專利名稱：噻吩異羥肟酸衍生物的對映異構(gòu)體及其作為hdac抑制劑的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的噻吩異羥肟酸衍生物的(R)-和(S)對映異構(gòu)體，它們的制備方法，含有它們的藥物及其制備，以及這些化合物作為藥學(xué)上的活性劑的應(yīng)用。
本發(fā)明的新化合物是組蛋白脫乙酰基酶(HDAC)的抑制劑。幾個HDAC抑制劑的結(jié)構(gòu)類別已經(jīng)被確定，并在Marks，P.A.，等，J.Nat.Cancer Inst.92(2000)1210-1216中綜述。更具體地，WO 98/55449，US 5,369,108，WO 01/38322，WO 01/70675和WO 02/22577中報導(dǎo)烷酰基，鏈烯基，鏈烯基烯基，芐基，和肉桂基異羥肟酸酯具有HDAC抑制活性。
本衍生物是新的式I化合物的(R)-和(S)對映異構(gòu)體及其生理上可接受的鹽 其中Ar是芳基或雜芳基，其可以是未取代的或被以下基團(tuán)取代1，2或3次鹵素；苯基；烷基；-O-烷基；-O-苯基；-O-(CH2)n-O-；-OH；-NO2；-NH2；-NH-烷基；-N(烷基)2；
-NH-C(O)-烷基；-SO2烷基；-SO2NH2；-SO2NH-烷基；-SO2N(烷基)2；-C(O)-NH2；-C(O)-NH-烷基；-C(O)-N(烷基)2；或-C(O)-烷基；R1是氫；苯基，烷基或鏈烯基，其可以是未取代的或被以下基團(tuán)取代一次或數(shù)次鹵素；-OH；-NO2；-NH2；-O-烷基；-O-芳基；-NH(烷基)；-N(烷基)2；嗎啉代；4-甲基哌嗪基；或芳基；或R1與Ar-基團(tuán)一起形成四氫萘-，1，2-二氫化茚-或二苯并環(huán)庚烷環(huán)；R2是氫或烷基；n是1，2或3。
轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)是細(xì)胞分化，增殖和編程性細(xì)胞死亡過程中的一件主要事件。一組基因的轉(zhuǎn)錄活化確定了細(xì)胞的終點，并且由于這個原因，轉(zhuǎn)錄被多種因子嚴(yán)格調(diào)節(jié)。在這個過程中涉及的它的一個調(diào)節(jié)機制是DNA三級結(jié)構(gòu)的改變，其通過調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子對它們的靶DNA片段的可接近性來影響轉(zhuǎn)錄。通過核心組蛋白的乙?；癄顩r來調(diào)節(jié)核小體的完整性。在低乙?；癄顟B(tài)下，核小體是緊密結(jié)合的，因此不能轉(zhuǎn)錄。另一方面，通過核心組蛋白的乙酰化松弛核小體，結(jié)果可以進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。組蛋白的乙?；癄顟B(tài)由組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)和組蛋白脫乙?；D(zhuǎn)移酶(HDAC)的活性的平衡來控制。近來，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)HDAC抑制劑在幾種類型的癌細(xì)胞，包括結(jié)腸癌、T-細(xì)胞淋巴瘤和紅白血病細(xì)胞中抑制生長和編程性細(xì)胞死亡。在編程性細(xì)胞死亡是癌癥發(fā)展的關(guān)鍵因素的條件下，作為編程性細(xì)胞死亡的有效誘導(dǎo)劑，HDAC抑制劑是治療癌癥的有前途的藥劑(Koyama，Y.，等，Blood 96(2000)1490-1495)。
我們現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)，某些噻吩異羥肟酸衍生物的對映異構(gòu)體顯示出改進(jìn)抗細(xì)胞增殖活性和HDAC抑制活性，并且意外地顯示出改進(jìn)的物理化學(xué)和藥物動力學(xué)性能，如較好的溶解性和改進(jìn)的血漿穩(wěn)定性。
本發(fā)明的目的是提供新的式I的噻吩異羥肟酸衍生物的(R)-和(S)對映異構(gòu)體，及其藥用鹽，上述化合物的制備，含有它們的藥物和它們的制造，以及上述化合物在疾病控制或預(yù)防中的應(yīng)用，該疾病特別是如上所述的疾病和病癥，或在制備相應(yīng)的藥物中的應(yīng)用。
在這里使用的術(shù)語“烷基”意思是一種直鏈或支鏈烴基團(tuán)，含有從1到8，優(yōu)選從1到6個碳原子，如甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基，仲丁基，叔丁基，正戊基，正己基，正庚基以及它們的異構(gòu)體。
術(shù)語“鏈烯基”意思是一種如上定義的不飽和烷基鏈，含有一或兩個孤立雙鍵，優(yōu)選一個雙鍵。例如1-丙烯基，2-丙烯基，1-丁烯基，2-丁烯基，1-戊烯基或1-己烯基。
在這里使用的術(shù)語“芳基”指苯基或萘基，如1-萘基，2-萘基或3-萘基。
術(shù)語“雜芳基”意思是一種5到10元環(huán)的，單-或二環(huán)的芳族環(huán)，其含有的環(huán)可達(dá)到3，優(yōu)選1或2個雜原子，其獨立地選自N，O或S，并且環(huán)上剩余的原子是碳原子。此類雜芳基的例子是噻吩基，呋喃基，吡咯基，咪唑基，吡啶基，嘧啶基，吡嗪基，噠嗪基，三嗪基，噻吩基，吡唑基，噁唑基，異噁唑基，噻唑基，異噻唑基，噻二唑基，噁二唑基，三唑基，吲哚基，喹啉基，異喹啉基，苯并呋喃基。
在這里使用的術(shù)語“鹵素”指氟，氯，溴或碘。
本發(fā)明的一個實施方案是式I的(R)-和(S)對映異構(gòu)體及其生理上可接受的鹽，其中Ar是芳基或噻吩-2-基基團(tuán)，其任選地被以下基團(tuán)取代1或2次；
鹵素；苯基；烷基；-O-烷基；-O-(CH2)n-O-；-OH；-NO2；-NH2；-NH-烷基；-N(烷基)2；-NH-C(O)-烷基；-SO2烷基；-SO2NH2-SO2NH-烷基；-SO2N(烷基)2；-C(O)-NH2；-C(O)-NH-烷基；-C(O)-N(烷基)2；-C(O)-烷基；R1是氫；或烷基，其任選地被以下基團(tuán)取代鹵素；-OH；-NO2；-NH2；-O-烷基；-O-芳基；-NH(烷基)；-N(烷基)2；嗎啉代；4-甲基哌嗪基；或芳基；R2是烷基或氫；n是1，2或3。
此類(R)對映異構(gòu)體是，例如(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-噻吩-2-基-乙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(5-甲基-噻吩-2-基)-乙基]-酰胺}，或(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺-5-[(1-聯(lián)苯基-4-基-乙基)-酰胺]。
此類(S)對映異構(gòu)體是，例如(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-噻吩-2-基-乙基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺-5-{[1-(5-甲基-噻吩-2-基)-乙基]-酰胺}，或(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-聯(lián)苯基-4-基-乙基)-酰胺]。
本發(fā)明的另一個實施方案是式I的(R)-和(S)對映異構(gòu)體及其生理上可接受的鹽，其中Ar是苯基，其被以下基團(tuán)取代一次鹵素；烷基；-O-烷基；-OH-NH2；-NH-烷基；-N(烷基)2；-NH-C(O)-烷基；-SO2烷基；-SO2NH2；-SO2NH-烷基；-SO2N(烷基)2；-C(O)-NH2；-C(O)-NH-烷基；-C(O)-N(烷基)2；-C(O)-烷基；R1是氫；或烷基；
R2是氫。
此類(R)對映異構(gòu)體是，例如(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-對甲苯基-乙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-氯-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-溴-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-酰胺}，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-酰胺}，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(4-三氟甲基-苯基)-乙基]-酰胺}，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-叔丁基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(4-甲磺酰基-苯基)-乙基]-酰胺}，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(3-氨基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(2-氨基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-乙基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-氨基甲酰基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，或(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-({1-[4-(3-甲基-丁基氨基甲酰基)-苯基]-乙基}-酰胺)。
此類(S)對映異構(gòu)體是，例如(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-對甲苯基-乙基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-氯-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-溴-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-酰胺}，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-酰胺}，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(4-三氟甲基-苯基)-乙基]-酰胺}，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-叔丁基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(4-甲磺?；?苯基)-乙基]-酰胺}，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(3-氨基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(2-氨基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，
