.4mmol)。移走冷卻浴，使反應(yīng)混合物達(dá)到室溫。將反應(yīng)混合物分離并按照以上純化化合物17的方法進(jìn)行純化達(dá)到產(chǎn)物18。用己烷/二氯甲烷重結(jié)晶達(dá)到白色針狀結(jié)晶(1批)，mp 74-75℃(5.0g，37％)。
1H NMR(CDCl3)7.40-7.10(m，5)，3.90-3.70(m，4)，2.80-2.65(m，2)，1.90-1.70(m，4)，1.55(br d，2，J＝11.9)，1.4 6(s，1)；13C NMR(CDCl3)142.14，128.47，128.28，125.87，68.86，63.78，45.13，37.58，28.91；MS(CI/CH4，eE＝70eV)m/z 207(M+H)+，205，190，189(基峰)，171，161，143，119，101，91，83，71；元素分析C13H18O2(MW＝206.3)，計(jì)算值C，75.69；H，8.80。實(shí)測(cè)值C，75.46；H，8.80。
N-(4-苯乙基四氫吡喃-4-基)-甲酰胺(20)將叔醇18(3.11g，15.1mmol)根據(jù)一般方法B用NaCN處理。反應(yīng)時(shí)間為5天。將產(chǎn)物通過(guò)FC(首先用二氯甲烷洗脫，然后用乙酸乙酯洗脫，最后用10∶1二氯甲烷/甲醇洗脫)純化黃色油(20，2.70g，77％)。以下是約67∶33酰胺旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體混合物的NMR譜。將主要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的信號(hào)指定為A，次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的信號(hào)指定為B。
1H NMR(CDCl3)8.29(d，0.33，J＝10，B)，8.19(s，0.67，A)，7.40-7.10(m，5)，6.77(d，0.33，J＝10，B)，5.71(s，0.67A)，3.95-3.55(m，4)，2.80-2.55(m，2)，2.30-1.65(m，6)；MS(MW＝233.3，CI/CH4，eE＝120eV)m/z 234[(M+H)+基峰]，233，217，199，189，171，161，145，129，119，100，91，74.
4，5-二氫-3H-苯并[c]吖庚因-3-螺-4′-四氫吡喃(22)將上一步反應(yīng)得到的甲酰胺20(3.65g，15.7mmol)根據(jù)一般方法C進(jìn)行環(huán)化，經(jīng)FC(1∶1二氯甲烷/異丙醇)得到黃色油狀亞胺22(0.47g，14％)。
1H NMR(CDCl3)8.35(s，1)，7.50-7.45(m，1)，7.40-7.20(m，3)，4.10-3.95(m，2)，3.85-3.70(m，2)，3.15-3.05(m，2)，2.00-1.95(m，2)，1.85-1.70(m，4)；13C NMR(CDCl3)157.88，141.77，135.23，132.61，129.89，129.66，126.21，64.02，58.32，38.71，37.25，30.13；MS(MW＝215.3，CI/CH4，eE＝120eV)m/z 216[(M+H+)，基峰]，199，189，171，143，117，100，83.
1，2，4，5-四氫-3H-苯并[c]吖庚因-3-螺-4′-四氫吡喃根據(jù)一般方法D將上一步反應(yīng)得到的亞胺22(0.430g，2.00mmol)還原。按照以上還原21所述進(jìn)行酸/堿后處理后分離出產(chǎn)物。得到白色結(jié)晶，mp76-78℃，重量0.427g(98％)。1H NMR(CDCl3)7.20-7.05(m，4)，3.89(s，2)，3.88-3.75(m，2)，3.70-3.60(m，2)，2.90-2.80(m，2)，1.80-1.55(m，6)，1.23(br s，1)；13C NMR(CDCl3)142.69，141.94，129.21，127.88，126.85，126.00，63.35，52.14，46.70，40.44，36.92，29.34；MS(MW＝217.3，CI/CH4，eE＝120eV)m/z218[(M+H)+，基峰]，216，201，183，157，118，91.
4，5-二氫-3H-苯并[c]吖庚因-3-螺-4′-四氫吡喃N-氧化物(12)將上一步反應(yīng)得到的胺(0.420g，1.94mmol)根據(jù)一般方法E進(jìn)行氧化得到褐色固體狀硝酮，MDL 104129(0.225g，51％)，mp 107-109℃。1H NMR(CDCl3)7.95(s，1)，7.40-7.05(m，4)，4.10-3.90(m，2)，3.70-3.60(m，2)，3.15-3.00(m，2)，2.70-2.55(m，2)，2.45-2.35(m，2)，1.80-1.60(m，2)；13C NMR(CDCl3)139.36，138.60，130.98，129.60，128.90，126.76，72.05，64.24，)34.73，34.59，29.29；MS(CI/CH4，eE＝120eV)m/z 232[(M+H)+，基峰]，214，199，181，158，116，98，83；元素分析C14H17NO2(MW＝231.3)，計(jì)算值C，72.70；H，7.41；N，6.06。
實(shí)測(cè)值C，72.36；H，7.38；N，6.00。
實(shí)施例55，5-二甲基-4，5-二氫噻吩并[2，3-c]吡啶N-氧化物(13)2-甲基-1-噻吩-3-基-丙-2-醇(25)將噻吩-3-乙酸乙酯(15.0g，88.2mmol)根據(jù)一般方法A用MeMgBr處理。得到無(wú)色液體狀產(chǎn)物25(16.1g，88％)，該產(chǎn)物無(wú)需進(jìn)一步純化。1H NMR(CDCl3)7.25-7.20(m，1)，7.00-6.95(m，2)，2.77(s，2)，1.21(s，6)；13C NMR(CDCl3)138.39，130.18，125.39，123.12，70.77，44.42，29.37；MS(MW＝156.2，EI，eE＝70eV)m/z 156(M+)，141，139，100，98(基峰)，97，85，69，59，43，32.
5，5-二甲基-4，5-二氫噻吩并[2，3-c]吡啶(26)將上一步反應(yīng)得到的醇25(15.9g，102mmol)根據(jù)一般方法B用NaCN處理，經(jīng)FC(3∶1己烷/乙酸乙酯)直接得到環(huán)化的亞胺。產(chǎn)率4.15g(25％)。
1H NMR(CDCl3)8.17(s，1)，7.36(d，1，J＝4.8)，6.88(d，1，J＝4.8)，2.75(s，2)，1.28(s，6)；13C NMR(CDCl3)153.96，141.02，131.45，125.79，124.39，56.24，35.65，28.03；MS(MW＝165.3，EI，eE＝70eV)m/z165(M+，基峰)，150，138，124，123，97，86，77，69，58，45.
5，5-二甲基-)4，5，6，7-四氫噻吩并[2，3-c]吡啶根據(jù)一般方法D將上一步反應(yīng)得到的亞胺26(1.00g，6.1mmol)還原得到相應(yīng)的深色液體狀的胺(1.00g，100％)(MW＝167.3)，該產(chǎn)物不經(jīng)純化直接使用。1HNMR(CDCl3)7.13(d，1，J＝5.1)，6.75(d，1，J＝5.1)，4.07(s，2)，2.56(s，2)，2.37(s，1)，1.23(s，6).
5，5-二甲基-4，5-二氫噻吩并[2，3-c]吡啶N-氧化物(13)將上一步反應(yīng)得到的粗品胺(1.00g，5.99mmol)根據(jù)一般方法E進(jìn)行氧化，經(jīng)FC(19∶1二氯甲烷/甲醇)得到褐色固體(300mg，28％，mp 136-138℃)。1H NMR(CDCl3)7.73(s，1)，7.33(d，1，J＝4.9)，6.93d，1，J＝4.9)，3.04(s，2)，1.48(s，6)；13CNMR(CDCl3)132.25，128.30，127.52，127.14，126.64，68.03，38.24，25.25；MS(EI，eE＝70eV)m/z 181(M+，基峰)，166，149，138，134，110，96，91，77，65，51，45；元素分析C9H11NOS(MW＝181.3)，計(jì)算值C，59.64；H，6.12；N，7.73；S，17.69。實(shí)測(cè)值C，59.57；H，6.10；N，7.86；S，17.56。
實(shí)施例64，5-二氫-3H-苯并[c]吖庚因-3-螺環(huán)己烷N-氧化物(14)
1-苯乙基環(huán)己烷-1-醇按照上述合成化合物18的方法將環(huán)己酮(13.2g，135mmol)與苯乙基溴化鎂反應(yīng)，經(jīng)FC(19∶1環(huán)己烷/乙酸乙酯，然后是9∶1環(huán)己烷/乙酸乙酯)得到叔醇(16.0g 58％)。
MS(CI/CH4，eE＝70eV)m/z 203(M-H)+，187(M+H-H2O，基峰)。
N-(1-苯乙基環(huán)己-1-基)-甲酰胺將上一步反應(yīng)得到的醇(15.9g，77.8mmol)根據(jù)一般方法B進(jìn)行Ritter反應(yīng)。經(jīng)FC(4∶1，環(huán)己烷/乙酸乙酯，然后是乙酸乙酯)得到橙色糊狀甲酰胺(12.4g，69％)。以下是酰胺旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體混合物的1H NMR譜。
1H NMR(CDCl3)8.27和8.17(2d，1total，J＝12.5和2.1)，7.30-7.15(m，5)，5.81和5.10(brd和br s，1總共，J＝12.5)，2.65-2.55(m，2)，2.15-2.10(m，2)，1.90-1.85(m，1)，1.80-1.75(m，1)，1.65-1.30(m，8)；IR(薄膜)3295，2932，2859，1667，1537，1497，1454，1391，700；MS(MW＝231.3，EI，eE＝70eV)m/z 231(M+)，188，126，104(基峰)，91，81.
4，5-二氫-3H-苯并[c]吖庚因-3-螺環(huán)己烷將上一步反應(yīng)得到的甲酰胺(13.0g，56.2mmol)根據(jù)一般方法C進(jìn)行環(huán)化，所不同的是通過(guò)將純凈中間體在125℃加熱至氣體溢出停止(約2小時(shí))來(lái)裂解草酸酯部分。得到橙色液體的亞胺(8.95g，75％)。
1H NMR(CDCl3)8.28(s，1)，7.50-7.40(m，1)，7.30-7.20(m，3)，3.05-3.00(m，2)，1.95-1.90(m，2)，1.80-1.70(m，4)，1.55-1.40(m，6)；13C NMR(CDCl3)157.06，142.12，135.05，132.78，129.60，129.57，126.01，61.03，38.07，34.69，30.57，26.06，22.15；MS(MW＝213.3，CI/CH4，eE＝70eV)m/z 214[(M+H)+，基峰]，197，141，129.
