專利名稱：一種含有脫氧核苷酸的保健食品及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于保健食品技術(shù)領(lǐng)域；具體涉及一種含有脫氧核苷酸的保健食品及其制備方法。
背景技術(shù)：
隨著社會(huì)的進(jìn)步，膳食結(jié)構(gòu)的變化與工作節(jié)奏的加快以及環(huán)境污染等因素，大多數(shù)人們都被疾病所困擾或者處于一種亞健康狀態(tài)。人們都需要一些安全有效的保健食品來(lái)為我們的身體保駕護(hù)航，提高人體免疫能力，增強(qiáng)對(duì)疾病的抵御能力。特別是現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展，崇尚自然，返樸歸真的食療保健方式日益受到大家的青睞，維生素、氨基酸、核酸、DNA制備的保健食品因其有利于人體吸收、效果突出，療效顯著而大行其道。眾所周知，上述物質(zhì)并不是最利于人體吸收的成分，并且成份的單一性導(dǎo)致其并不能發(fā)揮其更好的功效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的問(wèn)題就是提供一種更利于人體吸收、功效更顯著的保健食品，用以增強(qiáng)人體免疫力和損傷后內(nèi)臟修復(fù)能力、腦功能、抗病毒能力；同時(shí)提供一種所述保健食品的制備方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案是，一種含有脫氧核苷酸的保健食品，由脫氧核苷酸、黃精、杜仲組成，上述三種組分的重量百分含量分別為脫氧核苷酸10％-40％，黃精30％-50％，杜仲30％-50％。
在上述保健食品中，主要功效成分為脫氧核苷酸。
在上述保健食品中，輔助功效成分為黃精和杜仲所含有的黃酮類物質(zhì)、多糖類物質(zhì)及其他有效成分。
在上述保健食品中，總黃酮類物質(zhì)的有效含量大于等于110mg/100g。
上述保健食品的制備方法制備該保健食品的整個(gè)工藝流程均在GMP標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)房?jī)?nèi)進(jìn)行；1、提取脫氧核苷酸按照企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，從魚(yú)精中提取。
2、黃精、杜仲?gòu)闹兴幍曩?gòu)買符合2000版藥典1部標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)品。
3、粉碎 分別將上述三種原料粉碎，利用80-120目篩過(guò)篩。
4、混合 將上述三種原料，按照配方比例稱量，由復(fù)合員復(fù)合投料，混勻，檢查合格后，進(jìn)入下道工序。在潔凈室進(jìn)行，溫度控制在40℃以內(nèi)。
5、干燥滅菌 在常壓下，溫度控制在80℃左右，干燥時(shí)間為2h左右。
6、填充膠囊 在膠囊機(jī)械中，按膠囊制劑工藝，壓制成膠囊。室內(nèi)溫度控制在24℃-26℃，相對(duì)濕度控制在60％以內(nèi)。
7、低溫干燥 溫度控制在32℃左右，相對(duì)濕度控制在45％以內(nèi)，開(kāi)啟凈化流通風(fēng)。
8、高溫干燥 溫度控制在50℃左右，相對(duì)濕度控制在28％以內(nèi)，向烘房中送干燥熱風(fēng)源。
9、揀選 在符合規(guī)定的場(chǎng)地，按照產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)選揀膠囊，在產(chǎn)品交接卡上寫(xiě)明品名、日期、班次數(shù)量、重量、操作工號(hào)，并按照膠囊制劑的方法檢驗(yàn)，合格后送入包裝程序。
10、包裝 在包裝前，將包裝場(chǎng)地、包裝工具和包裝材料進(jìn)行嚴(yán)格的消毒；按照工藝衛(wèi)生制度，生產(chǎn)人員進(jìn)行相應(yīng)的著裝、消毒；室溫控制在20℃-25℃以內(nèi)；再作理化與微生物檢驗(yàn)，還應(yīng)符合GMP衛(wèi)生有關(guān)規(guī)定。
上述制備方法中，脫氧核苷酸通過(guò)水提、醇沉、酶解、過(guò)濾、濃縮、干燥、成品等工藝步驟得到。
本發(fā)明是以中國(guó)傳統(tǒng)的藥食同源原理和現(xiàn)代高科技手段，從天然活性物質(zhì)魚(yú)精中提取脫氧核苷酸，與傳統(tǒng)的中藥材黃精和杜仲科學(xué)配比而成的一種新型保健食品。眾所周知，脫氧核苷酸作為DNA的基本組成單位，更利于人體的吸收，而且大量的研究表明脫氧核苷酸具有增強(qiáng)免疫力、損傷后內(nèi)臟修復(fù)能力、增強(qiáng)腦功能、抗病毒和防治化療引起的毒副反應(yīng)的作用；杜仲、黃精也是自古以來(lái)備受人們推崇的中藥材，經(jīng)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)、藥學(xué)研究證明，黃精具有升高白細(xì)胞及增強(qiáng)免疫功能、抗腫瘤、抗放療、抗病毒、抗衰老等作用，對(duì)萎縮性胃炎亦有顯著療效；杜仲具有增強(qiáng)機(jī)體特異性免疫力，并有效延緩衰老等作用。因此本發(fā)明所述保健品完全能夠滿足人們的食補(bǔ)需求，能夠增強(qiáng)免疫力和損傷后內(nèi)臟修復(fù)能力、腦功能、抗病毒能力的作用。