(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-乙基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-氨基甲?；?苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，或(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{1-[4-(3-甲基-丁基氨基甲?；?-苯基]-乙基}-酰胺)。
本發(fā)明的又一個實施方案是式I的(R)-和(S)對映異構(gòu)體及其生理上可接受的鹽，其中Ar是苯基；R1是苯基；或烷基，其任選地被以下基團(tuán)取代鹵素；-OH；-NH2；-O-烷基；-O-芳基；-NH(烷基)；-N(烷基)2；嗎啉基；4-甲基哌嗪基；苯基；R2是氫或烷基。
此類(R)對映異構(gòu)體是，例如(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-乙基)-酰胺](R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-丙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-羥基-1-苯基-乙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(3-羥基-1-苯基-丙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-甲氧基-1-苯基-乙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-二甲基氨基-1-苯基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-2-吡咯烷-1-基-乙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-嗎啉-4-基-1-苯基-乙基)-酰胺]，
(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-[(1，2-二苯基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-戊基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-丁基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-甲基-1-苯基-丙基)-酰胺]，或(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(3-甲基-1-苯基-丁基)-酰胺]。
此類(S)對映異構(gòu)體是，例如(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-乙基)-酰胺]，(S)-噻吩2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-丙基)酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-羥基-1-苯基-乙基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(3-羥基-1-苯基-丙基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-甲氧基-1-苯基-乙基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-二甲基氨基-1-苯基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-(1-苯基-2-吡咯烷-1-基乙基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[2-嗎啉-4-基-1-苯基-乙基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-[(1，2-二苯基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-戊基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-丁基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-甲基-1-苯基-丙基)-酰胺]，或(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(3-甲基-1-苯基-丁基)-酰胺]。
本發(fā)明的另一個實施方案是式I的(R)-和(S)-對映異構(gòu)體，其中Ar是萘基；R1和R2獨立地是氫；烷基-或鏈烯基，其可以是未取代的或被以下基團(tuán)取代一次或數(shù)次烷基；鹵素；-OH；-NO2；-NH2；-O-烷基；-O-芳基；
-NH(烷基)；-N(烷基)2。
此類(R)-對映異構(gòu)體，例如(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-萘-1-基-乙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-萘-2-基-乙基)-酰胺]。
此類(S)-對映異構(gòu)體，例如(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-萘-1-基-乙基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-萘-2-基-乙基)-酰胺]。
本發(fā)明的另一個實施方案是式I的(R)-和(S)-對映異構(gòu)體及其生理上可接受的鹽，其中Ar和R1一起形成四氫萘基；2，3-二氫化茚基；或二苯并環(huán)庚烷基；其全部任選地被以下基團(tuán)取代烷基；鹵素；-OH；-NO2；-NH2；-O-烷基；-O-芳基；-NH(烷基)；-N(烷基)2；R2是氫。
此類(R)-對映異構(gòu)體，例如(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-(2，3-二氫化茚)-1-基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1，2，3，4-四氫-萘-1-基)-酰胺]。
此類(S)-對映異構(gòu)體，例如(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-(2，3-二氫化茚)-1-基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1，2，3，4-四氫-萘-1-基)-酰胺]。
本發(fā)明還有另一個實施方案是式I的(R)-和(S)-對映異構(gòu)體及其生理上可接受的鹽，其中Ar可以是未取代的或被以下基團(tuán)取代1，2或3次的雜芳基鹵素；苯基；烷基；-O-烷基；-O-苯基；-O-(CH2)n-O-；-OH；-NO2；-NH2；-NH-烷基；-N(烷基)2；-NH-C(O)-烷基；-SO2烷基；-SO2NH2；-SO2NH-烷基；-SO2N(烷基)2；-C(O)-NH2；-C(O)-NH-烷基；-C(O)-N(烷基)2；或-C(O)-烷基；R1是氫；苯基，烷基或鏈烯基，其可以是未取代的或被以下基團(tuán)取代一次或數(shù)次鹵素；-OH；-NO2；-NH2；-O-烷基；-O-芳基；-NH(烷基)；
-N(烷基)2；嗎啉代；4-甲基哌嗪基；或芳基；或R1與Ar-基團(tuán)一起形成四氫萘-，1，2-二氫化茚-或二苯并環(huán)庚烷環(huán)；R2是氫或烷基；n是1，2或3。
本發(fā)明還有另一個實施方案是式I的(R)-和(S)-對映異構(gòu)體及其生理上可接受的鹽，其中Ar可以是未取代的或被以下基團(tuán)取代1，2或3次的雜芳基鹵素；苯基；烷基；-O-烷基；-O-苯基；-O-(CH2)n-O-；-OH；-NO2；-NH2；-NH-烷基；-N(烷基)2；-NH-C(O)-烷基；-SO2烷基；-SO2NH2；-SO2NH-烷基；-SO2N(烷基)2；-C(O)-NH2；-C(O)-NH-烷基；-C(O)-N(烷基)2；或-C(O)-烷基；R1是氫；
R2是烷基；n是1，2或3。
本發(fā)明還有另一個實施方案是式I的(R)-和(S)-對映異構(gòu)體及其生理上可接受的鹽，其中Ar是苯并呋喃-2-基；異噁唑-3-基；吡啶-2-基；吡啶-3-基；吡啶-4-基；呋喃-2-基；吡咯-3-基；其全部可以是未取代的或被以下基團(tuán)取代1或2次苯基；或烷基；R1是氫；和R2是烷基。
此類(R)-對映異構(gòu)體，例如(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-[(1-苯并呋喃-2-基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(5-苯基-異噁唑-3-基)-乙基]-酰胺}，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-2-基-乙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-呋喃-2-基-乙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-3-基-乙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(1-甲基-1H-吡咯-3-基)-乙基]-酰胺}，或(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-4-基-乙基)-酰胺]。
此類(S)對映異構(gòu)體，例如(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-[(1-苯并呋喃-2-基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(5-苯基-異噁唑-3-基)-乙基]-酰胺}，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-2-基-乙基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-呋喃-2-基-乙基)酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-3-基-乙基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(1-甲基-1H-吡咯-3-基)-乙基]-酰胺}，或(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-4-基-乙基)-酰胺]。