1，2，4，5-四氫-3H-苯并[c]吖庚因-3-螺環(huán)己烷根據(jù)一般方法D將上一步反應(yīng)得到的亞胺(8.9g，4mmol)還原得到淺黃色液體狀胺(7.6g，84％)，該產(chǎn)物不經(jīng)純化。
1H NMR(CDCl3)7.15-7.05(m，4)，3.89(s，2)，2.90-2.85(m，2)，1.70-1.35(m，12)；13C NMR(CDCl3)142.66，142.22，129.17，127.89，126.58，125.78，54.02，46.73，39.22，36.48，29.75，26.44，21.60；MS(MW＝215.3，CI/CH4，eE＝70eV)m/z 216[(M+H)+，基峰]，117.
4，5-二氫-3H-苯并[c]吖庚因-3-螺環(huán)己烷N-氧化物(14)將上一步反應(yīng)得到的胺(1.36g，6.32mmol)根據(jù)一般方法E進(jìn)行氧化，經(jīng)FC(乙酸乙酯)得到淡黃色結(jié)晶狀硝酮(1.0g，69％)，mp 123-126℃。
1H NMR(CDCl3) 7.94(s，1)，7.25-7.10(m，4)，3.05-3.00(m，2)，2.55-2.45(m，2)，2.30-2.25(m，2)，1.80-1.60(m，5)，1.50-1.35(m，3)；13C NMR(CDCl3)140.29，139.42，131.53，129.37，128.63，128.18，126.57，75.68，34.13，31.55，29.21，24.89，22.36；MS(EI，eE＝70eV)m/z 229(M+)，212(基峰)，170，141，130，117，104，77；元素分析C15H19NO(MW＝229.3)，計(jì)算值C，78.57；H，8.35；N，6.11。
實(shí)測(cè)值C，78.64；H，8.32；N，6.47。
實(shí)施例73，3，5，7-四甲基-3，4-二氫異喹啉-)6-醇N-氧化物(15)(3-羥基苯基)乙酸甲酯(28)將苯酚-3-乙酸(13.3g，87.3mmol)溶于甲醇(75mL)，加入10滴濃硫酸。將混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，然后小心地加入稀碳酸氫鈉溶液并用乙酸乙酯提取(2次)。將有機(jī)提取液用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)得到淺黃色油狀的28(14.5g，100％，MW＝166.2)，該產(chǎn)物具有足夠的純度進(jìn)行下一步反應(yīng)。
1H NMR(CDCl3)7.17(t，1，J＝7.7)，6.85-6.70(m，3)，3.70(s，3)，3.58(s，2)；13C NMR(CDCl3)172.55，155.92，135.24，129.77，121.45，116.20，114.30，52.26，41.03.
3-(2-羥基-2-甲基丙基)苯酚(29)將上一步反應(yīng)得到的酯28根據(jù)一般方法A用MeMgBr(3M的乙醚溶液，150mL，450mmol)處理。需要進(jìn)行劇烈的機(jī)械攪拌以防止反應(yīng)混合物的固化。通過(guò)注射器在15分鐘內(nèi)加入底物(在THF中的溶液)(劇烈的氣體溢出)。將得到的粗產(chǎn)物溶于溫?zé)岬亩燃淄椴⒂眉和橄♂專玫桨咨Y(jié)晶固體狀產(chǎn)物29，mp 91-94℃(12.3g，85％)。
1H NMR(CDCl3)7.14(t，1，J＝7.7)，6.80-6.68(m，3)，2.70(s，2)，1.23(s，6)；13C NMR(CDCl3)155.92，138.97，129.41，122.61，117.31，113.78，71.54，49.36，28.98；MS(EI，eE＝70eV)m/z 166(M+)，152，151，133，115，108(基峰)，107，90，79，77，63，59，51，43；元素分析C10H14O2(MW＝166.2)，計(jì)算值C，72.26；H，8.49。實(shí)測(cè)值C，72.04；H，8.38。
4-溴-3-(2-羥基-2-甲基丙基)苯酚(30)將醇29(12.3g，74.2mmol)溶于干燥DMF并在氮?dú)庀吕鋮s至0℃。在1.5小時(shí)內(nèi)每次少量加入固體N-溴代琥珀酰亞胺(NBS，14.77g，83.0mmol)(應(yīng)在兩次加料之間使顏色分散開(kāi))。加料結(jié)束后，繼續(xù)在0℃攪拌30分鐘。然后將混合物倒入水中并用乙酸乙酯提取(3次)。將有機(jī)相用水(1次)和鹽水(1次)洗滌，干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)。將殘余物溶于乙酸乙酯/二氯甲烷并用己烷稀釋得到白色結(jié)晶狀的30，mp 139-141℃(12.7g，70％)。濃縮母液得到另外兩批結(jié)晶(1.2g和1.0g)，總產(chǎn)量為14.9g(82％)。1H NMR(丙酮-d6，2.05ppm)8.43(s，1)，7.34(d，1，J＝8.7)，7.01(d，1，J＝2.7)，6.64(dd，1，J＝8.7，2.8)，2.89(s，2)，1.21(s，6)；13C NMR(丙酮-d6，20.83ppm)147.90，130.98，124.56，111.34，107.05，106.19，62.35，39.59，20.76；MS(EI，eE＝70eV)m/z 246/244(M+)，231/229，201，188/186，163，150，131，108，107，91，77，63，59(基峰)，51，43；元素分析C10H13BrO2(MW＝245.1)，計(jì)算值C，49.00；H，5.35。實(shí)測(cè)值C，49.03；H，5.20。
4-溴-3-(2-羥基-2-甲基丙基)-2，6-(二吡咯烷-1-基甲基)苯酚(32)氮?dú)庀?，將上一步驟中得到的溴苯酚30(5.7g，23.3mmol)和吡咯烷(4.8mL，58.2mmol)置于裝有回流冷凝器的燒瓶?jī)?nèi)。向該混合物中加入甲醛水溶液(4.7mL，58.2mmol)，發(fā)生劇烈的放熱反應(yīng)。將黃色混合物在約85℃攪拌加熱6小時(shí)，3小時(shí)后加入另外2等份的吡咯烷和甲醛。將反應(yīng)混合物冷卻，倒入水中，用乙酸乙酯提取(3次)。將有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)。將殘余物加入二氯甲烷中并用己烷稀釋得到白色結(jié)晶狀32，mp 111-113℃。濃縮母液得到另外兩批結(jié)晶。32的總產(chǎn)率為8.0g(83％)。1H NMR(CDCl3)8.50(br s，1)，7.19(s，1)，3.75(v br s，8)，3.16(v br s，2)，2.62(v br s，8)，1.84(brs，4)，1.78(br s，4)，1.38(v br s，6)；13C NMR(CDCl3)156.28，139.24，131.02，125.82，121.77，115.82，68.68，58.08，53.30，52.33，49.13，46.78，34-28(V br，偕二甲基)，23.69，23.23；MS(CI/CH4，eE＝70eV)m/z 413/411(M+H)+，397/395，395/393，370/368，342/340(基峰)，324/322，290，283，262，211，183，145，100；元素分析C20H31BrN2O2(MW＝411.4)，計(jì)算值C，58.39；H，7.60；N，6.81。
實(shí)測(cè)值C，58.44；H，7.70；N，6.75。
3-(2-羥基-2-甲基丙基)-2，6-二[(4-甲氧基芐基sulfanyl)甲基]苯酚(37)氮?dú)庀?，將?吡咯烷)化合物32(5.00g，12.17mmol)和4-甲氧基芐基硫醇(11.24g，73.0mmol)在裝有回流冷凝器的燒瓶中混合。將混合物在180℃(加熱罩內(nèi)的沙浴)攪拌加熱3小時(shí)，然后冷卻，用二氯甲烷稀釋并上到硅膠填充柱上。用二氯甲烷洗脫非極性雜質(zhì)，然后用10∶1二氯甲烷/異丙醇將粗產(chǎn)物洗脫。可將該物質(zhì)通過(guò)FC(4∶1，二氯甲烷/乙腈)進(jìn)一步純化得到淺黃色油狀的37(4.60g，76％)。1H NMR(CDCl3)7.26(d，2，J＝8.5)，7.18(d，2，J＝8.6)，7.00-6.80(m，6)，6.71(d，1，J＝7.8)，3.85(s，2)，3.80(s，3)，3.79(s，3)，3.72(s，2)，3.66(s，2)，3.59(s，2)，2.68(s，2)，1.53(s，1)，1.15(s，6)；13C NMR(CDCl3)158.69，154.13，137.28，130.00，129.51，128.90，124.54，123.80，121.70，114.21，113.92，113.88，71.02，55.24，55.21，45.31，36.21，34.93，31.78，29.54，27.69；MS(MW＝498.7，CI/CH4，eE＝70eV)m/z 499(M+H)+，481，427，389，346，327，287，237，207，175，155，122，121(基峰)，109，91.
3-(2-羥基-2-甲基丙基)-2，6-二甲基苯酚(33)將阮內(nèi)鎳(RaNi，約20g)用水洗滌5次并用無(wú)水乙醇洗滌兩次。然后將該催化劑在乙醇中的漿液加入二(硫化物)37(3.01g，6.04mmol)的乙醇(30mL)溶液中。將形成的混合物于氮?dú)庀聞×壹訜峄亓?小時(shí)，然后冷卻。傾出上清液，將催化劑依次用甲醇和乙酸乙酯(2次)洗滌。合并傾出的有機(jī)層并蒸發(fā)。將殘余物通過(guò)FC(10∶1二氯甲烷/異丙醇)純化得到淺黃色油狀的33(0.98g，84％)。1H NMR(CDCl3)6.94(d，1，J＝7.7)，6.72(d，1，J＝7.7)，2.81(s，2)，2.24(s，6)，1.24(s，6)；13C NMR(CDCl3)152.44，135.06，127.42，123.42，122.91，120.95，71.59，45.68，29.41，15.87，12.76；MS(MW＝194.3，CI/CH4，eE＝70eV)m/z 195(M+H)+，177(基峰)，175，149，136，91，79.