本發(fā)明三種成分的詳細(xì)的功效介紹如下脫氧核苷酸 脫氧核苷酸作為DNA的基本組成單位，可以影響脂類代謝，組織免疫能力、組織的生長(zhǎng)發(fā)育和修復(fù)，組織的增值等生理功能；同時(shí)，脫氧核苷酸影響著淋巴組織的生長(zhǎng)、活化和增值，也影響著小腸和血液中子淋巴細(xì)胞群。它們更進(jìn)一步的參與增強(qiáng)巨食細(xì)胞的活力，遲發(fā)變態(tài)反應(yīng)以及異體移植和腫瘤的反應(yīng)。
近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外有相當(dāng)多的文獻(xiàn)報(bào)道脫氧核苷酸及其類似物具有增強(qiáng)免疫力、損傷后內(nèi)臟修復(fù)能力、增強(qiáng)腦功能、抗病毒、防治化療引起的毒副反應(yīng)的作用。例如由英國(guó)倫敦Surrey Roehampton大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院Grimble GK，Westwood OM撰寫(xiě)的《脫氧核苷酸作為免疫增強(qiáng)劑在臨床營(yíng)養(yǎng)上的應(yīng)用》指出，飲食中的脫氧核苷酸可以調(diào)節(jié)免疫功能，促進(jìn)小腸損傷的快速愈合和功能的恢復(fù)，這些研究結(jié)果類似與補(bǔ)充谷胺酰氨的效果的研究結(jié)果，但不同的是，脫氧核苷酸是在一個(gè)非常低的劑量的狀態(tài)些下起作用的。
休斯頓 德克薩斯醫(yī)科大學(xué) 手術(shù)科Kulkarni AD，Rudolph FB，Van Buren CT.撰文《綜述脫氧核苷酸在免疫功能中的作用》介紹飲食來(lái)源的嘌呤和嘧啶堿基對(duì)于細(xì)胞免疫反應(yīng)具有優(yōu)良的功能；這篇綜述中的研究指明脫氧核苷酸對(duì)與免疫反應(yīng)來(lái)說(shuō)是必須的，因?yàn)槊撗鹾塑账釋?duì)于T細(xì)胞的正常發(fā)育和活化是必不可少的。
南弗羅里達(dá)大學(xué) 醫(yī)學(xué)院 兒科系Carver JD.撰寫(xiě)的《飲食脫氧核苷酸在細(xì)胞免疫、腸道營(yíng)養(yǎng)和肝臟系統(tǒng)中的作用》指出飲食脫氧核苷酸可以增強(qiáng)免疫功能，不含脫氧核苷食物喂食的動(dòng)物，其細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)等若干指標(biāo)會(huì)降低，并且容易受到一些治病菌(如一些治病的氣生鏈球菌和白色念珠菌)的感染；脫氧核苷酸的補(bǔ)救合成途徑是一種非常節(jié)能的合成代謝方式，特別是當(dāng)組織因快速生長(zhǎng)發(fā)育而自身來(lái)不及以從頭合成形式供應(yīng)的時(shí)候，在飲食中補(bǔ)充脫氧核苷酸對(duì)快速生長(zhǎng)的組織來(lái)說(shuō)具有很好的功能。
南弗羅里達(dá)大學(xué)醫(yī)學(xué)院兒科系Carver JD撰文《飲食脫氧核苷酸在免疫和胃腸系統(tǒng)中的作用》指出，不含和含有脫氧核苷酸的飲食喂養(yǎng)動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)表明含脫氧核苷酸的飲食對(duì)增強(qiáng)胃腸道的生長(zhǎng)、發(fā)育和成熟，并且在促進(jìn)損傷腸道的修復(fù)，增強(qiáng)體液免疫和細(xì)胞免疫，增加病毒感染后的存活率等方面都明顯的高于不含脫氧核苷酸的對(duì)照組。
在《Nutrition》(1997；13327-374)上日本沖繩Ryukyus大學(xué)、醫(yī)學(xué)營(yíng)養(yǎng)學(xué)系，臺(tái)灣臺(tái)中仲謀大學(xué)食品及營(yíng)養(yǎng)學(xué)系撰文《脫氧核苷及脫氧核苷酸在免疫系統(tǒng)、損傷后內(nèi)臟修復(fù)及腦功能方面的作用》指出，我們發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)旋磷酰胺處理過(guò)的小白鼠在喂食了脫氧核苷及脫氧核苷酸后其造血功能及嗜中性細(xì)胞的數(shù)目增加了；腹膜內(nèi)注射脫氧核苷及脫氧核苷酸可以降低病毒的移位，即菌落形成數(shù)目，從而增加了抗二甲氧基苯青霉素葡萄菌感染的存活力；小白鼠的免疫試驗(yàn)表明，喂食了脫氧核苷酸后，其遲疑性皮膚的過(guò)敏性得以加強(qiáng)，并且淋巴節(jié)對(duì)于抗原、異基因，促細(xì)胞分裂劑的反應(yīng)加強(qiáng)；記憶力衰退及癡呆的小白鼠在喂食了添加脫氧核苷及脫氧核苷酸的飼料后，其記憶力得以加強(qiáng)，其結(jié)果證明添加脫氧核苷及脫氧核苷酸對(duì)于系統(tǒng)及大腦的功能有增強(qiáng)作用。
在齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)2003年第24卷第5期上由張?jiān)聢A、張耀華撰寫(xiě)的《DNA單核苷酸鈉對(duì)中晚期惡性腫瘤化療中骨髓療效觀察》中描述DNA單核苷酸鈉輔助治療化療后骨髓抑制及減毒增效取得較好近期療效；在中華肝臟病雜志，2000；8(4)248~249由拉米夫定臨床應(yīng)用專家指標(biāo)小組編撰的“2000年拉米夫定臨床應(yīng)用指導(dǎo)意見(jiàn)”說(shuō)明作為核苷類似物，拉米夫定作為抗病毒藥物已在國(guó)內(nèi)用于治療慢性乙型肝炎。
在專利號(hào)為93110925.6(申請(qǐng)日1993年3月27日，名稱多核苷酸營(yíng)養(yǎng)素產(chǎn)品及制造方法)的專利文獻(xiàn)中也介紹了從植物中提取脫氧核苷酸的方法和將其用于配比多核苷酸營(yíng)養(yǎng)素產(chǎn)品，然后將多核苷酸營(yíng)養(yǎng)素作為食品、飲料、藥品等生產(chǎn)時(shí)的添加劑的用途，使所生產(chǎn)的食品、飲料、藥品等產(chǎn)品具有提高機(jī)體免疫力、抗癌防癌等保健功效。
黃精 本品為百合科植物金氏黃精等的干燥根莖，本品含菸酸、醌類成分、粘液質(zhì)、淀粉和糖類及賴氨酸等十一種氨基酸。黃精具有補(bǔ)脾潤(rùn)肺、益氣養(yǎng)陰、生津的功效。用于脾胃虛弱、體虛乏力、心悸氣短、肺燥干咳、糖尿病等癥。
本草綱目記載“黃精是芝草之精也，為食服要藥?！鄙裣芍ゲ萁?jīng)云黃精補(bǔ)中益氣，補(bǔ)五勞七傷，益脾胃，潤(rùn)心肺，填精髓。經(jīng)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)、藥學(xué)研究證明，黃精主要成份黃精多糖有升高白細(xì)胞及增強(qiáng)免疫功能、降血脂、降血壓、抗腫瘤、抗放療、抗病毒、抗衰老等作用，對(duì)萎縮性胃炎亦有顯著療效。
杜仲 本品為杜仲科植物的杜仲干燥樹(shù)皮、樹(shù)葉，主要成分為杜仲膠(20％)、樹(shù)脂、衛(wèi)矛醇、氯原酸、維生素C、木脂素類(lignans)、苯丙素類(penylpropanoids)、環(huán)烯醚類(iridoids)、多糖類酸性聚糖杜仲糖A(Eucomman A)和杜仲糖B(Eucomman B)、杜仲擴(kuò)真菌蛋白EAFP(Eucommia Amtifungal rotein)、黃酮類化合物等幾大類。本品能補(bǔ)肝腎、壯筋骨、安胎、降血壓、利尿、鎮(zhèn)痛，是名貴的滋補(bǔ)中藥材。
在最早的藥典《神農(nóng)本草經(jīng)》《本草綱目》中把杜仲列為藥之上品。其藥用價(jià)值補(bǔ)腎、強(qiáng)筋骨、安胎、久服輕身耐老。《本草匯言》中記載凡下焦之虛，非杜仲不補(bǔ)；下焦之濕，非杜仲不利；足脛之酸，非杜仲不祛；腰膝之痛，非杜仲不除。
近年來(lái)國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)杜仲的化學(xué)成分和藥理進(jìn)行了大量研究，現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)證明杜仲具有增強(qiáng)機(jī)體特異性免疫力，并有效延緩衰老；滋補(bǔ)肝腎，雙向調(diào)節(jié)血壓；強(qiáng)壯筋骨、祛除疲勞；抗菌消炎、抗病毒；抑制腫瘤細(xì)胞，抑制乙型肝炎病毒DNA的復(fù)制；擴(kuò)張血管，降低血糖血脂；健身、美白、養(yǎng)顏等作用。
綜合功效經(jīng)過(guò)反復(fù)的比較實(shí)驗(yàn)證明，我們選擇的三個(gè)組分配方效果最佳，其動(dòng)物免疫力和損傷后內(nèi)臟修復(fù)能力、腦功能、抗病毒能力得到了顯著的增強(qiáng)。小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)表明，服用本品后，易感染性明顯降低；小鼠半數(shù)溶血值測(cè)定表明，服用本品后溶血素含量明顯增強(qiáng)；小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞試驗(yàn)和NK細(xì)胞活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)表明，服用本發(fā)明所述食品后，巨噬細(xì)胞吞噬能力得到了顯著增強(qiáng)、NK細(xì)胞活性得到了顯著的提高。