本發(fā)明還有另一個實施方案是式I的(R)-和(S)-對映異構(gòu)體，其中(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺和(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺。
本發(fā)明還有另一個實施方案是式I的(R)-和(S)對映異構(gòu)體的立體選擇性的制備方法，該方法通過在適當(dāng)?shù)幕罨瘎┑拇嬖谙聦⑹絀II的化合物與對映異構(gòu)體純的式III-A的(R)-或(S)-胺反應(yīng) 其中R3是甲基；Ar-C(R1)(R2)-NH2 III-A，其中Ar，R1和R2具有以上定義的含義，得到式II的化合物 它用羥胺或它的鹽酸鹽處理，分別得到式I的對映異構(gòu)體純的化合物；并且如果需要，轉(zhuǎn)化所述化合物為它的藥用鹽。
式I的化合物，或它的藥用鹽，可以通過使用任何公知的、化學(xué)上相關(guān)化合物的制備方法制備。此類方法，當(dāng)用于制備一種式I的噻吩異羥肟酸衍生物或它的一種藥學(xué)上可接受的鹽時，作為本發(fā)明的另一特征提供，并通過以下代表性的實施例說明，其中，除非另有說明，Ar，R1和R2具有任何如上定義的含義。必需的起始原料可以通過有機化學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)程序獲得。此類起始原料的制備伴隨非-限制性的實施例而被描述。另外，必需的起始原料可通過那些有機化學(xué)普通技術(shù)說明的類似程序獲得。
(a)一個優(yōu)選的制備式I的化合物方法包括使式II的化合物與羥胺在適當(dāng)堿的存在下反應(yīng)， 其中Ar，R1和R2具有如上定義的含義，并且R3是一種(C1-C4)的烷基，優(yōu)選甲基或乙基。反應(yīng)是在惰性溶劑或稀釋劑如甲醇或乙醇中，溫度0℃和100℃之間，方便地在或接近環(huán)境溫度下進(jìn)行，pH在10和12之間。一種合適的堿是，例如，一種醇化物，例如，甲醇鈉。并不是在原位產(chǎn)生羥胺，它可以被獨立地釋放和可以作為有機溶劑的溶液中使用，至于例子醇，如甲醇或乙醇。
式II的化合物從式III的化合物制備，其中R3具有如上定義的含義。
這些反應(yīng)典型地包括一種兩步一罐程序(two-step one-pot)。第一步，活化式III的羧酸酯。反應(yīng)是在一種惰性溶劑或稀釋劑，例如，在二氯甲烷，二噁烷，或四氫呋喃中進(jìn)行，其中存在活化劑。一種合適的反應(yīng)性酸的衍生物是，例如，一種酰鹵，例如一種由酸和一種無機?；确磻?yīng)形成的酰氯，例如亞硫酰氯；一種混合酐，例如一種由酸和氯甲酸酯，如氯甲酸異丁酯，反應(yīng)形成的酸酐；一種由酸和一種苯酚如五氟苯酚反應(yīng)形成的活性酯類；一種由酸和N-羥基苯并三唑反應(yīng)形成的活性酯類；相應(yīng)的羰基咪唑到III由酸和N，N′-羰基二咪唑反應(yīng)形成；一種由酸和一種疊氮化物，如聯(lián)苯基磷酰疊氮化物反應(yīng)形成的酰疊氮；一種由酸和一種氰化物，如二乙基磷?；杌锓磻?yīng)形成的酰基氰；或酸和一種碳化二亞胺，如二環(huán)己基碳二亞胺的反應(yīng)產(chǎn)物，或酸和雙-(2-氧代-3-噁唑烷基)-磷酰基氯的反應(yīng)產(chǎn)物。反應(yīng)在-30℃和60℃之間進(jìn)行，方便地在低于0℃。第二步，一種對映異構(gòu)體純的式Ar-C(R1)(R2)-NH2的胺，其中R1和R2具有如上定義的含義，在活化溫度加入到溶液中，溫度慢慢調(diào)節(jié)到環(huán)境溫度。一種合適的清除劑堿，如三乙胺，或二異丙基乙胺可以被加到反應(yīng)混合物中。這些方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的方法。原則上，在肽的化學(xué)中，用于酰胺合成的所有方法，被描述在，如Houben-Weyl，″Methoden der organischenChemie″，Vols.XV/1和XV/2，Georg Thieme Verlag，Stuttgart，均可以應(yīng)用。
式III的化合物在文獻(xiàn)，如US 2,680,31和J.Heterocycl.Chem.28(1991)17中作為實施例被描述。這些單酯通常是選擇性皂化該二酯類或氧化該相應(yīng)醛而制備，但是也可以用其它本領(lǐng)域人員熟悉的方法。
對映異構(gòu)體純的式Ar-C(R1)(R2)-NH2的胺，其中R1和R2具有如上定義的含義，是市場上可買到的或可以通過，如J.Am.Chem.Soc.64(1942)477；J.Am.Chem.Soc.105(1983)1578；或Hanano，T.，等，Bioorg.Med.Chem.Lett.10(2000)881-884中描述的合成化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)程序而制備。式Ar-C(R1)(R2)-NH2的外消旋胺，其中R1和R2具有如上定義的含義，可以單獨的由已知的方法分離成它們的對映異構(gòu)體，例如，在Rasor，P.，和Voss，E.，Applied Catalysis A 221(2001)145-158和Iglesias，L.E.，等，TetrahedronAsymmetry 8(1997)2675-2677中描述的外消旋物的酶分離。
(b)另一個用于制備式I的化合物的優(yōu)選方法是式IV化合物的脫保護(hù)反應(yīng) 其中Y是一種合適的保護(hù)基并且Ar，R1和R2具有如上定義的含義。
式IV的化合物是新的并包括在本發(fā)明內(nèi)。
合適的保護(hù)基可以是芐基-，對甲氧苯甲基-，叔丁氧羰基-，三苯甲基-，或甲硅烷基基團(tuán)，如三甲基甲硅烷基-或二甲基-叔丁基甲硅烷-基團(tuán)。反應(yīng)的進(jìn)行取決于保護(hù)基的類型。當(dāng)保護(hù)基是一種芐基-或?qū)籽醣郊谆鶊F(tuán)，反應(yīng)是一種在惰性溶劑如醇，如甲醇或乙醇中的氫解進(jìn)行，該反應(yīng)在環(huán)境溫度和壓力下，存在一種貴金屬催化劑，如鈀，附在一種合適的載體，如碳，硫酸鋇，或碳酸鋇上。當(dāng)保護(hù)基是叔丁氧羰基，三苯甲基，或一種甲硅烷基基團(tuán)，如三甲基甲硅烷基-或二甲基-叔丁基甲硅烷基，反應(yīng)是在存在酸，溫度-20℃和60℃之間，優(yōu)選在0℃和環(huán)境溫度之間進(jìn)行。酸可以是氫氯酸溶于一種惰性溶劑的溶液，如二乙醚或二噁烷的溶液，或三氟乙酸溶于二氯甲烷。當(dāng)保護(hù)基是一種甲硅烷基基團(tuán)，如三甲基甲硅烷基或二甲基叔-丁基甲硅烷基團(tuán)，反應(yīng)還可以是在存在一種氟化物源，如氟化鈉或四丁基胺氟化物溶于一種惰性溶劑，如二氯甲烷中進(jìn)行。不必要所有的保護(hù)基Y適合所有的R1或R2基團(tuán)。在一些情況下不允許使用一定的保護(hù)基，需要使用其它保護(hù)基Y或其它制備方法。
式IV化合物是由式V化合物與式VI化合物反應(yīng)獲得的。
其中Y是一種合適的如上所述的保護(hù)基。這些反應(yīng)典型地包括一種兩步一罐程序。第一步，活化結(jié)構(gòu)式V的羧酸酯。該反應(yīng)是在一種惰性溶劑或稀釋劑，例如，在二氯甲烷，二噁烷，或四氫呋喃中進(jìn)行，其中存在活化劑。一種合適的反應(yīng)性酸的衍生物是，例如，一種酰鹵，例如一種由酸和一種無機酰基氯反應(yīng)形成的酰氯，例如亞硫酰氯；一種混合酐，例如一種由酸和氯甲酸酯，如氯甲酸異丁酯，反應(yīng)形成的酸酐；一種由酸和一種苯酚如五氟苯酚反應(yīng)形成的活性酯類；一種由酸和N-羥基苯并三唑反應(yīng)形成的活性酯類；一種由酸和一種疊氮化物，如聯(lián)苯基磷酰疊氮化物反應(yīng)形成的酰疊氮；一種由酸和一種氰化物，如二乙基磷酰基氰化物反應(yīng)形成的?；?；或酸和一種碳化二亞胺，如二環(huán)己基碳二亞胺的反應(yīng)產(chǎn)物，或酸和雙-(2-氧代-3-噁唑烷基)-磷酰基氯的反應(yīng)產(chǎn)物。反應(yīng)在-30℃和60℃之間進(jìn)行，方便地在低于0℃。在第二步，在活化溫度下將化合物VI加入到溶液中，并且溫度被慢慢地調(diào)節(jié)到環(huán)境溫度。這些方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的方法。原則上，在肽的化學(xué)中，用于酰胺合成的所有方法，被描述在，如Houben-Weyl，″Methoden der organischen Chemie″，Vols.XV/1 and XV/2均可使用。
結(jié)構(gòu)式V化合物由式II化合物水解而制備。進(jìn)行的水解條件取決于基團(tuán)R3的性質(zhì)。當(dāng)R3是一種甲基或乙基，反應(yīng)在存在堿的條件下進(jìn)行，例如，氫氧化鋰，氫氧化鈉，或氫氧化鉀溶于一種惰性溶劑或稀釋劑，例如，甲醇或乙醇。當(dāng)R3是叔丁基，反應(yīng)在存在酸的條件下進(jìn)行，例如，氫氯酸溶于一種惰性溶劑如二乙醚或二噁烷的溶液，或三氟乙酸溶于二氯甲烷。當(dāng)R3是芐基，反應(yīng)在存在一種貴金屬催化劑，如鈀或鉑，附在一種合適的載體，如碳上的條件下進(jìn)行氫解反應(yīng)。不一定所有的水解方法均適合R1和R2基團(tuán)。如果這些基團(tuán)的特征不允許使用特定的水解方法，需要使用其它制備方法。
(c)另一個優(yōu)選的制備式I化合物的方法是式V化合物與羥胺的反應(yīng)。這些反應(yīng)典型地包括一種兩步一罐程序。第一步，活化結(jié)構(gòu)式V的羧酸酯。該反應(yīng)是在一種惰性溶劑或稀釋劑，例如，在二氯甲烷，二噁烷，或四氫呋喃中進(jìn)行，其中存在活化劑。一種合適的反應(yīng)性酸的衍生物是，例如，一種酰鹵，例如一種由酸和一種無機酰基氯反應(yīng)形成的酰氯，例如亞硫酰氯；一種混合酐，例如一種由酸和氯甲酸酯，如氯甲酸異丁酯，反應(yīng)形成的酸酐；一種由酸和一種苯酚如五氟苯酚反應(yīng)形成的活性酯類；一種由酸和N-羥基苯并三唑反應(yīng)形成的活性酯類；一種由酸和一種疊氮化物，如聯(lián)苯基磷酰疊氮化物反應(yīng)形成的酰疊氮；一種由酸和一種氰化物，如二乙基磷酰基氰化物反應(yīng)形成的?；?；或酸和一種碳化二亞胺，如二環(huán)己基碳二亞胺的反應(yīng)產(chǎn)物，或酸和雙-(2-氧代-3-噁唑烷基)-磷?；鹊姆磻?yīng)產(chǎn)物。反應(yīng)在-30℃和60℃之間進(jìn)行，方便地在低于0℃。第二步，在活化溫度下羥胺加入到溶液中，并且溫度被慢慢地調(diào)節(jié)到環(huán)境溫度。這些方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的方法。原則上，在肽的化學(xué)中，用于酰胺合成的所有方法，被描述在，如Houben-Weyl，″Methoden derorganischen Chemie″，Vols.XV/1 and XV/2均可使用。