3，3，5，7-四甲基-3，4-二氫異喹啉-6-醇(38)將叔醇33(12.5g，64.4mmol)根據(jù)一般方法B發(fā)生Ritter反應(yīng)。在2.5小時(shí)內(nèi)向該酸/氰化物混合物中加入底物(室溫)，然后將形成的紅色反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。用于產(chǎn)物的高度水溶性，在后處理過(guò)程中，將水相用氯化鈉飽和并用乙酸乙酯提取6次以盡可能的回收產(chǎn)物。將有機(jī)相干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并濃縮。將殘余物用10∶1二氯甲烷/甲醇濾過(guò)硅膠，合并適宜的餾分并用己烷稀釋得到黃色結(jié)晶狀產(chǎn)物38，mp 220-234℃(分解)。還分離得到較低Rf較低的產(chǎn)物。該產(chǎn)物具有相同類型的TLC特性(藍(lán)色熒光)和非常相似的1H NMR譜，推測(cè)其為對(duì)稱的二聚體。在溶液中放置時(shí)，該產(chǎn)物緩慢轉(zhuǎn)變成38而形成沉淀。收集到3批黃色結(jié)晶，總產(chǎn)率為6.8g(52％)。
1H NMR(CD3OD，3.30ppm)7.76(s，1)，7.10(s，1)，4.93(s，1)，2.82(s，2)，2.10(s，3)，2.07(s，3)，1.33(s，6)；13C NMR(CD3OD，49.05ppm)158.21，136.17，134.91，127.55，126.90，54.34，38.15，27.25，17.02，11.39；MS(MW＝203.3，CI/CH4，eE＝70eV)m/z 204[(M+H)+，基峰)]，188，177，122.
3，3，5，7-四甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-6-醇將亞胺38(1.00g，4.93mmol)用RaNi(藥勺，用水洗滌3次，乙醇洗滌3次)在乙醇(20mL)中于室溫下氫化(50psi H2)2小時(shí)。將反應(yīng)混合物用助濾劑過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑得到淺黃色固體狀的胺(MW＝205.3)，該產(chǎn)物不經(jīng)純化直接使用。產(chǎn)率0.90g(89％)。
1H NMR(CDCl3)6.68(s，1)，3.95(s，2)，3.62(brs，2)，2.45(s，2)，2.21(s，3)，2.08(s，3)，1.20(s，6)；13C NMR(CDCl3)150.43，131.39，125.87，125.12，122.19，121.16，48.85，43.93，38.98，27.89，16.01，10.97.
3，3，5，7-四甲-3，4-二氫異喹啉-6-醇N-氧化物(15)將上一步反應(yīng)得到的胺(0.90g，4.39mmol)根據(jù)一般方法E進(jìn)行氧化。得到淺黃色結(jié)晶狀硝酮(0.66g，69％)，mp 225-240℃。
1H NMR(CDCl3)7.60(s，1)，6.80(s，1)，2.97(s，2)，2.23(s，3)，2.17(s，3)，1.44(s，6)；13C NMR(DMSO-d6，39.43ppm)154.11，130.78，127.31，124.66，122.66，122.44，120.40，64.87，38.14，24.35，16.50，11.60；MS(EI，eE＝70eV)m/z219(M+，基峰)，202，187，172，160，115，91，77，43；元素分析C13H17NO2(MW＝219.3)，計(jì)算值C，71.21；H，7.81；N，6.39。
實(shí)測(cè)值C，71.25；H，7.70；N，6.35。
實(shí)施例83，3，6，8-四甲基-4，5-二氫-3H-苯并[c]吖庚因-7-醇N-氧化物(16)3′-羥基肉桂酸甲酯(41)向3′-羥基肉桂酸40(24.5g，149mmol)的甲醇(200mL)溶液中加入濃硫酸(2mL)。將形成的溶液在室溫下攪拌過(guò)夜，然后倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中并用乙酸乙酯提取(2次)。將有機(jī)相干燥(MgSO4)，過(guò)濾并濃縮得到棕色粉末(22.8g，86％)。將其樣品用環(huán)己烷/乙酸乙酯結(jié)晶得到淡黃色結(jié)晶粉末狀的41，mp 84-87℃。
1H NMR(CDCl3)7.65(d，1，J＝16.0)，7.30-7.25(m，1)，7.10-7.05(m，1)，7.03(m，1)，6.90(ddd，1，J＝8.1，2.5，0.9)，6.41(d，1，J＝16.0)，5.90(s，1)，3.82(s，3)；13CNMR(CDCl3)167.90，156.20，145.01，135.77，130.12，120.73，117.90，117.64，114.58，51.92；MS(CI/CH4，eE＝70eV)m/z179[(M+H)+，基峰)]，147；
元素分析C10H10O3(MW＝178.2)，計(jì)算值C，67.14；H，5.66。實(shí)測(cè)值C，67.40；H，5.68。
3-(3-羥基苯基)丙酸甲酯(42)將酯41(22.8g，128mmol)溶于甲醇(250mL)并與5％Pd/C(2.0g)一起置于Parr瓶?jī)?nèi)。將該混合物在Parr裝置中于50psi氫氣及室溫下氫化90分鐘。將反應(yīng)混合物過(guò)濾并蒸發(fā)得到深灰色液體狀42(19.5g，84％)。1H NMR(CDCl3)7.15(t，1，J＝7.5)，6.80(d，1，J＝7.5)，6.70(m，3)，3.70(s，3)，2.90(t，2，J＝7.4)，2.65(t，2，J＝7.4).
3-(3-羥基-3-甲基丁基)苯酚將酯42(19.4g，108mmol)根據(jù)一般方法A用MeMgBr處理。將粗產(chǎn)物(MW＝259.2)用環(huán)己烷/二氯甲烷(1∶1)重結(jié)晶進(jìn)行純化得到白色粉末，19.0g(98％)。
1H NMR(CDCl3)7.15(t，1，J＝7.3)，6.80(d，1，J＝7.3)，6.65(m，2)，4.90(s，1)，2.65(m，2)，1.80(m，2)，1.30(s，6).
4-溴-3-(3-羥基-3-甲基丁基)苯酚將上一步反應(yīng)得到的苯酚(19.0g，105mmol)通過(guò)與制備溴苯酚29相同的方法進(jìn)行溴化。將粗產(chǎn)物用環(huán)己烷/乙酸乙酯重結(jié)晶進(jìn)行純化得到20.0g(73％)白色結(jié)晶。
1H NMR(DMSO-d6，2.50ppm)9.54(s，1)，7.29(d，1，J＝8.6)，6.69(d，1，J＝2.9)，6.53(dd，1，J＝8.6，2.9)，4.27(s，1)，2.65-2.55(m，2)，1.60-1.50(m，2)，1.14(s，6)；13C NMR(DMSO-d6，3 9.43ppm)156.98，142.73，132.90，117.08，114.98，111.99，68.61，43.94，30.88，29.13；MS(MW＝259.2，EI，eE＝70eV)m/z 260/258(M+)，243，241(基峰)，187，185.
4-溴-3-(3-羥基-)3-甲基丁基)-2，6-(二吡咯烷-1-基甲基)苯酚將上一步驟中得到的溴苯酚(20.0g，77.2mmol)按照以上合成化合物30所述進(jìn)行氨甲基化。橙色油狀的粗產(chǎn)物(33.0g，103％)不經(jīng)純化直接使用。
1H NMR(CDCl3)7.17(s，1)，3.83(s，2)，3.70(s，2)，2.95-2.90(m，2)，2.60-2.55(m，8)，1.85-1.70(m，10)，1.23(s，6)；13C NMR(CDCl3)156.43，141.31，131.17，123.65，122.68，113.40，69.91，56.96，53.46，53.26，51.54，42.53，29.38，27.34，23.55，23.27；MS(MW＝425.4，CI/CH4，eE＝70eV)m/z 427/425[(M+H)+，基峰]，426/424(M+)，409，407，356，354，338，336，326，324，84.
3-(3-羥基-3-甲基丁基)-2，6-二[(4-甲氧基芐基sulfanyl)甲基]苯酚將上一步反應(yīng)得到的二(吡咯烷)化合物(6.32g，14.8mmol)按照以上制備化合物32所述用4-甲氧基芐基硫醇處理。經(jīng)FC(二氯甲烷，然后是9∶1二氯甲烷/乙腈)得到橙色油狀的二(硫化物)(3.9g，41％)。
1H NMR(CDCl3)7.25-7.15(m，4)，6.88(d，1，J＝7.8)，6.85-6.80(m，4)，6.68(d，1，J＝7.8)，3.79(表觀s，8)，3.75(s，2)，3.65(s，2)，3.57(s，2)，2.65-2.55(m，2)，1.70-1.65(m，2)，1.33(brs，1)，1.22(s，6)；13C NMR(CDCl3)158.65，153.93，142.17，130.18，130.00，129.91，129.53，129.39，122.94，121.19，120.77，113.93，113.89，70.76，55.24，45.39，36.36，34.80，31.88，29.10，27.67，27.18；MS(MW＝512.7，CI/CH4，eE＝70eV)m/z 513(M+H)+，495，360，359，341，121(b基峰).
3-(3-羥基-)3-甲基丁基)-2，6-二甲基苯酚將上一步反應(yīng)得到的二(硫化物)(17.1g，33.4mmol)按照以上制備化合物33所述進(jìn)行脫硫。經(jīng)FC(二氯甲烷，然后是9∶1二氯甲烷/乙腈)得到淡橙色糊狀的產(chǎn)物(5.0g，72％)。1H NMR(CDCl3)6.91(d，1，J＝7.5)，6.69(d，1，J＝7.5)，4.63(s，1)，2.70-2.65(m，2)，2.22(s，3)，2.21(s，3)，1.70-1.65(m，1)，1.58(s，1)，1.31(s，6)；13C NMR(CDCl3)152.11，139.77，127.66，121.18，120.83，120.23，70.90，44.78，29.18，28.39，15.76，11.20；MS(MW＝207.3，EI，eE＝70eV)m/z 208(M+)，191，177，163，149，135(基峰).
3，3，6，8-四甲基-4，5-二氫-3H-苯并[c]吖庚因-7-醇將上一步反應(yīng)得到的產(chǎn)物(4.9g，24mmol)按照以上制備化合物38所述用NaCN進(jìn)行處理。將得到的環(huán)化亞胺的粗品通過(guò)FC(19∶1二氯甲烷/甲醇，然后是9∶1二氯甲烷/甲醇)純化得到深橙色半固體(370mg，8％)。
1H NMR(CDCl3)7.50(s，1)，7.00(s，1)，3.34(br s，1)，3.00-2.95(m，2)，2.18(s，3)，2.13(s，3)，2.00-1.95(m，2)，1.41(s，6)；13C NMR(CDCl3)173.41，156.30，143.13，141.14，127.66，125.74，112.00，57.81，36.79，28.50，28.41，16.73，12.38；MS(MW＝217.3，EI，eE＝70eV)m/z 217(M+)，161(基峰).