本發(fā)明所述保健食品的免疫力調(diào)節(jié)試驗(yàn)結(jié)果如下1材料和方法1.1受試物本發(fā)明所述保健食品，由申請(qǐng)人提供。成人推薦量為1.2g/日/人。按成人60kg體重計(jì)，即0.02g/kg.bW。
1.2試驗(yàn)動(dòng)物清潔級(jí)BALB/c小鼠，雄性，200只，18～20g，購(gòu)自武漢生物制品研究所，合格證號(hào)為醫(yī)動(dòng)字第19～030號(hào)。
1.3劑量選擇試驗(yàn)設(shè)三個(gè)劑量組10倍人體攝入量(0.20g/kg.bW)組、20倍人體攝入量(0.40g/kg.bW)組、30倍人體攝入量(0.60g/kg.bW)組和對(duì)照組。小鼠灌胃體積為0.2g/10g.bW。
1.4主要儀器與試劑5mm直徑打孔器、顯微鏡、微量血凝試驗(yàn)板、離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96孔培養(yǎng)板、5％CO2培養(yǎng)箱、200目篩網(wǎng)、DNFB、丙酮、麻油、脫毛劑、SRBC、生理鹽水、雞紅細(xì)胞、甲醇、Giemsa染液、YAC-1細(xì)胞、Hanks液(pH7.2-7.4)、RPMI1640完全培養(yǎng)液、乳酸鋰、碘硝基氯化四氮唑(INT)、吩嗪二四甲酯硫酸鹽(PMS)、NAD、Tris-HCI緩沖(pH8.2)、1％NP40、臺(tái)盼蘭、1mol/L鹽酸等。
1.5實(shí)驗(yàn)方法1.5.1臟器/體重比值測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)┢?，小鼠稱重后，頸椎脫臼處死，解剖動(dòng)物，取出脾臟及胸腺，用濾紙吸干血跡后稱重。
1.5.2遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(DTH)小鼠連續(xù)灌胃30d后，每只小鼠腹部皮膚用脫毛處理，范圍約3cm×3cm，后用DNFB溶液50μl均勻涂抹致敏；5d后，再用DNFB溶液10μl均勻涂抹于小鼠右耳兩面，進(jìn)行攻擊；24h后，頸椎脫臼處死小鼠，剪下左右兩耳，用打孔器取下直徑5mm的耳片稱重。
1.5.3半數(shù)溶血值(HC50)的測(cè)定小鼠連續(xù)灌胃30天后，每只小鼠腹腔注射2％(V/V)SRBC的細(xì)胞懸液0.2g進(jìn)行免疫。5天后，將小鼠摘除眼球取血于離心管中，放置約1h，使血清析出，2000r/min離心10min，收集血清。用生理鹽水稀釋血清(300倍)，將稀釋后血清1g置試管內(nèi)，依次加入10％(V/V)SRBC 0.5g，補(bǔ)體1g(用生理鹽水按1∶10稀釋)，另設(shè)不加血清的對(duì)照管(以生理鹽水代替)，置37℃恒溫水浴中保溫15～30min后，冰浴終止反應(yīng)。2000r/min離心10min，取上清液1g，都氏試劑3g于試管內(nèi)，同時(shí)取10％(V/V)SRBC 0.25g加都氏試劑至4g，于另一支試管內(nèi)，充分混勻，放置10min后，于540nm處以對(duì)照管作空白，分別測(cè)定各管光密度。
1.5.4小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(半體內(nèi)法)小鼠連續(xù)灌胃30d后，每只小鼠腹腔注射2％雞紅細(xì)胞懸液1g。30min后，頸椎脫臼處死動(dòng)物，仰位固定于蠟板上，正中剪開(kāi)腹壁皮膚，經(jīng)腹腔注入生理鹽水2g，轉(zhuǎn)動(dòng)鼠板1min，然后吸出腹腔洗液1g，平勻分滴2片載玻片上，放入墊有濕紗布的搪瓷盒內(nèi)，于37℃孵箱溫育30min。孵畢，在生理鹽水中漂洗，除去未貼片細(xì)胞。晾干，以1∶1丙酮甲醇溶液固定20min，4％(V/V)Giemsa-磷酸緩沖液染色3min，再用蒸餾水漂洗干，于顯微鏡下計(jì)數(shù)巨噬細(xì)胞。
1.5.5小鼠NK細(xì)胞活性測(cè)定(乳酸脫氫酶LDH測(cè)定法)小鼠連續(xù)灌胃30d后，頸椎脫臼處死，無(wú)菌取脾，置于盛有適量無(wú)菌Hanks液的小平皿中，用攝子輕輕將脾撕碎，經(jīng)200目篩網(wǎng)過(guò)濾，制成單細(xì)胞懸液，用Hanks液洗三次，每次離心10min(1000r/min)，然后將細(xì)胞懸浮于2g的完全培養(yǎng)液中，臺(tái)盼蘭染色計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)(應(yīng)在95％以上)，用RPMI1640完全培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為5×106個(gè)/g；試驗(yàn)前24h將靶細(xì)胞傳代培養(yǎng)，用Hanks液洗3次，用RPMI1640完全培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為1×105個(gè)/g；取靶細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞各100μl(效靶比50∶1)，加入96孔培養(yǎng)板中；靶細(xì)胞自然釋放孔加靶細(xì)胞和培養(yǎng)液各100μl、靶細(xì)胞最大釋放孔加靶細(xì)胞和1％HP40各100μl，上述各項(xiàng)均設(shè)三個(gè)復(fù)孔，于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4h，然后將培養(yǎng)板離心(1500r/min)5min，每孔吸取上清100μl置96孔培養(yǎng)板中，同時(shí)加入LDH基質(zhì)液100μl，反應(yīng)3min，每孔加入1mol/L的HCL30μl，在酶標(biāo)儀490nm處測(cè)光密度值(OD)。
1.6實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)采用SAS軟件進(jìn)行分析。
2結(jié)果2.1本發(fā)明所述保健食品對(duì)小鼠體重的影響結(jié)果見(jiàn)表1.1～表1.5。
表1.1臟器/體重試驗(yàn)前后動(dòng)物體重記錄(X±S)

表1.2DTH試驗(yàn)前后動(dòng)物體重記錄(X±S)

表1.3HC50試驗(yàn)前后動(dòng)物體重記錄(X±S)

表1.4吞噬試驗(yàn)前后動(dòng)物體重記錄(X±S)

表1.5NK細(xì)胞活性試驗(yàn)前后動(dòng)物體重記錄(X±S)

經(jīng)方差分析P＞0.05，三個(gè)劑量組與對(duì)照組之間試驗(yàn)前、后體重以及增重均無(wú)顯著性差異。
2.2本發(fā)明所述保健食品對(duì)小鼠臟器/體重比值影響結(jié)果見(jiàn)表2。
表2本發(fā)明所述保健食品對(duì)小鼠臟器/體重比值的影響(X±S)

注*表明與對(duì)照組比較，P＜0.05；**表明與對(duì)照組比較，P＜0.01。
脾臟/體重比值經(jīng)方差分析，F(xiàn)＝33.74，P＜0.0001；Q檢驗(yàn)，人體推薦量的10倍劑量組與對(duì)照組比較，P＜0.05，有顯著性差異，20倍、30劑量組與對(duì)照組比較，P＜0.01，有極顯著性差異；胸腺/體重比值經(jīng)方差分析，F(xiàn)＝3.86，P＜0.05；Q檢驗(yàn)P＜0.05，20倍、30倍劑量組與對(duì)照組比較，有顯著性差異。
2.3本發(fā)明所述保健食品對(duì)小鼠細(xì)胞免疫功能[小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(DTH)]的影響見(jiàn)表3。
表3 本發(fā)明所述保健食品對(duì)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(DTH)的影響(X±S)

注**表明與對(duì)照組比較，P＜0.01。
經(jīng)方差分析，F(xiàn)＝10.98，P＜0.0001；Q檢驗(yàn)P＜0.01，三個(gè)劑量組與對(duì)照組比較，有極顯著性差異。
2.4本發(fā)明所述保健食品對(duì)體液免疫(小鼠半數(shù)溶血值)的影響見(jiàn)表4。
表4 本發(fā)明所述保健食品對(duì)小鼠半數(shù)溶血值(HC50)的影響(X±S)

注**表明與照組相比較，P＜0.01經(jīng)方差分析，F(xiàn)＝11.37，P＜0.0001；Q檢驗(yàn)P＜0.01，20倍、30倍劑量組與對(duì)照組相比較，均有極顯著性差異。
2.5本發(fā)明所述保健食品對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞能力的影響見(jiàn)表5。
表5 本發(fā)明所述保健食品對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力的影響(X±S)

注**表明與對(duì)照組比較，P＜0.01吞噬率經(jīng)方差分析，F(xiàn)＝7.92，P＜0.05；吞噬指數(shù)F＝6.64，P＜0.01；Q檢驗(yàn)P＜0.01，人體推薦量的30倍劑量組吞噬率與吞噬指數(shù)與對(duì)照組相比均有極顯著性差異。
2.6本發(fā)明所述保健食品對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響，見(jiàn)表6。
表6 本發(fā)明所述保健食品對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響(X±S)

注**表明與對(duì)照組比較P＜0.01經(jīng)方差分析，F(xiàn)＝8.44，P＜0.01；Q檢驗(yàn)P＜0.01，三個(gè)劑量組相比較均有極顯著性差異。
3結(jié)論1)本發(fā)明所述保健食品三個(gè)劑量組均未見(jiàn)對(duì)動(dòng)物體重增長(zhǎng)有明顯的影響。