(d)又一個優(yōu)選的制備式I化合物的方法是根據(jù)方法(a)，(b)，(c)或(e)合成的外消旋化合物應(yīng)用于式Ar-C(R1)(R2)-NH2的外消旋胺，其中R1和R2具有如上定義的含義。該外消旋物可以分離成兩種對映異構(gòu)體，在最終產(chǎn)品或式II的前體的任一階段。分離可以通過一種分析性的、半制備的或制備級的色譜法進(jìn)行，使用合適的旋光固定相和合適的洗脫劑。合適的旋光固定相包括，但不限于，硅石(如ChiraSper，Merck；Chiralpak OT/OP，Baker)，纖維素酯或氨基甲酸酯類(如Chiracel OB/OY，Baker)或其它(如Crownpak，Daicel或Chiracel OJ-R，Baker)。其它可以使用的用于對映異構(gòu)體分離的方法，同樣由式I的化合物和其它旋光化合物形成非對映的化合物，如樟腦磺酸或番木鱉堿，在脫離旋光試劑之后，這些非對映的化合物被分離。
(e)式I的化合物還可以通過固相支持合成方法制備。2，5-噻吩二羧酸與和樹脂結(jié)合的羥胺(-O-NH2)部分反應(yīng)，如一種王氏樹脂(Wang-O-NH2樹脂，由EMC microcollections，Tübingen供應(yīng))形成結(jié)合樹脂的異羥肟酸。第二碳酸結(jié)構(gòu)部分與胺Ar-C(R1)(R2)-NH2通過如Houben-Weyl，″Methoden der organischenChemie″，Vols.XV/1和XV/2中描述的形成酰胺鍵的標(biāo)準(zhǔn)方法反應(yīng)。此后，異羥肟酸從固體載體中釋放出來。這些可以例如用TFA完成。典型地，異羥肟酸的裂解是通過環(huán)境溫度下，存在三異丙基硅烷時，在二氯甲烷中用50％TFA處理樹脂獲得。如有必要，粗產(chǎn)物可以通過LC-MS提純。
本發(fā)明的化合物可以以它們的藥用鹽形式存在。術(shù)語“藥用鹽”指常規(guī)的酸-加成鹽或堿-加成鹽，保留式I化合物的生物有效性和性能，并形成自合適的、非毒性的有機或無機酸，或有機或無機堿。酸-加成鹽的例子包括那些源自無機酸，如氫氯酸，氫溴酸，氫碘酸，硫酸，氨基磺酸，磷酸和硝酸，和那些源自有機酸，如對甲苯磺酸酸，水楊酸，甲磺酸，草酸，琥珀酸，檸檬酸，蘋果酸，乳酸，富馬酸，等等。堿加成鹽例子包括那些源自銨，鉀，鈉和季銨氫氧化物，例如，氫氧化四甲銨。藥物化合物(也就是一種藥物)的化學(xué)改性成鹽是藥物化學(xué)工作者公知的技術(shù)，得到化合物改進(jìn)的物理和化學(xué)穩(wěn)定性，吸濕性，流動性和溶解性。參見，如Ansel，H.，等，Pharmaceutical Dosage Forms andDrug Delivery Systems，6th ed.，1995，pp.196和1456-1457。
本發(fā)明的一個目的是藥物組合物，含有藥理學(xué)有效量的一種或多種式I的對映異構(gòu)體純的化合物，其與藥學(xué)上可接受的賦形劑和/或稀釋劑混合。
本發(fā)明的另一方面是提供一種藥物，含有一種或多種對映異構(gòu)體純的式I化合物作為活性成分和藥學(xué)上可接受的輔藥。此類藥物或藥物組合物可能以一種適合口服的形式，例如作為片劑，包衣片劑，糖錠劑，膠囊劑，溶液乳劑或混懸劑；作為無菌溶液，混懸劑或乳劑用于胃腸外的注射(包括靜脈內(nèi)，皮下的，肌內(nèi)，血管內(nèi)的或輸注)；作為一種軟膏或乳膏用于局部給藥或作為栓劑用于直腸的給藥。這些藥物制劑可以通過加工本發(fā)明化合物與藥學(xué)惰性的無機或有機載體獲得。例如，乳糖，玉米淀粉或它的衍生物，滑石，硬脂酸或它的鹽等均可被用作片劑，包衣片劑，糖錠劑，和硬明膠膠囊的載體。軟明膠膠囊的合適載體為，例如，植物油，蠟，脂肪，半固體和液體多元醇等等。然而，取決于活性物質(zhì)的性質(zhì)在軟明膠膠囊的情況下通常不需要載體。用于生產(chǎn)溶液和糖漿劑的合適載體為，例如，水，多元醇，甘油，植物油等等。栓劑的合適載體為，例如，天然的或硬化油，蠟，脂肪，半液體的或液體多元醇等等。
另外，藥物制劑可以含有防腐劑，增溶劑，穩(wěn)定劑，潤濕劑，乳化劑，甜味劑，著色劑，調(diào)味劑，用于改變滲透壓的鹽，緩沖劑，掩蔽劑或抗氧化劑。它們還可以含有其它在治療上有價值的物質(zhì)。
一種優(yōu)選的藥物制劑，可以通過使用下列片劑配方獲得項目 成分 Mg/片1 化合物1 251002 無水乳糖 73353 交聯(lián)羧甲纖維素鈉 6 84 聚乙烯基吡咯烷酮K30 5 65 硬脂酸鎂 1 1總重量140 150步驟1、在一種合適的混合器中混合1，2和3項15分鐘。
2、使步驟1的混合物粉末與20％聚乙烯基吡咯烷酮K30溶液(項目4)成粒。
3、在50℃干燥來自步驟2的顆粒。
4、步驟3的顆粒通過一種合適的磨碎設(shè)備。
5、加項目5到步驟4中磨碎了的顆粒里并混合3分鐘。
6、在合適的壓力下，壓縮步驟5的顆粒。
化合物1在實施例1中描述。
另一個優(yōu)選的藥物制劑是一種本發(fā)明化合物的微混懸劑。為獲得該微混懸劑，使用下列材料每注射劑(溶解，用一種孔隙尺寸0.45μm過濾并高壓滅菌)的7.5％改性凝膠XF 20(Braun)的水溶液，過濾器(定做的，篩目尺寸100μm)，過濾支架，連接，洗過的一種直徑0.25mm的玻璃珠并且熱消毒Retsch磨碎機。
為制備一批典型的6244mg的化合物1，如實施例1描寫，兩個50ml燒瓶中加入30g重量的玻璃珠，用一種刮刀和渦旋分散。然后10ml凝膠載體被加入到每一瓶子。該瓶子被渦旋，包裹鋁箔避光保護(hù)。在一種Retsch磨碎機中，內(nèi)容物質(zhì)以30/s被磨碎14小時。然后微混懸劑從珠粒中提取并在過濾支架上雙層過濾(100μm)，連接到一個接受瓶，通過兩分鐘內(nèi)離心400g，并且包括六次洗滌步驟，得到最終容積為130ml。
均化后，該內(nèi)容物質(zhì)由HPLC測定為45.7mg/ml，相應(yīng)產(chǎn)率為95％。微混懸劑用18.6ml稀釋得到最終濃度為40mg/ml。獲得的球形、粒狀顆粒，通過顯微鏡測定，顯示直徑在1和5μm之間。為了儲存，將微混懸劑加入消毒的小瓶，加蓋，標(biāo)記并保存在-20℃。使用前，微混懸劑必須劇烈渦旋均勻。
該噻吩異羥肟酸衍生物通常以5-5000mg/平方米動物的體表面積，即約0.1-100mg/kg的單位劑量對溫血動物給藥，這通常提供了治療有效的劑量。單位劑量形式如片劑或膠囊通常包含例如1-250mg的活性成分。優(yōu)選地，使用1-100mg/kg的日劑量。然而，依據(jù)所治療的宿主、具體的給藥路徑和所治療的疾病的嚴(yán)重程度，必然需要改變?nèi)談┝?。因此，最佳劑量可以由治療任何具體患者的醫(yī)師來決定。
為顯示本發(fā)明化合物的活性，它們對人結(jié)腸癌細(xì)胞系的影響使用一種標(biāo)準(zhǔn)MTT分析評價。MTT(3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑鎓溴化物)廣泛地用于細(xì)胞毒性效應(yīng)或體外腫瘤細(xì)胞化學(xué)敏感性的定量測定。該分析基于通過代謝的活細(xì)胞將黃色四唑鎓鹽(MTT)裂解為紫色甲(formazan)晶體。詳細(xì)參見，Rubinstein，L.V.，等，J.Natl.Cancer Inst.82(1990)1113。
我們操作如下HT-29細(xì)胞(人結(jié)腸癌細(xì)胞系)培養(yǎng)在RPMI 1640，2.5％FCS，2mM谷氨酰胺，100u/ml青霉素，100ug/ml鏈霉素中。對于測定在相同的培養(yǎng)基中將細(xì)胞接種到384孔板中，每孔900個細(xì)胞。第二天，化合物(在二甲亞砜溶解的10mM)以30uM-1.5nM的各種濃度加入。5天后，主要根據(jù)廠家(細(xì)胞增擴(kuò)增試劑盒I，MTT，來自Roche Molecular Biochemicals)說明書，做MTT分析。簡言之在37℃，5％CO2，MTT標(biāo)記試劑加入到0.5mg/ml的終濃度，溫育4小時。在這個溫育期間，形成紫色甲晶體。在加入增溶作用的溶液(20％十二烷基磺酸鈉溶于0.02M HCl)后，該板在37℃，5％CO2下，溫育過夜。小心混合后，該板在550nm，用Victor 2(掃描多孔分光光度計，Wallac)測量。
在樣品中，減少活細(xì)胞數(shù)量導(dǎo)致總的代謝活性降低。該降低與由紫色甲月替晶體溶解作用產(chǎn)生的紫色的量直接相關(guān)。使用XL-擬合完成IC50的測定。
對照化合物是US專利5,369,108的化合物3。
為進(jìn)一步說明本發(fā)明的化合物作為HDAC抑制劑的活性，它們影響組蛋白脫乙?；敢种谱饔帽辉u價，使用下列生物化學(xué)猝滅(quench)分析組蛋白脫乙?；?HDAC)的功能是賴氨酸在如組蛋白H4的脫乙酰化作用。一種源自組蛋白H4的17個氨基酸的肽用TAMRA在C端，和QSY-7在N-末端標(biāo)記，用作底物(組蛋白H4-QSY7的TAMRA-最初17aa)。隨著HDAC的脫乙酰作用，酶Lys C能夠切割賴氨酸后的肽。這些導(dǎo)致猝滅效應(yīng)的喪失和高的熒光信號?；衔锏腍DAC抑制導(dǎo)致低的信號，因為Lys C不能切割底物并且猝滅效應(yīng)持續(xù)。
對于劑量響應(yīng)曲線，以1∶3稀釋稀釋10個濃度，起始為30uM。10ul稀釋化合物投入到384孔板的每一孔中。加入10ul HDAC(重組體HDAC-1，從HEK 293細(xì)胞純化得到；酶活性必須對每個制劑分別評估)。加入10ul肽底物(1uM終濃度，源自1mM貯備溶液在試驗緩沖液中1∶1000稀釋)。在室溫下溫育90分鐘后，加入20ul試驗緩沖液停止反應(yīng)，試驗緩沖液包括3ug/ml LysC和0.075％十二烷基磺酸鈉。過夜溫育后，TAMRA的熒光信號被測量(Victor2，來自Wallac，吸收544nm，發(fā)射590nm)。二甲亞砜處理的對照孔的O.D.為100％，化合物處理的孔的抑制作用％相對于100％計算。以10個濃度為基準(zhǔn)，通過使用XL-fit3產(chǎn)生一條IC50曲線。
使用的試驗緩沖液10mM HepespH8，10mMNaCl，10％甘油，0.005％Triton X100，0.1mM EDTA，0.1mM TCEP的混合物。作為板，使用的是384孔板(黑色，Greiner，781077)。
對照化合物是US專利5,369,108的化合物3。