3，3，6，8-四甲基-1，2，4，5-四氫-3H-苯并[c]吖庚因-7-醇將上一步反應(yīng)得到的亞胺(365mg，1.64mmol)根據(jù)一般方法D用NaBH4還原。得到的胺(MW＝219.3，256mg，71％)不經(jīng)純化直接用于下一步反應(yīng)。
1H NMR(CDCl3)6.74(s，1)，3.84(s，2)，2.85-2.80(m，2)，2.21(s，3)，2.18(s，3)，1.65-1.60(m，2)，1.21(s，6)；13C NMR(CDCl3)151.02，139.57，134.02，128.02，121.43，119.49，100.68，53.68，47.56，39.80，25.01，15.69，11.91.
3，3，6，8-四甲基-4，5-二氫-3H-苯并[c]吖庚因-7-醇，N-氧化物(16)將上一步反應(yīng)得到的胺(250mg，1.14mmol)根據(jù)一般方法E進(jìn)行氧化。得到褐色粉末狀硝酮16(104mg，39％)。1H NMR(CDCl3)7.79(s，1)，6.82(s，1)，6.03(br s，1)，2.95-2.90(m，2)，2.23(s，3)，2.22(s，3)，2.15-2.10(m，2)，1.58(s，6)；13CNMR(CDCl3)153.66，140.65，138.65，132.69，122.37，121.46，120.66，70.76，37.56，27.47，26.43，15.81，11.89；MS(MW＝233.3，CI/CH4，eE＝70eV)m/z 234[(M+H)+，基峰]，233，218，201，176.
實(shí)施例96，6-二甲基-6，7-二氫噻吩并[3，2-c]吡啶N-氧化物(48)3-噻吩-2-基-)2，2-二甲基丙酸乙酯(44)根據(jù)一般方法F，將異丁酸乙酯(10.9mL，81.7mmol)用2-(氯甲基)噻吩烷基化得到黃色液體狀產(chǎn)物44(16.4g，95％)。1HNMR(CDCl3)7.15-7.10(m，1)，6.95-6.90(m，1)，6.77(d，1，J＝3.6)，4.15(t，2，J＝7.0)，3.07(s，2)，1.26(t，3，J＝7.0)，1.21(s，6)；13C NMR(CDCl3)176.96，139.80，126.74，126.42，123.94，60.59，43.65，40.30，25.07，14.22；MS(MW＝212.3，CI/CH4，eE＝70eV)m/z 213[(M+H)+，基峰]，193，179，167，140，139，125，98，97.
3-噻吩-2-基-2，2-二甲基丙酸(45)
將酯44(16.4g，77.2mmol)根據(jù)一般方法G進(jìn)行水解得到乳色液體狀的45(11.0g，77％)。
1H NMR(CDCl3)7.15(d，1，J＝5.1)，6.95-6.90(m，1)，6.83(d，1，J＝3.4)，3.10(s，2)，1.2 6(s，6)；13C NMR(CDCl3)183.98，139.37，127.05，126.66，124.19，43.55，39.86，24.69；MS(MW＝184.3，EI，eE＝70eV)m/z 184(M+)，139，123，97(基峰)，77，69，53，45.
2-(2-異氰酸根合-2-甲基丙基)-噻吩(46)將上一步反應(yīng)得到的羧酸(11.0g，60.0mmol)根據(jù)一般方法H進(jìn)行Curtius重排，得到淺黃色液體狀異氰酸酯46(9.94g，92％)。
1H NMR(CDCl3)7.22(d，1，J＝5.1)，6.99(，6.89(d，1，J＝3.5)，3.00(s，2)，1.38(s，6)；13C NMR(CDCl3)138.20，127.58，126.74，124.80，58.12，43.77，29.92；IR(CHCl3)2982，2259，1265，1167，704；MS(MW＝181.3，EI，eE＝70eV)m/z 181(M+)，149，138，127，123，99，97(基峰)，84，77，71，58，45.
6，6-二甲基-6，7-二氫-5H-噻吩并[3，2-c]吡啶-4-酮(47)向干燥DCE(60mL)和無(wú)水H3PO4(35mL，從85％H3PO4和P2O5制備)的混合物中加入異氰酸酯46(5.12g，28.3mmol)的DCE(20mL)溶液。將得到的混合物在室溫下劇烈攪拌2小時(shí)，然后回流4小時(shí)。使反應(yīng)混合物冷卻并分成兩層。傾出上層的有機(jī)層，用乙酸乙酯和碳酸鈉溶液稀釋，然后用乙酸乙酯提取(2次)。將有機(jī)提取液用鹽水洗滌(2次)并干燥(MgSO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)。將殘余物通過(guò)FC(6∶4二氯甲烷/乙腈)純化得到黃色固體，mp 153-154℃。產(chǎn)率2.10g(41％)。1H NMR(CDCl3)7.43(d，1，J＝5.2)，7.10(d，1，J＝5.2)，6.82(s，1)，2.99(s，2)，1.3 8(s，6)；13C NMR(CDCl3)162.64，144.99，130.86，125.70，122.96，54.00，37.31，29.05；MS(EI，eE＝70eV)m/z 181(M+)，166，151，148，125，124(基峰)，96，83，70，45；元素分析C9H11NOS(MW＝181.3)，計(jì)算值C，59.64；H，6.12；N，7.73。
實(shí)測(cè)值C，59.76；H，6.17；N，7.87。
6，6-二甲基-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c]吡啶根據(jù)一般方法I將內(nèi)酰胺47(2.76g，15.2mmol)還原得到深色液體(MW＝167.3，1.82g，71％)。
1H NMR(CDCl3)7.07(d，1，J＝5.1)，6.75(d，1，J＝5.1)，3.93(s，2)，2.66(s，2)，1.64(br s，1)，1.21(s，6).
6，6-二甲基-6，7-二氫噻吩并[3，2-c]吡啶N-氧化物(48)將上一步反應(yīng)得到的胺(1.82g，10.9mmol)根據(jù)一般方法E氧化，用4∶1己烷/二氯甲烷重結(jié)晶后得到黃色固體狀硝酮48(660mg，33％，mp 130-131℃)。1H NMR(CDCl3)7.72(s，1)，7.17(d，1，J＝5.1)，6.89(d，1，J＝5.1)，3.15(s，2)，1.50(s，6)；13C NMR(CDCl3)131.24，130.31，128.63，124.73，123.54，67.87，37.41，24.99；MS(EI，eE＝70eV)m/z 181(M+，基峰)，166，149，138，134，110，96，91，77，65，51，45；元素分析C9H11NOS(MW＝181.3)，計(jì)算值C，59.64；H，6.12；N，7.73。
實(shí)測(cè)值C，59.45；H，6.22；N，7.67。
實(shí)施例105，5-二甲基-4，5-二氫呋喃并[2，3-c]吡啶N-氧化物(53)3-呋喃-3-基-2，2-二甲基丙酸乙酯根據(jù)一般方法F，將異丁酸乙酯(10.7mL，80.1mmol)用3-(氯甲基)呋喃烷基化，經(jīng)FC(二氯甲烷)得到黃色液體狀產(chǎn)物(12.91g，82％)。4H NMR(CDCl3)7.32(s，1)，7.20(s，1)，6.20(s，1)，4.12(t，2，J＝7.4)，2.66(s，2)，1.25(t，3，J＝7.4)，1.18(s，6)；13C NMR(CDCl3)177.56，142.36，140.54，120.78，112.76，60.39，42.85，35.43，24.96，14.13；MS(MW＝196.3，CI/CH4，eE＝70eV)m/z 197(M+H)+，195，161，151，123(基峰)，109，81.
3-呋喃-3-基-2，2-二甲基丙酸將上一步反應(yīng)得到的酯(12.9g，65.8mmol)根據(jù)一般方法G進(jìn)行水解，經(jīng)FC(二氯甲烷)得到黃色液體(10.24g，93％)。1H NMR(CDCl3)7.34(s，1)，7.24(s，1)，6.25(s，1)，2.69(s，2)，1.22(s，6)；13C NMR(CDCl3)184.25，142.38，140.60，120.34，112.14，42.99，35.27，24.81；MS(MW＝168.2，EI，eE＝70eV)m/z 168(M+)，123，81(基峰)，53.
3-(2-異氰酸根合-2-甲基丙基)-呋喃將上一步反應(yīng)得到的羧酸(10.2g，60.7mmol)根據(jù)一般方法H進(jìn)行Curtius重排，得到淺黃色液體狀異氰酸酯(8.56g，85％)。
1H NMR(CDCl3)7.39(s，1)，7.31(s，1)，6.34(s，1)，2.63(s，2)，1.34(s，6)；13CNMR(CDCl3)142.66，140.96，128.32，119.64，58.00，39.35，29.99；IR(膜)2962，2930，2257，2172，2135，1717，1489，1208，1186，1163，963；MS(MW＝165.2，EI，eE＝70eV)m/z168(M+)，123，81(基峰)，53.