2)本發(fā)明所述保健食品三個(gè)劑量組胸腺/體重比值與照組比較，20倍、30倍劑量組有明顯著性差異。10倍劑量組的脾臟/體重比值比較，有顯著性差異，20倍、30倍劑量組脾臟/體重與對(duì)比照組比較，均有極顯著性差異。
3)遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)表明，耳腫程度與對(duì)照比較，三個(gè)劑量組均有極顯著差異，呈陽(yáng)性結(jié)果；小鼠半數(shù)溶血值測(cè)定表明，20倍、30倍劑量組的HC50值與對(duì)照組比較有極顯著差異，呈陽(yáng)性結(jié)果；小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞試驗(yàn)表明，30倍劑量組的吞噬率和吞噬指數(shù)均極顯著高于對(duì)照組，呈陽(yáng)性結(jié)果；NK細(xì)胞活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)表明，三個(gè)劑量組均極顯著高于對(duì)照組，呈陽(yáng)性結(jié)果。
由以上結(jié)果判定本發(fā)明所述保健食品具有免疫調(diào)節(jié)作用。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例一制備該保健食品的整個(gè)工藝流程均在GMP(《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》現(xiàn)行為1998年修訂版)標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)房?jī)?nèi)進(jìn)行；1、提取脫氧核苷酸按照企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，從魚(yú)精中通過(guò)水提、醇沉、酶解、過(guò)濾、濃縮、干燥、成品等工藝步驟提取。
2、黃精、杜仲?gòu)闹兴幍曩?gòu)買符合2000版藥典1部標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)品。
3、粉碎 分別將上述三種原料粉碎，利用80-120目篩過(guò)篩。
4、混合 將上述三種原料，按照脫氧核苷酸10％，黃精45％，杜仲45％配方比例稱量，由復(fù)合員復(fù)合投料，混勻，檢查合格后，進(jìn)入下道工序。在潔凈室進(jìn)行，溫度控制在40℃以內(nèi)。
5、干燥滅菌 在常壓下，溫度控制在80℃左右，干燥時(shí)間為2h左右。
6、填充膠囊 在膠囊機(jī)械中，按膠囊制劑工藝，壓制成膠囊。室內(nèi)溫度控制在24℃-26℃，相對(duì)濕度控制在60％以內(nèi)。
7、低溫干燥 溫度控制在32℃左右，相對(duì)濕度控制在45％以內(nèi)，開(kāi)啟凈化流通風(fēng)。
8、高溫干燥 溫度控制在50℃左右，相對(duì)濕度控制在28％以內(nèi)，向烘房中送干燥熱風(fēng)源。
9、揀選 在符合規(guī)定的場(chǎng)地，按照產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)選揀膠囊，在產(chǎn)品交接卡上寫(xiě)明品名、日期、班次數(shù)量、重量、操作工號(hào)，并按照膠囊制劑的方法檢驗(yàn)，合格后送入包裝程序。
10、包裝 在包裝前，將包裝場(chǎng)地、包裝工具和包裝材料進(jìn)行嚴(yán)格的消毒；按照工藝衛(wèi)生制度，生產(chǎn)人員進(jìn)行相應(yīng)的著裝、消毒；室溫控制在20℃-25℃以內(nèi)，再作理化與微生物檢驗(yàn)，還應(yīng)符合GMP衛(wèi)生有關(guān)規(guī)定。
實(shí)施例二制備該保健食品的整個(gè)工藝流程均在GMP標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)房?jī)?nèi)進(jìn)行；1、提取脫氧核苷酸按照企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，從魚(yú)精中通過(guò)水提、醇沉、酶解、過(guò)濾、濃縮、干燥、成品等工藝步驟提取。
2、黃精、杜仲?gòu)闹兴幍曩?gòu)買符合2000版藥典1部標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)品。
3、粉碎 分別將上述三種原料粉碎，利用80-120目篩過(guò)篩。
4、混合 將上述三種原料，按照脫氧核苷酸40％，黃精30％，杜仲30％配方比例稱量，由復(fù)合員復(fù)合投料，混勻，檢查合格后，進(jìn)入下道工序。在潔凈室進(jìn)行，溫度控制在40℃以內(nèi)。
5、干燥滅菌在常壓下，溫度控制在80℃左右，干燥時(shí)間為2h左右。
6、填充膠囊 在膠囊機(jī)械中，按膠囊制劑工藝，壓制成膠囊。室內(nèi)溫度控制在24℃26℃，相對(duì)濕度控制在60％以內(nèi)。