使用下列體內(nèi)試驗，獲得用于支持本發(fā)明化合物活性的補充數(shù)據(jù)測定攜帶腫瘤的小鼠的組蛋白H3的乙?；紿T-29細(xì)胞系衍生自人的結(jié)腸腺癌，并從ATCC獲得，保存在藥物學(xué)使用的細(xì)胞庫里。細(xì)胞在RPMI1640/2mM L-谷氨酰胺培養(yǎng)基中培養(yǎng)，補充有10％熱失活的FCS。為了接種從培養(yǎng)瓶中去除HT29腫瘤細(xì)胞(胰蛋白酶-EDTA，50U/mg)并轉(zhuǎn)移入培養(yǎng)基(RPMI 1640，10％熱失活的FCS)，洗滌并再懸浮在消毒的PBS中，得到最終的細(xì)胞濃度為5×106/100μl。細(xì)胞懸液小心地通過規(guī)則的搖振混合，避免細(xì)胞聚集，并加入到一個1.0ml刻度注射器中。HT29人結(jié)腸癌細(xì)胞(5×106/100μl)s.c.接種在NMRI裸鼠腹部乳房區(qū)域的右上面四分之一處后，動物被每周觀察2-3次，直到異種移植物達(dá)到粗略地1000mm3體積或更多，足以進(jìn)行組蛋白乙?；姆治?。實施例1單個i.p.施用400mg/kg后，在7.5％改性明膠與0.22％NaCl溶液中配制成微混懸劑，各組動物分別給藥3，6，12，和24h后被處死。切除腫瘤用于乙?；慕M蛋白(H3)分析。等分量的腫瘤(大約200mg)用于分析乙?；腍3。組蛋白使用標(biāo)準(zhǔn)化方法(Richon，V.M.，等，PNAS 97(2000)10014-10019；Yoshida，M.，等，J.Biol.Chem.265(1990)17174-17179)從異種移植物中提取，分離，并且乙?；腍3通過Slot Blot和Immuno Blot技術(shù)(SB-IB，Bio-Rad Laboratories GmbH，Munich，Germany)鑒定，使用抗-乙?；?H3Pabs(UpState Biotechnology，Cat.#06-599)。組蛋白蛋白質(zhì)被測定(Pierce試劑盒)并調(diào)節(jié)到3mg/ml，應(yīng)用一種標(biāo)準(zhǔn)化量的1μg的組蛋白蛋白在SB-IB中進(jìn)行H3分析。乙?；疕3的量是由ECL(Enhanced ChemoLuminescence，Amersham Pharmacia，HybondTMECLTM硝化纖維薄膜)測量生物發(fā)光和Lumi-Imager儀器(Roche Diagnostics)測量完成。數(shù)據(jù)或表示為BLU/μg組蛋白蛋白質(zhì)(BLU＝生物發(fā)光單位)，或為載體對照的BLU百分?jǐn)?shù)。在實施例1單次給藥后，明顯的，乙?；疕3相對于載體對照組顯著提高，能持續(xù)達(dá)到24h。劑量給藥6h后，乙?；_(dá)到最大值。平均值和百分?jǐn)?shù)改變的簡要信息描繪在下面。
在HCT116異種移植模型中測定抗腫瘤活性HCT116細(xì)胞系(NCI系)源自于一種人的結(jié)腸腺癌，并保存在細(xì)胞庫內(nèi)。細(xì)胞在RPMI1640/2mM L-谷氨酰胺培養(yǎng)基中培養(yǎng)，補充有10％熱失活的FCS。為了接種從培養(yǎng)瓶中移出HCT116腫瘤細(xì)胞(胰蛋白酶-EDTA，50U/mg)并轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基(RPMI1640，10％熱失活的FCS)，洗滌并再懸浮在無菌PBS中，得到最終的細(xì)胞濃度為5×106/100μl。細(xì)胞懸液小心地通過規(guī)則的搖振混合，避免細(xì)胞聚集并加入到一個1.0ml刻度注射器中。腫瘤細(xì)胞接種是在右側(cè)腹上四分之一處，輕微麻醉(安氟醚)下進(jìn)行的，也就是說，在NMRI裸雄性小鼠的前腿腋下與中間線區(qū)域之間。在這個區(qū)域5×106的HCT116腫瘤細(xì)胞在100μl體積的PBS中被s.c.排出。全部過程在SPF條件，穿戴合適的衣服條件下進(jìn)行。在腫瘤細(xì)胞的s.c.接種后，可測量腫瘤在所有動物中發(fā)展。按照原發(fā)腫瘤的尺寸，小鼠在第10天被分級和隨機化。使用實施例1和WO 93/07148，WO 95/31977，US 5,369,108(‘108專利)中的化合物3作為試驗品，進(jìn)行21天的每日口服。75只雄性NMRI裸鼠被分成5個研究組。每一組由15只雄性鼠組成。每個組分別給入試驗品，在7.5％改性明膠與0.22％NaCl溶液中配制為微混懸劑，根據(jù)下列治療流程，每日口服超過29天3天治療，2天停藥，5天治療，2天停藥，5天治療，2天停藥，5天治療，2天停藥，3天治療。使用的體積是10ml/kg。實施例1的口服劑量選擇為50，100和200mg/kg，’108專利的化合物3為200mg/kg。該治療導(dǎo)致劑量依賴性的、顯著的腫瘤重量抑制，在200mg/kg，100mg/kg和50mg/kg組，腫瘤重量分別抑制87％，49％和40％。與使用100mg/kg實施例1化合物的治療組一樣，’108專利的化合物3顯示出相似的結(jié)果(49％腫瘤重量抑制)。
在PC-3異種移植模型中測定抗腫瘤活性
PC-3前列腺癌細(xì)胞最初從NCI保藏中心獲得，并在Roche cell bankPenzberg擴(kuò)增后被保藏。腫瘤細(xì)胞系常規(guī)在含有10％FBS和2mm L-谷氨酰胺的RPMI 1640培養(yǎng)基中，37℃，水飽和氛圍，5％CO2中培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通過用胰蛋白酶/EDTA 1x(Roche Diagnostics)分離每周進(jìn)行兩次。細(xì)胞第3次傳代用于本發(fā)明研究。
在細(xì)胞注射的當(dāng)天，細(xì)胞從培養(yǎng)瓶(Greiner T 75)中收獲，轉(zhuǎn)入50ml培養(yǎng)基，洗滌一次并再懸浮于PBS。用另外的PBS洗滌，最終的細(xì)胞效價通過Neubauer-Chamber測定。腫瘤細(xì)胞懸浮液(PBS)被小心的渦旋(減少細(xì)胞聚集)并保存在冰中。將細(xì)胞懸液加入1.0ml注射器中。為產(chǎn)生原發(fā)腫瘤，在100μl體積的PBS中2×106PC-3腫瘤細(xì)胞被皮下注入每一只小鼠(NMRI裸鼠)的右側(cè)。在腫瘤細(xì)胞的s.c.接種后，可測量腫瘤在所有動物中發(fā)展。按照原發(fā)腫瘤的尺寸，小鼠在第10天被分級和隨機化。使用實施例1和’108專利中的化合物3作為試驗品，進(jìn)行15天的每日口服。90只雄性NMRI裸鼠被分成6個研究組。每一組由15只雄性鼠組成。每個組被給入該試驗品，在7.5％改性明膠與0.22％NaCl溶液中的配制為微混懸劑，每日一次口服超過19天(5天治療和2天停藥期，3個周期)。施用體積是10ml/kg。實施例1的口服劑量選擇為25，50，100，和200mg/kg和’108專利的化合物3為200mg/kg。腫瘤細(xì)胞注射后，當(dāng)載體組達(dá)到終點標(biāo)準(zhǔn)后，研究在第28天后終止。治療15天后，產(chǎn)生劑量依賴性的、顯著的腫瘤重量抑制，相對于載體小組，100mg/kg和200mg/kg組的腫瘤重量抑制分別為51％和81％。與使用100mg/kg實施例1化合物的治療組一樣，’108專利的化合物3顯示出相似的結(jié)果(53％腫瘤重量抑制)。實施例1的25mg/kg和50mg/kg小組治療腫瘤重量抑制分別為15％和36％。
本發(fā)明的一個實施方案是一種藥物，如上定義，通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞中組蛋白的乙?；糜谝种扑瞿[瘤細(xì)胞增殖。
本發(fā)明的另一個實施方案是一種藥物，如上定義，用于治療造血和淋巴系統(tǒng)瘤。
本發(fā)明還有另一個實施方案是一種藥物，如上定義，用于治療癌癥。
本發(fā)明還有另外的實施方案是一種藥物，在此如前定義，用于治療結(jié)腸、乳腺、肺、前列腺、直腸、胃、膀胱、胰腺或卵巢癌。
本發(fā)明的又一個實施方案是一種或多種對映異構(gòu)體純的式I化合物在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞中組蛋白的乙?；糜谝种扑瞿[瘤細(xì)胞增殖。
本發(fā)明的又一個實施方案是一種或多種對映異構(gòu)體純的式I化合物在制備用于治療癌癥的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明的又一個實施方案是一種或多種對映異構(gòu)體純的式I化合物在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于治療結(jié)腸、乳腺、肺、前列腺、直腸、胃、膀胱、胰腺或卵巢癌。
本發(fā)明的又一個實施方案是一種或多種對映異構(gòu)體純的式I化合物在制備用于治療造血和淋巴系統(tǒng)瘤的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明的又一個實施方案是用于抑制腫瘤細(xì)胞增殖的一種方法，該方法由于向腫瘤細(xì)胞施用有效量的一種或多種對映異構(gòu)體純的式I化合物，誘導(dǎo)所述腫瘤細(xì)胞中的組蛋白乙酰化。根據(jù)本發(fā)明這方面的另一個特征，提供一種在需要這種治療的溫血動物，例如人，中產(chǎn)生抗細(xì)胞增殖作用的方法，其包含對所述動物給藥有效量的、如上文定義的對映異構(gòu)體純的噻吩異羥肟酸衍生物。
因此本發(fā)明還有另一個實施方案為一種方法，如上定義，其中腫瘤是結(jié)腸、乳腺、肺、前列腺、直腸、胃、膀胱、胰腺或卵巢癌。
根據(jù)本發(fā)明的一個更優(yōu)選的方面，提供一種如上定義的對映異構(gòu)體純的式I化合物，以通過治療，在人或動物體的治療方法中應(yīng)用。我們現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物具有抗細(xì)胞增殖性能，認(rèn)為該性能是由于它們的組蛋白脫乙酰轉(zhuǎn)移酶抑制活性而產(chǎn)生的。因此，本發(fā)明的化合物提供了一種治療惡性細(xì)胞增殖的方法。根據(jù)本發(fā)明的對映異構(gòu)體純的化合物，預(yù)計通過提供一種抗增殖作用用于治療癌癥，尤其治療乳腺、肺、結(jié)腸、直腸、胃、前列腺、膀胱、胰腺和卵巢癌。另外，預(yù)料本發(fā)明的衍生物具有抗一系列的白血病、淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤和實體瘤例如在組織如肝、腎、前列腺和胰腺組織中的癌和肉瘤的活性。
上文定義的抗細(xì)胞增殖治療可作為一種單獨的治療來應(yīng)用，或除了本發(fā)明的噻吩異羥肟酸衍生物以外，還可包括一種或多種其它抗腫瘤物質(zhì)，例如那些選自例如有絲分裂抑制劑如長春堿；烷基化劑如順鉑，卡鉑和環(huán)磷酰胺；微管組裝抑制劑，如紫杉醇或其它紫杉烷類；抗代謝物類，如5-氟尿嘧啶，卡培他濱，阿糖胞苷和羥基脲；或，例如，插入抗生素，例如阿霉素和博來霉素；免疫刺激劑，如曲妥單抗；DNA合成抑制劑，如吉西他濱；酶，如天冬酰胺酶；拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑，如依托伯苷；生物反應(yīng)調(diào)節(jié)物，如干擾素；和抗激素類，如抗雌激素類，如他莫昔芬，或例如抗雄激素藥類，如(4’-氰基-3-(4-氟苯基磺酰基)-2-羥基-2-甲基-3’-(三氟甲基)-N-丙酰苯胺，或描述于例如CancerPrinciples & Practice of Oncology，Vincent，T.DeVita，Jr.，Samuel Hellmann，Steven A.Rosenberg；第五版，Lippincott-Raven Publishers(1997)的其它治療劑和原則。這種聯(lián)合治療可通過同時、順次或分別給藥治療用的單獨組分得以實現(xiàn)。依照本發(fā)明的這個方面，提供了一種藥品，其包含用于聯(lián)合治療癌癥的如上文定義的式I的噻吩異羥肟酸衍生物和如上文定義的另外的抗腫瘤物質(zhì)。