5，5-二甲基-5，6-二氫-4H-呋喃并[2，3-c]吡啶-7-酮(51)在室溫及氮?dú)庀?，向BF3·Et20(2mL，160mmol)的干燥DCE(60mL)溶液中在20分鐘內(nèi)滴加異氰酸酯(6.60g，40.0mmol)的DCE(20mL)溶液。在室溫下繼續(xù)攪拌5小時(shí)。加入冰冷的碳酸氫鈉溶液終止反應(yīng)。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用碳酸氫鈉溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾并濃縮。將殘余物用乙酸乙酯結(jié)晶得到淺黃色固體狀的51(2.19g，33％)，mp 133-134℃。
1H NMR(CDCl3)7.53(d，1，J＝1.8)，6.37(d，1，J＝1.8)，5.50(br s，1)，2.77(s，2)，1.38(s，6)；13C NMR(CDCl3)159.15，146.02，128.42，111.71，110.72，54.83，35.07，29.35；MS(EI，eE＝70eV)m/z 165(M+)，150(基峰)，132，122，108，94，80，52，42；元素分析C9H11NO2(MW＝165.2)，計(jì)算值C，65.44；H，6.71；N，8.48。
實(shí)測(cè)值C，65.33；H，6.81；N，8.42。
5，5-二甲基-)4，5，6，7-四氫呋喃并[2，3-c]吡啶根據(jù)一般方法I將上一步反應(yīng)得到的內(nèi)酰胺(5.60g，3.39mmol)還原得到深色液體(MW＝151.3，2.46g，48％)，對(duì)該產(chǎn)物未進(jìn)行鑒定，而將其直接用于下一步反應(yīng)。
1H5，5-二甲基-4，5-二氫呋喃并[2，3-c]吡啶N-氧化物(53)將上一步反應(yīng)得到的胺(2.42g，16.0mmol)根據(jù)一般方法E氧化。經(jīng)FC(3∶2二氯甲烷/乙腈)得到黃色固體狀硝酮53(1.35g，51％，mp 89-90℃)。1H NMR(CDCl3) 7.68(s，1)，7.42(s，1)，6.40(s，1)，2.89(s，2)，1.48(s，6)；13C NMR(CDCl3)145.01，143.97，124.05，115.30，110.91，69.52，34.67，29.68，25.45；MS(EI，eE＝70eV)m/z 165(M+，基峰)，150，148，133，122，105，95，91，79，77，66，65，53，51，41；
元素分析C9H11NO2(MW＝165.2)，計(jì)算值C，65.44；H，6.71；N，8.48。
實(shí)測(cè)值C，65.43；H，6.70；N，8.51。
實(shí)施例116-甲氧基-1，1-二甲基-1H-異吲哚N-氧化物(58)2-(3-甲氧基苯基)-2-甲基丙腈(54)向冰冷的NaH(17.69g，60％的礦物油分散體，440mmol)的THF(500mL)漿液中在30分鐘內(nèi)加入3-甲氧基苯乙腈(25.0g，170mmol)的THF(25mL)溶液。將混合物攪拌30分鐘，然后在30分鐘內(nèi)加入CH3I(55.5g，390mmol)的THF(25mL)溶液。將反應(yīng)混合物升至室溫并繼續(xù)攪拌至GC分析表明反應(yīng)完全(25分鐘)。將反應(yīng)混合物倒入冷水/乙酸乙酯中，分液，將水相再次用乙酸乙酯提取。將有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)得到深色液體狀產(chǎn)物54(MW＝175.2)，31.0g(104％)，該產(chǎn)物不經(jīng)純化直接使用。
1H NMR(CDCl3)7.31(t，1，J＝8.1)，7.05-7.00(m，2)，6.90-6.85(m，1)，3.83(s，3)，1.72(s，6).
2-(3-甲氧基苯基)-2-甲基丙酸(55)根據(jù)一般方法G將粗品腈54(23.12g，132.1mmol)水解得到淺黃色固體狀的羧酸55，mp 46-47℃，20.76g(81％)。
1H NMR(CDCl3)7.24(t，1，J＝8.0)，7.00-6.95(m，2)，6.85-6.80(m，1)，3.81(s，3)，1.58(s，6)；13C NMR(CDCl3)182.90，159.57，145.44，129.40，118.27，112.41，111.68，55.19，46.24，26.14；MS(MW＝194.2，CI/CH4，eE＝70eV)m/z195(M+H)+，194，177，150，149(基峰)，137，121，109.
1-(1-異氰酸根合-1-甲基乙基)-3-甲氧基苯(56)將羧酸55(23.12g，132.1mmol)根據(jù)一般方法H進(jìn)行Curtius重排得到黃色液體狀異氰酸酯56(MW＝191.2)。該粗產(chǎn)物(16.84g，96％)不經(jīng)純化直接用于下一步反應(yīng)。1H NMR(CDCl3)7.26(t，1，J＝8.2)，7.00(m，2)，6.85-6.80(m，1)，3.80(s，3)，1.69(s，6)；13C NMR(CDCl3)159.64，147.56，129.52，116.70，112.02，111.06，60.71，55.26，32.97.
5-甲氧基-3，3-二甲基-2，3-二氫異吲哚-1-酮(57)，和7-甲氧基-3，3-二甲基-2，3-二氫異吲哚-1-酮(61)向冰冷的FeCl3(35.69g，220mmol)的干燥DCE(800mL)漿液中于45分鐘內(nèi)加入異氰酸酯56(19.12g，100.0mmol)在同種溶劑(100mL)中的溶液。加料結(jié)束后，等分液的GC分析表明反應(yīng)完全。加入水(600mL)并將形成的混合物劇烈攪拌。分液，將有機(jī)相用1M的酒石酸溶液洗滌(2×1L)，然后用鹽水洗滌一次。將溶液干燥(MgSO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)得到深色液體。將其通過(guò)FC(1∶4己烷/乙酸乙酯，然后是乙酸乙酯)純化得到淺黃色固體狀5-甲氧基異吲哚酮57，mp146-147℃，7.38g(39％)，以及黃色固體狀的區(qū)位異構(gòu)體7-甲氧基異吲哚酮61，mp155-158℃，2.85g(15％)。
571H NMR(CDCl3)7.74(d，1，J＝8.5)，7.00-6.95(m，1)，6.85(d，1，J＝2.2)，3.89(s，3)，1.54(s，6)；13C NMR(CDCl3)169.57，163.19，155.44，125.31，123.14，114.18，105.92，58.64，55.61，27.81；MS(MW＝191.2，EI，eE＝70eV)m/z 191(M+)，176(基峰)，161，133，118，88，77，63，42.
611H NMR(CDCl3)7.51(t，1，J＝8.0)，6.95(d，1，J＝8.0)，6.88(d，1，J＝8.0)，6.28(br s，1)，3.98(s，3)，1.51(s，6)；13C NMR(CDCl3)168.58，157.58，156.10，133.84，131.35，112.90，109.90，57.94，55.86，27.90；MS(MW＝191.2，EI，eE＝70eV)m/z 191(M+)，176(基峰)，162，158，133，118，103，89，63，42.
6-甲氧基-1，1-二甲基-1H-異吲哚N-氧化物(58)根據(jù)一般方法I將上一步反應(yīng)得到的內(nèi)酰胺57(170mg，0.889mmol)還原得到無(wú)色液體狀胺，未對(duì)其進(jìn)行純化或鑒定。將該粗產(chǎn)物(177mg，1.00mmol)根據(jù)一般方法E氧化。經(jīng)FC(97∶3二氯甲烷/異丙醇)得到淺黃色固體狀硝酮58(54mg，28％，mp 119-122℃)。1H NMR(CDCl3)7.61，(s，1)，7.29(d，1，J＝8.4)，6.90-6.85(m，1)，6.84(d，1，J＝2.3)，3.86(s，3)，1.56(s，6)；13C NMR(CDCl3)160.14，147.60，131.44，124.87，121.15，113.50，107.90，55.61，24.54；MS(MW＝191.2，EI，eE＝70eV)m/z 191(M+，基峰)，176，158，145，131，115，103，91，89，77，63，51，43.
實(shí)施例126-羥基-1，1-二甲基-1H-異吲哚N-氧化物(64)5-羥基-3，3-二甲基-2，3-二氫異吲哚-1-酮(62)將1M BBr3的二氯甲烷溶液(88.0mL，88.0mmol)在氮?dú)庀氯苡诟稍锏亩燃淄?。?0分鐘的時(shí)間將內(nèi)酰胺57(7.65g，40.0mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液滴加到該BBr3溶液中。將得到的混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物倒入水中并用乙酸乙酯提取(3次)。將有機(jī)相干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)，得到白色固體狀產(chǎn)物62(4.03g，57％)，mp 231-233℃，該產(chǎn)物無(wú)需純化。1H NMR(DMSO-d6，2.50ppm)8.18(s，1)，7.28(d，1，J＝8.5)，6.75(d，1，J＝1.6)，6.67(dd，1，J＝8.5，1.6)，1.25(s，6)；13C NMR(CDCl3+DMSO-，d6)169.30，161.06，155.40，124.68，121.53，115.39，107.26，57.98，27.47；MS(MW＝177.2，EI，eE＝70eV)m/z 177(M+)，163，162(基峰).
6-羥基-1，1-二甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚鹽酸鹽根據(jù)一般方法I將內(nèi)酰胺62(1.42g，8.01mmol)還原，所不同的是將HCl提取液進(jìn)行簡(jiǎn)單蒸發(fā)得到胺的鹽酸鹽(MW＝199.7)。可通過(guò)將殘余物反復(fù)溶于乙腈中并蒸發(fā)該混合物來(lái)除去殘余的水分。得到白色固體(1.6g，100％)，未對(duì)其進(jìn)一步純化。1H NMR(CDCl3+DMSO-d6)8.98(vbr s，2)，6.95(d，1，J＝9.0)，6.59(d，1，J＝9.0)，6.55(s，1)，4.02(s，2)，1.32(s，6)；13C NMR(DMSO-d6，39.43ppm)156.96，143.44，122.24，121.19，111.55，106.44，66.51，45.56，24.32.
6-羥基-1，1-二甲基-1H-異吲哚N-氧化物(64)將上一步反應(yīng)得到的胺鹽酸鹽(615mg，3.08mmol)根據(jù)一般方法E進(jìn)行氧化，所不同的是需加入1.0當(dāng)量的NaOH以就地生成游離的胺。經(jīng)FC(乙酸乙酯)得到白色固體狀硝酮64(60mg，11％，mp 225-230℃)。1H NMR(DMSO-d6，2.50ppm)9.48(s，1)，7.70(s，1)，7.20(d，1，J＝8.0)，6.82(d，1，J＝2.2)，6.80-6.75(m，1)，1.50(s，6)；13C NMR(DMSO-d6，39.43ppm)157.54，147.18，130.00，120.95，114.99，109.09，76.01，24.10；MS(MW＝177.2，EI，eE＝70eV)m/z 177[(M+)，基峰]，162，144，131，115，91，89，77，63，51，43.
實(shí)施例131，1-二甲基-1H-異吲哚N-氧化物(65)3，3-二甲基-5-(1-苯基-1H-四唑-5-基氧基)-2，3-二氫異吲哚-1-酮將內(nèi)酰胺62(1.17g，10.0mmol)和5-氯-1-苯基-1H-四唑(2.17g，12.0mmol)的干燥DMF(50mL)溶液用固體碳酸鉀(2.07g，15.0mmol)處理。將該混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，然后倒入水中并用乙酸乙酯提取(2次)。將有機(jī)相用水(3次)和鹽水(2次)洗滌，然后干燥(MgSO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)。將殘余物用二氯甲烷重結(jié)晶得到白色固體，mp 202-204℃。產(chǎn)物重量為3.10g(97％產(chǎn)率)。1H NMR(CDCl3)7.90(d，1，J＝8.3)，7.80(m，2)，7.60-7.55(m，4)，7.50-7.45(m，1)，6.78(s，1)，1.59(s，6)；13C NMR(CDCl3)168.45，158.80，156.15，155.27，132.83，129.81，128.77，125.78，122.33，119.44，112.11，59.14，53.39，27.59；MS(MW＝321.3，EI，eE＝70eV)m/z 321(M+)，306，293，278，261，250，236，222，208，187，176，161(基峰)，145，133，117，103，91，77，65，42.