7、低溫干燥 溫度控制在32℃左右，相對(duì)濕度控制在45％以內(nèi)，開(kāi)啟凈化流通風(fēng)。
8、高溫干燥 溫度控制在50℃左右，相對(duì)濕度控制在28％以內(nèi)，向烘房中送干燥熱風(fēng)源。
9、揀選 在符合規(guī)定的場(chǎng)地，按照產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)選揀膠囊，在產(chǎn)品交接卡上寫(xiě)明品名、日期、班次數(shù)量、重量、操作工號(hào)，并按照膠囊制劑的方法檢驗(yàn)，合格后送入包裝程序。
10、包裝 在包裝前，將包裝場(chǎng)地、包裝工具和包裝材料進(jìn)行嚴(yán)格的消毒；按照工藝衛(wèi)生制度，生產(chǎn)人員進(jìn)行相應(yīng)的著裝、消毒；室溫控制在20℃-25℃以內(nèi)，再作理化與微生物檢驗(yàn)，還應(yīng)符合GMP衛(wèi)生有關(guān)規(guī)定。
實(shí)施例三制備該保健食品的整個(gè)工藝流程均在GMP標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)房?jī)?nèi)進(jìn)行；1、提取脫氧核苷酸按照企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，從魚(yú)精中通過(guò)水提、醇沉、酶解、過(guò)濾、濃縮、干燥、成品等工藝步驟提取。
2、黃精、杜仲?gòu)闹兴幍曩?gòu)買符合2000版藥典1部標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)品。
3、粉碎 分別將上述三種原料粉碎，利用80-120目篩過(guò)篩。
4、混合 將上述三種原料，按照脫氧核苷酸30％，黃精35％，杜仲35％配方比例稱量，由復(fù)合員復(fù)合投料，混勻，檢查合格后，進(jìn)入下道工序。在潔凈室進(jìn)行，溫度控制在40℃以內(nèi)。
5、干燥滅菌在常壓下，溫度控制在80℃左右，干燥時(shí)間為2h左右。
6、填充膠囊 在膠囊機(jī)械中，按膠囊制劑工藝，壓制成膠囊。室內(nèi)溫度控制在24℃-26℃，相對(duì)濕度控制在60％以內(nèi)。
7、低溫干燥 溫度控制在32℃左右，相對(duì)濕度控制在45％以內(nèi)，開(kāi)啟凈化流通風(fēng)。
8、高溫干燥 溫度控制在50℃左右，相對(duì)濕度控制在28％以內(nèi)，向烘房中送干燥熱風(fēng)源。
9、揀選 在符合規(guī)定的場(chǎng)地，按照產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)選揀膠囊，在產(chǎn)品交接卡上寫(xiě)明品名、日期、班次數(shù)量、重量、操作工號(hào)，并按照膠囊制劑的方法檢驗(yàn)，合格后送入包裝程序。
10、包裝 在包裝前，將包裝場(chǎng)地、包裝工具和包裝材料進(jìn)行嚴(yán)格的消毒；按照工藝衛(wèi)生制度，生產(chǎn)人員進(jìn)行相應(yīng)的著裝、消毒；室溫控制在20℃-25℃以內(nèi)，再作理化與微生物檢驗(yàn)，還應(yīng)符合GMP衛(wèi)生有關(guān)規(guī)定。
下面是服用本產(chǎn)品人群典型效果實(shí)例說(shuō)明1、孫XX 男19歲，自小體弱多病，經(jīng)常性的感冒發(fā)燒，服用本品以來(lái)，面色紅潤(rùn)，身體素質(zhì)提高明顯，感冒發(fā)燒次數(shù)顯著減少。
2、趙XX 女25歲，記憶力差，經(jīng)常落東忘西，挨領(lǐng)導(dǎo)責(zé)罵是常事，整體愁眉苦臉，服用本品以來(lái)，記憶力顯著改善，現(xiàn)在被領(lǐng)導(dǎo)贊許“象換了一個(gè)人似的”。
3、王XX 男40歲，有肝病史20載，服用本品前，肝功能經(jīng)常不正常，服用本品后，肝功能指標(biāo)很快恢復(fù)正常，并且一直保持正常水平。
4、李XX 男50歲，因“胃潰瘍”手術(shù)，胃部被切去1/3；服用本品前，食量銳減，身體虛弱，服用本品后，李先生食量大增，身體越來(lái)越健康。
5、張XX 男55歲，從事化工行業(yè)30載，患有嚴(yán)重的職業(yè)病，因化療，身體虛弱，免疫力低下，惡心嘔吐，脫發(fā)嚴(yán)重，白細(xì)胞、血小板、淋巴細(xì)胞的數(shù)量顯著減少；服用本品后，上述癥狀都得到了改善。
權(quán)利要求