在下述非限制性的實施例中將舉例說明本發(fā)明，在所述實施例中，如果未另外聲明(i)通過在真空中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)來進(jìn)行蒸發(fā)，并且在通過過濾去除殘余的固體如干燥劑后進(jìn)行加工程序；(ii)在環(huán)境溫度即18-25℃，在惰性氣體如氬氣或氮氣氣氛下進(jìn)行操作；(iii)在購自E.Merck，Darmstadt，德國的Merck Kieselgel二氧化硅或MerckLichroprep RP-18反相二氧化硅上進(jìn)行柱色譜(通過快速程序)和高壓液相色譜(HPLC)；(iv)提供的產(chǎn)率僅是為了舉例說明的目的而不必是所達(dá)到的最大值；(v)使用Mettler SP62自動熔點儀，油浴儀或Kofler熱板儀測量熔點；(vi)通過核(通常是質(zhì)子)磁共振(NMR)和質(zhì)譜技術(shù)(利用APCI的Micromass臺式II儀或利用電霧化的Micromass臺式ZMD)確認(rèn)式I的終產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)；(Vii)通常不完全表征中間體，并且通過薄層色譜(TLC)評價純度；(viii)使用下述縮寫CH2Cl2二氯甲烷CO2二氧化碳DMFN，N-二甲基甲酰胺。
DMSO 二甲亞砜HCl 鹽酸MeOH 甲醇
rt 室溫SDS十二烷基磺酸鈉TFA三氟乙酸THF四氫呋喃mp 熔點制備實施例實施例1(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-乙基)-酰胺]a)合成(R)-5-(1-苯基-乙基氨基甲?；?-噻吩-2-羧酸甲酯一種40g(215mmol)的噻吩-2，5-二羧酸甲酯的亞硫酰二氯(200ml)懸浮液，回流處理約72小時(尾部HCl放出)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫，減壓下蒸發(fā)亞硫酰二氯，從起始原料生成中間體酰氯。(R)-1-苯乙胺(35.5ml，279mmol)和三乙胺(150ml，1.07mol)的THF(320ml)溶液被冷卻至-15℃，慢慢地加入一種冷的(-15℃)酰氯的THF(400ml)溶液。在相同的溫度下繼續(xù)攪拌1小時，升溫到室溫后另外攪拌16小時。過濾反應(yīng)混合物，減壓下蒸發(fā)溶劑。殘留物溶解于CH2Cl2中，水處理后，產(chǎn)物被分離，重結(jié)晶得到白色固體(mp＝131-33℃)，83％產(chǎn)率(52g)。
b)合成(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-乙基)-酰胺]中間體甲酯(35g，120mmol)溶于羥胺的甲醇(605ml，2M)溶液，隨后用氫氧化鉀的甲醇溶液(105ml，1.15M)處理。溶液室溫攪拌16小時，干冰處理，減壓下蒸發(fā)溶劑。固體殘基懸浮于水并將pH值調(diào)節(jié)到9。冷卻混懸劑，過濾沉淀物，干燥，并用快速層析法純化，使用乙酸乙酯/甲醇洗脫劑，產(chǎn)出19.7g(56％)希望的淺棕色粉末產(chǎn)物(mp＝180℃)。備選地，產(chǎn)物可以從甲醇中重結(jié)晶提純。
實施例2根據(jù)實施例1的制備方法，制備下列通式I的噻吩異羥肟酸衍生物，使用相應(yīng)(R)-構(gòu)型的手性胺
a)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-對甲苯基-乙基)-酰胺]，(mp＝189℃)；b)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(mp＝200℃)；c)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-氯-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(mp＝195℃)；d)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-溴-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(mp＝209℃)；e)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-萘-1-基-乙基)-酰胺]，(mp＝200℃)；f)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-萘-2-基-乙基)-酰胺]，(mp＝200℃)；g)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-丙基)-酰胺]，(mp＝190-195℃)；h)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-?；０?-{[1-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-酰胺}，(mp＝160℃)i)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-?；０?-{[1-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-酰胺}，(mp＝195℃)j)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-羥基-1-苯基-乙基)-酰胺]；(mp＝215℃)k)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(3-羥基-1-苯基-丙基)-酰胺]；l)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-甲氧基-1-苯基-乙基)-酰胺]；(mp＝192℃)m)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-(2，3-二氫化茚)-1-基-酰胺，(mp＝183℃)；n)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1，2，3，4-四氫萘-1-基)-酰胺]，(mp＝171℃)。
實施例3(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-對甲苯基-乙基)-酰胺]a)合成(S)-5-(1-對甲苯基-乙基氨基甲?；?-噻吩-2-羧酸甲酯1.4g(7.5mmol)噻吩-2，5-二羧酸甲酯的CH2Cl2(5ml)溶液，用1.5ml(18mmol)亞硫酰二氯和一滴DMF處理，隨后在80℃加熱1小時。溶劑和過量的亞硫酰二氯減壓下蒸發(fā)，殘留物溶解在CH2Cl2(10ml)中，慢慢地用(S)-1-(對甲苯基)乙胺(1.0g，7.4mmol)的CH2Cl2(10ml)溶液和三乙胺(2ml，14.2mmol)處理。另外室溫攪拌1小時。在酸后處理后分離產(chǎn)物，重結(jié)晶得到黃色固體(mp＝165℃)，71％產(chǎn)率(1.6g)。
b)合成(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-對甲苯基-乙基)-酰胺]向一種羥胺的甲醇(15ml，2M)冷溶液中加入(S)-5-(1-對甲苯基-乙基氨基甲?；?-噻吩-2-羧酸甲酯(910mg，3mmol)，并隨后加入另一氫氧化鉀的甲醇(4ml，0.75M)冷溶液。升溫到室溫后，溶液在此溫度攪拌另外2小時。然后混合物用干冰處理，過濾除去沉淀物，濾液減壓下蒸發(fā)到干燥。固體殘留物用水徹底洗滌，過濾，干燥，從甲醇中重結(jié)晶得到640mg(70％)希望的白色固體產(chǎn)物(mp＝189℃)。
實施例4根據(jù)實施例3的制備方法，制備下列通式I的噻吩異羥肟酸衍生物，使用相應(yīng)(S)-構(gòu)型手性胺a)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-乙基)-酰胺]；(mp＝198℃)b)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(mp＝199℃)；c)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-氯-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(mp＝197℃)d)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-溴-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(mp＝183℃)；e)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-萘-1-基-乙基)-酰胺]，(mp＝167℃)；f)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-萘-2-基-乙基)-酰胺]，(mp＝200℃)；g)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-丙基)-酰胺]，(mp＝210℃)；h)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-酰胺)，(mp＝170℃)；i)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-酰胺}；(mp＝190℃)j)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-羥基-1-苯基-乙基)-酰胺]；(mp＝165℃)k)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(3-羥基-1-苯基-丙基)-酰胺]；l)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-甲氧基-1-苯基-乙基)-酰胺]；(mp＝189℃)m)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-(2，3-二氫化茚)-1-基-酰胺；(mp＝178℃)n)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1，2，3，4-四氫萘-1-基)-酰胺]；(mp＝173℃).