3，3-二甲基異吲哚-1-酮(63)將上一步反應(yīng)得到的產(chǎn)物(3.10g，9.65mmol)溶于乙醇(80mL)，然后用5％Pd/C(400mg)在50psi H2及室溫下于Parr振蕩器上氫化過(guò)夜。濾除催化劑并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物通過(guò)FC(乙醚)純化得到白色固體狀63，mp159-160℃。以66％的的產(chǎn)率得到產(chǎn)物(1.03g)。
1H NMR(CDCl3)7.83(d，1，J＝7.6)，7.57(t，1，J＝7.6)，7.45-7.40(m，2)，1.57(s，6)；13C NMR(CDCl3)169.94，153.17，131.96，130.74，127.89，123.76，120.82，59.10，27.65；MS(MW＝161.2，EI，eE＝70eV)m/z 161(M+)，146(基峰)，128，103，91，77，65，51，42.
1，1-二甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚，鹽酸鹽根據(jù)一般方法I將內(nèi)酰胺63(1.42g，8.01mmol)還原，所不同的是將HCl提取液進(jìn)行簡(jiǎn)單蒸發(fā)得到胺的鹽酸鹽(MW＝183.7)?？赏ㄟ^(guò)將殘余物反復(fù)溶于乙腈中并蒸發(fā)該混合物來(lái)除去殘余的水分。得到白色固體(918mg，100％)，未對(duì)其進(jìn)一步純化。
1H NMR(CDCl3+DMSO-d6)10.30(br s，2)，7.40-7.35(m，3)，7.25-7.20(m，1)，4.55(s，2)，1.76(s，6)；13C NMR(CDCl3+DMSO-d6)132.02，128.10，127.90，122.26，120.25，110.43，60.98，46.78，25.51.
1，1-二甲基-1H-異吲哚N-氧化物(65)將上一步反應(yīng)得到的胺鹽酸鹽(918mg，5.00mmol)根據(jù)一般方法E進(jìn)行氧化，所不同的是需加入1.0當(dāng)量的NaOH以就地生成游離的胺。經(jīng)FC(8∶2二氯甲烷/乙腈)得到白色固體狀硝酮65(113mg，14％，mp 64-65℃)。1H NMR(CDCl3)7.66(s，1)，7.36(m，3)，7.27(m，1)，1.57(s，6)；13C NMR(CDCl3)145.43，132.33，131.50，128.36，127.54，120.68，120.12，77.62，24.46；MS(CI/CH4，eE＝70eV)m/z 162[(M+H)+，基峰]，144，128；元素分析C10H11NO(MW＝161.2)，計(jì)算值C，74.51；H，6.88；N，8.69。
實(shí)測(cè)值C，74.29；H，6.92；N，8.64。
實(shí)施例144-甲氧基-1，1-二甲基-1H-異吲哚N-氧化物4-甲氧基-1，1-二甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚鹽酸鹽根據(jù)一般方法I將內(nèi)酰胺61[參見(jiàn)實(shí)施例11](1.19g，6.22mmol)還原，所不同的是將HCl提取液進(jìn)行簡(jiǎn)單蒸發(fā)得到胺的鹽酸鹽(MW＝213.7)。可通過(guò)將殘余物反復(fù)溶于乙腈中并蒸發(fā)該混合物來(lái)除去殘余的水分。得到白色固體(1.33g，100％)，未對(duì)其進(jìn)一步純化。1H NMR(CDCl3+DMSO-d6)10.26(br s，2)，7.35(t，1，J＝7.7)，6.85-6.75(m，2)，4.47(brs，2)，3.86(s，3)，1.74(s，6)；13C NMR(CDCl3+DMSO-d6)143.55，129.51，124.98，118.85，111.64，108.88，67.38，53.91，44.16，24.20.
4-甲氧基-1，1-二甲基-1H-異吲哚N-氧化物將上一步反應(yīng)得到的胺鹽酸鹽(1.33g，6.21mmol)根據(jù)一般方法E進(jìn)行氧化，所不同的是需加入1.0當(dāng)量的NaOH以就地生成游離的胺。經(jīng)FC(乙酸乙酯)得到黃色固體狀硝酮(190mg，16％，mp149-152℃)。1H NMR(CDCl3)7.74(s，1)，7.35-7.25(m，1)，6.88(d，1，J＝8.9)，6.84(d，1，J＝8.9)，3.90(s，3)，1.55(s，6)；13C NMR(CDCl3)152.12，147.15，129.29，129.14，113.28，110.16，77.78，55.52，24.46；MS(MW＝191.2，EI，eE＝70eV)m/z 191[(M+)，基峰，176，158，134，131，128，115，91，77，65，63，51，43.
實(shí)施例153，3-二甲基-3，4-二氫異喹啉-4-醇，N-氧化物1-甲氧基-3-(1-甲基-1-硝基乙基)-1，3-二氫異苯并呋喃(71)10℃下，將金屬鈉(12.4g，0.539克原子)在90分鐘內(nèi)加入甲醇(1L)中。形成透明溶液后，移走冷卻水浴并加入2-硝基丙烷(256mL，2.85mmol)，隨后加入鄰苯二甲醛(120g，0.895mol)。將得到的溶液在室溫下攪拌過(guò)夜，加入1N硫酸將溶液酸化至pH2。形成白色沉淀。將混合物過(guò)濾，將濾餅用甲醇洗滌后棄去。將濾液在室溫下攪拌3小時(shí)，然后加入3N NaOH調(diào)至堿性。然后將溶液真空濃縮除去甲醇。將形成的含水溶液用乙醚提取2次。將合并的有機(jī)層用水洗滌一次，干燥(MgSO4)并真空濃縮。在50℃Kugelrohr蒸除剩余的溶劑(油泵真空)得到195g(106％理論產(chǎn)率，86％GC純)棕色液體，將其直接用于下一步反應(yīng)。非對(duì)映異構(gòu)體的比例為1∶1(1H NMR)?？蓪⒉糠执之a(chǎn)物通過(guò)快速硅膠色譜純化(9∶1環(huán)己烷/乙酸乙酯)得到淺黃色油狀的純凈71。1H NMR(CDCl3)7.42-7.36(m，3)，7.17-7.12(m，1)，6.25.和5.88(異構(gòu)體I，d和dd，1總共，J＝2.4，0.6，分別地)，6.01和5.72異構(gòu)體II，s和d，1總共，J＝0.6)，3.58和3.37(異構(gòu)體I和II，分別地，2s，3總共)，1.57和1.56和1.55和1.48(4s，6總共)；13C NMR(CDCl3)138.77，138.51，137.57，129.82，129.67，129.21，129.13，123.41，122.09，107.3 2，107.01，90.52，86.77，56.14，54.03，22.51，22.14，21.73，20.96；IR(純)1543，1464，1398，1373，1348，1113，1094，1026，974，756；MS，m/z 206[(M+H)+，基峰]，190，149；元素分析C12H15NO2，計(jì)算值C，60.75；H，6.37；N，5.90。實(shí)測(cè)值C，60.48；H，6.28；N，6.00。
N-[1-(3-甲氧基-1，3-二氫異苯并呋喃-1-基)-1-甲基-乙基]-羥胺(72)將鋁箔(Reynolds，1.29g，0.048克原子)撕成條并將各鋁條浸入氯化汞(II)(2.0g)的水(100mL)溶液中15秒進(jìn)行汞齊化。將各鋁條依次用無(wú)水乙醇和乙醚沖洗，然后將其加入盛有乙醚(100mL)和水(0.6mL，33mmol)的三頸圓底燒瓶中。然后用滴液漏斗向攪拌下的上述混合物中加入1(4.8g，23.0mmol)的乙醚(50mL)溶液，以保持劇烈回流的速度滴加。開(kāi)始發(fā)生的沸騰觀象在30分鐘內(nèi)停止。將混合物過(guò)濾并將濾液用2N氫氧化鈉洗滌2次，干燥(MgSO4)并真空濃縮得到淺綠色油(4.6g，88％)。經(jīng)快速硅膠色譜(1∶1乙酸乙酯/環(huán)己烷)得到回收的原料(0.48g，10％)和淺綠色玻璃樣的羥胺2(2.24g，43％)。1H NMR(CDCl3)7.39-7.31(m，4)，6.28和5.55(異構(gòu)體I，2d，1總共，J＝2.4)，6.03和5.41(異構(gòu)體II，2s，1總共)，3.62和13.34(異構(gòu)體I和II，分別地，2s，3總共)，1.32和0.88(異構(gòu)體I，2s，3總共)，1.27和0.80(異構(gòu)體I，2s，3總共)11C NMR(CDCl3)一種異構(gòu)體，140.06，138.22，129.17，128.07，123.16，122.34，106.51，85.64，61.10，53.16，20.44，19.07；d另一異構(gòu)體，139.70，138.47，129.06，127.96，123.13，122.27，106.99，60.32，56.10，20.95，19.43；IR(CHCl3)2980，2934，2907，2891，1375，1111，1092，1015，974，752；MS，m/z 224(M+H)+，192，149，119(基峰)，74.