1.一種含有脫氧核苷酸的保健食品，其特征在于，該保健食品由脫氧核苷酸、黃精、杜仲組成，上述三種組分的重量百分含量分別為脫氧核苷酸10％-40％，黃精30％-50％，杜仲30％-50％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含有脫氧核苷酸的保健食品，其特征在于，該保健食品的主要功效成分為脫氧核苷酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含有脫氧核苷酸的保健食品，其特征在于，該保健食品的輔助功效成分為黃精和杜仲所含有的黃酮類物質(zhì)、多糖類物質(zhì)及其他有效成分。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種含有脫氧核苷酸的保健食品，其特征在于，該保健食品的總黃酮類物質(zhì)的有效含量大于等于110mg/100g。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含有脫氧核苷酸的保健食品，其特征在于，脫氧核苷酸的含量?jī)?yōu)選30％-40％。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含有脫氧核苷酸的保健食品，其特征在于，黃精的含量?jī)?yōu)選30％-35％。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含有脫氧核苷酸的保健食品，其特征在于，杜仲的含量?jī)?yōu)選30％-35％。
8.一種如權(quán)利要求1-7所述的一種含有脫氧核苷酸的保健食品的制備方法，其特征在于，該方法包括如下的步驟制備該保健食品的整個(gè)工藝流程均在GMP標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)房?jī)?nèi)進(jìn)行；(1)提取脫氧核苷酸按照企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，從魚(yú)精中提取。(2)黃精、杜仲?gòu)闹兴幍曩?gòu)買符合2000版藥典1部標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)品。(3)粉碎分別將上述三種原料粉碎，利用80-120目篩過(guò)篩。(4)混合將上述三種原料，按照配方比例稱量，由復(fù)合員復(fù)合投料，混勻，檢查合格后，進(jìn)入下道工序。在潔凈室進(jìn)行，溫度控制在40℃以內(nèi)。(5)干燥滅菌在常壓下，溫度控制在80℃左右，干燥時(shí)間為2h左右。(6)填充膠囊在膠囊機(jī)械中，按膠囊制劑工藝，填充成膠囊制劑。室內(nèi)溫度控制在24℃-26℃，相對(duì)濕度控制在60％以內(nèi)。(7)低溫干燥溫度控制在32℃左右，相對(duì)濕度控制在45％以內(nèi)，開(kāi)啟凈化流通風(fēng)。(8)高溫干燥溫度控制在50℃左右，相對(duì)濕度控制在28％以內(nèi)，向烘房中送干燥熱風(fēng)源。(9)揀選在符合規(guī)定的場(chǎng)地，按照產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)選揀膠囊，在產(chǎn)品交接卡上寫(xiě)明品名、日期、班次數(shù)量、重量、操作工號(hào)，并按照膠囊制劑的方法檢驗(yàn)，合格后送入包裝程序。(10)包裝在包裝前，將包裝場(chǎng)地、包裝工具和包裝材料進(jìn)行嚴(yán)格消毒；按照工藝衛(wèi)生制度，生產(chǎn)人員進(jìn)行相應(yīng)的著裝、消毒；室溫控制在20℃-25℃以內(nèi)，再作理化與微生物檢驗(yàn)，還應(yīng)符合GMP衛(wèi)生有關(guān)規(guī)定。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種含有脫氧核苷酸的保健食品的制備方法，其特征在于，脫氧核苷酸通過(guò)水提、醇沉、酶解、過(guò)濾、濃縮、干燥、成品等工藝步驟得到。
全文摘要
本發(fā)明屬于保健食品技術(shù)領(lǐng)域；具體涉及一種含有脫氧核苷酸的保健食品及其制備方法。本發(fā)明提供一種更利于人體吸收、功效更顯著的保健食品，用以增強(qiáng)人體免疫力和損傷后內(nèi)臟修復(fù)能力、腦功能、抗病毒能力；同時(shí)提供一種所述保健食品的制備方法。一種含有脫氧核苷酸的保健食品，由脫氧核苷酸、黃精、杜仲組成，上述三種組分的重量百分含量分別為脫氧核苷酸10％－40％，黃精30％－50％，杜仲30％－50％。本發(fā)明是以中國(guó)傳統(tǒng)的藥食同源原理和現(xiàn)代高科技手段，從天然活性物質(zhì)魚(yú)精中提取脫氧核苷酸，與傳統(tǒng)的中藥材黃精和杜仲科學(xué)配比而成的一種新型保健食品。本發(fā)明所述保健品完全能夠滿足人們的食補(bǔ)需求，能夠增強(qiáng)免疫力和損傷后內(nèi)臟修復(fù)能力、腦功能、抗病毒能力的作用。
文檔編號(hào)A61K36/185GK1745662SQ20041005133
公開(kāi)日2006年3月15日 申請(qǐng)日期2004年9月6日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月6日
發(fā)明者王琪, 高波 申請(qǐng)人:廣東海陵海洋生物藥業(yè)有限公司