實施例5噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-噻吩-2-基-乙基)-酰胺]a)合成5-(1-噻吩-2-基-乙基氨基甲?；?-噻吩-2-羧酸甲酯500mg(2.7mmol)噻吩-2，5-二羧酸甲酯的CH2Cl2(20ml)溶液，被617mg(4mmol)1-羥基苯并三唑水合物和772mg(4mmol)N′-(3-二甲基氨基丙基)-N-乙基碳二亞胺鹽酸鹽處理，環(huán)境溫度下繼續(xù)攪拌1小時。410mg(3.2mmol)的1-噻吩-2-基-乙胺加入到反應(yīng)混合物中，隨后環(huán)境溫度下攪拌過夜。酸處理后，產(chǎn)物被分離，并在硅膠上提純，得到蠟狀固體，產(chǎn)率84％(0.67g)。
b)合成噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-噻吩-2-基-乙基)-酰胺]向冷的羥胺的甲醇(5ml，2M)溶液中加入5-(1-噻吩-2-基-乙基氨基甲?；?-噻吩-2-羧酸甲酯(300mg，1mmol)，隨后加入另一冷的氫氧化鉀甲醇(2ml，0.5M)溶液。升溫到室溫后，溶液在此溫度攪拌另外3小時。然后混合物用干冰處理，過濾除去沉淀物，濾液減壓下蒸發(fā)到干燥。固體殘留物用水徹底洗滌，過濾，干燥，得到260mg(87％)希望的白色固體產(chǎn)物(mp＝173℃)。
實施例6根據(jù)實施例5的制備方法，制備下列通式I的噻吩異羥肟酸衍生物a)噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-二甲基氨基-1-苯基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺b)噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-2-吡咯烷-1-基-乙基)-酰胺]c)噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-嗎啉-4-基-1-苯基-乙基)-酰胺]d)噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(4-三氟甲基-苯基)-乙基]-酰胺}e)噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-叔丁基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺f)噻吩-2，5-二羧酸2-[(1，2-二苯基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺g)噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-戊基)-酰胺]h)噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-丁基)-酰胺]i)噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-甲基-1-苯基-丙基)-酰胺]j)噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(3-甲基-1-苯基-丁基)-酰胺]k)噻吩-2，5-二羧酸2-[(1-苯并呋喃-2-基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺l)噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(5-苯基-異噁唑-3-基)-乙基]-酰胺}m)噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-2-基-乙基)-酰胺]n)噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(4-甲磺?；?苯基)-乙基]-酰胺}o)噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(3-氨基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺p)噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(2-氨基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺q)噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-呋喃-2-基-乙基)-酰胺]r)噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-3-基-乙基)-酰胺]s)噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(1-甲基-1H-吡咯-3-基)-乙基]-酰胺}t)噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-乙基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺u)噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺v)噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺w)噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-4-基-乙基)-酰胺]x)噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-聯(lián)苯基-4-基-乙基)-酰胺]y)噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-氨基甲?；?苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺z)噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-({1-[4-(3-甲基-丁基氨基甲?；?-苯基]-乙基}-酰胺)
aa)噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(5-甲基-噻吩-2-基)-乙基]-酰胺}實施例7(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-噻吩-2-基-乙基)-酰胺]外消旋化合物噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-噻吩-2-基-乙基)-酰胺]已在實施例5中描述，通過使用CHIRACELO7CSP固定相色譜分離將(R)和(S)對映異構(gòu)體分離。手性技術(shù)歐洲(Chiral Technologies Europe)，甲醇/水洗脫劑，得到對映異構(gòu)體富集的(R)-構(gòu)型產(chǎn)物(mp＝173℃)(對映異構(gòu)體的剩余測定，純度和產(chǎn)率未定)。備選地，可以在5-(1-噻吩-2-基-乙基氨基甲?；?-噻吩-2-羧酸甲酯階段分離兩種對映異構(gòu)體，使用相同的固定相獲得(R)-構(gòu)型酯類，其隨后根據(jù)實施例5b的制備方法轉(zhuǎn)變?yōu)樽罱K產(chǎn)物。
實施例8根據(jù)實施例7的制備方法，制備下列通式I的噻吩異羥肟酸衍生物a)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-二甲基氨基-1-苯基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺b)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-2-吡咯烷-1-基-乙基)-酰胺]c)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-嗎啉-4-基-1-苯基-乙基)-酰胺]；(mp＝88℃)d)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(4-三氟甲基-苯基)-乙基]-酰胺}；(mp＝155℃)e)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-叔丁基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺；(mp＝178℃)f)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-[(1，2-二苯基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺；(mp＝190℃)g)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-戊基)-酰胺]h)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-丁基)-酰胺]i)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-甲基-1-苯基-丙基)-酰胺]j)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(3-甲基-1-苯基-丁基)-酰胺]k)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-[(1-苯并呋喃-2-基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺l)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(5-苯基-異噁唑-3-基)-乙基]-酰胺}m)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-2-基-乙基)-酰胺]
n)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(4-甲磺?；?苯基)-乙基]-酰胺}o)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(3-氨基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺p)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(2-氨基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺q)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-呋喃-2-基-乙基)-酰胺]r)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-3-基-乙基)-酰胺]s)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(1-甲基-1H-吡咯-3-基)-乙基]-酰胺}t)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-乙基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺u)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺v)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺w)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-4-基-乙基)-酰胺]x)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-聯(lián)苯基-4-基-乙基)-酰胺]y)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-氨基甲?；?苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺z)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-({1-[4-(3-甲基-丁基氨基甲?；?-苯基]-乙基}-酰胺)aa)(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(5-甲基-噻吩-2-基)-乙基]-酰胺}實施例9(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-噻吩-2-基-乙基)-酰胺]外消旋化合物噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-噻吩-2-基-乙基)-酰胺]已在實施例6中描述，通過使用CHIRACEL O7CSP固定相柱色譜分離兩種(R)和(S)對映異構(gòu)體，手性技術(shù)歐洲，甲醇/水洗脫劑，得到對映異構(gòu)體地富集的(S)-構(gòu)型產(chǎn)物(mp＝170℃)(對映異構(gòu)體的剩余測定，純度和產(chǎn)率未定)。備選地，可以在5-(1-噻吩-2-基-乙基氨基甲酰基)-噻吩-2-羧酸甲酯階段分離兩種對映異構(gòu)體，使用相同的固定相獲得(S)-構(gòu)型酯類，其隨后根據(jù)實施例5b的制備方法轉(zhuǎn)變?yōu)樽罱K產(chǎn)物。
實施例10根據(jù)實施例9的制備方法，制備下列通式I的噻吩異羥肟酸衍生物a)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-二甲基氨基-1-苯基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺
b)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-2-吡咯烷-1-基-乙基)-酰胺]c)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-嗎啉-4-基-1-苯基-乙基)-酰胺]；(mp＝97℃)d)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(4-三氟甲基-苯基)-乙基]-酰胺}；(mp＝157℃)e)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-叔丁基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺；(mp＝142℃)f)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-[(1，2-二苯基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺；(mp＝189℃)g)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-戊基)-酰胺]h)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-丁基)-酰胺]i)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-甲基-1-苯基-丙基)-酰胺]j)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(3-甲基-1-苯基-丁基)-酰胺]k)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-[(1-苯并呋喃-2-基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺l)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(5-苯基-異噁唑-3-基)-乙基]-酰胺}m)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-2-基-乙基)-酰胺]n)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(4-甲磺酰基-苯基)-乙基]-酰胺}o)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(3-氨基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺p)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(2-氨基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺q)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-呋喃-2-基-乙基)-酰胺]r)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-3-基-乙基)-酰胺]s)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(1-甲基-1H-吡咯-3-基)-乙基]-酰胺}t)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-乙基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺u)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺v)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺w)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-4-基-乙基)-酰胺]x)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-聯(lián)苯基-4-基-乙基)-酰胺]y)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-氨基甲酰基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺z)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-({1-[4-(3-甲基-丁基氨基甲?；?-苯基-乙基}-酰胺)aa)(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(5-甲基-噻吩-2-基)-乙基]-酰胺}
參考文獻(xiàn)列表Ansel，H.，等，Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems，6thed.，1995，pp.196和1456-1457CancerPrinciples & Practice of Oncology，Vincent T.DeVita，Jr.，SamuelHellmann，Steven A.Rosenberg；5th ed.，Lippincott-Raven Publishers，1997Hanano，T.，等，Bioorg.Med.Chem.Lett.10(2000)881-884Houben-Weyl，″Methoden der organischen Chemie″，Vols.XV/1和XV/2，Georg Thieme Verlag，StuttgartIglesias，L.E.，等，TetrahedronAsymmetry 8(1997)2675-2677J.Am.Chem.Soc.105(1983)1578J.Am.Chem.Soc.64(1942)477J.Heterocycl.Chem.28(1991)17Koyama，Y.，等，Blood 96(2000)1490-1495Marks，P.A.，等，J.Nat.Cancer Inst.92(2000)1210-1216Rasor，P.，和Voss，E.，Applied Catalysis A 221(2001)145-158Richon，V.M.，等，PNAS 97(2000)10014-10019Rubinstein，L.V.，等，J.Natl.Cancer Inst.82(1990)1113US 2,680,731US 5,369,108WO 01/38322WO 01/70675WO 02/22577WO 93/07148WO 95/31977WO 98/55449Yoshida，M.，等，J.Biol.Chem.265(1990)17174-17179
權(quán)利要求