3，3-二甲基-3，4-二氫異喹啉-4-醇，N-氧化物(C)向72(7.1g，31.8mmol)的THF(20mL)溶液中加入2N HCl(10mL)并將形成的溶液在室溫下攪拌45分鐘。再加入2N HCl(10mL)，將溶液攪拌30分鐘。將溶液緩慢倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中并用乙酸乙酯提取5次。將合并的有機(jī)層干燥(MgSO4)并真空濃縮得到6.1g黃色油。用乙酸乙酯/環(huán)己烷重結(jié)晶得到3.45g(57％)淺黃色結(jié)晶，mp 134-136℃。蒸發(fā)液并將殘余物用己烷/二氯甲烷重結(jié)晶，可以得到第2批產(chǎn)物(0.62g，10％)，使總產(chǎn)率達(dá)到67％。
1H NMR(CDCl3)7.62(s，1)，7.47-7.4 5(m，1)，7.3 8-7.30(m，2)，7.12-7.09(m，1)，4.58(d，1，J＝6.3)，3.93(d，1，J＝6.3)，1.47(s，3)，1.36(s，3)；13C NMR(CDCl3)13 2.81，132.72，129.82，128.86，127.28，126.56，125.15，74.71，71.55，23.31，19.02；IR(KBr)3154，3028，1562，1370，1269，1236，1169，1057，777；MS m/z 192[(M+H)+，基峰)，174；元素分析C11H13NO2，計(jì)算值C，69.09；H，6.85；N，7.32。實(shí)測(cè)值C，68.99；H，6.89；N，7.19。
實(shí)施例164-乙酰氧基-3，3-二甲基-3，4-二氫異喹啉，N-氧化物(76)向MDL 104824(3.3g，17mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中加入三乙胺(3.1mL，22mmol)、4-二甲氨基吡啶(210mg，1.7mmol)和乙酸酐(1.8mL，19mmol)。將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，然后倒入水中并用二氯甲烷提取(2次)。將有機(jī)相干燥(MgSO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)達(dá)到黃色糊狀物。將其通過(guò)FC(9∶1二氯甲烷/丙酮)純化達(dá)到1.83g淺黃色固體。用環(huán)己烷/乙酸乙酯重結(jié)晶得到淺黃色結(jié)晶狀的76(1.53g，38％)。
1H NMR(CDCl3)7.76(s，1)，7.45-7.25(m，3)，7.20-7.15(m，1)，5.89(s，1)，2.02(s，3)，1.57(s，3)，1.36(s，3)；IR(KBr)3048，2986，2936，1734，1593，1553，1454，1375，1287，1240，1211，1018，978，964，770；MS(EI，eE＝70 eV)m/z 233[(M+)，基峰]191，190，174，156，143，130，115，91，89，77，63，51，43；元素分析C13H15NO3(MW＝233.3)，計(jì)算值C，66.94；H，6.48；N，6.00。實(shí)測(cè)值C，66.95；H，6.36；N，5.97。
實(shí)施例173，3-二甲基-3H-異喹啉-4-酮，N-氧化物(77)氮?dú)庀?，向MDL 104824(3.22g，16.8mmol)的二氯甲烷(150mL)溶液中加入二甲亞砜(23.8mL，336mmol)。將形成的溶液冷卻至-45℃。在1 0分鐘內(nèi)加入草酰氯(11.4mL，131mmol)，使內(nèi)溫保持在-40℃以下。將該混合物攪拌并在-55℃到-40℃之間保持2小時(shí)。在15分鐘內(nèi)加入二異丙基乙基胺(44mL，250mmol)，使內(nèi)溫保持在-50℃以下。然后將反應(yīng)混合物升至室溫，隨后將其倒入水中并用二氯甲烷提取(2次)。將有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾并濃縮得到黃色油。將其濾過(guò)硅膠(乙酸乙酯)并用環(huán)己烷/乙酸乙酯重結(jié)晶得到黃色粉末狀的77(2.0g，63％)。
1H NMR(CDCl3)8.07(d+細(xì)微偶合，1，J＝7.8)，7.86(s，1)，7.69(dt.1，J＝7.6，1.3)，7.49(dt，1，J＝7.6，1.0)，7.31(d+細(xì)微偶合，1，J＝7.8)，1.74(s，6)；IR(KBr)3048，2996，1680，1601，1555，1487，1377，1366，1300，1281，1244，1179，891，872，758，660；MS(EI，eE＝70eV)m/z 191，189[(M+)，基峰]，172，158，145，144，130，115，104，89，77，63，51；
元素分析C13H15NO3(MW＝189.2)，計(jì)算值C，69.83；H，5.86；N，7.40。
實(shí)測(cè)值C，69.86；H，5.86；N，7.36。
實(shí)施例183，4-二氫異喹啉-4-醇-3-螺環(huán)己烷，N-氧化物(D)1-甲氧基-(3-(1-硝基環(huán)己基)-1，3-二氫異苯并呋喃(a)室溫下將金屬鈉(0.46g，0.02克原子)分批加入甲醇(35mL)中。在形成均相溶液后，加入硝基環(huán)己烷(12.92g，100mmol)，隨后加入鄰苯二甲醛(8.38g，60.0mmol)。將得到的溶液在室溫下攪拌過(guò)夜。加入1N硫酸將溶液pH調(diào)至2并在室溫下攪拌60分鐘。形成白色沉淀。將該混合物過(guò)濾，濾液中有油層分出，加入10％氫氧化鈉溶液將該濾液調(diào)至堿性。將溶液真空濃縮以除去甲醇，然后將形成的含水溶液用乙醚提取2次。將合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并濃縮。最后用真空泵干燥得到淺黃色油(17.29g，100％)。以下數(shù)據(jù)是從約1∶1的順式和反式非對(duì)映異構(gòu)體的混合物得到的。1H NMR(CDCl3)7.45-7.35(m，3)，7.20-7.10(m，1)，6.26和5.55(異構(gòu)體I，2d，1總共，J＝2.7，和2.3Hz，分別地)，5.98和5.38(異構(gòu)體II，2s，1總共)，3.59和3.36(異構(gòu)體I和II，分別地，2s，3總共)，2.59(m，2)，2.22(m，2)，1.95-1.10(m，6).
N-[1-(3-甲氧基-1，3-二氫-異苯并呋喃-1-基)-1-環(huán)己基]羥胺(b)按照以上所述制備鋁汞齊(由6g鋁箔制得)并將其加入盛有乙醚(600mL)和水(1.5mL，83mmol)混合物的三頸圓底燒瓶中。然后用滴液漏斗向攪拌下的上述混合物中加入上一步反應(yīng)得到的硝基縮醛(14.24g，51.4mmol)的乙醚(60mL)溶液，以保持劇烈回流的速度進(jìn)行滴加。開(kāi)始發(fā)生的沸騰現(xiàn)象在30分鐘內(nèi)停止。將混合物過(guò)濾并將濾液用1N氫氧化鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾并濃縮得到淺黃色油。將快速硅膠色譜(1∶1乙酸乙酯/己烷)得到淺黃色油狀的羥胺b(7.19g，53％)。以下數(shù)據(jù)是從約1∶1的順式和反式非對(duì)映異構(gòu)體的混合物得到的。1H NMR(CDCl3)7.45-7.30(m，4)，6.28和5.55(異構(gòu)體I，2d，1總共，J＝1.4)，6.03和5.41(異構(gòu)體II，2s，1總共)，3.62和3.34(異構(gòu)體I和II，分別地1y，2s，3總共)，1.32和0.88(異構(gòu)體II，2s，3總共)，1.27和0.80(異構(gòu)體I，2s，3總共)13C NMR(CDCl3)一種異構(gòu)體，140.06，138.22，129.17，128.07，123.16，122.3 4，106.51，85.64，61.10，53.16，20.44，19.07；另一異構(gòu)體，139.70，138.47，129.06，127.96，123.13，122.27，106.99，60.32，56.10，20.95，19.43；IR(CHCl3)2980，293 4，2907，2891，1375，1111，1092，1015，974，752；MS(CI/CH4，eE＝120eV)，m/z 264(M+H)+，262，246，230，214，199，171，150，149，135，118，114(基峰)，96，84.
3，4-二氫異喹啉-4-醇-3-螺環(huán)己烷，N-氧化物(D)向b(7.19g，27.3mmol)的THF(100mL)溶液中加入10％HCl(50mL)并將得到的溶液在室溫下攪拌20分鐘。然后將溶液緩慢倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中并用乙酸乙酯提取3次。將合并的有機(jī)層干燥(MgSO4)，過(guò)濾并濃縮，從此過(guò)程中形成淺黃色沉淀。收集沉淀并用己烷洗滌得到3.36g(5 3％)純凈產(chǎn)物。將濾液蒸發(fā)并將殘余物用乙酸乙酯/己烷重結(jié)晶得到第2批產(chǎn)物(0.72g，11％)，使總產(chǎn)率達(dá)到64％。mp 195-197℃。
1H NMR(CDCl3)7.65(s，1)，7.45-7.30(m，3)，7.20-7.10(m，1)，4.93(d，1，J＝7.3)，3.32(d，1，J＝7.3)，2.47(td，1，J＝16.0，4.9)，2.25-2.15(m，1)，2.00-1.85(m，1)，1.80-1.30(m，7)；13C NMR(CDCl3) 132.37，131.55，129.63，129.25，128.66，126.87，125.13，74.22，69.65，32.01，26.21，24.99，22.60，22.07；IR(KBr)3408，3073，3052，2980，2938，2926，2857，1593，1553，1454，1414，1260，1235，1179，1161，1107，1049，1030，912，851，764，613；MS(CI/CH4，eE＝120eV)，m/z 232[(M+H)+，基峰]，214，198，183；元素分析C14H17NO2(MW＝231.3)，計(jì)算值C，72.70；H，7.41；N，6.06。
實(shí)測(cè)值C，72.92；H，7.24；N，5.93。
實(shí)施例193H-異喹啉-4-酮-3-螺環(huán)己烷，N-氧化物(E)在-78℃及氮?dú)庀?，向草酰?0.50mL，5.73mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入二甲亞砜(1mL，14.1mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液。將得到的溶液在-78℃攪拌5分鐘。將上一步反應(yīng)得到的D(1.16g，5.00mmol)溶于溫?zé)岬腄MSO并隨后冷卻至室溫。將該溶液以保持內(nèi)溫在-40℃以下的速率加入上述試劑溶液中。將該混合物在-78℃的冷卻浴中攪拌15分鐘，然后用三乙胺(3.5mL，25mmol)的二氯甲烷(7mL)溶液處理，加料速率為保持內(nèi)溫低于-50℃。將混合物在-78℃的冷卻浴中攪拌15分鐘，然后升至室溫。將反應(yīng)混合物倒入水中并用二氯甲烷提取(2次)。將有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾并濃縮。將殘余物用己烷/乙酸乙酯結(jié)晶得到黃色針狀的E(0.85g，74％)。mp 92-93℃。1H NMR(CDCl3)8.03(d，1，J＝7.7)，7.89(s，1)，7.66(t，1，J＝7.6)，7.48(t，1，J＝7.6)，7.28(d，1，J＝7.5)，2.55-2.35(m，2)，2.15-1.65(m，6)，1.60-1.3 5(m，2)；13C NMR(CDCl3)196.96，135.25，132.19，129.64，127.22，125.39，125.27，111.06，80.19，31.92，24.02，21.30；IR(KBr)3441，3040，2942，2884，2868，2845，1694，1599，1553，1447，1366，1319，1281，1258，1182，1157，882，752，696，660，637；MS(EI，eE＝70eV)m/z229(M+)，213，212(基峰)，188，184，174，158，132，129，102，89，76，63，51，41；元素分析C14H15NO2(MW＝229.3)，計(jì)算值C，73.34；H，6.59；N，6.11。
實(shí)測(cè)值C，73.50；H，6.58；N，6.07。
實(shí)施例203，4-二氫異喹啉-4-醇-3-螺環(huán)戊烷，N-氧化物(F)1-甲氧基-3-(1-硝基環(huán)戊基)-1，3-二氫異苯并呋喃(e)如以上制備化合物a所述，將硝基環(huán)戊烷(5.00g，40.0mmol)與鄰苯二甲醛(3.76g，28.0mmol)在新制備的甲醇鈉(10mmol)甲醇溶液存在下進(jìn)行縮合。得到的淺綠色油(7.21g，98％)具有足夠的純度用于下一步反應(yīng)。以下數(shù)據(jù)是從約1∶1的順式和反式非對(duì)映異構(gòu)體的混合物得到的。
1H NMR(CDCl3)7.50-7.25(m，3)，7.10-7.00(m，1)，6.16和5.91(異構(gòu)體I，2d，1總共，J＝2.3)，5.93和5.80(異構(gòu)體II，s和d，分別地，1總共，J＝0.7Hz)，3.49和3.30(異構(gòu)體I和II，分別地，2s，3總共)，2.50-2.35(m，1)，2.30-1.90(m，3)，1.75-1.50(m，4)；IR(膜)1543，1464，1398，1373，1348，1113，1094，1026，974，756；MS(CI/CH4，eE＝120eV)，m/z 236(M-H)+，219，206，191，175，159，149(基峰)，131，118，91，73；元素分析C12H15NO2(MW＝237.3)，計(jì)算值C，60.75；H，6.37；N，5.90。
實(shí)測(cè)值C，60.48；H，6.28；N，6.00。
N-[1-(3-甲氧基-1，3-二氫-異苯并呋喃-1-基)-1-環(huán)戊基]羥胺(f)如以上制備化合物b所述，將上一步反應(yīng)得到的硝基縮醛(7.21g，27.5mmol)用鋁汞齊(從3.31g鋁箔制得)還原。經(jīng)快速色譜(1∶1乙酸乙酯/己烷)純化得到回收的原料(3.65g，35％)，以及油狀的羥胺f(4.14g，42％)。
1H NMR(CDCl3)7.40-7.30(m，4)，6.28和5.55(異構(gòu)體I，2d，1總共，J＝2.4)，6.03和5.41(異構(gòu)體II，2s，1總共)，3.62和3.34(異構(gòu)體I和II，分別地，2s，3總共)，1.32and 0.88(異構(gòu)體II，2s，3總共)1.27和0.80(異構(gòu)體I，2s，3總共)13C NMR(CDCl3)一種異構(gòu)體，140.06，138.22，129.17，128.07，123.16，122.34，106.51，85.64，61.10，53.16，20.44，19.07 ；另一異構(gòu)體，139.70，138.47，129.06，127.96，123.13，122.27，106.99，60.32，56.10，20.95，19.43；IR(CHCl3)2980，2934，2907，2891，1375，1111，1092，1015，974，752；MS(CI/CH4，eE＝120eV)，m/z250(M+H)+，248，246，218，200，185，172，149，135，119，100(基峰)，84，67.
3，4-二氫異喹啉-4-醇-3-螺環(huán)戊烷，N-氧化物(F)按照以上制備化合物D所述的方法將羥胺f(4.14g，16.7mmol)轉(zhuǎn)變成硝酮F。經(jīng)硅膠色譜(乙酸乙酯/己烷，然后是乙酸乙酯)得到白色固體狀產(chǎn)物(1.87g，52％)。mp 141-143℃。
1H NMR(CDCl3)7.67(s，1)，7.45-7.30(m，3)，7.15-7.10(m，1)，4.52(d，1，J＝7.3)，3.98(d，1，J＝7.3)，2.70-2.55(m，1)，2.15-2.05(m，1)，2.00-1.50(m，6)；13C NMR(CDCl3)132.67，132.52，129.58，129.08，127.80，127.16，125.16，82.15，74.29，36.56，30.54，26.60，25.86；IR(KBr)3397，3385，3351，3196，3117，3067，3000，2959，2872，1595，1561，1452，1397，1254，1240，1171，1119，1101，1063，1030，772；MS(EI，eE＝70eV)，m/z 218，217(M+)，200(基峰)，176，170，142，130，115，104，89，77，51，41；元素分析C13H15NO2(MW＝217.3)，計(jì)算值C，71.87；H，6.96；N，6.45。
實(shí)測(cè)值C，71.99；H，6.98；N，6.58。
實(shí)施例213H-異喹啉-4-酮-3-螺環(huán)戊烷，N-氧化物(G)根據(jù)以上制備化合物D(MDL 105809)所述的方法，將F(1.09g，5.02mmol)用DMSO(1.0mL，14.1mmol)、草酰氯(0.5mL，5.73mmol)和三乙胺(3.5mL，25mmol)氧化。將粗產(chǎn)物用己烷/乙酸乙酯重結(jié)晶兩次進(jìn)行純化，得到黃色固體狀的G(0.65g，60％)。mp 107-108℃。1H NMR(CDCl3)8.06(d，1，J＝7.8)，7.88(s，1)，7.68(t，1，J＝7.6)，7.47(t，1，J＝7.6)，7.30(d，1，J＝7.8)，2.55-2.45(m，2)，2.35-1.90(m，6)；13C NMR(CDCl3)197.89，135.60，132.12，132.03，129.61，127.17，125.71，125.01，86.91，40.42，27.82；IR(KBr)3441，2976，2945，2870，1682，1595，1555，1485，1360，1323，1281，1252，1181，893，855，756，662；MS(EI，eE＝70eV)m/z 215(M+)，198(基峰)，174，170，152，130，127，103，89，76，63，41；元素分析C13H13NO2(MW＝215.3)，計(jì)算值C，72.54；H，6.09；N，6.51。
實(shí)測(cè)值C，72.53；H，6.09；N，6.48。
權(quán)利要求
1.下式化合物及其可藥用鹽 其中R1和R2彼此獨(dú)立地表示C1-3烷基，或R1和R2一起形成C5-6亞烷基環(huán)或如下結(jié)構(gòu)的環(huán) Z表示(CHx)n，其中n是2，x是相應(yīng)于R3的0或1-2的整數(shù)；R3表示選自氫、C1-4烷基、OH、OAc或＝O的取代基；并且X所表示的環(huán)是選自如下的取代基 或 其中，暗的描影區(qū)表示與硝酮環(huán)連接的一側(cè)，R4、R5、R6和R7彼此獨(dú)立地選自氫、C1-3烷基、OH或C1-3烷氧基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X是 其中R4和R6彼此獨(dú)立地是氫或C1-C3烷基，R5是H、OH或C1-3烷氧基，R7是H或C1-3烷氧基。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1、R2、R4和R6是甲基，R5是OH并且R7是氫。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，所述化合物是3，3，6，8-四甲基-4，5-3H-苯并[c]吖庚因-7-醇N-氧化物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X是 并且R1和R2均是甲基。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X是 并且R1和R2均是甲基。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X是 并且R1和R2均是甲基。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X是 并且R1和R2均是甲基。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X是 并且R1和R2均是甲基。
10.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1和R2形成如下結(jié)構(gòu)的環(huán)
11.根據(jù)權(quán)利要求10的化合物，其中R4、R5、R6和R7均是氫。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的化合物，所述化合物是4，5-二氫-3H-苯并[c]吖庚因-3-螺-4′-四氫吡喃N-氧化物。
13.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1和R2形成一個(gè)C5亞烷基環(huán)。
14.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1和R2形成一個(gè)C6亞烷基環(huán)。
15.根據(jù)權(quán)利要求13的化合物，其中R4、R5、R6和R7均是氫。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的化合物，所述化合物是4，5-二氫-3H-苯并[c]吖庚因-3-螺環(huán)戊烷N-氧化物。
17.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R4、R5、R6和R7均是氫。
18.權(quán)利要求1所述化合物的藥物組合物，其中含有有效量的化合物與可藥用載體形成的混合物。
19.權(quán)利要求18所述的藥物組合物，是用于抑制氧化性組織損傷的。
20.權(quán)利要求18所述的藥物組合物，是用于治療中風(fēng)的。
21.權(quán)利要求18所述的藥物組合物，是用于治療心肌缺血的。
22.權(quán)利要求18所述的藥物組合物，是用于治療神經(jīng)變性性疾病的。
23.權(quán)利要求18所述的藥物組合物，是用于治療膿毒性休克的。
24.權(quán)利要求18所述的藥物組合物，是用于治療與涉及過(guò)度出血的物理創(chuàng)傷有關(guān)的組織損傷的。
25.權(quán)利要求18所述的藥物組合物，是用于抑制氧化性組織損傷的。
26.權(quán)利要求18所述的藥物組合物，是用于治療動(dòng)脈粥樣硬化的。
27.權(quán)利要求1的化合物在生產(chǎn)用于治療中風(fēng)的藥物中的用途。
28.權(quán)利要求1的化合物在生產(chǎn)用于治療心肌缺血的藥物中的用途。
29.權(quán)利要求1的化合物在生產(chǎn)用于治療神經(jīng)變性性疾病的藥物中的用途。
30.權(quán)利要求1的化合物在生產(chǎn)用于治療膿毒性休克的藥物中的用途。
31.權(quán)利要求1的化合物在生產(chǎn)用于治療與涉及過(guò)度出血的物理創(chuàng)傷有關(guān)的組織損傷的藥物中的用途。
32.權(quán)利要求1的化合物在生產(chǎn)用于治療動(dòng)脈粥樣硬化的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的環(huán)狀硝酮類化合物及其在預(yù)防由自由基所引起的氧化性組織損傷中的用途、它們治療多種疾病的用途，在所述疾病中自由基通過(guò)氧化作用引起組織損傷或破壞，此外本發(fā)明還涉及含有這些環(huán)狀硝酮類化合物的藥物組合物。
文檔編號(hào)A61K31/472GK1500779SQ200310104609
公開(kāi)日2004年6月2日 申請(qǐng)日期1996年8月15日 優(yōu)先權(quán)日1995年9月11日
發(fā)明者C·E·托馬斯, T·L·凡韋格, S·M·博文, R·A·法爾, A·A·卡爾, D·A·亞諾維克, C E 托馬斯, 亞諾維克, 凡韋格, 博文, 卡爾, 法爾 申請(qǐng)人:阿溫蒂斯藥物公司