1.式I化合物的(R)-和(S)對映異構(gòu)體及其生理上可接受的鹽 其中Ar是芳基或雜芳基，其可以是未取代的或被以下基團(tuán)取代1，2或3次鹵素；苯基；烷基；-O-烷基；-O-苯基；-O-(CH2)n-O-；-OH；-NO2；-NH2；-NH-烷基；-N(烷基)2；-NH-C(O)-烷基；-SO2烷基；-SO2NH2；-SO2NH-烷基；-SO2N(烷基)2；-C(O)-NH2；-C(O)-NH-烷基；-C(O)-N(烷基)2；或-C(O)-烷基；R1是氫；苯基，烷基或鏈烯基，其可以是未取代的或被以下基團(tuán)取代一次或數(shù)次鹵素；-OH；-NO2；-NH2；-O-烷基；-O-芳基；-NH(烷基)；-N(烷基)2；嗎啉代；4-甲基哌嗪基；或芳基；或R1與Ar-基團(tuán)一起形成四氫萘-，1，2-二氫化茚-或二苯并環(huán)庚烷環(huán)；R2是氫或烷基；n是1，2或3。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的(R)-和(S)對映異構(gòu)體及其生理上可接受的鹽，其中Ar是芳基或噻吩-2-基基團(tuán)，其任選地被以下基團(tuán)取代1或2次；鹵素；苯基；烷基；-O-烷基；-O-(CH2)n-O-；-OH；-NO2；-NH2；-NH-烷基；-N(烷基)2；-NH-C(O)-烷基；-SO2烷基；-SO2NH2；-SO2NH-烷基；-SO2N(烷基)2；-C(O)-NH2；-C(O)-NH-烷基；-C(O)-N(烷基)2；-C(O)-烷基；R1是氫；或烷基，其任選地被以下基團(tuán)取代鹵素；-OH；-NO2；-NH2；-O-烷基；-O-芳基；-NH(烷基)；-N(烷基)2；嗎啉代；4-甲基哌嗪基；或芳基；R2是烷基或氫；n是1，2或3。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的(R)對映異構(gòu)體，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-噻吩-2-基-乙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(5-甲基-噻吩-2-基)-乙基]-酰胺}，或(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺-5-[(1-聯(lián)苯基-4-基-乙基)-酰胺]。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2的(S)-對映異構(gòu)體，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-噻吩-2-基-乙基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺-5-{[1-(5-甲基-噻吩-2-基)-乙基]-酰胺}，或(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-聯(lián)苯基-4-基-乙基)-酰胺]。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2的(R)-或(S)-對映異構(gòu)體及其生理上可接受的鹽，其中Ar是苯基，其被以下基團(tuán)取代一次鹵素；烷基；-O-烷基；-OH；-NH2；-NH-烷基；-N(烷基)2；-NH-C(O)-烷基；-SO2烷基；-SO2NH2；-SO2NH-烷基；-SO2N(烷基)2；-C(O)-NH2；-C(O)-NH-烷基；-C(O)-N(烷基)2；-C(O)-烷基；R1是氫；或烷基；R2是氫。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的(R)-對映異構(gòu)體，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-對甲苯基-乙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-氯-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-溴-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-酰胺}，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-酰胺}，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(4-三氟甲基-苯基)-乙基]-酰胺}，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-叔丁基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(4-甲磺酰基-苯基)-乙基]-酰胺}，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(3-氨基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(2-氨基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-乙基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-氨基甲?；?苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，或(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-({1-[4-(3-甲基-丁基氨基甲?；?-苯基]-乙基}-酰胺)。
7.根據(jù)權(quán)利要求5的(S)-對映異構(gòu)體(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-對甲苯基-乙基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-氯-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-溴-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-酰胺}，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-酰胺}，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(4-三氟甲基-苯基)-乙基]-酰胺}，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-叔丁基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(4-甲磺酰基-苯基)-乙基]-酰胺}，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(3-氨基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(2-氨基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-乙基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-氨基甲酰基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺，或(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{1-[4-(3-甲基-丁基氨基甲酰基)-苯基]-乙基}-酰胺)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或2的(R)-和(S)-對映異構(gòu)體及其生理上可接受的鹽，其中Ar是苯基；R1是苯基；或烷基，其任選地被以下基團(tuán)取代鹵素；-OH；-NH2；-O-烷基；-O-芳基；-NH(烷基)；-N(烷基)2；嗎啉基；4-甲基哌嗪基；苯基；R2是氫或烷基。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的(R)-對映異構(gòu)體(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-乙基)-酰胺]。
10.根據(jù)權(quán)利要求8的(R)-對映異構(gòu)體(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-丙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-羥基-1-苯基-乙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(3-羥基-1-苯基-丙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-甲氧基-1-苯基-乙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-二甲基氨基-1-苯基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-2-吡咯烷-1-基-乙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-嗎啉-4-基-1-苯基-乙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-[(1，2-二苯基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-戊基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-丁基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-甲基-1-苯基-丙基)-酰胺]，或(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(3-甲基-1-苯基-丁基)-酰胺]。
11.根據(jù)權(quán)利要求8的(S)-對映異構(gòu)體(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-乙基)-酰胺]。
12.根據(jù)權(quán)利要求(S)-對映異構(gòu)體(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-丙基)酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-羥基-1-苯基-乙基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(3-羥基-1-苯基-丙基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-甲氧基-1-苯基-乙基)酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-二甲基氨基-1-苯基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-(1-苯基-2-吡咯烷-1-基-乙基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-嗎啉-4-基-1-苯基-乙基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-[(1，2-二苯基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-戊基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-苯基-丁基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(2-甲基-1-苯基-丙基)-酰胺]，或(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(3-甲基-1-苯基-丁基)-酰胺]。
13.根據(jù)權(quán)利要求1或2的(R)-和(S)-對映異構(gòu)體及其生理上可接受的鹽，其中Ar是萘基；R1和R2獨立地是氫；烷基-或鏈烯基，其可以是未取代的或被以下基團(tuán)取代一次或數(shù)次烷基；鹵素；-OH；-NO2；-NH2；-O-烷基；-O-芳基；-NH(烷基)；-N(烷基)2。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的(R)-對映異構(gòu)體(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-萘-1-基-乙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-萘-2-基-乙基)-酰胺]。
15.根據(jù)權(quán)利要求13的(S)-對映異構(gòu)體(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-萘-1-基-乙基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-萘-2-基-乙基)-酰胺]。
16.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物及其生理上可接受的鹽，其中Ar和R1一起形成四氫萘基；2，3-二氫化茚基；或二苯并環(huán)庚烷基；其全部任選地被以下基團(tuán)取代烷基；鹵素；-OH；-NO2；-NH2；-O-烷基；-O-芳基；-NH(烷基)；-N(烷基)2；R2是氫。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的(R)-對映異構(gòu)體(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-(2，3-二氫化茚)-1-基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1，2，3，4-四氫-萘-1-基)-酰胺]。
18.根據(jù)權(quán)利要求16的(S)-對映異構(gòu)體(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-(2，3-二氫化茚)-1-基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1，2，3，4-四氫-萘-1-基)-酰胺]。
19.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物及其生理上可接受的鹽，其中Ar可以是未取代的或被以下基團(tuán)取代1，2或3次的雜芳基鹵素；苯基；烷基；-O-烷基；-O-苯基；-O-(CH2)n-O-；-OH；-NO2；-NH2；-NH-烷基；-N(烷基)2；-NH-C(O)-烷基；-SO2烷基；-SO2NH2；-SO2NH-烷基；-SO2N(烷基)2；-C(O)-NH2；-C(O)-NH-烷基；-C(O)-N(烷基)2；或-C(O)-烷基；R1是氫；苯基，烷基或鏈烯基，其可以是未取代的或被以下基團(tuán)取代一次或數(shù)次鹵素；-OH；-NO2；-NH2；-O-烷基；-O-芳基；-NH(烷基)；-N(烷基)2；嗎啉代；4-甲基哌嗪基；或芳基；或R1與Ar-基團(tuán)一起形成四氫萘-，1，2-二氫化茚-或二苯并環(huán)庚烷環(huán)；R2是氫或烷基；n是1，2或3。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的化合物及其生理上可接受的鹽，其中Ar可以是未取代的或被以下基團(tuán)取代1，2或3次的雜芳基鹵素；苯基；烷基；-O-烷基；-O-苯基；-O-(CH2)n-O-；-OH；-NO2；-NH2；-NH-烷基；-N(烷基)2；-NH-C(O)-烷基；-SO2烷基；-SO2NH2；-SO2NH-烷基；-SO2N(烷基)2；-C(O)-NH2；-C(O)-NH-烷基；-C(O)-N(烷基)2；或-C(O)-烷基；R1是氫；R2是烷基；n是1，2或3。
21.根據(jù)權(quán)利要求19的化合物及其生理上可接受的鹽，其中Ar是苯并呋喃-2-基；異噁唑-3-基；吡啶-2-基；吡啶-3-基；吡啶-4-基；呋喃-2-基；吡咯-3-基；其全部可以是未取代的或被以下基團(tuán)取代1或2次苯基；或烷基；R1是氫；和R2是烷基。
22.根據(jù)權(quán)利要求21的(R)-對映異構(gòu)體(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-[(1-苯并呋喃-2-基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(5-苯基-異噁唑-3-基)-乙基]-酰胺}，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-2-基-乙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-呋喃-2-基-乙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-3-基-乙基)-酰胺]，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(1-甲基-1H-吡咯-3-基)-乙基]-酰胺}，或(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-4-基-乙基)-酰胺]。
23.根據(jù)權(quán)利要求21的(S)-對映異構(gòu)體(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-[(1-苯并呋喃-2-基-乙基)-酰胺]5-羥基酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(5-苯基-異噁唑-3-基)-乙基]-酰胺}，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-2-基-乙基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-呋喃-2-基-乙基)酰胺，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-3-基-乙基)-酰胺]，(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-{[1-(1-甲基-1H-吡咯-3-基)-乙基]-酰胺}，或(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-羥基酰胺5-[(1-吡啶-4-基-乙基)-酰胺]。
24.根據(jù)權(quán)利要求1的(R)-和(S)對映異構(gòu)體，(R)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺和(S)-噻吩-2，5-二羧酸2-{[1-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-酰胺}5-羥基酰胺。
25.根據(jù)權(quán)利要求1-24中任何一項的化合物的立體選擇性的制備方法，該方法通過在適當(dāng)?shù)幕罨瘎┑拇嬖谙聦⑹絀II的化合物與對映異構(gòu)體純的式III-A的(R)-或(S)-胺反應(yīng) 其中R3是甲基；Ar-C(R1)(R2)-NH2III-A，其中Ar，R1和R2具有權(quán)利要求1所提供的含義，得到式II的化合物 它被羥胺或它的鹽酸鹽處理，分別得到如權(quán)利要求1的對映異構(gòu)體純的化合物；并且如果需要，轉(zhuǎn)化所述化合物為它的藥用鹽。
26.一種藥物，含有作為活性成分的一種或多種根據(jù)權(quán)利要求1-24中任何一項的化合物以及藥學(xué)上可接受的輔藥。
27.根據(jù)權(quán)利要求26的藥物，通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞中組蛋白的乙酰化用于抑制所述腫瘤細(xì)胞增殖。
28.根據(jù)權(quán)利要求26的藥物，用于治療癌癥。
29.根據(jù)權(quán)利要求26的藥物，用于治療造血和淋巴系統(tǒng)瘤。
30.根據(jù)權(quán)利要求26的藥物，用于治療結(jié)腸、乳腺、肺、前列腺、直腸、胃、膀胱、胰腺或卵巢癌。
31.一種或多種根據(jù)權(quán)利要求1-24中任何一項的化合物在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞中組蛋白的乙?；糜谝种扑瞿[瘤細(xì)胞增殖。
32.一種或多種根據(jù)權(quán)利要求1-24中任何一項的化合物在制備用于治療癌癥的藥物中的應(yīng)用。
33.一種或多種根據(jù)權(quán)利要求1-24中任何一項的化合物在制備用于治療造血和淋巴系統(tǒng)瘤的藥物中的應(yīng)用。
34.一種或多種根據(jù)權(quán)利要求1-24中任何一項的化合物在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于治療結(jié)腸、乳腺、肺、前列腺、直腸、胃、膀胱、胰腺或卵巢癌。
35.一種抑制腫瘤細(xì)胞增殖的方法，該方法由于向腫瘤細(xì)胞施用有效量的一種或多種根據(jù)權(quán)利要求1-24中任何一項的化合物，誘導(dǎo)所述腫瘤細(xì)胞中的組蛋白乙酰化。
36.根據(jù)權(quán)利要求35的方法，其中所述腫瘤是結(jié)腸、乳腺、肺、前列腺、直腸、胃、膀胱、胰腺或卵巢癌。
37.根據(jù)權(quán)利要求1-24中任何一項的化合物，其根據(jù)權(quán)利要求25所要求的方法或通過等價的方法制備。
38.以上描述的本發(fā)明。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)的化合物，其中Ar，R1和R2具有如說明書中定義的含義；和這些化合物的制備方法以及含有此類化合物、具有HDAC抑制活性的藥物。
文檔編號A61K31/4025GK1726204SQ200380105956
公開日2006年1月25日 申請日期2003年12月15日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月16日
發(fā)明者A·格羅斯曼, F·赫廷, M·克爾納, K-P·金克勒, A·利姆戈, O·蒙迪戈, U·蒂貝斯 申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司